Reagentes - Inova Diagnostics
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1. Material adicional necessario mas nao fornecido Instrumento BIO FLASH com computador Lavagem do Sistema BIO FLASH Numero de Pe a 3000 8205 Ativadores BIO FLASH Numero de Pega 3000 8204 Tinas BIO FLASH Numero de Pega 3000 8206 Calibradores QUANTA Flash Ro52 N mero de Pe a 701261 Controlos QUANTA Flash Ro52 N mero de Pe a 701262 Utilizar o Analisador Quimioluminescente BIO FLASH l Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH Para informa es adicionais e resolu o de problemas com este ensaio contacte a assist ncia t cnica da INOVA Diagnostics Inc no endere o ou atrav s do n mero de telefone indicados no final deste Folheto de Instru es Para esvaziar o recipiente de res duos s lidos abra a gaveta dos res duos Remova o recipiente de res duos s lidos e elimine adequadamente as tinas usadas Substitua o recipiente de res duos s lidos feche a gaveta dos res duos e clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Para substituir os ativadores clique no bot o Bulks Inventory F9 superior direito a No ecr Inventory Bulks clique no bot o Triggers esquerda Aparecer uma janela nova intitulada Add Triggers Remove old bottles b Abra e retire a gaveta dos res duos do instrumento BIO FLASH Elimine quaisquer tinas da gaveta de res2. Ro52 99 4 Total Concord ncia Total 93 5 84 3 98 2 Precis o e reprodutibilidade Avaliou se a precis o do ensaio do QUANTA Flash Ro52 testando 6 amostras de soro de acordo com o CLSI EP5 A2 e abaixo encontram se os dados resumidos Amostra N Meda UG DP CV DP CV DP CV DP HCV 4 fal 1348 os am o 22 155 ne 168 125 2 fsa 2136 090 a2 042 20 226 106 247 115 a Tee esel 200 se 190 23 512 ssl enal as rea 1415 oso 66 000 00 1416 98 17 04 118 se 27589 1662 60 000 00 2567 03 3058 80 82046 5642 69 3378 41 5126 62 8337 102 Intervalo de medi o anal tica limites e linearidade O intervalo de medi o anal tica IMA do ensaio situa se entre 2 3 UQ e 1685 3 UQ NO ee O limite de dete o deste ensaio 668 9 URL que esta abaixo do IMA do ensaio 2 3 UQ Determinou se ser consistente com a diretriz CLSI EP17 A com propor es de falsos positivos a inferiores a 5 e falsos negativos p inferiores a 5 Todo o IMA desde 2 3 UQ at 1685 3 UQ linear Realizou se um estudo de linearidade de acordo com a CLSI EP6 A utilizando 6 amostras de soro com v rias concentra es de anti Ro52 Todas as 6 amostras mostraram linearidade de dilui o individualmente e os dados combinados apresentaram os resultados seguintes Amostra Intervalo do Teste UQ Inclina o 95 IS Interce o Y 95 IS Ro pags as 0 6 a
3. Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH 15 Rastreabilidade Nao esta disponivel soro de refer ncia internacional para anticorpos anti Ro52 que permita a normaliza o de ensaios de anticorpo anti Ro52 Em vez deste testou se o soro de refer ncia do Center of Disease Control and Prevention para anticorpos anti SS A Ro IS2105 ANA 7 anti SS A Ro e determinou se uma concentra o de 40 8 UQ Limita es Estes controlos est o concebidos para 15 utiliza es A etiqueta de cada tubo de controlo tem uma fila de 15 caixas que podem marcar se para verificar o n mero de utiliza es O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento durante mais tempo dever o ser eliminados Utilizar os mesmos tubos de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados Refer ncias 1 Kavanaugh A Tomar R Reveille J Solomon DH Homburger HA Guidelines for clinical use of the antinuclear antibody test and tests for specific autoantibodies to nuclear antigens American College of Pathologists Arch Pathol Lab Med 2000 124 1 71 81 Schulte Pelkum J Fritzler M Mahler M Latest u
4. nica do IEQ QUANTA Flash Ro52 Antes da atribui o do valor testam se os calibradores em v rios instrumentos com diversos lotes de reagentes Reagentes 1 Calibrador 1 do QUANTA Flash Ro52 dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 3 mL de reagente pr dilu do pronto a usar Calibradores contendo anticorpos humanos para Ro52 em estabilizadores e conservantes 2 Calibrador 2 do QUANTA Flash Ro52 dois 2 tubos marcados com codigo de barras contendo 0 3 mL de reagente pr dilu do pronto a usar Calibradores contendo anticorpos humanos para Ro52 em estabilizadores e conservantes Advert ncias 1 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos calibradores deste produto foi testado e deu resultados negativos com m todos aprovados pela FDA para anticorpos de VIH HBsAg e VHC Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de VIH VHB VHC ou outros agentes infecciosos Portanto devem manipular se os Calibradores QUANTA Flash Ro52 como se fossem qualquer material potencialmente infeccioso 2 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes fornecidos 3 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Respeitar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precaucoes Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro Os calibradores QUANTA Flash Ro52 des
