Fer-color - Wiener lab.
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1. ES DE REA O Comprimento de onda 560 nm em espectrofot metro ou 540 560 nm em fotocolor metro com filtro verde Temperatura de rea o temperatura ambiente Tempo de rea o 10 minutos Volume de amostra 500 ul Volume total de rea o 2 5 ml PROCEDIMENTO Em tr s tubos ou cubetas marcados B Branco de Rea gente P Padr o e D Desconhecido colocar B P D gua bidestilada 500 ul E 500 ml 500 ml Reagente A B 2ml 2ml 2ml Padr o Soro Misturar Ler a absorb ncia do tubo D Branco de Soro BS em espectrofot metro a 560 nm ou em fotocolor metro com filtro verde 540 560 nm levando a zero o aparelho com gua Adicionar mantendo o conta gotas em posi o vertical 1 gota de Reagente C a cada tubo Misturar imediatamente cada tubo e ler todos os tubos a 560 nm entre 6 e 20 minutos levando o aparelho a zero com gua ESTABILIDADE DA MISTURA DE REA O FINAL Os tubos devem ser lidos entre 6 e 20 minutos depois de completados os passos do procedimento C LCULOS DOS RESULTADOS Corrigir as leituras de P e D subtraindo os Brancos corres pondentes P B S corrigida D B BS D corrigida Fe ug dl D corrigida x f 100 ug dl onde ES P corrigida M TODO DE CONTROLE DE QUALIDADE Processar dois n veis de um material de controle de qua lidade Standatrol S E 2 niveles com concentra es conhecidas de ferro com cada determina o VALORES TE RICOS Ho2. Fer color Para a determina o de ferro s rico SIGNIFICADO CL NICO O ferro encontra se distribu do no organismo em diferentes formas que incluem hemoglobina ferro tissular e mioglobina Otransporte de ferro de um rg o a outro realiza se median te uma prote na transportadora a apotransferrina O com plexo formado com o ferro conhecido como transferrina A ferritina localizada em quase todas as c lulas do corpo constitui uma reserva de ferro dispon vel para a forma o da hemoglobina e outras prote nas que cont m o grupo hemo A absor o de ferro realizada principalmente no duode no Tanto a ferritina como a transferrina encontram se nas c lulas da mucosa intestinal e ambas regulam a absor o de ferro Os mais grandes desordens do metabolismo de ferro relacionam se com a defici ncia ou excesso No entanto observam se altera es em muitas outras doen as como anemia doen as cardiovasculares hepatite cr nica doen as renais e infec es A anemia por perda de ferro representa um dos transtornos org nicos mais frequentes principalmente em crian as mu lheres jovens gr vidas e idosos Tamb m constituem causas de anemia ferrop nica as lceras g stricas ou duodenais e carcinoma de est mago Por outra parte o excesso de ferro associa se com outros desordens como hemosiderose hemocromatose e anemia siderobl stica FUNDAMENTO DO M TODO O ferro s rico libera se de sua liga o com s
3. rejeitados Realizar um controle periodicamente Mistura os tubos podem ser misturados com uma vara ou por agita o suave N o inverter para evitar contamina es Limpeza do material todo o material do laborat rio deve ser submergido durante 6 horas em HCl p a 10 15 elimi nando a acidez com v rios lavados com gua livre de ferro Enxugar o material temperatura n o superior a 80 C em cesto de a o inoxid vel ou recoberto com pl stico Todo o material deve ser utilizado s para a determina o de ferro PERFORMANCE a Reprodutibilidade processando duplicatas das mesmas amostras em 10 dias diferentes obteve se um coeficiente de varia o de 4 2 para um n vel de Fe s rico de 129 ug dl b Recupera o adicionando quantidades conhecidas de Fe Il a al quotas de um mesmo soro recuperou se entre 90 e 103 c Linearidade a rea o linear at 500 ug dl APRESENTA O 100 determina es C d 1492001 REFER NCIAS Dixon K Ann Clin Biochem 10 5 127 1973 C S H Am J Clin Path 56 4 543 1971 Zak B Baginski E S Epstein E y Wiener L M Clin Toxicol 4 4 621 1971 Rojkin M L Olgu n de Mariani M C Drappo G A y Albarrac n A III Congreso Argentino de Bioqu mica Buenos Aires 1975 Young D S Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests AACC Press 4 ed 2001 870450000 00 p 5 6 S mbolos Os seguintes s mbolos s o utilizad
