Home

Manual de Bancada - Boas Práticas de Laboratório

1. Resultado Decorridos 18 a 24 horas o conte do dos tubos dever o ser examinados procedendo classifica o do leite Na maioria dos casos pode se combinar a prova de redutase com a lactofermenta o utilizando se o tubo de leite adicionado de azul de metileno e deixando o em banho maria ap s a descolora o at a coagula o A temperatura do banho maria dever ser mantida rigorosamente a 37 C 1 C A fim de facilitar a interpreta o da lactofermenta o os principais tipos de resultados foram a seguir reunidos homog neo aspecto do co gulo floculoso bact rias predominantes digerido origem das bact rias sulcado consequ ncias tecnol gicas da presen a destas bact rias Caseoso aus ncia de co gulo Aspecto da coalhada compacta com pouco soro na superf cie com algumas bolhas ou riscos na superf cie branco fosco e odor um pouco cido Flora presente flora mesofilica com desenvolvimento timo de 20 a 40 C Consequ ncias tecnol gicas a flora l tica presente neste leite n o ocasiona problemas de fabrica o ou de fermenta o leite apto para uso Laborat rio de Rotina P gina 15 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Aspecto da coalhada coalhada em flocos desprendimento de soro branco ou amarelo Flora presente gt mofos e leveduras temperatura tima de 20 a 22 C Pseudomonas e Achromobacte
2. es de calibra o no manual do aparelho Uma vez calibrado enxaguar o eletrodo com gua destilada e secar com papel absorvente de cima para baixo bem levemente com as m os As amostras dever o estar a 20 ou 25 C de temperatura vide instru es no aparelho Laborat rio de Rotina P gina 10 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Alguns aparelhos possuem o eletrodo para medi o da temperatura permitindo desta forma a convers o autom tica leitura lida temperatura da amostra Resultado E expresso em unidades de pH com duas casas decimais Em pH 7 00 neutro acima alcalino e abaixo o meio cido Leite normal 6 70 a 6 80 Queijo no dia seguinte 5 00 a 5 20 pH da massa de filagem 5 00 a 5 20 logurte no ponto 4 60 7 1 Calibra o do eletrodo O eletrodo combinado permite somente medi es relativas ao pH Al m disso seus potenciais est o sujeitos a certos desvios no decorrer do tempo Portanto necess rio calibr los com solu es de refer ncia ou buffer com pH conhecido A calibra o do eletrodo dever ser executada ao menos uma vez por semana ou com frequ ncia maior quando necess rio Procedimentos a Durante a calibra o o eletrodo deve ser limpo ao mudar de uma solu o para outra lavando o com gua destilada e secando o com papel absorvente de qualidade b Somente guard lo devidamente limpo mantendo o bulbo imerso em solu o de KCI c Selecione a tecla
3. o de cido sulf rico para completar 19 mL c Adicionar 1 mL de lcool isoam lico Enxugar a boca do butir metro com papel absorvente e fechar com rolha apropriada d Agitar invertendo v rias vezes o butir metro e Levar ao banho maria a 65 C por 15 minutos f Centrifugar por 15 minutos a 1200 rpm g Repetir as opera es de banho maria e centrifuga o mais 2 vezes e fazer a leitura na escala do butir metro Resultado de gordura Lx 11 33 m Onde L leitura no butir metro 11 33 massa em gramas do leite se utilizarmos o m todo de Rose Gottlieb m massa da amostra em gramas Preparo da solu o do cido sulf rico Solu o de cido sulf rico densidade de 1 605 a 20 C adicionar 630 mL de cido sulf rico p a com densidade de 1 840 sobre 460 mL de gua lenta e cuidadosamente em banho de gelo Esfriar at temperatura de 20 C e conferir a densidade com o dens metro especifico lcool isoam lico densidade de 0 81 a 20 C Laborat rio de Rotina P gina 34 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio An lises de Salmoura A salmoura consiste na submers o dos queijos em uma solu o de gua e sal normalmente com concentra o de 20 m v massa volume O sal NaCl exerce uma influ ncia preponderante nos fen menos f sicos qu micos bioqu micos e microbiol gicos que ocorre durante a matura o do queijo Quando o teor de sal n o adequadamente
4. b Dissolver com aux lio de gua destilada e transferir quantitativamente para um bal o volum trico de 1000 mL c Fazer aproximadamente 5 lavagens no b quer com pequenas por es de gua destilada transferindo para o bal o d Completa o volume do bal o com gua destilada tampar e misturar por invers es e Armazenar em frasco mbar ao abrigo da luz 2 Cloretos Baseia se na rea o do nitrato de prata com cloretos em presen a de cromato de pot ssio como indicador Laborat rio de Rotina P gina 24 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Quando o teor de cloretos normal a quantidade de nitrato de prata adicionada excessiva reagindo com o indicador para produ o de colora o marrom Por outro lado quando o teor de cloretos elevado haver um maior consumo de nitrato de prata diminuindo a intensidade da colora o marrom A rea o desenvolve se em pH ajustado Material 1 Nitrato de Prata 0 1 mo L SR 2 Cromato de Pot ssio 5 m v SR 3 Tubos de ensaio 20 x 200 mm 4 Pipeta graduada capacidade 1 mL 5 Pipeta graduada capacidade 5 mL 6 Suporte para tubos de ensaio T cnica a Misturar em um tubo de ensaio 10 mL de leite 4 5 mL nitrato de prata e 0 5 ml cromato de pot ssio agitar Resultado Colora o amarela positivo para cloretos Colora o marrom tijolo normal 0 14 a 0 16 Coment rios A determina o quantitativa de cloretos
5. de grande relev ncia no aspecto clinico pois varia es anormais no conte do salino do leite podem representar a incid ncia de anormalidade na gl ndula mam ria A porcentagem de cloretos presentes no leite n o constante e podem variar tamb m com o est gio de lacta o muito elevado no colostro idade do animal e pela pr pria alimenta o Quando um animal padece de mamite o conte do de lactose do leite reduzido aumentando o teor de cloretos O teor de cloretos em leite provenientes de beres normais raramente excede 0 14 sendo que em animais enfermos pode se chegar a 0 3 A quantifica o do teor de cloretos til para investigar a mamite em leite proveniente de um nico animal O leite com elevado teor de cloretos normalmente possui atividade lipol tica elevada representando uma amea a qualidade de queijos pelo aparecimento do sabor de ran o 3 A cares A presen a de a car detectada pela rea o de carameliza o deste em meio fortemente cido Material 1 Acido Clor drico 50 R 2 Tubos de ensaio 3 Pipeta graduada capacidade 1 mL 4 Suporte para tubos de ensaio Laborat rio de Rotina P gina 25 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Misturar em um tubo de ensaio 1 mL de leite e 1 mL de cido clor drico b Agitar at dissolu o c Deixar em banho maria fervente por 2 a 3 minutos Resultado Colora o escura posit
6. ainda que o leite tenha sido adequadamente pasteurizado A fosfatase alcalina encontra se adsorvida aos gl bulos de gordura A fosfatase alcalina poder sofrer reativa o ap s algum tempo de pasteuriza o do leite N o comum encontrar esse tipo de interfer ncia mas o analista dever ter em conta a vida de prateleira do produto ao ser analisado principalmente se o teste for conduzido depois de 24 horas de o leite ter sido processado 3 Peroxidase A pesquisa de peroxidase visa investiga o do grau de aquecimento que o leite foi submetido pela interpreta o da colora o Em outras palavras o leite quando aquecido al m da temperatura preconizada para pasteuriza o n o apresenta atividade da peroxidase o que se torna uma pr tica n o l cita Material 1 Guaiacol 1 v v alco lico 2 Per xido de Hidrog nio 3 v v 3 Tubos de ensaio 20 x 200 mm 4 Pipeta graduada capacidade 2 mL 4 Pipeta graduada capacidade 10 mL 5 Suporte para tubos de ensaio T cnica a Misturar em um tubo de ensaio 10 mL aquecer em banho maria a 45 C por 5 minutos para ativa o da enzima Acrescentar 2 mL da solu o hidroalco lica de guaiacol 1 SR lentamente pelas paredes b Adicionar 3 gotas de per xido de hidrog nio a 3 Laborat rio de Rotina P gina 29 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Resultado Colora o r seo salm o positivo para leite cru Colora o anel
7. g Pesquisa de fosfatase alcalina quando a mat ria prima for proveniente de usina e ou f brica h Pesquisa de peroxidase quando a mat ria prima for proveniente de usina e ou f brica i de ST e de SNG s lidos totais e s lidos desengordurados j Pesquisa de neutralizantes da acidez e de reconstituintes da densidade Outras pesquisas que se fa am necess rias Laborat rio de Rotina P gina 1 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio AN LISES DE LEITE 1 Coleta para an lise Para coleta de amostra s o recomendados agitadores com rea suficiente para produzir turbul ncia adequada sem promover altera o do produto como por exemplo incorpora o de ar Ap s uma correta mistura do leite pode se empregar um recipiente coletor com al a Os frascos para acondicionamento devem ser preenchidos com volume adequado de amostra permitindo a homogeneiza o antes da an lise evitando a separa o de gordura durante o transporte Se houver dificuldade para obten o de uma amostra homog nea coletar sub amostras em diferentes pontos do conte do total a amostrar e em seguida considerar uma amostra final normalmente 500 a 1000 mL suficiente devendo se sempre levar em considera o que a quantidade poder variar em fun o das determina es a serem efetuadas As amostras dever o ser acompanhadas por uma ficha assinada pelo respons vel contendo as seguintes informa es a Local d
8. girando o para romper a tens o superficial c Depois de sua estabiliza o anote o resultado da temperatura T e densidade Dt lida Corre o A an lise de Densidade deve ser feita preferencialmente com o soro regulado para a temperatura de 15 C bastando fazer a leitura direta no termolactodensimetro A densidade dever ser convertida com auxilio da tabela quando se proceder an lise com temperaturas diferentes de 15 C Tabela Temperatura primeira coluna horizontal Densidade primeira coluna vertical 5 Gordura E um dos mais importantes componentes do leite afetando diretamente rendimento econ mico sabor aroma textura e consist ncia do queijo A medi o do teor de gordura do soro conjuntamente com a avalia o da densidade permite diagnosticar a perda ou reten o deste constituinte na massa traduzidos pelo ganho econ mico final A literatura cita a perda m xima de 0 5 de gordura no soro n mero atualmente elevado e que est diretamente associado ao processo de coagula o tipo de coagulante empregado dilui o do coagulante temperatura de coagula o distribui o do coagulante no tanque momento ideal para corte e metodologia de corte Como exemplo pr tico podemos citar que um coagulante a base de quimosina pura permite uma melhor reten o de constituintes do leite na massa menor perda de gordura quando comparado com um coalho de origem animal Material 1 Butir metro de
9. imediatamente pela coluna transparente de gordura separada Resultado direto de gordura Coment rios A amostragem correta do soro para an lise de gordura de grande import ncia na determina o do resultado final devendo ser representativa e cuidadosamente aplicada Gordura prevista 0 1 a 0 5 vide coment rios iniciais 6 Medi o do pH A metodologia de medi o do pH do soro a mesma utilizada para leite e seu objetivo equivalente ao m todo Dornic para acidez Sua leitura permite portanto o acompanhamento do grau e est gio de fermenta o do soro necess rio ou n o conforme o tipo de produto elaborado Material 1 pHmetro port til ou de bancada Term metro de merc rio 10 a 110 C Becker pl stico de 50 mL Becker pl stico de 100 mL Pisseta de 500 mL Papel absorvente Eletrodo para s lidos para medi o de queijos Eletrodo para l quidos para medi o de leite e gua Agua destilada 10 Solu o tamp o pH 7 00 11 Solu o tamp o pH 4 00 12 KCL cloreto de pot ssio 3M T cnica Ap s ligar o aparelho estabiliz lo e seguir as instru es de calibra o no manual do aparelho Uma vez calibrado enxaguar o eletrodo com gua destilada e secar com papel absorvente de cima para baixo bem levemente com as m os As amostras dever o estar a 20 ou 25 C de temperatura vide instru es no aparelho Laborat rio de Rotina P gina 47 Manua
