RIDASCREEN sIgA - R
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1. controle Low O calibrador aplicado para compensar flutua es do teste e para verificar a qualidade do processo O controle High decisivo para a valida o do teste Do valor m dio da determina o dupla do calibrador e seu valor te rico o software RIDA SOFT Win net calcula internamente um fator de corre o F e compensa o com as extin es das amostras fecais A avalia o segura e fi vel dos resultados do teste poss vel dentro dos limites da curva padr o Em vez do software RIDA SOFT Win net poss vel utilizar outro software de avalia o que disponibilize o modelo logistic log de 4 par metros 11 2 Resultado do teste A gama normal apurada para slgA situa se entre 100 1200 ug sigA g de fezes Se os valores medidos forem inferiores a 100 ug slgA g de fezes os pacientes t m insufici ncia de sigA Quando de valores superiores a 1200 ug slgA g de fezes os pacientes apresentam valores de slgA aumentada Recomendamos a cada laborat rio que estabele a uma gama de valores padr o pr pria 12 Limites do m todo O teste RIDASCREEN slgA detecta epitopos de sIgA humana em amostras fecais Dos testes n o se pode concluir uma rela o entre um valor de extin o apurado e a gravidade de sintomas cl nicos Os resultados apurados devem ser sempre interpretados em associa o com o quadro cl nico RIDASCREEN sigA 2014 10 21 12 13 Caracteristicas de desempenho 13 1 Limite da detecc o O l2. importante para se conseguir resultados corretos pelo que deve ser realizada seguindo se as instru es rigorosamente A solu o da incuba o que se encontra nos po os deve ser esvaziada primeiro para um recipiente de lixo contendo solu o de hipoclorito para desinfec o Depois disso bate se na placa sobre papel absorvente para remover o resto da umidade Em seguida lava se a placa 5 vezes com 300 ul de tamp o de lavagem de cada vez ver ponto 9 2 Assegurar que ela esvaziada completamente batendo lhe depois de cada uma das lavagens sobre uma parte do papel ainda seca e por usar Utilizando se uma lavadora de microplacas deve se verificar se ela est corretamente programada para o tipo de microplaca em quest o Al m disso as suspens es de fezes que n o estiverem completamente livres de part culas devem ser removidas dos po os manualmente antes da primeira lavagem para evitar o entupimento das agulhas de lavagem Durante os passos de lavagem importante assegurar que o l quido aspirado completamente Depois da lavagem final deve se bater na placa cuidadosamente sobre papel ou toalhas de laborat rio para remover restos de umidade 9 7 Segunda incuba o Adicionar 100 ul de conjugado Conjugate em todos os po os Em seguida incubar a placa uma hora a temperatura ambiente 20 25 C 9 8 Segunda lavagem Depois do per odo de incuba o ter decorrido o conjugado que se encontra nos po os d
3. imunol gica afetada na mucosa do intestino suscetibilidade aumentada para infec es doen a al rgica e Infec es locais na mucosa do intestino e Doen as autoimunes 3 Princ pio do teste No teste RIDASCREEN sigA s o aplicados anticorpos espec ficos em um m todo sandu che A superf cie do po o da microplaca est revestida com um anticorpo espec fico contra ep topos da IgA humana Uma suspens o da amostra fecal a analisar pipetada no po o da microplaca e incubada Depois disso segue se uma lavagem e uma segunda incuba o com um anticorpo monoclonal que est conjugado com peroxidase de raiz forte Existindo slgA na amostra forma se um complexo tipo sandu che constitu do pelo anticorpo imobilizado pelo ant geno sigA e pelo anticorpo conjugado Os anticorpos marcados com enzimas n o ligados s o removidos em uma lavagem seguinte Depois da adi o de substrato a enzima ligada em amostras positivas transforma a solu o incolor nos po os da microplaca em uma solu o azul Mediante adi o do reagente de parada esta cor muda de azul para amarelo A extin o medida proporcional concentra o de sigA existente na amostra RIDASCREEN sigA 2014 10 21 4 Conte do da embalagem Os reagentes de uma embagalem s o suficientes para 96 testes Plate 96 Microplaca 12 tiras divisiveis no suporte testes revestidas com anticorpos policlonais coelho contra slgA humana Extract 10x 1
