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ÄKTA™ start - GE Healthcare Life Sciences
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1. Nella schermata Create method selezionare Edit per accedere ai metodi Risultato Si apre la schermata Select method to edit 212 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione 2 Select method to edit o Method 1 O Method 2 3 Method 3 5 Method 4 ES 2 Ede e Nella schermata Select method to edit selezionare un pulsante di opzio ne per selezionare un metodo utente e Selezionare Edit per iniziare a modificare i parametri ciclo del metodo scelto Column volume Flow rate Pressure limit Set parameters 2 Sample from Pump Loop 7 3 Sample volume v 50 9 ini r Equilibration v 00 We CV l Wash unbound CV 2 3 O e E Set parameters Elution option socratic Gradient Elution volume v Fractionation v 20 Ad mi 3 3 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 213 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione e Selezionare il campo Save Method as se si desidera impostare il nome del metodo Il nome del file pu essere modificato impostando le cifre comprese tra 00 e 99 Nota Attribuire un nome al metodo unico per esempio AC02 DS05 Il metodo creato sar salvato nel menu metodi User defined I metodi importati tramite USB che sono stati creat
2. 242 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell Intervalli di manutenzione Pulire la Conductivity flow cell quando il monitor Conductivity mostra una risposta lenta o quando le misurazioni della conduttivit non sono comparabili a nessuno dei ri sultati precedentemente ottenuti Soluzioni richieste Sono richieste le seguenti soluzioni e 1MNaOH e Acquademineralizzata DM Pulizia della Conductivity flow cell in posizione Per pulire la Conductivity flow cell attenersi alle istruzioni che seguono Nota Prima di pulire la Conductivity flow cell rimuovere la colonna dal percorso di flusso e ricollegare quest ultimo Vedere Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagina 237 Passo Operazione 1 Immergere la tubazione di ingresso A o B in 1M NaOH 2 Avviare un ciclo manuale e pompare 1M di NaOH con una portata di 1 ml min per 10 minuti attraverso la cella di flusso 3 Mettere in pausa il ciclo Lasciare la Conductivity flow cell piena di 1M NaOH per 15 minuti 4 Immergere la tubazione d ingresso in acqua DM 5 Riprendere il ciclo e risciacquare completamente la cella di flusso Nota e Non lasciare l NaOH per molto tempo nella cella di flusso per evitare danni Sciacquare completamente il percorso di flusso con acqua e Assicurarsi che l NaOH venga eliminata completamente La lettura
3. Frac30 con imballaggio Movimentazione delle scatole consegnate AKTA start e Frac30 sono imballati in due scatole distinte GE Healthcare Life Sciences KTA start a m Per trasportare le scatole che contengono lo strumento e il collettore frazioni utilizzare un carrello manuale adatto per spostare imballaggi leggeri Ad ogni modo ciascuna scatola pu essere sollevata da 1 persona senza l ausilio di alcun mezzo di sollevamento KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 63 4 Installazione 4 2 Trasporto di AKTA start e Frac30 64 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 43 Disimballare AKTA start e Frac30 Introduzione In questa sezione si descrive come disimballare AKTA start e Frac30 Nota Conservare tutto il materiale d imballaggio originale Qualora il sistema debba essere reimballato per trasporto o altra ragione importante che esso sia imballato in modo sicuro utilizzando proprio il materiale d imballaggio originale Disimballaggio del sistema AKTA start Per disimballare lo strumento seguire le istruzioni indicate di seguito ATTENZIONE AKTA start alla consegna riempito con alcol denaturato 50 C2H50H etanolo La miscela di alcol denaturato pu essere pericolosa per l uomo se ingerita Prima di assemblare testare o integrare AKTA start nell ambiente di processo a cui esso destina
4. Passo Operazione 1 Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system _Q Nella schermata Method run selezionare Templates per accedere ai vari modelli Templates Affinity AC C Desalting buffer exchange DS lon exchange IEX Gel filtration GF Back a e Selezionare un pulsante di opzione per selezionare un modello adatto all applicazione in uso e Per proseguire con la tecnica scelta selezionare Select Run parameters Column volume v so Flow rate v i RO Zi imi min N 030 Pressure limit v A MPa T Save Result ACO1 1 3 to USB KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 191 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates 192 Passo Operazione Impostare i parametri ciclo Column volume volume colonna ml Flow rate portata ml min Pressure limit limite di pressione MPa Se si intende salvare il risultato spuntare la casella di controllo Save Result to USB I nome del file del risultato pu essere modificato impo stando le cifre comprese tra 00 e 99 Selezionare la freccia avanti per accedere a parametri ciclo supplemen tari Nota Assicurarsi che i valori di Column volume Flow rate e Pressure limit siano idonei per la colonna scelta Per informazioni pi dettagliate consultare il manuale della colonna Se la pressione supe
5. Affinity AC Desalting buffer exchange DS C lon exchange IEX TY Gelfiltration GF Ca a e Selezionare un pulsante di opzione per selezionare un modello e Selezionare Create per creare un metodo in base alla tecnica selezionata Per ulteriori informazioni sui modelli disponibili in KTA start vedere la Sezio ne 6 4 3 Templates a pagina 190 i 7 Set parameters Column volume v za mi so Flow rate v ae AE mlfmin r N EE Pressure limit v Ae MPa Save method as RGO 1 3 o e Impostare i parametri ciclo Column volume volume colonna ml Flow rate portata ml min Pressure limit limite di pressione MPa KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 209 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione e Selezionare il campo Save Method as se si desidera impostare il nome del metodo Il nome del file pu essere modificato impostando le cifre comprese tra 00 e 99 Nota Attribuire un nome al metodo unico Il metodo creato sar salvato nel menu metodi User defined Nota Assicurarsi che i valori di Column volume Flow rate e Pressure limit siano idonei per la colonna scelta Per informazioni pi dettagliate consultare il manuale della colonna Se la pressione supera il limite impostato lo strumento entra in stato di Pause 4 Set parameters 2 Sample from Pump Loop 7 Sample volum
6. e L unit KTA start deve essere utilizzata esclusivamente secon do le istruzioni riportate nella guida utente dell unit AKTA start e L uso ela manutenzione di KTA start devono essere eseguiti seguendo le istruzioni descritte in AKTA start Istruzioni di funzionamento e AKTA start Maintenance Manual e Non utilizzare accessori che non siano stati forniti o consigliati da GE e Non utilizzare KTA start in caso di malfunzionamento o se ha subito danni ad esempio danni al cavo di alimentazione alla sua spina o al cavo Frac30 danni derivanti dalla caduta dell attrezzatura danni causati da liquidi riversati sull attrezzatura 18 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza Utilizzo di liquidi infiammabili AVVERTENZA Quando si utilizzano liquidi infiammabili con AKTA start seguire le presenti precauzioni per evitare il possibile rischio di incendio o esplosione e Rischio d incendio Prima di avviare il sistema accertarsi che nello strumento o nella tubazione non siano presenti eventuali perdite accidentali e Rischio d esplosione In caso d utilizzo di liquidi infiammabili per evitare la formazione di un atmosfera esplosiva assicurarsi che la ventilazione dell ambiente soddisfi i requisiti locali ATTENZIONE Per evitare situazioni pericolose durante il disimballaggio o lo spo stamento di AKTA start osservare le
7. MoTo U 0 Funzione Buffer valve Valve position indica quale raccor do d ingresso valvola aperto Buffer A tampone A o Buffer B tampone B Turn valve commuta la valvola tra Buffer valve Valve position Turn valve le sue due posizioni cio le porte Valve switches eg Counts P p E d ingresso A e B Valve switches la casella di testo indica il numero di volte che la valvo la stata commutata Reset azzera i conteggi quando la valvola stata sostituita con una nuova Sample valve Valve position indica quale raccor do d ingresso valvola aperto Buffer tampone o Sample campione Sample valve Valve position Turn valve Valve switches o Counts Reset Back A Turn valve commuta la valvola tra le sue due posizioni cio le porte d ingresso tampone e campione Valve switches la casella di testo indica il numero di volte che la valvo la stata commutata Reset azzera i conteggi quando la valvola stata sostituita con una nuova 56 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service NM ele U o Funzione Wash valve Valve position indica quale raccor do d uscita valvola aperto Waste smaltimento o Column colonna Wash valve Turn valve commuta le due posizio ni della valvola cio le porte d uscita
8. 2 Istruzioni di sicurezza 2 4 Procedure di riciclaggio 2 4 Procedure di riciclaggio Introduzione La presente sezione descrive le procedure di smaltimento e riciclaggio di AKTA start Smantellamento dell attrezzatura AKTA start deve essere decontaminato prima dello smantellamento Seguire le normative locali in merito alla rottamazione dell attrezzatura Smaltimento istruzioni generali Quando lo strumento AKTA start viene messo fuori uso i vari materiali devono essere separati e riciclati secondo le normative ambientali locali e nazionali Riciclaggio delle sostanze pericolose AKTA start contiene sostanze pericolose Informazioni dettagliate sono disponibili presso il rappresentante GE Smaltimento dei componenti elettrici rifiuti che contengono apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti urbani indifferenziati ma devono essere raccolti separatamente Contattare un rappresentante autorizzato del costruttore per informazioni relative allo smantellamento dell attrezzatura KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 33 3 Descrizione del sistema 3 Descrizione del sistema Informazioni sul capitolo Questo capitolo offre una panoramica di KTA start del display dello strumento che consente all utente di operare e controllare il sistema e di Frac30 Collettore frazioni In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni
9. Cell Temperature g 4 Enable Temperature Compensation 2 Prendere nota della temperatura attuale della soluzione di calibrazione nella Conductivity flow cell come visualizzato nel campo Cell Temperature 3 Nella schermata Calibration impostare il valore teorico di conduttivit in base alla temperatura attuale nel campo Set Conductivity e poi selezionare Calibrate per eseguire la calibrazione della conduttivit Nota e Se viene usata una soluzione di conduttivit standard certificata utilizzare il valore teorico di conduttivit fornito corrispondente alla temperatura in questione e Se viene usata una soluzione di calibrazione da 1 00 M NaCl preparata manualmente ricavare il valore di conduttivit alla temperatura attuale dal grafico di conduttivit di 1 00 M NaCl come funzione della temperatura indicata di seguito 108 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor Grafico del valore di conduttivit Il grafico sottostante mostra il valore di conduttivit alla temperatura attuale quando si utilizza la soluzione di calibrazione 1 00 M NaCl Conductivity of 1 00 M NaCl at 20 30 C
10. Passo Operazione 3 Nella schermata Conductivity selezionare Advanced calibration Risultato Si apre la schermata Advanced calibration Advanced calibration Set actualtemp 250 Ae C Calibrate GEHC service only Cell resistance Ohms Calibrate sine gen a a 4 Prendere nota della temperatura e digitarla nel campo Set Actual Temp quindi selezionare Calibrate per eseguire la taratura della temperatura Nota Assicurarsi che la temperatura della Conductivity flow cell si sia stabilizzata e poi misurare la temperatura della soluzione di calibrazione con un termo metro di precisione Nota La procedura Calibrate Sine Gen deve essere eseguita esclusivamente da un tecnico dell assistenza GE quando viene sostituita la scheda madre Calibrare il Conductivity flow cell Requisiti preliminari Soluzione di calibrazione 1 00 M NaCl o 100 mS cm soluzione di conduttivit standard Attenersi alle istruzioni che seguono per calibrare la Conductivity flow cell Passo Operazione 1 Nella schermata Conductivity selezionare Calibration Conductivity Calibration Configuration calibration KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 107 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor Passo Operazione Risultato Si apre la schermata Calibration Calibration Set Conductivity RM sco PS mS cm Calibrate
11. e Sample valve e Wash valve 2 3 Settings and service Q Next e Outlet valve 52 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service Opzione Funzione Settings and service Schermata 3 Permette all utente di eseguire la calibrazione la diagnostica la confi gurazione e o la risoluzione dei problemi dei moduli poe Main board Scheda madre Settings and service si UV 3 3 ETE 3 Display Display Conductivity Settings and service Schermata 1 Le opzioni disponibili per i moduli visualizzati nella Schermata 1 Settings and service sono brevemente descritte di seguito NM ele V 0 Funzione Fraction collector Collettore frazioni Enable Frac Disable Frac attiva di sattiva il collegamento del collettore Fraction collector frazioni il gruppo bacinella ruota corretta mente Esegue un test Home per ve rificare che il gruppo bacinella ritorni in posizione iniziale Home Diagnostics i Diagnostics esegue un test di Disable Frac Na avanzamento tubo per verificare se Back Run log per vedere il numero di ore che il comando collettore stato at tivo per azzerare il numero di ore del comando usato KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 53 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Set
12. KTA start selezionare Settings and service Risultato Si apre la schermata 1 dell opzione Settings and service Settings and service Pressure sensor Fraction collector 1 3 A Net Selezionare System Risultato Si apre la schermata System System Serial 00000000000000000001 i Delay volume Firmware update setting Re Export system Switch valve timing report to USB A Selezionare Switch valve timing Risultato Si apre la schermata Switch valve timing Selezionare Switch valve timing B per portare la Switch valve timing a 5 Sec Switch valve timing G Switch valve timing A Default Switch valve timing B Advanced timing Back gt Selezionare Save per salvare la fasatura cambiata KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 4 Switch valve timing Passo Operazione 6 Se i gradienti ondulati persistono o se le oscillazioni dei livelli di gradiente a scalino sono eccessive selezionare Advanced timing per impostare una fasatura della valvola di commutazione diversa da Switch valve timing A e Switch valve timing B Switch valve timing 2i Switch valve timing A Default Switch valve timing B Advanced timing Switch valve time Sec Back Nota Si raccomanda di utilizzare la Advanced timing se le opzioni alternative a Switch
13. e Tubazionee connettori e Utensile di taglio tubazione Istruzioni Per la sostituzione di tubazione e raccordi seguire le istruzioni indicate di seguito Nota Per sostituire la tubazione della pompa tubazione Marprene M codice parte 29 0240 12 seguire le istruzioni riportate nel KTA start Maintenance Manual Nota Per sostituire la tubazione che collega il monitor UV al monitor Con ductivity utilizzare la tubazione pre piegata fornita con il sistema Passo Operazione 1 Svitare i raccordi e scollegare la tubazione Se la tubazione ha delle etichette rimuoverle ed utilizzarle successivamente con la nuova tubazione Eliminare la tubazione e i raccordi usati 254 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 8 Sostituzione della tubazione e dei filtri 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi Passo Operazione 3 Tagliare la nuova tubazione alla stessa lunghezza di quella originale Utiliz zare un cutter specifico per tubazioni in modo da ottenere un angolo di taglio diritto ATTENZIONE Lesioni da taglio Il tagliatubi molto affilato e deve essere utilizzato con attenzione per evitare di ferirsi Nota Quando si sostituisce la tubazione del sistema mantenere il diametro interno e la lunghezza originali per essere sicuri di preservare i corretti volumi di ritar do Le tubazioni di ingresso e uscita se necessario possono essere accorciate 5 Applicare l
14. 210 190 A 170 AutoZeroU gt OutletValve Waste gt i T aste Wast 2 AutoZeroUV gt e o FF Hold 5 6 2013 4 57 35 PM 05 30 gt 2 1 0 2 D N co w Be lt Pra KTA start utilizzando la Outlet valve senza Frac30 Di seguito viene mostrato un cromatogramma rappresentativo tramite Outlet valve in AKTA start senza Frac30 168 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 2 Frazionamento se i Method Run 5 6 2013 5 32 58 PM 05 30 Method workflow_5 Result co ollection started w Hold 5 6 2013 5 35 03 PM 05 30 Outletvalve Waste gt AutoZeroU gt A 3 D N 2 3 ji 1 0 5 0 0 5 1 1 5 2 2 5 3 3 5 4 4 5 5 5 5 6 6 5 F 7 5 8 8 5 Nota e Il volume 0 27 ml UV per Outlet valve costante per tutti gli strumenti KTA start se si utilizzano provette della lunghezza e d i consigliati e Utilizzare tubazioni PEEK della lunghezza e d i raccomandati da UV a Outlet valve per evitare calcoli errati del volume di ritardo e Cambiare la lunghezza e il d i della tubazione PEEK Settings and service System Delay volume setting qualora la tubazione non fosse della lunghezza e d i consigliati KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 169 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo ma
15. 273 S Scopo del presente documen to 8 Specifiche 276 Spegnimento 206 Stoccaggio 205 Superloop collegamento 144 Switch valve timing impostazioni 124 1 Tubazione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF sostituire la tubazione 254 U UNICORN start panoramica 223 UV flow cell lunghezza del percorso del la cella di flusso 100 pulizia 241 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Indice UV Monitor UV LED calibrazione 102 V Valutazione di un ciclo 204 W Washout fractionation tubing istruzioni 136 299 Pagina lasciata vuota intenzionalmente Per contattare gli uffici locali visitare il sito www gelifesciences com contact GE Healthcare Bio Sciences AB Bj rkgatan 30 751 84 Uppsala Svezia www gelifesciences com AKTA GE e GE monogram sono marchi di fabbrica di General Electric Company AKTA HiPrep HiTrap Superloop e UNICORN sono marchi di fabbrica di General Electric Company o di una delle sue consociate Decon un marchio di Decon Laboratories Ltd Deconex un marchio di Borer Chemie AG Zuchwil Switzerland Eppendorf un marchio di Eppendorf AG Falcon un marchio di Becton Dickinson and Company Macintosh un marchio di Apple Inc Marprene un marchio di Watson Marlow Limited Microsoft and Windows sono marchi di fabbrica di Microsoft Corporation Triton un marchio di Union Carbide Chemicals and Plastic Company Inc Tw
16. Manual KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 267 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Descrizione Il collettore di fra zioni non raggiun ge l homing all av Causa possibile Il collettore di fra zioni non collega to allo strumento Operazione Collegare il collettore di frazioni a KTA start vio del ciclo Opzione collettore Attivare l opzione collettore di frazioni di frazioni non atti dalla schermata Settings and service vata Buffer valve Sample valve Wash valve Outlet valve Descrizione Causa possibile Operazione Perdita esterna Collegamenti delle Verificare i collegamenti della tubazione tubazioni Se necessario serrarli o sostituirli Sostituire la valvola Fare riferimento a KTA start Maintenance Manual Perdita interna Le parti interne possono essere usurate Contropressione Percorso di flusso alta non pulito Pulire il percorso di flusso del sistema Vedere la sezione Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 Sostituire la valvola Fare riferimento a KTA start Maintenance Manual Valvola non in posi Le parti interne zione di commuta possono essere SOng usurate Se la valvola non funziona neanche dopo la sostituzione contattare un tecnico dell assistenza GE Injection valve Descrizione Causa possibile Operazione La valv
17. Run parameters Elution option socratic Gradient r 3 ConcB 100 Elution volume v 5o ae CV volume BoB volume AN lt gt 9 e Impostare i parametri ciclo per Elution Option configurata come Isocra tic Conc B concentrazione di tampone B per eluire la proteina legata Elution volume volume necessario per eluire la proteina legata della colonna Fractionation volume volume della frazione da raccogliere quando il collettore di frazioni attivato oppure Run parameters Elution option isocratic Gradient r Target conc B v 100 A Gradient volume CV volume vole w A KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 193 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates Passo Operazione e Configurare i parametri ciclo per Elution Option impostata come Gra dient le proteine legate sono eluite con un cambio continuo di compo sizione tampone B per aumentare la forza dell eluente in un tempo specificato Target conc B massimo livello di concentrazione del tampone B da impostare nel gradiente Gradient volume volume necessario per eluire la proteina legata della colonna Fractionation volume volume della frazione da raccogliere quando il collettore di frazioni attivato e Selezionare la freccia indietro per visualizzare o modificare i parametri ciclo e Selezionare Run per iniziare
18. Selezionare Yes per confermare la cancellazione dei file selezionati o selezio nareNo per annullare l operazione e tornare all elenco dei file KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 217 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB Introduzione AKTA start offre all utilizzatore la possibilit di memorizzare i dati dei risultati su un dispo sitivo di memoria USB La chiavetta di memoria USB viene usata per salvare un risultato un file BMP ed anche per trasferire metodi tra lo strumento e UNICORN start La chiavetta di memoria USB viene usata anche per creare un report degli errori di sistema Nota e file dei risultati saranno salvati nella cartella GE che viene creata automaticamente dallo strumento quando si inserisce la chiavetta USB e Nella cartella GE si possono salvare solamente 10 file di risultati Per salvare altri risultati trasferire i file dei risultati in un altra car tella PC oppure rinominare la cartella GE Archiviare il risultato in una chiavetta USB Per memorizzare i risultati generati in AKTA start su una chiavetta di memoria USB atte nersi alle istruzioni riportate di seguito Passo Operazione 1 Collegare una chiavetta di memoria USB allo strumento tramite la porta USB Avviare un Manual run o un Method run Nella schermata Run parameters
19. deve essere maneggiato con attenzione per evitare di ferirsi e Sostanze pericolose Quando si usano sostanze biologiche e chimiche pericolose adottare tutte le misure protettive adegua te per es indossando guanti e occhiali di protezione resistenti a tali sostanze Rispettare le normative nazionali e o locali rela tive alla sicurezza di utilizzo manutenzione e dismissione del sistema 20 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza Installazione e movimentazione dello strumento AVVERTENZA Per evitare lesioni personali durante l installazione o lo spostamento di AKTA start osservare le seguenti istruzioni e Spostamento dello strumento in direzione orizzontale Per spostare lo strumento in senso orizzontale richiesta una persona e Tensione di alimentazione Prima di collegare il cavo di alimen tazione assicurarsi che la tensione di alimentazione della presa a muro corrisponda alla marcatura indicata sullo strumento e Cavodialimentazione Usare unicamente i cavi di alimentazio ne a massa forniti o approvati da GE e Accessoall interruttore di avviamento e al cavo di alimenta zione con spina Non bloccare l accesso all interruttore di ali mentazione e al cavo di alimentazione L interruttore di alimen tazione deve essere sempre facilmente accessibile Il cavo di alimentazione e la presa devono essere sempre facili da scolle gare
20. i Milicia 228 0 IRE 229 8 1 Manutenzione TEJOJ E nat 230 8 2 Pulizia prima della manutenzione assistenza programmata inn 234 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema u 255 8 3 1 SCOlIC00 G000 iis 23r 8 3 2 Svetem clon PR A EE EA 238 oe POGGI rc 241 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell nr 243 Go Ate procedure di ZO 244 8 6 1 Pulizia dei filtri d INgresso iiiiii 245 8 6 2 Pulizia esterna dello strumento lla 246 3 6 3 Pulizia del collettore OFIFOZIONI scri 247 8 7 Stoccaggi dello UNNI anno 250 4 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Sommario 8 8 SOSTITUZIONE della tubazione e dei filtri a 252 8 8 1 Sostituire i filtri d INgreSso iiiiii 293 8 8 2 Sostituire le tubazioni raco di ria 254 9 Eliminazione dei guasti eeeseseeseeseessessessesserserseeseeseeeseesessceseeseeseessessesseeseeseesss 256 9 1 Introduzione alla risoluzione dei problemi sssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssssrsssrssrrrrerrrrrrrenn 257 9 2 Risoluzione dei problemi GIS 260 93 Reportaegli errori di Sistema lire 213 10 Informazioni di riferimento o rrtrerrrerereee eee neeee nese eine zine zizi zizzezinienee 275 li Pill 276 102 PESberRZe CNIC iano 282 gt Odia 285 10 4 Modulo di dichiarazione di salute SICUFEZZO sssssssssssssssessrssierirersrrrrsesrssssssssssssssessesrrserren 286 10 5 Informazi
21. spuntare la casella di controllo Save re sults to USB in modo da salvare sulla chiavetta di memoria USB i risultati ottenuti Quando il ciclo stato completato i risultati sono salvati in una cartella GE Viene anche creato un file dei risultati in formato BMP Pertanto il cromato gramma pu essere consultato senza usare UNICORN start Esportare i risultati in UNICORN start per poter vedere il cromatogramma e valutarlo Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB non venga tolta durante il ciclo Per ulteriori informazioni vedere Cosa fare e cosa non fare nell uso della chiavetta di memoria USB a pagina 219 218 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB Cosa fare e cosa non fare nell uso della chiavetta di memoria USB Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia completamente inserita nello stru mento La capacit massima supportata dalla chiavetta USB di 32 GB Uno spazio libero minimo di 1 GB richiesto per eseguire le operazioni di lettura scrittura supportato solo il file system FAT32 e di questo si deve tener conto durante la for mattazione della chiavetta Staccare la chiavetta di memoria USB solo quando il display dello strumento si trova nella schermata iniziale Home preferibile conservare un numero minimo di file sulla chiavetta di memoria Q
22. strumenti AKTA start se si utilizzano provette della lunghezza e d i consigliati Nota Accertarsi di utilizzare tubazioni PEEK della lunghezza e d i consigliati da UV a Outlet valve per evitare calcoli errati del volume di ritardo KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 9 Operazioni in camera fredda 5 9 Operazioni in camera fredda Introduzione quando si purificano biomolecole che sono sensibili alla temperatura i cicli romatogra fici vengono eseguiti in una camera fredda Preparazione Per preparare lo strumento per un ciclo in camera fredda seguire le istruzioni riportate di seguito Passo Operazione 1 Posizionare AKTA start nella camera fredda 2 Se un computer UNICORN start connesso allo strumento lasciare quest ul timo all esterno del locale freddo 3 Consentire allo strumento di stabilizzarsi alla temperatura della camera fredda 4 Serrare tutti i raccordi e pompare acqua DM nel sistema per verificare se ci sono perdite 5 Serrare i raccordi che perdono Avvio di un ciclo Prima di avviare un ciclo assicurarsi che la temperatura dei tamponi abbia raggiunto quella impostata nell ambiente freddo Nota La temperatura misurata del sistema quella registrata nella Conduc tivity flow cell che pu differire dalla temperatura ambiente Rimozione dalla camera fredda Per rimuovere lo strumento dalla camera fredda seguire le i
23. to scaricare l alcol denaturato Nota AKTA start con l imballaggio pesa circa 12 kg Non necessario alcun apparecchio di sollevamento una sola persona infatti in grado di spostare lo strumento Passo Operazione 1 Aprire la scatola tagliando il nastro adesivo sulla parte superiore della stessa KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 65 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 2 Togliere il documento che si trova alla sommit dell imballaggio e leggere le Unpacking Instructions Nota Conservare tutti i documenti per riferimento in futuro AKTA start 3 Togliere la scatola posta alla sommit dell imballaggio La scatola contiene gli accessori forniti con lo strumento AKTA start 66 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 4 Tenendo la fascetta rossa estrarre lo strumento dalla scatola 5 Aprire il fermo della fascetta e togliere quest ultima KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 67 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 6 Rimuovere l imbottitura in espanso dalla parte superiore dello strumento 7 Rimuovere l imbottitura in espanso anche dalla parte inferiore dello strumen to sollevando con cautela quest ultimo 68 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 02
24. 0270 57 AF 203 6 Operazioni dal display dello strumento 6 5 Operazioni successive al ciclo 6 5 Operazioni successive al ciclo Introduzione Questa sezione descrive brevemente e Come valutare la registrazione di un risultato e Come pulire lo strumento dopo un ciclo e Come preparare il sistema per lo stoccaggio se non si utilizza lo strumento per un certo periodo Lo strumento e le colonne devono essere pulite tra le corse Ci impedir per esempio il trasferimento e la contaminazione incrociata tra campioni la precipitazione delle proteine e l intasamento della colonna o del percorso di flusso Per ulteriori informazioni sulle procedure di pulizia e Manutenzione vedere il Capitolo 8 Manutenzione a pagina 229 Valutazione di un ciclo Al termine di un ciclo cromatografico il risultato memorizzato in una chiavetta di memoria USB pu essere trasferito in UNICORN start dove pu essere visto e valutato Il risultato contiene la registrazione completa del ciclo compreso il metodo le impostazioni del si stema il cromatogrammae il registro del ciclo Il risultato pu anche essere visto usando il file dei risultati BMP che viene creato e Memorizzato nella chiavetta di memoria USB Per ulteriori dettagli vedere il Sezione 6 6 3 File dei risultati BMP a pagina 221 Le istruzioni dettagliate per il trasferimento del risultato sono riportate nella Sezione 6 6 Gestione di metodi e file a pagina 207 Le istruzioni dettagliate
25. 6 3 Pulizia del collettore di frazioni Rimozione del porta provette Nota Il porta provette non deve essere aperto dall utilizzatore Se necessario rimuovere il porta provette dal gruppo bacinella per la pulizia Per smontare e poi riposizionare il porta provette nel gruppo bacinella seguire le istru zioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Per rimuovere il porta provette aprire le chiusure a scatto una ad una ed in sequenza per facilitare la rimozione 2 Per montare il porta provette sul gruppo bacinella e Allineare il supporto aiutandosi con l apposita tacca di riferimento e Chiudere a pressione la parte azionando un elemento a scatto alla volta in sequenza continua premendo sul bordo della parte interessata KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 249 8 Manutenzione 8 7 Stoccaggio dello strumento 8 7 Stoccaggio dello strumento Materiale richiesto Sono necessari i seguenti materiali e Acquademineralizzata DM e Etanoloal 20 e Tubazione PEEK d i 0 75 mm e Contenitore di smaltimento Conservazione a breve termine Se non si deve utilizzare il sistema per qualche giorno seguire le istruzioni indicate di seguito per preparare il sistema per lo stoccaggio a breve termine Nota Prima di pulire il percorso di flusso rimuovere la colonna e poi ricolle garla al percorso di flusso Vedere Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagina 237 Passo Operazione 1 Immergere il ta
26. AKTA Elenco accessori Parte Descrizione accessori Codice n Marprene Tubing 29 0240 12 Peristaltic Pump 29 0239 92 Elettrovalvola Buffer valve 29 0238 95 Sample valve 29 0238 96 Wash valve 29 0238 97 Outlet valve 29 0238 98 Manuale Injection val Injection valve Manual 29 0239 58 i Valve kit Manual INV 29 0239 17 Mixer Mixer KTA start 29 0239 60 UV UV module KTA start 29 0240 18 Flow Cell 2 mm UPC 900 29 0113 25 Conductivity Conductivity Cell KTA start 29 0240 21 Cicli campione Sample Loop PEEK 10 pil 18 1120 39 Sample Loop 100 pl INV 907 18 1113 98 Sample Loop 500 pl INV 907 18 1113 99 Sample Loop 1 0 ml INV 907 18 1114 01 Sample Loop 2 0 ml INV 907 18 1114 02 Sample Loop 5 ml PEEK 18 1140 53 Sample Loop 18 1161 24 Superloop M Superloop 10 ml KTA 18 1113 81 Superloop 50 ml KTA 18 1113 82 Superloop 150 ml 18 1023 85 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 10 Informazioni di riferimento 10 5 Informazioni su come effettuare gli ordini Parte Descrizione accessori Codice n Raccordi Tubing Connector 1 8 18 1121 17 Ferrule for 1 8 tubing 18 1121 18 Union Luer Female HPLC Male 18 1112 51 Fingertight Connector 1 16 18 1112 55 Stop plug 1 16 PKG 5 18 1112 52 Stop plug 5 16 PKG 5 18 1112 50 Union 1 16 female 1 16 female for 18 3855 01 1 16 o d tubing titanium Union Valco F
27. Classe A ai sensi della Parte 15 delle Norme FCC Questi limiti vengono stabiliti per fornire una protezione ragionevole contro le interferenze dannose quando l appa recchiatura viene utilizzata inun ambiente commerciale Questa appa recchiatura produce utilizza e pu irradiare frequenze radio e se non installata e usata in base a quanto indicato nel manuale di istruzioni pu provocare interferenze dannose nelle comunicazioni radio L uti lizzo di questa apparecchiatura in una zona residenziale pu provocare interferenze dannose nel qual caso l utente dovr provvedere a risol vere l interferenza a sue spese Conformit normativa dell attrezzatura collegata Eventuali apparecchiature collegate al sistema AKTA start dovranno rispettare i requisiti di sicurezza previsti dalla normativa EN 61010 1 CEI 61010 1 o dalle norme armonizzate di rilievo All interno dell UE le apparecchiature collegate devono avere il marchio CE Conformit ambientale Requisito Descrizione 2011 65 EU Direttiva sulle Restrizioni d uso di sostanze pericolose RoHS 2012 19 EU Direttiva sui rifiuti provenienti da apparecchiature elettriche ed elet troniche WEEE Waste Electrical and Electronic Equipment ACPEIP Administration on the Control of Pollution Caused by Electronic Infor mation Products Amministrazione sul controllo dell inquinamento proveniente da prodotti elettronici informatici Restrizioni cinese sull uso di sostanze per
28. Disconnect the column 2 Connect injection valve to UY with suitable tubing and connectors 3 Place the buffer tubings A amp B in cleaning solution When completed press Continue 7 Quando il ciclo stato completato selezionare Exit per chiudere la schermata System cleaning Nota e Non lasciare NaOH nello strumento per evitare di danneggiare il sistema Lavare l intero percorso di flusso con acqua e Al temine del lavaggio con acqua controllare il pH per essere sicuri di aver eliminato ogni traccia di NaOH System cleaning in progress UY absorbance mAU Conductivity 0 mS cm Flow rate 0 ml min Pressure MPa Tube no Edit run 240 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 4 Pulitura della cella di flusso UV 84 Pulitura della cella di flusso UV Intervalli di manutenzione Pulire la UV flow cell ogni sei mesi oppure quando necessario Una cella di flusso pulita condizione essenziale per ottenere prestazioni accettabili del monitor UV AVVISO Mantenere pulita la cella di flusso UV Non lasciare che soluzioni contenenti sali disciolti proteine o altri soluti solidi si secchino all interno della UV flow cell Non consentire che particelle entrino nella UV flow cell in quanto potrebbero danneggiarla Soluzioni richieste Sono richieste le seguenti soluzioni e Soluzione detergente soluzione detergente con il 10 di tensioatti
