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BioPAT® Trace

1. Segnalazione di informazioni utili e consigli di utilizzo Attenzione possibili danni collaterali Attenzione tensione elettrica pericolosa gt e Pe Attenzione sostanze nocive alla salute o irritanti Istruzioni generali per la sicurezza 19 4 Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo 4 1 Equipaggiamento fornito Descrizione Codice d ordine Apparecchio BioPAT Trace con alimentatore spine di rete BPTO001 Europa USA UK cavo Ethernet incrociato manuale d uso e software PC trace_mon Tabella 1 Equipaggiamento fornito per il BioPAT Trace 4 2 Materiali di consumo 4 2 1 Set di tubi Descrizione Codice d ordine Set di tubi per dialisi glucosio lattato BPT0003 Set di tubi per filtrazione glucosio lattato BPT0004 Set di tubi per filtrazione glucosio lattato resistente alla cellulasi BPT0005 Set di tubi per dialisi etanolo metanolo BPT0050 Set di tubi per filtrazione etanolo metanolo BPT0049 Reattore enzimatico per l applicazione etanolo metanolo BPT0048 4 2 2 Soluzione tampone concentrato Descrizione Codice d ordine Soluzione tampone concentrato 20x per coltura cellulare BPT0006 applicazione glucosio lattato quantit 0 5 litro Soluzione tampone concentrato 5x per coltura microbico BPTO060 applicazione glucosio lattato quantit 1 litro Soluzione tampone concentrato 5x applicazione
2. 7 1 4 Voce di menu Impostazioni i 31 Dial File Apparecchio Display Informazioni Parametri 10 Impostazioni base Lingua Figura 81 Opzioni di menu Impostazioni L opzione di menu Impostazioni permette di eseguire le impostazioni pi importanti per il funzionamento e la comunicazione dell apparecchio Parametri Questa opzione permette di impostare la frequenza di misura la frequenza di calibrazione la concentrazione degli standard di calibrazione ecc secondo le specifiche dell utente Impostazioni base Questa opzione permette di impostare l apparecchio sul metodo di prelievo selezionato Allo stesso modo l utente pu dare delle indicazioni sull apparecchio e sul progetto che saranno usate successivamente nell emissione dei dati Lingua Questa opzione permette di modificare la lingua dell interfaccia utente Funzionamento 101 102 Funzionamento 7 1 4 1 Parametri Nell opzione Parametri si possono impostare tutti i parametri rilevanti per il modo di misura figura 82 autocalibrazione Calibrazione ritardata Numero di valori di misura per gruppo Standard 1 Glucosio Standard 2 Glucosio Misurazioni tra le calibrazioni Misurazioni per standard Misurazioni per campione esterno Uscita analogica Glucosio Numero massimo di misurazioni per standard Campi di uscita Glucosio Standard 1Lattato Standard 21 stata Periodo di misura 1 00 Minuti Figura 82 Ca
3. 1 N Ki 1 x l ES P Aay Sa Nd Ve 40 7 gt N Se Figura 44 45 Connessione della sonda di dialisi al set di tubi Mettendo in funzione la sonda dopo la sterilizzazione si devono eliminare delle bolle d aria che si sono formate eventualmente nella camera di misura sull analizzatore online Messa in funzione 6 2 6 5 Pulizia della sonda di dialisi e sostituzione della membrana a Prima di smontare la sonda di dialisi dal bioreattore togliere il set di tubi dalla sonda staccando le estremit dei tubi b Dopo la raccolta del bioreattore ed un eventuale fase di sterilizzazione in autoclave smontare la sonda di dialisi dal bioreattore Pulire poi la sonda e l adattatore usando una spazzola morbida e acqua c Verificare che le guarnizioni di tenuta dell adattatore della sonda di dialisi siano pulite e correttamente in sede d Svitare le due viti Torx sull estremit della sonda di dialisi usando la chiave Torx fornita in modo da poter togliere la montatura della sonda di dialisi compresa la membrana dal supporto della montatura e Poi pulire la montatura della sonda e il supporto della montatura usando una spazzola morbida e dell acqua Messa in funzione 61 62 Messa in funzione 6 2 7 Collegamento della sonda di filtrazione La sonda di filtrazione sonda di prelievo in linea serve a prelevare del filtrato sterile da bioreattori e fermentatori in condizioni sterili Una membrana di m
4. 107 7 1 5 Voce di menu Informazioni LL 107 7 2 Messaggidi stato dei LED siii 108 8 Consigli e lista di controllo 109 8 1 Selezione delle soluzioni standard adatte 109 8 2 Modo Dialisi referenziazione all inizio di una fermentazione 109 8 3 Modo Dialisi referenziazione con concentrazioni basse di lattato 110 8 4 Esclusione delle contaminazioni nel set di tubi 111 8 5 Importazione dei dati in Excel nne tane enem Ea 112 9 Aiuto in caso di guasti 119 TO Manutenzione sarina paaien e aa 124 TOMAPPareCchio scsioriicii iaia 124 102 S t ditubiz c cnr Aa a 124 Ti APpendice j 0 eV pi LA a 125 TA Scheda tenia irani icone ade 125 6 Indice Indice delle figure Figura Figura Figura Figura Figura Figura Figura Figura Figura Figura 10 Figura 11 Figura 12 Figura 13 Figura 14 Figura 15 Figura 16 Figura 17 Figura 18 Figura 19 Figura 20 Figura 21 Figura 22 Figura 23 Figura 24 Figura 25 Figura 26 Figura 27 1 I 0 Trasformazione enzimatica del glucosio con ossidazione anodica parallela di HO Trasformazione enzimatica del lattato con ossidazione anodica parallela di H O LL i Trasformazione enzimatica del metanolo etanolo con ossidazione anodica parallela di H O LL Principio della tecnica di diffusione dei fluidi Schema di flusso che spi
5. Figura 87 Figura 88 Figura 89 Figura 90 Figura 91 Pagina di avvio con identificazione dei campi di selezione e VISUANIZZAZIONE ss ra spira oa AVVIO AUTOMATICO ri roi i Schermata nello stato Pronto Visualizzazione dopo la misura di riferimento Richiesta di prelievo di un campione e collegamento al rubinetto AOC Rulli ii ei ea Collegamento di un campione esterno LL Posizione corretta del rubinetto a 3 VIe Opzioni di menu File eis creare lia cade eni Opzioni di menu Apparecchio Connessione dell apparecchio inrais cerie niesaat ieri Simbolo di connessione asterisco Li Ricerca in releer iieiea niesie Pei li Finestra di query al riavvio dopo Arresto Opzioni di menu Visualizza LL Schermata dei valori di calibrazione attuali Schermata della riga di stato LL Schermata per l adattamento della visualizzazione dei valori di MISUNA pil A i i eii Visualizzazione dell andamento del valore di misura Opzioni di menu Impostazioni Campo di inserimento per l impostazione dei parametri di misura Commutazione dell uscita analogica Campo di inserimento per le impostazioni base Finestra di selezione della lingua LL Importazione dati del file ptd in Excel Attivare Tutti II orari nra ai eiae Importazione dati del file ptd in Excel Selezione del filepid isaaniia ie ea Importazione dati del file ptd in Excel ass
6. Trace 17 3 Istruzioni generali per la sicurezza L analizzatore BioPAT Trace stato concepito e costruito tenendo in considerazione un analisi dei rischi e secondo una selezione meticolosa delle norme armonizzate da rispettare nonch altre specifiche tecniche L analizzatore corrisponde pertanto allo stato attuale della tecnica e garantisce il massimo livello di sicurezza Tuttavia questo livello di sicurezza garantito solo se nella pratica operativa vengono attuate tutte le misure necessarie pertinenti Fa parte degli obblighi del gestore pianificare tali misure e controllare che vengano applicate Il gestore deve innanzitutto garantire che il BioPAT Trace venga utilizzato solo in conformit alla sua destinazione d uso cfr il capitolo b 2 Descrizione di BioPAT Trace a pagina 12 il BioPAT Trace venga fatto funzionare solo se in uno stato perfetto e funzionante il manuale d uso sia in uno stato leggibile e sia disponibile nella sua integrit sul luogo di utilizzo il BioPAT Trace venga sottoposto a manutenzione e riparazione solo da parte di personale sufficiente mente qualificato 18 Istruzioni generali per la sicurezza simboli usati nel presente manuale d uso servono ad attirare l attenzione sulle istruzioni di sicurezza Il simbolo usato di volta in volta non sostituisce il testo dell istruzione di sicurezza Pertanto il testo deve essere sempre letto integralmente
7. analita all interno di una cella di misura del flusso in presenza di un determinato potenziale applicato agli elettrodi In presenza di una soluzione elettrolita la trasforma zione elettrochimica della sostanza dell elettrodo di lavoro comporta una cessione o un acquisizione di elettroni ossidazione o riduzione La grandezza della corrente limite misurabile dipende sia dai parametri della legge di Faraday dell elettrolisi sia da quelli della legge di diffusione di Fick ed proporzionale alla concentrazione La selettivit di questo rilevatore sensibile si basa sul fatto che non tutte le sostanze sono elettrochimicamente attive e pertanto molte sostanze capaci di interferire non vengono rilevate in una soluzione campione La selettivit dipende dal materiale dell elettrodo di lavoro e dal potenziale applicato Per un ulteriore aumento della selettivit di un sensore elettrochimico si pu utilizzare una combinazione con enzimi in questo modo l elettrodo diventa un biosensore Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace 13 2 2 Tecnologia dei biosensori Gli analiti glucosio e lattato vengono rilevati per mezzo di reazioni enzimatiche La figura 1 mostra la trasformazione enzimatica del glucosio in gluconolattone In presenza di acqua si ha l immediata idrolisi del gluconolattone in acido gluconico Il perossido di idrogeno H 0 prodotto durante la prima fase viene rilevato in modo amperometrico mediante un ossidazione
8. anodica che libera due elettroni La figura 2 mostra la trasformazione enzimatica del lattato in piruvato Anche nel corso di questa reazione si forma H O che poi viene rilevato in modo amperometrico Le reazioni enzimatiche avvengono secondo il modello chiave serratura Esse sono specifiche e pertanto altamente selettive Una reazione sul sistema enzimatico dunque un ulteriore selezione La combinazione dei due principi selettivi rende l analizzatore BioPAT Trace ampiamente insensibile agli effetti di matrice e alle sostanze capaci di interferire H0 Oo 2 28 CHOH H ti O OH GOD OH H Tx e H 792 H OH CH 0H CHOH l O D gt OH B D Glucosio du uo 2 pi Hu H COOH O OH OH H OH Glucone delta lattone Acido D Gluconico Figura 1 Trasformazione enzimatica del glucosio con ossidazione anodica parallela di H 0 HO OH HO LOD Sol o Ms O2 E C CH3 H203 H O H203 O 2H 2e Figura 2 Trasformazione enzimatica del lattato con ossidazione anodica parallela di H 0 14 Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace sensori di BioPAT Trace sono costituiti da elettrodi di platino che formano uno strato spesso e vengono rivestiti con gli enzimi corrispondenti glucosio ossidasi GOD o lattato ossidasi LOD in modo stabile nel tempo L enzima e l elettrodo si trovano quindi in stretta vicinanza tra loro cos che le reazioni illustrate sopra possono essere registr
9. antiparticolato fa parte del set di tubi e ha due funzioni nel BioPAT Trace Attraverso la membrana con porosit di 0 22 um si ha in primo luogo una filtrazione sterile della soluzione tampone Prima che la soluzione esca dal modulo con una seconda membrana viene eseguita la degassificazione Il filtro antiparticolato garantisce quindi una corrente accettore priva di particelle e di bolle d aria nel BioPAT Trace Per un funzionamento sicuro dell apparecchio il set di tubi compreso il filtro antiparticolato devono essere sostituiti periodicamente Struttura e funzionalit 35 5 5 Funzione del modulo di diffusione Il modulo di diffusione fa parte del set di tubi Il modulo di diffusione permette di trasferire le soluzioni standard o un campione esterno nell analizzatore Una membrana rende possibile la diffusione del substrato dalle soluzioni del donatore standard e campione nella soluzione tampone accettore diversi materiali della membrana consentono la dialisi la dialisi resistente alla cellulasi e la diffusione di gas per la separazione dei substrati La figura 13 mostra una struttura schematica Donatore y T s i I Accettore 1 ia lt w Eo ta N js Pi l Membrana Figura 13 Struttura schematica e fissaggio del modulo di diffusione Il modulo in PMMA dotato di una superficie di diffusione di 20 mm e garantisce uno scambio sufficiente di sostanze tra la co
10. bioreattore Poco prima di procedere al montaggio nel bioreattore si deve sostituire l isopropanolo con acqua per evitare l evaporazione e la perdita dell idrofilizzazione Sosti tuire con acqua la soluzione nel cilindro vedi figura 55 e avviare la pompa sul pannello di comando vedi figura 56 premendo il pulsante Pompa On Dopo circa 10 minuti arrestare la procedura premendo il tasto Pompa Off Togliere il set di idrofilizzazione dalla sonda di filtrazione e montare quest ultima nel bioreattore secondo le istruzioni per l uso Osservare assolutamente le istruzioni contenute nel manuale d uso della sonda di filtrazione Se il montaggio il pretrattamento o la pulizia della membrana non sono eseguiti in modo appropriato si possono verificare degli errori di misura oppure delle contaminazioni del bioreattore 6 2 7 6 4 Esecuzione della rigenerazione della sonda di filtrazione dopo la fermentazione Direttamente dopo lo svuotamento e la sterilizzazione del bioreattore si deve smontare la sonda di filtrazione dalla porta del bioreattore Consigliamo di sostituire la membrana e la boccola in PTFE dopo ogni utilizzo In molti casi tuttavia possibile un uso ripetuto della membrana 3 5 usi dopo una precedente pulizia In questo caso procedere come segue Togliere tutti i depositi attaccati alla sonda di filtrazione sotto acqua corrente usando per es una spazzola morbida Successivamente per eliminar
11. delle soluzioni standard allo scopo di garantire una precisione di misura ottimale Inoltre si consiglia sempre di selezionare uno standard con una concen trazione molto bassa per determinare con affidabilit dei valori prossimi allo zero In caso di regolazioni le concentrazioni degli standard di calibrazione non dovrebbero essere troppo lontane dal punto di regolazione Ad esempio per una regolazione a 1g I pi logico lavorare con una combinazione di 0 5 g l e 4 g l che con 1 g l e 10 g l 8 2 Modo Dialisi referenziazione all inizio di una fermentazione Utilizzando il metodo Dialisi necessario eseguire una referenziazione per equiparare tra loro le permeabilit delle membrane all interno del reattore e all esterno nella cella di diffusione e per compensare le differenze di temperatura tra le due membrane Consigli e lista di controllo 109 110 Consigli e lista di controllo Pertanto ai fini della qualit dei risultati di misura molto importante determinare il fattore di riferimento in modo affidabile Di conseguenza si consiglia di determinare tempestivamente il valore di riferimento all inizio della coltura e allo stesso tempo di utilizzare una fase senza variazioni della concentrazione nel mezzo A questo scopo disattivare la calibrazione automatica e impostare innanzitutto l intervallo di misura su 1 Poi osservare alcuni valori di misura Se questi non presentano forti variazioni e rimangono il pi possib
12. di plastica e munite di dicitura singoli tubi sono contrassegnati come segue BUFFER Collegamento al tampone di trasferimento WASTE Collegamento al contenitore per scarti e Collegamento della sonda 1 per dialisi Collegamento della sonda 2 per dialisi Sample Collegamento della sonda per filtrazione Standard Dicitura sul coperchio per soluzione di calibrazione standard 1 Standard2 Dicitura sul coperchio per soluzione di calibrazione standard 2 Prima di riempire i set di tubi verificare che tutte le soluzioni siano collegate e che i recipienti siano riempiti sufficientemente Se i set dei tubi sono vuoti o solo parzialmente riempiti si avranno dei valori di misura erronei La soluzione di trasferimento viene fornita come concentrato Osservare le indicazioni riportate sulla confezione per eseguire una diluizione corretta La mancata diluizione o una diluizione errata comporta dei risultati di misura erronei Messa in funzione sartorius Figura 18 Vista del pannello frontale con tutti i tubi installati per il modo operativo Filtrazione Figura 19 Tensione e allineamento della coppia di tubi nella piastra di guida 6 2 3 Montaggio del set di tubi Filtrazione Per il montaggio del set di tubi si devono inserire innanzitutto i tubi delle valvole nelle valvole a manicotto Per evitare degli scambi le linee sono marcate a colori A riguardo valgono