4. 00 ml Tampao de extra o e dilui o 10x concentr para extra o e dilui o prim ria de fezes solu o de NaCl tamponada com fosfato cont m 0 1 Tween e 0 1 NaN Diluent 3 100 ml Tampao de dilui o de amostras solu o de NaCl tamponada com prote na cont m 0 1 NaNs pronto para uso colora o vermelha Wash 10x 100 ml Tamp o de lavagem 10x concentr solu o de NaCl tamponada com fosfato cont m 0 1 Thimerosal 0 1 detergente Calibrator 1 ml Calibrador para calibra o padr o cont m 0 1 NaNs pronto tampa para Uso transparente High control 1 ml Controle High cont m 0 1 NaNs pronto para uso tampa vermelha Low control 1 ml Controle Low cont m 0 1 NaNs pronto para uso tampa verde Conjugate 12 ml Anticorpo monoclonal rato contra sIgA humana conjugado com peroxidase em soluc o proteica estalizadora pronto para uso SeroSC 12 ml Substrato per xido de hidrog nio tetrametilbenzidina TMB pronto para uso Stop 12 ml Reagente de parada 1 N cido sulf rico pronto para uso Detalhes sobre substancias perigosas de acordo com as obrigac es de rotulagem Para mais informac es consulte as Folhas de Dados de Seguranca de Materiais MSDS em www r biopharm com RIDASCREEN sigA 2014 10 21 4 5 Reagentes e seu armazenamento Os reagentes devem ser armazenados entre 2 8 C e pode
5. RIDASCREEN sIgA Art N G09035 R Biopharm AG An der neuen Bergstra e 17 D 64297 Darmstadt Germany Tel 49 0 61 51 81 02 0 Telefax 49 0 61 51 81 02 20 C 1 rea de aplicac o Para diagn stico in vitro O teste RIDASCREEN sigA um teste imunoenzim tico para determina o quantitativa de IgA secretora humana slgA em amostras de fezes 2 Resumo e explica o do teste A IgA a mais heterog nea de todas as imunoglobulinas humanas Os anticorpos IgA est o presentes nas secre es externas onde formam uma barreira de defesa importante contra agentes patog nicos Atrav s da concentra o de sigA nas fezes pode se tirar conclus es sobre as defesas da mucosa intestinal IgA ocorre nas formas monom rica mlgA polim rica plgA e secretora dim rica SIgA A forma o de IgAs secretoras independente da s ntese de IgA no soro IgA secretora consiste de duas mol culas IgA monom ricas da cadeia J bem como do componente secretor cadeia SC um polipept deo com um peso molecular de 70 kDa O componente secretor sintetizado pelas c lulas epiteliais das mucosas dos tratos gastrointestinal respirat rio e urogenital bem como pelas gl ndulas salivares lacrimais e mam rias As c lulas de plasma no espa o subendotelial das mucosas segregam um complexo de duas mol culas IgA que est o unidas atrav s da prote na J Em seguida este complexo liga se ao componente secretor que se encontra na super
6. agem e suspens o da amostra Recomendamos que a amostra seja armazenada a 20 C at prepara o Amostras congeladas devem atingir lentamente a temperatura ambiente Pesar 100 mg de amostra fecal em um tubo de teste devidamente marcado e em seguida adicionar lhe com a pipeta 5 ml de tamp o de extra o dilu do dilui o 1 50 RIDASCREEN sigA 2014 10 21 Opcionalmente pode se pesar 80 130 mg de amostra fecal e para garantir uma propor o de dilui o constante 1 50 aplicar o volume de tamp o de extra o adequado em fun o do peso da amostra fecal em quest o ver tab 1 Tab 1 Volume do tamp o de extra o dilu do que necess rio em fun o do peso da amostra fecal fator constante de dilui o 1 50 E Ce 99 uso 120 oo No caso de ressuspens o em um volume de tamp o de extra o constante de 5 ml h que considerar o respectivo fator de dilui o quando da avalia o ver tab 2 Tab 2 Fator de dilui o quando de adi o constante de tamp o de extra o dilu do 5 ml em fun o do respectivo peso da amostra ml E 02 O 85 5882 E CHS 95 ae O 100 5000 105 ja MO 4545 15 43 45 120 T4166 125 4005 30 do i O 85 95 100 105 110 115 120 125 130 Independentemente do m todo de pesagem a homogeneiza o da suspens o das fezes efetuada mediante mistura minuciosa em um misturador Vortex Quando de fezes l quidas s o aspirados exatamente 100 ul das m