29. F 11 0003 39 Fill port 18 1127 66 Tubazione Inlet tubing Kit KTA start 29 0240 32 Complete tubing kit KTA start 29 0240 34 PEEK tubing i d 0 75 mm 1 16 18 1112 53 PEEK tubing i d 1 0 mm 1 16 18 1115 83 PEEK tubing 2 m i d 0 5 mm o d 1 16 18 1113 68 Cavi Mains cable 115 V 19 2447 01 Mains cable 220 V 19 2448 01 Cable Assy OTH USB 29 0240 36 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 10 Informazioni di riferimento 10 5 Informazioni su come effettuare gli ordini Descrizione accessori Inlet filter assembly Codice n 18 1113 15 Inlet filter set 10 Filters Nets 18 1114 42 Screw lid GL45 kit KTA 11 0004 10 Tubing cutter 18 1112 46 Column clamp o d 10 to 21 mm 28 9563 19 Short column holder 18 r115 17 T Slot holders 29 0240 38 Buffer tray KTA start 29 0240 39 Accessory Box 29 0240 37 Istruzioni di funzionamento stampate 29 0270 57 Manuale di manutenzione stampato 29 0603 08 Injection kit 18 1110 89 Software UNICORN start DVD license access code and manual package 29 0187 51 Frac30 KTA start Pezzi di ricambio Frac30 Assembly 29 0230 51 Drive sleeve 19 6067 02 Tubing holder Bowl Assembly Frac30 18 6464 01 29 0240 45 Cable Assembly Frac30 Packaging Kit for KTA start 29 0240 65 Codice n 29 0320 87 Packaging Kit for Frac
30. P MPa A Save Result ACO1 1 3 to USB 4 Una volta completato il ciclo il risultato sar salvato e verr creato un file BMP o I Nota Non staccare la chiavetta di memoria USB mentre la creazione del file BMP in corso 5 Trasferire e collegare la chiavetta di memoria USB ad un computer altrimenti non si potr creare il file immagine Aprire il file BMP creato e consultare o stampare il risultato KTA start Result DS04 UV 165 Frac Mark 180 UV Absorbance mAU 0 0 34 68 10 2 13 6 17 0 20 4 23 8 27 2 30 6 Volume ml 222 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 7 Operazioni controllate da UNICORN start 7 Operazioni controllate da UNICORN start Informazioni sul capitolo Il presente capitolo prende brevemente in esame i quattro moduli di UNICORN start System Control Method Editor Evaluation e Administration In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 7 1 System Control 224 7 2 Method Editor 226 7 3 Evaluation 227 7 4 Administration 228 Introduzione UNICORN start fornisce le seguenti funzionalit Creazione semplice e flessibile di metodi Facilit di controllo del sistema per mezzo di immagini di processo e monitoraggio in tempo reale dei cicli manuali e con metodo Capacit di valutazione e comparazione dei risultati Creazione di rapporti di stampa in PDF Capacit di gesti
31. Sample inject l Turn the Manual Injection Valve to Inject position to inject the sample and then tap Continue Nota Prima dell avvio del ciclo accertarsi che la Injection valve sia in posizione Load Dopo aver cambiato manualmente la posizione confermare il messaggio selezionando Continue Portare la posizione della Injection valve in Load quando appare la seguente schermata sul display dello strumento Sample inject Turn the Manual Injection Valve to Load position and then tap Continue Il campione sar iniettato sulla colonna quando la Injection valve commu tata manualmente in posizione Inject to column durante il ciclo AKTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Passo Operazione 8 Dopo aver cambiato manualmente la posizione della Injection valve con fermare il messaggio selezionando Continue KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 153 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 8 Preparazione del collettore di frazioni 5 8 Preparazione del collettore di frazioni Preparazione del collettore di frazioni Le frazioni sono raccolte in provette per mezzo del collettore di frazioni Per preparare il collettore di frazioni qualora lo si debba usare durante un ciclo seguire le istruzioni indicate di seguito seguenti tipi di provette possono essere messi nell apposito supporto del gruppo
32. a 380 MAU Sample valve Sample Livello conduttivi da 65 a 95 mS cm t Max 7 1 ml min su posizione Sample valve Buffer 10 Richiesta commutazione Livello UV Max da 300 a 380 MAU Injection valve per posizio ne Inject Livello conduttivi da 65 a 95 mS cm t max 13 Richiesta commutazione Injection valve nuovamen te in posizione Load 15 Gradiente iniziale da 0 a 100 B in 10 minuti avvio frazionamento raccolta KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 293 11 Appendice 11 1 Report sulle prestazioni del sistema Attivit Verificare Intervallo approvato Osservazioni Fine frazionamento 1 Pesare frazione da 0 80 1 2g n 2 3e4 Differenza max 0 1g tra frazioni Fine raccolta Pesare il becher da 4 20 5 8 g Fine gradiente restare a Gradiente Diretto nessuna indi 100 B cazione negativa 50 B Livello gradiente da 45 a 55 B 3 0 B ristabilizzazione Fine Verificare se ci Nessuna perdita sono perdite dai collegamenti tutti 1 Con collettore di frazioni 2 Senza collettore di frazioni 3 UV 50 B UV 100 B 294 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Prova eseguita da UNICORN start Attivit 1 ml min 0 B flusso attra verso il punto di scarico Ou tlet valve Ripetere UV Auto zero Verificare Contropressione 11 Appendice 11 1 Report sulle prestazioni del sis
33. baci nella e Provette Eppendorf M 1 5 o 2 ml e Provette da 5 ml 12 x 75 mm e Provette per centrifuga da 10a 12 ml e Provette Falcon 15 ml AVVISO I collettore di frazioni deve essere collegato o scollegato dallo strumento solo quando KTA start spento Nota Assicurarsi che il collettore di frazioni sia correttamente installato Ve dere la Collegare Frac30 a KTA start a pagina 80 Passo Operazione 1 Inserire un numero sufficiente di provette di raccolta nel gruppo bacinella Nota Tutte le provette devono avere la medesima lunghezza e diametro e non ci devono essere spazi vuoti nella sequenza 2 Collegare una tubazione PEEK con d i 0 75 mm alla porta III raccolta della Outlet valve Nota La tubazione deve essere lunga circa 50 cm per assicurare il corretto posizio namento del collettore di frazioni ed il libero movimento del braccio dispensa tore 154 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 8 Preparazione del collettore di frazioni Passo Operazione 3 Allentare il dado del supporto tubazione e inserire la tubazione di uscita nel supporto tubazione infine serrare il dado Nota La tubazione PEEK deve sporgere leggermente all esterno del supporto tuba zione 2 o 3 mm Assicurarsi che la sporgenza della tubazione sia abbastanza corta da evitare urti con le provette durante il frazionamento 4 Inserire il sup
34. controllo Autozero UV se richiesta un linea di base UV a zero e Spuntare la casella di controllo Set event mark se si deve impostare un contrassegno di evento nel cromatogramma e Dopo aver impostato i parametri ciclo selezionare Execute per imple mentare le modifiche 176 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Mettere in pausa il ciclo Per mettere in pausa il ciclo corrente seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo 1 Nella schermata Run view selezionare Pause per mettere temporaneamente in pausa il ciclo arrestando la Pump Run view UY absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS cm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 P eatru end 2 Per proseguire il ciclo selezionare Continue Run paused UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS fcm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edit run End Nota Il ciclo in pausa e non c flusso di liquido nel percorso di flusso perch la Pump ferma KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 177 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo Termine del ciclo Per terminare il ciclo corrente seguire le istruzioni indicate di
35. del display dello strumento 43 Parametri ciclo specifiche 166 Percorso di flusso tubazioni di ingresso e usci ta 87 Pompa installazione tubazione 78 Posizionamento colonna 126 Precauzioni di sicurezza etichette 27 28 introduzione 18 liquidi infiammabili 19 precauzioni generali 18 procedure d emergenza 31 protezione individuale 19 protezione personale 20 230 system performance me thod 111 Pressure sensor Zero offset 96 Prestazioni del sistema criteri di accettazione 116 119 switch valve timing 122 system performance me thod da AKTA start 114 system performance me thod da UNICORN start 119 Procedura di risoluzione dei problemi 257 Procedure di riciclaggio 33 Procedure di emergenza interruzione di corrente 32 spegnimento di emergen za 31 Pulizia Cella di flusso conduttivi t 243 Filtri d ingresso 245 UV flow cell 241 Pulizia del collettore di frazioni 247 Pulizia del sistema 204 238 Pump calibrazione 98 Pump wash A istruzioni 131 Pump wash B istruzioni 134 R Report degli errori di sistema creazione 273 Riciclaggio componenti elettrici 33 di sostanze pericolose 33 istruzioni generali 33 Messa fuori servizio 33 Riempimento circuito di campionamen to 148 del circuito di campionamen to 148 tubazione di campionamen to 145 Risoluzione dei problemi di base 260 Risoluzione problemi Messaggi di informazioni d uso 270 rapporto degli errori di siste ma
36. della conduttivit sulla schermata Run view deve essere lt 1 mS cm KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 243 8 Manutenzione 8 6 Altre procedure di pulizia 8 6 Altre procedure di pulizia Introduzione Questa sezione fornisce le istruzioni per altre procedure di pulizia che devono essere eseguite dall utente di AKTA start In questa sezione 244 La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 8 6 1 Pulizia dei filtri d ingresso 245 8 6 2 Pulizia esterna dello strumento 246 8 6 3 Pulizia del collettore di frazioni 247 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 6 Altre procedure di pulizia 8 6 1 Pulizia dei filtri d ingresso 8 6 1 Pulizia dei filtri d ingresso Intervalli di manutenzione Quando necessario pulire i filtri d ingresso ad esempio quando un controllo visivo evi denzia che i filtri sono ostruiti Soluzioni richieste Sono richieste le seguenti soluzioni e 1M NaOH e Acquademineralizzata DM Istruzioni Per pulire i filtri d ingresso attenersi alle istruzioni che seguono Passo Operazione 1 Togliere la rete di supporto ed il filtro d ingresso dall apposito portafiltro Vedere la sezione Sezione 8 8 1 Sostituire i filtri d ingresso a pagina 253 2 Immergere e lasciare il filtro d ingresso e la rete di supporto in 1 M NaOH per circa 2 ore 3 Togliere il filtro d ingresso e la rete di supporto da
37. di frazioni Passo Operazione l Nella schermata Home di KTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento Risultato Si apre la schermata 1 dell opzione Settings and service Settings and service Fraction collector Pressure sensor i e 1 3 La Next 2 Nella schermata Settings and service selezionare System per accedere alle opzioni di sistema Risultato Si apre la schermata System System Serial 00000000000000000001 less Delay volume Firmware update setting Switch valve timing pesati A 3 Nella schermata System selezionare Delay volume setting per accedere alle impostazioni Risultato Si apre la schermata Delay volume settings Delay volume setting Outlet valve to Fraction collector Tube ID mm Tubelength mm Jo ca Total Delay volume UY to Fraction collector 0 49 ml Back A KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 157 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 8 Preparazione del collettore di frazioni 158 Passo Operazione Inserire il diametro interno DI nel campo Tube ID e la lunghezza della tuba zione dalla Outlet valve al collettore di frazioni nei campi Tube length quindi selezionare Save Risultato Il volume di ritardo totale da UV a collettore frazioni visualizzato nel campo Total delay volume Nota Il volume di ritardo da UV a Outlet valve costante 0 27 ml per tutti gli
38. domestico reperibile in commercio Display Prodotto chimico Tamponi acquosi pH 2 12 Concentrazione N D CAS n CEE n N D Decon90 1310 58 3 215 181 3 Etanolo 64 17 5 200 578 6 Acido cloridrico 7647 01 0 231 595 7 Isopropanolo 67 63 0 200 661 7 Cloruro di sodio 7647 14 5 231 598 3 idrossido di sodio 1310 73 2 215 185 5 Triton X 100 9002 93 1 Tween 20 9005 64 5 500 018 3 Spray con detergente domestico reperibile in commercio 284 N D KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 10 Informazioni di riferimento 10 3 Documenti 10 3 Documenti Per ulteriori informazioni relative a AKTA start consultare i seguenti documenti e AKTA start Maintenance Manual e UNICORN start 1 0 User Manual e AKTA start System Cue Card e KTA start Maintenance Cue Card e Filedi dati KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 285 10 Informazioni di riferimento 10 4 Modulo di dichiarazione di salute e sicurezza 10 4 Modulo di dichiarazione di salute e sicurezza Assistenza in situ On Site Service Health amp Safety Declaration Form To make the mutual protection and safety of GE service personnel and our customers all equipment and work areas must be clean and free of any hazardous contaminants before a Service Engineer starts a repair To avoid delays in the servicing of your equipment please complete this checklis
39. il ciclo Risultato Verr visualizzata la schermata Run view Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS cm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edit run End Nota Il ciclo ha inizio con un lavaggio pompa predefinito Il lavaggio pompa viene eseguito a 10 ml min per 1 min con 30 sec di lavaggio tampone B seguiti da 30 sec di lavaggio tampone A Edit run disattivato con lavaggio pompa in corso Nel corso del lavaggio pompa il flusso diretto attraverso la Wash valve verso Waste Filtrazione su gel scambio Dissalazione Tampone 194 Per avviare un ciclo in base a Gel Filtration o Desalting attenersi alle istruzioni indicate di seguito Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento Se lo strumento rileva la chiavetta USB il risultato non sar salvato Nota Prima di avviare il ciclo impostare lo stato del collettore frazioni su attivato o disattivato in base alle necessit KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates Passo Operazione 1 Method run User defined Prepare system L Nella schermata Method run selezionare Templates per accedere ai modelli di metodo predefiniti Templates Affinity AC Desalting buffer exchange DS O lon exchange IEX Gel filtration G
40. la Pump non in funzione Monitor UV e Seilsegnale instabile o le letture sembrano non essere corrette e Dopo la pulizia o la sostituzione della UV flow cell e Quando si rileva un errore avvertenza all ac censione e Quando la linea base ignorata con UV flow cell pulita e Prima e dopo l esecuzione di cicli in camera fredda 92 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 1 Guida alla calibrazione Modulo Quando eseguire la calibrazione Monitor Conductivity Se il segnale instabile o le letture sembrano non essere corrette Dopo la sostituzione della Conductivity flow cell KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 93 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 2 Calibrazione display strumento 5 3 2 Calibrazione display strumento Istruzioni Per calibrare il display dello strumento seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione i Nella schermata Home di AKTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento Selezionare Next Next per accedere alla 3a schermata Risultato Verr visualizzata la schermata Settings and service Settings and service da Display Conductivity 3 3 2 Nella schermata Settings and service selezionare Display per accedere alle opzioni touch screen Risultato Si apre la schermata Display Touch screen Colo
41. lunghezza 17 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF Da Injection valve a colonna Tubazione in PEEK lunghezza 15 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF Da colonna a UV Tubazione in PEEK lunghezza 15 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF UV Conductivity Tubazione in PEEK lunghezza 20 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF Conductivity Outlet valve Tubazione in PEEK lunghezza 19 cm d i 0 50 mm raccordi 10 32 UNF Outlet valve Frac30 Tubazione PEEK lunghezza 50 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF Tubazione Waste Tubazione in ETFE lunghezza 60 cm d i 1 0 mm raccordo da 1 16 serrato a mano Tubazione Sample Tubazione in ETFE lunghezza 25 cm d i 1 0 mm connettore serrato a mano 1 16 Livello acustico apparecchiatura Parametro Livello acustico KTA start lt 60 dB A Condizioni ambientali Parametro Gamme delle temperature di stoccaggio Da 25 C a 60 C e trasporto Condizioni chimiche Da 20 a 80 senza condensa KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 277 10 Informazioni di riferimento 10 1 Specifiche Gamma di funzionamento Parametro Gamma delle temperature di esercizio Da 4 C a 35 C Umidit relativa Da 20 a 80 senza condensa Pump Parametro Tipo di pompa Pompa peristaltica Canale singolo testa pompa a quattro rulli con bassa pulsazione Portata da 0 5 a 5 ml min intervallo di funzionamento 10 ml
42. min flusso di lavaggio Specifiche portata e Accuratezza Portata lt 1 ml min Portata gt 1 ml min e Precisione Portata lt 1 ml min 15 Portata gt 1 ml min 10 Condizione da 0 8 a 2 cP e tubazione fluido fresco pompa Gamma delle pressioni da 0 a 0 5 MPa 5 bar Gamma delle viscosit da 0 6 a 5 cP Mixer Parametro Principio di miscelazione Mixer statico Volume del mixer 0 4 ml 278 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Valves Buffer Sample Wash e Outlet Parametro Tipo 10 Informazioni di riferimento 10 1 Specifiche Valvola di commutazione tipo a solenoide Numero di porte Injection valve Parametro Tipo di Buffer valve e Sample valve 5 08 cm 1 out e Wash valve e Outlet valve 1 in 2 out Valvola manuale tipo rotante Funzione Iniezione campione attraverso il Loop Numero di porte Gradient formation Parametro Gamma delle portate del gradiente 6 porte da 0 5 a 5 ml min Composizione del gradien te accuratezza Pressure sensor Parametro Posizione del sensore 5 Condizioni dal 5 al 95 B da 1 a 5 ml min da 0 8 a 2 cP e tubazione fluido fresco pompa I Pressure sensor situato dopo la Pump Gamma da 0 a 0 5 MPa 5 bar Precisione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 0 05 MPa 279 10 Informazioni di riferimento 10 1 Speci
43. necessario sostituire i filtri d ingresso ad esempio quando un controllo visivo evidenzia che i filtri sono ostruiti o danneggiati Elementi necessari Sono necessari i seguenti elementi J filtri d ingresso e reti di supporto Nota Nel kit accessori compreso un set di filtri d ingresso che contiene questi ultimi e le reti di supporto Istruzioni Per sostituire un filtro d ingresso ed una rete di supporto seguire le istruzioni indicate di seguito Nota I filtri d ingresso sono montati sulla tubazione d ingresso all estremit Passo che sar immersa nella soluzione tampone Operazione 1 Togliere la rete di supporto ed il filtro d ingresso dall apposito portafiltro RETI EERE Montare la rete di supporto e il filtro d ingresso nuovi e premere il filtro in posizione nel relativo supporto KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 253 8 Manutenzione 8 8 Sostituzione della tubazione e dei filtri 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi Intervalli di manutenzione Sostituire la tubazione e i raccordi quando necessario ad esempio quando la tubazione intasata o piegata ostruendo il flusso Nota Prima di iniziare la sostituzione di tubazione e i raccordi pulire il per corso di flusso del sistema con acqua DM quindi togliere la tubazione d ingresso dall acqua Elementi necessari Sono necessari i seguenti elementi
44. persiste sostituire la valvo la circuito Operazione Verificare la tubazione e le valvole staccandone una alla volta Se si ri scontra un ostruzione pulire o sosti tuire Pulire la colonna mezzo di separazio ne con una soluzione adatta 1 M NaOH oppure sostituire la colonna con una nuova Controllare le specifiche della colon na per scegliere la portata corretta Il Pressure sensor non funziona La curva di pressione non viene visualiz zata sullo scher mo Guasto Pressure sensor o guasto di componente della scheda madre KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Contattare un tecnico di assistenza GE 269 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Messaggi di informazioni d uso 270 Descrizione Messaggio di istruzione ignorata Instruc tion ignored not allowed to set the inlets during gradient Causa possibile Questo messaggio appare quando non possibile dare istruzioni durante il Gradient Messaggio evento The instruction Outlet valve is not possible to issue during an active fractionation Questo messaggio appare dopo che il volume di ritardo passato ma non attivo alcun frazionamento Messaggio evento Instruction ignored Stop fractionation is only allowed during fractionation Questo messaggio appare quando l istruzione di Fractionation non stata eseguita l istruzione di Stop fractiona tion verr ingorat
45. riferimento al ma nuale KTA start Maintenance Manual In presenza di una discrepanza del pattern contattare un tecnico dell assistenza GE La retroilluminazio ne del display non funziona corretta mente Guasto del display Allentamento cavo d intefaccia di splay Eseguire un test con la funzione Di splay Diagnostic Backlight test fare ri ferimento al manuale AKTA start Maintenance Manual Verificare se si regi strano variazioni della retroilluminazione o meno Se l intensit non cambia contat tare un tecnico dell assistenza GE KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Curva UV Descrizione Segnale UV distur bato instabilit o deviazione del se gnale Causa possibile Se il livello di distur bo del segnale UV supera i 10 mAU significa che ci so no bolle d aria in trappolate nella cella di flusso 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Operazione Eliminare le bolle d aria dalla UV flow cell lavandola con acqua DM o soluzione tampone Se il problema persiste pulire la UV flow cell Vedere la Sezione 8 4 Pu litura della cella di flusso UV a pagina 241 Tampone non pu ro Verificare se il segnale disturbato anche con acqua DM Aria disciolta nel tampone o bolle d aria presenti nel le tubazioni di in gresso tampone UV flow cell non pulita Degassare il tampone prima dell uso Usare una tecnica disponibile in l
46. seguenti istruzioni AKTA start alla consegna riempito con alcol denaturato 50 C2H50H etanolo La miscela di alcol denaturato pu essere pericolosa per l uomo se ingerita Prima di assemblare testare o integrare AKTA start nell ambiente di processo a cui esso destina to scaricare l alcol denaturato Protezione individuale AVVERTENZA Per evitare situazioni pericolose mentre si lavora con AKTA start utilizzare i seguenti dispositivi di protezione individuale Fuoriuscita di sostanze biologiche L operatore deve fare il possi bile per evitare la fuoriuscita di sostanze biologiche pericolose in prossimit dell apparecchiatura L impianto deve essere conforme al codice di procedura nazionale per la biosicurezza KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 19 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza ATTENZIONE Per evitare situazioni pericolose mentre si lavora con AKTA start utilizzare i seguenti dispositivi di protezione individuale e Durante il funzionamento e la manutenzione di KTA start si raccomanda l uso di dispositivi di protezione individuale ade guati e Rischio di fuoriuscita Quando si utilizza KTA start usare di spositivi di protezione individuale come occhiali protettivi ca mice da laboratorio calzature e guanti di sicurezza per evitare problemi in caso di fuoriuscita e Lesioni da taglio L utensile di taglio per tubi molto affilato e
47. seguito 178 Passo Operazione 1 Nella schermata Run view selezionare End per terminare il ciclo Run view UY absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mSfcm Flow rate 30 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edit run End Risultato Appare una schermata con messaggio che chiede di confermare l apertura dell operazione 2 Message Ah Are you sure you want to end the run Selezionare Yes per confermare di terminare il ciclo o selezionare No per annullare l operazione e tornare alla schermata Run view Nota Quando si termina un ciclo prima del suo completamento il risultato parziale viene memorizzato sulla chiavetta di memoria USB La chiavetta di memoria USB memorizza i file dei risultati che possono essere visualizzati tramite UNICORN start Viene creato anche un file BMP che pu essere visualizzato su un PC Per ulteriori dettagli vedere la Sezione 6 6 3 File dei risultati BMP a pagina 221 Non staccare la chiavetta di memoria USB finch il sistema non genera il rapporto file BMP KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Passo Operazione 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo E Run ended UY absorbance Conductivity Flow rate Pressure Tube no mAU mS cm ml min MPa Selezionare Exit per chiudere la schermata Run ended KTA start Istruzioni di funz
48. seguito per avviare il System performance method dal display dello strumento Nota Collegare una chiavetta USB per salvare i risultati Passo Operazione 1 Dalla schermata Home di AKTA start selezionare Method Run KTA start a Create method Settings and service 2 Nella schermata Method run selezionare Prepare system Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system EI 3 Selezionare System performance method Per avviare il metodo selezionare Select Select system method C System cleaning O System performance method 7 s 2 2 Back Aa 114 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 2 System performance method da AKTA start Passo Operazione 4 Spuntare la casella di controllo in modo da salvare i risultati sulla chiavetta di memoria USB quindi selezionare Run per dare il via alla Prova delle pre stazioni del sistema Nota Attribuire un nome file unico Run parameters 2 System performance method e fg Q Rn 1 1 Risultato Verr visualizzata la schermata Run view Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS cm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edit run End Nota e Siconsiglia di non modificare alcun parametro durante un ciclo per evitare il fallimento della prova e Se necessario i
49. smaltimento e colonna Valve position Turn valve Valve switches Counts Valve switches la casella di testo indica il numero di volte che la valvo la stata commutata Reset azzera i conteggi quando la valvola stata sostituita con una nuova Outlet valve Valve position indica quale raccor do d uscita valvola aperto Waste smaltimento o Collection raccolta Outlet valve Turn valve commuta le due posizio ni della valvola cio le porte d uscita raccolta e smaltimento e collettore frazioni Valve position Turn valve Valve switches Counts Valve switches la casella di testo indica il numero di volte che la valvo la stata commutata Back Ga Reset azzera i conteggi quando la valvola stata sostituita con una nuova KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 57 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service Settings and service Schermata 3 Le opzioni disponibili per i moduli visualizzati nella Schermata 3 Settings and service sono brevemente descritte di seguito Modulo Funzione Main board Scheda madre Power supply indica la tensione reale Main board Memory test esegue un test di me Power supply y moria Memorvcom M Temperature indica la temperatura siii asi la della scheda madre recate M FPGA test esegue un test dell hard Back Q ware FPG
50. sostanze chimiche e le concentrazioni utilizzate sono intese solo per uso a breve termine lt 1 giorno la temperatura ambiente deve essere lt 25 C salvo diversamente indicato Per utilizzo a lungo termine si intende 1 mese max Il percorso di flusso deve resistere alle seguenti sostanze chimiche consigliate Prodotto chimico Tamponi acquosi pH 2 12 Concentrazione CAS n CEE n N D UKo Separazione Acetone 10 67 64 1 200 662 2 Acido acetico 6 1 M 64 19 7 200 580 7 CIP Solfato di ammonio 3M 77 83 20 2 231 984 1 Purificazione dei plasmidi Arginina 2 M 74 79 3 200 811 1 Lavaggio con gel di proteina A refol ding Alcool benzilico 100 51 6 202 859 9 Pulizia e stoccag gio delle colonne Decon 90 1310 58 3 215 181 3 Pulizia Dimetilsulfossido DMSO 67 68 5 200 664 3 CIP RPC separa zione cellulare DTT 100 mM 3483 12 3 222 468 7 Agente riducente DTE 100 mM 6892 68 8 229 998 8 Agente riducente TCEP tris 2 carbossietil fosfi 100 mM 51805 45 9 Agente riducente na EDTA 100 mM 6381 92 6 205 358 3 Additivo tampone Etanolo 96 64 17 5 200 578 6 Conservazione a lungo termine Etilenglicole 30 112 60 7 203 989 9 Additivo tampone Glicerina 30 56 81 5 200 289 5 Additivo tampone Glicina 0 5 M 56 40 6 200 272 2 Pulizia del mezzo legante MAb 282 KTA start Istruzioni di funzionament
51. sottoposto ad assistenza rispettivamente in situ o presso il produttore Copiare il modulo necessario da Sezione 10 4 Modulo di dichiarazione di salute e sicurezza a pagina 286 o stamparlo dal file PDF disponibile sul CD Documentazione Utente 234 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema Introduzione La pulizia del percorso di flusso del sistema viene eseguita per prevenire il trasferimento tra i cicli la contaminazione del percorso di flusso e come protocollo di manutenzione ordinaria La pulizia del percorso di flusso del sistema viene generalmente eseguita tramite i me todi System cleaning o Pump wash Nota Prima di pulire il percorso di flusso del sistema rimuovere la colonna dal percorso di flusso Per istruzioni dettagliate vedere la Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagina 237 AVVERTENZA Agenti biologici pericolosi durante l esecuzione del ciclo Quando si utilizzano sostanze biologiche pericolose prima di eseguire inter venti di assistenza e Manutenzione avviare il metodo System cleaning per lavare l intera tubazione del sistema prima con 1M NaOH e successivamente con acqua distillata L NaOH pu risultare nocivo per la salute evitare fuoriuscite ATTENZIONE Sostanze pericolose Quando si usano sostanze biologiche e chimi che pericolose adottar
52. sulle etichette si riferiscono a sostanze pericolose Rinomina Significato Questo simbolo indica che le apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltite come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccol te separatamente Contattare un rappresentante auto rizzato del fabbricante per informazioni relative allo smantellamento dell attrezzatura KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 29 2 Istruzioni di sicurezza 2 2 Etichette 30 Rinomina Significato Questo simbolo indica che il prodotto contiene delle sostanze pericolose oltre i limiti stabiliti dalla norma ci nese SJ T11363 2006 Requirements for Concentration Limits for Certain Hazardous Substances in Electronic Information Products KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 Istruzioni di sicurezza 2 3 Procedure di emergenza 2 53 Procedure di emergenza Introduzione La presente sezione descrive come eseguire uno spegnimento d emergenza del sistema AKTA start La presente sezione descrive anche le conseguenze della mancanza di ali mentazione Spegnimento in caso di emergenza In una situazione di emergenza Escludere l alimentazione dello strumento premendo l interruttore di alimentazione in posizione O oppure scollegare il cavo di alimentazione dello strumento Il ciclo si inter rompe immediatamente AVVERTENZA Accesso all interruttore di avviamento e al cavo di alim
53. tampone Non posizionare conteni tori con un volume superiore a 1 litro ciascuno sul vassoio tampone Il peso massimo consentito sul vassoio tampone di 5 kg e Fuoriuscita di vaste proporzioni Se si verifica una fuoriuscita importante spegnere AKTA start e scollegare il cavo di alimen tazione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 23 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza AVVISO Per evitare di danneggiare lo strumento AKTA start o altra attrez zatura durante il funzionamento dello strumento osservare le se guenti istruzioni Tenere la UV flow cell pulita Non lasciare che soluzioni conte nenti sali disciolti proteine o altri soluti solidi si secchino all in terno della cella di flusso Non consentire che particelle entrino nella cella di flusso in quanto potrebbero danneggiarla Riempimento preliminare UV flow cell Prima di mettere in funzione il sistema assicurarsi che la UV flow cell sia preventi vamente riempita con liquido Evitare la formazione di condensa Qualora AKTA start venga conservato in una cella frigorifera armadio refrigerato o luogo simile lasciare acceso lo strumento per ridurre al minimo il ri schio di condensa Evitare il surriscaldamento Qualora lo strumento AKTA start venga conservato in un armadio refrigerato che non sia in funzione assicurarsi che anche lo strumento non sia in funzione e lasciare aperta la porta dell armadio refrigerato on
54. tubazione di campionamento col campione prima di avviare il ciclo per essere sicuri che essa sia piena 5 Nella schermata Run parameters impostare il volume di campione e gli altri parametri richiesti Per ulteriori dettagli vedere la sezione Generalit di funzionamento a pagina 165 6 Selezionare Run per iniziare il ciclo KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 147 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Prima di iniettare il campione riempire il circuito di campionamento Un circuito di campionamento consente l iniezione di piccole quantit di campione sulla colonna L applicazione del campione tramite il circuito viene eseguita in due fasi 1 Caricamento del circuito di campionamento con il campione 2 Iniezione del campione dal circuito alla colonna Seguire le istruzioni indicate di seguito per riempire il circuito di campionamento con acqua DM tampone prima di iniettare il campione tramite Injection valve Passo Operazione 1 Riempire una siringa con acqua distillata tampone Nota Assicurarsi che la Injection valve sia impostata in modalit Load Sample 2 Collegare la siringa alla porta 3 della Injection valve J Caricare l acqua distillata tampone nel circuito di campionamento 4 Prima di caricare il campione ripetere i punti da 1 a 3 utilizzando una quantit superiore di almeno 5 volte a quella del volume del circuito 148 KTA start Istruzion
55. volume di ritardo Il volume di ritar Serial 00000000000000000001 i do rappresenta il volume del liquido Delay volume ea che si trova nel percorso di flusso tra setting i UV e le provette di raccolta Switch valve timin Aden RIOLO upaate Aa Oto l k report to USB firmware del sistema Switch valve timing per impostare la fasatura della valvola di commuta zione consigliato per ottimizzare la fasatura della valvola di commuta zione Buffer valve quando si otten gono gradienti ondulati o quando si osservano oscillazioni nel gradiente a scalino durante i test delle presta zioni di sistema o i cicli cromatogra fici Export system report to USB Esporta i registri degli errori di siste ma in una chiavetta di memoria USB in un formato testo Un report degli errori di sistema utile quando si cerca di capire un possibile errore che richiede un intervento di assisten za remoto Nota Il numero di serie visualizzato nella parte superiore sinistra dello schermo del display l identificativo unico dello strumento Tale numero consi derato anche l ID dello strumento quando ci si collega a UNICORN start KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 55 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service Settings and service Schermata 2 Le opzioni disponibili per i moduli visualizzati nella Schermata 2 Settings and service sono brevemente descritte di seguito
56. 30 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 29 0337 03 10 Informazioni di riferimento 10 5 Informazioni su come effettuare gli ordini Strumenti di assistenza Torx driver T10 29 0031 71 Torx driver T20 28 9513 03 Flat screwdriver 56 4656 00 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 291 11 Appendice 11 Appendice Informazioni sul capitolo Questa appendice presenta un modello di Report del System performance method Report deve essere compilato con le osservazioni raccolte durante l esecuzione del Sy stem performance method esguito da KTA start o da UNICORN start In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 11 1 Report sulle prestazioni del sistema 293 292 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 11 Appendice 11 1 Report sulle prestazioni del sistema 11 1 Report sulle prestazioni del sistema Prova eseguita da AKTA start Tempo Attivit Verificare Intervallo approvato Osservazioni min 0 Lavaggio pompa Posizione Wash Fase mobile fuori sca valve la per parametro Wa ste 1 Un flusso pari a 1 ml min Contropressione lt 0 05 MPa 0 B attraversa la posizio ne Outlet valve Waste 2 Ripetere UV Auto zero 3 5 ml min Contropressione da 0 06 a 0 2 MPa Livello UV 10 mAU Livello conduttivi 1 mS cm t 4 1 ml min su posizione Livello UV max da 300