10. o e planejamento dos processos de produ o de instala o e de servi os associados que afetem diretamente esta qualidade e que esses processos seja executados sob condi es controladas A comprova o metrol gica importante como suporte do controle de processo e garantia as especifica es dos produtos Sem a atividade de confirma o metrol gica n o h como garantir a confiabilidade dos dados referentes ao controle das caracter sticas que determinam a qualidade dos produtos assim como o controle do processo produtivo Aferi o Para o laborat rio de rotina a aferi o de instrumentos como term metro e pHgametro deve executada no decorrer da rotina validando desta forma as opera es de monitoramento de pontos cr ticos e controles de processos Qualquer falha detectada pelo processo de aferi o deve impedir o uso imediato do instrumento evitando o monitoramento impreciso da produ o A ind stria dever dispor de term metros em n meros e locais suficientes devidamente aferidos conforme a metodologia padr o para este tipo de instrumento al m de possuir os devidos registros disponibilizados a qualquer tempo para a verifica o oficial Calibra o A calibra o de instrumentos de controle de processos deve ser executada independente das a es de aferi o Seu objetivo visa assegurar se o equipamento n o sofreu deteriora o na exatid o evitando que seja utilizado quando existir uma significati
11. 110 C T cnica a Colocar as amostras em banho maria e aquec las a 80 C 5 minutos resfriando imediatamente b Pipetar 0 1 mL de cada amostra usando uma ponteira para cada amostra e colocar no tubo Devoltest c Deixar um tubo controle junto com os outros e incubar a 65 C 2h 30 a 3 00 h Resultado Aguardar at que o tubo de controle fique amarelo e comparar com os outros Roxo presen a de inibidores i Amarelo aus ncia de inibidores 10 An lise de redutase Constitui um m todo para estimar o teor bacteriano do leite gra as correla o existente entre o n mero de bact rias presentes e o tempo de redu o do azul de metileno Em geral o tempo de redu o inversamente proporcional ao n mero de bact rias presentes no leite O fundamento da prova baseia se no fato das bact rias consumirem o oxig nio do leite atrav s de seu processo respirat rio da resultando na redu o do corante assim quanto maior o n mero de bact rias presentes no leite maior o consumo de oxig nio e mais r pido ser a perda da colora o do leite A presen a de subst ncias inibidoras no leite antibi ticos ocasiona resultados err neos classificando como leite de excelente qualidade pelo longo tempo de Laborat rio de Rotina P gina 13 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio redu o do corante uma vez que o inibidor ir atuar sobre a flora presente reduzindo a O teste de reduta
12. 2 Pipeta graduada de 5 mL 3 Rolha de borracha 4 Tubo de ensaio 5 Reagentes Catalisador dissolver 0 2 g de sulfato de cobre pentahidratado p a em 100 mL de gua Solu o reagente pesar 0 150 g de 2 6 dicloroquinona cloroimida p a dissolver em 50 mL de lcool et lico p a transferir para frasco mbar e estocar em geladeira A colora o da solu o recentemente preparada amarelo citrina passando a amarelo ouro e tendendo a escurecer adquirindo tons amarronzados com o envelhecimento Recomenda se usar a solu o por um per odo m ximo de duas semanas desde que conservada sob refrigera o e ao abrigo da luz Substrato pesar 0 5 g de fenilfosfato diss dico dihidratado p a em um b quer dissolver com o tamp o dilu do transferir para bal o volum trico de 500 mL e completar o volume com o tamp o dilu do Recomenda se usar esta solu o durante um per odo m ximo de duas semanas Tamp o carbonato pesar 46 89 g de carbonato de s dio anidro p a e 37 17 g de bicarbonato de s dio p a dissolver e levar ao volume de 1000 mL solu o estoque Retirar uma al quota de 25 mL da solu o estoque transferir para bal o volum trico de 500 mL e completar o volume O pH deste tamp o dilu do dever situar se entre 9 5 e 9 7 T cnica a Transferir 0 5 mL da amostra a analisar para um tubo de ensaio adicionar 5 mL do substrato tampar com rolha de borracha b Agitar ligeiramente e levar ao banho m
13. C ou 6 minutos a temperatura ambiente Resultado Colora o amarelada leite cru ou mal pasteurizado Colora o normal leite pasteurizado Coment rios O leite natural n o pasteurizado possui uma gama ampla de microrganismos O processo de pasteuriza o visa prioritariamente destruir a flora patog nica eliminando a possibilidade de transmiss o de doen as via leite Para comprova o da efici ncia do processo de pasteuriza o emprega se a prova de fosfatase alcalina Em leite cru a fosfatase alcalina est presente sendo destru da pelo processo de pasteuriza o A prova de fosfatase visa investigar a incid ncia da mesma no leite pasteurizado ou indevidamente pasteurizado Laborat rio de Rotina P gina 27 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Estando presente a fosfatase alcalina atua produzindo uma rea o com forma o de cor o que acontece em leite cru ou em leite mal pasteurizado N o havendo a presen a de fosfatase pela efici ncia da pasteuriza o n o haver a forma o de cor 2 Fosfatase alcalina com prepara o dos reativos A verifica o da atividade enzim tica feita mediante a adi o amostra do substrato espec fico da enzima em condi es ideais para sua atua o A presen a do indicador permite identificar a atividade enzim tica pela rea o colorim trica com os produtos de degrada o Material 1 Banho maria
14. as bordas tornando as impr pria para medidas precisas Uma almofada de algod o ou l de vidro colocada na base da jarra evitar a quebra das bordas Certifique se de que o n vel de gua suficiente para imergir uma boa parte ou toda a pipeta Na hora conveniente as pipetas poder o ent o ser drenadas e colocadas em uma jarra contendo detergente dissolvido ou no caso de estarem excepcionalmente sujas em uma jarra com solu o de limpeza de cido cr nico Depois de deixar de molho por v rias horas ou durante a noite drene as pipetas e fa a correr gua de torneira atrav s delas at que todos os tra os de sujeira sejam removidos Coloque de molho em gua destilada pelo menos 1 hora Retire da gua destilada enx g e seque as partes externas com papel toalha agite para retirar res duos das paredes e seque 2 Em laborat rios onde um grande n mero de pipetas usado diretamente seria conveniente utilizar uma lavadora autom tica de pipetas Cestos e jarras de polietileno podem ser utilizados para enxaguar pipetas ou coloc las de molho em solu o de limpeza de cido cr mico A 3 Depois da secagem coloque as pipetas em gavetas prova de poeira Embrulhe pipetas bacteriol gicas em papel ou coloque as em estojos e utilize esterilizador a ar seco temperatura de 160 C por 2 horas Pipetas utilizadas para transferir material patog nico devem conter um chuma o de algod o na extremidade da boca antes de ester
15. cido do mesmo ou seja leite cido inst vel ao calor Material 1 Tubos de ensaio 2 Pipeta graduada capacidade de 5 mL 3 Suporte para tubos de ensaio 4 Lamparina a lcool ou bico de Bunsen 5 Garra para tubos de ensaio Laborat rio de Rotina P gina 6 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Transferir para um tubo de ensaio 5 mL de leite e ferver em chama com o auxilio da lamparina ou bico de Bunsen agitando continuamente Resultado a Coagula o leite sem resist ncia t rmica n o poder ser pasteurizado ou aquecido pois ir coagular consequentemente causar transtornos e perdas econ micas na produ o b Coagula o fina leite com pequena resist ncia t rmica igualmente ao leite coagulado poder causar danos se submetido pasteuriza o c Sem coagula o leite normal poder ser submetido a processo de pasteuriza o e fervura como na produ o de doce de leite 2 5 An lise de acidez pelo m todo Dornic O teste de acidez pelo m todo Dornic visa determina o quantitativa da acidez do leite com utiliza o do reagente de Dornic com indicador fenolftale na Material 1 Pipeta volum trica capacidade de 10 mL 2 Erlenmeyer de 125 mL 3 Aced metro de Dornic 4 Solu o Dornic Hidr xido de S dio 0 111 N 9 A 5 Fenolftale na 1 m v alco lica neutralizada SI Ees T cnica a Transferir para o erlenmeyer 10 mL d
16. cido hipocloroso Material para medi o do pH 1 pHmetro port til ou de bancada Term metro de merc rio 10 a 110 C Becker pl stico de 100 ml Pisseta de 500 ml Papel absorvente Suporte para funil e funil de vidro Eletrodo para liquidos para medi o de leite e gua Agua destilada Solu o tamp o pH 7 00 10 Solu o tamp o pH 4 00 11 KCL cloreto de pot ssio 3M T cnica a Ap s ligar o aparelho estabiliz lo e seguir as instru es de calibra o no manual do aparelho b Transferir para um b quer de 100 mL aproximadamente 50 mL de gua a 25 C c Inserir o bulbo do eletrodo de medi o na amostra d Acionar para leitura de pH do aparelho e Deixar estabilizar e fazer a leitura Resultado E expresso em unidades de pH com duas casas decimais 3 Teor sanitizante ppm de cloro residual A efici ncia da capacidade sanitizante dos agentes clorados esta intimamente relacionada com seu excelente efeito residual ou seja um bom sanitizante deve estar presente em concentra es m nimas mesmo em condi es adversas As dosagens utilizadas n o devem ocasionar problemas sa de do ser humano Um m todo simples e pr tico para medi o da dosagem do teor residual de cloro o m todo colorim trico denominado OTO onde usada a ortotolidina solu o org nica clara que na presen a de cloro passa a apresentar a cor amarela lim o Em concentra es maiores a cor deriva
17. controlado diversos problemas podem ocorrer no decorrer da matura o Ficha t cnica da salmoura Quantidade por quilo de queijo 2 a 3 litros Concentra o 21 22 B 20 21 de sal Temperatura 10 a 12 C Acidez m nima 20 D Acidez m xima 45 D pH 5 00 a 5 20 Coliformes ufc ml 30 C menor que 100 Contagem global ufc ml menor que 100 000 Mofo e levedura ufc m l menor que 200 As trocas durante a salga Durante o per odo em que o queijo permanece na salmoura ocorre troca de elementos entre ambos o resultado final a absor o de sal pelo queijo e enriquecimento da salmoura com compostos org nicos e minerais bem como a dilui o de seu teor de sal Como resultado dessa trocas ao final de um per odo razo vel de uso a salmoura tende a Diminuir sua concentra o de sal Aumentar conte do de mat ria org nica e mineral Diminuir sua densidade que n o proporcional a diminui o do seu teor de sal Aumentar a acidez titul vel Estabilizar numa faixa de pH Aumentar a carga bacteriana Diminuir a capacidade de salgar o queijo se o sal n o for corrigido Aumentar os dep sitos em decanta o Temperatura da salmoura A temperatura ideal para salga de queijos de 10 a 12 C Temperatura elevada aumenta a rapidez na absor o de sal e um aumento na perda de umidade Temperatura baixa abaixo de 7 C a salga ocorre muito lentament
18. corresponde a 1 D Cada 1 D corresponde a 0 01 m v ou 0 1 g litro de cido l tico Ex 11 D graus Dornic corresponde a 1 1 gramas de cido l tico por litro de soro Coment rios a Acidez do soro no corte da massa via de regra a acidez do soro no momento do corte deve representar cerca de 7 da acidez original do leite Portanto o soro deve possuir acidez m xima de 13 D no momento do corte da massa salvo algumas exce es Para elabora o de ricota bebida l ctea ou outras utiliza es esta acidez deve ser a m xima permitida pois valores superiores a 13 D incorrem na perda da estabilidade t rmica inviabilizando sua utiliza o b Acidez do ponto a acidez do ponto representa um indicativo do grau da evolu o da fermenta o l tica no decorrer do processo de fabrica o portanto para alguns casos deve ser superior a acidez do corte Por exemplo na elabora o do queijo Parmes o a acidez do ponto deve ser superior a acidez do corte em at 2 D dependendo da flora l tica utilizada Outros casos Queijos de massa lavada a acidez do ponto inferior a acidez do corte pela retirada e lavagem da massa com gua Queijos com fermenta o l tica cottage a acidez do corte elevada 45 a 48 D Massa de requeij o a acidez final depois da lavagem e prensagem da massa deve ser m xima de 3 D ou nula Massa de mussarela fermentada acidez de 60 a 65 D Utiliza o de leite cido para
19. de monitoramento e a adequa o entre 6 00 e 9 50 eliminam qualquer problema de sanitiza o relacionado ao pH O cloro age como sanitizante quando destr i microrganismos transmissores de doen as bact rias fungos e v rus em sob a denomina o de bacteri fagos na ind stria queijeira assim como microrganismos n o nocivos ao ser humano Quando oxida completamente as mat rias org nicas age como oxidante e quando reage com produtos nitrogenados age como oxidante parcial produzindo cloraminas o que acontece em guas de piscinas Do ponto de vista da sanitiza o quanto menor o pH mais eficiente ser o cloro Por m para se evitar ou diminuir a corros o nos equipamentos e a nocivicidade ao ser humano o pH ideal deve estar compreendido entre 7 20 a 7 40 Tamb m conhecido como cloro l quido apresenta cor clara ligeiramente amarelada Apresenta a porcentagem em peso de cloro ativo de 9 a 13 comercialmente denominados de 10 a 15 respectivamente e pH de 13 Rea o qu mica com a gua hipoclorito de s dio gua gt hidr xido de s dio cido hipocloroso Laborat rio de Rotina P gina 41 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio e Denominado de cloro granulado s lido ou seco apresenta gr nulos de cor branca Apresenta a porcentagem em peso de cloro ativo de 65 a 70 pH de 11 em solu o a 1 Rea o qu mica com a gua hipoclorito de c lcio gua gt hidr xido de c lcio