13. ess Stao riale Figura 56 Pagina di avvio di Filtrazione con pannello di comando per l azionamento della pompa per l idrofilizzazione Messa in funzione 71 72 Messa in funzione 6 2 7 6 3 Esecuzione del controllo dell ermeticit Una volta completata l idrofilizzazione si deve esegui re un controllo dell ermeticit per mezzo del pannello di comando vedi figura 56 attivando il pulsante Prova ermeticit Per il controllo dell ermeticit usare la struttura per l idrofilizzazione mostrata nella figura 55 L estremit libera del tubo del set di idrofilizzazione deve essere sospesa in aria al di sopra del livello del liquido conte nuto nel cilindro vedi marcatura nella figura 55 La procedura di test dura 8 minuti Nell arco di questo tempo viene pompata dell aria nella sonda Poi la pompa aspira automaticamente di nuovo isopropa nolo attraverso la membrana per garantire che la membrana non diventi di nuovo idrofoba Durante la procedura di test si dovrebbe osservare quanto segue Dopo circa 6 minuti dalla membrana dovrebbero uscire protratte nel tempo molte bollicine d aria altrimenti la membrana non idrofilizzata a sufficienza Se dai raccordi escono delle bolle d aria grandi ci pu significare che le guarnizioni non sono integre Si consiglia di conservare la membrana nella solu zione di idrofilizzazione di isopropanolo al 70 per mantenerla idrofila fino al momento del montaggio nel
14. laterale da 25 mm con rubinetto BPT0023 di chiusura lunghezza della membrana 130 mm Sonda di filtrazione per il foro laterale da 25 mm con rubinetto BPT0036 di chiusura lunghezza della membrana 90 mm Tabella 3 Sonde di campionamento per il BioPAT Trace 4 4 Accessori per sonde di campionamento 4 4 1 Accessori per sonda di dialisi Descrizione Codice d ordine Kit di intervento per sonda di dialisi BPT0045 Adattatore 25 12 mm per il montaggio della sonda di dialisi di 165 mm BB 38242540 nel foro laterale da 25 mm raccordo Ingold 52 mm con O ring 4 4 2 Accessori per sonda di filtrazione Descrizione Codice d ordine Kit di intervento per sonda di filtrazione BPT0059 Set di tubi per l idrofilizzazione delle membrane filtranti BPT0042 Gabbia di protezione per sonda di filtrazione per il montaggio BPT0038 nel foro laterale da 25 mm lunghezza della membrana di 130 mm profondit di montaggio aumentata di ca 25 mm Gabbia di protezione per sonda di filtrazione per il montaggio BPT0039 nel foro laterale da 25 mm lunghezza della membrana di 90 mm profondit di montaggio aumentata di ca 25 mm Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo 23 4 4 3 Accessori per sonda di dialisi e filtrazione Descrizione Codice d ordine Raccordo a morsetto PG13 5 con O ring e disco scorrevole BPTO061 Adattatore 19 12 mm per il montaggio della sonda di dialisi e filtrazione nel foro del coperch
15. le seguenti regole Le coppie di tubi sono marcate a colori rosso giallo e verde e sono sorrette da due piastre di guida L ordine dall alto verso il basso segue il principio del semaforo rosso in alto giallo in centro verde in basso La linea marcata a colori della coppia di tubi deve essere sempre nella fessura anteriore della valvola Durante l inserimento si deve sempre condurre il lato con la marcatura con la mano destra Una volta inserito il set di tubi verificare se il risultato corrisponde a questa descrizione Come primo passo prendere con entrambe le mani le due piastre di guida e aprirle leggermente per allineare in parallelo i tubi della valvola vedi figura 19 La coppia di tubi marcata in rosso dovrebbe essere in alto e la marcatura essere a destra Messa in funzione 45 Figura 20 Posizionamento dei tubi delle valvole sull apparecchio 46 Messa in funzione Mettere le piastre di guida sopra le valvole in modo che le coppie di tubi poggino rispettivamente sopra le fessure delle valvole vedi figura 20 Durante la posatura dei tubi verificare che la marcatura colorata rosso giallo verde si trovi sempre a destra vicino alla valvola e che corrisponda alla marcatura colorata della valvola Quando si inseriscono i tubi tendere i due lati della coppia di tubi corrispondente e tirarli verso il basso fino a quando i tubi sono inseriti perfettamente nelle fessure vedi figura 21 22 Du
16. reciproco tra le due membrane viene quindi definito in un fattore di riferimento che viene usato per calcolare i valori di misura Si pu eseguire una misurazione di riferimento in qualsiasi momento in particolare se nel processo risultano delle modifiche che potrebbero influenzare la velocit di diffusione per es dopo delle variazioni della temperatura Le misure di riferimento possono essere anche eseguite di routine per es quando si prelevano dei campioni per l analisi esterna concomitante Il valore di misura viene quindi corretto sulla base del nuovo fattore di riferimento solo se il nuovo valore di riferimento stato inserito ed stato confermato con Applica Fino a quel momento i valori di misura rilevati provvisoriamente vengono sempre calcolati e visualizzati con il fattore di riferimento attualmente valido L apparecchio si avvia con un fattore di riferimento di 1 0 Se entrambe le membrane avessero lo stesso grado di permeabilit questo valore sarebbe corretto Tuttavia la pratica ha mostrato che vi sono delle differenze dovute alla fabbricazione e risultanti dall influenza delle condizioni ambientali della sonda L equiparazione funziona come segue dopo aver attivato il tasto Riferimento l apparecchio determina i valori di concentrazione nel bioreattore e propone dei valori corrispondenti figura 66 Si deve ora controllare per mezzo di un campione di riferimento se questi sono corretti ed eventual
17. ricommutazione delle valvole il flusso scorre verso la cella di misura e qui genera un segnale L intensit del segnale rappresenta la misura per la concentrazione del campione Un grande vantaggio offerto da questo metodo di arricchimento dato dall ampio campo di misura che viene raggiunto variando il tempo di diffusione nonch dalla protezione dei sensori contro i componenti capaci di interferire presenti nel campione Bypass Bypass gt e f Cella di I B Cella di Valvola Camera di misura Valvola Cameradi misura raccolta raccolta Donatore Donatore Figura 5 Schema di flusso che spiega l analisi di diffusione dei fluidi Figura a sinistra Commutazione della valvola durante la determinazione della linea base e durante il caricamento Figura a destra Commutazione durante lo scaricamento e la rilevazione del segnale 2 4 Trasmissione e salvataggio dei dati Il BioPAT Trace dotato di molteplici uscite che rendono molto versatile la connessione in sistemi di registrazione dei dati Oltre ad un uscita analogica standard per segnali compresi tra 0 20 mA 0 10 V o 4 20 mA il BioPAT Trace dispone di una porta Ethernet che permette di connettere l apparecchio ad un PC tramite una rete Grazie al software fornito possibile visualizzare graficamente i risultati di misura e salvarli vedi capitolo gt 7 Funzionamento a pagina 85 Descrizione dell analizzatore BioPAT
18. superiore P1 rie eritininniiie Posizione corretta della scatola della pompa perno di fissaggio innestato Pannello laterale completamente equipaggiato Figura 28 Figura 29 Figura 30 Figura 31 Figura 32 Figura 33 Figura 34 Figura 35 Figura 36 Figura 37 Figura 38 Figura 39 Figura 40 Figura 41 Figura 42 Figura 43 Figura 44 Figura 45 Figura 46 Figura 47 Figura 48 Figura 49 Figura 50 Figura 51 Figura 52 Figura 53 Figura 54 Figura 55 Figura 56 Figura 57 Figura 58 Figura 59 Figura 60 Figura 61 Figura 62 8 Indice Applicazione della cella di misura sull apparecchio Fissaggio della cella di misura sull apparecchio Fissaggio del modulo di diffusione sulla guida di fissaggio Inserimento dei contagocce nel supporto Collocazione del rubinetto a 3 Vie Rubinetto a 3 vie e siringa montati LL Collocazione del reattore enzimatico LL Fissaggio del reattore enzimatico LL Reattore enzimatico MONtato LL Sostituzione della membrana nella sonda di dialisi per l applicazione glucosio lattato 0 Inserimento della membrana Montaggio della montatura per sonda renane Avvitamento delle 2 Viti siriani e ina Inserimento del disco scorrevole e dell O ring Riempimento della sonda con la soluzione tampone Chiusura della sonda prim
19. 2 6 4 Controllo dell assenza di bolle d aria nella 34 60 camera di misura lavare se necessario 12 Solo per Dialisi eseguire la referenziazione 7 88 segg 66 69 Referenziazione con campione esterno 88 segg 66 69 oppure con valore di misura noto 13 Opzionale collegamento dell uscita 6 6 82 62 analogica al sistema PLC Collegamento dell uscita analogica 82 62 0 10 V 4 20 mA o 0 20 mA Tabella 7 Lista di controllo per la messa in funzione 118 Consigli e lista di controllo 9 Aluto in caso di guasti Se non si riesce ad avviare l analizzatore BioPAT Trace oppure si verificano dei malfunzionamenti durante l utilizzo rivolgersi in genere a operatori esperti per la manutenzione oppure ai tecnici del servizio assistenza del costruttore per le riparazioni Per evitare il rischio di scosse elettriche letali gli interventi sulla dotazione elettrica devono essere eseguiti esclusivamente da personale qualificato e autorizzato l operatore stesso pu porre rimedio solo a guasti che sono chiaramente da ricondurre a errori di utilizzo o di manutenzione in nessun caso l operatore deve tentare di risolvere i guasti della dotazione elettrica Se insorgono dei problemi con l analizzatore BioPAT Trace innanzitutto leggere con attenzione le seguenti tabelle 8 e 9 che offrono una panoramica dei guasti possibili Aiuto in caso di guasti 119 Errore Messaggio di errore Causa possibile Calibrazio
20. Avvio del software del PC 7 85 segg 63 73 Doppio clic sull icona di avvio sul desktop 85 63 trace mon Attesa dell instaurazione automatica 7e7 1 2 1 85 72 della connessione oppure connessione 93 segg dell apparecchio Selezione dell avvio con Nuovo set di tubi 96 73 7 Impostazione dei parametri operativi 7 1 4 101 segg 79 80 Menu Impostazioni Impostazioni base 7 1 4 2 105 segg 82 Selezione del metodo di misura 105 segg 82 Filtrazione Dialisi Parametri di misura 7 1 4 1 102 segg 80 81 Impostazione del periodo di misura 102 Inserimento dei valori degli standard di 103 calibrazione Creazione di un file per il salvataggio dei 7 1 1 92 70 valori di misura 8 Collegamento della sonda di campionamento 6 2 6 4e 60 76 44 45 6 2 7 9 57 58 Collegamento della sonda di filtrazione o di 60 76 44 45 dialisi ai tubi 57 58 9 Avvio delle misurazioni 7 85 segg 64 65 Attivazione del tasto Priming e attesa della 86 segg 64 65 calibrazione Consigli e lista di controllo 117 Passo Azione Capitolo Pagina Figura Lista di controllo In alternativa attivazione dell opzione 86 segg 64 65 Avvio autom dopo il riempimento e la calibrazione l apparecchio passa automaticamente nel modo di misura 10 Solo per Metanolo Etanolo 6 2 5 52 segg 34 36 collegamento del reattore enzimatico Montaggio del reattore enzimatico nel 52 segg 34 36 set di tubi 11 Controllo della camera di misura 53 e 34 60 6
21. BPT0046 metanolo etanolo quantit 1 litro 20 Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo 4 2 3 Disinfettante Descrizione Codice d ordine Disinfettante concentrato quantit 1 litro BPT0044 4 2 4 Standard di calibrazione quantit 0 5 litro Descrizione Codice d ordine Standard di calibrazione 0 1 g l glucosio 0 05 g l lattato BPT0043 Standard di calibrazione 0 5 g l glucosio 0 25 g l lattato BPT0011 Standard di calibrazione 1 g l glucosio 0 5 g l lattato BPT0010 Standard di calibrazione 2 g l glucosio 1 g l lattato BPT0009 Standard di calibrazione 4 g l glucosio 2 g l lattato BPT0008 Standard di calibrazione 10 g l glucosio 5 g l lattato BPT0007 Standard di calibrazione 20 g l glucosio 10 g l lattato BPT0041 Standard di calibrazione 0 2 g l metanolo BPT0051 Standard di calibrazione 1 g l metanolo BPT0052 Standard di calibrazione 5 g l metanolo BPT0053 Standard di calibrazione 20 g l metanolo BPT0054 Standard di calibrazione 0 5 g l etanolo BPT0058 Standard di calibrazione 2 g l etanolo BPT0057 Standard di calibrazione 4 g l etanolo BPT0056 Standard di calibrazione 40 g l etanolo BPT0055 Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo 21 4 2 5 Membrane Descrizione Codice d ordine Membrane glucosio lattato per la sonda di dialisi quantit BPT0024 5 pezzi Membrane glucosio lattato resistente alla cellulasi per la so
22. Connessione Messa in funzione e Arresto vedi figura 71 7 1 2 1 Connessione Se si vuole selezionare l opzione Connessione si pu connettere un nuovo BioPAT Trace figura 72 A tale scopo inserire l indirizzo IP dell apparecchio Se il software stato avviato con l icona di avvio 9 sul desktop l indirizzo IP di default 192 168 120 231 gi visualizzato Funzionamento 93 94 File Apparecchio Di Figura 73 Visualizzazione della connessione Funzionamento Chi c Di default Nome o indirizzo IP dell apparecchio 192 168 120 231 Figura 72 Connessione dell apparecchio Se all apparecchio stato assegnato un indirizzo differente per es da parte dell amministratore di rete inserirlo qui Se si desidera che questo nuovo indirizzo venga proposto automaticamente anche in futuro procedere come descritto nella sezione b 6 5 Modifica delle impostazioni di avvio a pagina 81 Se l indirizzo IP stato inserito in modo corretto e l apparecchio si trova in rete esso verr collegato al computer di comando e apparir un asterisco accanto al nome dell apparecchio o al numero di serie nella barra di visualizzazione Chi c Di default Nome o indirizzo IP dell apparecchio 192 168 120 231 x Elimina Figura 74 Ricerca in rete In alternativa si pu avviare una ricerca degli apparecchi in rete premendo il tasto Chi c risultati ven
23. Funzionamento a pagina 85 6 8 Messa fuori servizio L apparecchio pu essere messo fuori servizio in ogni momento spegnendo l interruttore di rete valori di calibrazione e di riferimento memorizzati rimangono conservati per l avvio successivo si veda la sezione b 7 1 2 1 Connessione a pagina 93 Se l apparecchio viene messo fuori servizio per due giorni per es per il fine settimana il sistema pu restare riempito con tampone In caso di un non utilizzo prolungato il set di tubi deve essere sostituito prima di un nuovo avvio Nel modo operativo Metanolo Etanolo il reattore enzimatico deve essere smontato in caso di messa fuori esercizio e deve essere conservato al fresco vedi capitolo 6 2 5 Collegamento e smontaggio del reattore enzimatico 7 Funzionamento L analizzatore BioPAT Trace viene acceso con l interruttore di rete posto sul retro e viene comandato mediante un PC esterno L icona di avvio 9 si trova sul desktop del PC Cliccare due volte sull icona per avviare l applicazione Appare l interfaccia utente mostrata nella figura 63 Stino nesie Figura 63 Pagina di avvio con identificazione dei campi di selezione e visualizzazione Nell intestazione appare il numero dell apparecchio Qui 231 L asterisco indica che il computer di coman do ha stabilito una connessione con il BioPAT Trace Se non c nessuna connessione con l apparecchio di misura si deve instaurarla si veda la sez