5. o ser eliminados Utilizar os mesmos tubos de controlo durante mais de 15 utiliza es e ou mais de um total de 2 horas e meia pode originar resultados errados 3 Para a estabilidade ideal retire os controlos do sistema imediatamente apos a amostragem e guarde os a 2 8 C tapados no frasco original Procedimento Para criar novos materiais de CQ para o Ensaio Ro52 1 Antes de utilizar Controlos QUANTA Flash Ro52 pela primeira vez no instrumento tem de introduzir no software o nome o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo 2 A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M v Selecione QC Ctrl F2 Clique no bot o New QC Material 3 Com cada conjunto de Controlos esta incluida uma ficha de dados especifica do lote Introduza primeiro o nome o numero do lote e a data de validade desta folha de dados no software Em seguida clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio Ro52 da lista e clique em Add Por fim introduza a dose alvo e o DP alvo Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Para criar um novo lote para materiais de CQ existentes ale Antes de utilizar um nove lote de Controlos QUANTA Flash Ro52 pela primeira vez tem de introduzir no software o lote a data de validade o valor ou dose e as informa es de DP alvo 2 A partir do ecr Inst
6. os anticorpos Ro t m uma import ncia especial no diagn stico do bloqueio card aco cong nito O bloqueio atrioventricular cong nito completo e isolado BACCI mostra uma estreita liga o com os anticorpos maternais anti Ro e anti SS B La os riscos relativos mais elevados de BACCI verificam se nos beb s de m es com anticorpos contra as prote nas 52 kDa Ro e 48 kDa SS B Os anticorpos contra Ro52 podem passar despercebidos em ensaios sorol gicos Ro usados normalmente De salientar que a reatividade nica ao Ro52 ou Ro60 pode ser perdida quando medida com um Ro ELISA cl ssico baseado numa mistura dos dois antig nios Aproximadamente 20 das amostras positivas de Ro52 ou Ro60 podem n o ser detetadas utilizando uma mistura dos dois antig nios Portanto importante testar as especificidades em separado dos dois anticorpos Apesar de o anti Ro52 estar mais presente juntamente com o anti Ro60 em doentes com LES e SS uma frequ ncia elevada de anti Ro52 isolado foi descrita em doentes com esclerose sist mica ES polimiosite PM e dermatomiosite DM gt A preval ncia de anti Ro52 em ES e miosite significativamente mais elevada do que de anti Ro60 Descobriu se num estudo que inclu a 1010 doentes com ES que a preval ncia de anti Ro52 era de 15 38 Nos subgrupos definidos pela sintetase de anti Ro60 e anti aminoacil tRNA o anti Ro52 estava presente em 92 e 100 respetivamente Pode encontrar se anti Ro52 sem ant
7. 1758 6 1 03 1 02a 1 04 3 61 0 86a 8 08 1 00 Amostras Interfer ncia reatividade cruzada N o se detetou nenhuma interfer ncia com at 200 mg dL de hemoglobina 1000 mg dL de triglic ridos 224 3 mg dL de colesterol 10 mg dL de bilirrubina e 500 Ul mL de FR IgM Testaram se noventa e seis amostras de doentes com v rias doen as autoimunes e infecciosas para avaliar reatividade cruzada Uma amostra de um doente com hepatite viral e duas amostras de doentes com artrite reumatoide foram positivas no IEQ QUANTA Flash Ro52 QUANTA Flash Ro52 701261 Calibradores Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTA O NAO SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o prevista Os Calibradores QUANTA Flash Ro52 destinam se a utiliza o com os Reagentes QUANTA Flash Ro52 para a determina o de autoanticorpos IgG anti Ro52 em soro humano Cada calibrador estabelece um ponto de refer ncia para a curva de trabalho utilizada para calcular valores unit rios Resumo e princ pios do procedimento O imunoensaio quimioluminescente IEQ QUANTA Flash Ro52 utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que est armazenada no c digo de barras do cartucho de reagente Os Calibradores QUANTA Flash Ro52 est o concebidos para produzir uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento a partir de par metros da Curva Modelo com um ponto de decis o baseado nas caracter sticas de desempenho e na avalia o cl