20. fabrica o de queijos a acidez do corte pode ultrapassar 13 D c Acidez na prensa representa um par metro a ser determinado para alguns tipos de queijos os quais no momento da prensagem deve apresentar determinado n vel de pH na massa o que representa a evolu o satisfat ria do fermento l tico Quantificando o soro residual da massa podemos relacion lo a um determinado pH e por conseguinte verificar a evolu o da fermenta o l tica pela simples medi o da acidez do soro 4 Densidade A medi o da densidade do soro importante no processo de avalia o de poss veis perdas originadas por um insatisfat rio processo de coagula o corte mexedura etc Em outras palavras quanto mais pr xima densidade do soro for a do leite maior o n vel de perdas de constituintes que deveriam estar retidos na massa A densidade do soro deve estar abaixo da densidade m nima do leite 1028 g L a 15 C Valores pr ximos densidade do leite representam maiores perdas de constituintes como prote nas e gordura Densidade lida ideal para soro 1023 a 1024 g L Material 1 Proveta graduada de 250 mL 2 Termolactodens metro Laborat rio de Rotina P gina 45 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Transferir cerca de 250 mL do soro para proveta lentamente evitando forma o de espuma preferencialmente a temperatura de 15 C b Introduza cuidadosamente o termolactodens metro
21. fundamentada na separa o das hem cias por centrifuga o Material 1 Tubo para centrifuga 2 Estante para tubos 3 Pipeta volum trica de 10 mL 4 Centrifuga para 4 ou 8 provas T cnica Colocar 10 mL de leite in natura em tubo de centr fuga e centrifugar a 1200 rpm por 5 minutos Resultado Em presen a de sangue forma se um dep sito avermelhado no fundo do tubo Laborat rio de Rotina P gina 18 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Pesquisa de Alcalinos Com exce o da fraude por aguagem a neutraliza o do leite com agentes alcalinos hidr xido de s dio ou soda c ustica bicarbonato de s dio e carbonatos com certeza a adultera o mais comum e frequentemente empregada para mascarar a altera o do leite sofrida pelo excesso de acidez O leite adulterado com alcalinos e classificado como bom resultado de p ssimas condi es higi nicas defici ncias de armazenamento transporte e refrigera o Muito importante considerar que este tipo de mat ria prima possui um elevado conte do bacteriano e enzim tico com danos irrevers veis para a empresa produto e consumidor A neutraliza o excessiva altera consideravelmente a composi o qu mica do leite saponificando sua gordura e hidrolizando suas prote nas alterando o sabor textura consist ncia e retardando coagula o no processo de produ o de queijos 1 Neutralizantes da acidez m todo cido ros lic
22. m v alco lica neutralizada SI Frasco com gua destilada a 40 50 C T cnica a Transferir para o erlenmeyer 5 mL da amostra do creme com auxilio da pipeta volum trica Mantenha a pipeta a boca do frasco e com outra pipeta passando pela primeira junte cerca de 20 mL de gua 40 50 C b Adicionar 3 a 5 gotas da fenolftale na Laborat rio de Rotina P gina 31 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio c Titular com a solu o Dornic at viragem que se reconhece pela altera o da cor branca para r seo claro e interpretar resultado Resultado Acidez Dornic AD v x 2 Sendo V quantidade de d cimos de mL gastos de solu o Dornic leitura direta no acedimetro 2 fator referente a 5 mL Para expressar a acidez em de cido l tico basta dividir graus Dornic por 100 Ex Acidez de 30 D Acido l tico 0 45 4 Acidez titul vel IN 68 Consiste na titula o de determinada massa da amostra por uma solu o alcalina de concentra o conhecida utilizando como indicador fenolftale na Material 1 Balan a anal tica 2 Bast o de vidro 3 B quer de 150 mL 4 Bureta de 10 mL 5 Solu o de hidr xido de s dio 0 1 N 6 Solu o alco lica de fenolftale na a 1 m v T cnica a Pesar 10 g de amostra adicionar 50 mL de gua isenta de g s carb nico e homogeneizar b Adicionar a amostra previamente preparada conforme 10 gotas de solu o de
23. o no manual do aparelho b Transferir para um b quer de 100 mL aproximadamente 50 ml de salmoura filtrada em algod o a 25 C c Inserir o bulbo do eletrodo de medi o na amostra d Acionar para leitura de pH do aparelho e Deixar estabilizar e fazer a leitura Resultado E expresso em unidades de pH com duas casas decimais 4 Acidez Dornic Material Funil de vidro e suporte Pipeta volum trica capacidade de 10 mL Erlenmeyer de 125 mL Aced metro de Dornic Solu o Dornic Hidr xido de S dio 0 111 N 9 Fenolftale na 1 m v alco lica neutralizada SI Algod o hidr filo Laborat rio de Rotina P gina 38 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Transferir para o erlenmeyer de 125 ml 10 mL de salmoura filtrada em algod o temperatura de 20 a 25 C com auxilio da pipeta volum trica b Adicionar 3 a 5 gotas da fenolftale na c Titular com a solu o Dornic at viragem que se reconhece pela altera o da cor branca para r sea claro e interpretar resultado correspondente ao pH de 8 3 e anotar o volume gasto Resultado Cada 0 1 ml de solu o Dornic gasto na titula o corresponde a 1 D Cada 1 D corresponde a 0 01 m v ou 0 1 g litro de cido l tico Como preparar salmoura 1 Ap s o c lculo da quantidade de sal e gua deve se pesar o sal e adicionar no tanque de preparo 2 Completar o volume com gua e aquecer at 90 95 C
24. para um laranja profundo podendo chegar ao vermelho Material 1 KIT para an lise cloro e reagentes 2 Copo para coleta Laborat rio de Rotina P gina 42 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Enx gue a c lula comparadora na pr pria gua antes e depois de cada uso b Despreze a gua que exceder os n veis marcados nos tubos c No tubo do lado direito correspondente ao pH adicione 4 gotas do REAGENTE pH d No tubo do lado esquerdo correspondente ao cloro adicione 4 gotas do REAGENTE CLORO e Coloque as tampas agite para igualar as cores formadas e compare as com os padr es ao seu lado Refer ncia resultados Cloro 0 5 a 1 0 ppm E Laborat rio de Rotina P gina 43 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio An lise de soro A an lise do soro no decorrer da fabrica o de queijos segue o mesmo principio adotado na an lise de leite para pH acidez densidade e gordura Os resultados obtidos nos fornecem informa es importantes sobre a evolu o do fermento l tico assim como ganhos ou perdas as quais est o intimamente relacionadas com o sucesso da fabrica o A coleta da amostra deve ser implementada nos seguintes momentos da fabrica o 1 Soro no corte 2 Soro no ponto 3 Soro do queijo no momento da prensagem conforme o queijo elaborado 1 Sele o de soro Caracter sticas sensoriais a Aspecto l quido b Cor caracter stica t
25. sab o detergente ou outros materiais de limpeza faz se absolutamente necess ria antes da utiliza o dos materiais de vidro Isto particularmente importante com detergentes pois leves tra os dos mesmos interferir o em algumas rea es 2 Depois de lavar enx gu e os materiais de vidro com gua corrente Quando tubos de ensaio frascos graduados e similares forem enxaguados com gua corrente deixe a correr por fora e por dentro por um determinado per odo de tempo A seguir encha parcialmente os frascos com gua agite bem e esvazie por pelo menos 6 vezes Para melhor enxaguar pipetas e buretas coloque uma mangueira de borracha na torneira e adapte a outra extremidade da mangueira na sa da das pipetas e buretas fazenda a gua correr atrav s delas Se a gua da torneira for muito dura melhor faz la passar por um desmineralizador antes de us la 3 Enx g e a vidraria numa grande vasilha com gua destilada para em seguida enxagu la com um filete tamb m de gua destilada proveniente de um garraf o de 20 litros sabre uma prateleira ao qual se adapta uma mangueira Recomenda se isto no lugar de se enxaguar diretamente em torneira de gua destilada para se reduzir pedras de mesma 4 Para ensaios microbiol gicos onde os testes s o extremamente sens veis uma lavagem meticulosa deve ser efetuada Manuseio e armazenamento 1 Quando lavar ou enxaguar pipetas provetas ou buretas tenha cuidado para n
26. 0 001 mg L 100 mg L Aus ncia Laborat rio de Rotina P gina 40 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 1 Caracter sticas sensoriais As caracter sticas sensoriais s o utilizadas para identifica o inicial e avalia o preliminar da integridade da gua sendo subjetivas e por isso n o podem ser utilizadas isoladamente O termo cor inclui n o apenas as subst ncias na solu o mas tamb m materiais em suspens o A cor aparente determinada na amostra original sem filtra o ou centrifuga o T cnica Cor Transferir cerca de 5 mL da amostra homogeneizada para um tubo de ensaio e observar a apar ncia a cor e a limpidez Odor Verificar o odor agitando o tubo sob o nariz O resultado do teste do odor depende da capacidade sensorial humana Aguas para processos industriais necessitam serem livres de odor e de sabor O resultado deve ser n o objet vel ou seja aceito 2 pH O pH expresso por um n mero que varia de 0 a 14 sendo neutro o pH igual a 7 0 pH inferior a 7 0 indica que a gua cida pH superior a 7 0 indica que a gua b sica A maioria dos produtos clorados por meio dos subprodutos gerados nas rea es qu micas com a gua altera consideravelmente o pH Essa desvantagem pode ser minimizada pelo constante monitoramento do pH e mantendo se a alcalinidade dentro dos padr es O cloro possui sua a o santizante fortemente influenciada pelo pH A constante
27. 3 Deixar em repouso at o dia seguinte 4 No dia seguinte transferir para o tanque de salmoura eliminando se as sujidades depositadas no fundo do tanque 5 Analisar o teor de sal medir o pH e fazer corre es se necess rio 6 Adicionar 50 mL de cloreto de c lcio para cada 100 litros de salmoura somente para salmoura nova Conserva o da salmoura 1 Eliminar diariamente materiais org nicos como peda os de queijos 2 Medir semanalmente o pH e a acidez Dornic 3 Analisar o teor de sal a cada 3 dias Recupera o da salmoura 1 Transferir a salmoura para o tanque e verificar o teor de sal pH acidez Aquecer at atingir a temperatura de 95 C 2 Deixar em repouso at o dia seguinte 3 Proceder s corre es necess rias Laborat rio de Rotina P gina 39 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio gua de abastecimento O controle da gua industrial gua utilizada em todas as opera es da ind stria constitu um ponto de controle de estimada relev ncia uma vez que contamina es oriundas dos processos de capta o armazenagem e distribui o podem atingir diretamente o consumidor via produto contaminado O agente sanitizante comumente utilizado pela ind stria de latic nios no controle de gua de abastecimento o cloro sob a forma de cido hipocloroso HCIO o qual resultado da rea o dos agentes clorados com a gua A verifica o e controle da gua de abastecimento cons
28. 5 C b Introduza cuidadosamente o termolactodens metro girando o para romper a tens o superficial c Depois de sua estabiliza o anote o resultado da temperatura T e densidade Dt lida Corre o A an lise de Densidade deve ser feita preferencialmente com o leite regulado para a temperatura de 15 C bastando fazer a leitura direta no termolactodensimetro A densidade dever ser convertida com aux lio da tabela quando se proceder an lise com temperaturas diferentes de 15 C Tabela de corre o da densidade em anexo Coment rios Alguns fatores influenciam a densidade do leite como a Temperatura que se faz na leitura b Composi o do leite um leite naturalmente baixo em seu teor de gordura tende a possuir uma densidade menor que um leite rico em gordura aparentemente o leite rico em gordura deveria possuir uma densidade menor pois a densidade relativa da gordura baixa por m ao aumentar seu teor de gordura os s lidos n o desengordurados s o elevados proporcionalmente compensando a densidade baixa da gordura c O leite desnatado possui a densidade superior ao leite normal acima de 1 032 at 1 035 gramas por litro 4 Gordura E um dos mais importantes componentes do leite afetando diretamente rendimento econ mico sabor aroma textura e consist ncia do queijo A an lise da gordura pode ser utilizada para pagamento ao produtor de leite por qualidade O principio b sico da an