57. 30 a AKTA start seguire le istruzioni indicate di seguito 80 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Passo Operazione l Collegare il cavo Frac30 alle porte corrispondenti nella parte posteriore del collettore di frazioni e dello strumento Nota La tensione di alimentazione per Frac30 distribuita da KTA start Dopo aver collegato il cavo del Frac30 procedere al serraggio delle viti fissate al connettore 2 Accendere AKTA start 3 Attivare la connessione di Frac30 dal display dello strumento e Nella schermata home di KTA start selezionare Settings and service Risultato Si apre la schermata 1 dell opzione Settings and service Settings and service Fraction collector Pressure sensor Pump System 1 3 A Nert KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 81 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Passo Operazione e Nella schermata Settings and service selezionare Fraction collector Risultato Si apre la schermata Fraction collector Fraction collector Enable Frac es Back e Nella schermata Fraction collector selezionare Enable Frac per attivare la connessione del Collettore frazioni Risultato Verr visualizzata la seguente schermata Fraction collector Disable Frac NES Back al Nota Lo stato di accensione del Collettore frazioni
58. 65 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Pump Descrizione Causa possibile Operazione Flusso irregolare Bolle d aria nel Eliminare le bolle d aria intrappolate nel percorso di flusso percorso di flusso lavando quest ultimo con acqua DM o soluzione tampone a seconda della procedura e Rimuovere la colonna e ricollegare il percorso di flusso vedere la sezione Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagina 237 e eseguire un ciclo manuale con una portata di 5 ml min per circa 10 mi nuti e osservare il grafico finch le pulsazio ni scompaiono e la curva diventa stabile Nota In presenza di aria nel percorso di flusso il flusso non preciso e si possono verifi care pulsazioni che influiscono sui segnali di uscita Tubazione della Sostituire la tubazione della pompa Ve pompa usurata dere la sezione Sezione 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi a pagina 254 Portata imprecisa Pump non calibra Tarare la Pump Vedere la sezione Sezio ta ne 5 3 Calibrazioni a pagina 91 La tubazione pom Posizionare la tubazione pompa nella pa non corretta calotta della pompa mantenendo mente posizionata un uguale distanza su entrambi i lati Tubazione della Sostituire la tubazione della pompa Ve pompa usurata dere la sezione Sezione 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi a pagina 254 266 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF D
59. 7 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 4 Calibrazione Pump 5 3 4 Istruzioni 98 Calibrazione Pump Attenersi alle istruzioni che seguono per calibrare la Pump Passo i Operazione Immergere il tampone A della tubazione d ingresso in acqua demineralizzata DM Mettere la tubazione di uscita proveniente dalla Wash valve in una provetta di raccolta pesata preventivamente Nota Prima di iniziare la calibrazione adescare il percorso di flusso con acqua ed accertarsi che la tubazione di uscita sia piena d acqua DM nel punto in cui l acqua pompata viene raccolta In tal modo si sicuri che il volume dell acqua raccolta corrisponda al volume pompato Nella schermata Home di KTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento Risultato Si apre la schermata 1 dell opzione Settings and service Settings and service Fraction collector Pressure sensor E S Next 1 3 Nella schermata Settings and service selezionare Pump per accedere alle opzioni Pump Risultato Si apre la schermata Pump Pump 2 Calibration Pump tubing log Back A KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 4 Calibrazione Pump Passo Operazione 5 Nella schermata Pump selezionare Calibration Risultato Si apre la schermata Calibration Calibration 2 Flow Ra
60. 7 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 1 Selezionare un tipo di metodo Passo Operazione Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system Selezionare uno dei seguenti metodi e Quick start e Templates e User defined e Prepare system KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 183 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 2 Quick start 6 4 2 Quick start Introduzione Quick start contiene metodi pronti all uso per purificare le proteine pi comuni in base all affinit scambio di ioni filtrazione su gel e tecniche di dissalazione parametri ciclo come volume colonna portata modalit di bilanciamento ed eluizione e volume sono predefiniti nel metodo L utente deve solo inserire il volume del campione Per una descri zione dettagliata di ciascun metodo Quick start vedere AKTA start System Cue Card Nota Se necessario i parametri ciclo possono essere modificati tramite l opzione Edit run durante un ciclo in esecuzione Tecniche Quick start La tabella seguente descrive i vari tipi di tecniche di avvio rapido che un utente pu scegliere in base ai requisiti di applicazione Metodo Tecnica dicroma Dettagli tografia AC step 1 ml 5ml Affinit Le proteine legate sono eluite in un unica HiTrap Cromatografia fase utilizzando un solo tampone di elui zione Comunement
61. 70 57 AF 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 8 Rimuovere il sacco di plastica inclinando il sistema delicatamente in avanti e indietro mentre si toglie il sacco Disimballaggio di Frac30 Per disimballare il collettore di frazioni seguire le istruzioni indicate di seguito ATTENZIONE Quando si solleva il Frac30 o quando si toglie l involucro di plastica fare attenzione a non danneggiare il braccio dispensatore AVVISO Non sollevare mai il Frac30 tenendolo per il braccio dispensatore Cos si potrebbe danneggiare il collettore di frazioni Nota Frac30 con l imballaggio pesa circa 6 kg Non necessario alcun ap parecchio di sollevamento una sola persona infatti in grado di spo stare il collettore di frazioni KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 69 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione I Aprire la scatola di Frac30 tagliando il nastro adesivo sulla parte superiore della stessa 2 Togliere il documento che si trova alla sommit dell imballaggio e leggere le Unpacking Instructions 3 Tenendo la fascetta rossa estrarre lo strumento dalla scatola Posizionare il collettore di frazioni sul banco da laboratorio Frac 30 70 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 43 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 4 Aprire il fermo del
62. A UV UV LED calibration per calibrare l intensit UV LED Flow cell path length per ottenere TRS la lunghezza di percorso effettiva della cella di flusso dura di risoluzione dei problemi del modulo UV Q Back Configuration per configurare il monitor UV e la cella di flusso nuovi Nota I valori C amb e C drft non devono essere modificati dall utente La pro cedura UV Configuration deve esse re eseguita esclusivamente da un tecnico dell assistenza GE 58 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service Modulo Funzione Display Display Touch screen calibration per cali brare il touch screen Display Color test per eseguire un test dia gnostico dei colori visualizzati sul Touch screen touch screen Dnt Diagnostics per eseguire un test diagnostico e verificare le performan ce di retroilluminazione del display Back Q Log book per rilevare il numero di ore che lo strumento stato in uso Conductivity Calibration per calibrare la Conduc tivity flow cell e il sensore di tempe TRE Configuration per impostare un nuovo valore della costante cella o RTE valore di temperatura di riferimento calibration generalmente dopo la sostituzione della Conductivity flow cell Advanced calibration per calibrare la temperatura della Conductivi
63. AF 1 Introduzione 1 4 Documentazione associata Nel menu di Help in UNICORN start o sul DVD UNICORN start disponibile la seguente documentazione d uso Documentazione Principali contenuti UNICORN start 1 0 User Manual Descrizioni generali e dettagliate del software di controllo del sistema messo a punto per KTA start che comprende la mappa delle immagine di processo per monitoraggio in tempo reale editor dei metodi moduli di valutazione e di ammi nistrazione UNICORN start Online Help Descrizioni delle finestre di dialogo di UNICORN start accessibili solo dal menu di Help File dati note sulle applicazioni e documentazione utente nel web Per ordinare o scaricare i file dati le note sulle applicazioni o la documentazione utente attenersi alle seguenti istruzioni Passo Operazione 1 Passare a www gelifesciences com AKTA 5 Cliccare su KTA Lab Scale Systems 3 Selezionare il KTA start dall elenco 4 Cliccare su Related Documents 3 Selezionare la documentazione desiderata per effettuare lo scaricamento KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 15 1 Introduzione 1 4 Documentazione associata Accesso alla documentazione da dispositivi mobili Eseguire la scansione del codice utilizzando il telefono cellulare smartphone o il tablet per accedere alla pagina prodotto di AKTA start Selezionare i documenti da scaricare dalla scheda Related Documents 16 KTA start Istru
64. AF 207 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method 6 6 1 Create method Menu Create method 208 Il menu Create method consente all utente di creare un nuovo metodo oppure di modi ficare importare e cancellare un metodo dal display dello strumento KTA start Seguire le istruzioni che seguono per accedere alle opzioni di Create method Operazione KTA start a Create method Settings and service Nella schermata home di KTA start selezionare Create method Create method a USB import Delete Nella schermata Create method sono disponibili le seguenti opzioni Create per creare un nuovo metodo usando un modello predefinito Edit per modificare un metodo o cambiare i parametri ciclo dei metodi creati dall utente e archiviati nello strumento USB Import per importare un metodo sviluppato con UNICORN start nello strumento tramite chiavetta di memoria USB Delete per cancellare un metodo archiviato nello strumento KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Creazione di un metodo Attenersi alle seguenti istruzioni per creare un metodo usando un modello predefinito Passo Operazione 1 Create method g Nella schermata Create method selezionare Create Risultato Si apre la schermata Select templates 2 Select templates
65. AKTA start Istruzioni di funzionamento Tradotto dall inglese Pagina lasciata vuota intenzionalmente Sommario Sommario 1 IR 7 14 Informazioni Su gusto Mono aaa 8 02 INIT lano 9 L3 Informazioni di carattere Nol VO sr 11 1 4 Documentazione ASSOCIOtA urina 14 2 isr zi ni di SICA ina 17 adl Precauzioni di SICUFEZZAO iiiririe rece 18 2 2 LO e A EEEE EE E E E EEEE A A E E E E T 27 25 PIOCCHUFEdIGMe 06 20 31 e POUR 33 3 Descrizione del sistema sli 34 a Idee 35 3 2 SUA EA I 39 5 Pene 42 Fal Panoramica del display dello strumento iiiiii 43 3 3 2 Descr 48 3 3 5 DECOR lla 51 3 3 4 Descrizione di Settings and Service sisirin 52 60 MR 60 41l ReQUISILIGISPOZIO ln 61 42 TaSpono dl ARTASIOTESFO6IO rina 63 4 3 Disimballare KTA start e FFACZO ui eeeeecveneeezeveezeze 65 il 06 0000 76 4 5 Installazione KTA start uiii ica 77 5 Preparazione del sistema per un ciclo orrrrrrrrreerene rene eezezinzeninne 85 5 l Panoramica del percorso GFIUSSO ri a 86 De Weber 90 5 CI 91 53 1 Guda ala CIlWOZIONE siria 92 532 Calibrazione display StrUMEntO ii 94 53a Pressure sensor zero OSL 96 5 3 4 Calibrazione PUMI sila 98 535 UV Calibrazione del Rin 100 5 3 6 Conductivity Calibrazione del MONO 104 54 Prestazi ni del SIEM iii 111 5 4 1 System performance method sssssssssessssssiisirisssrssssssssrsssirrrrrrsrsssssssssrrrsrrrrrnrrrsrsssssssren 112 5 4 2 S
66. B v 100 A Gradient volume Fractionation lt R E 3 Kad UW e Configurare i parametri ciclo per Elution Option impostata come Gra dient le proteine legate sono eluite con un cambio continuo di compo sizione tampone B per aumentare la forza dell eluente in un tempo specificato Target conc B massimo livello di concentrazione del tampone B da impostare nel gradiente Gradient volume volume necessario per eluire la proteina legata della colonna Fractionation volume volume della frazione da raccogliere quando il collettore di frazioni attivato e Selezionare Save per salvare il nuovo metodo Risultato Una schermata Message che chiede di confermare l operazione che verr visualizzata KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 211 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione Message Ah Are you sure you want to save the method Selezionare Yes per confermare il salvataggio del metodo o selezionareNo per annullare l operazione e tornare all impostazione dei parametri ciclo Nota Il metodo creato sar salvato nel menu metodi User defined Il sistema pu memorizzare solo 10 metodi al massimo Se si devono memo rizzare nuovi metodi cancellare quelli vecchi Modificare un metodo Attenersi alle seguenti istruzioni per modificare un metodo definito dall utente Passo Operazione 1 Create method
67. F Back _ EZS e Selezionare un pulsante di opzione per selezionare un modello adatto all applicazione in uso p es Gel filtration e Per proseguire con la tecnica scelta selezionare Select 3 Run parameters 2 Column volume v 1200 A mi Flow rate ml min 5 Pressure limit v 030 A MPa tai Save Result GFO1 to USB ci KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 195 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates 196 Operazione e Impostare i parametri ciclo Column volume volume colonna ml Flow rate portata ml min Pressure limit limite di pressione MPa Usare le frecce su e gi per impostare i valori oppure usare il tastierino numerico per digitarli e Sesi intende salvare il risultato spuntare la casella di controllo Save Result to USB I nome del file del risultato pu essere modificato impo stando le cifre comprese tra 00 e 99 e Selezionare la freccia avanti per accedere a parametri ciclo supplemen tari Nota Assicurarsi che i valori di Flow rate e Pressure limit siano idonei per la colonna scelta Per informazioni pi dettagliate consultare il manuale della colonna Se la pressione supera il limite impostato lo strumento entra in stato di Pause Nota La chiavetta di memoria USB memorizza i file dei risultati che possono essere visualizzati tramite UNICORN start Viene creato anche un file BMP che
68. Metodi per ciclo Prepare system 5 6 4 Column preparation Passo Operazione Risultato Si aprono le seguenti opzioni a schermo Column preparation in progress UY absorbance i mAU Conductivity mSfem Flow rate o0 mlfmin Pressure Tube no Edit run Nota Se necessario il ciclo Column preparation pu essere terminato prima del completamento selezionandoEnd per arrestare il ciclo 7 Quando il ciclo stato completato selezionare Exit per chiudere la schermata Column preparation KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 141 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione 5 7 Applicazione del campione Applicazione del campione La tabella seguente mostra le diverse modalit di applicazione del campione disponibili per KTA start La tecnica di applicazione del campione pu essere selezionata dal display dello strumento nella schermata Run parameters o da UNICORN start Per ulteriori dettagli vedere Capitolo 6 Operazioni dal display dello strumento a pagina 163 e UNICORN start 1 0 User Manual Volume campione Applicazione del campione Tipo di circuito 25 ul 5 ml tramite Loop Ciclo campione Da 10mla 150 ml tramite Loop Superloop M 10 ml Superloop 50 ml Superloop 150 ml tramite Pump dalla Sample valve porta I campione Nota Per ottenere buoni risultati accertarsi di caricare nella colonna solo il volume di campione consigliato Pe
69. Opzioni di frazionamento KTA start UNICORN start Frac30 e Frazionamento a volume fisso e Frazionamento con picco In base al livello In base alla pendenza KTA start UNICORN start e Raccolta picco singolo In base al livello KTA start Frac30 e Frazionamento a volume fisso KTA start e Raccolta volume eluizione Gestione volume di ritardo Per impostare il volume di ritardo vedere Sezione 5 8 Preparazione del collettore di fra zioni a pagina 154 Frazionamento con Frac30 Il volume di ritardo raccolto nella prima provetta T1 seguito dal resto delle frazioni nelle provette successive Frazionamento senza Frac30 Il volume di ritardo raccolto nel collettore di frazioni assieme alla frazione cio volume totale raccolto volume di ritardo volume frazione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 167 6 Operazioni dal display dello strumento 6 2 Frazionamento Frazionamento tramite AKTA start Per le istruzioni dettagliate sulle operazioni di frazionamento tramite UNICORN start vedere UNICORN start 1 0 User Manual AKTA start con Frac30 Di seguito viene mostrato un cromatogramma rappresentativo che descrive il fraziona mento per mezzo della raccolta frazioni a volume fisso in AKTA start con Frac30 Nota Accertarsi di impostare volumi di frazioni che siano idonei per la colon na usata ed utilizzare un numero adeguato di provette di raccolta 250 AU 240 230 220
70. Per proseguire con il metodo System cleaning selezionare Select System cleaning Please follow instructions 1 Disconnect the column 2 Connect injection valve to UY with suitable tubing and connectors 3 Place the buffer tubings A amp B in cleaning solution When completed press Continue e Eseguire le operazioni che appaiono sul display 1 Scollegarela colonna 2 Collegare Injection valve a UV con le tubazioni ed i connettori adatti 3 Posizionare i tubi dei tamponi A amp B nella soluzione detergente Per istruzioni dettagliate vedere la Sezione 8 3 2 System cleaning a pa gina 238 e Selezionare Continue per iniziare il ciclo System cleaning 202 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 5 Metodi Prepare system Passo Operazione 4 System cleaning in progress UY absorbance i mAU Conductivity 0 mS cm Flow rate i mlfmin Pressure Tube no Edit run Mentre il ciclo System cleaning in corso attendere che venga completato Nota Se necessario il ciclo System cleaning pu essere terminato prima del com pletamento selezionandoEnd 5 Run ended UY absorbance 0 mAU Conductivity mSfem Flow rate 0 ml min Pressure Tube no Selezionare Exit per chiudere la schermata System cleaning quando il ciclo System cleaning completato KTA start Istruzioni di funzionamento 29
71. Sezione Vedere pagina 3 1 Panoramica del sistema Dio 3 2 Strumento 59 3 3 Display strumento 42 34 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 1 Panoramica del sistema 3 1 Panoramica del sistema Introduzione KTA start lo strumento principale nell ambito di un sistema di cromatografia dei liquidi destinato principalmente alla purificazione preliminare delle proteine a livello di labora torio Il sistema pu essere utilizzato per molteplici scopi di ricerca nell intento di soddi sfare le esigenze degli utenti sia del Mondo accademico che nel campo della biologia AKTA start controllato e gestito dal display dello strumento Inoltre il software UNICORN start pu essere usato per controllare KTA start e per analizzare i dati acquisiti durante i cicli ccomatografici UNICORN start fornisce diverse funzioni aggiuntive che sono de scritte in dettaglio nello UNICORN start 1 0 User Manual Questa sezione fornisce una panoramica del sistema AKTA start Immagine del sistema L immagine seguente mostra il sistema AKTA start con UNICORN start installato su un computer pa p Descrizione KTA start strumento Frac30 Collettore frazioni UNICORN start software installato su computer KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 35 3 Descrizione del sistema 3 1 Panoramica del sistema Immagine dello strumento L illustrazione sottostante mostr
72. UV Calibrazione del monitor Impostare la Cell path length 100 Se la UV flow cell stata sostituita bisogna impostare un nuovo valore di Cell path length Nota Assicurarsi che la UV flow cell sia montata saldamente e che le tuba zioni di ingresso e uscita siano ben strette al monitor UV Nessuna luce parassita deve entrare nel monitor UV Verificare che non vi siano bolle d aria nella UV flow cell Presupposti e Tampone A Acqua demineralizzata DM e Tampone B soluzione di acetone all 1 appena preparata che si prevede possa produrre un valore Abs di 340 mAU Seguire le istruzioni che seguono per impostare la Cell path length Passo Operazione l Nella schermata Home di KTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento quindi selezionare Next Next Risultato Si apre la schermata 3 dell opzione Settings and service Settings and service b Display Conductivity 3 3 Back Q 2 Nella schermata Settings and service selezionare UV per accedere alle opzioni del monitor UV Risultato Si apre la schermata UV Flow cell path length Back KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 5 UV Calibrazione del monitor Passo Operazione 3 Nella schermata UV selezionare Flow cell path length per accedere alle opzioni della cella di flusso Per una descrizione dettagliata delle opzio
73. Un flacone di smaltimento pu essere sistemato sul banco a destra dello strumento 88 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 1 Panoramica del percorso di flusso ATTENZIONE Peso massimo sul vassoio tampone Non collocare flaconi aventi un volume superiore a 1 litro ciascuno sul vassoio tampone Il peso totale consentito sul vassoio tampone di 5 kg ATTENZIONE Evitare fuoriuscite e straripamenti Assicurarsi che la tubazione di smaltimento sia inserita in un contenitore di smaltimento ade guato e fissata in posizione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 89 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 2 Avviare lo strumento 5 2 Avviare lo strumento Accendere lo strumento Per avviare lo strumento seguire le istruzioni riportate sotto Passo Operazione 1 Accendere lo strumento premendo l interruttore di accensione in posizione l Risultato Lo strumento si avvia ed inizializza il display mostrando la scher mata iniziale KTA start KTA start a Create method Settings and service 2 L avvio si pu eseguire usando direttamente lo strumento Tutti i moduli sono pre calibrati in fabbrica 90 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 Calibrazioni Introduzione La presente sezione descrive come calibrare il display dello st
74. Un suggerimento contiene informazioni utili che possono migliorare o ottimizzare le procedure 10 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 1 Introduzione 1 3 Informazioni di carattere normativo 1 3 Informazioni di carattere normativo Introduzione Questa sezione descrive le direttive e le norme che sono rispettate da KTA start Informazioni sulla costruzione La tabella sottostante riassume le informazioni sulla produzione richieste Per ulteriori informazioni si veda il documento Dichiarazione di Conformit CE DoC Requisito Contenuto Nome e indirizzo del costruttore GE Healthcare Bio Sciences AB Bj rkgatan 30 SE 751 84 Uppsala Sweden Conformit alle Direttive Europee Questo prodotto conforme alle direttive europee elencate nella tabella sottostante e rispetta le relative norme armonizzate Per ulteriori informazioni vedere il documento della Dichiarazione di conformit CE Direttiva Titolo 2006 42 CE Direttiva macchine MD 2004 108 CE Direttiva Compatibilit Elettromagnetica EMC 2006 95 CE Direttiva bassa tensione LVD KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 11 1 Introduzione 1 3 Informazioni di carattere normativo Marcatura CE La marcatura CE e la relativa Dichiarazione di conformit CE valida per lo strumento quando e utilizzato come unit autonoma oppure e collegatoadaltri prodotti suggeriti o descritti nella documen
75. V Risultato Si apre la schermata UV UV la UV LED calibration Flow cell path length Back a Nella schermata UV selezionare UV LED calibration Per una descrizione dei parametri di calibrazione UV vedere KTA start Maintenance Manual Risultato Si apre la schermata UV LED Calibration UV LED calibration Strength T amb 000 e Calibrate Save e Impostare il valore Light strength su 500 usando le frecce su e gi op pure digitandolo e Selezionare Calibrate Si apre una schermata di conferma Selezionare OK per cercare automaticamente il valore di Light strength e ottenere una risposta minima del Signal pari a 2500 mV e Seil valore del Signal superiore a 2500 mV selezionare Save Se il valore del Signal inferiore a 2500 mV usare le frecce per aumen tare la Light strength finch il segnale Signal supera i 2500 mV Selezionare Save per salvare il valore Light strength calibrato KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 103 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor Impostare il valore della costante cella Se la cella di flusso stata sostituita bisogna impostare un nuovo valore della costante cella Per impostare il valore della costante cella seguire le istruzioni riportate di seguito 104 Passo Operazione Nella schermata Hom
76. a e Etanoloal 20 e Panno per pulizia Istruzioni Per smontare e pulire il gruppo bacinella seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Verificare che non vi siano cicli in corso _ Spegnere AKTA start e scollegare il cavo Frac30 3 Togliere le provette di raccolta e smontare il gruppo bacinella dall unit di base e Spostare delicatamente il braccio dispensatore in senso antiorario fino a fine corsa 1 e Premere sul gruppo di comando e tenerlo in posizione ritratta 2 e Sollevare e rimuovere il gruppo bacinella 3 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 247 8 Manutenzione 8 6 Altre procedure di pulizia 8 6 3 Pulizia del collettore di frazioni Passo Operazione 4 Lavare la bacinella con acqua di rubinetto Se necessario utilizzare un de tergente neutro e sciacquare accuratamente con acqua 5 Pulire la superficie con un panno inumidito Pulire le macchie con acqua 6 Prima del rimontaggio lasciare asciugare il gruppo bacinella completamente 7 Rimontare il gruppo bacinella sull unit di base e Orientare la bacinella in modo da far coincidere la tacca di allineamento e i segni corrispondenti sul portabacinella 1 e Abbassare il gruppo bacinella sull unit di base 2 e premere sul gruppo di comando per assestare il gruppo bacinella in posizione 3 248 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 6 Altre procedure di pulizia 8
77. a ESSENSEN EENEN FEE EEH 95 HHHH E FEESEEEESEEIZRIE IEEE HEHE HESSE ENZZE PE E AGGZIEHESZOE 90 i e E 9 III J LI HH HHHH TAZZA 3 HHHH DESSNERECanane s ZH HEFE 85 EHHH EE AEE 7 RA O OD I O O AE E CI di 77 LL 20 a 50 Temperature C KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 109 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor Asse Descrizione Temperatura C Conduttivit mS cm 110 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 Prestazioni del sistema Introduzione La presente sezione descrive il System performance method e come eseguire e valutare ile System performance method prestazioni del sistema In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 5 4 1 System performance method 112 5 4 2 System performance method da KTA start 114 5 4 3 System performance method da UNICORN start 119 5 4 4 Switch valve timing 122 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 111 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 1 System performance method 5 4 1 System performance method Introduzione I System performance method eseguito per essere sicuri che il sistema stia lavorando entro limiti accettabili Si consiglia
78. a chiavetta di memoria USB dalla relativa porta e collegarla al computer Verificare il contenuto dei file di report del sistema INSTLOG TXT e ERRORLOG TKT Il contenuto deve essere simile a quello delle immagini sotto illustrate PD INSTLOG TXT Notepad E ERRORLOG TXT Notepad AKTA start seraino 1234567891 1234567895 Firmwere Version V2 01 19 Over Pressure FPGA Version v2 00 00 301 Frac Module Failure paap ari pi 003 Iiegal operation Restart hstrument ump ui run gt s F UY LED run time 63 2Hrs 901 Frac Module Failure Bufler valve count 138 Wash valve count ni Outlet valve count 5 Sample valve count 2 Usare il rapporto del sistema quando si procede a contattare un tecnico dell assistenza GE KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 10 Informazioni di riferimento 10 Informazioni di riferimento Informazioni sul capitolo Questo capitolo elenca le specifiche tecniche di AKTA start Questo capitolo comprende anche un elenco dei materiali bagnati la guida alla resistenza chimica il modulo per la Dichiarazione sulla Salute e la Sicurezza in servizio e le informazioni sugli ordini In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 10 1 Specifiche 276 10 2 Resistenza chimica 282 10 3 Documenti 285 10 4 Modulo di dichiarazione di salute e sicurezza 286 10 5 Informazioni su come effettuare gli ordini 288 KTA start Istruzioni di funzionament
79. a e verr emesso un evento Messaggio di avvertenza Instruction ignored Peak fractionation is not allo wed during fractionation or Single peak collection Questo messaggio appare quando non possibile eseguire un istruzione duran te la Single peak collection o durante il Fractionation Messaggio di avvertenza Last tube has been reached change tubes in the frac tion collector and press Continue to continue the run with fractionation Press Cancel fractionation to continue the run without fractionation flow is di verted to Flow through Waste position Questo messaggio appare quando stata raggiunta l ultima provetta Messaggio evento Last tube has been reached and the run has continued wi thout fractionation Questo messaggio appare se si selezio na Continue without fractionation Messaggio di avvertenza Instruction ignored Single peak collection is not al lowed during Fractionation or Peak fractionation Questo messaggio appare quando qualcuno cerca di eseguire la Single peak collection durante il frazionamen to Messaggio di avvertenza Turning Outlet valve is not allowed during Single peak fractionating Questo messaggio appare per indicare che durante il Single peak fractionation la Outlet valve non deve essere in grado di ruotare Messaggio evento Instruction ignored Stop single peak collection is only allo wed during single peak collection Questo mess
80. a i componenti principali dello strumento hd Descrizione 1 Display strumento Funzione Interfaccia utente per il controllo del sistema e la visualizzazione dei dati runtime 2 Lato umido I moduli interconnessi tramite tubazioni hanno le seguenti funzioni e peralimentare il liquido in un percorso di flusso specifico deviandolo in base alle ne cessit e per monitorare l assorbanza UV e la conduttivit del liquido 3 Vassoio tampone Posizione destinata alla collocazione di bottiglie di tampone usate durante i cicli ccomatografici 4 Interruttore di alimen tazione Collega o stacca l alimentazione 36 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Parte Descrizione Porta USB Immagine del collettore di frazioni 3 Descrizione del sistema 3 1 Panoramica del sistema Funzione Per collegare una chiavetta di memoria USB per l archiviazione dei risultati e il trasferimento di file La figura seguente mostra il collettore di frazioni Frac30 Descrizione Assemblaggio del braccio dispensato re Funzione Trattiene e posiziona il supporto tubazione per distribuire il liquido in frazioni Supporto tubazio ne Trattiene la tubazione utilizzata per distribuire le frazioni di liquido nelle provette di raccolta Provette di raccol ta Provette con diametro di 10 18 mm usate per raccogliere le frazioni Gruppo bacinella U
81. aborato rio come il degassamento sotto vuoto o la sonicazione Effettuare il lavaggio pompa per elimina re le bolle d aria presenti nel percorso del flusso Pulire la UV flow cell Vedere la Sezio ne 8 4 Pulitura della cella di flusso UV a pagina 241 UV flow cell non correttamente montata controda do non serrato adeguatamente Togliere il coperchio di protezione e con trollare la cella di flusso Serrare il contro dado Picchi fantasma Aria sciolta nel tampone Degassare il tampone prima dell uso Usare una tecnica disponibile in laborato rio come il degassamento sotto vuoto o la sonicazione Percorso di flusso non pulito Pulire il percorso di flusso del sistema Vedere la sezione Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 Colonna non puli ta Pulire la colonna in base alle specifiche istruzioni KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 261 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base 262 Descrizione Bassa sensibilit Causa possibile UV flow cell non pulita Operazione Pulire la UV flow cell Vedere la Sezio ne 8 4 Pulitura della cella di flusso UV a pagina 241 Onde sul gradiente Fasatura della val vola di commuta zione non ottimiz zata Eseguire Switch valve timing per ottimiz zare la fasatura della valvola di commu tazione Vedere la Sezione 5 4 4 Switch val
82. aggio viene visualizzato quando l istruzione di Single peak collec tion non stata eseguita KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Descrizione USB removed abruptly KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Causa possibile Questo messaggio appare quando l utente toglie la chiavetta di memoria USB durante la procedura di lettura o scrittura 271 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Connessione chiavetta di memoria USB Per eseguire la procedura di risoluzione di possibili problemi incontrati durante il colle gamento di una chiavetta di memoria USB a KTA start seguire la procedura riportata nel diagramma di flusso seguente Collegare la chiavetta USBa KTA start Rimuovere e reinserire la chiavetta USB La chiavetta USB viene riconosciuta senza errori di lettura scrittura La chiavetta USB viene riconosciuta No Riavviare lo strumento KTA start La chiavetta USB viene riconosciuta Utilizzare una nuova chiavetta USB La chiavetta USB viene riconosciuta Procedere col proprio lavoro Contattare il tecnico di assistenza GE 212 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF A Introduzione 9 Eliminazione dei guasti 9 3 Report degli errori di sistema Report degli errori di sistema Durante le procedure di identificazione e risoluzione proble
83. ali 12 Informazioni di riferimento informazioni sugli ordi ni 288 riciclaggio 33 Informazioni sulla produzio ne 11 Injection valve descrizione 143 Installazione collegamento dell alimenta zione 79 collegamento di un compu ter 82 collegamento Frac30 80 Disimballaggio AKTA start 65 Disimballaggio Frac30 69 requisiti della postazione 61 tubazione pompa 78 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Indice L Letteratura 285 M Manutenzione 229 precauzioni di sicurez za 230 Preparazione dei metodi di sistema 201 procedure di sostituzio ne 244 252 programma di manutenzio ne 231 pulizia dello strumen to 245 246 pulizia prima della manuten zione 234 Pump wash A 131 Pump wash B 134 regolare 230 scollegare la colonna 237 stoccaggio a breve termi ne 250 stoccaggio a lungo termi ne 251 System cleaning 201 238 Washout fractionation tu bing 136 Marcatura CE 12 Messaggi di informazioni d uso 270 Modelli Affinit AC o Scambio di io ni IEX 191 Filtrazione su gel scambio Dissalazione Tampone 194 predefiniti 190 N Note e suggerimenti 10 O Operazioni camera fredda 159 controllate da UNICORN start 223 dal display dello strumento esecuzione di un ciclo con metodo 180 297 Indice 298 esecuzione di un ciclo manuale 170 Gestione metodi 207 elenco di controllo 165 flusso di lavoro 164 monitoraggio del ciclo 173 P Panoramica
84. ammata 234 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema 235 8 4 Pulitura della cella di flusso UV 241 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell 243 8 6 Altre procedure di pulizia 244 8 7 Stoccaggio dello strumento 250 8 8 Sostituzione della tubazione e dei filtri 252 229 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 1 Manutenzione regolare 8 1 Manutenzione regolare Introduzione Una manutenzione regolare importante per un funzionamento sicuro e privo di problemi di AKTA start L utente deve eseguire la manutenzione preventiva su base giornaliera settimanale e mensile Precauzioni di sicurezza Per evitare lesioni personali durante la manutenzione dello strumento osservare le se guenti istruzioni AVVERTENZA Pericolo di scossa elettrica Aprire i coperchi o sostituire i compo nenti solo se ci specificamente indicato nella documentazione d uso Tutte le altre riparazioni devono essere eseguite da personale autorizzato GE AVVERTENZA Scollegare l alimentazione Salvo diversamente indicato nella do cumentazione d uso staccare sempre l alimentazione prima di sostituire un componente dello strumento AVVERTENZA Rischio di fuoriuscite Evitare la fuoriuscita di liquidi che possano interessare superfici dello strumento con presenza di cavi spine ed altri fili Fare attenzione se si verifica una fuoriuscita di liquidi sul vassoio mentre si cerca di toglierl