7. de dos reagentes e a realiza o correta do teste A aplica o do controle Low opcional O teste foi realizado corretamente quando o valor de extin o OD do controle negativo a 450 nm 620 nm for menor do que 0 05 e o mediano do valor de extin o OD do calibrador estiver dentro da gama mencionada na folha de dados espec fica do lote O controle High tem de estar dentro da gama de concentra o espec fica do lote mencionada na folha de dados Ao realizar o teste RIDASCREEN sigA em sistemas autom ticos ELISA abertos o valor de extin o OD apurado do calibrador Calibrator pode divergir da gama mencionada no certificado espec fico do lote em fun o do sistema utilizado Tamb m nos sistemas ELISA autom ticos o controle High High control decisivo para a valida o dos resultados do teste e deve ser sempre aplicado A aplica o do controle Low Low control n o mandat ria Se os valores divergirem dos requeridos ou se os reagentes estiverem turvos ou o substrato incolor estiver azulado antes de serem adicionados nos po os pode ser sinal de que os reagentes j caducaram Se os valores estipulados n o forem atingidos h que verificar os pontos seguintes antes da repeti o do teste Data de validade dos reagentes utilizados Funcionalidade do equipamento utilizado calibra o por exemplo Rea
8. ent and eosinophils in mucosal inflammation Int Arch Allergy Immunol 2000 122 suppl 1 25 27 R ssmann H et al IgA IgM and secretory immunity Sepsis 1999 3 219 234 Russel MW et al Molecular heterogeneity of human IgA antibodies during an immune response Clin Exp Immunol 1992 87 1 6 RIDASCREEN sigA 2014 10 21
9. esmas com uma pipeta e pipetados em exatamente 5 ml de tamp o de extra o dilu do Em seguida este homogeneizado tem de ser centrifugado durante 10 minutos a pelo menos 3000 g para sedimenta o das part culas fecais maiores O sobrenadante do extrato tem de ser dilu do novamente para aplica o imediata no teste Recomendamos RIDASCREEN sigA 2014 10 21 que a armazenagem do sobrenadante seja realizada de forma separada em aliquotas no m nimo a 20 C 9 4 2 Dilui o manual da amostra 50 ul do sobrenadante clarificado de 9 4 1 s o dilu dos com 950 ul de tamp o de extra o dilu do 1 20 e misturados no Vortex Depois disto efetua se uma nova dilui o misturando 100 ul da primeira dilui o com 900 ul de tamp o de dilui o de amostras RIDASCREEN Diluent 3 1 10 e agitando os no Vortex Esta dilui o final da amostra fecal dilui o final 1 10000 utilizada em seguida para o teste Em vez da prepara o e homogeneiza o da amostra anteriormente descritas pode se utilizar o sistema de prepara o de amostras da empresa Roche Diagnostics Mannheim art n 745804 As instru es especiais para este sistema s o disponibilizadas pela R Biopharm AG a pedido 9 4 3 Dilui o autom tica da amostra Se o teste for realizado com o sistema DSX ELISA da marca Dynex o respectivo protocolo de medi o necess rio pode ser obtido na R Biopharm AG e aplicado no aparelho Este aparelho
10. eve ser esvaziado para um recipiente de lixo com solu o de hipoclorito para desinfec o Depois disso bate se na placa sobre papel absorvente para remover o resto da umidade Em seguida lava se a placa 5 vezes com 300 ul de tamp o de lavagem de cada vez Assegurar que ela esvaziada completamente batendo lhe depois de cada uma das lavagens sobre uma parte do papel ainda seca e por usar 9 9 Terceira incuba o Adicionar 100 ul de substrato SeroSC em todos os po os Em seguida incubar a placa 15 minutos ao escuro a temperatura ambiente 20 25 C Depois disto adicionar 50 ul de reagente de parada Stop em todos os po os para terminar a rea o Depois de mistur lo cuidadosamente batendo se suavemente na beira da placa medir a extin o a 450 nm e um comprimento de onda de refer ncia de 620 nm Nota Amostras de pacientes fortemente positivas podem causar precipitados de substrato pretos Tais amostras devem ser dilu das na propor o 1 10 e novamente analisadas ver ponto 9 5 dilui o final da amostra de fezes 1 100000 RIDASCREEN sigA 2014 10 21 10 10 Controle de qualidade Sinais de caducidade do reagente Para fins de controle da qualidade devem ser utilizados em cada realizac o do teste o calibrador Calibrator duplamente o tamp o de dilui o de amostras RIDASCREEN Diluent 3 como controle negativo e o controle High High control para garantir a estabilida