29. CALIBRAR ou CALIBRA d Ser solicitado que se mergulhe o eletrodo na solu o buffer de pH 7 00 e Acione a tecla enter ou sim e aguardar f Ser solicitada a solu o cujo pH 4 00 Enxaguar primeiro o eletrodo com gua destilada e limpar levemente com papel absorvente g Mergulhar o eletrodo na solu o pH 4 00 teclar enter ou sim e aguardar h Ap s alguns instantes aparecer o percentual de qualidade do eletrodo i Finalizar a opera o Resultados a 90 a 100 O eletrodo esta dentro de sua vida til para funcionamento e calibra normalmente b 80 a 90 O eletrodo esta no final de sua vida til ou a solu o tamp o esta contaminada Deve se rever a solu o para calibra o adquirindo nova solu o e enviar o eletrodo para revis o c menos que 80 A vida til do eletrodo se esgotou e deve ser substitu do incluindo nova solu o tamp o pH 4 00 e 7 00 Importante Nunca utilizar o eletrodo na solu o tamp o diretamente Adicionar um pouco em um b quer previamente limpo e seco descartando a ap s o uso Laborat rio de Rotina P gina 11 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 8 Crioscopia A crioscopia do leite corresponde medi o do ponto de congelamento ou da depress o do ponto de congelamento do leite em rela o ao da gua A composi o normal do leite gera um valor aproximado de 0 531 C 0 550 H para o ponto criosc pico A incid ncia de fraude de leit
30. Gerber para leite desnatado 2 Estante para butir metros Pipeta volum trica de 11 mL Dosador volum trico para cido sulf rico de 10 mL Dosador volum trico para lcool isoam lico de 1 mL Centrifuga para 4 ou 8 provas Acido sulf rico dens 1 820 a 1 825 15 C Alcool isoam lico R dens 0 810 15 C T cnica a Transferir diretamente para o butir metro de Gerber 10 mL de cido sulf rico b Adicionar lentamente 11 mL de amostra com aux lio de uma pipeta volum trica inclinando a pipeta e deixando fluir pelas paredes internas do butir metro Laborat rio de Rotina P gina 46 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio evitando a queima do soro ao entrar em contato com o cido o que ir dificultar a leitura c Acrescentar 1 mL do lcool isoam lico d Limpar o gargalho com papel absorvente e vedar com rolha pr pria e Envolver numa toalha umedecida colocando o bulbo maior na palma da m o de forma tal que o dedo polegar exer a press o sobre a tampa impedindo sua proje o e agitar at completa dissolu o do co gulo invertendo algumas vezes com cuidado f Colocar os butir metros na centrifuga balanceando o lado oposto com outro butir metro o qual pode ser fazer simultaneamente outra determina o ou utilizar um butir metro carregado com gua Centrifugar por 4 a 5 minutos a 1200 rpm g Retire deixe em banho maria a 65 C por 2 3 minutos e fa a a leitura
31. Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio MANUAL DE BANCADA PARA LABORAT RIO BPL FABRICA DE QUEIJOS Fernando Rodrigues Parte II An lises de rotina para f brica de queijos O objetivo deste manual apresentar de forma did tica e comentada as principais t cnicas de controle laboratorial de rotina a serem empregadas em ind stria de latic nios Minist rio da Agricultura segundo a Instru o Normativa n 51 de 18 09 2002 assegurando desta forma a integridade e qualidade do leite como mat ria prima principal A f brica de latic nios deve conter em sua planta um laborat rio devidamente localizado e equipado que permita o controle rotineiro para sele o e classifica o do leite destinado fabrica o assim como o monitoramento de algumas etapas importantes no processamento de queijos como an lises de fosfatase alcalina e peroxidase para leite pasteurizado controle da gua de abastecimento controle da salmoura an lises de soro soro no corte soro no ponto soro na prensagem soro da massa e an lises de acidez gordura leite e creme de leite para padroniza o O leite recebido pela f brica de latic nios dever ser submetido aos procedimentos relacionados a Medi o da temperatura b Teste do lcool alizarol na concentra o m nima de 72 v v setenta e dois por cento volume volume c Acidez titul vel d Indice criosc pico e Densidade relativa a 15 C f Teor de gordura
32. a o mais breve poss vel recomendando se que seja evitada a utiliza o de mecanismos que impliquem em estocagem intermedi ria entre o ponto de colheita e o laborat rio Somente devem ser aceitas para an lise amostras acondicionadas em embalagem lacrada pelo respons vel que efetuou a coleta sugerindo se para tal a utiliza o de lacre ou outro tipo de fechamento herm tico que n o possa ser violado sem que se torne evidente Tal provid ncia se faz necess ria para evitar a substitui o ou adultera o da amostra entre o ponto de coleta e o laborat rio com reflexos no resultado da an lise Todas as amostras que chegarem ao laborat rio em condi es diferentes das preconizadas devem ser recusadas cabendo ao laborat rio notificar o respons vel que realizou a coleta as raz es da n o aceita o BRASIL Minist rio da Agricultura Secretaria Nacional de Defesa Agropecu ria Laborat rio Nacional de Refer ncia Animal Recomenda es gerais In M todos anal ticos oficiais para controle de produtos de origem animal e seus ingredientes m todos f sicos e qu micos Bras lia DF 1981 v Il p L 1 L 6 Preparo da amostra A amostra dever ser armazenada em recipiente n o absorvente e com tampa Deve ser conservada refrigerada evitando o congelamento at o momento da an lise Somente em alguns casos especiais permitido o uso de conservantes os quais n o devem interferir nas an lises a serem realizadas Os co
33. absoluto e misturar c Filtrar com papel de filtro d Adicionar 6 gotas do cido ros lico 1 Resultado Colora o vermelho carmim positivo para alcalinos E Colora o alaranjada negativo 3 1 Bicarbonatos e outros alcalinos A adi o de solu o alco lica de alizarina ao leite desenvolver uma colora o viol cea indicando a presen a de bicarbonatos ou outros alcalinos Seguir o m todo de alizarol para esta pesquisa 4 Hipocloritos O teste se d pela adi o de iodeto de pot ssio ao leite que promover desenvolvimento de colora o alaranjada em presen a de hipoclorito devido libera o de iodo Material 1 lodeto de Pot ssio 10 m v SR conservar sob refrigera o Laborat rio de Rotina P gina 20 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 2 Pipeta graduada de 1 mL 3 Tubo de ensaio 4 Suporte para tubos de ensaio T cnica a Misturar no tubo de ensaio partes iguais de leite 1 mL e de iodeto de pot ssio 10 b Agitar e observar imediatamente a colora o formada Resultado Colora o alaranjada positivo para hipoclorito Laborat rio de Rotina P gina 21 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Pesquisa de Conservantes A fraude pela adi o de conservantes ao leite visa redu o da flora original desenvolvida ap s ordenha pela n o observ ncia de corretas pr ticas de manejo e higiene assim como armazenamento do
34. amb m alterar o menisco Limpeza 1 Lave a vidraria imediatamente ap s o uso Se uma lavagem completa n o for poss vel coloque a de molho em gua Caso isso n o seja feito a remo o dos res duos poder se tornar trabalhosa e em alguns casos imposs vel 2 maioria dos materiais de vidro novos levemente alcalina durante a rea o Para experi ncias qu micas de precis o materiais de vidros novos devem ser colocados de molho por algumas horas em solu o cida solu o 1 hidrocl rica ou n trica antes de serem lavados 3 Os materiais de vidro contaminados com material patog nico e meio de cultura placas de petri devem ser esterilizados antes da lavagem colocando os em uma vasilha grande com gua a qual tenham sido adicionados na dosagem de 1 a 2 de sab o detergente deixando ferver por 30 minutos Os materiais de vidro podem ent o ser enxaguados com gua corrente esfregados com detergente e enxaguados novamente 4 Laborat rios maiores podem preferir autoclavar materiais de vidro ou esteriliz los em estufas a vapor ou equipamentos similares Se uma virose ou col nia de microorganismos estiver presente a autoclavagem ser absolutamente necess ria 5 Se o material de vidro ficar indevidamente emba ado sujo ou contiver material org nico coagulado ele deve ser lavado em solu o de limpeza com cido cr mico O dicromato deve ser manuseado com extrema precau o por ser um agente corrosi
35. anteiga coliformes Origem dos germes forragens excrementos defici ncia de higiene e sanitiza o na produ o leiteira Aspecto da coalhada coalhada mais ou menos depositada soro esverdeado pouco cido Flora presente Bacilos esporulados B subtilis temperatura tima de desenvolvimento de 37 C Micrococcus M caseoliticus e M liquefaciens Proteus vulgaris leveduras Torula temperatura tima de desenvolvimento de 20 C fungos Geotrichum Mucor Penicillium temperatura tima de desenvolvimento de 20 a 22 C Consequ ncias tecnol gicas sabor amargo ran o sabor de bolor na manteiga sabor de azedo olhaduras e sabor azedo em massas moles Laborat rio de Rotina P gina 16 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Origem dos germes polui o atmosf rica dos est bulos distribui o de forragens defici ncia de higiene e sanitiza o em todo processo de produ o leiteira Causas leite muito pobre em flora l tica presen a de antibi ticos e anti s pticos leite mamitosos filante odor ruim coloridos com dep sito de pus Flora presente gt Streptococcus St agalactiae Colibacillus Bacillus pyogenes fungos e leveduras Consequ ncias tecnol gicas leite impr prio para iogurtes e queijos e ao tratamento t rmico 12 Teste de redu o da Resazurina Este teste apresenta certa semelhan a com o teste de azul de met
36. apacidade 2 mL Suporte para tubos de ensaio Tubos de ensaio Bico de Bunsen ou Lamparina a lcool Garra para tubos de ensaio Laborat rio de Rotina P gina 22 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Resultado Colora o violeta positivo para formol Colora o amarela negativo 3 Formol m todo B O princ pio do teste se baseia no fato de que o formalde do quando aquecido com cido cromotr pico em presen a de cido sulf rico origina um produto de condensa o que oxidado posteriormente transforma se em um composto p quinoidal de colora o violeta Material Banho maria Bico de Bunsen ou placa aquecedora Bal o de Kjeldahl de 500 mL Condensador de Liebig Erlenmeyer de 125 mL Pipeta graduada de 5 mL Provetas de 25 e 200 mL Tubo de ensaio de 25 mL Acido fosf rico p a 10 Solu o de cido cromotr pico sal diss dico dihidratado a 0 5 m v em solu o de cido sulf rico a 72 v v 11 Solu o refer ncia de formalina solu o de formalde do a 37 na dilui o de 1 100 000 v v T cnica a Medir 100 mL de leite homogeneizado e passar para bal o de destila o juntamente com 100 a 150 mL de gua Acidificar com 2 mL de cido fosf rico p a b Destilar lentamente recolhendo cerca de 50 mL de destilado c Em tubo de ensaio colocar 5 mL de solu o de cido cromotr pico a 0 5 e 1 mL de destilado e Coloca
37. aria mantido a 39 41 C durante 20 minutos c Esfriar o tubo de ensaio em gua corrente adicionar 6 gotas de solu o reagente e 2 gotas do catalisador Laborat rio de Rotina P gina 28 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio d Levar o tubo novamente ao banho maria a 39 41 C por 5 minutos e Repetir o mesmo procedimento acima descrito usando em lugar da amostra e em diferentes tubos 0 5 mL de leite cru e 0 5 mL de leite fervido Resultado Positivo colora o azul intensa leite cru Negativo colora o cinza leite pasteurizado Observa o A tonalidade do azul vai ficando tanto mais intensa quanto maior for a defici ncia de pasteuriza o Os tubos de ensaio e as rolhas de borracha devem encontrar se perfeitamente limpos e sem qualquer vest gio de detergentes em decorr ncia do processo de lavagem do material As rolhas de borracha em particular dever o ser fervidas durante 5 minutos depois de lavadas visando eliminar quaisquer res duos de fenol eventualmente presente em detergente ou outro material de limpeza As provas positivas devem ser repetidas cuidadosamente principalmente se forem usados reagentes com algum tempo de preparo A amostra dever sofrer cuidadosa agita o antes de ser analisada visando distribuir a gordura ou a camada de creme pelo l quido A retirada de uma al quota da amostra a partir da sua camada superior poder levar a resultado positivo ou suspeito