85. anuale avvio di un ciclo 171 fine 178 modifica 174 pausa 177 Circuito di campionamento collegamento 144 Collegamento colonna 127 Colonna scollegamento 237 Column preparation 139 Conductivity flow cell calibrazione 107 pulizia 243 Conductivity Monitor calibrazione del sensore di temperatura 106 impostazione costante cel la 104 temperatura di riferimen to 105 Conformit normativa 13 Convenzioni di nomenclatura 8 Convenzioni tipografiche 8 Create method 208 Cromatogramma visualizzazione 173 D Disimballaggio confezione accessori 76 Display dello strumento calibrazione del touch screen 94 Settings and service scher mo 52 Display strumento Create method schermo 51 funzione 44 guida 47 Method run schermo 48 pulsanti a sfioramento 44 E Esportazione di un metodo 220 F File dei risultati BMP 221 Flusso di lavoro 164 Frac30 delay volume setting 156 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF parti principali 37 preparazione 154 Frazionamento 167 G Gestione file chiavetta di memoria USB 218 Gestione metodi cancellazione di un meto do 216 creazione di un metodo 209 importazione di un meto do 214 modifica di un metodo 212 Importazione metodo 220 Importazione del file dei risultati 219 Informazioni d uso importan te 9 Informazioni di carattere nor mativo Conformit CE 11 Informazioni di carattere rego lamentare Norme internazion
86. azione Nella schermata Method run selezionare Prepare system Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system au Selezionare Pump wash B e poi Select per iniziare l esecuzione del metodo Select system method 2 Pump wash A Pump wash B Washout fractionation tubing C Column preparation 1 2 Back EJ Risultato Si aprono le seguenti opzioni a schermo Pump wash in progress UY absorbance 0 mAU Conductivity mSfem Flow rate o0 mlfmin Pressure MPa Tube no Se necessario il ciclo Pump wash B pu essere terminato prima del comple tamento selezionandoEnd per arrestare il lavaggio in anticipo Quando il ciclo stato completato selezionare Exit per chiudere la schermata Pump wash B Run ended UY absorbance 0 mAU Conductivity mSfem Flow rate o0 mlfmin Pressure Tube no KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 135 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 3 Washout fractionation tubing 5 6 3 Washout fractionation tubing Introduzione Il metodo Washout fractionation tubing usato per pulire la tubazione di frazionamento Se ne raccomanda l uso quando si raccolgono le frazioni senza un collettore frazioni mediante Outlet valve e tra diversi cicli tramite il collettore frazioni Nota Il flusso deviato dalla tubazione di frazionamento alla provetta di raccolta
87. ccessivo potrebbe rompere i connettori e schiacciare la tubazione ostruendo cos il flusso KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 129 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 Metodi per ciclo Prepare system Introduzione Questa sezione descrive come preparare il percorso di flusso e la colonna prima dell esecuzione di un ciclo cromatografico In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 5 6 1 Pump wash A 131 5 6 2 Pump wash B 134 5 6 3 Washout fractionation tubing 136 5 6 4 Column preparation 139 130 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 1 Pump wash A 5 6 1 Pump wash A Introduzione Il metodo Pump wash A viene usato prima di avviare un nuovo ciclo o in caso di sostitu zione dei tamponi Nel corso di Pump wash A il flusso diretto attraverso la Wash valve verso Waste Nota e Pump wash A eseguito a 10 ml min per 1 min attraverso la porta del tampone A e Pump wash A importante per impedire il trasferimento e la contaminazione incrociata tra tamponi campioni e Siraccomandadilavare prima con acqua DM e poi con iltampone prescelto e Il metodo Pump wash A non pu essere modificato Requisiti Le soluzioni richieste sono e Acquademineralizzata DM e Soluzione tampone Istruzioni Pe
88. ce i mAU Conductivity mS cm Flow rate o ml min Pressure Tube no KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 133 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 2 Pump wash B 5 6 2 Introduzione Requisiti Istruzioni 134 Pump wash B Il metodo Pump wash B viene usato prima di avviare un nuovo ciclo o in caso di sostitu zione dei tamponi Nel corso di Pump wash B il flusso diretto attraverso la Wash valve verso Waste Nota e Pump wash B eseguito a 10 ml min per 1 min attraverso la porta del tampone B e Pump wash B importante per impedire il trasferimento e la contaminazione incrociata tra tamponi e campioni e Siraccomandadilavare prima con acqua DM e poi con iltampone prescelto e Il metodo Pump wash B non pu essere modificato Le soluzioni richieste sono e Acquademineralizzata DM e Soluzione tampone Per eseguire un ciclo Pump wash B seguire le istruzioni indicate di seguito La procedura Pump wash B avviata dal display dello strumento Passo Operazione 1 Immergere la tubazione d ingresso tampone B in acqua DM o soluzione tampone 2 Nella schermata home di KTA start selezionare Method run KTA start fa Create method Settings and service KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Passo 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 2 Pump wash B Oper
89. ciclo Conc B concentrazione tampone B Flow rate portata ml min Fractionation volume volume frazionamento ml Alternare Fractionation tra Start e Stop per avviare o arrestare il frazio namento Usare le frecce su e gi per regolare i valori oppure usare il tastierino numerico per digitare i valori Se non si devono impostare altri parametri selezionare Execute per im plementare le modifiche Per ignorare le modifiche selezionare Cancel e Selezionare la freccia avanti per accedere ai parametri ciclo da modifi care Nota Prima di avviare il ciclo impostare lo stato del collettore frazioni su attivato o disattivato in base alle necessit KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 175 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo Passo Operazione 3 Edit run Sample valve Wash valve Waste Outlet valve C Set event mark 0 Autozero UV e Alternare la selezione secondo necessit per impostare quali posizioni valvola vanno aperte Sample valve impostare come Buffer o Sample in modo che il flusso venga mandato dagli ingressi dei tamponi o dall ingresso del cam pione Wash valve impostare come Column o Waste per dirigere il flusso verso la colonna o lo scarico Outlet valve impostare come Collection o Waste per dirigere il flusso verso il collettore frazioni o lo scarico e Spuntare la casella di
90. colonna e Staccarela colonna dallo strumento e conservarla secondo le istruzioni specifiche Stoccaggio del sistema Se si prevede di non utilizzare il sistema per un certo periodo riempire il sistema e gli ingressi con la soluzione di stoccaggio acqua DM o etanolo al 20 Per istruzioni detta gliate vedere la Sezione 8 7 Stoccaggio dello strumento a pagina 250 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 205 6 Operazioni dal display dello strumento 6 5 Operazioni successive al ciclo Spegnimento dello strumento Spegnere lo strumento ruotando l interruttore in posizione O Nota Quando lo strumento spento o non usato aprire la calotta della pompa e far uscire la tubazione dalla testata della pompa 206 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 Gestione di metodi e file Introduzione Questa sezione descrive come creare modificare importare e cancellare metodi in AKTA start Per informazioni su come creare un metodo con UNICORN start vedere il Capitolo 7 Operazioni controllate da UNICORN start a pagina 223 o il UNICORN start 1 0 User Manual In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 6 6 1 Create method 208 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB 218 6 6 3 File dei risultati BMP 421 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57
91. con CE get imboli disi Mfg Year 2013 Max Power 10va SIM O SICUrEezza e spe Protection Closs 1p21 AE CEG cifiche tecniche ANON OI ROMINA GE Healthcore Bio Sciences AB 751 84 Uppsala 56 Made in Sweden Sweden Non aprire nessun coper chio sullo strumento L apertura dei coperchi in valida la garanzia La rupture du sceau annule la garantie Warranty void if seal is broken 28 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 Istruzioni di sicurezza 2 2 Etichette Simboli di sicurezza Nelle etichette vengono utilizzati i seguenti simboli di sicurezza Rinomina Significato Attenzione Non utilizzare KTA start prima di aver letto il KTA start Istruzioni di funzionamento Aprire i coperchi o sostituire i componenti solo se ci specificamente indicato nella documentazione d uso I sistema rispetta i requisiti di compatibilit elettroma gnetica EMC per l Australia e la Nuova Zelanda Il sistema rispetta le direttive europee applicabili Questo simbolo indica che AKTA start stato certificato da un Laboratorio di Prova riconosciuto a Livello Nazio A CI ve nale NRTL NRTL un organizzazione riconosciuta LsTEO dall US Occupational Safety and Health Administration Intertek OSHA come conforme ai requisiti legali del Title 29 of the Code of Federal Regulations 29 CFR Part 1910 7 Etichette concernenti le sostanze pericolose I seguenti simboli
92. contaminazione Ove necessario regolare la temperatura richiesta Le colonne scelte sono idonee per le proteine target selezionate e Sono state definite le linee base stabili per UV e Conductivity KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 259 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base 9 2 Risoluzione dei problemi di base Introduzione Questa sezione descrive i problemi che si possono verificare con display misure UV e di conduttivit problemi con i moduli lato umido le possibili cause e le azioni correttive consigliate Se sul touch screen compaiono codici di errore vedere AKTA start Maintenance Manual Display 260 Descrizione Il display strumen to non mostra nul la Causa possibile Mancanza di ali mentazione Operazione Verificare che il cavo d alimentazione sia collegato e l interruttore di accensione sia inserito ON Il display strumen to danneggiato Contattare un tecnico di assistenza GE Problema di comu nicazione nessun segnale al display Contattare un tecnico di assistenza GE Problemi di rispo sta al tocco Calibrazione fuori range Ricalibrare il touch screen Per ulteriori dettagli fare riferimento a AKTA start Maintenance Manual Il display a colori non funziona cor rettamente Guasto del display Allentamento cavo d intefaccia di splay Eseguire un test con la funzione Di splay Color test fare
93. de evitare il surriscaldamento Posizionare il computer in un locale a temperatura ambiente Se AKTA start collocato in un ambiente freddo sistemare il computer all esterno del locale freddo ed utilizzare il cavo di connettivit del PC fornito con lo strumento per il collegamento al computer Quando non si utilizza il sistema tenere aperto il coperchio della pompa Aprire il coperchio della pompa peristaltica dopo lo spegnimento dell apparecchiatura In tal modo si allungher la durata utile della tubazione della pompa 24 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Manutenzione 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza AVVERTENZA Per evitare lesioni personali durante la manutenzione di AKTA start osservare le seguenti istruzioni Pericolo di scossa elettrica Non aprire coperchi o componenti se non specificamente indicato nella documentazione d uso Ad eccezione degli interventi di manutenzione e assistenza descritti nella documentazione d uso tutte le altre riparazioni devono essere eseguite da personale d assistenza autorizzato GE Utilizzare soltanto pezzi di ricambio approvati o forniti da GE per la manutenzione o il servizio d assistenza sull impianto KTA start Scollegare l alimentazione Salvo diversamente indicato nella documentazione d uso staccare sempre l alimentazione prima di sostituire un componente dello strumento o di effettuarne la pulizia Rischio di fuori
94. di campioni o per eseguire un ciclo cromatografico incustodito Nota L applicazione del campione tramite Loop non utilizzabile 186 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 2 Quick start Passo Operazione e Inserire il volume campione nel campo Sample volume Usare le frecce su e gi per impostare i valori oppure usare il tastierino numerico per digitarli e Sesiintende salvare il risultato spuntare la casella di controllo Save Result to USB I nome del file del risultato pu essere modificato impo stando le cifre comprese tra 00 e 99 e Selezionare Run per iniziare il ciclo Risultato Verr visualizzata la schermata Run view Nota Si possono modificare altri parametri ciclo tramite l opzione Edit run presente nella schermata Run view 4 i Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS cm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edit run End Nella schermata Run view sono disponibili le seguenti opzioni per monito rare e controllare il ciclo in corso per maggiori dettagli vedere la Sezio ne 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo a pagina 173 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 187 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 2 Quick start Mantenimento ciclo 188 Passo Opera
95. di eseguire il test al momento dell installazione dello strumento o dopo la sostituzioni di moduli come Pump UV Conductivity o Valves Il System performance method pu anche essere usato per verificare le condizioni del sistema ad esempio dopo un lungo periodo di stoccaggio Il System performance me thod pu essere eseguito sia dal display dello strumento che con UNICORN start Nota e Primadiiniziare la prova calibrare tutti i moduli e Accertarsi che nessuna colonna sia collegata e Siconsigliadinon modificare alcun parametro durante un test per evitare il fallimento della prova Requisiti Le soluzioni richieste sono e Tampone A acqua demineralizzata DM e Tampone B acetone all 1 1 0 M NaCl e Campione acetone all 1 0 1 0 M NaCl tampone B Nota Preparare con la massima cura le soluzioni tampone per evitare il fal limento del test Elenco di controllo Prima di avviare un System performance method accertarsi che i seguenti interventi vengano portati a termine o rispettati e Calibrazione di tutti i moduli Pressure sensor Pump UV e Conductivity e Nessuna colonna deve essere presente nel percorso di flusso e Impostare la temperatura di riferimento conduttivit a 20 C salvare e abilitare la funzione e Immergere l ingresso della porta tampone A nel tampone B acqua DM e Immergere l ingresso della porta tampone B nel tampone B acetone all 1 0 1 0 M NaCl e Ingresso Sample valve immerso nel ca
96. di seguito per riempire la tubazione di campionamento con acqua distillata tampone prima di eseguire il caricamento del campione mediante la funzione Pump Passo Operazione 1 Collegare una tubazione in ETFE con d i di 1 mm alla porta I campione della Sample valve 2 Immergere l altra estremit della tubazione di ingresso campione nel conte nitore dell acqua distillata tampone 3 Dal display dello strumento selezionare la funzione Manual Run Per ulteriori informazioni sul ciclo manuale vedere la sezione Sezione 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale a pagina 170 4 Selezionare il pulsante freccia avanti per accedere ai parametri di ciclo della schermata 2 2 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 145 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Passo Operazione 5 Impostare la funzione Sample valve in modalit Sample in modo che il flusso venga inviato dall ingresso campione Manual run Sample valve Wash valve Outlet valve Fractionation volume 6 Selezionare Run per iniziare il ciclo 7 Concludere il ciclo manualmente una volta che il riempimento con il volume richiesto di acqua distillata buffer terminato Caricare il campione tramite la Pump Il campione pu essere applicato direttamente tramite la Pump attraverso la Sample valve La tecnica di applicazione diretta del campione consente l applicazione di volumi di campione superiori a 5 ml P
97. e 150 Passo Operazione 5 Nella schermata Run parameters selezionare l applicazione del campione tramite Loop e impostare tutti i parametri ciclo richiesti Per ulteriori dettagli vedere la sezione Capitolo 6 Operazioni dal display dello strumento a pagi na 163 Portare la posizione della Injection valve in Inject quando appare la seguente schermata sul display dello strumento Sample inject Turn the Manual Injection Valve to Inject position to inject the sample and then tap Continue Nota Prima dell avvio del ciclo accertarsi che la Injection valve sia in posizione Load 6 Dopo aver cambiato manualmente la posizione confermare il messaggio selezionando Continue Il campione sar iniettato sulla colonna quando la Injection valve commu tata manualmente in posizione Inject to column durante il ciclo 7 Portare la posizione della Injection valve in Load quando appare la seguente schermata sul display dello strumento Sample inject Turn the Manual Injection Valve to 6 Load position and then tap Continue 8 Dopo aver cambiato manualmente la posizione della Injection valve con fermare il messaggio selezionando Continue Nota Per le tecniche leganti AC IEX si consiglia di svuotare il circuito con un volume triplo di quello del circuito per ottenere un buon elevato recupero dei campioni Questa operazione sconsigliata per le tecniche non leganti DS GF in quanto vi sono limitazioni nel volume di campio ne dov
98. e di raccoglierle in provette di quattro diverse misure 38 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 2 Strumento 5 2 Strumento Introduzione La presente sezione offre una panoramica di KTA start Immagine dei moduli strumento L immagine seguente mostra le posizioni e propone brevi descrizioni dei moduli collocati sul lato umido dello strumento 8 9 10 Funzione Descrizione 1 Buffer valve Una valvola a 3 porte usata come valvola di commutazione per la formazione di gradiente Consente di usare due tamponi che sono neces sari per formare un gradiente durante i cicli 2 Mixer Un mixer statico usato per la miscelazione dei tamponi A eB KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 39 3 Descrizione del sistema 3 2 Strumento Funzione Descrizione Sample valve Una valvola a 3 porte che permette al tampone o al campione di entrare nel percorso di flusso La Sample valve consente l applicazione diretta del campione sulla colonna per mezzo della Pump Una pompa peristaltica che manda il tampone o il campione al percorso di flusso con una portata di max 5 ml min Per le procedure di pulizia la Pump pu lavare il percorso di flusso con una portata di 10 ml min Pressure sensor Il Pressure sensor rileva la pressione nel percorso di flusso e avverte l eventuale sovrappressione Wash valve Una valvola a 3 porte viene usata per deviare il pe
99. e Installazione del computer opzionale I computer deve essere installato e utilizzato secondo le istruzioni fornite dal relativo costruttore e Scollegarel alimentazione Scollegare sempre l alimentazione da AKTA start prima di rimuovere installare un modulo dello strumento o di collegare scollegare un cavo ATTENZIONE Per evitare lesioni personali durante l installazione o lo spostamento di AKTA start osservare le seguenti istruzioni Messa a terra AKTA start deve essere sempre collegato a una presa di corrente con connessione a terra KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 21 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza 22 AVVISO Le istruzioni indicate servono a evitare di danneggiare lo strumento AKTA start o altra attrezzatura durante l installazione o lo sposta mento dello strumento e Sfiatatoisu KTA start Per garantire una ventilazione adegua ta tenere fogli e altri oggetti lontano dagli sfiatatoi dello stru mento e Qualsiasi computer utilizzato con l attrezzatura deve essere conforme alla norma IEC60950 ed essere installato in base alle istruzioni del costruttore e Il dispositivo Frac30 non deve essere collegato o scollegato dall unit AKTA start quando lo strumento acceso ON KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza Funzionamento del sistema AVVERTENZA Osservare l
100. e caratteristiche principali del modulo System Control sono elencate di seguito e Un diagramma di flusso che rappresenta il percorso di flusso in tempo reale con in dicazioni dei diversi moduli sul lato umido dello strumento Viene visualizzato lo stato del ciclo attuale del sistema 224 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 7 Operazioni controllate da UNICORN start 7 1 System Control Possibilit di controllare lo strumento tramite semplici clic sul percorso di flusso per esempio per azionare le valvole impostare le portate cambiare le concentrazioni B e avviare arrestare il frazionamento Un cromatogramma in tempo reale che rappresenta il ciclo completo con curve in cluso UV conduttivit flusso del sistema concentrazioni di gradiente segni delle frazioni registri dei cicli e pressione Possibilit di eseguire cicli manuali e con metodo Possibilit di eseguire metodi predefiniti come Quick start Templates e Prepare system methods Possibilit di eseguire System performance method Possibilit di generare un report degli errori di sistema Nota Quando il collettore di frazioni attivato l immagine di processo visua lizzer quella del collettore frazioni Se il collettore di frazioni disatti vato verr visualizzata l immagine di un becher di raccolta KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 225 7 Operazioni controllate da UNICORN start 7 2 Method Editor 7 2 Meth
101. e di KTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento quindi selezionare Next Next Risultato Si apre la schermata 3 dell opzione Settings and service Settings and service 2 Nella schermata Settings and service selezionare Conductivity per acce dere alle opzioni del monitor Conductivity Risultato Si apre la schermata Conductivity Conductivity Calibration Configuration Advanced calibration KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor Passo Operazione 3 Nella schermata Conductivity selezionare Configuration per accedere alle opzioni di configurazione Risultato Si apre la schermata Configuration Configuration Set Cell Const Set Ref Temp 4 Nella schermata Configuration impostare il valore della costante cella nel campo Set Cell Const per la nuova Conductivity flow cell utilizzando le frecce su e gi Selezionare Save per salvare il nuovo valore Nota Il valore della costante cella indicato sull imballaggio della Conductivity flow cell Se non disponibile il valore della costante cella calibrare la Conductivity flow cell come spiegato in Calibrare il Conductivity flow cell a pagina 107 Impostare la temperatura di riferimento Nota Perch il sistema possa ricalcolare la conduttivit misurata riportare la temperatura di riferim
102. e etichette alla nuova tubazione 6 Installare i raccordi sulla tubazione Per il serraggio manuale dei raccordi e Far scorrere il raccordo sulla tubazione Per raccordi di tubazione da 1 8 Far scorrere il raccordo sulla tubazione e Farscorrerela ghiera sulla tubazione con l estremit grossa rivolta verso la fine della tubazione T Inserire la tubazione con il raccordo nella porta Assicurarsi di inserire la tu bazione completamente nella porta fino in fondo 8 Serrare completamente il raccordo KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 255 9 Eliminazione dei guasti 9 Eliminazione dei guasti Informazioni sul capitolo Questo capitolo descrive le azioni per la risoluzione dei problemi e per le azioni correttive per KTA start In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 9 1 Introduzione alla risoluzione dei problemi 257 9 2 Risoluzione dei problemi di base 260 9 3 Report degli errori di sistema 273 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 9 Eliminazione dei guasti 9 1 Introduzione alla risoluzione dei problemi 9 1 Introduzione alla risoluzione dei problemi Introduzione Le sezioni di questo capitolo descrivono la risoluzione dei problemi di base per AKTA start e comprendono un elenco di controllo generale che deve essere completato prima di procedere all effettiva risoluzione dei problemi Viene anche spiegato come ge
103. e following Radioactivity please specify Infectious or hazardous biological substances please specify Equipment must be decontaminated prior to service return Please provide a telephone number where GE can contact Other Hazardous Chemicals please specify you for additional information concerning the system equipment Telephone No Liquid and or gas in equipment is Water Ethanol None empty Argon Helium Nitrogen Liquid Nitrogen Other please specify I hereby confirm that the equipment specified above has been cleaned to remove any hazardous substances and that the area has been made safe and accessible Company or NGN institution Position or job title Date YYYY MM DD Signed i D GE and GE monogram are trademarks of General Electric Company To receive a return authorization number or service number GE Healthcare Bio Sciences Corp 800 Centennial Avenue PO Box 1327 Piscataway please call local technical support or customer service NJ 08855 1327 US 2010 14 General Electric Company All rights reserved First published April 2010 DOC1149544 28 9800 27 AC 05 2014 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 287 10 Informazioni di riferimento 10 5 Informazioni su come effettuare gli ordini 10 5 Informazioni su come effettuare gli ordini Per le informazioni sugli ordini visitare il sito www gelifesciences com
104. e istruzioni indicate per evitare lesioni personali durante il funzionamento di AKTA start e Rotazione dello strumento Assicurarsi che ci siano sempre almeno 20 cm di spazio libero attorno a KTA start per consen tirne l adeguata aerazione Quando si accende o si sposta lo strumento fare attenzione a non allungare o schiacciare le tubazioni o i cavi Un cavo scollegato pu causare l interruzione dell alimentazione o della rete tubi tirati possono far cadere i flaconi causando fuoriuscita di liquido e frammenti di vetro Lo schiacciamento delle tubazioni pu causare un aumento della pressione o il blocco del flusso di liquido Per evitare il ri schio di rovesciare i flaconi posizionarli sempre sul vassoio tampone e ruotare o spostare con cautela e Sostanze chimiche pericolose durante il ciclo Quando si uti lizzano sostanze chimiche pericolose eseguire il modello Sy stem cleaning prima di procedere all assistenza e alla manu tenzione per pulire e lavare l intera tubazione del sistema con acqua distillata e Impostazione Verificare che vengano usate le impostazioni delle dimensioni di uscita corrette Accertarsi che tubazione e raccordi siano correttamente collegati e fissati Prima di avviare il ciclo accertarsi che le impostazioni del limite di pressione siano corrette ATTENZIONE Osservare le istruzioni indicate per evitare lesioni personali durante il funzionamento di AKTA start e Peso massimo sul vassoio
105. e tutte le misure protettive adeguate per es indossando guanti e occhiali di protezione resistenti a tali so stanze Rispettare le normative nazionali e o locali relative alla si curezza di utilizzo manutenzione e dismissione del sistema Suggerimento Quando si utilizzano sostanze chimiche pericolose per la pulizia della colonna o del sistema durante l ultima fase o passo della procedura lavare il sistema o le colonne con una soluzione neutra In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 235 8 Manutenzione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema Sezione Vedere pagina 8 3 1 Scollegare la colonna 8 3 2 System cleaning 237 238 236 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema 8 3 1 Scollegare la colonna 8 3 1 Scollegare la colonna Introduzione La colonna deve essere rimossa dal percorso di flusso prima di pulire il percorso di flusso del sistema I percorso di flusso deve essere ricollegato tra la porta 1 della Injection valve manuale e l ingresso UV Per le procedure di pulizia della colonna e le istruzioni di stoccaggio vedere il catalogo colonna Istruzioni Per rimuovere e ricollegare la colonna dal percorso di flusso attenersi alle istruzioni che seguono Passo Operazione 1 Staccare la t
106. e usare il tastierino numerico per digitarli e Sesi intende salvare il risultato spuntare la casella di controllo Save Result to USB Il nome del file del risultato pu essere modificato impo stando le cifre comprese tra 00 e 99 e Selezionare Run se non si devono impostare altri parametri KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 171 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 1 Ciclo manuale Passo Operazione Nota Assicurarsi che i valori relativi ai limiti di portata e pressione siano idonei per la colonna scelta Per informazioni pi dettagliate consultare il manuale della colonna Se la pressione supera il limite impostato lo strumento entra in stato di Pause Manual run Sample valve Wash valve Column Outlet valve Collection Fractionation volume e Alternare la selezione per impostare quali posizioni valvola vanno aperte A 5 Sample valve impostare come Buffer o Sample in modo che il flusso venga mandato dagli ingressi tampone o dall ingresso del campione Wash valve impostare come Column o Waste per dirigere il flusso verso la colonna o lo scarico Outlet valve impostare come Collection o Waste per dirigere il flusso verso il collettore frazioni o lo scarico e Impostare il Fractionation volume il volume della frazione da raccogliere quando il collettore di frazioni attivato Usare le frecce su e gi per impostare il
107. e usate per la purificazione di proteine marcate per esempio le pro teine marcate con istidina DS 5 ml 53ml Dissalazione Le proteine sono eluite in un unica fase HiTrap utilizzando un solo tampone di eluizione IEX step 1 ml S5Sml Cromatografia a Le proteine legate sono eluite in un unica HiTrap scambio di ioni fase utilizzando un solo tampone di elui zione IEX gradient 1 Cromatografia a Le proteine legate sono eluite utilizzando ml 5ml HiTrap scambio di ioni due tamponi con incremento lineare della concentrazione di tampone B in un periodo di tempo specifico seguito da un passaggio del 100 B GF 16 60 HiPrep Filtrazione su gel Le proteine sono eluite in un unica fase utilizzando un solo tampone di eluizione 184 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Nota 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 2 Quick start Si raccomanda l uso della colonne adatta come indicato dai nomi dei modelli Ad esempio utilizzare la colonna HiTrap 1 ml quando si sele ziona AC IEX step 1 ml HiTrap o una colonna da 5 ml quando si sele ziona AC IEX step 5 ml HiTrap Avvio di un ciclo Per avviare un ciclo in base ad un metodo Quick start attenersi alle istruzioni indicate di seguito Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento Se lo strumento rileva la chiavetta USB il risultato non sar salvato Passo Operaz
108. e v AS mi N Equilibration CV Wash unbound v 15 0 Ae CV 2 3 Q _sove e Selezionare la modalit d iniezione del campione nel campo Sample from da applicare tramite Pump o Loop Per istruzioni dettagliate sull applicazione del campione vedere la Sezione 5 7 Applicazione del campione a pagina 142 e Impostare i parametri ciclo Sample volume il volume di campione da caricare sulla colonna Equilibration volume il volume di tampone A richiesto per bilanciare la colonna Wash unbound volume volume di tampone necessario dopo l appli cazione del campione per lavare le molecole scomposte Nota Il Washout unbound volume utilizzabile unicamente con le tecniche AC IEX 210 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione 3 E Set parameters Elution option socratic Gradient Cone B 10 AN lt le gt Elution volume v Fractionation v 0 Aa mi 3 3 5 e Impostare i parametri ciclo per Elution Option configurata come Isocra tic Conc B concentrazione di tampone B per eluire la proteina legata Elution volume volume necessario per eluire la proteina legata della colonna Fractionation volume volume della frazione da raccogliere quando il collettore di frazioni attivato oppure Set parameters l Elution option isocratic Gradient Target conc
109. een un marchio di Uniqgema Americas LLC Tutti i marchi di fabbrica di terzi sono di propriet dei rispettivi proprietari Qualsiasi uso di UNICORN start regolamentato dall accordo di licenza software standard per l utente finale GE Healthcare per i prodotti software Life Sciences Una copia del presente accordo di licenza per l utente finale Standard Software disponibile su richiesta UNICORN start 2013 2014 General Electric Company 2013 2014 General Electric Company Tutti i diritti riservati Prima edizione settembre 2013 Tutte le merci e i servizi sono venduti in conformit ai termini e alle condizioni di vendita della societ all interno di GE Healthcare che li fornisce Una copia dei presenti termini e condizioni disponibile su richiesta Contattare il rappresen tante locale di GE Healthcare per accedere alle informazioni pi aggiornate GE Healthcare Europe GmbH Munzinger Strasse 5 D 79111 Freiburg Germany GE Healthcare UK Limited Amersham Place Little Chalfont Buckinghamshire HP7 9NA UK GE Healthcare Bio Sciences Corp 800 Centennial Avenue PO Box 1327 Piscataway NJ 08855 1327 USA GE Healthcare Japan Corporation Sanken Bldg 3 25 1 Hyakunincho Shinjuku ku Tokyo 169 0073 Japan 29 0270 57 AF 06 2014 a1875
110. een Sezione 5 3 2 Calibrazione display strumento a pagina 94 Calibrare il UV flow cell Sezione 5 3 5 UV Calibrazione del monitor a pa gina 100 Calibrare il Conductivity cell Sezione 5 3 6 Conductivity Calibrazione del moni tor a pagina 104 Pressure sensor zero offset Sezione 5 3 3 Pressure sensor zero offset a pagi na96 Sostituire i filtri d ingresso Sezione 8 8 1 Sostituire i filtri d ingresso a pagi na 255 232 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 1 Manutenzione regolare Intervento di manutenzione Vedere la sezione Sostituire le tubazioni e i raccordi Sezione 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi a pagina 254 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 233 8 Manutenzione 8 2 Pulizia prima della manutenzione assistenza programmata 8 2 Pulizia prima della manutenzione assistenza program mata Pulizia prima della manutenzione assistenza programmata Per garantire la protezione e la sicurezza del personale di servizio tutte le attrezzature e le aree di lavoro devono essere pulite e prive di contaminanti pericolosi prima che il tecnico dell assistenza inizi l intervento di manutenzione necessario completare l elenco di controllo nel Modulo di dichiarazione di sicurezza amp salute per l intervento di manutenzione in situ o il Modulo di dichiarazione di sicurezza amp salute per la resa o l assistenza del prodotto a seconda che lo strumento sia
111. entazione con spina Non bloccare l accesso all interruttore di alimentazione e al cavo di alimentazione L interruttore di alimentazione deve essere sempre facilmente accessibile Il cavo di alimentazione e la presa devono essere sempre facili da scollegare KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 31 2 Istruzioni di sicurezza 2 3 Procedure di emergenza Interruzione di corrente Le conseguenze dell interruzione di corrente dipendono dall unit coinvolta Mancanza di alimentazio KTA start j si tradurr in Il ciclo si interrompe immediatamente dati raccolti fino al momento della Mancanza d alimentazione sono disponibili sulla chiavetta di memoria USB o se il sistema collegato a un com puter UNICORN start UNICORN start su compu 32 Il computer con installato UNICORN start si spegne Sul display dello strumento AKTA start tutti e quattro i pulsanti a sfioramento verrano evidenziati Il ciclo si interrompe immediatamente possibile recuperare i dati generati fino a 10 secon di prima di un interruzione della corrente Nota I client UNICORN start potrebbe spegnersi in caso di momentaneo sovraccarico del processore Questa con dizione potrebbe essere interpretata come un guasto al computer Il ciclo di funzionamento continua ed possi bile riavviare il client UNICORN start per riprendere il controllo KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF
112. ento nell apposito campo Set Ref Temp Assicurarsi che la casella di controllo Enable Temperature Compen sation nella schermata Conductivity Calibration sia spuntata Per impostare la temperatura di riferimento seguire le istruzioni indicate di seguito KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 105 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor Passo Operazione 1 Nella schermata Conductivity Configuration impostare il valore della temperatura di riferimento Set Ref Temp nell intervallo compreso tra 4 C e 35 C Configuration Set Cell Const Set Ref Temp 2 Selezionare Save per salvare il nuovo valore della temperatura di riferimento Calibrazione del sensore di temperatura Per calibrare il sensore di temperatura seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Collocare un termometro di precisione sul percorso della UV flow cell imme diatamente dopo la Conductivity flow cell e pompare acqua DM nel sistema con una portata di 0 5 ml min 2 Nella schermata 3 Settings and service selezionare Conductivity per acce dere alle opzioni del monitor Conductivity Risultato Si apre la schermata Conductivity Calibration Configuration Advanced calibration A 106 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor
113. er applicare direttamente il campione tramite la Pump seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Collegare una tubazione in ETFE con d i di 1 mm alla porta I campione della Sample valve 2 Immergere l altra estremit della tubazione di ingresso campione nel conte nitore per campioni 146 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Passo Operazione 3 Dal display dello strumento selezionare la funzione Method Run Method run Quick start User defined Prepare system O Templates Selezionare Quick start oppure Templates Per istruzioni dettagliate vedere la sezione Sezione 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo a pagina 180 4 Nella schermata Run parameters selezionare l applicazione del campione tramite la Pump Run parameters 1 Sample from Pump Loop Equilibration Ae CV volume SI 50 votume e Mii 15 B A volume 159 Nota e Una volta applicato il campione tramite la Pump la Injection valve deve essere portata manualmente in posizione Load predefinita e Lavare la tubazione di ingresso campione con il tampone A prima di im mergere la tubazione nel tubo di campionamento Mantenere un volume sufficiente di campione per evitare che nella tubazione entri aria e Verificare che non vi siano bolle d aria intrappolate nella tubazione e Riempire preliminarmente la
114. er preparare la colonna per un ciclo seguire le istruzioni indicate di seguito La proce dura Column preparation avviata dal display dello strumento Passo Operazione 1 Immergere la tubazione d ingresso tampone nella soluzione tampone previ sta 2 Collegare la colonna al percorso di flusso Per istruzioni dettagliate vedere la Sezione 5 5 Collegamento di una colonna a pagina 126 3 Nella schermata home di AKTA start selezionare Method run KTA start a Create method Settings and service KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 139 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 4 Column preparation Passo Operazione 4 Nella schermata Method run selezionare Prepare system Method run Quick start Templates User defined Prepare system l D ES 5 Selezionare Column preparation e poi Select per iniziare l esecuzione del metodo Per istruzioni dettagliate vedere Sezione 6 4 5 Metodi Prepare system a pagina 201 Select system method 7 Pump wash A E Pump wash B gt C Washout fractionation tubing Column preparation 1 2 Back L_ EZS 6 Per iniziare l esecuzione del metodo impostare i parametri ciclo richiesti e selezionare Run Run parameters Column volume Flow rate Pressure limit Run volume 140 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6
115. ere il System performance method fino ad ottenere la riusci ta Se si nota un gradiente ondulato o sue oscillazioni eseguire l otti mizzazione del Switch valve timing Se la prova non va a buon fine anche dopo aver seguito la proce dura di cui sopra sostituire il modulo guasto KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 121 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 4 Switch valve timing 5 4 4 Switch valve timing Introduzione 122 Switch valve timing usato per ottimizzare la fasatura della valvola di commutazione Buffer valve di KTA start consigliato per ottimizzare la fasatura della valvola di commutazione quando si ottengono gradienti ondulati o quando si osservano oscillazioni nel gradiente a scalino durante i cicli con System performance method o cromatogra fici Nota La Switch valve timing A predefinita 4 sec La Switch valve timing B 5 sec Switch valve time pu essere impostato tra 3 0 e 5 0 sec con in crementi di 0 1 sec tramite Advanced timing Le oscillazioni del gradiente o i gradienti ondulati dipendono in larga misura dalle portate Si consiglia di modificare la fasatura della valvola di commutazione se si denotano ondulazioni oscilla zioni in portate specifiche Dopo aver cambiato il Switch valve time eseguire un System performance method per valutare le oscillazioni di gradiente gra dienti ondulati Alternativamente si pu anche
116. escrizione Assenza di flusso Causa possibile La tubazione pom pa non fissata all interno della ca lotta della pompa Guasto componen te della scheda madre 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Operazione Fissare la tubazione pompa all interno della calotta e avviare il ciclo Eseguire la procedura di risoluzione pro blemi mediante la funzione Pump e qualora il problema persista contattare un tecnico dell assistenza GE Perdita Descrizione Perdita Collettore frazioni Descrizione Connessione tuba zioni Causa possibile Raccordo tubazio ne Causa possibile Verificare i collegamenti della tubazione Se necessario serrare di nuovo o sostitui re Operazione Verificare i collegamenti della tubazione Se necessario serrare di nuovo o sostitui re Operazione Le frazioni raccolte fuoriescono dalle provette di raccol ta Gruppo bacinella montato in modo errato sull unit di base Verificare che il gruppo bacinella sia montato correttamente sulla base non inclinato Braccio dispensato re non in posizione corretta Controllare che il braccio dispensatore sia in posizione di distribuzione Osserva re l allineamento dei contrassegni sul braccio dispensatore Il manicotto di co mando usurato e si verifica lo slitta mento Sostituire il manicotto di comando Fare riferimento al KTA start Maintenance
117. eseguire un ciclo manuale con 50 B per 10 min per valutare le oscillazioni di gra diente gradienti ondulati KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 4 Switch valve timing Immagine di funzionamento tipico L immagine sottostante mostra il risultato di un System performance method in cui si sono osservate oscillazioni nel gradiente freccia 4 UV 4 Conductivity 4 Gradient Concentration O System Flow O Pressure O Fraction O Run Log ml La Switch valve timing stata modificata a 5 sec il test stato ripetuto ed il risultato ha fatto registrare una performance accettabile del gradiente freccia E UV Ly Conductivity 4 Gradient Concentration L System Flow Pressure O Fraction O Run Log mi Nota Alternativamente si pu anche eseguire un ciclo manuale con 50 B per 10 min per valutare le oscillazioni di gradiente gradienti ondulati KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 123 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 4 Switch valve timing Impostazione della Switch valve timing Attenersi alle istruzioni che seguono per modificare la Switch valve timing La Switch valve timing pu essere modificata dal display dello strumento Passo Operazione 1 124 Dalla schermata Home di
118. feriore Nota Durante il disimballaggio dell unit Frac30 evitare di danneggiare o strappare l etichetta di garanzia 74 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 75 4 Installazione 4 4 Confezione accessori 4 4 Confezione accessori Illustrazione della confezione accessori L illustrazione seguente mostra la scatola accessori e la documentazione per l utente che accompagna l unit AKTA start alla consegna AKTA start 3 W Hi KTA start Product Documentation z AKTATM start AKTATM Start AKTA Stort e Card User bo Documentos Descrizione Istruzioni di disimballaggio Certificato del sistema Documentazione sul prodotto Guida rapida alla manutenzione Guida rapida al sistema CD contenente i file della documentazione per l utente e un video con la procedura di disimballaggio Il CD contiene le Istruzioni di funzionamento e il Manuale di manutenzione in inglese e nelle versioni tradotte 76 Scatola accessori KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start 4 5 Installazione KTA start Introduzione Questa sezione illustra la procedura di installazione dell unit AKTA start Eseguire le operazioni descritte di seguito e Installare la tubazione
119. fiche UV Conductivity Frac30 Parametro Gamma della lunghezza d onda 280 nm 3 nm Lunghezza d onda singola Gamma dell assorbanza Da 0 1 a 2 AU Linearit entro 5 fino a 1 5 AU Pressione di esercizio da 000 5 MPa Cella di flusso Parametro Gamma di conduttivit Lunghezza percorso ottico 2 mm Volume totale cella 30 pl da 0 mS cm a 300 mS cm Risoluzione 1 mS cm Precisione 5 o 2 mS cm lin base al valore maggiore Pressione di esercizio da 0 a 0 5 MPa Volume celle di flusso Intervallo monitor tempe ratura 22 pl Da 4 C a 35 C Precisione del monitor temperatura Parametro Numero di frazioni 10 o 5 C in base al valore maggiore Fino a 30 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Parametro Tipi di recipiente 10 Informazioni di riferimento 10 1 Specifiche Provette per centrifuga da 10 a 12 ml Provette in flaconi 15 ml Provette Eppendorf 1 5 o 2 ml e Provetteda5ml 12x 75 mm Volumi delle frazioni da 0 50 15 ml Liquidi infiammabili Volume di ritardo da UV a testa dispensatrice No 0 49 ml predefinito Dimensioni L x P x A 270 x 280 x 285 mm Peso KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Kg 281 10 Informazioni di riferimento 10 2 Resistenza chimica 10 2 Resistenza chimica Percorso di flusso Tutte le
120. i con UNICORN start non possono essere modificati dallo strumento Utilizzare UNICORN start per modificare tali metodi Message A Are you sure you want to save the method Yes No Selezionare Yes per confermare il salvataggio del metodo oppure Selezionare No per annullare l operazione e tornare all impostazione dei parametri ciclo Importare un metodo Attenersi alle seguenti istruzioni per importare un metodo memorizzato in una chiavetta di memoria USB Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB contenente i metodi definiti dall utente sia collegata allo strumento Per ulteriori informazioni sull esportazione di un metodo vedere Sezione 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB a pagina 218 214 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione Create method i EE EEN Nella schermata Create method selezionare USB Import per accedere ai metodi Select method to import from USB Method 1 C Method 2 sea E CZS e Selezionare un pulsante di opzione per selezionare un metodo e Selezionare Import per importare il metodo Risultato Una schermata Message che chiede di confermare l operazione che verr visualizzata Selezionare Yes per confermare l importazione del file selezionato oppure Selezionare No per annullare l operazione e tornare all ele
121. i di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Caricare il campione nel circuito di campionamento Per caricare il campione nel circuito seguire le istruzioni indicate di seguito Nota Prima dell iniezione del campione lavare il circuito con acqua demine ralizzata DM e tampone utilizzando una quantit almeno 5 volte su periore a quella del circuito Passo Operazione 1 Riempire una siringa con il campione 2 Collegare la siringa alla porta Injection valve 3 Nota Accertarsi che la Injection valve sia in posizione Load Sample questo con sente di riempire il circuito di campionamento dalla porta di riempimento 3 3 Prestando la Massima attenzione caricare il campione nell apposito circuito Per evitare perdite di campione dovute all effetto di sitonamento lasciare la siringa nella porta fino a quando il campione non viene iniettato nella colonna durante il ciclo Suggerimento consigliabile riempire il circuito fino all eccesso per essere sicuri che sia completamente pieno Il campione in eccesso fuoriesce dalla valvola attraverso la porta 4 4 Dal display dello strumento selezionare Method run quindi scegliere Templates Per maggiori dettagli vedere la sezione Sezione 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo a pagina 180 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 149 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campion
122. i report di superamento non superamento test nel rapporto Per un elenco dettagliato dei criteri di accettazione vedere Sezio ne 5 4 2 System performance method da KTA start a pagina 114 120 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Immagine della Prova delle prestazioni del sistema 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 3 System performance method da UNICORN start L illustrazione seguente mostra un tipico file dei risultati del System performance method creato da UNICORN start 4 UV 4 Conductivity 4 Gradient Concentration System Flow Pressure Fraction Run Log mAU 360 340 320 300 280 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 ml 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 Nota Si consiglia di ottimizzare la fasatura della valvola di commutazione se si osservano gradienti ondulati o oscillazioni Per una descrizione dettagliata vedere la sezione Sezione 5 4 4 Switch valve timing a pa gina 122 Nota Se il System performance method fallisce analizzarne la causa in base ai criteri di accettazione Eseguire le seguenti operazioni Ricalibrare il modulo non riuscito Usare un tampone con composizione corretta Pulire il modulo guasto o l intero sistema Fare riferimento al capi tolo Capitolo 8 Manutenzione a pagina 229 per ulteriori dettagli sulle procedure di pulitura Seguire attentamente le istruzioni di prova Ripet
123. ia ne cessario pulirli dei filtri d ingresso a pagina 245 Ognime Pulire il percorso di flusso del sistema con 1M Sezione 8 3 2 System se O NaOH e sciacquare con acqua DM cleaning a pagina 238 quando Nota necessa rio La pulizia pu rendersi necessaria pi o meno frequentemente a seconda dell uso del sistema e della natura dei campioni KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 231 8 Manutenzione 8 1 Manutenzione regolare interval Intervento di manutenzione Vedere la sezione Ko Una vol Controllare visivamente il manicotto dicoman Manuale di manuten ta l anno do del collettore di frazioni Se il componente zione Capitolo 7 o quan usurato sostituirlo Smontaggio do neces sario Altri interventi di manutenzione richiesti seguenti interventi di manutenzione devono essere eseguiti dall utente di KTA start quando necessario Intervento di manutenzione Vedere la sezione Pulizia esterna dello strumento Sezione 8 6 2 Pulizia esterna dello strumento a pagina 246 pulizia del collettore di frazioni Sezione 8 6 3 Pulizia del collettore di frazioni a pagina 247 Eseguire la System cleaning Sezione 8 3 2 System cleaning a pagina 238 Pulizia della UV flow cell Sezione 8 4 Pulitura della cella di flusso UV a pagina 241 Pulizia della Conductivity cell Sezione 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell a pagina 243 Calibrare il touch scr
124. iare un ciclo dal display dello strumento sono e Methodrun e Manualrun Istruzioni dettagliate sono presentate nella Sezione 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale a pagina 170 e nella Sezione 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo a pagina 180 Pagina iniziale di AKTA start Method run Create method Settings and service Opzioni ciclo con metodo e Quick start e Templates e User defined Prepare system Crea opzioni di esecuzione metodo Crea Modifica Importa USB Elimina Esecuzione manuale Imposta parametri di esecuzione Salvare il nuovo metodo User defined Impostazioni e opzioni di servizio per i moduli e Fraction collector e Pressure sensor e Pump e System e Buffer valve e Sample valve e Wash valve e Outlet valve e Main board e UV Display e Conductivity Le procedure necessarie successive al ciclo ad es la pulizia della colonna del percorso di flusso del sistema possono anche essere eseguite manualmente oppure tramite i metodi presenti nel menu Prepare system KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 1 Introduzione La calibrazione dei moduli e l assistenza possono essere eseguiti dalla schermata Settings and service Istruzioni dettagliate sulla calibrazione sono riportate nella Sezione 5 3 Ca librazioni a pagina 91 Le operazioni di gestione dei metodi come creare modificare e importare un metod
125. icolose RoHS cinese KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 13 1 Introduzione 1 4 Documentazione associata 1 4 Documentazione associata Introduzione Questa sezione descrive la documentazione d uso che viene fornita con lo strumento e come reperire ulteriore documentazione ad esso associata scaricabile o ordinabile da GE Documentazione utente su CD La documentazione d uso elencata nella tabella sottostante disponibile sul CD con la Documentazione Utente di AKTA start Una guida consultabile direttamente sul display dello strumento Documentazione Principali contenuti KTA start Istruzioni di funzionamento Istruzioni necessarie per installare utiliz zare ed eseguire la manutenzione di KTA start in piena sicurezza KTA start Instrument Display Help Le descrizioni con finestre di dialogo del menu funzioni per KTA start accessibili solo dal display dello strumento KTA start Maintenance Manual Descrizioni dettagliate dello strumento e del modulo comprese quelle necessarie per la manutenzione e per risolvere i problemi di KTA start KTA start System Cue Card Una guida riepilogativa per predisporre ed eseguire le tecniche cromatografiche su AKTA start AKTA start Maintenance Cue Card Una guida riepilogativa su come gestire le operazioni di manutenzione ordinaria e la risoluzione dei problemi di KTA start 14 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57
126. indicato dal LED bianco nella parte anteriore di Frac30 Collegare un computer a KTA start Nota Prima di collegare il computer ad AKTA start installare il software UNICORN start sul computer Fare riferimento a UNICORN start 1 0 User Manual Seguire le istruzioni indicate di seguito per collegare un computer UNICORN start ad AKTA start 82 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Passo Operazione l Collegare l alimentazione al computer ed al monitor quindi accendere il computer e KTA start Risultato Lo strumento visualizza la schermata iniziale KTA start KTA start 2 Create method Settings and service 2 Collegare il cavo di collegamento PC al connettore contrassegnato PC Connection nella parte posteriore di KTA start e ad una porta USB del computer KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 83 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Passo Operazione 3 Avviare UNICORN start e collegarlo ad AKTA start Per le istruzioni dettagliate fare riferimento a UNICORN start 1 0 User Manual Risultato Una volta connesso lo strumento visualizza la schermata iniziale AKTA start AKTA start CI Nota Prima dell avvio accertarsi che siano state realizzate tutte le connessioni del sistema Assicurarsi inoltre di trovarsi nella schermata iniziale AKTA start in stato di connessione quando si cerca di effettuare il col
127. ionamento 29 0270 57 AF 179 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo Introduzione Questa sezione descrive i tipi di metodo che si possono selezionare per un ciclo In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 6 4 1 Selezionare un tipo di metodo 181 6 4 2 Quick start 184 6 4 3 Templates 190 6 4 4 User defined methods 198 6 4 5 Metodi Prepare system 201 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 1 Selezionare un tipo di metodo 6 4 1 Selezionare un tipo di metodo Tipi di metodo Per eseguire un ciclo con metodo sono selezionabili quattro diversi tipi di metodo diversi tipi di metodo sono indicati di seguito Quick start Consente all utente di eseguire metodi come affinit scambio di ioni filtra zione su gel e dissalazione con parametri metodo predefiniti Templates Consente all utente di modificare ed eseguire i metodi predefiniti Affinit Scambio di ioni Filtrazione su gel e Dissalazione User defined Consente all utente di eseguire metodi da esso creati o metodi importati tramite USB Prepare system Consente all utente di eseguire operazioni di sistema come lavaggio pompa preparazione colonna pulizia e prove sulle performance del sistema metodi Quick start e Templates disponibili c
128. ione 1 Method run Quick start Templates User defined Prepare system EY Nella schermata Method run selezionare Quick start per accedere ai mo delli Quick start ACstep 1 ml HiTrap C ACstep 5 ml HiTrap ca gt gt DSS ml HiTrap _ DS 53 ml HiPrep 1 3 Cia O EB Quick start O IEX step 1 ml HiTrap IEXstep 5 ml HiTrap i lt gt f IEX gradient 1 ml HiTrap ii IEX gradient 5 ml HiTrap 2 3 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 185 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 2 Quick start Passo Operazione Quick start gt GF 16 60 HiPrep e Perselezionare un metodo Quick start selezionare un pulsante di opzio ne oppure Selezionare la freccia avanti per accedere ai metodi Quick start supple mentari e Per proseguire can il ciclo scelto selezionare Select Nota Accertarsi di caricare il volume campione consigliato per la colonna selezio nata Se si utilizzano colonne grandi per la filtrazione su gel si consiglia di prebilan ciare la colonna prima di avviare il ciclo Run parameters Sample from Pump Sample volume v 50 AS mi tous M to USB asala e La modalit di applicazione del campione Pump predefinita Nota L applicazione del campione tramite Pump usata per tutti i metodi Quick start per automatizzare il caricamento
129. itor in UNICORN start Collegare una chiavetta di memoria USB al computer Selezionare File Export Export Method per poter esportare il metodo creato su una chiavetta di memoria USB collegata al computer Nota Assicurarsi che il metodo venga memorizzato in una cartella GE Importare metodi in KTA start importazione USB Attenersi alle istruzioni che seguono per importare un metodo da UNICORN start a AKTA start Passo Operazione 1 2 Creare un metodo usando il modulo Method Editor in UNICORN start Selezionare File Export Export Method for AKTA start to USB per poter esportare il Metodo creato su una chiavetta di memoria USB Collegare la chiavetta USB a KTA start Nota Assicurarsi che il metodo venga memorizzato in una cartella GE Dalla schermata Home di KTA start selezionare Create method USB import Selezionare il metodo da importare 220 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 3 File dei risultati BMP 6 6 3 File dei risultati BMP Introduzione Per poter assicurare all utilizzatore la possibilit di vedere l immagine dei risultati utiliz zando un altro tipo di software esternamente a AKTA start e UNICORN start lo strumento consente tramite una funzione di esportare i risultati in formato BMP Questo formato facilita la visione dei risultati generati senza UNICORN start Carat
130. ity flow cell Nota I tamponi usati devono rientrare nel range di con duttivit dello strumento da 0 a 300 mS cm Outlet valve Una valvola a 3 porte viene usata per dirigere il flusso nel collettore frazioni o verso lo smaltimen to KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 41 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 Display strumento Introduzione Questa sezione fornisce una descrizione del display dello strumento AKTA start e le funzioni che sono accessibili dal display In questa sezione 42 Questa sezione include i seguenti sotto paragrafi Sezione Vedere pagina 3 3 1 Panoramica del display dello strumento 43 3 3 2 Descrizione di Method run 48 3 3 3 Descrizione di Create method 51 3 3 4 Descrizione di Settings and service 52 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 1 Panoramica del display dello strumento 3 3 1 Panoramica del display dello strumento Introduzione Il display dello strumento posizionato sul lato anteriore di KTA start Il display dello strumento consente all utente di controllare il sistema selezionando l operazione deside rata e Avviare un ciclo e controllare un ciclo in esecuzione e Visualizzare l avanzamento del ciclo in corso e Gestire metodi definiti dall utente e Eseguire la manutenzione e l assistenza Questa sezione fornisce una breve descrizione delle funzi
131. iude PUMP Collegamento dell alimentazione elettrica a AKTA start Per collegare l alimentazione a AKTA start seguire le istruzioni riportate di seguito Passo Operazione 1 Scegliere il corretto cavo d alimentazione da usare KTA start viene fornito completo di 2 tipi di cavi d alimentazione e Cavo di alimentazione da 2 m con spina americana e Cavo di alimentazione da 2 m con spina europea Nota Scartare il cavo di alimentazione non necessario KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 79 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Passo Operazione 2 Collegare il cavo di alimentazione al connettore di ingresso corrente sul lato sinistro dello strumento e ad una presa a muro con messa a terra da 100 240 VCA 50 60 Hz ATTENZIONE AKTA start alla consegna riempito con alcol denatu rato 50 C2H50H etanolo La miscela di alcol dena turato pu essere pericolosa per l uomo se ingerita Prima di assemblare testare o integrare KTA start nell ambiente di processo a cui esso destinato scari care l alcol denaturato Nota Per le istruzioni su come pulire il percorso di flusso vedere Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 Collegare Frac30 a KTA start AVVISO Il dispositivo Frac30 non deve essere collegato o scollegato dall unit KTA start quando lo strumento acceso ON Per collegare Frac
132. l Tubazione pompa Porta III Tubazione d ingresso dal Mixer Porta Tubazione di uscita utilizzata per la pulizia del smaltimento percorso di flusso o la sostituzione del tampo ne eseguendo il modello Pump Wash A B Porta Il Tubazione d ingresso dal Pressure sensor Porta III Tubazione di uscita per Injection valve Injection val Porta 1 Uscita la tubazione collegata alla colonna ve Porte 2 e 5 Ingresso uscita per il collegamento del circuito siii di campionamento Porta 3 Ingresso per iniettare il campione nel circuito Porta 4 Tubazione di uscita verso smaltimento serve smaltimento per il lavaggio o lo scarico del campione in eccesso dal circuito Porta 6 Ingresso la tubazione collegata alla Wash valve KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 87 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 1 Panoramica del percorso di flusso NM ete LU Co Outlet valve Connessione tu bazioni Porta smaltimento Utilizzo Tubazione di uscita verso contenitore di smal timento Porta Il Tubazione d ingresso dal monitor Conductivi ty Porta III raccolta Posizionamento dei recipienti di tampone Tubazione di uscita verso collettore frazioni I recipienti di tampone sono collocati sul vassoio tampone nella parte superiore dello strumento come illustrato di seguito Il contenitore o tubo di campionamento pu essere sistemato sul banco a sinistra dello strumento
133. l ciclo System performance method pu essere terminato prima del completamento selezionandoEnd per annullare la prova KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 115 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 2 System performance method da AKTA start Passo Operazione 5 Selezionare Exit per chiudere la schermata quando il ciclo System perfor mance method completato Run ended UY absorbance Conductivity Flow rate Pressure Tube no Nota Non staccare la chiavetta di memoria USB finch il sistema non genera il rapporto file BMP 6 Rivedere il report per verificare se la prova riuscita o meno in base ai Cri teri di accettazione sotto riportati Criteri di accettazione Tempo Attivit min Lavaggio pompa Verificare Posizione Wash valve Intervallo appro Yo Ko Fase mobile fuori scala per parame tro Waste Un flusso pari a 1 ml min 0 B attraversa la posizione Ou tlet valve Waste Ripetere UV Auto zero Contropressione lt 0 05 MPa 5 ml min Contropressione da 0 06 a 0 2 MPa Livello UV 10 MAU Livello conduttivit 1 mS cm 1 ml min su posizione Sample valve Sample Livello UV max da 300 a 380 MAU Livello conduttivit max da 65 a 95 mS cm 116 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Pres
134. l o esportati in una chiavetta di memoria USB per avviarli direttamente da AKTA start 226 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 7 Operazioni controllate da UNICORN start 7 3 Evaluation 7 3 Evaluation Introduzione Il modulo Evaluation viene usato per gestire e valutare i risultati dei cicli cromatografici Immagine del modulo Evaluation L interfaccia utente di Evaluation illustrata di seguito lag Evaluation GF 2 olle 4 File Edit View Integrate Operations Tools Help F X B3 a LA Peak Integrate INR Edit Peak Table Result Navigator Results Recent Runs Find Results Open lo A s UV Li Conductivity 4 Gradient Concentration A System Flow O Pressure d Fraction Folder name System 4 Injection d Run Log TEST PC mS cm Default Home 18 E 00000000000001722538 17 AIAC GS Trap 0000000000 16 I AC HisTrapi 0000000000 15 A AC HisTrap2 0000000000 14 A AC Mab Protein A ID_nnnn nnn 13 A AC Mab Protein G ID_nnnn nonni 12 ml DS HiTrap Frac Pump 002 1D_nnnn nnni 11 ml DS HiTrap NoFrac Pump 0 ID_nnnn nnni 10 GeF 9 mi GF 2 8 GF 3 7 Pi 4 GF HiPrep Sephacryl 16_6 0000000000 i A IEX HiTrap DEAE 1 ID_nnnn noi A F J IEX HiTrap DEAE 2 Dmna 5 3 2 DO IEX HiTrap DEAE 3 1D_nnnn ninni 5 5 o i 1 ii 0 Funzioni principali Le caratteristiche principali del modulo Evaluation son
135. la fascetta e togliere quest ultima 5 Rimuovere l imbottitura in espanso dalla parte superiore del collettore di frazioni KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 71 4 Installazione 43 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 6 Rimuovere l imbottitura in espanso anche dalla parte inferiore del collettore di frazioni sollevando con cautela quest ultimo 7 Togliere la busta di plastica 72 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 8 Togliere il gruppo bacinella dall unit di base e Muovere delicatamente il braccio dispensatore in senso antiorario fino a fine corsa e Premere sul gruppo di comando e tenerlo in posizione ritratta Contem poraneamente sollevare il gruppo bacinella Ev KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 73 4 Installazione 4 3 Disimballare KTA start e Frac30 Passo Operazione 10 Rimontare il gruppo bacinella sull unit di base e Orientare la bacinella in modo da far coincidere la tacca di allineamento e i segni corrispondenti presenti sul portabacinella e Premere leggermente di lato sul gruppo di comando ed abbassare il gruppo bacinella sull unit di base ti AVVISO Non utilizzare mai il braccio dispensatore per sollevare o tenere in mano il Frac30 Per sollevare il modulo utilizzare la maniglia pre sente sulla piastra in
136. legamento dal modulo System Control ATTENZIONE AKTA start alla consegna riempito con alcol denaturato 50 C2H50H etanolo La miscela di alcol denaturato pu essere pericolosa per l uomo se ingerita Prima di assemblare testare o integrare KTA start nell ambiente di processo a cui esso destina to scaricare l alcol denaturato 84 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 Preparazione del sistema per un ci clo Informazioni sul capitolo Questo capitolo descrive come avviare lo strumento e preparare il sistema per l esecu zione di un ciclo In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 5 1 Panoramica del percorso di flusso 86 5 2 Avviare lo strumento 90 5 3 Calibrazioni 91 5 4 Prestazioni del sistema 111 5 5 Collegamento di una colonna 126 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 130 5 7 Applicazione del campione 142 5 8 Preparazione del collettore di frazioni 154 5 9 Operazioni in camera fredda 159 5 10 Avvio di un ciclo 161 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 85 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 1 Panoramica del percorso di flusso 5 1 Panoramica del percorso di flusso illustrazione del percorso di flusso La figura seguente mostra il percorso di flusso di AKTA start Il percorso del flusso con tiene Pump Mixer Valves e UV Conductivity e i monitor Pres
137. liate vedere la Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 I modelli di sistema disponibili con KTA start sono elencati di seguito e PumpwashA e Pump wash B e Washout fractionation tubing e Column preparation e System cleaning e System performance method I metodi Pump wash A B Washout fractionation tubing e Column preparation richiesti per la preparazione del sistema sono riportati in dettaglio nella Sezione 5 6 Metodi per ciclo Prepare system a pagina 130 Il System performance method riportato nella Se zione 5 4 Prestazioni del sistema a pagina 111 Pulizia del sistema Per effettuare un ciclo di pulizia del sistema attenersi alle istruzioni indicate di seguito Per istruzioni dettagliate sulla pulizia del sistema tramite modello System cleaning ve dere la Sezione 8 3 2 System cleaning a pagina 238 Passo Operazione 1 Method run Quick start Templates User defined Prepare system Nella schermata Method run selezionare Prepare system per accedere ai metodi di sistema KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 201 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 5 Metodi Prepare system Passo Operazione 2 ri Select system method System cleaning System performance method 2 2 Back EJ EZS Nella schermata Select system method e Selezionare System cleaning e
138. lla soluzione di NaOH e sciacquarli completamente in acqua DM 4 Montare il filtro d ingresso e la rete di supporto e premerli in posizione sul relativo supporto KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 245 8 Manutenzione 8 6 Altre procedure di pulizia 8 6 2 Pulizia esterna dello strumento 8 6 2 Pulizia esterna dello strumento Intervalli di manutenzione Se necessario pulire lo strumento all esterno Non lasciare che il liquido versato si secchi sullo strumento Materiale richiesto Sono necessari i seguenti materiali e Panno per pulizia e Detergente neutro o 20 di etanolo Istruzioni Per pulire lo strumento esternamente seguire le istruzioni riportate di seguito Passo Operazione 1 Verificare che non vi siano cicli in corso 2 Spegnere lo strumento 3 Pulire la superficie con un panno inumidito Pulire le macchie usando un detergente neutro od etanolo acquoso al 20 4 Prima di procedere all uso lo strumento deve essere completamente asciutto 246 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 6 Altre procedure di pulizia 8 6 3 Pulizia del collettore di frazioni 8 6 3 Pulizia del collettore di frazioni Intervalli di manutenzione Pulire il collettore di frazioni all occorrenza per esempio in caso di versamento di liquidi nel gruppo bacinella Materiale richiesto Per la pulizia del gruppo bacinella sono necessari i seguenti materiali e Acqu
139. lle istruzioni che seguono La pro cedura System cleaning avviata dal display dello strumento Passo Operazione 1 Rimuovere la colonna dal percorso di flusso e ricollegare la tubazione 2 Immergere entrambi gli ingressi dei tamponi in 1M NaOH 238 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema 8 3 2 System cleaning Passo Operazione 3 Nella schermata home di KTA start selezionare Method run KTA start a Create method Settings and service 4 Nella schermata Method run selezionare Prepare system Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system A 5 Selezionare System cleaning e poi Select per iniziare l esecuzione del metodo Per istruzioni dettagliate vedere Sezione 6 4 5 Metodi Prepare system a pa gina 201 Select system method System cleaning O System performance method KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 239 8 Manutenzione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema 8 3 2 System cleaning Passo Operazione 6 e Eseguire le operazioni che appaiono sul display 1 Scollegarelacolonna 2 Collegare Injection valve a UV con le tubazioni ed i connettori adatti 3 Posizionare i tubi dei tamponi A amp B nella soluzione detergente e SelezionareContinue per avviare System cleaning System cleaning Please follow instructions 1