24. Hi SartorIus biotech Istruzioni per l uso BioPAT Trace Analizzatore online a 2 canali DIAM L a Veseo LLET 2 In generale Avvertenza importante dati e le informazioni contenuti in questo manuale sono stati redatti con la massima cura Ciononostante non possiamo offrire la garanzia assoluta che il presente documento non contenga degli errori Si prega di comunicarci se nel manuale mancano informazioni importanti se si scoprono errori tecnici o se si desiderano informazioni dettagliate sui singoli componenti La ristampa la traduzione e la riproduzione in qualsiasi forma anche parziale necessitano dell autorizzazione scritta della Sartorius Stedim Biotech GmbH Indirizzo della Redazione documentazione tecnica Sartorius Stedim Biotech GmbH Technical Editorial Department Redazione tecnica August Spindler Strasse 11 D 37079 Goettingen Germania E mail tech pubs sartorius stedim com Indirizzo Internet www sartorius stedim com Indice Indice delle FIGUFE 3i cia te a ai 7 Indice delle tabell amp c ocr pae 10 Spiegazione del simboli riris srren ip e di an ERA 10 li Introduzione iaia aaa 11 2 Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace 12 2 1 Principi della tecnica di analisi elettrochimica LL 13 2 2 Tecnologia dei DIOSENSOrI as iii 14 2 3 Fluidica e prelievo di campione Li 15 2 4 Trasmissione e salvataggio dei dati unauna 17 3 Istruzioni ge
25. LL 35 5 5 Funzione del modulo di diffusione LL 36 5 6 Funzione della sonda di dialisi 0 37 5 7 Funzione della sonda di filtrazione L nsin 38 5 8 Funzione del reattore enzimatico LL 39 5 9 Correzione della temperatura LL 39 Indice 6 Messa in funzione nereo oe r aa nE n e AAEN E EENE 40 6 1 Trasporto cea ninien i PARE RR Ve A a 40 6 2 Installazione sscan hagani neaga ana pra 40 6 2 1 Installazione dell apparecchio LL 40 6 2 2 Allacciamento dei tubi dell apparecchio L LL 42 6 2 3 Montaggio del set di tubi Filtrazione LL 45 6 2 4 Montaggio del set di tubi per il modo operativo Dialisi 51 6 2 5 Collegamento e smontaggio del reattore enzimatico 52 6 2 6 Collegamento della sonda di dialisi 55 6 2 6 1 Montaggio della membrana di dialisi nella sonda di dialisi ssasssiiaica piera eran 55 6 2 6 2 Installazione della sonda di dialisi nel bioreattore 58 6 2 6 3 Sterilizzazione della sonda di dialisi prima del collegamento al BioPAT Trace aa 58 6 2 6 4 Connessione della sonda di dialisi al set di tubi 60 6 2 6 5 Pulizia della sonda di dialisi e sostituzione della membrana ite piera 61 6 2 7 Collegamento della sonda di filtrazione 62 6 2 7 1 Descrizione del dispositivo 64 6 2 7 2 Accessori Opzionali 0 65 6 2 7 3 Montaggio della sonda di filtrazione 66 6 2 7 4 Idrofilizzazion
26. NF search trace bs local TORRSSAROe 192 168 120 10 send data Figura 60 Campo di inserimento per l impostazione di rete Se si desidera lavorare tramite una rete locale o una rete aziendale pu essere che l indirizzo di rete preimpostato oppure il nome della rete non sia compatibile con la propria rete In tal caso rivolgersi al proprio amministratore di rete e modificare l indirizzo IP del BioPAT Trace nel campo di questo formulario Dopo la modifica dell indirizzo di rete il BioPAT Trace accessibile unicamente tramite questo nuovo indirizzo IP Le ultime 3 cifre dell indirizzo IP qui 231 rappresentano il numero dell apparecchio che viene visualizzato sull interfaccia utente Messa in funzione 79 80 Messa in funzione 6 3 1 Risoluzione dei problemi Se nel sito web o durante l installazione sono stati indicati indirizzi IP differenti o scorretti la connessione non pu essere instaurata Procedere quindi nel seguente modo Innanzitutto cercare di instaurare per mezzo di un PC o di un cavo Ethernet incrociato una connessione diretta al sito web interno dell apparecchio mediante l indirizzo IP standard 192 168 120 231 Se ci non possibile si deve forzare la modifica su un indirizzo IP noto mediante il file di boot Prima spegnere l apparecchio Poi copiare il file di boot ip_set su una chiavetta USB e collegarla sul retro dell apparecchio Accendere quindi l apparecchio Dopo l operaz
27. No SLL6006 i13041 Order No 85032 541 57 Ver 04 2013
28. a della sterilizzazione Connessione della sonda di dialisi al set di tubi Connessione della sonda di dialisi al set di tubi Sonda di filtrazione con due diverse lunghezze della membrana Componenti della sonda di filtrazione per il montaggio nel foro del coperchio da 12 mm con raccordo PG da 13 5 Sonda di filtrazione con adattatore M26x1 Sonda di filtrazione con adattatore RD 28 1 8 Inserimento della DOCCOla LL Inserimento della membrana in polipropilene Inserimento del Oting eces Line Avvitamento del dado a risvolto Set di idrofilizzazione con scatola della pompa e tubazioni Montaggio e collegamento del set di idrofilizzazione Pagina di avvio di Filtrazione con pannello di comando per l azionamento della pompa per l idrofilizzazione Sonda di filtrazione con set di tubi Connessione del set di tubi LL Login per le impostazioni di rete LL Campo di inserimento per l impostazione di rete IMPOSTAZIONE ANAVVIO atpietro iero Uscitesanalogiche i icriie n Figura 63 Figura 64 Figura 65 Figura 66 Figura 67 Figura 68 Figura 69 Figura 70 Figura 71 Figura 72 Figura 73 Figura 74 Figura 75 Figura 76 Figura 77 Figura 78 Figura 79 Figura 80 Figura 81 Figura 82 Figura 83 Figura 84 Figura 85 Figura 86
29. alisi con la sonda di dialisi l analita viene trasferito attraverso una membrana di dialisi posta nella sonda la quale separa il contenuto del reattore mezzo dalla corrente accettore Allo stesso tempo la membrana di dialisi rappresenta una barriera sterile La figura 10 mostra lo schema del sistema di flusso La valvola di calibrazione verde e il rubinetto a 3 vie permettono di scegliere tra gli standard e il campione manuale La valvola per campioni rosso e la valvola bypass giallo permettono di scegliere la sonda di dialisi e il modulo di diffusione La parte superiore del sistema di flusso rappresenta la corrente donatore che responsabile dell alimentazione della soluzione di calibrazione verso il modulo di diffusione In base all operazione la corrente carrier accumula l analita nel modulo di diffusione o nella sonda di dialisi Campione esterno Standard 1 Scarti Standard 2 Cella Modulo di diffusione __ di misura Qui vatvola 2 va vaoia di controllo 6 rubinetto a 3 vie trasferimento Pompa 1 Sonda di dialisi Figura 10 Schema di flusso del metodo di dialisi online Con il metodo di dialisi la calibrazione di BioPAT Trace avviene mediante il modulo di diffusione interno AI contrario la misurazione del campione si svolge sempre attraverso la sonda di dialisi nel bioreattore Tra le due membrane viene determinato una sola volta un fatto
30. ate direttamente H H AOD X H C OH y 7 0 P o H202 R R R H Metanolo R H Fomaldeide R CH Etanolo R CH Acetaldeide H0 O 2 2e Figura 3 Trasformazione enzimatica del metanolo etanolo con ossidazione anodica parallela di H 0 La figura 3 mostra la trasformazione enzimatica del metanolo o etanolo in formaldeide o acetaldeide Come catalizzatore viene usato l enzima alcol ossidasi AOD che presente in forma immobilizzata in un reattore enzimatico Il perossido di idrogeno H 0 prodotto da questa reazione viene rilevato in modo ampero metrico Con questo metodo l alcol viene trasformato nel reattore enzimatico e la rilevazione del perossido di idrogeno ha luogo su un elettrodo di platino 2 3 Fluidica e prelievo di campione Per eseguire l analisi di un campione si deve trasferire del materiale rappresentativo verso il biosensore A questo scopo viene usato un sistema fluidico set di tubi costituito da tubazioni pompe e valvole Inoltre il campione viene condizionato nel sistema fluidico vale a dire viene liberato dai componenti potenzialmente capaci di interferire e viene diluito fino a quando possibile una rilevazione affidabile mediante i biosensori altamente sensibili A questo scopo si esegue una separazione per mezzo di una membrana di dialisi che integrata in ciascun set di tubi come modulo di diffusione Il condizionamento del campione si basa sul metodo dell analisi di diffu
31. ato rimesso nella posizione iniziale 12 Le versioni del software di BioPAT Trace e del Usare un software adatto PC non sono compatibili Se necessario reinstallare il software PC trace_mon dalla pagina Internet Tabella 9 Errori di calibrazione e rimedi Aiuto in caso di guasti 123 124 Manutenzione 10 Manutenzione 10 1 Apparecchio Se una serie di misurazioni viene interrotta per breve tempo massimo due giorni in tal caso il sistema pu continuare a funzionare senza dover sostituire il set di tubi Se il BioPAT Trace fuori servizio per un tempo prolungato oltre 7 giorni si deve successivamente cambiare il set di tubi Pulire la superficie dell alloggiamento di BioPAT Trace solo con un panno umido 10 2 Set di tubi Sostituire parzialmente o completamente i set di tubi ostruiti o danneggiati Ogni volta prima di mettere in funzione il sistema controllare che tutte le connessioni dotate di raccordi Luer lock o UNF siano ermetiche e se necessario serrare le connessioni 11 Appendice 11 1 Scheda tecnica Principio di misura Enzimatico amperometrico Campo di misura glucosio 0 10 40 g l Campo di misura lattato 0 05 5 g l Campo di misura metanolo 0 5 20 g l Campo di misura etanolo 1 40 g l Frequenza di misura Fino a 60 valori di misura h Scarto del valore di misura glucosio lt 3 per 5 0 g l Scarto del va
32. atore delle migliaia marcatura rossa Advanced Text Import Settings ba ED Settings used to recognjz numeric data Decimal separator Thousands separator l Note Numbers will be displayed using the numeric settings specified in the Regional Settings control panel Reset X Trailing minus for negative numbers OK Cancel Figura 91 Importazione dati del file ptd in Excel Ulteriori impostazioni per importazione testo Dopo aver confermato questa finestra con OK premere Avanti per confermare anche la fase 3 dell assistente per conversione testo Ora i dati del file ptd sono disponibili in una tabella Excel Consigli e lista di controllo 115 Lista di controllo per la messa in funzione Passo Azione Capitolo Pagina Figura Lista di controllo 0 Installazione del software PC 6 3e6 4 77segg 59 61 solo per la messa in funzione iniziale Accesso alla pagina Internet dell apparecchio 77 Download del programma di installazione 77 segg Esecuzione del programma di installazione 78 segg Impostazione dell indirizzo IP e della masche 79 59 61 ra subnet 1 Preparazione delle sonde 6 2 6 e 6 2 7 55 segg 37 58 Installazione della membrana 55 segg 37 40 64 segg 50 53 Solo per Filtrazione idrofilizzazione della 69 segg 54 56 membrana con isopropanolo Installazione della sonda nel bioreattore 58 segg 41 43 ed eventuale sterilizza
33. attato nonch Filtrazione Metanolo Etanolo e Dialisi Metanolo Etanolo Filtratione Metanolo Etanolo Dialisi Metanolo Ethanolo Wed Apr 24 14 36 26 2013 T Imposta ora OK Elimina Figura 84 Campo di inserimento per le impostazioni base Prima di lavorare con un nuovo set di tubi verificare sempre se stata selezionata l applicazione corretta Altrimenti come conseguenza si avranno valori di misura erronei oppure il danneggiamento del set di tubi Figura 85 Finestra di selezione per l impostazione della lingua Barrando l opzione Imposta ora si pu sincronizzare i tempi di sistema del proprio PC e quelli di BioPAT Trace Il tempo di sistema del PC viene quindi registrato nel BioPAT Trace 7 1 4 3 Lingua Nell opzione Lingua si pu selezionare l impostazione della lingua figura 85 7 1 5 Voce di menu Informazioni Richiamando la voce di menu Informazioni vengono visualizzati i numeri di versione attuali del software di BioPAT Trace e del software di comando Funzionamento 107 7 2 Messaggi di stato dei LED Sul pannello frontale i LED permettono una lettura dei diversi stati operativi dell apparecchio direttamente su BioPAT Trace senza dover usare il software di comando su un PC collegato La tabella 4 seguente offre una panoramica dei segnali LED Stato Azione LED1 verde LED 2 colore LED 2 stato Messa in funzione e fuori servi
34. azione di etanolo e metanolo Il BioPAT Trace in grado di fornire un analisi continua indipendentemente dal tipo di coltura batch fed batch coltura continua Il campo di misura di BioPAT Trace va da 0 01 a 40 g l per il glucosio da 0 05 a 10 g l per il lattato da 0 5 a 20 g l per il metanolo e da 1 a 40 g l per l etanolo La frequenza di misurazione di fino a 60 analisi all ora a seconda delle condizioni Grazie al suo design strutturato e ad un sistema di utilizzo semplice basta una breve introduzione per eseguire le funzioni di analisi di routine La temperatura ambiente del BioPAT Trace pu trovarsi tra 15 e 35 C poich dispone della correzione interna della temperatura L umidit dell aria non dovrebbe superare il 90 L analisi nel BioPAT Trace avviene combinando una trasformazione enzimatica e una rilevazione elettrochimica Come bioreattore viene usato un elettrodo ad enzima a 2 canali rivestito di ossidasi o una combinazione di un reattore enzimatico con un elettrodo di platino applicazione Metanolo Etanolo 12 Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace In base all applicazione la vita utile del sistema di sensori di 30 giorni o 5000 analisi La deviazione dal valore di misurazione medio inferiore al 3 per 5 g l di glucosio e per 2 5 g l di lattato 2 1 Principi della tecnica di analisi elettrochimica Un rilevatore elettrochimico serve a misurare una corrente che viene prodotta dall
35. cessi di fermentazione microbici sia nella coltura delle linee di cellule animali o umane Per l analisi dei substrati nei mezzi di coltura il campione deve essere prelevato dal bioreattore fermentatore in condizioni sterili in modo che vengano preservate la riproducibilit e rilevanza del campione prelevato Per il BioPAT Trace sono disponibili al momento le seguenti possibilit per il prelievo dei campioni sonda di filtrazione e sonda di dialisi Tutti i sistemi permettono di eseguire un prelievo perfettamente sterile dal bioreattore Il BioPAT Trace costituito da un alloggiamento compatto che adattato allo scopo applicativo e alle condizioni ambientali Tutti gli elementi meccanici e fluidici sono disposti sul pannello frontale e su quello laterale L elettronica concepita in modo modulare e comunica mediante diverse interfacce Per l esecuzione dell analisi ci si avvale di un unit sensore che costituita da un biosensore elettrochi mico Il comando del sistema e la valutazione dei dati vengono eseguiti mediante un computer esterno Il software di comando fornito si contraddistingue per la sua facilit d uso Introduzione 11 2 Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace L analizzatore BioPAT Trace serve al controllo online simultaneo degli analiti glucosio e lattato nelle colture di microrganismi e linee cellulari di laboratorio o industriali Come ulteriore applicazione disponibile la misur
36. del reattore enzimatico reattore enzimatico Messa in funzione 53 Figura 36 Reattore enzimatico montato Lo smontaggio del reattore avviene allo stesso modo in uno stato di arrestato Apparecchio Arresto Il reattore viene chiuso con il cappuccio di chiusura rosso viene posto nel contenitore di trasporto e conservato al fresco a 4 8 C Per un riutilizzo successivo del reattore enzimatico toglierlo dal set di tubi riempirlo con il tampone di trasferimento e conservarlo in frigorifero a 4 8 C Se nel reattore enzimatico penetra dell aria si corre il rischio che la sua capacit venga ridotta con conseguente abbassamento della sensibilit 54 Messa in funzione 6 2 6 Collegamento della sonda di dialisi 6 2 6 1 Montaggio della membrana di dialisi nella sonda di dialisi Prima di ogni misurazione online per i bioprocessi che richiedono condizioni di sterilit si deve incorporare una nuova membrana di dialisi come mostrato nella figura 37 Se questa condizione non viene rispettata una mancanza di sterilit rischia di compromettere l intero processo di coltura Parte inferiore della sonda di dialisi Membrana a sandwich Montatura OP Viti M3 D OP ua verso la montatura Figura 37 Sostituzione della membrana nella sonda di dialisi per l applicazione glucosio lattato Messa in funzione 55 56 Messa in funzione La nuova membrana di dialisi