38. ata e hora da coleta b C digo de identifica o c Indica o de que a amostra proveniente de sub amostras quando aplic vel d Local de destino da amostra Coleta de amostras para envio a laborat rio terceirizado A coleta da amostra constitui a primeira fase para an lise do produto Dentro do conceito de que a an lise come a com a coleta da amostra este procedimento deve estar integrado com o laborat rio devendo haver sincronismo entre a remessa e a capacidade do laborat rio em executar as an lises As amostras para an lises f sico qu micas dever o ser enviadas separadas daquelas destinadas s an lises microbiol gicas Quando aplic vel s amostras devem ser enviadas em sua embalagem original para evitar modifica es em suas caracter sticas As amostras para an lises f sico qu micas dever o ser acondicionadas em recipientes limpos e ntegros sem perfura es rachaduras A quantidade m nima de amostra a ser encaminhada deve ser de 500 g ou 1000 ml no caso de leite flu do Ao utilizar um term metro deve se observar o limite de temperatura que o mesmo capaz de medir tomando se o cuidado de n o utiliz lo para medi o de temperaturas superiores temperatura m xima da escala Para medi o de amostra liquida a mesma deve ser homogeneizada permitindo desta forma uma perfeita distribui o de calor Para medi o de temperatura de um l quido em aquecimento colocar o bulbo do term metr
39. borat rio de Rotina P gina 54 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio C conforme NC n o conforme 3 Registro de gua de abastecimento Laborat rio de Rotina Data Ponto An lise Padr o Resultado Cor Odor ppm pH Hora Respons vel C conforme NC n o conforme Seguir procedimentos referenciados no PPHO relacionado a gua de abastecimento 4 Registro de an lise de soro Laborat rio de Rotina Data Queijo An lise Soro no corte Soro no ponto observa o Acidez Densidade Gordura pH Lote Respons vel 5 Registro de an lise de salmoura Laborat rio de Rotina Data Tanque An lise Soro no corte Soro no ponto observa o Temperatura Acidez Densidade B Teor de sal pH Respons vel Respons vel Laborat rio de Rotina P gina 55 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Comprova o metrol gica calibra o e aferi o A confirma o metrol gica o conjunto de opera es necess rias para assegurar se de que um dado equipamento ou instrumento de medi o est em condi es de conformidade com os requisitos para uso pretendido Geralmente incluem calibra o aferi o reparos etc A garantia de qualidade deve ser assegurada pela identifica
40. dos com um veiculo est ril e se eles precisarem ser esterilizados por fracionamento ou outros m todos tampe e esterilize os tubos dentro da autoclave ou esterilize os por ar seco antes de adicionar o veiculo Vidrarias B quer um recipiente de boca larga paredes laterais retas que t m um bico para derramarem l quidos S o teis na estimativa de volume de solu es na mistura de solu es ou aquecimento com o aux lio de tela de amianto N o serve para fazer medi es exatas e sim volumes aproximados Erlenmeyer tem fundo chato e lados inclinados que gradualmente se aproximam no di metro de modo que a abertura do topo semelhante a uma garrafa E usado para conter l quidos misturar solu es ou medir volumes n o exatos Bal o volum trico um frasco em forma de p ra usado para fazer medi es exatas Os bal es volum tricos s o fabricados de acordo com padr es r gidos para conter exatamente um certo volume a uma certa temperatura Tubos de ensaio Os tubos de ensaio tem uma grande variedade de tamanhos e formas e s o usados em muitas t cnicas de laborat rio Proveta Uma proveta um cilindro graduado de paredes lisas e retas com uma base estendida para dar estabilidade S o usadas para fazer medidas n o exatas Pipetas S o usadas no laborat rio para medir e transferir l quidos Os dois tipos b sicos de pipetas s o as volum tricas e as graduadas As volum tricas como o pr prio nome d
41. e o queijo fica excessivamente duro e podendo trincar Laborat rio de Rotina P gina 35 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 1 Amostragem Para coleta de amostra s o recomendados agitadores com rea suficiente para produzir uma turbul ncia adequada na salmoura Ap s misturar a salmoura pode se empregar um recipiente coletor com al a Os frascos para acondicionamento devem ser preenchidos completamente com volume adequado de amostra permitindo mistura antes da an lise As amostras devem ser acompanhadas por uma ficha assinada pelo respons vel contendo as seguintes informa es Local data e hora da coleta C digo de identifica o Local de destino da amostra 2 An lise de cloreto de s dio A determina o da densidade feita em fun o do principio de Arquimedes Todo corpo mergulhado em um fluido recebe um empuxo vertical de baixo para cima igual massa do fluido deslocado pelo corpo Assim a imers o do dens metro de massa constante no l quido provocar deslocamento de uma quantidade deste que ser em massa igual ao dens metro utilizado e em volume proporcional densidade da amostra Esse deslocamento far o liquido alcan ar um valor na escala graduada em graus Baum Material 1 Proveta capacidade de 250 mL 2 Funil de vidro 3 Aer metro de Baum 4 Term metro com escala 10 110 C intervalo de 1 C 5 Suporte para funil 6 Algod o hidr f
42. e Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio calor Quanto maior a gradua o alco lica da solu o de alizarol mais rigoroso o teste e a sele o Material 1 Solu o de alizarol a 72 GL 2 Tubos de ensaio 3 Pipeta graduada capacidade de 2 mL 4 Suporte para tubos de ensaio T cnica a Transferir para um tubo de ensaio partes iguais 2 mL de leite e solu o de alizarol a 72 GL e misturar cuidadosamente Resultado a Leite normal colora o r sea salm o e sem grumos o leite resiste ao processo de pasteuriza o b Leite em processo de acidifica o colora o r sea salm o com grumos o leite inst vel n o resistindo ao processo de pasteuriza o c Leite cido colora o amarela leite que possivelmente n o ir resistir ao processo de pasteuriza o ou aquecimento d Leite alcalino ou suspeita com gua colora o arroxeada ou violeta pode ser um indicativo da presen a de gua leite origin rio de vacas com mamite ou leite adicionado de redutores como hidr xido de s dio Embora possa resistir ao processo de pasteuriza o pode estar com sua composi o alterada consequentemente alterando o processo tecnol gico ou produto final 2 4 Teste de coc o E um teste simples que visa testar a resist ncia do leite quando submetido ao aquecimento A prote na do leite tende a desestabilizar quando submetida ao calor em fun o do efeito do desequil brio salino
43. e leite com aux lio da pipeta volum trica b Adicionar 3 a 5 gotas da fenolftale na c Titular com a solu o Dornic at viragem que se reconhece pela altera o da cor branca para r seo claro e interpretar resultado Resultado Cada 0 1 mL de solu o Dornic gasto na titula o corresponde a 1 D Cada 1 D corresponde a 0 01 m v ou 0 1 g litro de cido l tico Ex 16 D graus Dornic corresponde a 1 6 gramas de cido l tico por litro de leite Par metros de acidez Leite normal 15 a 18 D Leite cido acima de 18 D Fermento l tico 80 a 90 D Soro ap s o corte 11 a 13 D Agua n o possui acidez Soro de massa de mussarela ao filar 60 a 65 D Laborat rio de Rotina P gina 7 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Coment rios A acidez do leite pode variar em fun o de in meros fatores como por exemplo pela prolifera o bacteriana fermenta o da lactose devido a defici ncia de refrigera o est gio de lacta o o colostro possui acidez mais elevada sa de do animal mamite abaixa a acidez do leite fraudes por aguagem e neutralizantes 3 Densidade Um litro de leite temperatura de 15 C dever conter o peso de 1028 a 1032 gramas Material 1 Proveta graduada de 250 mL 2 Termolactodens metro T cnica gt a Transferir cerca de 250 mL do leite para proveta lentamente evitando forma o de espuma preferencialmente a temperatura de 1
44. e por adi o de gua afeta diretamente sua composi o ocasionando perda do valor nutricional aumento em custos de transportes transporta se gua como leite queda de rendimento e in meros fatores relacionados mat ria prima de baixa qualidade A determina o do ponto de congelamento com consequente avalia o da qualidade do leite a metodologia usual e oficial para monitoramento desta qualidade e detec o de fraude por aguagem Para medi o do ponto criosc pico do leite utiliza se criosc pio eletr nico Para opera o do aparelho devem se seguir as instru es do fabricante O procedimento empregado nos modelos usuais de criosc pios preconiza o acionamento do bot o de opera o que far com que o cabe ote abaixe empurrando o tubo contendo a amostra na solu o refrigerante glicerina gua destilada e lcool et lico na propor o de 1 1 2 iniciando o processo de super resfriamento Quando o mostrador atingir aproximadamente 3 C 3000 a haste do vibrador causar uma intensa agita o da amostra liberando o calor de fus o e a temperatura subir at o plateau permitindo a leitura do ponto de congelamento Material a Criosc pio eletr nico ligado a rede el trica estabilizada composto de banho de refrigera o controlado por termostato sonda termost tica com circuito associado e leitor O agitador para amostra dever ter uma amplitude de vibra o lateral e aproximadamente 1 5 mm se
45. ensidade e do teor de gordura de uma amostra com utiliza o do DISCO DE ACKERMANN ae BH F T cnica Es a Girar o disco firmando pelo pino central fazendo coincidir a densiaage a 15 U com a gordura lida nas escalas respectivas b Fazer a leitura na escala exterior extrato seco indicada pela seta do disco Leitura direta como de extrato seco total do leite 6 Extrato Seco Desengordurado ESD O extrato seco desengordurado refere se parte s lida do leite nos quais est o presentes as prote nas lactose sais minerais e tra os excluindo a gordura O extrato seco desengordurado obtido pela diferen a do extrato seco total menos a gordura Ex Leite com 11 8 de EST e 3 5 de gordura 8 3 de ESD 7 Determina o do pH Atrav s da determina o do pH potencial hidrogeni nico poss vel avaliar o grau de fermenta o do leite ou produtos l cteos consequentemente as condi es cido b sicas dos mesmos Material 1 pHmetro port til ou de bancada 2 Term metro de merc rio 10 a 110 C Becker pl stico de 50 mL Becker pl stico de 100 mL Pisseta de 500 mL Papel absorvente Eletrodo para s lidos para medi o de queijos Eletrodo para l quidos para medi o de leite e gua Agua destilada 10 Solu o tamp o pH 7 00 11 Solu o tamp o pH 4 00 12 KCL cloreto de pot ssio 3M T cnica Ap s ligar o aparelho estabiliz lo e seguir as instru
46. er numa toalha umedecida colocando o bulbo maior na palma da m o de forma tal que o dedo polegar exer a press o sobre a tampa impedindo sua proje o e agitar at completa dissolu o do co gulo invertendo algumas vezes com cuidado f Colocar os butir metros na centrifuga balanceando o lado oposto com outro butir metro o qual pode ser fazer simultaneamente outra determina o ou utilizar um butir metro carregado com gua Centrifugar por 4 a 5 minutos a 1200 rpm g Retire deixe em banho maria 65 C por 2 3 minutos e fa a a leitura imediatamente pela coluna transparente de gordura separada Resultado direto de gordura Coment rios A amostragem correta do leite para an lise de gordura de grande import ncia na determina o do resultado final devendo ser representativa e cuidadosamente aplicada 5 Extrato Seco Total EST M todo por Instrumento Disco de Ackermann Os s lidos totais ou extrato seco total do leite constituem a somat ria de todos os componentes do mesmo excluindo a gua A utiliza o do Disco de Ackermann constitui um m todo simples pr tico e preciso a ser utilizado em laborat rios de rotina constituindo o m todo escolhido para o dia a dia de uma f brica de queijos Laborat rio de Rotina P gina 9 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Para aplica o desta metodologia poss vel a determina o do EST extrato seco total por meio da d
47. fenolftale na a 1 e titular com a solu o de hidr xido de s dio 0 1 N at aparecimento de colora o r sea persistente por aproximadamente 30 segundos C lculos de cido l tico V x f x 0 9 m Onde V volume de solu o de hidr xido de s dio 0 1 N gasto na titula o em mL f fator de corre o da solu o de hidr xido de s dio 0 1 N m massa da amostra em gramas Observa o Para expressar o resultado em graus Dornic multiplicar a de cido l tico por 100 Laborat rio de Rotina P gina 32 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 5 Gordura m todo K hler Material Butir metro de K hler para creme de leite Estante para butir metros Pipeta volum trica de 5 mL Pipeta volum trica de 5 mL especial para creme de leite Dosador volum trico para cido sulf rico de 10 mL Dosador volum trico para lcool isoam lico de 1 mL Centrifuga para 4 ou 8 provas Acido sulf rico densidade 1 820 a 1 825 g L Alcool isoam lico R reagente 10 Banho maria regulado para 65 C 11 Frasco de gua destilada temperatura de 40 a 50 C 12 Term metro T cnica a Transferir diretamente para o butir metro de K hler 10 mL de cido sulf rico b Adicionar lentamente 5 mL de amostra com aux lio de uma pipeta volum trica mantendo a pipeta na borda do butir metro c Acrescentar 5 mL de gua destilada a 40 50 C com auxilio de outra pipeta passand