140. mento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 4 User defined methods Passo Operazione Graph per visualizzare il ccomatogramma Edit run per cambiare i parametri del ciclo in corso Hold per mettere in pausa il ciclo in corso Pause per mettere in pausa il ciclo in corso End per terminare il ciclo prima del suo completamento Nota La chiavetta di memoria USB memorizza i file dei risultati che possono essere visualizzati tramite UNICORN start Viene creato anche un file BMP che pu essere visualizzato su un PC Per ulteriori dettagli vedere la Sezione 6 6 3 File dei risultati BMP a pagina 221 Non staccare la chiavetta di memoria USB finch il sistema non genera il rapporto file bmp Nota I metodi importati tramite USB che sono stati creati con UNICORN start non possono essere modificati dallo strumento Utilizzare UNICORN start per modificare tali metodi 200 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 5 Metodi Prepare system 6 4 5 Metodi Prepare system Introduzione Metodi predefiniti per la preparazione e la pulizia del sistema sono disponibili con AKTA start Usare i metodi Prepare system per pulire l intero percorso di flusso del sistema ove necessario e per riempire il sistema con soluzione di stoccaggio quando lo strumento non deve essere utilizzato per un certo periodo di tempo Per istruzioni dettag
141. mi possibile generare un rapporto degli errori di sistema con le informazioni specifiche sul tipo di problema riscon trato Il rapporto pu poi essere inviato al tecnico dell assistenza GE per gli interventi del caso Creare un report degli errori di sistema per generare un report degli errori di sistema seguire le istruzioni riportate di seguito Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento Se lo strumento non riesce a rilevare la chiavetta USB il file del risultato non sar salvato Passo Operazione 1 Nella schermata Home di KTA start selezionare Settings and service per accedere alla schermata 1 vedere Sezione 3 3 4 Descrizione di Settings and service a pagina 52 quindi selezionare Settings and service Settings and service Schermata 1 Settings and service Fraction collector Pressure sensor 1 3 Q Next KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 273 9 Eliminazione dei guasti 9 3 Report degli errori di sistema 214 Passo Operazione Collegare una chiavetta di memoria USB alla relativa porta USB presente su KTA start Nella schermata Sistema selezionare Export system error report to USB System Serial 00000000000000000001 Dl sg Firmware update setting Switch valve timing pesanti a Risultato Nella chiavetta di memoria USB vengono esportati due file deno minati INSTLOG TXT e ERRORLOG TKT Staccare l
142. mpione acetone all 1 0 1 0 M NaCl 112 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 1 System performance method e Accertarsichellcircuito di campionamento sia riempito di campione acetone all 1 0 1 0 M NaCI e Assicurarsi che la tubazione da 2 m con d i di 0 5 mm sia collegata alla Outlet valve in posizione di smaltimento e Quandosiesegue il System performance method senza collettore di frazioni accer tarsi che la tubazione di frazionamento della Outlet valve sia inserita in un becher pesato preventivamente e Quando si esegue il System performance method con collettore di frazioni accer tarsi che la tubazione di frazionamento della Outlet valve sia collegata al collettore di frazioni con almeno 5 provette preventivamente pesate e Assicurarsi che il sistema sia preventivamente riempito con acqua DM e Prendere nota di tutte le osservazioni richieste registrando i parametri mentre il Sy stem performance method in corso Inserire i valori osservati nel modello di report del sistema riportato nella sezione Sezione 11 1 Report sulle prestazioni del sistema a pagina 293 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 113 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 2 System performance method da AKTA start 5 4 2 System performance method da AKTA start Istruzioni Seguire le istruzioni indicate di
143. mpone e la tubazione d ingresso campione in acqua DM 2 Nella schermata home di KTA start selezionare Manual run Per istruzioni dettagliate vedere la Sezione 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale a pagina 170 Impostare i parametri del ciclo facendo riferimento alla tabella seguente Parametro Impostazione Flow rate 1 ml min Pressure limit 0 5 MPa Select Buffer Sample Buffer Wash valve Column Outlet valve Waste 3 Selezionare Run per avviare il ciclo manuale Pompare 20 ml di acqua DM nel sistema 250 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 7 Stoccaggio dello strumento Passo Operazione 4 Selezionare Edit run e impostare i parametri del ciclo come indicato di se guito Risultato La tubazione di ingresso campione e quella di uscita per la raccolta frazioni verranno lavate con acqua DM Parametro Impostazione Select Buffer Sample Sample Outlet valve Collection 5 Pompare 20 ml di acqua DM nel sistema 6 Terminare il ciclo e lasciare il sistema pieno d acqua DM durante il periodo di stoccaggio Stoccaggio a lungo termine Se non si deve utilizzare il sistema per pi di 4 giorni seguire le istruzioni indicate di se guito per preparare il sistema per lo stoccaggio a lungo termine Nota Prima di pulire il percorso di flusso rimuovere la colonna e poi ricolle garla al percorso di flusso Vedere Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagi
144. n un ciclo con metodo KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 2 Quick start Passo Operazione Run on hold UY absorbance I maAU Conductivity 0 mS cm Flow rate i ml min Pressure Tube no Per riprendere il ciclo selezionare Resume Nota Durante il mantenimento il ciclo viene momentaneamente interrotto mante nendo portata gradiente e posizioni valvole attuali KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 189 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates 6 4 3 Templates Introduzione AKTA start fornisce quattro modelli di metodo in base alle tecniche di purificazione pi comunemente utilizzate Modelli sono gi provvisti di parametri ciclo predefiniti para metri possono essere anche modificati per adattarli alle condizioni del ciclo Si possono creare e salvare nuovi metodi basandosi su questi modelli predefiniti nell opzione Create method In questa sezione si descrive come avviare un ciclo tramite Templates Modelli di metodi predefiniti L utente pu creare metodi di purificazione personalizzati basandosi sui modelli presenti sullo strumento modelli predefiniti disponibili con KTA start sono descritti di seguito Descrizione Affinity AC La Cromatografia di affinit separa le molecole in base all interazione reve
145. na 122 Conductivity flow cell non calibrata Ricalibrare la Conductivity flow cell Ve dere la sezione Sezione 5 3 Calibrazioni a pagina 91 Calibrare il sensore di temperatura Vede re la sezione Sezione 5 3 Calibrazioni a pagina 91 Preparare una nuova soluzione di calibra zione e ricalibrare la Conductivity flow cell KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Descrizione Presenza di picchi fantasma nel profi lo gradiente Causa possibile Rilevato campione caricato p es una proteina 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Operazione Pulire la Conductivity flow cell vedere la sezione Sezione 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell a pagina 243 Passaggio di bolle d aria nella cella di flusso Verificare se sono presenti dei collega menti allentati nella tubazione Gradienti non linea ri o risposta lenta ai cambiamenti di B Guasto Buffer val ve Vedere Risoluzione dei problemi Buffer valve Flusso irregolare Verificare che la Pump funzioni corretta mente Vedere Risoluzione dei problemi Pump Tubazione non pu lita KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Accertarsi che la tubazione sia lavata correttamente Eseguire System cleaning per pulire il percorso di flusso del sistema Vedere la sezione Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 2
146. na 237 Passo Operazione 1 Immergere il tampone e la tubazione d ingresso campione in una soluzione di etanolo al 20 2 Avviare un ciclo manuale e pompare 20 ml di etanolo al 20 nel sistema Usare gli stessi parametri ciclo raccomandati per la procedura di stoccaggio a breve termine 3 Modificare il ciclo e impostare i parametri ciclo per pulire la tubazione d in gresso campione e quella di uscita per la raccolta frazioni 4 Pompare 20 ml di etanolo al 20 nel sistema 5 Terminare il ciclo e lasciare il sistema pieno di etanolo al 20 durante il pe riodo di stoccaggio KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 251 8 Manutenzione 8 8 Sostituzione della tubazione e dei filtri 8 8 Sostituzione della tubazione e dei filtri Introduzione Questa sezione descrive come sostituire tubazione e raccordi e come sostituire i filtri d ingresso ATTENZIONE Prima di iniziare la sua sostituzione accertarsi che l intera tubazione del sistema venga lavata con acqua demineralizzata In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 8 8 1 Sostituire i filtri d ingresso 253 8 8 2 Sostituire le tubazioni e i raccordi 254 252 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione 8 8 Sostituzione della tubazione e dei filtri 8 8 1 Sostituire i filtri d ingresso 8 8 1 Sostituire i filtri d ingresso Intervalli di manutenzione Quando
147. nco dei file KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 215 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione Nota I metodi importati saranno salvati nel menu metodi User defined possibile importare un solo metodo per volta Se si devono importare pi metodi contemporaneamente ripetere i passaggi descritti in precedenza Nota Qualora la memoria di sistema fosse esaurita prima di importare un nuovo metodo cancellare quelli esistenti Cancellare un metodo Attenersi alle seguenti istruzioni per cancellare un metodo definito dall utente Passo Operazione 1 Create method Nella schermata Create method selezionare Delete per accedere ai metodi 216 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 1 Create method Passo Operazione Select method to delete Method Method Q K r L Method Method cons a e Selezionare una casella di controllo per selezionare un metodo e Selezionare Delete per cancellare il metodo Risultato Appare una schermata Message che chiede di confermare l operazione oppure Selezionare Cancel per annullare l operazione e tornare alla schermata Create method Nota Si possono cancellare pi file contemporaneamente i Are you sure you want to delete the selected methodls
148. nerare un report degli errori di sistema per interventi di assistenza Per la sostituzione dei mo duli e altri problemi specifici dei moduli e le azioni correttive vedere AKTA start Maintenance Manual Fare riferimento a UNICORN start 1 0 User Manual per i problemi connessi al software Nota Per una descrizione dettagliata dei messaggi di Avvertenza vedere AKTA start Maintenance Manual Procedura di risoluzione dei problemi Per la procedura di risoluzione dei problemi di AKTA start attenersi a quanto segue Passo Operazione 1 Osservare le liste di controllo che seguono per sistema percorso di flusso e purificazione 2 Se i problemi rimangono cercare le soluzioni nella Sezione 9 2 Risoluzione dei problemi di base a pagina 260 3 Se i problemi persistono anche dopo aver attuato le misure correttive creare un rapporto degli errori di sistema vedere la Sezione 3 3 4 Descrizione di Settings and service a pagina 52 e contattare il rappresentante GE di zona KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 257 9 Eliminazione dei guasti 9 1 Introduzione alla risoluzione dei problemi Verifiche del sistema e Lo strumento visualizza la schermata iniziale KTA start KTA start 2 Create method Settings and service e La ventilazione dello strumento funziona Se le ventole poste sul lato inferiore dello strumento smettono di funzionare contattare un tecnico dell assistenza GE Verifiche del percors
149. ni monitor UV vedere AKTA start Maintenance Manual Risultato Si apre la schermata Flow Cell Path Length Flow cell path length abs 00 mau Set baseline v 000 PN Save path length Back Ai Nella schermata Flow Cell Path Length e impostare la Cell path length nel campo Cell corrispondente alla nuova UV flow cell Nota La Cell path length indicata sull imballo della UV flow cell e Selezionare Save Path Length per salvare il valore 4 Se la Cell path length non disponibile attenersi alle istruzioni che seguono per calcolare la Cell path length Immergere la tubazione d ingresso tampone A in acqua DM e la tubazione d ingresso tampone B in una soluzione di acetone all 1 5 Nella schermata Flow Cell path length impostare il valore Cell su 2 00mm utilizzando le frecce su e gi oppure digitando il valore 6 Lavare a fondo e lasciare la UV flow cell piena di tampone A acqua DM Selezionare Set Baseline per acquisire un nuovo riferimento per il test Risultato Abs deve mostrare un valore prossimo a 0 MAU 7 Lavare la UV flow cell col tampone B acetone all 1 e lasciare la cella di flusso piena di acetone all 1 Prendere nota del nuovo valore Abs 8 Calcolare la Cell path length reale Cell mm 2 00 nuovo Abs valore 340 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 101 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 5 UV Calibrazione del monitor Calib
150. nit di base Supporto per provette di raccolta di quattro diver se misure Scatola del gruppo elettromeccanico e supporto del gruppo bacinella KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 37 3 Descrizione del sistema 3 1 Panoramica del sistema Funzione Spia di accensione Caratteristiche principali di KTA start Le principali caratteristiche di KTA start sono elencate di seguito KTA start uno strumento di purificazione compatto a singolo stadio che assicura la purificazione delle proteine in modo rapido ed affidabile Un sistema semplice e moderno che viene proposto per automatizzare il processo di purificazione delle proteine assicurando funzioni come l iniezione automatizzata del campione la raccolta delle frazioni e il monitoraggio in tempo reale I modelli metodologici sono disponibili per tutte le pi comuni tecniche di cromato grafia come la cromatografia di affinit la cromatografia a scambio di ioni la filtra zione su gel e la dissalazione Sono disponibili metodi di avvio rapido per purificare vari tipi di proteine comuni Sono disponibili metodi di sistema predefiniti per la pulizia del percorso di flusso AKTA start controllato tramite il touch screen dello strumento Inoltre il sistema pu essere gestito da un computer collegato allo strumento tramite il software UNICORN start AKTA start viene proposto con un collettore di frazioni dedicato Frac30 che consent
151. nitore e Nessuna tubazione sia attorcigliata e che il percorso del flusso non presenti perdite KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 165 6 Operazioni dal display dello strumento 6 1 Introduzione La configurazione del collettore di frazioni deve essere attiva o disattiva secondo necessit Se viene utilizzato il collettore frazioni utilizzare tubazioni di uscita della stessa di mensione delle provette Il volume di ritardo sia impostato Specifiche dei parametri ciclo Parametro Portata da 0 5 a 5 0 ml min Incremento Volume colonna CV da 1a 1000 ml da Oa 150 ml Limite di pressione da 0 1 a 5 bar Volume campione Pump da 0 1 a 1000 0 ml da 0 1 a 1000 ml Circuito di campionamento da 0 1 a 1000 ml Superloop da 0 1 a 1000 ml Volume di lavaggio Volume di bilanciamento da 0 0 a 50 0 CV da 0 0 a 50 0 CV Volume di eluizione da 0 0 a 100 CV Concentrazione B target da 0 C a 100 Lunghezza gradiente da 0 0 a 100 0 Volume di frazionamento da 0 50 15 ml KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 2 Frazionamento 6 2 Frazionamento Opzioni di frazionamento Per molti schemi di purificazione importante raccogliere frazioni dell eluente AKTA start assicura le opzioni di frazionamento riportate nella seguente tabella Configurazioni strumento
152. no essere importati nello strumento Delete Indica i metodi utente memorizzati nello strumento che possono es sere cancellati quando necessario KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 51 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service 3 3 4 Descrizione di Settings and service Settings and service opzioni L opzione display Settings and service consente all utente di eseguire la manutenzione la calibrazione l impostazione del volume di ritardo la diagnostica e la risoluzione dei problemi dei moduli posizionati sul lato umido dello strumento Per una breve descrizione dei moduli vedere la Sezione 3 2 Strumento a pagina 39 Le istruzioni dettagliate di ca libratura della Pump dei monitor e del display strumento sono riportate nella sezione Sezione 5 3 Calibrazioni a pagina 91 Le opzioni disponibili in Settings and service sono elencate nella tabella seguente Opzione Funzione Settings and service Schermata 1 Permette all utente di eseguire la calibrazione impostare il volume di a Ei ritardo la diagnostica e o la risoluzio ne dei problemi Il menu contempla denari i seguenti moduli rem e Fraction collector Collettore frazioni 1 3 4 Next e Pressure sensor e Pump e System Sistema Settings and service Schermata 2 Permette all utente di eseguire la diagnostica e o la risoluzione dei problemi dei moduli
153. nuale 6 3 Esecuzionedi un ciclo manuale Introduzione Questa sezione descrive come avviare un ciclo manuale configurando i parametri ciclo dal display dello strumento e come controllare un ciclo in corso In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 6 3 1 Ciclo manuale 171 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo 173 170 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 3 1 Avvio di un ciclo 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 1 Ciclo manuale Ciclo manuale Per avviare un ciclo manuale seguire le istruzioni indicate di seguito Nota Passo Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento Se lo strumento rileva la chiavetta USB il risultato non sar salvato Operazione 1 Nella schermata Home di KTA start selezionare Manual run per accedere ai parametri ciclo richiesti per il ciclo manuale KTA start a Method run Create method Settings and service Selezionare la freccia avanti per accedere a parametri ciclo supplementari Manual run 2 Flow rate ml min Pressure limit v oso AN MPa Conc B v A Save Result to USB ManRes01 1 2 Li e Impostare i parametri ciclo Flow rate portata ml min Pressure limit limite di pressione MPa Conc B concentrazione tampone B Usare le frecce su e gi per impostare i valori oppur
154. nzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 5 Collegamento di una colonna Collegamento di una colonna Per collegare una colonna allo strumento seguire le istruzioni riportate di seguito Passo Operazione 1 Fissare un supporto colonna idoneo alla barra portacolonna sullo strumento CONDUCTIVITY INJECTION VALVE tool i ah eye Sa PRESSURE SENSOR am 2 Rimuovere i fermi della colonna montarla sul connettore di raccordo se il tipo di colonna ne richiede uno IWL n dEJLIH o a KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 127 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 5 Collegamento di una colonna Passo Operazione 3 Fissare la colonna al relativo supporto 4 Collegare una tubazione PEEK con d i 0 75 mm dalla porta 1 della Injection valve alla testa della colonna JECTION VALVE 128 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 5 Collegamento di una colonna Passo Operazione 5 Collegare una tubazione PEEK con d i 0 75 mm dalla parte inferiore del monitor UV alla parte inferiore della colonna Nota La tubazione PEEK con d i 0 75 mm non deve essere scollegata dall ingresso del monitor UV quando si smonta la colonna Vedere la Sezione 8 3 1 Scolle gare la colonna a pagina 237 INJECTION VALVE Nota Non serrare eccessivamente quando si collegano le colonne Il serraggio e
155. o possono essere eseguite dalla schermata Create method Per istruzioni dettagliate ve dere la Sezione 6 6 Gestione di metodi e file a pagina 207 Generalit di funzionamento La schermata home di AKTA start propone all utente quattro diverse opzioni per la sele zione e l esecuzione di operazioni Le istruzioni relative a ciascuna operazione sono ripor tate in un apposita sezione del presente capitolo Per la descrizione delle opzioni dispo nibili nella schermata principale vedere la Capitolo 3 Descrizione del sistema a pagina 34 KTA start Create method Settings and service Elenco di controllo Accertarsi che il sistema sia stato preparato correttamente Controllare che e Il sistema sia preparato in base al Capitolo 5 Preparazione del sistema per un ciclo a pagina 85 ed i moduli siano calibrati in base alla Sezione 5 3 Calibrazioni a pagi no 91 e Siastataselezionata una colonna adatta all applicazione Tener conto della proteina target dell intervallo di pressione e della portata ottimale e Venga utilizzata una tecnica di applicazione del campione adatta Vedere la Sezio ne 5 7 Applicazione del campione a pagina 142 e La tubazione d ingresso del tampone sia inserita nei recipienti di tampone corretti Tener conto del volume richiesto per l applicazione prevista e La tubazione di smaltimento sia inserita in un contenitore di smaltimento idoneo Tener conto della dimensione e del materiale del conte
156. o 29 0270 57 AF Prodotto chimico Cloridrato di guanidina 6 M Acido cloridrico Concentrazione 10 Informazioni di riferimento CAS n CEE n 50 01 1 200 002 3 7647 01 0 231 595 7 10 2 Resistenza chimica UKo Denaturazione di proteine CIP Imidazolo 288 32 4 206 019 2 Affinit Isopropanolo 67 63 0 200 661 7 CIP Metanolo 67 56 1 200 659 6 RPC CIP Mercaptoetanolo 60 24 2 200 464 6 Agente riducente Fosfato di potassio basico 16788 57 1 231 834 5 Tampone SDS 151 21 3 205 788 1 Detergente Cloruro di sodio 7647 14 5 231 598 3 CIP Idrossido di sodio NaOH 1310 73 2 215 185 5 CIP Solfato di sodio 7757 82 6 231 820 9 Tampone Triton M X100 Tween M 20 9002 93 1 9005 64 5 500 018 3 Detergente Detergente Urea 57 13 6 200 315 5 Additivo tampone agente denaturan te Lato umido e verniciatura Uso a lungo termi ne Prodotto chimico Concentrazione CAS n CEE n Decon 90 10 1310 58 3 215 181 3 Etanolo 20 64 17 5 200 578 6 Acido cloridrico 0 1 M 7647 01 0 231 595 7 Isopropanolo 70 67 63 0 200 661 7 Triton X 100 1 9002 93 1 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 283 10 Informazioni di riferimento 10 2 Resistenza chimica Prodotto chimico Tween 20 Concentrazione CAS n CEE n 9005 64 5 500 018 3 Spray con detergente
157. o 29 0270 57 AF 275 10 Informazioni di riferimento 10 1 Specifiche 10 1 Specifiche Introduzione Questa seziona elenca le specifiche tecniche di KTA start Per i dati dei componenti vedere il AKTA start Maintenance Manual Specifiche del sistema 276 Parametro Configurazione del sistema Sistema su banco da lavoro Sistema di controllo Display dello strumento e o UNICORN start Collegamento tra PC e strumento USB Dimensioni L x P x A 340 mm x 280 Mmm x 360 Mmm Peso escluso l imballaggio 8 kg Alimentazione 100 240 VCA 50 60 Hz Potenza assorbita 95 VA Fuse Ad ampolla di vetro a fusione rapida F5AL250V Classe di protezione dell alloggiamento IP21 Tubazione e connettori Ingresso Tubazione PTFE lunghezza 100 cm d i 1 6 mm raccordi 5 16 24 UNF Buffer valve Mixer Tubazione in PEEK lunghezza 15 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF Mixer Sample valve Tubazione in PEEK lunghezza 23 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF Sample valve Pressure sensor tramite Pump Pressure sensor Wash valve Tubazione in marprene lunghezza 25 cm d i 0 8 mm raccordi 10 32 UNF Tubazione in PEEK lunghezza 13 cm d i 0 75 mm raccordi 10 32 UNF KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 10 Informazioni di riferimento 10 1 Specifiche Parametro Wash valve Injection valve Tubazione in PEEK
158. o da AKTA start ATTENZIONE Durante il funzionamento e la manutenzione di AKTA start si racco manda l uso di dispositivi di protezione individuale adeguati 230 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Programma di manutenzione periodica 8 Manutenzione 8 1 Manutenzione regolare seguenti interventi di manutenzione periodica devono essere eseguiti dall utente per assicurare la corretta manutenzione ordinaria di AKTA start Interval Intervento di manutenzione Vedere la sezione o Ogni Controllare visivamente lo strumento per rileva giorno re eventuali perdite nel percorso di flusso Controllare se ci sono perdite dalla Pump Se ci sono tracce di perdita di liquido dalla Pump verificare l integrit della tubazione della pompa ed i collegamenti della tubazione Nota Assicurarsi che la tubazione della pompa non venga lasciata all interno della Pump quando non in uso Pulire la colonna e il percorso di flusso del siste Sezione 6 5 Operazioni ma dopo l uso e lasciare il sistema pieno di ac successive al ciclo a qua DM pagina 204 Nota Sezione 8 3 Pulizia Se si prevede di non utilizzare lo strumento per 1 n qualche giorno predisporre il sistema per lo A A a pagina 235 stoccaggio Ognisetti Tarare la Pump Sezione 5 3 Calibrazio mana O ni a pagina 91 quando n UO necessa Verificare visivamente i filtri d ingresso e se ne Sezione 8 6 1 Puliz
159. o di flusso e Tutte le tubazioni sono correttamente collegate come indicato nella Sezione 5 1 Panoramica del percorso di flusso a pagina 86 e Siriscontrano perdite da qualche raccordo Se necessario serrare i raccordi e Qualche tubazione piegata o intrecciata Registrare la posizione della tubazione per essere sicuri che il flusso del liquido sia regolare oppure sostituire la tubazione ove necessario e La tubazione d ingresso tampone immersa nella corretta soluzione tampone Ve dere la Sezione 5 10 Avvio di un ciclo a pagina 161 e filtri d ingresso sono puliti Pulire i filtri d ingresso o se necessario sostituirli Vedere la sezione Sezione 8 6 1 Pulizia dei filtri d ingresso a pagina 245 e Sezione 8 8 1 Sosti tuire i filtri d ingresso a pagina 253 e Lacolonna collegata correttamente Vedere la Sezione 5 5 Collegamento di una colonna a pagina 126 Controlli di purificazione e La colonna stata pulita e preparata secondo le raccomandazioni del manuale di istruzioni della colonna e campione stato regolato in base alle condizioni del tampone legante e Ilcampione stato chiarificato per centrifugazione e o filtrazione prima di caricarlo e tamponi usati sono corretti per le colonne e le proteine scelte 258 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 9 Eliminazione dei guasti 9 1 Introduzione alla risoluzione dei problemi Controllare se i tamponi sono interessati da precipitazioni e
160. o elencate di seguito e Apertura e visualizzazione dei risultati ccromatografici esistenti e Comparazione di due curve o cromatogrammi e Esecuzione dell analisi d integrazione dei picchi e Creazione di rapporti di stampa in PDF e Importazione dei risultati di KTA start tramite chiavetta USB KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 227 7 Operazioni controllate da UNICORN start 74 Administration 74 Administration Introduzione Il modulo Administration viene usato per gestire il database UNICORN start e rivedere i registri di UNICORN start e di sistema IMmagine del modulo Administration 2 Administration la El x File Reports Tools Help LS ld UNICORN and System Log Database Management Funzioni principali Le caratteristiche principali del modulo Administration sono elencate di seguito e Possibilit di effettuare il back up e il ripristino delle operazioni e di archiviare e recu perare le stesse e Revisione dei registri UNICORN start e di sistema 228 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 8 Manutenzione Informazioni sul capitolo 8 Manutenzione Questo capitolo descrive il programma di manutenzione di AKTA start e fornisce le istruzioni per la manutenzione ordinaria In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 8 1 Manutenzione regolare 230 8 2 Pulizia prima della manutenzione assistenza progr
161. o il sistema manualmente possibile avviare un ciclo dal display dello strumento o da UNICORN start selezionando una delle opzioni ciclo disponibili sullo strumento Ulteriori dettagli per avviare un ciclo sono riportati nella sezione Capitolo 6 Operazioni dal display dello strumento a pagina 163 Per avviare un ciclo da UNICORN start vedere UNICORN start 1 0 User Manual 162 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 Operazionidaldisplay dello strumen tO Informazioni sul capitolo Questo capitolo descrive come utilizzare lo strumento eseguire un ciclo e le procedure da adottare dopo un ciclo In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 6 1 Introduzione 164 6 2 Frazionamento 167 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 170 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 180 6 5 Operazioni successive al ciclo 204 6 6 Gestione di metodi e file 207 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 163 6 Operazioni dal display dello strumento 6 1 Introduzione Dal Introduzione Flusso di lavoro Un flusso di lavoro tipico di KTA start quello illustrato di seguito Tutte le operazioni del flusso di lavoro possono essere controllate dal display dello strumento possibile effettuare un ciclo cromatografico usando un metodo Quick start Template oppure azionando manualmente il sistema 164 Le opzioni per avv
162. od Editor Introduzione Il modulo Method Editor assicura flessibilit per creare o modificare i Metodi cromato grafici Immagine del modulo Method Editor L interfaccia utente di Method Editor illustrata di seguito Elution and Fractionation Method Settings lIsocratic elution Prime and Equilibration n Set target B concentration 100 0 B 0 0 100 0 v Sample Application ui E ie 10 0 cv 10 0 100 0 v Wash out unbound 5 Gradient elution y Start target B concentration at 0 0 B 10 0 100 0 Elution and Fractionation y Set target B concentration 100 0 B 0 0 100 0 Prime and Equilibration Set gradient volume 20 0 CV 0 0 100 0 Fractionation Fractionation settings Fractionation type Peak fractionation z Advanced Setti Fixed fractionation volume 2 0 mi 0 5 15 0 Peak Frac Peak fractionation volume 0 5 ml 0 5 15 0 Settings i Delete Method summary Funzioni principali Le caratteristiche principali del modulo Method Editor sono elencate di seguito e Possibilit di creare metodi da modelli predefiniti come Affinity Ilon Exchange De salting e Gel Filtration e Flessibilit per creare metodi personalizzati tramite drag and drop delle fasi croma tografiche come Prime and Equilibration Sample Application Wash Out Unbound Elution and Fractionation e metodi creati con Method Editor possono essere eseguiti direttamente da System Contro
163. ola commu Componenti della tata nella posizio ne sbagliata Verificare che il segno inciso sulla valvola valvola assemblati si allinei correttamente con quello corri in modo sbagliato spondente sullo strumento Fare riferi dopo la sostituzio mento a KTA start Maintenance Manual ne 268 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Descrizione Perdita esterna Perdita interna Causa possibile Collegamenti delle tubazioni Le parti interne possono essere usurate 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Operazione Verificare i collegamenti della tubazione Se necessario serrarli o sostituirli Sostituire la valvola Fare riferimento a KTA start Maintenance Manual Contropressione alta Percorso di flusso non pulito Pulire il percorso di flusso del sistema Vedere la sezione Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 Impossibile carica re il campione nel circuito Pressure sensor Descrizione Error 501 Sovra pressione La valvola di inie zione manuale in posizione Inject Ruotare la Injection valve in posizione Load durante il caricamento del campio ne nel circuito Valvola o circuito ostruiti Causa possibile Intasamento nella tubazio ne nelle valvo le o nella colon na Errata selezio ne della porta ta Pulire il percorso di flusso del sistema Se il problema
164. on KTA start sono brevemente descritti nella Sezione 6 4 2 Quick start a pagina 184 e nella Sezione 6 4 3 Templates a pagina 190 Per la descrizione dei metodi Prepare system vedere la Sezione 6 4 5 Metodi Prepare system a pagina 201 e la Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 Tipi di metodo Opzione Quick start e ACstep 1ml HiTrap e AC step 5ml HiTrap e DS5mlHiTrap e DS53mlHiPrep e IEX step 1ml HiTrap e IEX step 5ml HiTrap e IEX gradient 1 ml HiTrap e IEX gradient 5 ml HiTrap e GF 16 60 HiPrep Templates e Affinity AC e Desalting buffer exchange DS e lon exchange IEX e Gel filtration GF KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 181 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 1 Selezionare un tipo di metodo Tipi di metodo Opzione User defined Metodi creati dall utente in base ai modelli predefiniti Prepare system Pump wash A Pump Wash B Washout fractionation tubing Column preparation System cleaning System performance method Selezionare un metodo Per selezionare un ciclo attenersi alle istruzioni indicate di seguito Passo Operazione KTA start 2 Create method Settings and service Nella schermata Home di KTA start selezionare Method run per accedere ai tipi di metodo in dotazione con lo strumento 182 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 5
165. oni del display dello strumento Nota Non agire sul display dello strumento con oggetti affilati e rigidi Immagine del display dello strumento L immagine seguente mostra l ubicazione e la vista dettagliata del display dello strumento AKTA start 2 Create method Settings and service Descrizione Area schermo del nome Area informazioni L esempio mostra la schermata iniziale KTA start Pulsante di Help KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 43 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 1 Panoramica del display dello strumento Software strumento AKTA start dispone del seguente menu funzioni che compare nella schermata home di AKTA start come evidenziato nella tabella seguente Per i dettagli dei flussi di lavoro con le varie opzioni vedere il Capitolo 6 Operazioni dal display dello strumento a pagi na 163 Opzione Descrizione Method run Utilizzare un avvio rapido o un metodo modello per eseguire un ciclo Manual run Eseguire un ciclo inserendo i parametri manual mente Create method Creare modificare importare e cancellare metodi utente Settings and service Configurare impostazioni e calibrare moduli ese guire test diagnostici Descrizione dei pulsanti del display strumento Il display dello strumento comprende i seguenti pulsanti a sfioramento Pulsante Descrizione DPS Guida Apre una nuova finestra di dialogo fornendo info
166. oni su come effettuare gli ordini iii ii 288 i Plana 292 11 1 Report sulle prestazioni del sistema iiii 295 OE eE IA 296 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Pagina lasciata vuota intenzionalmente 1 Introduzione 1 Introduzione Informazioni sul capitolo Questo capitolo contiene importanti informazioni per l utente la descrizione degli avvisi di sicurezza informazioni di carattere normativo le specifiche d uso previste per il Multi Temp IV Thermostatic CirculatorAKTA start e un elenco della documentazione associata In questo capitolo Sezione Vedere pagina 1 1 Informazioni su questo manuale 8 1 2 Importanti informazioni d uso 9 1 3 Informazioni di carattere normativo 11 1 4 Documentazione associata 14 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 7 1 Introduzione 1 1 Informazioni su questo manuale 1 1 Informazioni su questo manuale Scopo del presente documento Le Istruzioni di funzionamento contengono le indicazioni necessarie per installare utiliz zare ed eseguire la manutenzione di KTA startin sicurezza Convenzioni di nomenclatura La tabella seguente illustra la nomenclatura utilizzata in questo manuale Concetto Spiegazione KTA start Lo strumento Frac30 Il collettore di frazioni UNICORN start Il software installato su computer Sistema AKTA start L intero sistema di cromatografia dei liquidi incluso lo str
