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APTIMA® Trichomonas vaginalis Assay

1. Collari di ricostituzione 3 3 Scheda del codice a barre del lotto master 1 scheda 1 scheda APTIMA Trichomonas vaginalis Controls Kit kit dei controlli Trichomonas vaginalis APTIMA alla ricezione conservare a temperature comprese tra 2 C e 8 C Simbolo Componente Quantit NC APTIMA Trichomonas vaginalis Negative Control controllo 5x1 7 mL negativo Acido nucleico non target non infettivo in soluzione tamponata contenente 5 di detergente PC APTIMA Trichomonas vaginalis Positive Control controllo 5x1 7 mL positivo Organismi di Trichomonas vaginalis non infettivi in soluzione tamponata contenente lt 5 di detergente Materiali richiesti ma disponibili separatamente Nota Per i materiali disponibili presso Gen Probe sono indicati i numeri di catalogo se non diversamente specificato N cat PANTHER System 303095 Kit di reagenti APTIMA 303014 1000 test Soluzione di lavaggio APTIMA tampone per liquido di disattivazione APTIMA e reagente olio APTIMA Kit Auto Detect APTIMA 303013 1000 test APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 17 502536IT Rev A PANTHER System Unit multiprovetta MTU 104772 02 Kit dei sacchetti di rifiuti PANTHER 902731 Coperchio del contenitore dei rifiuti PANTHER 902714 Oppure Kit procedurale PANTHER 303096 5000 test Contiene le MTU i sacchetti dei rifiuti i coperchi dei contenitori dei rifiuti i reagenti e gli Auto Detect Puntali 1000 uL conduttivi r
2. 97 8 99 7 89 6 98 8 99 2 100 i 100 100 100 100 e Asintomatico 353 23 0 330 0 6 5 85 7 100 98 8 100 86 2 NC 99 0 100 vi 100 992 95 9 100 Sintomatico 460 70 3 387 0 15 2 94 8 100 97 8 99 7 88 9 99 1 99 1 100 IC intervallo di confidenza TVM tampone vaginale raccolto da un medico TE tampone endocervicale FN falso negativo FP falso positivo NC non calcolabile PCyt campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt Prev prevalenza TN vero negativo TP vero positivo Intervallo di confidenza del punteggio 2Intervallo di confidenza del 95 del VPP calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza positivo intervallo di confidenza del 95 del VPN calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza negativo Alcuni limiti di confidenza potrebbero non essere calcolati a causa di risultati indeterminati nelle formule Nella Tabella 4 sono riportati la sensibilit la specificit il valore predittivo positivo VPP e il valore predittivo negativo VPN dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay nonch la prevalenza di 7 vaginalis nello stato di infezione in ciascun tipo di campione per sito di APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 28 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System raccolta Per ciascun tipo di campione le prestazioni sono risultate simili tra i vari siti di raccolta Come previsto tra
3. inizio quando si verificher una delle seguenti condizioni a Una coppia di controlli viene trattata dal sistema b Nel sistema vengono registrati risultati validi per i controlli 2 Al temine del pipettaggio e del trattamento delle provette dei controlli di uno specifico kit di reagenti i campioni dei pazienti possono essere trattati con il relativo kit fino a 24 ore a meno che a risultati dei controlli risultino non validi b Il kit di reagenti del test associato viene rimosso dal sistema c Il kit di reagenti del test associato ha superato i limiti di stabilit 3 Ciascuna provetta del controllo APTIMA pu essere analizzata una sola volta tentativi di pipettare pi di una volta dalla provetta possono causare errori di trattamento B Temperatura Per temperatura ambiente si intende una temperatura compresa tra 15 C e 30 C C Talco dei guanti Come in qualsiasi sistema di reazione il talco eccessivo in alcuni guanti pu causare la contaminazione delle provette aperte Si consigliano guanti privi di talco D Protocollo di monitoraggio della contaminazione in laboratorio per il PANTHER System Esistono numerosi fattori specifici del laboratorio che possono contribuire alla contaminazione tra cui il volume di analisi il flusso di lavoro la prevalenza di una malattia e altre attivit connesse al laboratorio Quando si stabilisce la frequenza di monitoraggio della contaminazione necessario tenere in considera
4. 3 100 Q WM amp 13 1 50 0 203 100 72 100 980 89 99 929 709 998 100 04 1 100 TE 67 13 0 54 0 194 100 772 100 100 934 100 100 78 NC 100 944 100 PCyt 67 13 0 54 O 194 100 77 2 00 100 93 4 100 100 78 NC 100 94 4 100 CI intervallo di confidenza TVM tampone vaginale raccolto da un medico TE tampone endocervicale FN falso negativo FP falso positivo NC non calcolabile PCyt campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt Prev prevalenza TN vero negativo TP vero positivo Intervallo di confidenza del punteggio 2Intervallo di confidenza del 95 del VPP calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza positivo intervallo di confidenza del 95 del VPN calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza negativo Alcuni limiti di confidenza potrebbero non essere calcolati a causa di risultati indeterminati nelle formule Nella Tabella 5 sono riportati la sensibilit la specificit il valore predittivo positivo VPP e il valore predittivo negativo VPN dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay nonch la prevalenza APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 29 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System di T vaginalis nello stato di infezione in campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PrservCyt mediante un dispositivo di prelievo cervicale Per i campioni per Pap test ra