4. contar da data de sua prepara o Antes mesmo de utilizar levar a 18 30 C IND CIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORA O DOS REAGENTES Vari veis nas leituras de Brancos de Reagentes e ou Padr o s o ind cios de contamina es ocasionais gua material de vidro etc Aumento no valor dos Brancos indicar uma contamina o com ferro AMOSTRA Soro a Coleta deve ser utilizado unicamente o soro posto que os anticoagulantes interferem na rea o O paciente deve estar em jejum sendo que as extra es devem ser realiza das sempre na mesma hora preferentemente da manh j que as oscila es fisiol gicas s o muito importantes durante o dia b Aditivos n o s o necess rios c Subst ncias interferentes conhecidas n o observa se interfer ncia pela hemoglobina at 70 mg dl hiperlipemia i nes Cu at 200 ug dl e bilirrubina at 400 mg dl Ahem lise ligeira n o interfere neste m todo mas o Interna tional Committee for Standardization in Hematology ICSH recomenda o uso de soro livre de hem lise Refer ncia bibliogr fica de Young para efeitos de drogas neste m todo d Estabilidade e instru es de armazenamento o soro pode ser conservado at uma semana sob refrigera o 2 10 C 870450000 00 p 4 6 MATERIAL NECESS RIO n o fornecido Espectrofot metro ou fotocolor metro Micropipetas e pipetas para medir os volumes indicados Tubos ou cubetas espectrofotom tricas CONDI
5. mens 65 a 175 ug dl 11 6 31 3 umol l Mulheres 50 a 170 ug dl 9 30 4 umol l VALORES DE REFER NCIA Em um grupo de 20 mulheres e 20 homens sadios com idades entre os 18 e 51 anos foram encontradas faixas de 55 a 175 ug dl com as seguintes m dias Homens 114 6 ug dl 20 5 umol 1 Mulheres 103 3 ug dl 18 5 umol l Valores de refer ncia extra dos de arquivos da Wiener lab E recomend vel que cada laborat rio estabele a seus pr prios valores de refer ncia CONVERS O DE UNIDADES AO SISTEMA SI Ferro ug dl x 0 179 Ferro umol l LIMITA ES DO PROCEDIMENTO Valores de Branco aceit vel a determina o de oligoelemen tos comprometem as poss veis contamina es de gua e os reagentes O Branco de Reagente realizado segundo o Manual de instru es n o deve superar 0 150 D O devendo ser ainda desprez vel a contribui o de gua no Branco Para poder ser controlado recomenda se ler um Branco de Reagente 2 ml de Reagente A B 0 5 ml de gua 1 gota de Reagente C em oposi o a um Branco de Reagente A 2 5 ml de Reagente A B 1 gota de Reagente C a leitura do Branco de Reagentes deve ser menor ou igual que a do Branco de Tamp o De n o se obter os resultados conforme as refer ncias trocar a gua por outra de quali dade comprovada condutibilidade menor de 0 02 uOhms Se a leitura do Branco de Tamp o superior a 0 150 D O ind cio de contamina o dos reagentes os que deveram ser
6. os nos kits de reagentes para diagn stico da Wiener lab Ce EC REP IVD Y 2 X D Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europ ia 98 79 CE para dispositivos m dicos de diagn stico in vitro Representante autorizado na Comunidade Europ ia Uso m dico diagn stico in vitro Conte do suficiente para lt n gt testes Data de validade Limite de temperatura conservar a N o congelar Risco biol gico Volume ap s da reconstitui o Conte do N mero de lote x La Calibr CONTROL CONTROL di CONTROL REF 870450000 00 p 6 6 Elaborado por Nocivo Corrosivo Ca stico Irritante Consultar as instru es de uso Calibrador Controle Controle Positivo Controle Negativo N mero de cat logo O Wiener lab 2000 Rosario Argentina UR111125
7. ua prote na transportadora espec fica a transferrina em tamp o suc cinato de pH 3 7 e em presen a de um redutor o cido mercaptoac tico Depois reage com o reagente de cor piridil bis fenil triazina sulfonato PBTS obtendo se um produto de cor magenta que se mede a 560 nm REAGENTES FORNECIDOS A Reagente A solu o de succinato 0 25 mol l para pH 3 7 B Reagente B ampola contendo cido mercaptoac tico a 70 redutor C Reagente C solu o estabilizada de piridil bis fenil tria zina sulfonato PBTS 50 mmol S Padr o solu o de i nes Fe III equivalem a 100 ug dl REAGENTES N O FORNECIDOS gua destilada INSTRU ES DE USO Reagente C e Padr o prontos para uso Reagente A B transferir o conte do da ampola do Rea gente B ao Reagente A vertendo o diretamente no frasco de Reagente A e misturando por invers o Marcar no r tulo a data de sua prepara o PRECAU ES Os reagentes s o para uso diagn stico in vitro O Reagente B corrosivo R36 38 irrita os olhos e a pele S24 25 evitar o contato com os olhos e a pele S26 28 caso de contato com a pele e os olhos lavar imediatamente com abundante gua e acudir ao m dico S37 utilizar luvas apropriadas ESTABILIDADE E INSTRU ES DE ARMAZENAMENTO Reagentes Fornecidos s o est veis a temperatura am biente at a data do vencimento indicada na embalagem Reagente A B sob refrigera o 2 10 C est vel durante um ano a
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