8. desta rea o medida como Unidades Relativas de Luz URL pelo sistema tico BIO FLASH As URL s o proporcionais a quantidade de conjugado de isoluminol ligado que por sua vez proporcional quantidade de anticorpos anti Ro52 ligados ao Ro52 nas esferas O ensaio QUANTA Flash Ro52 utiliza uma Curva Modelo espec fica do lote predefinida que carregada no instrumento atrav s do c digo de barras do cartucho de reagente Baseando se no resultado da execu o de dois calibradores cria se uma Curva de Trabalho espec fica do instrumento que o software utiliza para calcular unidades quimioluminescentes UQ a partir do valor da URL obtido para cada amostra Reagentes 1 O cartucho de reagente QUANTA Flash Ro52 cont m os reagentes seguintes para 50 determina es a Esferas paramagn ticas revestidas de Ro52 conservadas antes da primeira utiliza o b Tampao de ensaio cor de rosa contendo tampao salino Tris Tween 20 estabilizadores proteicos e conservantes C Marcador IgG anticorpo IgG anti humano marcado a isoluminol contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservante 2 Tamp o de ressuspens o 1 frasco cor de rosa contendo tamp o estabilizadores proteicos e conservantes Advert ncias 1 O tamp o de ensaio cont m um qu mico 0 02 cloranfenicol conhecido no Estado da Calif rnia por causar cancro 2 A azida de s dio utilizada como conservante A azida de s dio venenosa e pode ser
9. QUANTA Flash Ro52 701263 Reagentes Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTA O NAO SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o prevista O QUANTA Flash Ro52 um imunoensaio quimioluminescente para a determina o semiquantitativa de anticorpos anti Ro52 SS A 52 em soro humano A presen a de anticorpos anti Ro52 em conjunto com descobertas laboratoriais e cl nicas pode ajudar no diagn stico de l pus eritematoso sist mico sindrome de Sjogren esclerose sist mica polimiosite e dermatomiosite Resumo e explica o do teste Os anticorpos anti Ro SS A que foram descritos pela primeira vez em l pus eritematoso sist mico LES e sindroma de Sj gren SS sao a especificidade de antig nios nucleares extra veis ENA mais prevalecente identificada em laborat rios Foram descritos dois tipos de anticorpos anti Ro anti Ro 52 kDa SS A 52 e anti Ro 60 kDa SS A 60 cada um espec fico de um antig nio diferente Historicamente estes autoanticorpos eram considerados um sistema autoanticorpo uniforme No entanto estudos recentes apresentaram conclus es de que o Ro60 e o Ro52 n o fazem parte de um complexo macromolecular est vel e que os anticorpos Ro52 e Ro60 t m associa es cl nicas diferentes O antig nio Ro52 foi identificado recentemente como prote na TRIM21 Os autoanticorpos Ro52 est o presentes frequentemente no soro de doentes com SS 40 70 ou LES 20 40 Al m disso
10. a o 1 Conserve os cartuchos de reagente e o tamp o de ressuspens o por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem est veis at data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Os cartuchos de reagente abertos devem guardar se no instrumento e permanecem est veis durante um total de 24 dias per odo ap s o qual devem ser eliminados O software BIO FLASH monitoriza as datas de validade dos cartuchos colocados bem como dos lotes do cartucho de reagente Colheita prepara o e manuseamento de amostras Este procedimento deve ser efetuado numa amostra de soro As amostras de soro com contamina o bacteriana que sofreram tratamento t rmico ou contendo part culas vis veis n o devem ser utilizadas Ap s a colheita o soro deve ser separado do co gulo O documento H18 A4 da CLSI recomenda as seguintes condi es de conserva o para as amostras 1 Nao conservar as amostras a temperatura ambiente durante mais de 8 horas 2 Se o teste n o for conclu do num prazo de 8 horas guardar a amostra a 2 8 C e Se o teste n o for conclu do num prazo de 48 horas ou para transporte da amostra congelar a 20 C ou temperatura inferior As amostras congeladas devem ser bem agitadas depois de descongelarem e antes de serem testadas Procedimento Materiais Fornecidos 1 1 1 Cartucho de Reagente QUANTA Flash Ro52 Tamp o de ressuspens o Pipeta de transfer ncia
11. acao do cartucho de reagente Da primeira vez que utilizar o cartucho de reagente tem de seguir os passos seguintes para instalar corretamente o cartucho no instrumento BIO FLASH Nota n o utilize o cartucho de reagente se observar quaisquer sinais de danos 1 Coloque o cartucho de reagente numa superf cie s lida Com uma m o segure o cartucho de reagente no lugar Com a outra m o segure firmemente a patilha vermelha na parte de tr s do cartucho de reagente e puxe a totalmente para fora 2 Pressione as duas patilhas nos lados da tampa perfurada parte cinzenta e exer a press o na parte superior do cartucho de reagente at encaixar numa posi o bloqueada As patilhas dever o deixar de estar vis veis NAO VIRE O CARTUCHO ABERTO 3 Ressuspender as microparticulas de Ro52 a Destape o frasco do tamp o de ressuspens o e recolha fluido para a pipeta de transfer ncia fornecida Ser utilizado todo o conte do do frasco b Fa a deslizar a porta na tampa do cartucho de reagente para a posi o de aberta pressionando suavemente o lado estreito do cartucho de reagente e mantenha a nesta posi o Transfira analiticamente todo o conte do do frasco para o tubo do reagente de micropart culas atrav s de um unico orif cio na parte superior do cartucho de reagente C Misture os conteudos do tubo do reagente de microparticulas aspirando e doseando o liquido pelo menos 30 vezes Se estiverem visi