37. deve essere posizionata in modo corretto e la montatura per sonda deve essere serrata con due viti si vedano le figure 38 fino a 40 F Figura 38 Inserimento della Figura 39 Montaggio della membrana montatura per sonda Figura 40 Avvitamento delle 2 viti Si deve fare particolare attenzione al corretto posizionamento della membrana nella sonda di dialisi Il lato bianco della membrana deve essere posto in direzione della sonda di dialisi a contatto con il tampone Il lato argentato della membrana rivolto verso la montatura per sonda a contatto con il mezzo Se la membrana inserita in modo sghembo si pu verificare una perdita di ermeticit nella testa della sonda di dialisi e compromettere la sterilit dell intero processo di coltura Messa in funzione 57 58 Messa in funzione 6 2 6 2 Installazione della sonda di dialisi nel bioreattore Prima del montaggio nel fermentatore inserire il disco scorrevole e l O ring figura 41 Si Figura 41 Inserimento del disco scorrevole e dell O ring 6 2 6 3 Sterilizzazione della sonda di dialisi prima del collegamento al BioPAT Trace Prima di collegare la sonda di dialisi al BioPAT Trace si deve sterilizzare la sonda insieme al bioreattore Collegare la sonda di dialisi con il set di tubi come mostrato nella figura 42 Le linee in entrata e uscita della sonda sono contrassegnate sui lati con de
38. di tubi e l applicazione impostata non sono Impostare l applicazione compatibili per es set di tubi Dialisi mentre correttamente sull apparecchio impostato Filtrazione 6 Schiacciatura di un tubo per es avvitando il Eliminare la schiacciatura coperchio sulle bottiglie di soluzione standard 7 Set di tubi ostruito se il tampone rimane Eliminare l ostruzione oppure per lungo tempo nel set di tubi i sali si se non possibile usare un cristallizzano Queste cristallizzazioni si nuovo set di tubi formano per lo pi nei tubi in silicone Un altro tipo di ostruzione pu essere causata dalla crescita microbica 8 Perdita i tubi possono staccarsi se l ostruzione Eliminare la perdita oppure se non viene eliminata non possibile usare un nuovo set di tubi 9 Il sensore non ha contatto se il sensore non Smontare e rimontare il sensore inserito correttamente il retro del sensore non correttamente ha un contatto elettrico con la sede del sensore 122 Aiuto in caso di guasti Causa possibile Rimedi 10 La membrana di dialisi stata posizionata nella Installare correttamente la sonda in modo scorretto solo per l applicazione nuova membrana nella sonda DIALISI Ti Il rubinetto a 3 vie non stato regolato in modo Mettere il rubinetto a 3 vie corretto solo per l applicazione DIALISI stato nella posizione corretta misurato un campione esterno e il rubinetto a 3 vie non st
39. e della membrana in polipropilene 68 6 2 7 5 Controllo dell ermeticit LL 68 6 2 7 6 Utilizzo del set di idrofilizzazione 69 6 2 7 6 1 Descrizione della struttura 70 6 2 7 6 2 Esecuzione dell idrofilizzazione 70 6 2 7 6 3 Esecuzione del controllo dell ermeticit 72 6 2 7 6 4 Esecuzione della rigenerazione della sonda di filtrazione dopo la fermentazione 73 6 2 7 7 Montaggio nel bioreattore LL LL 74 6 2 7 8 Sterilizzazione in linea della sonda di filtrazione 75 6 2 7 9 Connessione della sonda di filtrazione al set di tubi 76 6 3 Caricamento del software e collegamento in rete 77 6 3 1 Risoluzione dei problemi LL 80 64 Installazione del Software PE iii 81 6 5 Modifica delle impostazioni di avvio LL 81 6 6 Assegnazione delle uscite analogiche 82 6 7 Messa in funzione dell apparecchio LL 83 6 8 Messa FUORISENVIZIO sepi piscia edi nie 84 7 FUNZIONIMENTO ria ra ila 85 Ai Barra del Menu dia ARIA E 92 7 1 1 Voce d menu FINE ieri 92 7 1 2 Voce di menu Apparecchio 93 742 1 CONNESSIONE gt irta ea si 93 7 122 Messa in funzione pe 95 TAZI ANESTO crociera a e E 95 7 1 3 Voce di menu Visualizza 97 7 1 3 1 Modifica della visualizzazione 99 7 1 4 Voce di menu Impostazioni LL 101 TAIA TVParamettis orsi ea ala 102 7 1 4 2 Impostazioni base LL 106 TAAS Lingua sera ee
40. e la contaminazione da proteine della membrana pompare una soluzione basica debole per es 0 5 N NaOH nel circuito nel senso della filtrazione attraverso la sonda di filtrazio ne la durata del ciclo di pulizia di circa 4 ore A questo proposito si pu usare lo stesso dispositivo come per l idrofilizzazione Messa in funzione 73 74 Messa in funzione Al termine dell operazione di pulizia riempire il cilindro con acqua demineralizzata e lavare a fondo la sonda di filtrazione con il set di idrofilizzazione in modo da togliere i resti della soluzione basica Per mantenere l idrofilizzazione della membrana la sonda deve essere conservata in una soluzione di idrofilizzazione isopropanolo al 70 fino all utilizzo successivo Se la portata del filtrato della sonda di filtrazione non dovesse essere sufficiente nonostante un lavaggio intensivo con una soluzione basica si deve sostituire la membrana compresa la boccola in PTFE necessaria 6 2 7 7 Montaggio nel bioreattore Ogni volta prima di montare la sonda di filtrazione nel raccordo di prelievo del bioreattore si deve controllare che tutte le connessioni siano fisse se necessario serrarle Allo stesso modo controllare l integrit dell O ring della sonda di filtrazione e se necessario sostituirlo Selezionare sul bioreattore un raccordo che permetta di posizionare la sonda in un area possibilmente di forte turbolenza Una velocit di flusso possibilmente elevata n
41. e le guarnizioni non sono integre Si consiglia di conservare la membrana nella soluzione di idrofilizzazione isopropanolo al 70 per mantenerla idrofila fino al momento del mon taggio nel bioreattore Poco prima di procedere al montaggio nel bioreattore si dovrebbe sostituire l isopropanolo con acqua per evitare l evaporazione e la perdita dell idrofilizzazione 6 2 7 6 Utilizzo del set di idrofilizzazione Il set di idrofilizzazione un mezzo di aiuto per la messa in funzione della sonda di filtrazione Pu essere ordinato come opzione La membrana in polipropilene che viene usata per la sonda di filtrazione impermeabile ai mezzi liquidi idrofoba Per questo motivo la membrana deve essere idrofilizzata prima di ogni utilizzo in una soluzione di isopropanolo al 70 L uso del set di idrofilizzazione e del BioPAT Trace facilita la procedura di idrofilizzazione Messa in funzione 69 Figura 54 Set di idrofilizzazione con scatola della pompa e Figura 55 Struttura e collega mento del set di idrofilizzazione Messa in funzione 6 2 7 6 1 Descrizione della struttura Il set di idrofilizzazione costituito da una scatola della pompa da cui si dipartono due tubi in PTFE Sull estremit di un tubo si trova un raccordo UNF con boccola da collegare alla sonda e l altra estremit senza raccordo vedi figura 54 6 2 7 6 2 Esecuzione dell idrofilizzazione Dopo il montaggio nella sonda di fil
42. ega l analisi di diffusione dei fluidi Vista frontale di BioPAT Trace con i seguenti componenti Vista laterale di BioPAT Trace con i seguenti componenti Vista posteriore di BioPAT Trace con i seguenti componenti Principio di alimentazione del campione mediante la sonda di dialisi sul BioPAT Trace E Schema di flusso del metodo di dialisi online Schema di flusso del metodo di filtrazione online Cella di misura con linea di lavaggio Struttura schematica e fissaggio del modulo di diffusione Principio di funzionamento della sonda di dialisi Sonda di filtrazione per il prelievo sterile dei campioni dai DIOFCALtOlri c irrita Reattore senzimatico AOD asie pira Vista di un set di tubi per il modo operativo Filtrazione Vista del lato frontale con tutti i tubi installati per il modo operativo Filtrazione vi iii na Tensione e allineamento della coppia di tubi nella piastra di guida Posizionamento dei tubi delle valvole sull apparecchio Tensione e inserimento della coppia di tubi Tensione e inserimento della coppia di tubi Fissaggio dei tubi delle valvole spingendo assieme le piastre UEGUIdA zizi cirie een tali ia RE ci Inserimento della scatola della pompa inferiore P2 e della scatola della pompa superiore P1 Inserimento della scatola della pompa inferiore P2 e della scatola della pompa
43. el set di tubi Ciascun set di tubi costituito dai componenti necessari per l analisi scatole delle pompe tubi delle valvole camera di misura modulo di diffusione contagocce e linee di collegamento per tamponi standard contenitore per scarti e la sonda di campionamento filtrazione dialisi Le linee per tamponi standard sonda di campiona mento e scarti sono premontate e confezionate in buste di plastica Si consiglia di aprirle solo dopo il montaggio del set di tubi sull apparecchio per facilitarne l uso 42 Messa in funzione Figura 17 Vista di un set di tubi per il modo operativo Filtrazione Il set di tubi Dialisi contiene anche una siringa monouso con un rubinetto a 3 vie per l analisi di campioni esterni Prima del montaggio togliere le due scatole vuote sui posti di inserimento delle pompe Le scatole vuote possono essere riutilizzate per proteggere le assi del motore durante il trasporto Per ogni allacciamento si devono usare i set di tubi originali confezionati segmenti di tubo non devono essere n schiacciati n piegati affinch le soluzioni possano scorrere senza impedimento Fare attenzione che i tubi della valvola siano installati perfettamente nella valvola a manicotto per permettere un apertura e chiusura senza problemi dei tubi Messa in funzione 43 44 Le linee di alimentazione e di scarico del set di tubi sono confezionate in buste
44. ell area della superficie filtrante provoca un prolungamento della durata utile della sonda di filtrazione effetto Crossflow Fare assolutamente attenzione che la sonda una volta montata non venga a contatto con le parti mobili per es agitatore asta di agitazione all interno del bioreattore La membrana in polipropilene deve essere sempre completamente immersa nel liquido durante il fun zionamento del bioreattore Altrimenti ci potrebbe essere una forte riduzione della portata del filtrato Una pressione idrostatica elevata sul punto di prelie vo pu migliorare la prestazione dell unit filtrante La sonda di filtrazione deve essere sempre montata solo poco prima del riempimento del bioreattore poich una disidratazione della membrana comporta una perdita delle propriet idrofile 6 2 7 8 Sterilizzazione in linea della sonda di filtrazione Una volta montata la sonda di filtrazione viene chiusa con un tappo cieco e poi sterilizzata insieme al bioreattore Durante l intera operazione la sonda deve essere coperta completamente con il liquido Terminata la sterilizzazione e dopo che il bioreattore ha raggiunto la temperatura di esercizio di max 40 C si deve aprire l uscita del filtrato e la sonda di filtrazione viene collegata al BioPAT Trace mediante un set di tubi per il prelievo di campione Messa in funzione 75 76 Messa in funzione 6 2 7 9 Connessione della sonda di filtrazione al set di tub
45. erali figura 30 Fare attenzione che il modulo di diffusione sia orientato correttamente con la freccia rivolta verso l alto Figura 30 Fissaggio del modulo di diffusione sulla guida di fissaggio Dopodich inserire i due contagocce nei supporti previsti a tale scopo figura 31 Figura 31 Inserimento dei contagocce nel supporto 50 Messa in funzione 6 2 4 Montaggio del set di tubi per il modo operativo Dialisi La procedura di installazione del set di tubi Dialisi la stessa che per il set di tubi Filtrazione Informazione aggiuntiva Il set di tubi Dialisi contiene anche una siringa monouso con un rubinetto a 3 vie per l analisi di campioni esterni Se si desidera usare questa opzione si deve montare il rubinetto a 3 vie tra l attacco con la marcatura verde e la linea per lo standard di calibrazione 1 vedi figura 32 e 33 1 m_e f Figura 32 Collocazione del Figura 33 Rubinetto a 3 vie rubinetto a 3 vie e siringa montati Messa in funzione 51 52 Messa in funzione 6 2 5 Collegamento e smontaggio del reattore enzimatico Nel modo operativo Metanolo Etanolo necessario un reattore enzimatico con alcol ossidasi immobiliz zato per la trasformazione enzimatica degli analiti Dato che l enzima termosensibile e non pu essere conservato asciutto il reattore viene fornito separato dal set di tubi Il reattore enzimatico deve essere montato nel set di tubi pr
46. eview of file C Users Dan Kopec ARL11004 V7 Desktop Trace Runs 12_06_9231 ptd 6 12 2012729 102 16 025 74 000003 828 000001 663 6 12 2012223104 161025 771000003 8172000001 672 Figura 88 Importazione dati del file ptd in Excel assistente per conversione testo fase 1 Consigli e lista di controllo 113 114 Consigli e lista di controllo 6 Assistente per conversione testo fase 2 In questa fase selezionare il separatore punto e virgola marcatura arancione e confermare premendo il tasto Avanti marcatura rossa CEE O ooo Lo i This screen lets you set the delimiters your data contains You can see how your text is affected in the preview below Figura 89 Importazione dati del file ptd in Excel assistente per conversione testo fase 2 7 Assistente per conversione testo fase 3 In questa fase selezionare l opzione Ulteriori marcatura arancione Textimpori Wizard Step30t3 T O __ VES This screen lets you select each column and set the Data Format Column data format General Generar comverts numeri values to numbers date values to dates and all remaining Iot 7 Volvesto tot Dote moy j Do not pnport column skap ea i Figura 90 Importazione dati del file ptd in Excel assistente per conversione testo fase 3 Qui si possono selezionare Ulteriori impostazioni per importazione testo Impostare il punto come separatore decimale e uno spazio come separ
47. evisto a tale scopo L installazione dovrebbe essere eseguita solo immediatamente prima della messa in funzione essendo le condizioni di conservazione a 4 8 C Prima di montare il reattore il set di tubi nel BioPAT Trace deve essere installato e riempito con tampone Una messa in funzione a secco comporta una riduzione della capacit del reattore e pertanto dovrebbe essere assolutamente evitata Avviare innanzitutto l operazione di riempimento del set di tubi vedi capitolo 7 figura 64 Attivando la visualizzazione dello stato vedi capitolo 7 1 3 si pu seguire sul display la progressione del riempimento Prima e durante le premisurazioni si deve arrestare l apparecchio per poter montare il reattore Arrestare l apparecchio con Arresto vedi capitolo 7 1 2 3 Se nel reattore enzimatico penetra dell aria si corre il rischio che la sua capacit venga ridotta con conseguente abbassamento della sensibilit Per il montaggio il reattore enzimatico viene tolto dal contenitore di trasporto e vengono aperti i cappucci di chiusura rossi Poi viene montato nel posto previsto nel set di tubi vedi figure 34 36 Dopo aver montato il reattore enzimatico riavviare l apparecchio con Messa in funzione vedi capitolo 7 1 2 2 Selezionare Nuovo set di tubi e avviare una nuova operazione di riempimento con il reattore enzimatico Li Figura 34 Collocazione Figura 35 Fissaggio del
48. giato Messa in funzione Figura 26 Posizione corretta della scatola della pompa perno di fissaggio innestato Verificare che le scatole delle pompe siano posizionate correttamente figura 26 Una volta che il pannello frontale dell apparecchio stato equipaggiato con le pompe e le valvole installare sul pannello laterale il sensore le camere di gocciolamento e il modulo di diffusione La figura 27 mostra il pannello laterale con tutti gli elementi installati Inserire per prima la cella di misura nella sede dell amplificatore di misura figura 28 Per fare questo svitare il dado zigrinato sulla piastra di tenuta superiore in modo da poterla spostare verso l alto Poi inserire l angolo inferiore della cella di misura nell incavo del bordo inferiore della sede figura 28 Figura 28 Applicazione della cella di misura sull apparecchio Ribaltare la cella di misura verso l alto nelle spine di contatto Allo stesso tempo spingere un po verso l alto la piastra di tenuta superiore Premere la cella di misura nella sede e spingere la piastra di tenuta verso il basso figura 29 Serrare il dado zigrinato per fissare la cella di misura all apparecchio Figura 29 Fissaggio della cella di misura sull apparecchio Messa in funzione 49 Poi fissare gli altri elementi all apparecchio Fissare il modulo di diffusione sulla guida di fissaggio per mezzo delle fessure di tenuta lat