167. p DSS ml HiTrap DS 53 ml HiPrep Back 2 Quick start 2 3 Quick start Q IEX step 1 ml HiTrap IEXstep 5 ml HiTrap amp C IEX gradient 1 ml HiTrap IEX gradient 5 ml HiTrap gt 2 3 Mostra i modelli Quick start disponi bili con KTA start Per la descrizione dei metodi Quick start vedere la Sezione 6 4 2 Quick start a pagina 184 48 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Metodo Quick start 3 3 Quick start GF 16 60 HiPrep 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 2 Descrizione di Method run Descrizione Templates Templates Affinity AC Desalting buffer exchange DS lon exchange IEX C Gel filtration GF Back a EZS Mostra i modelli di metodi per le tecniche di cromatografia disponibili con KTA start Per la descrizione dei modelli vedere la Sezione 6 4 3 Templates a pagi na 190 User defined Select method ACO1 DS06 Mostra i metodi creati dall utente Per istruzioni dettagliate sulla crea zione e la gestione dei metodi definiti dall utente vedere la Sezione 6 6 Gestione di metodi e file a pagina 207 Prepare system 1 2 Select system method Pumpwash A gt Pump wash B gt Washout fractionation tubing X Column preparation 1 2 2 Back gt al Select Mostra i metodi predefiniti di si
168. per la valutazione del risultato sono riportate nel Capitolo 7 Operazioni controllate da UNICORN start a pagina 223 e nel UNICORN start 1 0 User Manual Pulire il sistema 204 Al termine di un ciclo procedere come segue e Rimuovere la colonna dal percorso di flusso e ricollegare quest ultimo Per istruzioni dettagliate vedere la Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagina 237 e Sciacquare il percorso di flusso con soluzione detergente e o acqua DM servendosi dei metodi System cleaning oPump wash in base alle necessit Per istruzioni det tagliate vedere la Sezione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema a pagina 235 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 5 Operazioni successive al ciclo e Senecessario rimuovere le provette dal collettore di frazioni In caso di fuoriuscita pulire il gruppo bacinella con acqua DM e Rimuovere eventuali fuoriuscite dallo strumento e dal banco con un panno umido e Vuotare il contenitore di smaltimento Pulizia e conservazione della colonna Al termine di un ciclo procedere come segue e Scollegarela colonna dal percorso di flusso e Pulire la colonna off line in base alle istruzioni specifiche Se si prevede di non utilizzare la colonna per almeno un paio di giorni o pi eseguire anche quanto segue e Riempire la colonna con la soluzione di stoccaggio consigliata nella scheda tecnica della
169. pompa e Collegare l alimentazione all unit KTA start e Collegare l unit Frac30 a KTA start e Collegare l unit KTA start al computer UNICORN start AVVERTENZA Utilizzare solo cavi di alimentazione a terra consegnati e approvati da GE AVVERTENZA Tensione di alimentazione Prima di collegare il cavo di alimenta zione assicurarsi che la tensione di alimentazione nella presa a muro corrisponda ai dati riportati sullo strumento ATTENZIONE Messa a terra di protezione KTA start deve essere sempre colle gato a una presa di corrente con connessione qa terra KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 77 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Installare la tubazione pompa Seguire le istruzioni indicate di seguito per installare la tubazione pompa Passo Operazione 1 Aprire il coperchio superiore completamente 2 Posizionare la tubazione tra i rulli ed il binario premendo verso la parete in terna della testa della pompa Nota Accertarsi che la tubazione della pompa non si attorcigli o allunghi contro i rulli 78 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Passo 4 Installazione 4 5 Installazione AKTA start Operazione Abbassare il coperchio superiore fino alla chiusura completa indicata dal rumore di uno scatto Il binario si chiude automaticamente e la tubazione viene correttamente ti rata quando il binario si ch
170. porto tubazione nella porta corrispondente sul braccio dispen satore cio la porta esterna o interna viene scelta in base al tipo di provette di raccolta inserite nel gruppo bacinella KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 155 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 8 Preparazione del collettore di frazioni Passo Operazione 5 Muovere delicatamente il braccio nella posizione di distribuzione Impostazione del volume di ritardo Il volume di ritardo rappresenta il volume tra UV ed il collettore di frazioni o l uscita utiliz zata Le impostazioni del volume di ritardo vengono fatte per essere sicuri che le frazioni raccolte durante il frazionamento corrispondano alle frazioni indicate nel cromatogram ma Quando il collettore di frazioni attivato il volume di ritardo raccolto nella prima pro vetta T1 e il volume di eluizione raccolto nelle provette successive Con collettore di frazioni disattivato il volume di ritardo raccolto nel becher di raccolta il volume totale raccolto nel becher di raccolta sar volume di ritardo volume di eluizione Poich il volume di ritardo influenzato dalla lunghezza e dal diametro della tubazione esso va impostato in base alla tubazione usata Per impostare il volume di ritardo atte nersi alle istruzioni che seguono 156 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 8 Preparazione del collettore
171. pressione MPa e Run volume volume ciclo ml Run parameters 2 Column volume ml j Flow rate ZI ml min Pressure limit v 030 Ae MPa Run volume v so Ad mi Selezionare Run per avviare il metodo KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 137 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 3 Washout fractionation tubing Passo Operazione Risultato Si aprono le seguenti opzioni a schermo Frac tube wash in progress UY absorbance mAU Conductivity mS cm Flow rate 0 ml min Pressure Tube no Edit run Nota Se necessario il ciclo Washout fractionation tubing pu essere terminato prima del completamento selezionandoEnd per arrestare il lavaggio in anti cipo 8 Quando il ciclo stato completato selezionare Exit per chiudere la schermata Washout fractionation tubing Run ended UY absorbance f mAU Conductivity mSfem Flow rate 0 ml min Pressure i MPa Tube no 138 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 4 Column preparation 5 6 4 Column preparation Introduzione Il metodo Column preparation viene usato per preparare una nuova colonna o per bi lanciarla Prima di cominciare un nuovo ciclo si consiglia di bilanciare le colonne Requisiti La soluzione richiesta e Soluzione tampone Istruzioni P
172. pu essere visualizzato su un PC Per ulteriori dettagli vedere la Sezione 6 6 3 File dei risultati BMP a pagina 221 Non staccare la chiavetta di memoria USB finch il sistema non genera il rapporto file BMP Run parameters Sample from Pump Loop r 7 Sample volume ml r Equilibrati gt j quilibration j A volume he Se Wash unbound 00 volume CV CV 2 3 e Selezionare la modalit d iniezione del campione nel campo Sample from da applicare tramite Pump o Loop Per istruzioni dettagliate sull applicazione del campione vedere la Sezione 5 7 Applicazione del campione a pagina 142 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates Passo Operazione e Impostare i parametri ciclo Sample volume il volume di campione da caricare nella colonna Equilibration volume il volume di tampone A richiesto per bilanciare la colonna Nota Washout unbound non utilizzabile per i metodi GF DS Nota Accertarsi di caricare il volume campione consigliato per la colonna selezio nata Se si utilizzano colonne GF grandi si consiglia di prebilanciare la colonna prima di avviare il ciclo Run parameters Conc B Elution volume Fractionation volume e Impostare i parametri ciclo Elution volume volume di tampone necessario per eluire la proteina della colonna Frac
173. r mazioni sul contenuto della schermata attuale o indica dove reperire ulteriori informazioni o istru zioni lt Home Apre la schermota iniziale di KTA start A Avanti Apre la schermata seguente nell attuale flusso di lavoro Ritorna Apre la schermata precedente nell attuale flusso di lavoro 44 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 1 Panoramica del display dello strumento Pulsante Descrizione Incremento Il valore nel campo di testo pu essere aumentato freccia su o diminuito selezionando la freccia su o gi Decremento Selezionando il valore compare il tastierino nume freccia gi rico e si pu digitare un nuovo valore Dopo aver digitato un valore col tastierino numeri co selezionare OK per confermare il nuovo valore Si apre la schermata successiva Torna alla schermata precedente Avvia un ciclo Mette in pausa il ciclo in corso arrestando la Pump Le impostazioni dei valori della portata e del gradiente vengono mantenute Continue Ripristina un ciclo messo in pausa Continue Mantiene un ciclo in corso con la portata attuale le posizioni valvole e la concentrazione B impo state Il gradiente mantenuto al valore visualiz zato Riprende un ciclo che stato messo in attesa Edit run Apre una nuova finestra per modificare i parametri ciclo attuali KTA start Istruzioni di fun
174. r eseguire un ciclo Pump wash A seguire le istruzioni indicate di seguito La procedura Pump wash A avviata dal display dello strumento Passo Operazione 1 Immergere la tubazione d ingresso tampone A in acqua DM o soluzione tampone 2 Nella schermata home di KTA start selezionare Method run AKTA start a Create method Settings and service KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 131 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 1 Pump wash A Passo Operazione 3 Nella schermata Method run selezionare Prepare system Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system 2 4 Selezionare Pump wash A e poi Select per iniziare l esecuzione del metodo Select system method Pump wash A C Pump wash B une gt gt Washout fractionation tubing gt Column preparation 1 2 Back Q UY absorbance 0 mAU Conductivity mS fem Flow rate 0 mlfmin Pressure Tube no Nota Se necessario il ciclo Pump wash A pu essere terminato prima del comple tamento selezionandoEnd per arrestare il ciclo 132 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 1 Pump wash A Passo Operazione 5 Quando il ciclo stato completato selezionare Exit per chiudere la schermata Pump wash A Run ended UY absorban
175. r maggiori dettagli vedere la sezione Istruzioni colonna 142 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Descrizione della Injection valve La Injection valve consente l applicazione di un campione sulla colonna da un circuito di campionamento collegato alla valvola L illustrazione seguente mostra le diverse po sizioni della Injection valve La posizione della Injection valve pu essere cambiata manualmente ruotando la leva a sinistra posizione Load Sample o a destra posizione Inject to column LOAD INJECT LOAD INJECT a Funzione Direzione predefinita del percorso di flusso del sistema Dirige il liquido iniettato manualmente attraverso la porta 3 verso il circuito di campionamento Nota Un circuito di campionamento o un Superloop collegato alle porte 2 e 5 della Injection valve Dirige il liquido dal circuito di campionamento attraverso la porta 4 verso il contenitore di smaltimento Nota Il percorso indicato dalle frecce in arancione pi chiaro dell immagine sopra usato durante il riempimento manuale del circuito del campione o Superloop attraverso la porta 3 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 143 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Posizione valvola Inject to column Collegamento porta Funzione Devia il percorso di flusso del sistema nel circ
176. r test calibration A 94 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 2 Calibrazione display strumento Passo Operazione 3 Nella schermata Display selezionare Touch screen calibration per iniziare la calibrazione Risultato Si apre una schermata Message Message Touch Screen will be Calibrated now Do you want to continue Yes No Selezionare Yes per confermare e procedere con la calibrazione oppure Selezionare No per annullare l operazione e tornare alla schermata Display 4 Nelle quattro schermate Calibration successive toccare con precisione i cerchi contrassegnati secondo necessit La prima schermata Calibration viene presentata come esempio Calibration in progress press the marked circle shown 5 Selezionare Exit al termine della calibrazione Calibration done press exit Nota Se la calibrazione non riesce ripetere la procedura KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 95 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 3 Pressure sensor zero offset La Zero offset 96 Pressure sensor zero offset Per registrare la pressione a zero quando il Pressure sensor esposto alla sola pressione atmosferica Zero offset seguire le istruzioni indicate di seguito Nota La calibrazione della pressione deve essere eseguita esclusivamente da un tecnico dell a
177. ra il limite impostato lo strumento entra in stato di Pause Nota La chiavetta di memoria USB memorizza i file dei risultati che possono essere visualizzati tramite UNICORN start Viene creato anche un file BMP che pu essere visualizzato su un PC Per ulteriori dettagli vedere la Sezione 6 6 3 File dei risultati BMP a pagina 221 Non staccare la chiavetta di memoria USB finch il sistema non genera il rapporto file BMP Run parameters Sample from Equilibration volume Wash unbound volume 15 0 au CV 2 3 Selezionare la modalit d iniezione del campione nel campo Sample from da applicare tramite Pump o Loop Per istruzioni dettagliate sull applicazione del campione vedere la Sezione 5 7 Applicazione del campione a pagina 142 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates Passo Operazione e Impostare i parametri ciclo Sample volume il volume di campione da caricare sulla colonna Equilibration volume il volume di tampone A richiesto per bilanciare la colonna Wash unbound volume volume di tampone necessario dopo l appli cazione del campione per lavare le molecole scomposte Nota Per i metodi AC IEX quando si carica il campione attraverso il circuito consigliabile svuotare il circuito con un volume triplo di quello del circuito per ottenere un buon recupero dei campioni
178. rare il UV LED 102 Passo Operazione 9 Aggiornare il valore della lunghezza della Cell calcolato utilizzando le frecce su e gi oppure digitandolo Selezionare Save Path Length per salvare il valore nella memoria permanente Nota Verificare che il valore Abs ora sia di circa 340 5 mAU a conferma che la normalizzazione abbia avuto luogo Attenersi alle istruzioni che seguono per calibrare l UV LED Nota Assicurarsi che la UV flow cell sia montata saldamente e che le tuba zioni di ingresso e uscita siano ben strette al monitor UV Nessuna luce parassita deve entrare nel UV flow cell Passo Operazione 1 Immergere la tubazione d ingresso tampone in acqua DM 2 Lavare la UV flow cell con acqua DM usando la Pump Verificare che non vi siano bolle d aria nella UV flow cell Nota Lavare a fondo con acqua DM per essere sicuri che la cella di flusso sia pulita 3 Nella schermata Home di AKTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento quindi selezionare Next Next Risultato Si apre la schermata 3 dell opzione Settings and service Settings and service Il Display Conductivity Back Q KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Passo 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 5 UV Calibrazione del monitor Operazione 7 Nella schermata Settings and service selezionare UV per accedere alle opzioni del monitor U
179. rcorso di flusso verso lo smaltimento La Wash valve si commuta automaticamente durante una procedura di pulizia predefinita Pump wash In un ciclo manuale la valvola pu essere portata nella posizione voluta configurando i parametri ciclo Injection valve Una valvola a 6 porte con funzionamento manuale usata per trasferire il campione caricato nel circui to di campionamento sulla colonna Un circuito di campionamento collegato alle re lative porte della valvola La valvola commutata manualmente nelle posizioni e Load sample predefinito Per consentire il caricamento del campione nel circuito di campionamento Inject to column per trasferire il campione dal circuito sulla colonna durante un ciclo di cromatografia Il monitor UV misura continuamente l assorbanza del liquido nella UV flow cell ad una lunghezza d onda di 280 nm La UV flow cell ha un lunghezza di percorso di 2 mm 40 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 2 Strumento Parte Funzione Descrizione Conductivity Il monitor Conductivity rileva continuamente la conduttivit del liquido nella Conductivity flow cell La conduttivit viene calcolata automaticamente moltiplicando la conduttanza per la costante della cella di flusso La costante cella calibrata in fabbrica La Conductivity flow cell dotata di un sensore di temperatura che misura la temperatura del li quido nella Conductiv
180. re Memorizzare archiviare recuperare effettuare il backup ripristi nare i risultati ottenuti con KTA start Per istruzioni dettagliate sulle operazioni eseguibili in UNICORN start vedere il UNICORN start 1 0 User Manual KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 223 7 Operazioni controllate da UNICORN start 7 1 System Control 7 1 System Control Introduzione Il modulo System Control viene usato per avviare visualizzare e controllare un ciclo Immagine dell interfaccia utente System Control r i El System Control e x File View Manual System Tools Help z FT Manual Run Method Run E Connect P Disconnect ED AKTA start _ Chromatogram Xx lt iN Conductivity Gradient Concentra on System Flow Pressure Fraction mAU Injection Run Log 600 400 200 0 200 400 7 T 7 T min 0 0 05 0 1 0 15 0 2 0 25 0 3 0 35 0 4 0 45 0 5 0 55 0 6 0 65 0 7 0 75 0 8 0 85 0 9 0 95 1 Process Picture XxX www J 1 Current Stote dy Column ES n a 0 00 B g Rea 0 00 ms Cm Outlet valve Buffer volve 7 PJ e9 Accumulated Time 0 min D Accumulated Volume o ml 4 M Injection valve 0 ni Tube number 0 50 ml min 0 00 MPa sn Wash valve t t Ready Block Nowatch Connection Connected in control Controlled by Default HCE 21CKSR1 Funzioni principali L
181. ressione i volumi di frazionamento rac colta i livelli di gradiente e tutti i raccordi per vedere se ci sono perdite du rante il test attenendosi ai Criteri di accettazione sotto riportati Criteri di accettazione Tempo Attivit Verificare Intervallo appro min vato 1 1 ml min 0 B flusso attra Contropressione lt 0 05 MPa verso il punto di scarico Outlet valve 2 Ripetere UV Auto zero 3 5 ml min Contropressione da 0 06 a 0 2 MPa 1a Gradiente di avvio da 0 a 100 B in 10 minuti avvio frazionamento raccolta KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 119 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 3 System performance method da UNICORN start Tempo Attivit min Fine frazionamento 1 Verificare Intervallo appro vato Pesare frazione n da 0 8a1 2g 2 3e4 Differenza max tra 0 1g frazioni Fine raccolta Pesare il becher da 4205 8g Fine gradiente restare a 100 B Gradiente 5 Diretto nessuna indicazione negati va 1 Con collettore di frazioni 2 Senza collettore di frazioni 3 UV50 B UV 100 B Verificare se ci so Nessuna perdita no perdite dai colle gamenti tutti Nota e Ricordarsi di aggiornare il file di testo del Performance result con le registrazioni osservate in modalit manuale e poi stampare il rapporto e Glialtri parametri sono controllati automaticamente e vengono creat
182. rizione Deviazione dei vad lori basali o segna le rumoroso Causa possibile Aria intrappolata nella cella di flusso conduttivit Operazione Eliminare l aria intrappolata nella cella di flusso lavando quest ultima con acqua DM o soluzione tampone Se il problema persiste pulire la Conductivity flow cell Vedere la Sezione 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell a pagina 243 Colonna non bilan ciata Verificare che la colonna sia bilanciata Se necessario pulire la colonna Guasto Pump Verificare che la pompa funzioni corretta mente Vedere Risoluzione dei problemi Pump La misura della conduttivit con lo stesso tampone nel corso del tem po cambia a tem peratura costante Cella di flusso non pulita Pulire la Conductivity flow cell vedere la sezione Sezione 8 5 Pulizia del sistema Conductivity flow cell a pagina 243 Onde sul gradiente Guasto Pump o Buffer valve Verificare che la Pump e la Buffer valve funzionino correttamente Fare riferimen to a KTA start Maintenance Manual Sensore di tempe ratura non calibra to Soluzione di cali brazione 1 00 M NaCl non prepara ta correttamente Fasatura della val vola di commuta zione non ottimiz zata Valore assoluto della conduttivit errato Eseguire Switch valve timing per ottimiz zare la fasatura della valvola di commu tazione Vedere la Sezione 5 4 4 Switch valve timing a pagi
183. roseguire con il metodo utente scelto selezionare Select Run parameters Sample from Pump Loop Sample volume v 50 DS mi dee RETTO to USB ResultO1 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 4 User defined methods Passo Operazione Impostare i parametri ciclo e Selezionare la modalit d iniezione del campione nel campo Sample from da applicare tramite Pump o Loop Per istruzioni dettagliate sull applicazione del campione vedere la Sezione 5 7 Applicazione del campione a pagina 142 e Sample volume il volume di campione da caricare nella colonna e Sesiintende salvare il risultato spuntare la casella di controllo Save Result to USB I nome del file del risultato pu essere modificato impo stando le cifre comprese tra 00 e 99 e Selezionare Run per avviare il metodo scelto Risultato Verr visualizzata la schermata Run view 4 l Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS cm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edit run End Nella schermata Run view sono disponibili le seguenti opzioni per monito rare e controllare il ciclo in corso per maggiori dettagli vedere la Sezio ne 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo a pagina 173 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 199 6 Operazioni dal display dello stru
184. rsibile tra la proteina tar get e il ligando specifico fissato alla matrice cro matografica lon exchange IEX La Cromatografia a scambio di ioni si basa sull interazione reversibile tra una proteina carica ta ed un mezzo cromatografico caricato in modo opposto Gel filtration GF La Filtrazione su gel conosciuta anche come cro matografia di esclusione in base alle dimensioni una tecnica cromatografica che separa le mole cole in base alle differenze di dimensione moleco lare Desalting buffer exchange DS La dissalazione una tecnica di filtrazione su gel che consente una separazione rapida di gruppi di sostanze di elevato peso molecolare da quelle di basso peso molecolare Le molecole piccole come il sale marcatori liberi ed altre impurit vengono efficacemente separati dalle sostanze ad elevato peso molecolare d interesse 190 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 3 Templates Affinit AC o Scambio di ioni IE Per avviare un ciclo in base a Affinity AC o lon exchange IEX attenersi alle istruzioni indicate di seguito Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento Se lo strumento rileva la chiavetta USB il risultato non sar salvato Nota Prima di avviare il ciclo impostare lo stato del collettore frazioni su attivato o disattivato in base alle necessit
185. rumento Pump e Monitors In questa sezione La presente sezione contiene le seguenti sottosezioni Sezione Vedere pagina 5 3 1 Guida alla calibrazione 92 5 3 2 Calibrazione display strumento 94 5 3 3 Pressure sensor zero offset 96 5 3 4 Calibrazione Pump 98 5 3 5 UV Calibrazione del monitor 100 5 3 6 Conductivity Calibrazione del monitor 104 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 91 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 1 Guida alla calibrazione 5 3 1 Guida alla calibrazione Quando eseguire la calibrazione Nota Lo strumento pre calibrato alla consegna pertanto non richiesta alcuna calibrazione quando lo strumento installato Tuttavia se il System performance test fallisce si consiglia di calibrare i moduli La tabella sottostante riporta le raccomandazioni circa la tempistica di calibrazione dei moduli Modulo Quando eseguire la calibrazione Display strumento e Se si verificano problemi nella risposta del touch screen Pressure sensor e Sela pressione fuori range di 0 03 MPa eseguire Zero offset Pump e Sele condizioni di un ciclo cromatografico sono cambiate p es viscosit del campione o del tampone temperatura contropressione e Pumpetubazione pompa richiedono una ta ratura regolare Consigliato una volta la setti mana e Dopo la sostituzione della tubazione pompa con una nuova Nota Non lasciare la tubazione all interno della Pump quando
186. sere usato nelle proce dure cliniche oppure a scopi diagnostici Presupposti Per seguire il manuale e usare il sistema nel modo previsto importante e comprendere i concetti della cromatografia dei liquidi e aver letto e compreso il capitolo delle struzioni di sicurezza in KTA start Istruzioni di funzionamento KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 9 1 Introduzione 1 2 Importanti informazioni d uso Avvisi di sicurezza La presente documentazione d uso contiene messaggi di sicurezza AVVERTENZA ATTEN ZIONE e AVVISO riguardanti l utilizzo sicuro del prodotto Vedere le definizioni seguenti AVVERTENZA AVVERTENZA indica una situazione pericolosa che se non viene evitata potrebbe causare la morte o lesioni gravi importante procedere soltanto quando tutte le condizioni indicate sono state soddisfatte e chiaramente comprese ATTENZIONE ATTENZIONE indica una situazione pericolosa che se non viene evitata potrebbe causare lesioni moderate o di lieve entit im portante procedere soltanto quando tutte le condizioni indicate sono state soddisfatte e chiaramente comprese AVVISO AVVISO indica delle istruzioni che devono essere seguite al fine di evitare danni al prodotto o ad altre attrezzature Note e suggerimenti Nota Suggerimento Una nota viene usata per riportare informazioni importanti per un impiego del prodotto ottimale e senza problemi
187. sezione descrive le etichette di sicurezza e quelle relative alle sostanze peri colose che sono attaccate a AKTA start Il numero di serie dello strumento visibile anche sull etichetta prodotto dello strumento che viene qui illustrata Etichette su AKTA start Le immagini seguenti mostrano le etichette affisse a AKTA start Posizionamento Rinomina Descrizione 29022098 AKA start Etichetta strumento con Pci DI cdr imboli di si Bover ManPower mw simboli di sicurezza e spe x DCEO cifiche tecniche ANZI CE intenti vige Saden 751 6 Upea Sane ED J Non aprire nessun coper chio sullo strumento L apertura dei coperchi in valida la garanzia La rupture du sceau annule la garantie Warranty void if seal is broken Quando non si utilizza il sistema tenere aperto il coperchio della pompa Aprire il coperchio della pompa dopo lo spegni mento dello strumento KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 27 2 Istruzioni di sicurezza 2 2 Etichette Rinomina Descrizione Posizionamento Questo prodotto non conforme alla direttiva ATEX e non deve essere impiegato in ambienti esplosivi Rischio di schiacciamen to Spegnere la pompa prima del carico della tubazione Etichetta su Frac30 L immagine seguente mostra le etichette applicate sull unit Frac30 Rinomina Descrizione Posizionamento 25023051 Frocso Etichetta strumento
188. sistema Fare riferimento al capi tolo Capitolo 8 Manutenzione a pagina 229 per ulteriori dettagli sulle procedure di pulitura e Seguire attentamente le istruzioni di prova e Ripetere il System performance method fino ad ottenere la riusci ta e Sesinotaun gradiente ondulato o sue oscillazioni eseguire l otti mizzazione del Switch valve timing e Se la prova non va a buon fine anche dopo aver seguito la proce dura di cui sopra sostituire il modulo guasto 118 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 3 System performance method da UNICORN start 5 4 3 System performance method da UNICORN start Istruzioni Seguire le istruzioni indicate di seguito per avviare il System performance method da UNICORN start Passo Operazione j Avviare il test da UNICORN start System control System Performance Test and Report 2 Selezionare il metodo in base alla configurazione del collettore di frazioni e Performance method with Frac quando il collettore di frazioni attivato e Performance method without Frac quando il collettore di frazioni disattivato 3 Leggere le note del metodo prima di avviare il ciclo 4 Prendere nota della posizione del file dei risultati 5 Eseguire il System performance method 6 Il rapporto del test specifica se il System performance method ha superato la prova o no Verificare manualmente i limiti di p
189. ssistenza GE in occasione della sostituzione del Pressure sensor Passo Operazione I Scollegare la tubazione d ingresso dal Pressure sensor per esporlo alla sola pressione atmosferica Nota Prima di scollegare la tubazione accertarsi che la Pump sia spenta OFF 2 Nella schermata Home di AKTA start selezionare Settings and service per accedere ai moduli strumento Risultato Si apre la schermata Service and settings Settings and service 1 3 Ai Next 3 Nella schermata Settings and service selezionare Pressure sensor per ac cedere alle opzioni Pressure sensor Risultato Si apre la schermata Pressure sensor Pressure sensor T User operations P set MPa Zero offset GEHC service only Stop flow Calibrate Back _ KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 3 Pressure sensor zero offset Passo Operazione 4 Nella schermata Pressure sensor selezionare Zero offset Risultato Si apre una schermata Message Message A Make sure No Pressure in the system E o 5 Selezionare OK in assenza di contropressione nel sistema cio la tubazione d ingresso dalla Pump stata staccata dal Pressure sensor Risultato La pressione atmosferica impostata a zero 6 Ricollegare la tubazione d ingresso dalla Pump al Pressure sensor KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 9
190. stema usati per la pulizia del percorso di flusso del sistema Per istruzioni dettagliate sull esecu zione di metodi di sistema vedere la sezione Sezione 6 4 5 Metodi Prepare system a pagina 201 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 49 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 2 Descrizione di Method run Metodo Prepare system 2 2 Select system method System cleaning O System performance method 50 Descrizione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 3 Descrizione di Create method 3 3 3 Descrizione di Create method Create method opzioni L opzione display Create method consente all utente di creare nuovi metodi modificare o cancellare metodi utente esistenti e anche di importare metodi archiviati in una chia vetta di memoria USB collegata allo strumento Quando si seleziona Create method nella schermata Create method vengono visualiz zate altre opzioni Create method EI USB import Delete Le operazioni disponibili in Create method sono descritte in breve di seguito Opzione Descrizione Create Indica i modelli di metodo che possono essere usati per creare un nuovo metodo Edit Indica i metodi utente memorizzati sullo strumento che possono es sere modificati quando necessario USB Import Mostra un elenco di metodi utente memorizzati in una chiavetta di memoria USB che posso
191. stitution Position or job title Date YYYY MM DD Signed GE and GE monogram are trademarks of General Electric Company GE Healthcare Bio Sciences Corp 800 Centennial Avenue P O Box 1327 Piscataway NJ 08855 1327 2010 14 General Electric Company All rights reserved First published April 2010 DOC1149542 28 9800 26 AC 05 2014 286 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 10 Informazioni di riferimento 10 4 Modulo di dichiarazione di salute e sicurezza Restituzione prodotto o assistenza Health amp Safety Declaration Form for Product Return or Servicing Return authorization and or number Service Ticket Request To make sure the mutual protection and safety of GE personnel our customers transportation personnel and our environment all equipment must be clean and free of any hazardous contaminants before shipping to GE To avoid delays in the processing of your equipment please complete this checklist and include it with your return 1 Please note that items will NOT be accepted for servicing or return without this form 2 Equipment which is not sufficiently cleaned prior to return to GE may lead to delays in servicing the equipment and could be subject to additional charges 3 Visible contamination will be assumed hazardous and additional cleaning and decontamination charges will be applied yes No Please specify if the equipment has been in contact with any of th
192. struzioni sotto riportate Passo Operazione 1 Prima di spostare lo strumento all esterno della camera fredda spegnerlo e scollegare il cavo d alimentazione KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 159 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 9 Operazioni in camera fredda Passo Operazione 2 Allentare tutti i raccordi per impedire che si blocchino quando il sistema ri torna alla temperatura ambiente 3 Consentire allo strumento di stabilizzarsi a temperatura ambiente per almeno qualche ora 4 Serrare tutti i raccordi e pompare acqua DM nel sistema per verificare se ci sono perdite i Serrare i raccordi che perdono 160 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 10 Avvio di un ciclo 5 10 Avvio di un ciclo Controlli finali Prima di avviare un ciclo eseguire i controlli consigliati di seguito per evitare di incontrare problemi una volta che il ciclo avviato Tampone e Verificare che le tubazioni di ingresso tampone A e B siano immerse nei flaconi cor retti che contengono i tamponi interessati e Verificare che il tampone a disposizione sia sufficiente Uscita di smaltimento e Verificare che le tubazioni di uscita che conducono allo smaltimento dalla Wash valve Injection valve e la Outlet valve siano inserite nel contenitore di smaltimento e Verificare che il contenitore di smaltimento non sia pieno e possa accogliere il volume devia
193. sure singoli moduli dello strumento sono elencati nella tabella seguente Per la descrizione dettagliata dei moduli vedere il KTA start Maintenance Manual Descrizione Descrizione Buffer valve Injection valve manuale Mixer Colonna Sample valve Monitor UV Pump Monitor Conductivity Pressure sensor Outlet valve Wash valve Collettore frazioni 86 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Tubazione d ingresso e d uscita 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 1 Panoramica del percorso di flusso AKTA start viene fornito con l intero percorso di flusso preassemblato e riempito di solu zione di stoccaggio etanolo al 50 dettagli sulle tipologie di tubazioni utilizzate con il percorso di flusso sono riportati nel Capitolo 10 Informazioni di riferimento a pagina 275 La tabella sottostante elenca le tubazioni collegate allo strumento Preparare il sistema per l esecuzione di un ciclo collegando la tubazione d ingresso e d uscita alle porte delle valvole contrassegnate con le frecce arancioni NM ete LU Co Connessione tu bazioni Utilizzo Buffer valve Porta I tampone A Tubazione d ingresso per tampone A Porta Il Tubazione di uscita per Mixer Porta III tampone B Tubazione d ingresso per tampone B Porta I campione Tubazione d ingresso utilizzata quando il campione viene applicato tramite Pump Porta l
194. t and present it to the Service Engineer upon arrival Equipment and or work areas not sufficiently cleaned accessible and safe for an engineer May lead to delays in servicing the equipment and couldbe subject to additional charges Please review the actions below and answer Yes or No Provide explanation for any No answers in box below Instrument has been cleaned of hazardous substances Please rinse tubing or piping wipe down scanner surfaces or otherwise ensure removal of any dangerous residue Ensure the area around the instrument is clean If radioactivity has been used please perform a wipe test or other suitable survey Adequate space and clearance is provided to allow safe access for instrument service repair or installation In some cases this May require customer to move equipment from normal operating location prior to GE arrival Consumables such as columns or gels have been removed or isolated from the instrument and from any area that may impede access to the instrument AII buffer waste vessels are labeled Excess containers have been removed from the area to provide access Provide explanation for any No answers here Equipment type Product No Serial No hereby confirm that the equipment specified above has been cleaned to remove any hazardous substances and that the area has been made safe and accessible Name Company or in