11. executa a dilui o da amostra automaticamente como se descreve abaixo 25 ul do sobrenadante clarificado s o pipetados pelo sistema autom tico ELISA em uma placa Deepwell e dilu dos com 975 ul de tamp o de extra o dilu do 1 40 Seguem se dois ciclos de mistura Depois coloca se no suporte da microplaca Platel RIDASCREEN slgA a quantidade de tiras de microtitula o que s o necess rias Al quotas de 20 ul de amostra dilu da s o transferidas da placa Deepwell para a microplaca Plate RIDASCREEN sigA e novamente dilu das com 80 ul de tamp o de dilui o de amostras RIDASCREEN Diluent 3 1 5 dilui o final 1 10000 Para realiza o do teste com outros sistemas autom ticos de pipetagem ELISA contate a R Biopharm AG para obter instru es 9 5 Primeira incuba o Depois de se encaixar uma quantidade de tiras po os suficientes no suporte adiciona se aos respectivos po os 100 ul cada de calibrador Calibrator duplamente de tamp o de dilui o de amostras RIDASCREEN Diluent 3 controle negativo de controle High High control bem como da amostra fecal dilu da a analisar Utilizando se o controle Low Low control adiciona se tamb m 100 ul do mesmo Em seguida incubar a placa uma hora a temperatura ambiente 20 25 C RIDASCREEN sigA 2014 10 21 9 6 Primeira lavagem A lavagem cuidadosa
12. f cie da c lula epitelial Depois desta liga o a sIgA transportada seletivamente pela c lula epitelial mediante a ajuda de receptores epiteliais e segregada na superf cie por exocitose Deste modo conduzida IgA secretora sIgA em grandes quantidades por exemplo para a superf cie da mucosa intestinal Mas tamb m outras secre es como o leite saliva l grimas e expectora o nasal ou traqueobr nquica entre outras cont m sigA A determina o da concentra o de sigA nas fezes permite tirar conclus es sobre o estado de funcionamento do sistema imunol gico associado ao intestino GALT apurando se o grau de secre es bem como a estimula o das c lulas do plasma na submucosa do intestino Enquanto que a defici ncia de slgA indica uma atividade reduzida das defesas imunol gicas os valores de slgA aumentada indicam uma atividade intensificada do sistema imunol gico intestinal Devido as fortes propriedades anti inflamat rias da IgA valores de slgA aumentada nas fezes indicam tamb m uma poss vel resposta inflamat ria local na mucosa do intestino RIDASCREEN sigA 2014 10 21 RIDASCREEN sigA para detec o r pida e fi vel do seguinte e Estado de funcionamento do tecido linf tico associado ao intestino GALT o Nivel de slgA reduzida atividade reduzida do sistema imunol gico associado ao intestino o Nivel de slgA aumentada atividade aumentada do sistema imunol gico associado ao intestino e Barreira
13. imite de detec o do teste RIDASCREEN slgA foi calculado da soma do valor Bo e do dobro do desvio padr o de Bo O valor Bo em si o valor m dio de determina es m ltiplas n 84 do controle negativo Diluent 3 Daqui resulta um limite de detec o para sIgA de 171 ug g ou 17 1 ng ml de fezes 13 2 Precis o A reprodutibilidade Intra teste e inter teste do RIDASCREEN sigA foi apurada em determina es m ltiplas realizadas em dias diferentes e sob condi es de teste ideais Dos resultados obtidos calculou se o valor m dio MW o desvio padr o SD bem como o coeficiente de varia o VK Os resultados est o representados nas tabelas 3 e 4 Tab 3 Reprodutibilidade intra teste n 16 Intra teste RIDASCREEN slgA 1 Concentra o 660 ug g 2 Concentra o 1500 ug g MW OD 674 1380 SD 45 6 55 80 VK 6 8 4 0 Tab 4 Reprodutibilidade inter teste n 8 Inter teste RIDASCREEN slgA 1 Concentra o 660 ug g 2 Concentra o 1500 ug g MW OD 677 1461 SD 79 7 85 5 VK 11 8 5 9 13 3 Linearidade dos resultados do teste Para verificar a linearidade dos resultados do teste RIDASCREEN sigA foram elaboradas s ries de dilui o de v rias amostras fecais com sigA A pesagem e a suspens o das amostras bem como o primeiro passo da dilui o foram realizados de acordo com as instru es contidas neste manual ver ponto 9 4 Os pa