49. gono visualizzati dopo un certo tempo e si pu selezionare l apparecchio desiderato e poi premere OK Se il programma non trova alcun apparecchio appare un messaggio di errore Provare quindi a inserire direttamente l indirizzo IP oppure rivolgersi al proprio amministratore di rete 7 1 2 2 Messa in funzione Se il set di tubi viene sostituito si deve richiamare l opzione Messa in funzione L opzione Messa in funzione disattiva i dati di calibrazione e di riferimento finora usati ed esige un nuovo priming del sistema di tubi 7 1 2 3 Arresto L opzione Arresto serve a mettere provvisoriamente il sistema fuori servizio per es in caso di interruzioni del bioprocesso da controllare in caso di brevi interruzioni del funzionamento oppure per connettere i reattori enzimatici vedi capitolo 6 2 5 pagina 52 Premendo l opzione Arresto si interrompe il modo di misura e lo stato di pronto Tutte le pompe vengono arrestate e le valvole disattivate In questo caso l apparecchio conserva i dati memorizzati per i valori di calibrazione e di riferimento Funzionamento 95 96 Premendo il tasto Arresto il BioPAT Trace passa nello stato di arresto Ora si pu chiudere il programma L apparecchio stesso pu essere spento con l interruttore di rete senza perdita di dati Accendendo di nuovo l apparecchio o riavviando il programma di comando appare la finestra di query mostrata nella figura 75 Continuare la misurazi
50. i La sonda di filtrazione viene collegata al set di tubi Filtrazione degli analizzatori online Per collegare la sonda di filtrazione al set di tubi dell analizzatore online BioPAT Trace disponibile come accessorio una linea adattatore Luer UNF Questa deve essere montata come mostrato nelle figure 57 e 58 tra la sonda attacco UNP e il set di tubi di BioPAT Trace attacco Luer uu H Yyyy Uiig Figura 57 Sonda di filtrazione con set di tubi Figura 58 Connessione del set di tubi 6 3 Caricamento del software e collegamento in rete Il BioPAT Trace viene comandato internamente da un computer e pu funzionare come utente completo in reti aziendali reti locali o in connessione diretta con un PC A questo scopo si deve installare il software fornito sul PC che s intende usare file necessari per l installazione del software operativo trace_mon sono archiviati nella memoria dati dell apparecchio e sono accessibili mediante una pagina web interna all apparecchio Per l installazione procedere nel seguente modo Collegare il BioPAT Trace alla propria rete e richiamare nel proprio browser l indirizzo IP di default 192 168 120 231 Si ha la possibilit di scaricare file importanti e il manuale d uso sul proprio computer nonch assegnare all apparecchio un indirizzo IP adatto alla propria rete Se non si vuole eseguire alcuna modifica per es per una connessione diretta con
51. i colori dei punti nonch le scale dell asse figura 79 I valori del glucosio sono rappresentati di default in blu mentre quelli del lattato in rosso Per il metanolo o l etanolo preimpostato un punto verde Mie Apparecchio Onpiay impostazioni informazioni 1 997 1 374 1230 1096 1248 1248 1260 1295 1200 1208 IXI 1R16 1920 1925 t330 1806 194 thes 1246 1088 on Modari di Promo Figura 79 Schermata per l adattamento della visualizzazione dei valori di misura Funzionamento 99 100 Funzionamento Durante il funzionamento si pu modificare in ogni momento la visualizzazione dei valori di misura Premendo il tasto destro del mouse appare il campo di inserimento per la modifica della visualizzazione figura 80 Si possono selezionare le seguenti opzioni Spostamento del grafico tenere premuto il tasto destro del mouse e trascinare Zoom tirare la finestra dall angolo superiore destro verso l angolo inferiore sinistro tenere premuto il tasto sinistro del mouse Ritorno alla visualizzazione di partenza tirare la finestra dall angolo inferiore sinistro verso l angolo superiore destro tenere premuto il tasto sinistro del mouse sn LA 3 iE o a 19371 1374 s rosotoste il ocossessto N2SO ISS 1248 t2AS 1240 1295 1200 T20S TAIP 1216 1929 1925 t230 1935 1O00 tIAS 1330 1345 cm Mocait Gi Proeto Figura 80 Visualizzazione dell andamento del valore di misura
52. icrofiltrazione a forma di tubo in polipropilene che viene posizionata all interno del bioreattore per mezzo di una sonda in linea serve da barriera sterile La sterilizzazione della sonda di filtrazione avviene insieme al bioreattore La sonda di campionamento viene installata nel raccordo del bioreattore in conformit allo standard INGOLD METTLER TOLEDO foro del coperchio da 12 e 19 mm e foro laterale da 25 mm Il filtrato sterile viene prelevato in modo continuo o discontinuo sulla testa della sonda che accessibile all esterno del bioreattore fermentatore Per trasferire il filtrato si collega la sonda al set di tubi di filtrazione La figura seguente 46 mostra la sonda di filtrazione per il montaggio nel foro del coperchio da 12 mm nonch il rubinetto di chiusura per il montaggio nel foro laterale da 25 mm Figura 46 Sonde di filtrazione di 12 mm e 25 mm Durante il montaggio e l uso della sonda di filtrazione osservare assolutamente il manuale fornito L idrofilizzazione della membrana in polipropilene l installazione nel bioreattore il controllo di ermeticit la sterilizzazione in linea e la pulizia della sonda di filtrazione devono essere eseguiti necessariamente secondo le procedure descritte Messa in funzione 63 6 2 7 1 Descrizione del dispositivo La sonda di filtrazione da montare in un foro del coperchio da 12 mm costituita da un unit filtrante 1 con supp
53. il nuovo indirizzo IP nella casella indicata a nella figura 61 sottostante 5 Confermare la modifica con Applica e poi con OK Figura 61 Impostazioni di avvio Messa in funzione 81 N Analog Figura 62 Uscite analogiche 82 Messa in funzione 6 6 Assegnazione delle uscite analogiche valori di misura ottenuti sono disponibili sui connettori femmina Analog 1 canale di misura 1 glucosio e Analog 2 canale di misura 2 lattato per un ulteriore utilizzo come segnali analogici Utilizzando il metodo Etanolo Metanolo viene emesso il segnale Analog 1 L uscita Analog 3 non assegnata 1 1 0 2 10V 2 1 0 2 10V 1 2 GND 2 2 GND 1 3 0 4 20mA 2 3 0 4 20mA Nel menu Parametri 7 1 4 1 il formato di uscita viene commutato tra 0 10Ve2 10Ve tra 0 20 mA e 4 20 mA Qui vengono anche impostati i campi di uscita delle uscite analogiche I campi di uscita delle uscite analogiche possono essere impostati come descritto nel capitolo 7 1 4 1 Parametri a pagina 102 Il segnale sull uscita analogica cambia ogni volta che c un nuovo valore di misura e rimane invariato fino a che a si presenta un nuovo valore di misura b l apparecchio viene riavviato c la voce Nuovo set di tubi viene attivata 6 7 Messa in funzione dell apparecchio Prima di ogni messa in funzione si dovrebbe controllare il BioPAT Trace per verificare che tutti i moduli sull apparecchio siano pronti a funzi
54. ile costanti si pu avviare la misurazione di riferimento Dopo la referenziazione si deve ancora attendere alcune misurazioni e controllare poi se i valori calcolati ex novo corrispondano alle proprie attese Eventualmente la referenziazione pu essere anche ripetuta Se il risultato corrisponde alle aspettative si possono modificare nuovamente i parametri e iniziare con la coltura 8 3 Modo Dialisi referenziazione con concentrazioni basse di lattato In molti casi all inizio della coltura il glucosio in eccedenza e il mezzo non contiene ancora del lattato Durante una referenziazione il BioPAT Trace propone dopo la misurazione di riferimento un valore che in genere viene sovrascritto inserendo un valore noto che si conosce dalla composizione del mezzo o che stato determinato con un analizzatore esterno Se la concentrazione del lattato ancora molto bassa non sovrascrivere ancora questo valore il fattore del lattato rimane quindi a 1 0 Col procedere della coltura si pu meglio osservare l aumento della concentrazione del lattato e al momento opportuno si pu eseguire una referenzia zione normale durante la quale entrambi i valori vengono sovrascritti 8 4 Esclusione delle contaminazioni nel set di tubi Per i processi che durano a lungo settimane si pu formare nel tempo un biofilm nel set di tubi Questa biopellicola pu causare l ostruzione delle linee o comportare forti oscillazioni dei valori di mis
55. imento Riferimento fr vengono visualizzati Funzionamento 97 tto a0 0 001 za 352 al 10E10 6682 77 5 Rfermento fr ronson 1 000000000 Reitti ermont w ol Figura 77 Schermata dei valori di calibrazione attuali 98 Funzionamento Se si attiva l opzione Resetta riferimenti i fattori di riferimento vengono resettati sul fattore 1 0 solo nel modo Dialisi Selezionando l opzione Stato nel margine inferiore del display appare una barra info ripartita in tre campi che fornisce ulteriori informazioni sullo stato attuale vedi figura 78 Questa funzione interessante soprattutto in caso di lunghi intervalli o di misurazioni raggruppate Nel campo 1 visualizzato il numero delle misurazioni raggruppate o delle premisurazioni Nel campo 2 un contatore temporale conta il tempo alla rovescia fino alla fine dell azione attuale in secondi Nel campo 3 visualizzato il tempo rimanente nell intervallo del periodo di misura in secondi MEA nan a 1 893 0 505 Modalta a Pronto IRIZ MESI MEM IEIS SEI RIT ESP SEIP 1820 1821 1622 162 1820 1825 1026 1627 1028 dra inpo 10 Contatare terporie 145 Intera 145 La mevazone n orepzazene Figura 78 Schermata della riga di stato 7 1 3 1 Modifica della visualizzazione Con l opzione Modifica visualizzazione si pu modificare la rappresentazione del diagramma Questa opzione permette di impostare la grandezza e
56. io da 12 mm M26x1 con O ring BB 8848630 Adattatore 19 12 mm per il montaggio della sonda di dialisi e filtrazione nel foro del coperchio da 12 mm RD28x1 8 BB 34104704 O ring interno per adattatore RD28x1 8 BB 39120830 O ring esterno per adattatore RD28x1 8 Tabella 4 Accessori per sonde di campionamento 4 5 Accessori per il BioPAT Trace BB 39121054 Descrizione Codice d ordine Colonnina BPT0012 Morsetto della colonnina BPT0013 Dado zigrinato di ricambio per cella di misura BPT0026 Alimentatore BPT0027 Cavo di rete EU UK USA BPT0028 Tabella 5 Accessori per il BioPAT Trace 24 Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo 5 Struttura e funzionalit 5 1 Struttura dell apparecchio Il BioPAT Trace un analizzatore online contenuto in un compatto alloggiamento di metallo La comunicazione con l utente avviene per mezzo di un computer esterno Il pannello frontale e i pannelli laterali sono equipaggiati con gli elementi del set di tubi preassemblati per l analisi come mostrato nelle figura 6 e 7 Gli elementi attuatori e sensori si trovano sull esterno dell alloggiamento Per mezzo di una pompa 1 b viene trasferita la soluzione standard o del campione nell analizzatore Una delle valvole a manicotto 3 permette di selezionare le soluzioni da trasferire Il flusso del tampone viene trasportato per mezzo della pompa superiore 1 a Grazie ad un filtro an
57. ione b 6 3 1 Connessione via Ethernet a pagina 80 Nella barra di menu si possono selezionare i seguenti punti File Apparecchio Visualizza Impostazioni e Informazioni Funzionamento 85 I valori di glucosio e lattato vengono riportati nel centro della finestra di misura in funzione del tempo valori di glucosio vengono rappresentati con punti blu e i valori di lattato con punti rossi Sotto la finestra di misura viene visualizzato lo stato Figura 64 Avvio automatico dell apparecchio All inizio l apparecchio si trova nella modalit di funzionamento di base A destra accanto alla finestra di misura si trova la zona dei tasti di selezione contestuali Dopo un riavvio dell apparecchio si deve dapprima riempire completamente il set di tubi ed effettuare qualche premisurazione in modo che il sistema sensore sia stabile prima di iniziare la calibrazione Questa procedura chiamata priming comprende oltre al riempimento e alle premisurazioni anche una calibrazione iniziale del sistema Dopo il priming l apparecchio passa allo stato di Pronto L intera procedura richiede 40 fino a 60 minuti a seconda del metodo misura scelto Vi tuttavia anche la possibilit che il BioPAT Trace inizi automaticamente le misurazioni subito dopo il priming Affinch l avvio sia automatico barrare la casella di selezione Avvio autom figura 64 L apparecchio avvia quindi automaticamente la misurazione dopo la calibrazione i
58. ione sonda di campionamento ostruita e o tubo della valvola non inserito correttamente Nessuna connessione con Trace mon Indirizzo IP non impostato correttamente PC indirizzo IP non assegnato automaticamente Cavo di rete sbagliato o difettoso L apparecchio esegue il boot ma il programma non si avvia La pompa non gira Togliere la scatola della pompa e pulire l albero motore Tendere bene il tubo della pompa Nessun flusso Tampone di trasferimento vuoto Standard di calibrazione vuoto Sonda di filtrazione bloccata Filtro ostruito Set di tubi ostruito Perdita nel set di tubi Tabella 8 Descrizione e risoluzione dei problemi di BioPAT Trace Aiuto in caso di guasti 121 Messaggio di errore Calibrazione non riuscita Causa possibile Rimedi 1 Il tampone di trasferimento vuoto c Collegare un nuovo tampone abbastanza tampone di trasferimento nel di trasferimento e riempire il recipiente di stoccaggio Il tubo di aspirazione set di tubi ancora nel recipiente di stoccaggio Il tampone sgocciola nel contagocce 2 Una soluzione di calibrazione vuota Collegare la nuova soluzione di calibrazione 3 tubi in silicone non sono inseriti correttamente Verificare il posizionamento nelle valvole dei tubi delle valvole ed eventualmente correggerlo 4 C una bolla d aria nella camera di misura Eliminare la bolla d aria con una siringa attraverso la linea di lavaggio 5 Il set
59. ione di boot il nuovo indirizzo IP ora 192 168 120 232 Richiamare ora nel proprio browser web il nuovo indirizzo IP 192 168 120 232 Una volta che stata instaurata la connessione in questo modo si pu impostare l indirizzo di rete nel proprio browser web come descritto sopra 6 4 Installazione del software PC Per installare il software operativo sul proprio computer eseguire il file setup_tracemon Appare la richiesta di inserire il nuovo indirizzo IP A questo scopo sovrascrivere l indirizzo IP di default proposto con il nuovo Se l indirizzo IP non stato modificato confermare con Avanti Durante l installazione viene richiesto di definire dove il programma e i dati di misura successivi devono essere memorizzati Poi il software avvia l apparecchio con l indirizzo IP indicato e si connette automatica mente al BioPAT Trace 6 5 Modifica delle impostazioni di avvio Se l indirizzo IP stato modificato in un momento successivo si dovrebbe quindi attualizzare anche le impostazioni di avvio nel collegamento programma dell icone di avvio affinch l apparecchio possa continuare a essere connesso automaticamente Procedere nel seguente modo 1 Dalla schermata attuale passare a quella del desktop 2 Cliccare con il tasto destro del mouse sull icona Iraca mon sue Shorter di avvio Target tipo Fepiostion gi mM an Targa ecazan nce v1 0 10 3 Selezionare l opzione Propriet et A 4 Inserire
60. ire una nuova misurazione di un campione esterno Prima di continuare a lavorare verificare che il rubinetto a 3 vie sia stato rimesso nella posizione iniziale una volta che il campione esterno stato prelevato vedi figura 69 al fine di misurare correttamente lo standard 1 durante la calibrazione successiva A Assicurarsi che il rubinetto a tre vie sia regolato come illustrato Altrimenti tutte le calibrazioni successive e i valori di misura risultanti saranno erronei Funzionamento 91 92 Funzionamento 7 1 Barra del menu 7 1 1 Voce di menu File Dialisi Apparecchio Display Impostazioni Informazioni Figura 70 Opzioni di menu File dati di misura vengono registrati nel formato di testo in un file ptd e sono archiviati di default in una sottocartella Dati Se si vuole creare un nuovo file selezionare l opzione di menu Nuovo Se si vogliono caricare e visualizzare i dati di misura di un file pi vecchio si deve selezionare l opzione di menu Apri file memorizzati possono essere elaborati ulterior mente in modo semplice per es in Excel Per informa zioni sull importazione sotto forma di file Excel vedi capitolo 8 5 7 1 2 Voce di menu Apparecchio Display Impostazioni Informazio Connetti Messa in funzione Arresta oa RA ARR ARA T SPA III Figura 71 Opzioni di menu Apparecchio Sono disponibili tre opzioni di menu