195. tazione d uso e e utilizzato nello stesso stato in cui stato spedito GE fatta eccezione per le modifiche descritte nella documentazione d uso Norme internazionali Questo prodotto rispetta i requisiti delle seguenti norme EN 61010 1 IEC 61010 1 UL 61010 1 CAN CSA C22 2 No 61010 1 Descrizione Prescrizioni di sicurezza per gli apparecchi elettrici di misura zione controllo e uso in labora torio La norma EN armonizzata con la direttiva UE 2006 95 CE EN 61326 1 IEC 61326 1 Emissioni secondo Cl SPR 11 Gruppo 1 Classe A Attrezzatura elettrica per misurazione controllo e uso in laboratorio requisiti EMC La norma EN armonizzata con la direttiva UE 2004 108 CE EN ISO 12100 Sicurezza del macchinario Principi generali di progettazio ne Valutazione e riduzione dei rischi Lo standard EN ISO armonizzato con la direttiva UE 2006 42 CE AVVERTENZA Questo un prodotto di Classe A In un ambiente domestico questo prodotto pu provocare interferenze radio nel qual caso all utente pu essere chiesto di adottare le misure necessarie 12 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 1 Introduzione 1 3 Informazioni di carattere normativo Dichiarazione FCC AKTA start conforme alla norma FCC 47 CFR Parte 15b Nota Questa apparecchiatura stata testata e ritenuta compatibile con i li miti previsti per un dispositivo digitale di
196. tazioni del sistema 5 4 2 System performance method da AKTA start Attivit 1 ml min su posizione Sample valve Buffer Verificare Intervallo appro vato Richiesta commutazione Injec tion valve per posizione Inject Livello UV max da 300 a 380 mAU Livello conduttivit max da 65 a 95 mS cm Richiesta commutazione Injec tion valve nuovamente in po sizione Load Gradiente di avvio da 0 a 100 B in 10 minuti avvio frazionamento raccolta Fine frazionamento 1 Pesare frazione n 2 5e4 da 0 8a 1 2g Differenza Max tra frazioni 0 1g Fine raccolta Pesare il becher da 4 2 a 5 89 Fine gradiente restare a 100 B Gradiente Diretto nessuna indicazione negati va 50 B Livello gradiente da 45 a 55 B 0 B ristabilizzazione Fine Verificare se ci so no perdite dai colle gamenti tutti Nessuna perdita 1 Con collettore di frazioni 2 Senza collettore di frazioni 3 UV50 B UV 100 B Nota Se il System performance method fallisce analizzarne la causa in base ai criteri di accettazione Eseguire le seguenti operazioni e Ricalibrare il modulo non riuscito e Usare un tampone con composizione corretta KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 117 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 4 Prestazioni del sistema 5 4 2 System performance method da AKTA start e Pulire il modulo guasto o l intero
197. te g p ml min Start flow peli RETI i eara Back _ 6 Nella schermata Calibration impostare la portata desiderata nell intervallo tra 0 5 e 5 ml min Usare le frecce su e gi per impostare il valore oppure usare il tastierino numerico per digitarlo 7 Nella schermata Calibration selezionare Start flow per avviare la Pump Risultato La Pump entra in funzione e l acqua DM pompata verr raccolta nella provetta di raccolta pesata preventivamente Raccogliere acqua per almeno un minuto nella provetta di raccolta pesata preventivamente 8 Valutare accuratamente il volume dell acqua raccolta nell apposita provetta pesata preventivamente quindi impostare il valore del Collected volume uguale a questo volume 9 Nella schermata Calibration selezionare Calibrate per confermare l opera zione OK ed eseguire la calibrazione 10 Verificare che la Pump sia stata correttamente tarata Ripetere i passaggi 6 e 7 per confermare che il volume dell acqua raccolta corrisponde alla portata prevista Nota Se l acqua raccolta non corrisponde al volume richiesto cio la Pump non manda il liquido con la portata prevista controllare le condizioni della tuba zione pompa Se necessario sostituire la tubazione pompa quindi procedere ad una nuova taratura KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 99 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 3 Calibrazioni 5 3 5 UV Calibrazione del monitor 5 3 5
198. tema Intervallo appro vato Osservazioni 5 ml min Contropressione da 0 06 a 0 2 MPa Gradiente di avvio da 0 a 100 B in 10 minuti avvio frazionamento raccolta Fine frazionamento 1 Pesare frazione n 2 5e4 da 0 8a 1 2g Differenza max tra frazioni 0 19 Fine raccolta Pesare il becher da 4205 8g Fine gradiente restare a 100 B Gradiente 5 Diretto nessuna indicazione negati va Fine Con collettore di frazioni 2 Senza collettore di frazioni 3 UV50 B UV 100 B KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Verificare se ci so no perdite dai col legamenti tutti Nessuna perdita 295 Indice Indice 296 A AKTA start caratteristiche principali 38 descrizione del sistema 35 destinazione d uso 35 moduli strumento descrizio ne 39 parti principali dello stru mento 36 Applicazione del campione alternative 142 circuito di campionamen to 148 dalla pompa 146 Superloop 151 Avviare un ciclo controlli finali 161 Avvisi di sicurezza 10 C Calibrazioni guida alla calibrazione 92 Camera fredda operazioni 159 Caricamento del campione nel circuito dicampionamen to 149 Chiavetta di memoria USB risoluzione dei problemi 272 Ciclo con metodo avvio di un ciclo 185 mantenimento 188 metodi definiti dall uten te 198 Quick start 184 selezione di un metodo 182 templates 190 tipi di metodo 181 Ciclo m
199. teristica dei risultati esportati e Il file generato in formato BMP pu essere aperto e visionato tramite sistemi opera tivi OS come Microsoft Windows e Mac OS e Ilfiledeirisultati BMP viene salvato ed esportato quando l utente seleziona l apposita opzione per Save result to USB prima dell avvio di un ciclo e Ilfiledeirisultati contiene i dati delle curve UV dell utente con i contrassegni di frazio namento e Il file dei risultati contiene 4 ore di dati ciclo e Nelfile BMP sono visualizzate le apposite legende come nome del prodotto partico lari del ciclo UV e contrassegni di frazionamento e n caso di spegnimento o interruzione di corrente il risultato parziale non sar dispo nibile Tuttavia la conclusione forzata del ciclo da parte dell utente consente di esportare il risultato come file BMP Creare un file BMP Passo Operazione l Collegare una chiavetta di memoria USB allo strumento 2 Avviare un Method run o un Manual run KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 221 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 3 File dei risultati BMP Passo Operazione 3 Spuntare la casella di controllo Save results to USB in modo da salvare i ri sultati sulla chiavetta di memoria USB Nota Un file BMP pu essere creato solo se il risultato stato salvato Run parameters Column volume v ZI mi Flow rate ml min r Pressure limit v 0o30
200. tings and service NM ete LU Co Pressure sensor Pressure sensor User operations GEHC service only Stop flow Back Q Pset MPa Funzione Zero offset permette di portare la pressione a zero La Pump deve es sere spenta e il raccordo del percor so di flusso verso il Pressure sensor deve essere aperto P set mostra la pressione nel percor so di flusso Nota La calibrazione della pressione deve essere eseguita esclusivamente da un tecnico dell assistenza GE in occa sione della sostituzione del sensore Pump Pump Back Calibration Pump tubing log Calibration per calibrare la Pump di modo che invii liquido con una portata precisa Pump tubing log e Per prendere nota del numero di ore che la tubazione della pompa stata utilizzata Tubing run e azzerare il conteggio d uso della tubazione dopo la sostituzione della tubazione della pompa e Per prendere nota del numero di ore che la Pump stata utilizzata Pump run e azzerare il conteg gio d uso della Pump dopo la sostituzione della Pump Diagnostics per regolare la portata e l avvio arresto del flusso Pump 54 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 4 Descrizione di Settings and service ele U 0 Funzione System Sistema Delay volume setting Per impostare a il
201. tionation volume volume di frazioni da raccogliere quando il collettore di frazioni attivato e Selezionare Run per iniziare il ciclo Risultato Verr visualizzata la schermata Run view Nota Conc B non utilizzabile per GF DS perch l eluizione avviene solo con un singolo tampone tampone A Nota Il ciclo ha inizio con un lavaggio pompa predefinito Il lavaggio pompa viene eseguito con il tampone A a 10 ml min per 30 sec Edit run disattivato con lavaggio pompa in corso Nel corso del lavaggio pompa il flusso diretto attraverso la Wash valve verso Waste KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 197 6 Operazioni dal display dello strumento 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo 6 4 4 User defined methods 6 4 4 User defined methods Avvio di un ciclo 198 Per avviare un ciclo in base ad un metodo definito dall utente o importato tramite USB attenersi alle istruzioni indicate di seguito Nota Accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento Se lo strumento rileva la chiavetta USB il risultato non sar salvato Passo Operazione Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system Ea Nella schermata Method run selezionare User defined per accedere ai metodi creati dall utente 2 Select method AC DS06 IC e EZS e Selezionare un pulsante di opzione per selezionare un metodo utente da eseguire e Per p
202. tive al contenuto della schermata attuale oppure fa riferimento a documentazione pi dettagliata Select the template that suits your application Affinity Chromatography AC separation based on biological recognition Desalting DS removal of low molecular weight molecules e g salt Or when changing buffer lon exchange IEX separation based on the charge ofthe protein Gel filtration GF separation based on the size and shape of the protein For details see KTAITM start Operating Instructions KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 47 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 2 Descrizione di Method run 3 3 2 Method run opzioni Descrizione di Method run L opzione display Method run consente all utente di eseguire metodi in base a tecniche Quick start o a modelli di metodo predefiniti a metodi creati dall utente ed eseguire metodi predefiniti come Pump Wash e System cleaning Istruzioni dettagliate sui metodi di esecuzione sono riportate nella Sezione 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo a pagi na 180 Quando si seleziona Method run nella schermata Method run vengono visualizzate altre opzioni Method run User defined 2 2 Quick start Templates Prepare system tipi di metodo disponibili in Method run sono descritti in breve di seguito Metodo Descrizione Quick start 1 3 Quick start AC step 1 ml HiTrap ACstep 5 ml HiTra
203. to Passo Operazione Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mS cm Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Editrun E NS Nella schermata Run view per visualizzare il crtomatogramma selezionare l icona del grafico KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 173 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo Passo Operazione 2 5 z 5 2 2 i 3 8 10 Time min Il grafico visualizza la curva UV L asse Y riporta l assorbanza UV MAU e l asse X il tempo min Selezionare la freccia di ritorno per tornare alla schermata Run view Modifica del ciclo Per modificare i parametri del ciclo corrente seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 l Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mSfcem Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Edtrun End Nella schermata Run view selezionare Edit run per accedere ai parametri del ciclo in corso 174 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo Passo Operazione Edit run edi Fractionation A Fractionation SS mi volume Coa E e Modificare i parametri
204. to in esso durante il ciclo Collettore frazioni e Se il collettore di frazioni Frac30 deve essere utilizzato durante il ciclo verificare che il collettore frazioni sia preparato e riempito con le provette di raccolta and la tuba zione di raccolta PEEK della Outlet valve sia collegata al collettore frazioni e inoltre che quest ultimo sia attivato Colonna e Verificare che sia stata collegata e bilanciata la colonna corretta se il bilanciamento non rientra nel metodo Campione e Assicurarsi che il campione sia pronto per il caricamento tramite Pump Circuito o Superloop Pump e Posizionare la tubazione della pompa correttamente sopra la testa della pompa Prima dell avvio del ciclo accertarsi che la calotta della pompa sia chiusa Archiviazione del risultato e Seilrisultato del ciclo va salvato quando si procede senza UNICORN start accertarsi che la chiavetta di memoria USB sia collegata allo strumento UNICORN start e Verificare che KTA start sia collegato a un PC con UNICORN start installato KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 161 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 10 Avvio di un ciclo e Prima dell avvio accertarsi che siano state realizzate tutte le connessioni del sistema Per ulteriori dettagli vedere UNICORN start 1 0 User Manual Avvio di un ciclo possibile effettuare un ciclo cromatografico su KTA start usando un metodo Quick start o Template oppure controlland
205. tramite Outlet valve Requisiti Le soluzioni detergenti richieste sono e Acquademineralizzata DM e Soluzione tampone Istruzioni Per eseguire un ciclo Washout fractionation tubing seguire le istruzioni indicate di se guito La procedura Washout fractionation tubing avviata dal display dello strumento Passo Operazione 1 Immergere la tubazione d ingresso tampone in acqua DM o soluzione tam pone 2 Rimuovere la colonna dal percorso di flusso e ricollegare quest ultimo Per istruzioni dettagliate vedere la Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagi na 237 3 Portare la tubazione di frazionamento in un contenitore di smaltimento 4 Nella schermata home di KTA start selezionare Method run KTA start oD Create method Settings and service 136 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 6 Metodi per ciclo Prepare system 5 6 3 Washout fractionation tubing Passo Operazione 5 Nella schermata Method run selezionare Prepare system Method run 2 Quick start Templates User defined Prepare system a 6 Selezionare Washout fractionation tubing e poi Select per iniziare l esecu zione del metodo Select system method Pump wash A Pump wash B 3 a Washout fractionation tubing i E Column preparation 1 2 eok j A EZS 7 Impostare i parametri ciclo richiesti e Flow rate portata ml min e Pressure limit limite di
206. ttivit fuori specifiche Causa possibile Cella Conductivity non pulita 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base Operazione Pulire la cella Conductivity Vedere la Sezione 8 5 Pulizia del sistema Conducti vity flow cell a pagina 243 Cavo collegato non correttamente al monitor Conduc tivity Verificare che il cavo del modulo Conduc tivity sia collegato correttamente al connettore dietro la cella di flusso Guasto Pump Verificare che la Pump funzioni corretta mente Vedere Risoluzione dei problemi Pump Sensore di tempe ratura non calibra tO Colonna non bilan ciata Calibrare il sensore di temperatura Vede re la sezione Sezione 5 3 Calibrazioni a pagina 91 Verificare che la colonna sia bilanciata Se necessario pulire la colonna Guasto Buffer val ve La tubazione PEEK con d i da 0 5 mm 195 mm non collegata tra il mo nitor Conductivity e la Outlet valve Verificare il funzionamento della Buffer valve Fare riferimento a KTA start Maintenance Manual Collegare la tubazione PEEK con d i 0 5 mm Vedere la sezione Sezione 8 8 2 Sosti tuire le tubazioni e i raccordi a pagina 254 Guasto componen te della scheda madre Contattare un tecnico di assistenza GE KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 263 9 Eliminazione dei guasti 9 2 Risoluzione dei problemi di base 264 Desc
207. ty flow cell Nota La calibrazione del parametro Sine Wave Generator deve essere esegui ta esclusivamente da un tecnico dell assistenza GE dopo la sostituzio ne della scheda madre KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 59 4 Installazione 4 Installazione Informazioni sul capitolo Questo capitolo fornisce le istruzioni necessarie per consentire agli utenti di disimballare e installare gli strumenti KTA start e Frac30 Prima di cominciare ad installare KTA start leggere l intero capitolo di Installazione In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 4 1 Requisiti di spazio 61 4 2 Trasporto di AKTA start e Frac30 63 4 3 Disimballare AKTA start e Frac30 65 4 4 Confezione accessori 76 4 5 Installazione KTA start 77 60 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 1 Requisiti di spazio 4 1 Requisiti di spazio Configurazione su banco da lavoro La figura sottostante mostra i requisiti di spazio consigliati per KTA start KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 61 4 Installazione 4 1 Requisiti di spazio Dimensioni strumento AKTA start 280 Mmm Frac30 285 mm 280 MM 62 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 4 Installazione 4 2 Trasporto di AKTA start e Frac30 4 2 Trasporto di AKTA start e Frac30 Peso strumento AKTA start con imballaggio
208. uando si esegue un backup dei file cancellarli dalla chiavetta di memoria e poi salvarli su un computer Evitare di conservare file inutili nella chiavetta di memoria Evitare di usare cartelle nominate GE sulla chiavetta di memoria USB In ogni caso si possono usare cartelle nominate per esempio GE_ o GExyz Eseguire sempre il backup dell intera cartella GE dalla chiavetta di memoria USB e non di singoli file Si raccomanda di eseguire i backup ogni volta che si completato un ciclo importante Importazione del file dei risultati dalla chiavetta USB in UNICORN start Attenersi alle istruzioni riportate di seguito per esportare un file dei risultati creato in AKTA start e importarlo in UNICORN start Passo Operazione 1 Aprire il modulo Evaluation in UNICORN start Selezionare File Import Import KTA start results from USB quindi impor tare i file dei risultati nella posizione scelta del computer Visualizzare analizzare riportare o stampare il file dei risultati KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 219 6 Operazioni dal display dello strumento 6 6 Gestione di metodi e file 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB Esportare metodi da UNICORN start alla chiavetta USB Attenersi alle istruzioni riportate di seguito per esportare un metodo creato in UNICORN start su una chiavetta di memoria USB Passo Operazione 1 2 Creare un metodo usando il modulo Method Ed
209. ubazione dalla colonna come indicato dalle frecce nell immagine seguente 1 2 Ricollegare il percorso di flusso tra Injection valve e monitor UV come indi cato dalle frecce nell immagine seguente 2 Unire la tubazione utilizzando il raccordo montato sulla tubazione collegata alla UV flow cell KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 237 8 Manutenzione 8 3 Pulizia delle parti interessate dal flusso del sistema 8 3 2 System cleaning 8 3 2 System cleaning Introduzione I metodo System cleaning viene usato per pulire il percorso di flusso dello strumento Si suggerisce di eseguire il System cleaning al fine di prevenire il trasferimento tra i cicli la contaminazione del percorso di flusso come protocollo di manutenzione ordinaria e per preparare il sistema per lo stoccaggio Nota e La pulizia importante per impedire contaminazioni incrociate e lo sviluppo di batteri nello strumento e Perassicurareunac corretta pulizia preparare le soluzioni detergenti nella concentrazione consigliata e Siconsiglia di non interrompere un ciclo prima del suo completa mento e Siconsiglia inoltre di procedere alla pulizia di ingressi e uscite tu bazione di campionamento tubazione di frazionamento dalla schermata Edit run Soluzioni richieste Sono necessarie le seguenti soluzioni detergenti e 1M NaOH e Acquademineralizzata DM Istruzioni Per pulire il percorso di flusso del sistema attenersi a
210. uito di campio namento Dirige il liquido dal circuito di campionamento alla colonna di modo che il campione caricato nel circuito venga trasfe rito nella colonna Collegamento di un circuito di campionamento Per collegare un circuito di campionamento seguire le istruzioni indicate di seguitolnjec tion valve Passo Operazione 1 Collegare il circuito di campionamento tra le porte 2 e 5 della Injection valve 2 Assicurarsi che la tubazione di smaltimento sia collegata alla porta 4 della Injection valve Collegare un Superloop Per collegare un Superloop alla Injection valve seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Fissare un supporto colonna idoneo alla barra portacolonna sul bordo destro dello strumento 2 Assicurarsi che il Superloop sia riempito di liquido seguendo le istruzioni Superloop 3 Fissare il Superloop al supporto colonna 4 Collegare la tubazione dal lato inferiore del Superloop alla porta 2 della In jection valve 144 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Passo Operazione 5 Collegare la tubazione dalla sommit del Superloop alla porta 5 della Injec tion valve 6 Assicurarsi che la tubazione di smaltimento sia collegata alla porta 4 della Injection valve Riempire la tubazione di campionamento utilizzando la funzione Pump Seguire le istruzioni indicate
211. umen to il collettore di frazioni e il software Convenzioni tipografiche Gli elementi del software sono identificati all interno del testo mediante caratteri in cor sivo grassetto due punti separano i livelli dei menu quindi File Open si riferiscono al comando Open nel menu File Gli elementi hardware sono evidenziati all interno del testo da caratteri in grassetto ad es Buffer valve 8 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 1 Introduzione 1 2 Importanti informazioni d uso 1 2 Importanti informazioni d uso Leggerle attentamente prima di utilizzare il prodotto Tutti gli utenti devono leggere per intero le Istruzioni di funzionamento prima di procedere all installazione all uso o alla manutenzione del prodotto Tenere sempre le Istruzioni di funzionamento a portata di mano quando si utilizza il prodotto Utilizzare il prodotto esclusivamente nel modo descritto nella documentazione d uso In caso contrario l operatore potrebbe essere esposto a pericolo di infortunio e l attrezza tura potrebbe subire danni Uso previsto AKTA start un sistema di cromatografia dei liquidi usato per la purificazione preliminare delle proteine a livello di laboratorio Il sistema pu essere utilizzato per molteplici scopi di ricerca nell intento di soddisfare le esigenze degli utenti sia del mondo accademico che nel campo della biologia AKTA start inteso unicamente a scopo di ricerca e non deve es
212. uscite Evitare la fuoriuscita di liquidi che possa no interessare superfici dello strumento con presenza di cavi spine ed altri fili Fare attenzione se si verifica una fuoriuscita di liquidi sul vassoio mentre si cerca di toglierlo da AKTA start L NaOH corrosiva e quindi pericolosa per la salute Quando si utilizzano sostanze chimiche pericolose evitare le fuoriuscite e indossare occhiali di protezione e altri dispositivi di protezione individuale adeguati DPI ATTENZIONE Per evitare lesioni personali durante la manutenzione di AKTA start osservare le seguenti istruzioni Luce UV pericolosa Spegnere sempre lo strumento prima di sostituire la UV flow cell Quando si utilizzano sostanze chimiche pericolose per la pulizia della colonna o del sistema durante l ultima fase od operazione della procedura prima della manutezione lavare il sistema o le colonne con una soluzione neutra KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 25 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza AVVISO Pulizia Lo strumento deve essere mantenuto pulito e asciutto Pulire regolarmente con un panno morbido inumidito e se neces sario utilizzare un detergente neutro Prima di procedere all utilizzo lo strumento deve essere completamente asciutto 26 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 2 Etichette Introduzione 2 Istruzioni di sicurezza 2 2 Etichette La presente
213. ute alle dimensioni della colonna utilizzata AKTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Caricare il campione dal Superloop Superloop consente l iniezione di maggiori quantit di campione 10 150 ml sulla co lonna Per applicare il campione tramite un Superloop seguire le istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Riempire di campione una siringa di grande volume 2 Collegare la siringa alla porta 3 della Injection valve e iniettare il campione con cautela nel Superloop Nota Accertarsi che la Injection valve sia impostata in posizione Load sample ci consente di riempire il circuito capillare dalla porta di riempimento 3 3 Dal display dello strumento selezionare Method run quindi scegliere i metodi Quick start o Templates Per istruzioni dettagliate vedere la sezione Sezione 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo a pagina 180 4 Nella schermata Run parameters selezionare l applicazione del campione tramite Loop e impostare tutti i parametri ciclo richiesti Per ulteriori dettagli vedere la sezione Generalit di funzionamento a pagina 165 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 151 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 7 Applicazione del campione Passo Operazione 152 Portare la posizione della Injection valve in Inject quando appare la seguente schermata sul display dello strumento
214. valore oppure usare il tastierino numerico per digitarlo Nota Per raccogliere le frazioni accertarsi che il collettore di frazioni sia attivato Se il collettore di frazioni attivato collocare il numero richiesto di provette di volume adeguato nel gruppo bacinella Se attivato il collettore di frazioni ritorner in Home in posizione 1 all inizio di ogni ciclo e Selezionare Run per iniziare il ciclo Risultato Verr visualizzata la schermata Run view 172 AKTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 6 Operazioni dal display dello strumento 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo 6 3 2 Monitoraggio e controllo del ciclo Generalit Dalla schermata Run view l utente pu monitorare e controllare il ciclo in esecuzione Run view UV absorbance 1 0 mAU Conductivity 25 0 mSfcem Flow rate 3 0 ml min Graph Pressure 0 30 MPa Tube no 6 Editrun E NNT Sono disponibili le seguenti opzioni Opzione Descrizione Graph Visualizza la curva runtime di assorbanza UV Edit run Consente all utente di modificare i parametri del ciclo in corso Pause Mette temporaneamente in pausa il ciclo arrestando la Pump perci non c flusso di liquido nel percorso di flusso End Termina il ciclo corrente Visualizzazione del cromatogramma Per visualizzare il ccomatogramma del ciclo corrente seguire le istruzioni indicate di segui
215. valve timing A o Switch valve timing B non producono risultati soddisfacenti 7 Impostare il Switch valve time entro l intervallo di 3 0 5 0 sec 8 Selezionare Save per salvare la fasatatura ottimizzata 9 Eseguire il System performance method o cicli con gradiente al 50 finch non si ottengono risultati soddisfacenti KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 125 5 Preparazione del sistema per un ciclo 5 5 Collegamento di una colonna 5 5 Collegamento di una colonna Introduzione Questa sezione descrive come collegare una colonna a KTA start Sono disponibili vari tipi di supporti per le colonne che devono essere usate con lo strumento Vedere Capito lo 10 Informazioni di riferimento a pagina 275 per la scelta del supporto colonna pi adatto La colonna collegata nel percorso di flusso tra la Injection valve e il Monitor UV come visibile nell immagine del percorso di flusso in Sezione 5 1 Panoramica del percorso di flusso a pagina 86 Posizionamento colonna In funzione delle dimensioni della colonna scegliere la posizione idonea sullo strumento per posizionarla Le barre di supporto colonna sono posizionate sul lato anteriore e quello destro dello strumento come appare nell immagine sotto e Lato anteriore dello strumento per colonne piccole p es colonne HiTrap e Lato destro dello strumento per colonne grandi p es colonne con lunghezza di 60 cm 126 KTA start Istruzioni di fu
216. ve timing a pagina 122 Warning 111 bas sa intensit UV Il modulo UV non calibrato correttamente Cella di flusso non pulita La cella di flus so non mon tata corretta mente L intensit del LED UV infe riore al livello prescritto Montare saldamente la cella di flusso e ricalibrare il modulo UV con cella riempita di acqua DM Se il problema persiste so stituire il modulo UV Per ulteriori dettagli fare riferimento a AKTA start Maintenance Manual Warning 112 alta intensit UV La calibrazione non stata eseguita su cella di flusso pulita La cella di flus so non mon tata corretta mente Montare saldamente la cella di flusso pulire e ricalibrare il modulo UV con cella riempita di acqua DM Per ulteriori detta gli fare riferimento a KTA start Maintenance Manual Warning 115 lava re la cella di flusso e montare salda mente La cella di flusso non montata correttamente o otticamente disalli neata Montare la cella di flusso correttamente Ricalibrare il modulo UV con cella di flus so riempita di acqua DM Warning 116 linea base UV ignorata Cella di flusso non pulita Pulire a fondo la cella di flusso con acqua DM Ricalibrare il modulo UV con cella di flusso riempita di acqua DM KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF Curva Conductivity Descrizione Lettura errata o in stabile o valori di condu
217. vo come ad esempio Decon 90 Deconex M 11 RBS 25 1M HCl o 1M NaOH e Acquademineralizzata DM Nota e Perpulirela UV flow cell si raccomanda l impiego di una soluzione detergente con il 10 di tensioattivo e Riscaldare la soluzione detergente con il 10 di tensioattivo a 40 C per aumentare l efficacia della pulizia e Sesiutilizza NaOH effettuare la pulitura a 1ml min e ridurre il tempo di attesa a 5 min rispetto al punto 3 del metodo menzionato di seguito e L NaOHnon deve essere lasciata nella cella di flusso per pi di 20 minuti facendo poi attenzione ad eliminare totalmente l NaOH dalla cella Pulizia della UV flow cell in posizione Attenersi alle istruzioni che seguono per pulire la UV flow cell Nota Prima di pulire la UV flow cell rimuovere la colonna dal percorso di flusso e ricollegare quest ultimo Vedere Sezione 8 3 1 Scollegare la colonna a pagina 237 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 241 8 Manutenzione 8 4 Pulitura della cella di flusso UV Passo Operazione 1 Immergere la tubazione d ingresso in una soluzione detergente 2 Avviare un ciclo manuale e pompare la soluzione detergente a 5 ml min attraverso la UV flow cell per 10 minuti e poi mettere in pausa il ciclo 3 Lasciare la UV flow cell piena di soluzione detergente per 15 minuti 4 Immergere la tubazione d ingresso in acqua DM 5 Riprendere il ciclo e risciacquare completamente la cella di flusso con acqua DM
218. ystem performance method da KTA start sora 114 5 4 3 System performance method da UNICORN start iiiii 119 544 SWECO VONE TTITO iaire aA E TONEDE AGE ENRE Te 55 Collegamento adilund ColONnNA sesanan EET Ri 126 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Sommario 56 Metodi percio Prepi e ystee rina 130 5 6 1 PUMPWOSNA cca 151 5 6 2 POD 134 5 6 3 Washout fractionation TUDNO rica 136 5 6 4 Column preparo cresa ORE IR AA 139 57 Applicazione d l campione sessies 142 5 8 Preparazione del collettore di frazioni siisii eE naran 154 59 Operazioni incamerd Ciara 159 dl an 161 6 Operazioni dal display dello strumento ttrtrrrrrrrereeeeeezezineenenee 163 ol dba 164 6 2 FOO 167 6 3 Esecuzione di un ciclo manuale n sssssssssssssssessesssieerirssresreeresssssssssssssssssssstssrsttrtrttrtreerreeresresrsssssssssss 170 6 3 1 Cena 171 6 3 2 Monitoraggio e controllo GEICICIO cui 173 6 4 Esecuzione di un ciclo con metodo iii 180 6 4 1 Selezionare un tipo IMMOLO siii 181 6 4 2 CL II 184 6 4 3 ARE RR O ttt 190 6 4 4 User defined methodS iii 198 6 4 5 Kerodi PEPE ia 201 6 5 Op rdzion successive GICICIO saneren R e 204 6 6 Gestione di metodi SH 207 6 6 1 CUR 208 6 6 2 Gestione della chiavetta di memoria USB ricada 218 6 6 3 File dei risultati BMP 221 7 Operazioni controllate da UNICORN Start rrrrrrrrrrereeienezineeneo 223 E RO 224 Le Pei 226 7 3 CL PRA 227
219. zionamento 29 0270 57 AF 45 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 1 Panoramica del display dello strumento Pulsante Descrizione Execute Esegue i parametri ciclo modificati durante l ese EZI cuzione Conferma una selezione o un operazione Cancel Annulla una selezione o un operazione Cancel Termina il ciclo in esecuzione sempre seguito da una schermata che chiede di confermare l opera zione Al termine di un ciclo chiude l applicazione e ritor na alla schermata iniziale AKTA start Icona grafico Apre la visualizzazione grafica del ciclo in corso visualizzando il grafico dell assorbanza UV MAU rispetto al Tempo min Salva un metodo utente che stato creato o mo dificato Select Conferma ed avvia un ciclo in base ad un modello specifico o un metodo utente Create Crea un metodo utente in base al modello selezio Create nato parametri ciclo devono essere modificati in base alla necessit Conferma un intervento Rifiuta un intervento 46 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 3 Descrizione del sistema 3 3 Display strumento 3 3 1 Panoramica del display dello strumento Descrizione della guida del display strumento L AKTA start Instrument Display Help accessibile da qualsiasi schermata del display strumento selezionando il punto interrogativo nell angolo superiore destro Il testo dell Help fornisce informazioni rela
220. zione Graph per visualizzare il ccomatogramma Edit run per cambiare i parametri del ciclo in corso Hold per sospendere momentaneamente il ciclo mantenendo la portata le posizioni valvole e la concentrazione B impostate Pause per mettere in pausa il ciclo in corso End per terminare il ciclo prima del suo completamento Nota Il ciclo ha inizio con un lavaggio pompa predefinito Il lavaggio pompa viene eseguito a 10 ml min per 1 min con 30 sec di lavaggio tampone B seguiti da 30 sec di lavaggio tampone A Edit run disattivato con lavaggio pompa in corso Nel corso del lavaggio pompa il flusso diretto attraverso la Wash valve verso Waste Nota La chiavetta di memoria USB memorizza i file dei risultati che possono essere visualizzati tramite UNICORN start Viene creato anche un file BMP che pu essere visualizzato su un PC Per ulteriori dettagli vedere la Sezione 6 6 3 File dei risultati BMP a pagina 221 Non staccare la chiavetta di memoria USB finch il sistema non genera il rapporto file BMP Per attivare il mantenimento del ciclo corrente attenersi alle istruzioni indicate di seguito Passo Operazione 1 Run view UY absorbance Conductivity Flow rate Pressure Tube no Edit run Hold End Nella schermata Run view selezionare Hold per sospendere temporanea mente il ciclo Nota Non applicabile per ciclo manuale L opzione Hold attiva solo i
221. zioni di funzionamento 29 0270 57 AF 2 Istruzioni di sicurezza 2 struzioni di sicurezza Informazioni sul capitolo Questo capitolo descrive le precauzioni di sicurezza e le procedure per l arresto di emergenza del prodotto Il capitolo descrive anche le etichette presenti sul sistema e le procedure di riciclaggio In questo capitolo Il presente capitolo contiene le seguenti sezioni Sezione Vedere pagina 2 1 Precauzioni di sicurezza 18 2 2 Etichette Li 2 3 Procedure di emergenza 31 2 4 Procedure di riciclaggio 33 KTA start Istruzioni di funzionamento 29 0270 57 AF 17 2 Istruzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza 2 1 Precauzioni di sicurezza Introduzione AKTA start alimentato con la tensione di rete e utilizza liquidi che possono risultare pericolosi Prima di installare utilizzare o sottoporre a manutenzione il prodotto l utente tenuto a conoscere tutti i pericoli descritti nel presente manuale Seguire le istruzioni fornite per evitare lesioni personali o danni all attrezzatura Le precauzioni di sicurezza nella presente sezione sono raggruppate nelle seguenti ca tegorie Precauzioni generali Utilizzo di liquidi infiammabili Protezione individuale Installazione e movimentazione dello strumento Funzionamento del sistema Manutenzione Precauzioni generali AVVERTENZA Osservare sempre le presenti Precauzioni generali per evitare di ferirsi mentre si utilizza AKTA start
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