14. liza o correta do teste Controle visual dos componentes do kit quanto a contamina o ou m veda o uma solu o de substrato com colora o azulada j n o deve ser utilizada Se as condi es ap s repeti o do teste ainda n o forem satisfat rias contate o fabricante ou o seu distribuidor R Biopharm local 11 Avalia o e interpreta o 11 1 Quantifica o de um ponto mediante o modelo logistic log de 4 par metros O teste RIDASCREEN slgA utiliza o modelo logistic log de 4 par metros 4PL para determinar a concentra o de sigA nas fezes em unidades de ug g RIDASCREEN sigA 2014 10 21 11 Para apuramento dos resultados necess rio o software de avalia o RIDAPSOFT Win net Este software RIDA SOFT Win net ou sua atualiza o podem ser obtidos na R Biopharm AG ou atrav s do distribuidor R Biopharm local Os par metros A D da curva padr o bem como os valores te ricos para o calibrador controle High e controle Low que s o necess rios para o c lculo 4PL est o indicados na folha de dados espec fica do lote que acompanha o kit e t m de ser comparados com os respectivos valores no software de avalia o antes de cada medi o No controle final de qualidade a R Biopharm AG apura para cada lote de kits em condi es de teste ideais a curva padr o inclusive os par metros A D bem como um valor te rico e uma gama de desvio padr o admiss vel para o calibrador controle High e
15. m desifetantes adequados ou ent o autoclavados a 121 C durante pelo menos uma hora CUIDADO para evitar a forma o de gases t xicos o dejeto l quido que incluir reagente de parada tem de ser neutralizado antes de ser colocado em uma solu o de hipoclorito Todos os reagentes e materiais utilizados devem ser descartados corretamente ap s o uso Consulte os regulamentos nacionais relevantes para a elimina o 8 Coleta e armazenamento das amostras As amostras fecais devem ser transportadas refrigeradas sempre que poss vel e guardadas entre 2 8 C at o come o do teste Recomendamos que a amostra seja armazenada a 20 C at prepara o O congelamento e descongelamento repetidos da amostra devem ser evitados Amostras fecais n o devem ser guardadas em recipientes de transporte que contenham fluidos de transporte com conservantes soros animais ons de metal nem agentes ou detergentes oxidantes uma vez que estas subst ncias podem interferir no teste RIDASCREEN siga RIDASCREEN sigA 2014 10 21 9 Realizac o do teste 9 1 Generalidades Antes de serem utilizados todos os reagentes e a microplaca Plate t m de estar a temperatura ambiente 20 25 C As tiras de microtitula o n o devem ser retiradas da embalagem de alum nio antes de atingirem a temperatura ambiente Os reagentes devem ser bem misturados no momento que v o ser utilizados As tiras de microtitula o que n o s o necess
16. m ser utilizados at a expira o da data de validade impressa na respectiva etiqueta Os tamp es de lavagem ou de extra o dilu dos podem ser utilizados 4 semanas quando armazenados entre 2 8 C Evitar a contamina o com micr bios Ap s expira o da data de validade a qualidade n o garantida Abrir a embalagem de alum nimo das tiras de microtitula o com uma tesoura de modo a n o cortar o fecho As tiras de microtitula o que n o s o necess rias devem voltar a ser guardadas imediatamente na embalagem de alum nio entre 2 8 C Evitar a incid ncia de luz direta sobre o substrato incolor para prevenir a degrada o ou o azulamento devido a auto oxida o Quando o substrato apresentar uma cor azulada j n o deve ser utilizado 6 Reagentes adicionais necess rios e equipamento acess rio 6 1 Reagentes gua destilada ou desionizada 6 2 Equipamento acess rio Balan a de precis o ou tubo de prepara o de amostras Roche Mixer Vortex opcional ver 9 4 Micropipeta para volumes de 50 100 ule 1 ml Proveta 1000 ml Cron metro Lavadora para microplacas ou pipetas multicanais 300 ul Fot metro para microplacas 450 nm filtro de refer ncia gt 620 nm Papel filtro panos de laborat rio Recipiente para lixo com uma solu o de 0 5 de hipoclorito 7 Medidas de precau o Somente para diagn stico in vitro Este ensaio s deve ser realizado por profissionais de laborat rio treinad