12. ape cada tubo calibrador e coloque ambos num rack de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os no rack Coloque o rack de amostras no carrossel de amostras do instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos calibradores e identificar o cartucho de reagente necess rio Consulte o manual do operador fornecido com o sistema BIO FLASH relativamente a instru es de funcionamento pormenorizadas do analisador quimioluminescente BIO FLASH e do software BIO FLASH O instrumento testar ent o cada calibrador em triplicado Ap s os Calibradores terem sido testados o software exigir a valida o da calibra o A partir do ecr Instrument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M V Selecione Calibration Ctrl F3 Na janela Calibra o realce o ensaio pretendido e clique em Details Na nova janela Calibration Details selecione a calibra o que acabou de ser executada A Curva Modelo aparece como uma linha tracejada ao passo que a Curva de Trabalho aparece como uma linha cont nua Se os resultados da calibra o forem v lidos aparecer um bot o de valida o no canto inferior esquerdo do ecr Clique no bot o Validate Calibration Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Recomenda se testar os Controlos QUANTA Flash Ro52 vendidos separada
13. ca Diagn stico An lise n 177 N o RS T Intervalo de seguran a de 95 Foto o Sensibilidade 44 4 33 4 55 9 QUANTA Flash Ro52 Especificidade 96 9 91 1 99 4 Toa 81 S6 177 Sensibilidade cl nica e especificidade do QUANTA Flash Ro52 na ES An lise Cl nica Diagn stico An lise n 144 Intervalo de seguran a de 95 See E pS Sensibilidade 12 5 4 7 25 2 QUANTA Flash Ro52 Especificidade 96 9 91 1 99 4 Total 1 48 96 144 Sensibilidade cl nica e especificidade do QUANTA Flash Ro52 na MAI An lise Cl nica me cae reer er Analise n 136 Intervalo de seguran a de 95 See oe r Sensibilidade 35 0 20 6 51 7 QUANTA Flash Ro52 Especificidade 96 9 91 1 99 4 Tol ao 96 16 O Comparacao do metodo com dispositivo implicado As amostras para compara o de m todos inclu ram as amostras dos estudos de valida o clinica doentes com SS LES ES e MAI outros controlos de doen a e dadores de sangue aparentemente saud veis que estavam dentro do intervalo pass vel de relat rio do ensaio Testaram se sessenta e duas destas amostras no QUANTA Flash Ro52 e no dispositivo implicado ELISA Os dados s o apresentados na tabela seguinte Compara o do M todo Ro52 ELISA Concord ncia de Percentagem N 62 Intervalo de seguran a de 95 Concord ncia Pos 90 0 68 3 Negativo 98 8 Yo IEQ QUANTA Flash Positivo Concordancia Neg 95 2 83 8
14. de anticorpos anti Ro52 O Controlo Negativo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de autoanticorpo muito baixos O Controlo Positivo destina se a avaliar a precis o e a exatid o do ensaio com n veis de autoanticorpo desde moderados a elevados Reagentes 1 Controlo Negativo do QUANTA Flash Ro52 dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 5 mL de reagente pronto a usar Controlos contendo anticorpos humanos para Ro52 em estabilizadores e conservantes 2 Controlo Positivo do QUANTA Flash Ro52 dois 2 tubos marcados com c digo de barras contendo 0 5 mL de reagente pronto a usar Controlos contendo anticorpos humanos para Ro52 em estabilizadores e conservantes Advert ncias 1 Todo o material de origem humana utilizado na prepara o dos controlos deste produto foi testado e deu resultados negativos com m todos aprovados pela FDA para anticorpos de VIH HBsAg e VHC Contudo nenhum teste pode garantir com certeza absoluta a aus ncia de VIH VHB VHC ou outros agentes infecciosos Portanto devem manipular se os Controlos QUANTA Flash Ro52 como se fossem qualquer material potencialmente infeccioso 2 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes fornecidos 3 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Respeitar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precau es 1 Este pr