61. istente per conversione testo fase 1 Importazione dati del file ptd in Excel assistente per conversione testo fase 2 Importazione dati del file ptd in Excel assistente per conversione testo fase 3 Importazione dati del file ptd in Excel Ulteriori impostazioni per importazione testo 9 Indice delle tabelle Tabella 1 Equipaggiamento fornito per il BioPAT Trace Tabella 2 Materiali di consumo per il BioPAT Trace Tabella 3 Sonde di campionamento per il BioPAT Trace Tabella 4 Accessori per sonde di campionamento sssesserensru Tabella 5 Accessori per il BioPAT Trace Tabella 6 Messaggi di stato dei LED Tabella 7 Lista di controllo per la messa in funzione Tabella 8 Descrizione e risoluzione dei problemi di BioPAT Trace Tabella 9 Errori di calibrazione e rimedi Tabella 10 SCHEAA tECNICa sosia Spiegazione dei simboli o Segnalazione di informazioni utili e consigli di utilizzo Attenzione possibili danni collaterali Attenzione sostanze nocive alla salute o irritanti A Attenzione tensione elettrica pericolosa 10 Indice 1 Introduzione Il BioPAT Trace un analizzatore online a 2 canali destinato alla misurazione del glucosio e del L lattato Pu essere utilizzato sia nei pro
62. lla membrana in polipropilene Le membrane in polipropilene nuove sono impermeabili per i mezzi liquidi idrofobe Pertanto la membrana deve essere idrofilizzata dopo che stata inserita nella sonda di filtrazione Come soluzione di idrofilizzazione si pu usare isopropanolo al 70 vol vol La sonda viene immersa in un cilindro con piede d appoggio di lunghezza sufficiente e contenen te la soluzione di idrofilizzazione in modo che la membrana si trovi completamente nel liquido Per mezzo di una pompa peristaltica che viene collegata all uscita del campione della sonda viene pompato l alcol in circolo attraverso la sonda con una portata di 1 2 ml min La durata dell idrofilizzazione di almeno 2 ore Se non viene utilizzata una pompa la sonda pu anche essere idrofilizzata lasciandola per una notte in isopropanolo al 70 vol vol 6 2 7 5 Controllo dell ermeticit Una volta terminata l idrofilizzazione viene eseguito un test di ermeticit A questo scopo si usa il dispositivo per l idrofilizzazione descritto al paragrafo 6 2 7 6 2 Invece di far assorbire l isopropanolo dalla membrana della sonda ora viene pompata aria nella sonda La portata dovrebbe essere la stessa come per l idrofilizzazione precedente Dalla membrana dovrebbero uscire protratte nel tempo molte bollicine d aria altrimenti la membrana non idrofilizzata a sufficienza Se dai raccordi escono delle bolle d aria grandi pu significare ch
63. lle frecce Le marcature sul set di tubi indicano la stessa direzione Figura 42 Riempimento della Figura 43 Chiusura della sonda sonda con la soluzione tampone prima della sterilizzazione a b e f Prima di eseguire la sterilizzazione riempire la sonda di dialisi con la soluzione tampone usando la siringa monouso fornita e l adattatore Luer UNF figura 42 Contemporaneamente si pu controllare l ermeticit della sonda Per la sterilizzazione chiudere la sonda collegando i raccordi Luer figura 43 In questo modo si evita che sulla membrana nella sonda di dialisi si generi una sovrapressione da un solo lato che potrebbe danneggiare la membrana Sterilizzare ora il bioreattore Dopo la sterilizzazione dopo la fase di raffredda mento aprire di nuovo il raccordo Luer Riempire di nuovo la sonda con la soluzione tampone usando la siringa monouso e verificare con cautela se il liquido scorre liberamente vedi figura 42 Ora si pu collegare la sonda di dialisi al set di tubi corrispondente dell analizzatore online Messa in funzione 59 60 6 2 6 4 Connessione della sonda di dialisi al set di tubi La sonda di dialisi viene collegata al set di tubi Dialisi degli analizzatori online Le linee in entrata e uscita della sonda sono contrassegnate sui lati con delle frecce Le marcature sul set di tubi indicano la stessa direzione si vedano le figure sottostanti 44 e 45
64. lore di misura lattato lt 3 per 2 5 g l Campo di pH del mezzo 4 8 9 2 Durata dell elettrodo enzimatico 30 giorni o 5000 analisi Temperatura ambiente 15 35 C Umidit dell aria ambiente 10 90 Interfacce RS 232 Ethernet PC per il comando Sistema operativo Windows XP Windows 7 Uscita analogica 0 10 V 0 20 mA 4 20 mA Tensione d ingresso 100 120 220 240 V 50 60 Hz Dimensioni in mm LxAxP 120x 170x200 Peso Tabella 10 Scheda tecnica 1 8 kg Appendice 125 Sartorius Stedim Biotech GmbH August Spindler Str 11 37079 Goettingen Germania Telefono 49 551 308 0 Fax 49 551 308 3289 www sartorius stedim com Copyright by Sartorius Stedim Biotech GmbH Goettingen Germania Tutti i diritti riservati La riproduzione o la traduzione della presente pubblicazione o di parti di essa in qualsiasi forma e con qualsiasi metodo non sono consentite salvo previa autorizzazione da parte di Sartorius Stedim Biotech GmbH Le informazioni le specifiche e le illustrazioni contenute in questo manuale sono aggiornate alla data sotto indicata Sartorius Stedim Biotech GmbHsi riserva il diritto di apportare modifiche alla tecnica alla dotazione alle specifiche e alla forma degli apparecchi senza preavviso alcuno Data abril 2013 Sartorius Stedim Biotech GmbH Goettingen Germania Stampato in Germania su carta sbiancata senza cloro W Publication
65. mente correggerli Nel caso in cui si conoscano i valori di concentrazione per es mediante pesatura questi possono essere inseriti direttamente Le concentra zioni nel bioreattore possono essere determinate anche mediante un campione esterno con un analizzatore offline Premere Applica per confermare i valori di misura proposti Se si vogliono eseguire delle modifiche inserire i nuovi valori nel campo di inserimento con punto decimale e confermare con Applica La funzione Annulla permette di interrompere l operazione e ritornare al punto di partenza Fintanto che la finestra di inserimento aperta e non stato inserito e confermato nessun valore di riferimento nuovo il BioPAT Trace continua a funzionare con il fattore di riferimento valido attualmente Nel caso in cui la determinazione della misurazione di riferimento con un analizzatore esterno dura pi a lungo e durante questo tempo si prevede una modifica della concentrazione nel mezzo si dovrebbe attendere la misura di riferimento prima di prelevare un campione per l analisi esterna Se appare la finestra di inserimento per i valori di riferimento significa che l apparecchio ha rilevato la concentra zione attuale misurata e confronter i valori inseriti successivamente con questa concentrazione e determiner il nuovo fattore di riferimento Funzionamento 89 90 Funzionamento Se non disponibile un apparecchio offline per la determinazio
66. menti si corre il rischio di danneggiare l apparecchio Struttura e funzionalit 5 2 Metodi di misura di BioPAT Trace Il BioPAT Trace permette due metodi di campionamento online Filtrazione con sonda di filtrazione Dialisi con sonda di dialisi Il metodo pi semplice rappresentato dalla misura diretta del campione del mezzo da filtrare Tuttavia a causa del consumo del mezzo del reattore il campo applicativo limitato ai processi per i quali il reattore dispone di un volume sufficiente o che ne permettono un alimentazione continua Per i processi per i quali a causa del volume del reattore il campione disponibile non sufficiente possibile eseguire un prelievo mediante dialisi Questo metodo rimuove solo le sostanze di basso peso molecolare dal mezzo del reattore senza diminuire il volume del liquido La figura 9 mostra come esempio una rappresentazione fotografica del collegamento di BioPAT Trace ad un bioreattore mediante una sonda di dialisi Informazioni pi precise relative alle sonde di prelievo si trovano nei capitoli 5 6 Funzione della sonda di dialisi a pagina 37 5 7 Funzione della sonda di filtrazione a pagina 38 Struttura e funzionalit 29 Figura 9 Principio di alimentazione del campione mediante la sonda di dialisi sul BioPAT Trace 30 Struttura e funzionalit 5 2 1 Metodo di misura Dialisi con la sonda di dialisi Con il metodo di misura Di
67. mpo di inserimento per l impostazione dei parametri di misura Periodo di misura Indicare qui l intervallo di misura desiderato Con il valore 1 la misura ha luogo ogni minuto o alla frequenza massima Per eseguire un analisi ogni ora ad esempio si deve inserire 60 La frequenza pu essere modificata in ogni momento e dopo aver premuto OK subito attiva Autocalibrazione Selezione si no Se si permette un autocalibrazione ogni x misurazioni si veda misurazioni tra le calibrazioni ha luogo una calibrazione automatica Calibrazione ritardata Normalmente una calibrazione viene eseguita allo scadere di un determinato numero di misurazioni In caso di intervalli prolungati per es misurazioni ogni 6 ore durante le colture di cellule tra la calibrazione attuale e la misurazione successiva passa un periodo molto lungo Attivando l opzione per la calibrazione ritardata la calibrazione avr luogo prima della misurazione successiva in modo da disporre di un valore di calibrazione attuale Numero di valori di misura per gruppo In caso di intervalli di misura pi lunghi pu essere utile eseguire al momento opportuno pi misurazioni in successione con una frequenza massima Ad esempio si potrebbe eseguire un gruppo di 10 misurazioni ogni 6 ore Il numero dei valori misurati all interno di un gruppo pu essere impostato in questa opzione Non viene calcolato nessun valore medio Ogni valore di misura viene eme
68. nda BPT0040 di dialisi quantit 5 pezzi Membrane etanolo metanolo per la sonda di dialisi quantit BPT0047 5 pezzi Membrana per la sonda di filtrazione lunghezza 130 mm BPT0025 Membrana per la sonda di filtrazione lunghezza 90 mm BPT0037 Tabella 2 Materiali di consumo per il BioPAT Trace 4 3 Sonde di campionamento 4 3 1 Sonda di dialisi fornitura con kit di intervento 2 membrane e manuale d uso Descrizione Codice d ordine Sonda di dialisi lunghezza 132 mm BPT0014 Sonda di dialisi lunghezza 165 mm BPT0015 Sonda di dialisi lunghezza 212 mm BPT0016 Sonda di dialisi lunghezza 232 mm BPT0017 Sonda di dialisi lunghezza 332 mm BPT0018 Sonda di dialisi lunghezza 362 mm BPT0019 Sonda di dialisi lunghezza 432 mm BPT0020 4 3 2 Sonda di dialisi monouso fornitura con manuale d uso Descrizione Codice d ordine Sonda di dialisi monouso ContiTRACE 22 Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo BPT0002 4 3 3 Sonda di filtrazione fornitura con kit di intervento 1 membrana e manuale d uso Descrizione Codice d ordine Sonda di filtrazione per il foro del coperchio da 12 mm con BPT0021 raccordo a morsetto PG13 5 lunghezza della membrana 130 mm Sonda di filtrazione per il foro del coperchio da 12 mm con BPT0022 raccordo a morsetto PG13 5 profondit di montaggio aumentata di 10 cm lunghezza della membrana 130 mm Sonda di filtrazione per il foro
69. nda di dialisi per bioreattori di dimensioni pi piccole poich non ci si pu permettere di perdere del volume durante il prelievo L utilizzo della sonda di dialisi come sistema di campionamento garantisce un analisi a volume costante Struttura e funzionalit 37 5 7 Funzione della sonda di filtrazione Figura 15 Sonda di filtrazione per il prelievo sterile dei campioni dai bioreattori La sonda di prelievo permette di prelevare dai bioreattori campioni di substrato privi di cellule sulla base di una filtrazione figura 15 La sonda idrofilizzata viene fissata all interno del bioreattore e poi sterilizzata con il mezzo Il modulo a membrana della sonda viene posizionato nella zona agitata del bioreattore in prossimit dell agita tore Una membrana tubolare in polipropilene serve da barriera sterile La portata del filtrato al massimo di 2 ml min Dopo il prelievo il campione privo di cellule pu essere trasferito direttamente nel BioPAT Trace per essere analizzato La sonda di filtrazione viene usata quando si dispone di un volume sufficiente nel bioreattore 38 Struttura e funzionalit 5 8 Funzione del reattore enzimatico Il reattore enzimatico richiesto per la misurazione di metanolo ed etanolo figura 16 Nel reattore si trova l enzima immobilizzato alcol ossidasi AOD Qui ha luogo la trasformazione dell alcol corrispondente e la formazione di perossido di idrogeno Il perossido di idr
70. ne dei valori di riferimento si pu misurare direttamente il campione sul BioPAT Trace Selezionare allo scopo la funzione Misurazione e seguire le istruzioni che appaiono nel menu figura 67 tener pronto un valore noto oppure estrarre un campione esterno e collegare mediante il rubinetto a 3 vie Il rubinetto a 3 vie deve essere nella posizione corretta Campione pronto Figura 67 Richiesta di prelievo di un campione e collegamento al rubinetto a 3 vie Prelevare un campione privo di cellule dal bioreattore almeno 5ml metterlo in una siringa da 5 ml e collegare la siringa al rubinetto a 3 vie come mostrato in figura 68 Verificare che il rubinetto a 3 vie sia in posizione corretta le frecce del rubinetto devono essere rivolte verso la marcatura verde del tubo e verso al siringa gt a N gt ie Figura 68 Collegamento di un campione esterno Premere su Campione pronto solo se si sicuri che la siringa riempita sia collegata e il rubinetto a 3 vie sia nella posizione corretta Altrimenti i valori di misura risulteranno erronei Figura 69 Posizione corretta del rubinetto a 3 vie Attivare la misura del campione esterno con Campione pronto Vengono eseguite tre misurazioni e viene visualizzato il valore medio come risultato Si possono quindi salvare correggere e annullare i valori di misura come descritto sopra oppure esegu
71. ne non riuscita Standard di calibrazione vuoto Tampone di trasferimento vuoto Bolla d aria nella camera di misura stato utilizzato un set di tubi sbagliato La cella di misura non installata correttamente stato selezionato un metodo sbagliato tubi delle valvole non sono inseriti o non lo sono correttamente Solo per Dialisi rubinetto a 3 vie regolato in modo sbagliato Set di tubi troppo vecchio Perdita nel set di tubi Linea di calibrazione bloccata o set di tubi ostruito Le versioni software dell apparecchio PC non sono compatibili La valvola gialla non funziona Valore di misura troppo alto o troppo basso Calibrazione errata Il valore del parametro Standard e lo standard reale non concordano Bolla d aria nella camera di misura Tampone di trasferimento vuoto Perdita nel set di tubi Solo per Dialisi referenziazione non eseguita Solo per Dialisi referenziazione non attuale Nessun valore di misura o valore negativo 120 Aiuto in caso di guasti La cella di misura non installata correttamente Tampone di trasferimento vuoto Set di tubi ostruito Perdita nel set di tubi Set di tubi troppo vecchio Nessuna sonda di campionamento collegata oppure sonda sbagliata Errore Messaggio di errore Causa possibile Forte oscillazione del valore di misura Bolla d aria nella camera di misura La cella di misura non installata correttamente Set di tubi troppo vecchio Filtraz
72. nel reattore attraverso la membrana Consigli e lista di controllo 111 112 Consigli e lista di controllo 8 5 Importazione dei dati in Excel valori di misura del BioPAT Trace vengono memo rizzati nel computer sotto forma di file ptd Per un ul teriore elaborazione i dati possono essere importati in Excel L importazione dei dati del file ptd in Excel avviene in sette passi 1 Aprire il programma MS Excel 2 Selezionare File Apri e selezionare la cartella in cui si trova il file ptd 3 Attivare Tutti i file marcatura arancione a enl Figura 86 Importazione dati del file ptd in Excel Attivare Tutti i file 4 Selezionare il file ptd marcatura arancione Confermare la selezione premendo il tasto Apri marcatura rossa 5s luleler i son Figura 87 Importazione dati del file ptd in Excel Selezione del file ptd 5 Assistente per conversione testo fase 1 Poi si avvia l assistente per conversione testo La lettura del file avviene in tre fasi Nella prima fase dell assistente per conversione testo selezionare il campo Separato marcatura arancione Per termi nare questa fase premere il tasto Avanti marcatura rossa The Text Wizard has determined that your data is Delimited W this ts correct choose Next or choose the data type that best describes your data Start import at cow 1 BLCTTNIc _ ____ gt Pr