48. idade Baum tamb m pode ser dada pela aplica o da seguinte f rmula D 144 _onde n leitura em graus Baum apresentada pela solu o 144 n Ex Qual a densidade de uma solu o que ao ser analisada com o aer metro de Baum forneceu uma leitura de 12 B D 144 144 n 144 144 12 1 0909 g ml Laborat rio de Rotina P gina 37 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 3 pH Como regra geral o pH da salmoura deve ser ajustado ao pH do queijo ou seja na faixa de 5 0 5 3 e acidez Dornic em torno de 15 a 30 D v pH baixo acidez elevada aproxima se do ponto isoel trico da case na pH 4 6 esta precipta se na casca aumentando a perda de gua pelo queijo ao mesmo tempo em que reduzida a velocidade de absor o pelo sal y pH alto da salmoura acidez baixa pode favorecer a putrefa o da salmoura e retardar a salga pois a sa da de soro do queijo para a salmoura maior Material 1 pHmetro port til ou de bancada Term metro de merc rio 10 a 110 C Algod o hidr filo Becker pl stico de 100 mL Pisseta de 500 mL Papel absorvente Suporte para funil e funil de vidro Eletrodo para liquidos para medi o de leite e gua Agua destilada 10 Solu o tamp o pH 7 00 11 Solu o tamp o pH 4 00 12 KCL cloreto de pot ssio 3M T cnica a Ap s ligar o aparelho estabiliz lo e seguir as instru es de calibra
49. ileno usando como indicador a resazurina com o objetivo de estimar a qualidade microbiol gica do leite cru Esta subst ncia apresenta se com colora o azul em leite dito normal pH de 6 6 a 6 8 reduzida para resorufina de colora o rosa pelo abaixamento do potencial de oxi redu o do leite A mudan a de colora o de azul para rosa efetuada atrav s de algumas varia es de cores azul para roxo para lavanda para rosa Ap s a redu o a resorufina transformada em hidro resorufina incolor Material 1 Tubos de ensaios esterilizados c rosca 16x150 mm 2 Estante p tubos de ensaios Pipeta graduada 10 mL esterilizada Pipeta graduada de 1 mL Term metro 10 110 C Banho maria regulado para 37 C Solu o de resazurina T cnica a Adicionar 10 mL de leite em um tubo de ensaio e 1 mL de resazurina b Aquecer os tubos em banho maria regulado para 37 C c Inverter os tubos 3 vezes para misturar o corante e distribuir a gordura d Marcar o fim da opera o como o hor rio inicial e Incubar a 37 C Resultado Ap s 60 minutos retirar os tubos de ensaio do banho maria ou estufa e fazer a classifica o Laborat rio de Rotina P gina 17 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Leite Azul timo Roxo bom Lavanda regular Rosa ruim Branco p ssimo 13 Sangue A determina o da presen a de sangue em leite
50. ilizar Isso evitar que o material a ser medido seja incidentalmente aspirado para dentro da boca Limpeza de buretas 1 Remova a torneira ou ponteira de borracha e lave a bureta com detergente e gua 2 Enx g e com gua corrente at que a sujeira seja removida Enx g e ent o com gua destilada e seque 3 Lave a torneira ou ponteira da borracha separadamente Antes de colocar a torneira de volta na bureta lubrifique a junta com um lubrificante apropriado Use somente uma pequena quantidade de lubrificante 4 Buretas devem estar cobertas quando fora do uso Laborat rio de Rotina P gina 52 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Limpeza de tubos de ensaio usados em microbiologia 1 Tubos de ensaio j usados material microbiol gico devem ser esterilizados antes da limpeza O melhor m todo geral para esterilizar culturas autoclavar a 121 C por 30 minutos press o de 15 libras pol Ve culos que se solidificam por resfriamento devem ser retirados enquanto os tubos estiverem quentes Depois que os tubos forem esvaziados escove os com detergente e gua enx g e bem com gua corrente primeira e em seguida com gua destilada colocando os em um cesto para secagem 2 Se os tubos forem utilizados com ve culos que s o esterilizados por autoclavagem n o os tampe at que os ve culos sejam adicionados Os ve culos e os tubos s o est o autoclavados juntos 3 Se os tubos forem ser utiliza
51. ilo T cnica a Transferir para uma proveta de 250 mL aproximadamente 250 mL de salmoura filtrada em algod o exatamente a 20 C b Introduzir cuidadosamente o aer metro de Baum c Ap s a estabiliza o anotar a leitura em graus Baum Resultado Calcular o percentual m v de cloreto de s dio dividindo a leitura em B graus Baum por 0 9 Concentra o de sal da salmoura A concentra o de sal influi notadamente na qualidade final do queijo regulando a quantidade de sal que este pode absorver Quanto maior o teor de sal na salmoura mais r pido a absor o de sal pelo queijo n o linearmente Dobrando se a concentra o de sal na salmoura n o implica que o queijo vai absorver sal duas vezes mais r pido Laborat rio de Rotina P gina 36 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio A concentra o de sal ideal de 20 medida da de sal na salmoura Salmoura nova Utiliza se o Aer metro de Baum para gradua o da concentra o de salmoura Tabela correspondente para o Aer metro de Baum Gradua o no Densidade a temperatura de sal equivalente Aer metro de 20 C 1 007 1 014 1 022 1 029 1 036 1 044 1 052 1 060 1 067 IES 1 83 1 091 1 100 1 108 1 116 1 125 1 134 1 143 1 152 1 163 1 171 1 180 1 190 1 199 1 209 A dens
52. ivo para a car tendendo ao preto Laborat rio de Rotina P gina 26 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Pesquisa de Enzimas A verifica o da atividade enzim tica til na avalia o do tratamento t rmico sofrido pelo leite e investigada mediante a um substrato especifico da enzima que se quer testar em condi es ideais para que ocorra a rea o A presen a de colora o ou de um indicador que apresente rea o por cor com os produtos de degrada o permite identificar a atividade enzim tica 1 Fosfatase alcalina kit comercial A fosfatase alcalina uma enzima presente naturalmente no leite Em leite pasteurizado a fosfatase alcalina n o deve estar presente por n o resistir ao calor da pasteuriza o Material 1 Banho maria a 37 C 2 Tubos de ensaio 13 x 100 3 Pipeta graduada capacidade 10 mL 4 Pipeta graduada capacidade 1 mL 5 Suporte para tubos de ensaio 6 Kit Fosfatase alcalina Diasys Antes do procedimento deve se preparar o reativo de trabalho conforme as instru es do teste Este reativo deve ser mantido sob refrigera o por um per odo n o superior a 30 dias Preparo do reativo do teste Diasys misturar 4 mL do reativo R1 com 1 mL do reativo R2 Armazenar sob refrigera o T cnica a Pipetar para um tubo de ensaio 1 mL do reativo de trabalho e 0 1 mL 2 gotas do leite pasteurizado b Misturar e deixar em repouso por 3 minutos a 37
53. iz mede um nico volume preciso As graduadas medem mais de um volume precisos Placa de Petri Para acondicionar meios de cultura em bacteriologia Laborat rio de Rotina P gina 53 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Registros e resultados de an lises Os registros constituem parte da garantia e valida o dos processos executados conferindo credibilidade demonstrando a efetividade e efic cia do sistema de controle de seguran a da mat ria prima e produto processado Cada an lise realizada deve ser anotada pelo respons vel a qual executou a devidamente datada e assinada Todos os resultados e anota es devem estar devidamente leg veis permanentes e exatos dispon veis por um ano e quando solicitados Exemplo de registros 1 Registro de an lise de leite recebido Laborat rio de Rotina Produtor An lise Padr o Resultado Temperatura Alizarol Acidez ndice criosc pio Densidade Gordura EST ESD Alcalinos Per xido Data Respons vel C conforme NC n o conforme 2 Registro de an lise de leite pasteurizado em processamento Laborat rio de Rotina Lote Produto An lise Padr o Resultado Temperatura Alizarol Acidez ndice criosc pio Densidade Gordura EST ESD Alcalinos Per xido Data Respons vel La
54. l de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Alguns aparelhos possuem o eletrodo para medi o da temperatura permitindo desta forma a convers o autom tica leitura lida temperatura da amostra Resultado E expresso em unidades de pH com duas casas decimais Em pH 7 00 neutro acima alcalino e abaixo o meio cido Soro no corte 6 6 a 6 7 Queijo no dia seguinte 5 00 a 5 20 Laborat rio de Rotina P gina 48 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Limpeza do material de laborat rio Os procedimentos corretos de um bom laborat rio exigem vidraria limpa pois qualquer trabalho por mais cuidadoso que seja executado resultar em erros ao utilizar vidraria suja Em todos os casos a vidraria deve estar fisicamente limpa na maioria dos casos deve estar quimicamente limpa e em muitos casos deve estar bacteriologicamente limpa e esterilizada Toda vidraria deve estar absolutamente livre de gorduras O crit rio mais seguro de limpeza a lavagem uniforme das superf cies com gua destilada Isto especialmente importante em vidraria utilizada para medidas de volumes de l quidos Gordura ou outro tipo de material contaminante evitam que as paredes do vidro fiquem uniformemente molhadas Isto por sua vez altera o volume residual afetando volume quantificado Ao utilizar pipetas e buretas o menisco sofrer distor es com falhas nos ajustes A presen a de pequena quantidade de limpeza de impurezas pode t
55. lar consequentemente causar transtornos e perdas econ micas na produ o b Coagula o fina leite com pequena resist ncia t rmica igualmente ao leite coagulado poder causar danos se pasteurizado c Sem coagula o leite normal poder ser submetido a processo de pasteuriza o e fervura como na produ o de doce de leite Como neutralizar o lcool et lico Transferir o volume de lcool et lico desejado para um b quer Adicionar 5 gotas de solu o alco lica de fenolftale na m v a 1 Agitar lentamente com um bast o de vidro N o ocorrendo altera o de cor gotejar solu o de hidr xido de s dio 1 N ou 0 1 N at leve colora o rosada Agitar lentamente com o bast o Desaparecendo a cor continuar com a adi o de solu o de hidr xido de s dio 0 1 N at leve colora o r sea persistente 2 3 Teste de alizarol teste de estabilidade Baseia se no mesmo princ pio do teste do lcool na presen a de um indicador de pH alizarina Permite estimar o perfil de acidez do leite auxiliando na diferencia o entre o desequil brio salino e a acidez excessiva Com o teste de alizarol podemos verificar se o leite est cido ou alcalino pela presen a do indicador alizarina O leite testado nos fornece a seguran a se o mesmo poder ou n o ser pasteurizado aquecido pois o leite cido tende a talhar quando submetido ao Laborat rio de Rotina P gina 5 Manual d
56. lise de gordura do leite baseia se na separa o e quantifica o da gordura pelo emprego do cido sulf rico e lcool isoamilico O cido dissolve as prote nas que se encontram ligadas gordura diminuindo a viscosidade do meio aumentando a densidade da fase aquosa e fundindo a Laborat rio de Rotina P gina 8 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio gordura devido libera o de calor proveniente da rea o o que favorece a separa o da gordura pelo extrator lcool isoamilico A leitura feita na escala graduada do butir metro ap s centrifuga o e imers o em banho maria Material 1 Butir metro de Gerber para leite Estante para butir metros Pipeta volum trica de 11 mL Dosador volum trico para cido sulf rico de 10 mL Dosador volum trico para lcool isoam lico de 1 mL Centrifuga para 4 ou 8 provas Acido sulf rico dens 1 820 a 1 825 15 C Alcool isoam lico R dens 0 810 15 C T cnica a Transferir diretamente para o butir metro de Gerber 10 mL de cido sulf rico b Adicionar lentamente 11 mL de amostra com aux lio de uma pipeta volum trica inclinando a pipeta e deixando fluir pelas paredes internas do butir metro evitando a queima do leite ao entrar em contato com o cido o que ir dificultar a leitura c Acrescentar 1 mL do lcool isoam lico d Limpar o gargalho com papel absorvente e vedar com rolha pr pria e Envolv