15. duos secos Clique em Yes na janela Empty Waste Drawer Retire as garrafas ativadoras dos respetivos suportes e clique no bot o Next Desaperte as tampas das garrafas antigas de ativadores e substitua por ativadores novos Certifique se de que as coloca uma de cada vez com as tampas com o c digo de cores correspondente branca com branca e vermelha com vermelha c Siga as instru es na janela nova Add Triggers Add Trigger 2 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 2 no suporte com o c digo de cores branco Clique em Next d Siga as instru es da janela Add Triggers Add Trigger 1 bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite coloque o Ativador 1 no suporte com o c digo de cores vermelho Clique em Finish Volte a colocar a gaveta dos res duos e feche a Para substituir o recipiente da Lavagem do Sistema clique no bot o Bulks Inventory F9 canto superior direito No ecr Inventory Bulks clique no bot o Sys Rinse Na nova janela Add System Rinse Remove bottles clique em Next Siga as instru es na janela nova Add System Rinse Add bottle Quando o c digo de barras tiver sido aceite se necess rio clique em Finish Para esvaziar o recipiente de res duos de fluido a partir do ecr Inventory Bulks clique no bot o Fluid Waste Retire e elimine os res duos de fluido Clique em Next Quando tiver substitu do a garrafa vazia clique em Finish Metodo Prepar
16. i Ro60 isolado em at 20 37 de doentes com miosite No entanto em soros de miosite positivos a anti Jo 1 a frequ ncia dos anticorpos anti Ro52 foi muito superior 58 Al m disso a coexist ncia de anticorpos anti Ro52 e anti Jo 1 parece ser um indicador de doen a pulmonar intersticial relativamente grave em doentes com miopatia inflamat ria Principios do procedimento O antig nio Ro52 recombinado purificado esta revestido por esferas paramagneticas que est o guardadas no cartucho de reagente em condi es que conservam o antig nio no seu estado reativo Quando o cartucho do ensaio estiver pronto a ser utilizado pela primeira vez adiciona se uma solu o tamp o ao tubo que cont m as esferas conservadas e as esferas s o misturadas com o tamp o O cartucho de reagente ent o carregado no instrumento BIO FLASH No instrumento dilu se uma amostra do doente numa tina pl stica descart vel Pequenas quantidades de soro dilu do do doente as esferas de Ro52 e o tamp o de ensaio s o todos combinados numa segunda tina e misturados Incuba se esta tina a 37 C As esferas s o ent o magnetizadas e lavadas v rias vezes Adiciona se ent o tina o anticorpo IgG anti humano conjugado de isoluminol e incuba se a 37 C Mais uma vez as esferas s o magnetizadas e lavadas repetidamente O conjugado de isoluminol produz uma rea o luminescente quando se adicionam os reagentes Ativadores tina A luz produzida a partir
17. iva lt 20 Positiva 220 A reatividade em UQ est diretamente relacionada com o t tulo do autoanticorpo na amostra do doente Os aumentos e as diminui es nas concentra es do autoanticorpo no doente refletir se o numa subida ou descida correspondente em UQ proporcionalmente quantidade de anticorpo O intervalo de medi o anal tica IMA do ensaio situa se entre 2 3 UQ e 1685 3 UQ Se o resultado de um doente for inferior a 2 3 UQ ent o o sistema BIO FLASH indica lo a como lt 2 3 UQ Visto ser inferior a 20 UQ considera se um resultado negativo Se o resultado de um doente for superior a 1685 3 UQ ent o o sistema BIO FLASH indica lo a como gt 1685 3 UQ Este considerado um resultado positivo O software BIO FLASH disponibiliza uma op o de Novo teste autom tico Se esta op o for selecionada o instrumento voltar a testar automaticamente qualquer amostra que tenha um resultado gt 1685 3 UQ diluindo a ainda mais por um fator de 35 e calculara a UQ real utilizando este fator de dilui o adicional 6 Interpreta o dos resultados O Ensaio QUANTA Flash tem capacidade para detetar pequenas diferen as em popula es de doentes Cada laborat rio aconselhado a verificar o intervalo de refer ncia fornecido pelo fabricante e pode estabelecer o seu pr prio intervalo normal baseando se nos seus pr prios controlos e na popula o de doentes de acordo com os procedimentos estabelecidos pelo mesmo Suge
18. mente numero de pe a 701262 ap s a calibra o de um lote de cartucho de reagente Rastreabilidade Nao esta disponivel soro de refer ncia internacional para anticorpos anti Ro52 que permita a normaliza o de ensaios de anticorpo anti Ro52 Em vez deste testou se o soro de refer ncia do Center of Disease Control and Prevention para anticorpos anti SS A Ro IS2105 ANA 7 anti SS A Ro e determinou se uma concentra o de 40 8 UQ Limita es Estes calibradores est o concebidos para 4 calibra es O tempo total em que os tubos calibradores podem estar destapados dentro do instrumento de 8 horas Se se deixarem os calibradores destapados dentro do instrumento durante mais tempo dever o ser eliminados Utilizar os mesmos tubos calibradores durante mais de 4 calibra es e ou mais de 8 horas pode originar uma calibra o incorreta do ensaio que por sua vez pode fornecer resultados errados QUANTA Flash Ro52 701262 Controlos Para Utiliza o em Diagn stico In Vitro APENAS PARA EXPORTAGAO NAO SE DESTINA A VENDA NOS ESTADOS UNIDOS Utiliza o prevista Os controlos QUANTA Flash Ro52 destinam se a utiliza o com os Reagentes QUANTA Flash Ro52 para controlo de qualidade na determina o de autoanticorpos IgG anti Ro52 em soro humano Resumo e princ pios do procedimento Os Controlos QUANTA Flash Ro52 s o constitu dos por um Controlo Negativo e um Controlo Positivo Cada um cont m uma quantidade diferente