17. os As diretrizes para trabalhar em laborat rios m dicos devem ser seguidas O manual de instru es relativo ao procedimento de ensaio deve ser seguido N o pipete amostras ou reagentes com a boca Evite o contato com a pele ferida ou membranas mucosas Ao manusear reagentes ou amostras use roupas de seguran a adequadas luvas apropriadas jaleco RIDASCREEN sigA 2014 10 21 culos de seguran a e lave suas m os ap s o t rmino do procedimento de ensaio N o fume coma ou beba nas reas onde est o sendo usados amostras ou reagentes Para mais informa es consulte as Folhas de Dados de Seguran a de Materiais MSDS em www r biopharm com As amostras fecais devem ser tratadas como potencialmente infecciosas nos termos dos regulamentos de seguran a nacionais O tamp o de lavagem cont m 0 1 de Thimerosal como conservante O contato com a pele ou com as mucosas deve ser evitado O calibrador o controle High o controle Low e o tamp o de extra o e dilui o de amostras cont m 0 1 NaN como conservante O contato com a pele ou com as mucosas deve ser evitado Per xido de hidrog nio substrato pode causar corros o Manuse lo com cuidado O reagente de parada cont m 1 N cido sulf rico Evitar o contato com a pele e com o vestu rio No caso de contato com a pele lav la com gua Todos os reagentes e materiais que entrarem em contato com amostras potencialmente infecciosas t m de ser tratados co
18. rias devem ser guardadas novamente na embalagem fechada com os reagentes entre 2 8 C As tiras de microtitula o usadas uma vez n o devem voltar a ser utilizadas Os reagentes e as tiras de microtitula o n o devem ser utilizados quando a embalagem estiver danificada ou os frascos apresentarem derrames Evitar o contato direto das amostras com os componentes do kit para excluir a contamina o cruzada Evitar a incid ncia de luz solar direta durante a realiza o do teste Recomendamos cobrir a microplaca ou ved la com fita adesiva para evitar perdas por evapora o 9 2 Prepara o do tamp o de lavagem 1 parte do tamp o de lavagem Wash 10x misturada com 9 partes de gua destilada 1 10 Para isso verte se 100 ml de concentrado em uma proveta de 1000 ml e adiciona se gua destilada at se atingir os 1000 ml Os cristais eventualmente existentes no concentrado devem ser dissolvidos previamente mediante aquecimento em banho maria a37 C 9 3 Prepara o do tamp o de extra o 1 parte do tamp o de extra o concentrado Extract 10x misturada com 9 partes de gua destilada 1 10 Para isso verte se 100 ml de concentrado em uma proveta de 1000 ml e adiciona se gua destilada at se atingir os 1000 ml Os cristais eventualmente existentes no concentrado devem ser dissolvidos previamente mediante aquecimento em banho maria a 37 C 9 4 Prepara o das amostras 9 4 1 Pes
19. ssos de dilui o seriais foram efetuados em seguida com tamp o de dilui o de amostras RIDASCREEN Diluent 3 RIDASCREEN sigA 2014 10 21 Foram calculadas as concentra es apuradas no teste em compara o com as esperadas Na tabela 5 est o representados os resultados das s ries de dilui o de tr s amostras com diferentes concentra es de sigA Tab 5 Determina o da linearidade dos resultados do teste Concentra o RR Concentra o apurada Concentra o esperada apurada Amostra Dilui o ug g ug g Concentra o esperada 1 10 000 807 00 1 20 000 406 00 403 50 1 40 000 207 50 201 75 1 80 000 104 25 100 88 1 160 000 57 69 50 44 1 10 000 1 20 000 1 40 000 1 80 000 1 ni 000 1 10 000 s 1 20 000 587 50 1 40 000 293 75 1 80 000 146 88 1 160 000 73 44 MW RIDASCREEN sigA 2014 10 21 14 Literatura 1 Brand S Gerritzen A Evaluation eines neuen Enzym Immuno Assays zum Nachweis von sekretorischem IgA im Stuhl Poster DGKL 2010 Brandtzaeg P Update on mucosal immunoglobulin A in gastrointestinal disease Current Opinion in Gastroenterology 2010 26 554 563 Goldblum RM The role of IgA in local immune protection J Clin Immun 1990 10 6 645 71S Mestecky Y et al Intestinal IgA novel views on its function in the defence of the largest mucosal surface Gut 1999 44 2 5 Motegi Y et al Role of secretory compon
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