73. nerali per la sicurezza 18 4 Equipaggiamento fornito accessori e materiali di consumo 20 4 1 Equipaggiamento fornito 20 42 Materiali di CONSUMO sebra alii AES 20 421 Setdi tUDi iii e paiono 20 4 2 2 Soluzione tampone concentrato 20 42 3 Disinfettahte picca ei elia 21 4 2 4 Standard di calibrazione quantit 0 5 litro 21 4 2 5 Membrane eroi pia lia ii pi PELA pie 22 4 3 Sonde di campionamento ennea a csin nny a a aa ea 22 4 3 1 Sonda di dialisi fornitura con kit di intervento 2 membrane e manuale d uso LL 22 4 3 2 Sonda di dialisi monouso fornitura con manuale d uso 22 4 3 3 Sonda di filtrazione fornitura con kit di intervento 1 membrana e manuale d USO LL ennnen naa 23 4 4 Accessori per sonde di campionamento LL 23 4 4 1 Accessori per sonda di dialisi 23 4 4 2 Accessori per sonda di filtrazione LL 23 4 4 3 Accessori per sonda di dialisi e filtrazione 24 4 5 Accessori per il BioPAT Trace LL 24 Indice 3 5 Struttura e funzionalit aa anaana aaaea 25 4 5 1 Struttura dell appareechio cosiinini ia 25 5 2 Metodi di misura di BioPAT Trace nnna nennen 29 5 2 1 Metodo di misura Dialisi con la sonda di dialisi 31 5 2 2 Metodo di misura Filtrazione con la sonda di filtrazione 33 5 3 Funzione della cella di Misura cerro nenin LL 34 5 4 Funzione del filtro antiparticolato LL
74. niziale Premendo il tasto Priming l apparecchio avvia il riempimento e il tasto scompare 86 Funzionamento Se il sistema viene messo in funzione con l autostart assicurasi che il set di tubi sia stato collegato correttamente al raccordo di prelievo del bioreattore Se il sistema pronto a misurare sulla riga inferiore viene visualizzato lo stato Pronto figura 65 Nel modo Filtrazione sono disponibili due tasti quando il sistema nello stato di pronto Da un lato il tasto Calibrazione per eseguire eventualmente una nuova calibrazione con l apparecchio e dall altro il tasto Avvio per attivare l inizio delle misurazioni ow om Figura 65 Schermata nello stato Pronto Nel modo Dialisi appare un terzo tasto a destra vicino alla finestra di misura chiamato Riferimento Attivando il tasto Riferimento l apparecchio avvia una misurazione di riferimento per la calibrazione della sonda di dialisi collegata Funzionamento 87 Applica Misurazione Figura 66 Visualizzazione dopo la misura di riferimento 88 Funzionamento Riferimento solo per Dialisi Si deve eseguire una misurazione di riferimento per equiparare la permeabilit di entrambe le membrane di diffusione nella cella di diffusione che pu venire a contatto solo con le soluzioni di calibrazione e nella sonda di dialisi che a contatto solo con il contenuto del bioreattore Il rapporto
75. o Essa raffigurata nella figura 12 Il liquido scorre verticalmente verso il sensore a 2 canali principio wall jet Mediante la finestra si pu controllare che il flusso attraverso la cella sia privo di bolle d aria Se necessario si possono eliminare le bolle d aria sciacquando la camera di misura A questo scopo il liquido viene iniettato attraverso la linea di lavaggio dotata di valvola di ritegno Il segnale elettrico misurabile sugli elettrodi viene misurato dai contatti a molla e trasferito al BioPAT Trace La cella di misura fissata all apparecchio mediante un dado zigrinato Fare attenzione che durante la misurazione non vi siano delle bolle d aria nella camera di misura della cella di flusso poich queste potrebbero falsare il risultato di misura Dopo aver collegato la sonda di campionamento e prima dell avvio della serie di misurazioni controllare attraverso la fine stra che la cella di misura non contenga delle bolle d aria Se ve ne sono eliminare le bolle per mezzo della linea di lavaggio A Per il lavaggio della cella di misura usare esclusi vamente del tampone di trasferimento o dell acqua distillata L uso di altri tipi di liquidi pu danneggiare il sensore Utilizzare solamente soluzioni fresche e o un unit filtrante sterile per evitare la penetrazione di germi nel set di tubi Struttura e funzionalit 5 4 Funzione del filtro antiparticolato Il filtro
76. ogeno viene rilevato in seguito nella cella di misura Figura 16 Reattore enzimatico AOD A causa della stabilit dell enzima usato A la temperatura ambiente non deve superare i 25 C A temperature maggiori si consiglia di usare un condizionatore 5 9 Correzione della temperatura L analizzatore BioPAT Trace dotato di un sensore termico che si trova vicino alla cella di misura Tutti i valori di misura vengono corretti mediante una funzione termodipendente Struttura e funzionalit 39 40 6 Messa in funzione 6 1 Trasporto Il BioPAT Trace e i suoi accessori sono forniti in un imballaggio protettivo Conservare l imballaggio di origine poich solo questo imballaggio assicura una protezione adeguata in caso di rispedizione dell apparecchio Alla consegna controllare la completezza della spedizione e se vi sono danni visibili dovuti al trasporto danni da trasporto dovrebbero essere segnalati entro una settimana dopo la consegna reclami tardivi non saranno presi in considerazione 6 2 Installazione 6 2 1 Installazione dell apparecchio Il BioPAT Trace deve essere installato nelle vicinanze del bioreattore da sorvegliare max 2 m di distanza Il luogo di installazione deve essere privo di vibrazioni e protetto contro atmosfere corrosive e lo sporco causato dai prodotti chimici Il BioPAT Trace deve essere inoltre protetto dall irraggiamento solare diretto Pe
77. on il metodo di misura Filtrazione il prelievo di campione dal bioreattore avviene mediante la sonda di filtrazione Il trasferimento del campione nella corrente del tampone avviene per diffusione nel modulo di diffusione La valvola di calibrazione giallo e la valvola per campioni verde permettono di selezionare tra le soluzioni di calibrazione e la sonda di filtrazione La valvola bypass rossa permette di scegliere il modulo di diffusione e il bypass La figura 11 mostra lo schema del sistema di flusso Sonda di filtrazione Standard 1 Scarti Standard 2 Modulo di diffusione Cella Valvola 1 di misura vavo 2 Valvola 3 x O Valvola di controllo Tampone di trasferimento 0 Pompa Pompa 1 Figura 11 Schema di flusso del metodo di filtrazione online Con il metodo di filtrazione online la calibrazione di BioPAT Trace e la misurazione di un campione vengono eseguiti sempre utilizzando il modulo di diffusione Il BioPAT Trace calcola la retta di regressione compreso il punto di zero e la pendenza a partire da una misurazione multipla degli standard di calibrazione 1 e 2 Il calcolo della concentrazione del campione viene eseguito invece sulla base delle rette di calibrazione Struttura e funzionalit 33 Figura 12 Cella di misura con linea di lavaggio 34 5 3 Funzione della cella di misura La cella di misura contiene i biosensori per il glucosio e il lattat
78. onare Controllare con attenzione i seguenti punti Le due scatole d origine delle pompe sono inserite in modo corretto Il set di tubi collegato completamente e correttamente Nel modo operativo Metanolo Etanolo montato il reattore enzimatico La cella di misura si trova nel supporto Sono disponibili quantit di tampone di trasferimento sufficienti cos come le soluzioni di calibrazione corrispondenti Poi si pu avviare l apparecchio Le funzioni necessarie del software operativo sono descritte dettagliatamente nel capitolo b 7 Funzionamento a pagina 85 Eseguire i seguenti passi nell ordine indicato 1 Selezionare il metodo di misura nel menu Impostazioni base capitolo b 7 1 4 2 Impostazioni base a pagina 106 2 Nel menu Parametri definire gli standard di calibrazione e la frequenza di misura e calibrazione che si desidera usare capitolo b 7 1 4 1 Parametri a pagina 102 3 Se tutti i tubi e le linee di prelievo sono collegati avviare il riempimento capitolo b 7 Funzionamento a pagina 85 4 Dopo il priming l apparecchio avvia auto maticamente le misurazioni se stata attivata l opzione Autostart o passa al modo di pronto Messa in funzione 83 84 Messa in funzione Se si lavora con il metodo Dialisi bisogna eseguire tempestivamente una misurazione di riferimento per ottenere dei risultati significativi Procedere a riguardo come descritto nel capitolo b 7
79. one o proseguire con nuovo set di tubi Continua misurazione Figura 75 Finestra di query al riavvio dopo Arresto Premendo il tasto Continua misurazione il sistema passa direttamente nella modalit di pronto Non vengono eseguite n operazioni di lavaggio n di calibrazione vecchi valori di calibrazione vengono conservati Premere Continua misurazione solo se si sicuri che vi siano le stesse condizioni come prima dell arresto per es in caso di brevi interruzioni Altrimenti i valori di misura possono risultare erronei Funzionamento In caso di interruzioni prolungate per es la notte si consiglia di eseguire una calibrazione prima di continuare con altre misurazioni 7 1 3 Voce di menu Visualizza File Apparecchio Display Impostazioni _Informaz Modifica visualizzazione 10 Mostra connessione Stampa diagramma Valori di calibrazione Estado Ti T Figura 76 Opzioni di menu Visualizza Se l opzione Mostra la connessione attivata un asterisco indica che il computer di comando comunica correttamente con il BioPAT Trace Selezionare l opzione Stampa diagramma per stampare il diagramma al momento visualizzato sulla stampante Selezionando l opzione Valori di calibrazione si apre una finestra con i valori di calibrazione attuali figura 77 Le intersezioni dell asse a0 la pendenza di calibrazione a1 e i fattori di rifer
80. orto della membrana 2 dado con risvolto 3 boccola 4 O ring 5 membrana in polipropilene 6 kit di montaggio raccordo a morsetto con disco scorrevole e O Ring 7 e tappo cieco 8 Figura 47 Componenti della sonda di filtrazione per il montaggio nel foro del coperchio da 12 mm con raccordo PG da 13 5 La membrana in polipropilene 6 viene fissata sul supporto della membrana 2 un tubo a spirale in acciaio inox Il permeato raccolto dalla membrana viene trasferito attraverso un canale a spirale verso 4 fori a croce Questi conducono il filtrato attraverso il percorso pi breve nel foro di raccolta dell unit filtrante evitando completamente una retromiscelazione del campione La boccola 4 in PTFE racchiude l estremit della membrana e la parte scoperta del supporto della membrana Serrando il dado a risvolto 3 la boccola viene deformata sotto la pressione assicurando una chiusura ermetica dell estremit della membrana verso il suo supporto 64 Messa in funzione Il filetto della sonda viene protetto contro la penetrazione di microrganismi mediante l O ring 5 e serrandolo fino all arresto La profondit di immersione della sonda di filtrazione pu essere variata tra 160 e 330 mm installando il raccordo a morsetto del kit di montaggio 7 Il tappo cieco 8 serve a chiudere la sonda di filtrazione durante la sterilizzazione 6 2 7 2 Accessori opzionali Per il montaggio della sonda di fil
81. osio Fattore di uscita Lattato Qui vengono impostati i campi di uscita delle uscite analogiche Procedere come segue Viene sempre indicato il limite superiore del campo di misura Il limite inferiore impostato di default su 0 Per un campo di misura desiderato di per es 0 10 g l di glucosio viene impostato 10 limite superiore per il campo di uscita Glucosio Quando si seleziona un campo di tensione 0 10 V 10 volt corrispondono quindi a 10 g l di glucosio Numero di valori di misura per gruppo a Standard 1 Glucosio Standard 2 Glucosio Misurazioni tra le calibrazioni E es Numero massimo di misurazioni per standard Reset Campi di uscita Glucosio Standard 1 Lattato Standard 2 Lattato Uscita analogica Lattato Campi di uscita Lattato Figura 83 Commutazione dell uscita analogica Qui si pu commutare l uscita dei segnali sulle uscite analogiche tra 0 20 mA e 4 20 mA nonch tra 0 10Ve 2 10 V vedi figura 83 Funzionamento 105 106 Funzionamento 7 1 4 2 Impostazioni base L opzione Impostazioni base permette degli inserimenti importanti per l esecuzione e la documentazione delle misurazioni figura 84 Prima di eseguire la misurazione si possono inserire il nome del progetto il luogo di installazione dell apparecchio e l ID dell utente La voce pi importante la selezione dell applicazione usata Si pu selezionare tra Filtrazione Dialisi per la determinazione del glucosio e l
82. r il collegamento alla rete seguire le istruzioni riportate qui di seguito Se l apparecchio funziona con una tensione di rete sbagliata e o con un fusibile sbagliato sussiste pericolo di morte Messa in funzione L alimentatore di rete fornito con l apparecchio comprende una spina di rete un adattatore e un connettore maschio da collegare all apparecchio Inserire il connettore maschio nella presa che si trova sul retro di BioPAT Trace e collegare la spina alla corrente elettrica Usare l interruttore di rete per accendere e spegnere l apparecchio Quando l apparecchio acceso s illumina un LED verde sul pannello frontale Connettere un cavo Ethernet alla porta Ethernet posta sul retro per collegare il BioPAT Trace alla rete locale L apparecchio viene comandato mediante un PC dotato del software operativo fornito Lo stesso PC deve essere collegato alla rete locale o direttamente mediante il cavo Ethernet incrociato fornito Dopo aver collegato l apparecchio al PC controllare se i tempi di sistema di entrambi gli apparecchi siano sincronizzati Procedere come descritto nel capitolo b 7 1 4 2 Impostazioni base a pagina 106 Messa in funzione 41 6 2 2 Allacciamento dei tubi dell apparecchio In base al modo operativo selezionato l analizzatore BioPAT Trace deve essere equipaggiato con i tubi corrispondenti fluidica Per ciascun modo operativo sono riportate qui di seguito le istruzioni per il montaggio d
83. rante questa procedura premere alternando i tasti neri della valvola in modo che anche i tubi posteriori possano essere inseriti in profondit nella fessura della valvola Poi controllare che i tubi siano posizionati correttamente nella valvola al fine di evitare degli errori durante la misurazione Figura 21 22 Tensione e inserimento della coppia di tubi Figura 23 Fissaggio dei tubi delle valvole spingendo assieme le piastre di guida Dopo aver equipaggiato tutte le tre valvole spingere poi le due piastre di guida verso la valvola per fissare la posizione dei tubi nella fessura della valvola figura 23 Nella fase successiva inserire le due scatole della pompa nell albero del motore e premerle verso la piastra di tenuta fino a quando si sente un clic di innesto A Prima di inserire le scatole delle pompe si deve verificare se l albero motore pulito pulirlo eventualmente con un panno morbido Le particelle di sporco o di abrasione lasciate dalle applicazioni precedenti possono pregiudicare il funzionamento corretto della pompa o addirittura impedirlo completamente Inserire in successione la pompa inferiore P2 e la pompa superiore P1 figura 24 25 Figura 24 25 Inserimento della scatola della pompa inferiore P2 e della scatola della pompa superiore P1 Messa in funzione 47 Figura 27 Pannello laterale completamente equipag