57. m tocar nas paredes do tubo e sonda termost tica A leitura dever ser realizada assim que a temperatura da amostra ap s o congelamento estabilize com uma varia o de 0 001 C por no m nimo 20 segundos b Tubos de ensaio apresentando 50 8 0 1 mm de comprimento 16 0 1 mm de di metro externo e 13 5 0 1 mm de di metro interno A espessura da parede dever variar menos que 0 1 mm Os tubos dever o receber uma marca 29 8 mm abaixo da borda 21 mm acima da base a fim de indicar um volume de leite igual a2 5 0 1 mL Convers o entre as escalas C 0 9656 x H e H 1 0356 x C Laborat rio de Rotina P gina 12 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio 9 An lise de inibidores Visa avaliar poss veis res duos de inibidores principalmente antibi ticos na mat ria prima oriundos da produ o leiteira capazes de causar danos sa de do consumidor e alterar o processo fermenta o que ocorre na produ o de queijos e leites fermentados como iogurtes Atualmente existem in meros testes para determina o de res duos antibi ticos em leites com amplitudes diferenciadas de detec o assim como o antibi tico presente Nossa op o foi pelo teste Devoltest Material 1 Banho maria a 65 C 2 Banho maria c controle de aquecimento 3 Agitador de tubos vortex 4 Pipeta autom tica 0 1 mL 5 Estante p tubos Devoltest 6 Kit de an lise 7 Term metro de merc rio 10 a
58. mesmo O conservante possui a o bactericida que atua diretamente sobre a flora presente mascarando a qualidade e podendo finalmente causar dist rbios ao consumidor pela ingest o de res duos qu micos que n o devem estar presentes no produto final ou leite de consumo 1 Per xido de Hidrog nio A detec o de per xido de hidrog nio no leite se d pela forma o de colora o salm o em presen a de guaiacol A enzima peroxidase naturalmente presente no leite degrada o per xido de hidrog nio oxidando o indicador tetraguaiacol respons vel pela colora o caracter stica O teste apresenta melhor desempenho em amostras de leite cru pelo fato da enzima apresentar se em maior quantidade em amostras que n o sofreram tratamento t rmico Material 1 Guaiacol 1 v v alco lico 2 Tubos de ensaio 3 Pipeta graduada capacidade 2 mL 4 Pipeta graduada capacidade 10 mL 5 Suporte para tubos de ensaio T cnica a Misturar em um tubo de ensaio 10 mL de leite cru e 2 mL de guaiacol 1 SR e agitar Resultado Colora o salm o positivo para per xido 2 Formol m todo A O m todo baseado na rea o de Leach a qual emprega cloreto f rrico para detec o de formol evidenciando se pela forma o de colora o viol cea em propor o de 1 200 at 1 20 000 Material 1 Acido Cloridrico p a 2 Cloreto F rrico 2 5 m v SR Pipeta graduada capacidade 1 mL Pipeta graduada c
59. nservantes recomendados pela norma FIL 5OB 1985 s o bicromato de pot ssio 1 g litro de leite Cloreto de merc rio 0 2 g litro de leite formalde do 1 5 mL litro de leite Laborat rio de Rotina P gina 3 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Material para amostragem de leite 1 Frasco conservador de amostras 250 mL rolha esmerilhada boca larga transparente ou semelhante 2 B quer de 300 500 mL 3 Banho maria 40 50 C 4 Term metro escala 10 a 110 C Agitador Deve estar limpo e seco ter rea suficiente para agitar o produto e peso adequado para moviment lo rapidamente no leite Caneca coletora Deve possuir cabo m nimo de 15cm com no m nimo 50 mL de capacidade e material de inox Agitador com cabo conforme sua utiliza o 1 mt para lat o e 1 8 mt para tanque isot rmico T cnica para lat es tanques isot rmicos a Homogeneize o leite com agitador pelo tempo de 30 segundos b Me a a temperatura e registre b Coletar com o b quer cerca de 500 mL c Para execu o das an lises a amostra dever ser aquecida em banho maria regulando a para 15 a 20 C com transvases para o frasco conservador de amostras e vice versa evitando a incorpora o de ar T cnica sacos pl sticos a Ponha o saco pl stico no banho maria e quando em vez pressione com os dedos para homogeneizar b Quando a temperatura estiver entre 15 20 C coloque no p
60. o A presen a de alcalinizantes na amostra revelada pela a o do cido ros lico usado como indicador Material 1 Pipetas graduadas de 5 e 10 mL 2 Tubo de ensaio sem rosca 20 x 200 mm 3 Estante para tubo de ensaio 4 lcool et lico p a neutralizado 5 Solu o de cido ros lico a 2 m v em lcool et lico neutralizado T cnica a Em tubo de ensaio colocar 5 mL de leite e adicionar 10 mL de lcool et lico neutralizado b Agitar e adicionar 2 gotas de solu o de cido ros lico a 2 c Fazer uma prova em branco com lcool et lico e solu o de cido ros lico a 2 e comparar as cores Resultado Positivo colora o vermelho carmim 2 Hidr xido de S dio Material 1 Contas gotas 2 Pipeta graduada de 5 mL 3 Tubo de ensaio sem rosca 20 x 200 mm 4 Estante para tubo de ensaio 5 Reagente azul de bromotimol Laborat rio de Rotina P gina 19 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Medir 5 mL de leite em tubo de ensaio e adicionar 4 gotas de azul de bromotimol Resultado Colora o esverdeada positivo para alcalinos Colora o amarela negativo i 3 Bicarbonato de S dio Material Papel de filtro qualitativo Pipeta graduada de 5 mL e 10 mL Funil de vidro Becker de 50 mL Bast o de vidro Conta gotas Alcool absoluto Acido ros lico 1 T cnica a Medir 5 mL de leite b Medir 10 mL de lcool
61. o deixar a ponta bater na pia ou na torneira A maioria das quebras ocorre por esta raz o 2 Secar os tubos de ensaios frascos e outros materiais mantendo os suspensos atrav s de ganchos ou colocando os sobre cestos com a boca para baixo e deixando os secar ao ar ou ainda colocando os em cestos para secarem estufa 5 A temperatura de secagem n o deve exceder a 40 C Antes de se colocar o material de vidro no cesto cubra a base deste com uma folha de papel toalha absorvente limpa e dobrada Isso evitar que res duos de sujeira fiquem na boca dos tubos 3 Secar as buretas pipetas e provetas deixando as em p sobre um papel toalha dobrada Proteja o material de vidro limpo contra poeira A melhor maneira de fazer isto tap lo com um chuma o de algod o rolha de corti a colocando um Laborat rio de Rotina P gina 51 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio peda o de papel grosso ao redor da tampa ou colocando o material em um arm rio prova de poeira 4 Quando for armazenar as pe as coloque as em suportes desenhados especialmente para elas Assegure se de que as pe as n o se toquem para evitar choques mec nicos 5 N o armazene solu es alcalinas em frascos volum tricos ou buretas Tampos e torneiras podem emperrar Limpeza de pipetas 1 Coloque as pipetas pontas para baixo em uma cuba ou jarra alta imediatamente ap s o uso N o jogue na cuba ou na jarra para n o lascar ou quebrar
62. o aproximadamente no centro do recipiente que cont m o l quido para que se tenha uma medida correta nas extremidades ou no fundo do recipiente a distribui o do calor desigual Laborat rio de Rotina P gina 2 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Quando o peso ou volume unit rio n o atingir o m nimo estabelecido dever o ser colhidas tantas unidades necess rias para se obten o do quantitativo Neste caso cuidados especiais ser o necess rios para que todas as unidades que perten am ao mesmo lote partida e data de fabrica o a fim de serem mantidas as caracter sticas de homogeneidade da amostra Em casos especiais a amostra poder ser acompanhada de relat rio adicional contendo informa es que possam auxiliar o analista na condu o do seu trabalho As amostras dever o ser acompanhadas de indica o precisa dos tipos de an lises a serem realizadas Depois de colhidas as amostras dever o ser acondicionadas adequadamente para evitar qualquer altera o nas mesmas at sua chegada ao laborat rio Assim as amostras de produtos facilmente perec veis dever o ser acondicionadas em recipientes isot rmicos embaladas em sacos pl sticos e acompanhadas de gelo ou outra subst ncia refrigerante cuidando se sempre para que n o haja contatos desses com a amostra Provid ncias especiais dever o ser tomadas para que o tempo decorrido entre a colheita da amostra e sua chegada ao laborat rio sej
63. o pela primeira d Medir e adicionar 1 mL do lcool isoam lico R d Limpar o gargalho com papel absorvente e vedar com rolha pr pria e Envolva numa toalha e agite vigorosamente f Centrifugar por 4 a 5 minutos a 1200 1400 rpm g Retire deixe em banho maria 65 C por 2 3 minutos e fa a a leitura imediatamente Resultado direto de gordura 6 Gordura utiliza o de butir metro de leite Material Butir metro Gerber para leite com rolhas Estante para butir metros Pipeta graduada de 5 mL Pipeta graduada de 10 mL especial para creme de leite Dosador volum trico para cido sulf rico de 10 mL Dosador volum trico para lcool isoam lico de 1 mL Centrifuga para 4 ou 8 provas Acido sulf rico densidade 1605 g L 20 C Alcool isoam lico densidade 810 g L 20 C 10 Banho maria regulado para 65 C 11 Frasco de gua destilada temperatura de 40 a 50 C 12 Term metro 13 Bast o de vidro 14 Balan a anal tica 15 B quer de 50 mL Laborat rio de Rotina P gina 33 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio T cnica a Pesar exatamente cerca de 1 g de amostra homogeneizada em um b quer de 50 mL creme de leite adicionar 10 mL da solu o de cido sulf rico Aquecer a 60 C em ambos os casos e homogeneizar com bast o de vidro b Transferir cuidadosamente para butir metro com aux lio de bast o de vidro Lavar o b quer 2 ou 3 vezes com 3 a 4 mL da solu
64. onalidade amarelada n o leitosa c Odor caracter stico d Sabor caracter stico e Momentos da coleta soro do corte e soro do ponto 2 Amostragem de soro 1 Frasco conservador de amostras 250 ml rolha esmerilhada boca larga transparente ou semelhante 2 B quer de 300 500 ml 3 Banho maria 40 50 C 4 Term metro escala 10 a 110 C As coletas devem ser implementadas nas fases citadas corte ponto e prensa conforme a situa o e o produto em quest o Por exemplo interessante a determina o do pH da massa para queijo Parmes o no momento da prensagem 3 An lise de acidez pelo m todo Dornic O teste de acidez pelo m todo Dornic visa determina o quantitativa da acidez do leite e soro com utiliza o do reagente de Dornic com indicador fenolftale na Material 1 Pipeta volum trica capacidade de 10 mL 2 Erlenmeyer de 125 mL 3 Aced metro de Dornic 4 Solu o Dornic Hidr xido de S dio 0 111 N 9 5 Fenolftale na 1 m v alco lica neutralizada SI T cnica a Transferir para o erlenmeyer 10 mL de soro com auxilio da pipeta volum trica b Adicionar 3 a 5 gotas da fenolftale na c Titular com a solu o Dornic at viragem que se reconhece pela altera o da cor para r sea clara e interpretar resultado Laborat rio de Rotina P gina 44 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Resultado Cada 0 1 mL de solu o Dornic gasto na titula o
65. orta saco comum de leite c Abra o saco com tesoura e verta no b quer a quantidade necess ria 2 Sele o de leite triagem 2 1 Caracter sticas sensoriais a Aspecto l quido opaco b Cor branca ou levemente amarelada c Odor caracter stico d Sabor caracter stico Laborat rio de Rotina P gina 4 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio e Temperatura no momento da coleta m ximo de 7 C Nota o teste sensorial pelo quesito sabor n o deve ser adotado como procedimento de sele o de leite uma vez que o leite cru tamb m ve culo de bact rias patog nicas 2 2 Teste de lcool teste de estabilidade Possui a finalidade de estimar a estabilidade do leite em presen a de solu o alco lica cuja gradua o empregada proporcional ao rigor requerido no teste A coagula o ocorre por efeito da elevada acidez combinada instabilidade salina e consequente desestabiliza o das micelas de prote nas pela exposi o ao lcool Material 1 Solu o reagente de lcool et lico neutralizado a 72 GL 2 Tubos de ensaio 3 Pipeta graduada capacidade de 2 mL 4 Suporte para tubos de ensaio T cnica a Transferir para um tubo de ensaio partes iguais 2 mL de leite e solu o de lcool et lico a 72 GL e misturar cuidadosamente Resultado a Coagula o leite sem resist ncia t rmica n o poder ser pasteurizado ou aquecido pois ir coagu
66. r psicrofilicas com temperatura tima de 3 a 15 C Consequ ncias tecnol gicas sabor desagrad vel nos produtos finais como creme coalhada queijos Sabor de malte em leite concentrado com a car Sabor amargo ou de batata em manteiga e queijo Sabor de ran o em manteiga e queijo gosto ardido Origem dos germes defici ncia de higiene e sanitiza o na produ o e p s produ o leiteira Aspecto da coalhada alveolar soro no fundo do tubo esponja retra da Flora presente bact rias anaer bias do tipo Clostridium com temperatura tima para desenvolvimento na faixa de 30 a 37 C Consequ ncias tecnol gicas estufamento tardio putrefa o branca em massas cozidas ou prensadas Altera o em leites longa vida e queijos fundidos Origem dos germes silagens deficientes polpas de frutas e fezes Ressalvas na utiliza o deste leite para elabora o de queijos com longa matura o Aspecto da coalhada bolhas na coalhada odor desagrad vel aspecto ligeiramente esponjoso Flora presente associa o da flora l tica e flora coliforme e aerogenes com temperatura tima de desenvolvimento de 20 a 37 C Enterococcus Staphilococcus Micrococcus com temperatura tima de desenvolvimento na faixa de 30 a 37 C Consequ ncias tecnol gicas sabor desagrad vel em queijos estufamento precoce presen a de g s nos produtos alcaliniza o nos leites sabor de queijos na m