19. odas as amostras 3 Carregue as amostras nas posi es selecionadas no rack de amostras e carregue o rack no carrossel de amostras do instrumento 4 Se todos os materiais necess rios estiverem colocados no instrumento o icone iniciar estar dispon vel a verde na parte superior do ecr Pressione o cone Start F4 para iniciar o ensaio Controlo de qualidade Os Controlos QUANTA Flash Ro52 vendidos em separado INOVA Numero de Item 701262 cont m os Controlos Ro52 Positivos e Negativos Consulte a sec o intitulada QUANTA Flash Ro52 Controlos 701262 do Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como introduzir todas as informa es necess rias de cada controlo no software bem como sobre o funcionamento dos controlos Recomenda se que se testem os controlos pelo menos uma vez nos dias em que se utiliza o ensaio no entanto os utilizadores tamb m dever o considerar os requisitos regulamentares locais nacionais C lculo dos resultados Para cada lote novo de QUANTA Flash Ro52 cria se na INOVA uma Curva Modelo de cinco pontos Esta curva log stica de quatro par metros est codificada no c digo de barras de cada cartucho de reagente Quando um cartucho de reagente tiver sido calibrado a curva de trabalho espec fica do instrumento ser utilizada para converter as ULR em UQ Pode entao classificar se a reatividade do anticorpo ao Ro52 de acordo com a tabela abaixo Reatividade UQ Negat
20. oduto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro 2 Os Controlos QUANTA Flash Ro52 destinam se a ser utilizados com o ensaio QUANTA Flash Ro52 3 Nao transfira os reagentes do controlo para tubos secundarios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para identificar o controlo 4 Uma vez aberto cada tubo de controlo est em condi es de ser utilizado at 15 vezes com um tempo m ximo por utiliza o de 10 minutos inserido no instrumento 5 A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Os res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza recomendado do instrumento conforme definido no manual do operador do BIO FLASH 14 Condicoes de conservacao i Conserve os controlos por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem estaveis ate a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo 2 Podem utilizar se os controlos abertos at 15 vezes com um tempo maximo por utiliza o de 10 minutos inseridos no instrumento O tempo total em que os tubos de controlo podem estar abertos colocados no instrumento de 2 horas e meia ou 10 minutos por utiliza o Se se deixarem os controlos abertos colocados no instrumento por um per odo total superior a 2 horas e meia dever
21. pdate on the Ro SS A autoantibody system Autoimmun Rev 2009 8 7 632 637 Ghillani P Andre C Toly C Rouquette AM Bengoufa D Nicaise P Goulvestre C Gleizes A Dragon Durey MA Alyanakian MA Chretien P Chollet Martin S Musset L Weill B Johanet C Clinical significance of anti Ro52 TRIM21 antibodies non associated with anti SSA 60kDa antibodies results of a multicentric study Autoimmun Rev 2011 10 9 509 513 Defendenti C Atzeni F Spina MF Grosso S Cereda A Guercilena G Bollani S Saibeni S Puttini PS Clinical and laboratory aspects of Ro SSA 52 autoantibodies Autoimmun Rev 2011 10 3 150 154 Parker JC Burlingame RW Bunn CC Prevalence of antibodies to Ro 52 in a serologically defined population of patients with systemic sclerosis J Autoimmune Dis 2009 6 6 2 Brouwer R Hengstman GJ Vree Egberts W Ehrfeld H Bozic B Ghirardello A Gr ndal G Hietarinta M Isenberg D Kalden JR Lundberg Moutsopoulos H Roux Lombard P Vencovsky J Wikman A Seelig HP van Engelen BG van Venrooij WJ Autoantibody profiles in the sera of European patients with myositis Ann Rheum Dis 2001 60 2 116 123 Rutjes SA Vree Egberts WT Jongen P Van Den Hoogen F Pruijn GJ Van Venrooij WJ Anti Ro52 antibodies frequently co occur with anti Jo 1 antibodies in sera from patients with idiopathic inflammatory myopathy Clin Exp Immunol 1997 109 1 32 40 La Corte R Lo Mo Naco A Locaputo A Dolzani F Trotta F In patients