84. re di riferimento Struttura e funzionalit 31 32 Struttura e funzionalit Dato che non possibile mettere uno standard nel bioreattore la calibrazione di BioPAT Trace deve essere eseguita indirettamente per mezzo del fattore di riferimento Durante questo processo la concentra zione iniziale nel bioreattore viene usata come con centrazione di avvio per la sonda di dialisi A partire dai valori di misura del campione aventi una concen trazione identica il BioPAT Trace calcola il fattore tra la membrana del modulo di diffusione e la membrana nella sonda di dialisi Di conseguenza la calibrazione del metodo di dialisi si svolge complessivamente in tre fasi Fase 1 Determinazione delle rette di calibrazione sul modulo di diffusione con lo standard 1 e 2 Fase 2 Misurazione del campione esterno sul BioPAT Trace per mezzo delle rette di calibrazione in alternativa inserimento diretto dei valori di concentrazione se sono conosciuti mediante pesatura o analisi esterna Fase 3 Determinazione delle rette di calibrazione della sonda di dialisi mediante la sonda Dopo la misurazione degli standard per il calcolo delle rette di calibrazione il BioPAT Trace calcola un fattore a partire dalle pendenze delle singole rette Questo fattore viene usato durante tutte le misurazioni con la sonda di dialisi per il calcolo della concentrazione reale 5 2 2 Metodo di misura Filtrazione con la sonda di filtrazione C
85. rrente donatore e accettore La corrente del donatore e dell accettore entrano attraverso l ingresso inferiore del modulo Lo scarico si trova in alto di misura il modulo di diffusione deve essere fissato in posizione corretta sulla piastra di tenuta freccia rivolta verso l alto A Per un funzionamento affidabile dell apparecchio 36 Struttura e funzionalit caricato A non caricato Corrente accettatore Vi Ne a Analita 9 Figura 14 Principio di funziona mento della sonda di dialisi 5 6 Funzione della sonda di dialisi Se il campione viene trasferito dal bioreattore verso il BioPAT Trace per mezzo della sonda di dialisi l analita viene condotto attraverso la membrana di diffusione in una corrente tampone azionata da una pompa interna e poi viene trasportato verso la cella di misura La figura 14 mostra la funzione principale della sonda La sonda di dialisi adatta a tutti i tipi di coltura L uso di una membrana di diffusione estremamente robusta assicura una sterilit elevata diversi materiali della membrana consentono la dialisi la dialisi resistente alla cellulasi e la diffusione di gas per la separazione dei substrati La sonda pu essere installata nel coperchio o in uno dei raccordi laterali del bioreattore La possibilit di utilizzo della sonda di dialisi dipende dalle dimensioni del bioreattore e dalle condizioni del processo In genere si consiglia di usare la so
86. sione dei fluidi figura 4 Tale metodo lavora con una trasmissione del campione in funzione del tempo A questo scopo la linea di misura e il campione o la linea di alimentazione Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace 15 16 del campione sono separate tra loro da una membrana Il percorso di misura viene chiamato accettore e il lato del campione donatore Durante un analisi la linea di misura viene flussata con un tampone di trasferimento che avendo la funzione di corrente accettore pu essere arrestato dietro la membrana per un tempo definito Questa procedura ha luogo commutando una valvola che apre una linea di bypass Gli analiti che si trovano nel campione si diffondono intanto attraverso la membrana e si concentrano nella camera di raccolta In questo modo si genera progressivamente una concentrazione crescente dei componenti dializzabili nel segmento di liquido del tampone di trasferimento Membrana Tampone ks 5 O di trasferimento o a o2 o o o gi O 0 0 00 lo O gO a 9 r j l i Fase 1 Lavaggio Camera di raccolta Uscita P SA 0 00 00 Soi K VENA 0 0 0 00 9 2 f na i Fase 3 Trasferimento delle sostanze accumulate verso la cella di misura Figura 4 Principio della tecnica di diffusione dei fluidi Descrizione dell analizzatore BioPAT Trace Se questo segmento viene attivato mediante la
87. sso direttamente dopo la misurazione Se il tempo necessario per l esecuzione del gruppo maggiore del periodo di misura in tal caso il gruppo successivo inizia con il nuovo intervallo di misura Per determinare il numero di misurazioni tra le calibrazioni si prende in considerazione ciascuna misurazione in un gruppo Ci deve essere tenuto in considerazione durante la selezione delle impostazioni di calibrazione Valori degli standard glucosio e lattato Indicare qui le concentrazioni delle soluzioni standard di calibrazione selezionate e collegate per la propria applicazione Misurazioni tra le calibrazioni Qui si pu stabilire dopo quante misurazioni deve avere luogo una calibrazione automatica Tuttavia ci possibile solo se la calibrazione automatica stata attivata Funzionamento 103 104 Funzionamento Si pu attivare in qualsiasi momento una calibrazione premendo il tasto Calibrazione Se durante il funzionamento si modificano le indicazioni di autocalibrazione tali modifiche saranno efficaci solo con la calibrazione successiva Misurazioni per standard Con questa funzione si pu definire il numero di misurazioni per ogni standard di calibrazione Ogni misurazione di un valore di calibrazione necessita di un minuto Pertanto una calibrazione normale con 3 misurazioni per standard richiede 6 minuti pi i tempi di lavaggio per il cambio del mezzo Fattore di uscita Gluc
88. tiparticolato 2 vengono rimosse le piccole particelle e bolle d aria dal flusso del tampone Figura 6 Vista frontale di BioPAT Trace con i seguenti componenti Pos Componente 1alb Scatole delle pompe 2 pezzi 2 Filtro antiparticolato 3 Valvole a manicotto 3 pezzi Struttura e funzionalit 25 Figura 7 Vista laterale di BioPAT Trace con i seguenti componenti Pos Componente 4 Cella di misura 5 Dado zigrinato per il fissaggio della cella di misura 6 Modulo di diffusione 7 Contagocce 8 Linea di lavaggio con valvola di ritegno L arricchimento di un segmento della soluzione tampone con l analita della corrente donatore avviene per mezzo del modulo di diffusione 6 Dopo un arricchimento in funzione del tempo nel modulo di diffusione 6 la corrente accettore scorre nella cella di misura 4 che rileva il contenuto di analita La cella di misura fissata per mezzo di una piastra di tenuta che pu essere svitata o avvitata per mezzo di un dado zigrinato 5 Inoltre sulla cella di misura fissata una linea di lavaggio dotata di valvola di ritegno 8 Prima che le soluzioni vengano trasferite nel contenitore per scarti attraversano rispettivamente un contagocce 7 26 Struttura e funzionalit Il lato posteriore di BioPAT Trace mostrato nella figura 8 L interruttore di rete 9 serve ad accendere e spegnere l apparecchio Il segnale ele
89. trazione la membrana in polipropilene deve essere idrofilizzata con l isopropanolo al 70 vol vol La sonda viene immersa in un cilindro con piede d appoggio di lunghezza sufficiente e contenente la soluzione di isopropanolo al 70 in modo che la membrana si trovi completamente nel liquido L estremit del tubo con il raccordo UNF viene collegata alla sonda di filtrazione L estremit libera del tubo viene fissata nel cilindro in modo che si trovi sospesa in aria al di sopra del livello del liquido vedi la marcatura nella figura 55 La scatola della pompa del set di idrofilizzazione viene fissata su un albero motore del BioPAT Trace Il secondo albero motore rimane libero Dopo aver avviato il programma TraceMon nel modulo di filtrazione appare la schermata di avvio mostrata nella figura 56 Sul lato destro dell inter faccia utente si trova il pannello di comando con i pulsanti per l avvio Pompa On e l arresto Pompa Off della pompa nonch il pulsante per il controllo dell ermeticit Per avviare l operazione di idrofilizzazione premere Pompa On La soluzione di isopropanolo viene aspi rata attraverso la sonda di filtrazione e poi pompata di nuovo nel cilindro La durata dell idrofilizzazione dovrebbe essere di almeno 2 ore per ottenere durante il funzionamento delle buone prestazioni di filtrazio ne Al termine dell idrofilizzazione arrestare la pompa premendo il pulsante Pompa Off CE I moat nei
90. trazione nel foro del coperchio da 19 mm sono disponibili due adattatori di riduzione da 19 12 mm M26x1 con filettatura fine e RD 28x1 8 con filettatura grossolana amp 37 Figura 48 Sonda di filtrazione Figura 49 Sonda di filtrazione con adattatore M26x1 con adattatore RD 28x1 8 Messa in funzione 65 66 Messa in funzione 6 2 7 3 Montaggio della sonda di filtrazione Spingere la boccola con l apertura stretta davanti sul supporto della membrana fino al portamembrana conico dell unit filtrante figura 50 Togliere la membrana in polipropilene dalla confezione e inserirla con attenzione sul supporto della membrana fino all arresto nella boccola in PTFE gi montata SS Figura 50 Inserimento della Figura 51 Inserimento della boccola membrana in polipropilene Spingere l O ring sul filetto esterno dell unit filtrante Ora spingere con cautela il dado a risvolto sulla membrana inserita e avvitarlo nell unit filtrante Serrare il dado fino all arresto meccanico usando 2 chiavi fisse Sa Figura 52 Inserimento Figura 53 Avvitamento del dell O ring dado a risvolto Bagnare il filetto esterno della sonda di filtrazione prima del montaggio con dell acqua demineralizzata Il raccordo a vite della sonda di filtrazione viene serrato fino all arresto meccanico Messa in funzione 67 68 Messa in funzione 6 2 7 4 Idrofilizzazione de
91. ttrochimico del biosensore convertito internamente in un valore di concentrazione mediante i dati di calibrazione Al termine dell analisi viene emesso il valore di misura per mezzo di un computer collegato alla porta Ethernet 10 possibile far emettere i segnali mediante le uscite di segnale analogiche 12 Sono possibili i seguenti campi 0 10 V 0 20 mA 4 20 mA L interfaccia USB 11 e l interfaccia seriale RS232 13 possono anche essere usate per la trasmissione dei dati attualmente non possibile 12a 12b 12c Figura 8 Vista posteriore di BioPAT Trace con i seguenti componenti Pos Funzione 9 Interruttore di rete 10 Porta Ethernet 11 Interfaccia USB 12a blc Uscite analogiche 1 3 13 Interfaccia seriale Struttura e funzionalit 27 28 Il BioPAT Trace pu essere fissato su colonnine da laboratorio aste di supporto o supporti da banco Un opportuno morsetto per colonnina nonch una colonnina da banco appropriata sono disponibili come accessori assolutamente vietato collegare una sorgente di tensione alle uscite dati analogiche che si trovano sul retro di BioPAT Trace Ci vale anche per un multimetro per la misura della resistenza Se si utilizza un multimetro per la misurazione della tensione o dell intensit di corrente si devo no togliere i contatti verso il BioPAT Trace prima del cambio del campo di misura sul multimetro Altri
92. un PC attraverso il cavo Ethernet incrociato l apparecchio lavorer con l indirizzo IP di default Verificare se si utilizza una connessione diretta che il computer non sia impostato sull assegnazione automatica dell indirizzo IP Messa in funzione 77 78 Messa in funzione Come primo passo scaricare sul proprio computer gli altri file importanti per l installazione clic sul tasto destro del mouse Accedere alla voce di menu Download dove si trovano i seguenti file setup_tracemon_x_x_x come file di setup del software operativo _x_x_x indicazione della versione ip_set come copia di sicurezza del file di boot Manuale d uso di BioPAT Trace come file pdf Come secondo passo modificare l indirizzo di rete dell apparecchio Questo si trova sotto la voce di menu Impostazioni di rete i sartoriusst Start Download Network Logout Deutsch Login Possword Som Pease enable Cocioes and Imvasenpt Figura 59 Login per le impostazioni di rete A questo scopo bisogna collegarsi con la password TuSh1Vf5Ja L indirizzo IP di default nella maggioranza dei casi non compatibile con le reti aziendali Farsi assegnare dal proprio amministratore un indirizzo IP adatto altrimenti non si potrebbe collegare l apparecchio al software operativo Networking INTERFACE address 192 168 120 231 e netmask 255 255 255 0 e gateway 192 168 120 1 RESOLV CO
93. ura Ci succede in particolare quando si rabbocca di continuo della soluzione fresca nel recipiente di stoccaggio contenente la soluzione di trasferimento diluita pronta per l uso Conviene sostituire il recipiente quasi vuoto con un nuovo recipiente contenente soluzione fresca in modo da evitare una propagazione di germi germi possono anche diffondersi nel set di tubi attraverso la linea di lavaggio della cella di misura quando si eliminano le bolle d aria dalla camera di misura Per questa procedura usare unicamente soluzioni fresche e o un unit filtrante sterile In alcuni casi con colture di lunga durata si osservato che i biofilm si formano nella linea degli scarti diffondendosi poi fino nella camera di gocciolamento Anche per questo motivo si consiglia di sostituire regolarmente i contenitori per scarti e di evitare l immersione della linea nel contenitore per scarti Come protezione aggiuntiva si pu aggiungere una soluzione disinfettante nel contenitore per scarti vedi materiali di consumo tabella 3 Utilizzando il metodo Filtrazione si pu aggiungere la soluzione disinfettante direttamente nel tampone di trasferimento 0 5 V V In questo modo si ottiene la protezione pi efficace contro la formazione di germi Questa procedura purtroppo non pu essere applicata al metodo Dialisi poich la soluzione di trasferimento si trova dietro la membrana di dialisi e il disinfettante pu quindi penetrare direttamente
94. zio Procedura di boot illuminato bianco illuminato Arresto illuminato ciano illuminato Riempimento illuminato ciano lampeggia Premisurazione illuminato verde ciano lampeggia Modo di misura Modo di misura caricato illuminato verde illuminato Modo di misura scaricato illuminato verde lampeggia Pause di misurazione Pronto Pronto illuminato giallo illuminato Intervallo Riposo illuminato giallo lampeggia Procedure di lavaggio Cambio del mezzo illuminato magenta illuminato Lavaggio sonda illuminato magenta lampeggia Calibrazioni Calibrazione caricato illuminato blu illuminato Calibrazione scaricato illuminato blu lampeggia Riferimento caricato illuminato blu illuminato Riferimento scaricato illuminato blu lampeggia Guasti Nessuna connessione in illuminato rosso illuminato rete Tabella 6 Messaggi di stato dei LED 108 Funzionamento 8 Consigli e lista di controllo 8 1 Selezione delle soluzioni standard adatte Sono disponibili diverse combinazioni di soluzioni standard di calibrazione al fine di offrire una copertura ottimale delle evoluzioni previste per le concentrazioni Consigliamo di collegare ogni volta come standard 1 lo standard con la concentrazione pi alta A seconda delle condizioni di processo e degli obiettivi della coltura si devono coprire diversi campi di concentrazione Di regola il campo di concentrazione si dovrebbe trovare tra le concentra zioni
95. zione 74 segg 2 Preparazione del tampone di trasferimento 6 2 2e8 4 44 111 e del contenitore per scarti Diluizione del concentrato di tampone e 6 2 2 42 conservazione in bottiglia Se necessario preparare il contenitore per 8 4 111 scarti con disinfettante 3 Allacciamento dei tubi dell apparecchio 6 2 2 42 segg 17 33 fino a 6 2 4 Allineamento e leggera apertura della 45 segg 19 piastra di guida Inserimento e tensione dei tubi delle valvole 46 20 22 nelle fessure delle valvole Avvicinamento delle piastre di guida verso le 47 23 valvole per fissare i tubi Inserimento e innesto delle pompe 47 segg 24 26 Inserimento della cella di misura nella sede 48 segg 28 29 e fissaggio con dado zigrinato Installazione del modulo di diffusione 50 30 Inserimento dei contagocce 50 31 Solo per Dialisi collegare il rubinetto 3 vie 51 32 33 opzionale 116 Consigli e lista di controllo Passo Azione Capitolo Pagina Figura Lista di controllo 4 Collegamento delle linee di entrata e uscita 6 2 2 44 Collegamento dei tubi al tampone di de trasferimento Collegamento dei tubi alle soluzioni di 44 calibrazione Collegamento della linea scarti al contenitore 44 per scarti 5 Accensione dell apparecchio 7 85 Accensione dell interruttore di rete sul retro 7 85 dell apparecchio Attesa del boot del computer interno 7 2 108 il LED passa da bianco a rosso 6

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