67. r seo salm o leite pasteurizado na faixa correta Colora o branca leite superaquecido al m da temperatura de pasteuriza o E Laborat rio de Rotina P gina 30 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio An lises para creme de leite Creme de Leite 1 Caracter sticas sensoriais a Aspecto cremoso b Cor branco creme c Odor caracter stico d Sabor caracter stico 2 Colheita e preparo da amostra Material 1 Frasco conservador de amostras 250 mL rolha esmerilhada boca larga transparente ou semelhante 2 Erlenmeyer de 250 mL 3 Banho maria 40 50 C 4 Term metro escala 10 a 110 C T cnica a Colha amostra com t cnica adequada homogeneizando pelo tempo de 30 segundos b Colher com o b quer cerca de 100 mL c Aque a em banho maria a 40 50 C agitando discretamente a cada 3 minutos at que a temperatura esteja a 30 35 C utilizada em todas as an lises d Transfira para o frasco conservador de amostras Notas 1 A acidez elevada percept vel ao exame sensorial olfato 2 A cada an lise a amostra deve ser homogeneizada com transvases do frasco conservador para o erlenmeyer e vice versa 3 Acidez titul vel m todo Dornic Material Tubos de ensaio Pipeta volum trica capacidade de 5 mL e 20 mL Erlenmeyer de 125 mL Aced metro de Dornic Solu o Dornic hidr xido de s dio 0 111 N 9 Fenolftale na 1
68. r em banho maria durante 15 minutos Resultado Positivo colora o viol cea Para obter um testemunho da prova positiva fazer um teste com a solu o de refer ncia Laborat rio de Rotina P gina 23 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Pesquisa de Reconstituintes A fraude por adi o de gua altera a composi o f sico qu mica do leite O adulterante ou reconstituinte visa mascarar ndices de crioscopia densidade refra o atribuindo ao leite uma caracter stica normal 1 Amido A presen a de amido no leite verificada pelo desenvolvimento de colora o azulada ap s aquecimento e adi o de solu o de iodo iodeto de pot ssio lugol a amostra O aquecimento promove a abertura da cadeia heliocoidal da mol cula do amido permitindo a adsor o do iodo com o desenvolvimento da colora o caracter stica ap s resfriamento Material 1 Solu o de lugol Tubos de ensaio Pipeta graduada capacidade 1 mL conta gotas Pipeta graduada capacidade 5 mL Suporte para tubos de ensaio Lamparina lcool ou bico de Bunsen Pin a de madeira T cnica a Misturar em um tubo de ensaio 5 mL de leite b Ferver c Resfriar em gua corrente d Acrescentar 5 gotas de solu o de lugol Resultado Colora o azul positivo para amidos p Preparo da solu o de lugol a Pesar em um Becker de 500 mL 100 gramas de iodeto de pot ssio p a e 50 g de iodo p a
69. se deve ser precedido ou executado em paralelo com o teste de inibidor para antibi ticos Material 1 Tubos de ensaios esterilizados c rosca 16x150 mm Estante p tubos de ensaios Pipeta graduada 10 mL esterilizada Pipeta graduada de 1 mL Term metro 10 110 C Banho maria regulado para 37 C Solu o de azul de metileno T cnica a Adicionar 10 mL de leite em um tubo de ensaio b Aquecer os tubos em banho maria regulado para 37 C c Adicional 1 mL de azul de metileno e inverter os tubos 3 vezes para misturar o corante e distribuir a gordura d Marcar o fim da opera o como o hor rio inicial Resultado a Fazer a 1 observa o ap s 30 minutos e as demais a cada 60 minutos A cada observa o os tubos que apresentarem redu o perda da cor de 80 dever o ser registrados b Ap s cada per odo de observa o 30 60 60 60 minutos os tubos devem ser invertidos lentamente uma nica vez e re incubados agita o violenta pode causar a incorpora o de oxig nio e oxida o do redutor Esta opera o de invers o visa redistribuir a gordura do leite que por ser mais leve tende a ascender superf cie carregando consigo microrganismos Classifica o Leite A min 5 30 horas Leite B min 3 30 horas Leite C min 1 30 horas Obs os tempos devem ser respeitados desde que o leite tenha dado inibidor negativo 11 Lactofermenta o A prova de lactofermenta o utili
70. somente quando estritamente necess rio 8 Ao lavar o recipiente pode se usar sab o detergente ou p de limpeza com ou sem abrasivo Detergentes comerciais para vidros podem ser Odd Minerva Limpol Rid A gua deve estar quente Para recipientes excepcionalmente sujos pode se utilizar p de limpeza com uma leve a o abrasiva dar resultados mais satisfat rios O abrasivo n o deve riscar o vidro Durante a lavagem todas as partes do vidro devem ser esfregadas com uma escova Isto significa que um jogo completo de escovas deve estar sempre m o escovas que sirvam em tubos de ensaio buretas funis frascos graduados Vidros riscados s o mais propensos a quebrar durante o uso Qualquer marca na superf cie uniforme do vidro um ponto de quebra em potencial especialmente nos casos de aquecimento do mesmo N o permita que cidos entrem em contato com recipientes rec m lavados antes de enxagu los muito bem e se certificar que o sab o ou detergente foi completamente removido Se isso acontecer uma camada de graxa poder se formar 9 A melhor maneira de remover gordura ferver com uma solu o fraca de carbonato de s dio Solu es alcalinas fortes n o podem ser usadas Laborat rio de Rotina P gina 50 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Lembre se sempre que muito importante remover toda e qualquer solu o na limpeza Enxaguamento 1 A remo o de todo e qualquer res duo de
71. tas 1 Todos os reagentes utilizados devem ser adquiridos de laborat rio confi vel acompanhados de sua correta rotulagem laudo de garantia ficha de seguran a 2 As vidrarias devem acompanhar de certificado 3 Equipamentos como estufa banho Maria e demais equipamentos do laborat rio de rotina devem possuir manual de instru es estarem devidamente instalados e funcionamento na ntegra A Laborat rio de Rotina P gina 57 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio REFER NCIAS BRASIL Minist rio da Agricultura Pecu ria e Abastecimento Secretaria da Defesa Agropecu ria Laborat rio Nacional de Refer ncia Animal Instru o Normativa 68 de 12 12 2006 M todos Anal ticos Oficiais F sico Qu micos para Controle de Leite e Produtos L cteos BRASIL Minist rio da Agricultura Pecu ria e Abastecimento Instru o Normativa n 51 de 18 de Setembro de 2002 Rodrigues Fernando Manual de Fabrica o de Queijos 2005 Laborat rio de Rotina P gina 58
72. tituem um procedimento de rotina a ser executado diariamente pela an lise de determina o do cloro livre ppm de cloro ativo e controle de pH em pontos mapeados e previamente definidos na ind stria A verifica o deve ser feita no decorrer da rotina e deve contemplar os pontos definidos pelo cronograma da empresa em hor rios alternados Torna se imperativo a reclora o da gua quando constados n veis de cloro residual livre abaixo dos padr es determinados pelas normas vigentes O resultado de n o conformidade deve desencadear a es para regulariza o do evento imediatamente uma vez que a gua um ponto cr tico de grande relev ncia em uma ind stria de latic nios Padr es legislativos de potabilidade da gua Portaria 36 de 19 de Janeiro de 1990 Minist rio da Sa de Resolu o conjunta SS MA n 1 de 26 de Agosto de 1997 PAR METRO LIMITES Tubidez Odor Cor pH Dureza total Acidez total Alcalinidade total Alcalinidade c ustica Oxig nio consumido Nitritos Cloretos Cloro residual Fluoretos Silicatos Sulfatos S lidos totais Cobre Chumbo Ferro Mangan s Zinco Fen is Contagem de aer bios mes filos Coliformes totais NMP 5 mg L Aus ncia 20 PYL Hazen 6 5 8 5 200 mg L 5 20 mg L 10 50 mg L Aus ncia 2 mg L Aus ncia 250 mg L 0 2 conc m nima 1 mg L Aus ncia 250 mg L 1000 mg L 3 mg L 0 1 mg L 0 3 mg L 0 1 mg L 5 mg L
73. va possibilidade de produzir resultados errados como por exemplo uso de balan a imprecisa Alguns fatores influenciam a determina o da frequ ncia de comprova o e os mais importantes s o tipo e equipamento recomenda o do fabricante dados de tend ncia conseguidos por registros de comprova es anteriores registro hist rico e assist ncia t cnica extens o e severidade de uso desgaste natural frequ ncia de verifica o cruzada com outros equipamentos de medi o em especial padr es de medi o frequ ncia e formalismo das calibra es em uso condi es ambientais do local de instala o exatid o pretendida da medi o consequ ncias de um valor medido incorretamente ser aceito como correto devido a defeito de equipamento e custo das comprova es A calibra o normalmente executada por empresa terceirizada ou institui es oficiais credenciados pelo INMETRO pertencentes a Rede Brasileira de Calibra o RBC as quais disp em de pessoal qualificado procedimentos adequados e padr es rastre veis aos padr es nacionais e ou internacionais O Laborat rio de Rotina P gina 56 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio INMETRO possui uma lista com todos os organismos credenciados e seus respectivos escopos de credenciamento Finalmente em qualquer situa o a ind stria dever dispor do respectivo certificado de calibra o arquivados e acess veis fiscaliza o oficial No
74. vo muito poderoso Laborat rio de Rotina P gina 49 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio Solu o de limpeza com cido cr mico Use dicromato de s dio ou pot ssio em p comercial ou PA Se o composto estiver na forma de cristais amassar com bast o at se tornar um p bem fino Para 20 gramas de p em um griffin de 1 litro adicione um pouco de gua suficiente para formar uma pasta grossa Lentamente adicione 300ml de concentrado comercial de cido sulf rico agitando bem Transfira o conte do para um recipiente de vidro com tampa Use a solu o sobrenadante clara A solu o de cido cr nico pode ser usada repetidamente at se tornar de cor esverdeada Material de descarte Res duos de limpeza com cido cr mico e outros res duos agressivos como res duos de an lises de gordura devem ser dilu dos em grandes volumes de gua ou neutralizados com solu o de hidr xido de s dio A solu o de cido cr nico fortemente cida e provoca queimaduras violentas na pele Cuidado ao manuse la 6 Quando for necess rio usar a solu o de cido cr mico o produto pode ser limpo deve ser enxaguado com uma solu o ou preenchido com a mesma e deix la atuar 7 Alguns tipos especiais de precipitado exigem remo o com cido n trico gua r gia 1 3 cido n trico cido clor drico ou cido sulf rico fumegante Estas s o subst ncias muito corrosivas e devem ser usadas
75. zada em muitas ind strias de latic nios para se apreciar a qualidade bacteriol gica do leite destinado s fabrica es de queijos A velocidade da coagula o do leite e aspecto da coalhada obtida nos fornece indica es quantitativas e principalmente qualitativas sobre a flora microbiana presente no leite Certamente o m todo aproximativo por m simples e sem custos O teste consiste em manter certa amostra de leite em estufa ou banho Laborat rio de Rotina P gina 14 Manual de Bancada Boas Pr ticas de Laborat rio A maria na temperatura de 37 C at o momento onde devido influ ncia do desenvolvimento de microrganismos ocorre o processo de fermenta o com consequente coagula o do mesmo Durante a incuba o as amostras devem ser monitoradas tomando se nota do tempo decorrido entre o inicio da incuba o e a coagula o assim como as propriedades e caracter sticas da coalhada formada e soro A lactofermenta o uma prova pr tica que nos permite selecionar o leite visando produ o de queijos especiais que n o podem ser influenciados pela flora l tica presente naturalmente no mesmo Material 1 Tubos de ensaio com tampa e rosca 16 x 150 mm 2 Pipeta graduada esterilizada de 10 mL 3 Banho maria regulado para 37 C T cnica a Em um tubo de ensaio esterilizado adicionar 10 mL do leite a ser testado Tampar com rolha ou tampa de rosca tamb m esterilizado b Incubar a 37 C

Manual de Bancada - Boas Práticas de Laboratório

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents

Manual de Bancada - Boas Pr&aacute;ticas de Laborat&oacute;rio

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents

Manual de Bancada - Boas Práticas de Laboratório