22. re se que os resultados apresentados pelo laborat rio incluam a declara o Obtiveram se os seguintes resultados com o imunoensaio quimioluminescente INOVA QUANTA Flash Ro52 Os valores obtidos com m todos de ensaio de diferentes fabricantes n o podem ser comparados A magnitude dos n veis de autoanticorpos descritos n o pode ser sempre correlacionada com um t tulo final Limita es do procedimento 1 Nem todos os doentes com LES ES e MAI s o positivos para anticorpos Ro52 2 Os resultados deste ensaio devem ser utilizados em conjunto com as conclus es cl nicas e outros testes serol gicos 3 A ressuspens o inadequada das esferas revestidas Ro52 pode apresentar valores inferiores aos de uma ressuspens o correta 4 As caracteristicas de desempenho deste ensaio nao foram determinadas para outras matrizes al m do soro Intervalo de refer ncia Determinou se o corte do ensaio usando 155 amostras de indiv duos de refer ncia com 115 dadores de sangue aparentemente saud veis 15 homens 100 mulheres entre os 19 e 69 anos de idade 8 amostras de hepatite viral positiva 6 homens 2 mulheres entre os 19 e 54 anos de idade 5 amostras de s filis positiva 1 homem 4 mulheres entre os 27 e 57 anos de idade 5 amostras de VIH positivo 4 homens 1 mulher entre os 28 e 51 anos de idade e 22 amostras de AR sem dados dispon veis de sexo e idade Estabeleceu se o corte ao percentil gt 98 dos resultados obtidos nos indiv duo
23. rument Summary clique no bot o de seta Choose more options Ctrl M v Selecione QC Ctrl F2 Realce o ensaio Ro52 na coluna do lado esquerdo Em seguida realce o material do controlo apropriado do lado direito Ro52N para Controlo Negativo ou Ro52P para Controlo Positivo Clique no bot o New QC Lot 3 Com cada conjunto de Controlos esta incluida uma ficha de dados especifica do lote Introduza as informa es desta ficha de dados no software Estas dever o incluir o numero do lote a data de validade a dose alvo e o DP alvo Se necess rio clique no bot o Add Assay Na nova janela certifique se de que a caixa Show All Assays est marcada Selecione o ensaio Ro52 da lista e clique em Add Clique em Save Execute este processo para ambos os controlos Recomenda se que os Controlos QUANTA Flash Ro52 sejam utilizados uma vez cada dia que se utilize o ensaio Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada controlo para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Destape cada tubo de controlo e coloque ambos num rack de amostras com os c digos de barras virados para a frente atrav s dos espa os no rack Coloque o rack de amostras no carrossel de amostras do instrumento BIO FLASH e feche a porta O instrumento ler os c digos de barras nos tubos de controlo e identificar o cartucho de reagente necess rio
24. s refer ncia e foi atribu do um valor de 20 UQ Valores esperados O valor esperado na popula o normal negativo Analisaram se n veis de autoanticorpo anti Ro52 numa coorte de 111 dadores de sangue aparentemente saud veis 21 homens e 90 mulheres entre os 17 e 60 anos de idade utilizando o QUANTA Flash Ro52 Com um corte de 20 UQ nenhuma das amostras foi positiva no QUANTA Flash Ro52 A concentra o m dia foi 8 3 UQ e os valores variaram entre lt 2 3 e 19 3 UQ Sensibilidade e especificidade clinicas Utilizou se um total de 289 amostras no estudo de valida o cl nica incluindo 81 de doentes com LES 24 de doentes com sindroma de Sj gren 48 de doentes com ES e 40 de doentes com miosite autoimune MAI Como controlos inclu mos 50 doentes com artrite reumatoide 20 doentes com doen a autoimune da tiroide 11 doentes com doen a cel aca e 15 doentes com v rias doen as infecciosas Nas quatro tabelas abaixo calculam se a sensibilidade cl nica e a especificidade para a SS n 24 LES n 81 ES n 48 e MAI n 40 utilizando a popula o de controlo n 96 Sensibilidade cl nica e especificidade do QUANTA Flash Ro52 na SS An lise Cl nica Diagn stico An lise n 120 Intervalo de seguran a de 95 Fossa a Sensibilidade 58 3 36 6 77 9 QUANTA Flash Ro52 Especificidade 96 9 91 1 99 4 Toa 24 96 1207 Sensibilidade cl nica e especificidade do QUANTA Flash Ro52 na LES An lise Cl ni
25. sse 80 D 66386 St Ingbert Alemanha Tel 49 6894 581020 Fax 49 6894 581021 www mt procons com 621260PRT Novembro de 2012 Revis o 0
26. t xica se for ingerida ou absorvida pela pele ou pelos olhos A azida de s dio pode reagir com componentes de canaliza es de chumbo ou cobre formando azidas met licas explosivas Por esta raz o ao deitar fora os restos de reagentes necess rio deixar correr agua em quantidade abundante para evitar a acumula o de azida 3 Usar equipamento de prote o individual apropriado para trabalhar com os reagentes fornecidos 4 Os salpicos de reagentes devem ser limpos imediatamente Respeitar todas as regulamenta es ambientais nacionais e locais relativas elimina o de res duos Precaucoes ON gt Este produto destina se a utiliza o para diagn stico In Vitro Este ensaio destina se apenas a utiliza o com o instrumento BIO FLASH O protocolo para a ressuspens o deve ser criteriosamente respeitado Uma vez aberto este cartucho de reagente deve guardar se no carrossel do reagente do instrumento Deve ter se cuidado para evitar entornar os reagentes quando se coloca pela primeira vez o cartucho de reagente no instrumento A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Os res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza recomendado do instrumento conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserv
27. tinam se a ser utilizados com o ensaio QUANTA Flash Ro52 N o transfira os reagentes calibradores para tubos secund rios O instrumento utiliza os c digos de barras nos tubos para combinar os calibradores com o tipo de ensaio adequado Ap s aberto um tubo calibrador mant m se bom durante um per odo de 8 horas ou 4 calibra es ap s o qual o reagente tem de ser eliminado A contamina o qu mica dos reagentes pode surgir devido a limpeza ou lavagem inadequada do instrumento Os res duos de qu micos laboratoriais comuns como formalina lix via etanol ou detergente podem causar interfer ncia no ensaio Certifique se de que segue o procedimento de limpeza recomendado do instrumento conforme definido no manual do operador do BIO FLASH Condi es de conserva o 2 Conserve os calibradores por abrir a 2 8 C Nao congele Os reagentes permanecem estaveis ate a data de validade indicada quando armazenados e manipulados conforme descrito no protocolo Devem eliminar se os calibradores abertos apos 8 horas Procedimento 1 Cada lote novo de cartucho de reagente tem de ser calibrado antes da primeira utiliza o O software n o permitir utilizar um lote novo at que seja calibrado Antes da utiliza o tem de misturar se suavemente cada calibrador para garantir a homogeneidade Evite a forma o de espuma uma vez que as bolhas podem interferir com a dete o do n vel do l quido dos instrumentos Dest
28. veis pedacos de esferas continue a misturar a solu o mais 30 vezes Se as micropart culas n o ficarem em ressuspens o NAO UTILIZE O CARTUCHO d Certifique se de que pipeta todo o liquido antes de retirar a pipeta do tubo e elimina la 4 Retire o autocolante da parte superior do cartucho de reagente para p r vista os outros tr s orif cios 5 Coloque o cartucho de reagente em qualquer ranhura aberta no carrossel do reagente do instrumento BIO FLASH Calibracao do ensaio 1 Cada lote novo de cartucho de reagente tem de ser calibrado antes da primeira utiliza o O software n o permitir utilizar um lote novo at que seja calibrado 2 Consulte a sec o intitulada QUANTA Flash Ro52 Calibradores 701261 deste Folheto de Instru es relativamente a instru es pormenorizadas sobre como calibrar o cartucho de reagente 3 Quando a calibra o tiver sido validada o lote do cartucho de reagente onde se realizou a calibra o est pronto a ser utilizado Programa o e realiza o de testes 1 Pressione o bot o Worklist na parte superior do ecr e selecione o separador Racks no fundo 2 Selecione o rack da amostra a utilizar real ando o rack no ecr ou digitalizando o c digo de barras com o leitor de c digo de barras port til Digitalize ou escreva o nome da amostra selecione o tipo de amostra o tipo de recipiente tubo ta a e selecione Ro52 a partir do painel do ensaio Repita estes passos para t
29. with antisynthetase syndrome the occurrence of anti Ro SSA antibodies causes a more severe interstitial lung disease Autoimmunity 2006 39 3 249 253 Vancsa A Csipo Nemeth J Devenyi K Gergely L Danko K Characteristics of interstitial lung disease in SS A positive Jo 1 positive inflammatory myopathy patients Rheumatol Int 2009 29 9 989 994 Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories BMBL 5 Edition Centers for Disease Control National Institute of Health 2009 Simbolos Utilizados S O i 5 LOT ONTR ONTR ROEE gE Dispositivo m dico para diagn stico n Vitro Consultar as instru es de utiliza o Limite de temperatura N o reutilizar Riscos biol gicos C digo do lote N mero de cat logo Utilizar at Fabricante Representante autorizado Cont m o suficiente para lt n gt testes Controlo Positivo Controlo Negativo Calibrador 1 Calibrador 2 Reciclar a caixa de papel Este lado para cima QUANTA Flash uma marca comercial da INOVA Diagnostics Inc BIO FLASH uma marca comercial registada da Biokit S A O 2012 Fabricado por INOVA Diagnostics Inc 9900 Old Grove Road San Diego CA 92131 Estados Unidos da Am rica Assist ncia T cnica apenas EUA e Canad 877 829 4745 Assist ncia T cnica Fora dos EUA 1 858 805 950 support inovadx com Representante Autorizado na UE Medical Technology Promedt Consulting GmbH Altenhofstra
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