5. 5 di detergente S APTIMA Trichomonas vaginalis Selection Reagent 1x 108 mL 1x43 0 mL reagente di selezione Soluzione tampone borato 600 mM contenente un tensioattivo TCR APTIMA Trichomonas vaginalis Target Capture 1x54 0 mL 1x 26 0 mL Reagent reagente di cattura del target Soluzione tamponata contenente oligomeri di cattura e particelle magnetiche Collari di ricostituzione 3 3 Scheda del codice a barre del lotto master 1 scheda 1 scheda APTIMA Trichomonas vaginalis Controls Kit kit dei controlli Trichomonas vaginalis APTIMA alla ricezione conservare a temperature comprese tra 2 C e 8 C Simbolo Componente Quantit NC APTIMA Trichomonas vaginalis Negative Control controllo 5x1 7 mL negativo Acido nucleico non target non infettivo in soluzione tamponata contenente 5 di detergente PC APTIMA Trichomonas vaginalis Positive Control controllo 5x1 7mL positivo Organismi di Trichomonas vaginalis non infettivi in soluzione tamponata contenente 5 di detergente Materiali richiesti ma disponibili separatamente Nota Per i materiali disponibili presso Gen Probe sono indicati i numeri di catalogo se non diversamente specificato N cat TIGRIS DTS System 105118 Kit di reagenti APTIMA 302382 Soluzione di lavaggio APTIMA tampone per liquido di disattivazione APTIMA e reagente olio APTIMA Kit Auto Detect APTIMA 301048 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 10 502536IT Rev A T
6. C e 30 C APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per l amplificazione APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per l enzima APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per la sonda APTIMA Trichomonas vaginalis Target Capture Reagent reagente di cattura del target APTIMA Trichomonas vaginalis Selection Reagent reagente di selezione C Dopo la ricostituzione il reagente di amplificazione il reagente enzimatico e il reagente sonda sono stabili per 60 giorni se vengono conservati a temperature comprese fra 2 Ce8 C D Il reagente di cattura del target di lavoro Working Target Capture Reagent wTCR stabile per 60 giorni se viene conservato a temperature comprese tra 15 C e 30 C Non refrigerare E Dopo 60 giorni o dopo la data di scadenza del lotto master a seconda della condizione che si verifica per prima gettare qualsiasi reagente ricostituito e wTCR non utilizzato controlli sono stabili fino alla data indicata sulle fiale G reagenti contenuti nei flaconi da 250 test che sono conservati a bordo del TIGRIS DTS System hanno una stabilit a bordo di 48 ore H I reagenti contenuti nei flaconi da 100 test che sono conservati a bordo del TIGRIS DTS System hanno una stabilit a bordo di 96 ore I reagenti conservati a bordo del PANTHER System hanno una sta
7. Interferenza sh 37 Contaminazione crociata nel PANTHER System 37 Bibliografia isa A REOR RS 38 TIGRIS HoH Cm PARISER TIGRIS DTS System eene 9 PANTHER System esee 16 Reagenti e materiali forniti i 9 Reagenti e materiali forniti i 16 Materiali richiesti ma disponibili separatamente 10 Materiali richiesti ma disponibili separatamente 17 Materiali facoltativi sese 11 Materiali facoltativi ii Procedura di analisi con il TIGRIS DTS System 12 Procedura di analisi per il PANTHER System Note procedurali e nete 15 Note procedurali enne APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 1 502536IT Rev A Informazioni generali Finalit d uso L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay un test di amplificazione degli acidi nucleici nucleic acid amplification test NAAT qualitativo in vitro per il rilevamento dell RNA ribosomiale rRNA di Trichomonas vaginalis utile per la diagnosi della tricomoniasi mediante il TIGRIS DTS System o il PANTHER System Il test pu essere utilizzato per analizzare i seguenti campioni prelevati da donne sintomatiche o asintomatiche tamponi endocervicali e vaginali raccolti da un medico campioni di urina femminile e campioni raccolti in soluzione PreservCyt Sommario e spiegazione del test Trichomonas
8. PANTHER System Pertinenti al laboratorio D Usare solo prodotti da laboratorio monouso forniti o specificati E Adottare le consuete precauzioni di laboratorio Non mangiare bere n fumare nelle aree di lavoro designate Durante la manipolazione dei campioni e dei reagenti dei kit indossare guanti monouso senza talco occhiali protettivi e camici da laboratorio Lavarsi accuratamente le mani dopo aver manipolato campioni e reagenti dei kit F Avvertenza Irritanti e corrosivi Evitare di fare entrare in contatto l Auto Detect 1 e l Auto Detect 2 con la pelle gli occhi e le mucose Se questi liquidi vengono a contatto con la pelle o con gli occhi risciacquare con acqua la parte interessata In caso di versamento di questi liquidi diluire il liquido con acqua prima di asciugarlo con un panno G Le superfici di lavoro le pipette e le altre apparecchiature devono essere decontaminate regolarmente con una soluzione di ipoclorito di sodio in concentrazioni comprese fra 2 5 e 3 5 da 0 35 M a 0 5 M Pertinenti ai campioni H Le date di scadenza dei kit di trasferimento dei campioni si riferiscono alla raccolta o al trasferimento dei campioni e non all analisi dei campioni campioni raccolti trasferiti precedentemente alla data di scadenza sono validi per l analisi a condizione che siano stati trasportati e conservati conformemente alle indicazioni riportate sul foglietto illustrativo anche se stata superata la data di scadenza r
9. TIGRIS DTS System stata del 99 2 per i tamponi vaginali del 98 3 per i tamponi endocervicali e del 99 6 per i campioni di urina e per quelli raccolti in liquido PreservCyt Tabella 10 Concordanza clinica dei campioni Concordanza Concordanza Concordanza TIGRIS TIGRIS TIGRIS TIGRIS positiva negativa complessiva N PANTHER PANTHER PANTHER PANTHER 95 CI 95 CI 95 CI 100 99 1 99 2 TM 495 33 o 229 93 2 100 97 7 99 6 97 9 99 7 10096 98 196 98 396 5 P 48 a 3 468 92 6 100 96 5 99 0 96 8 99 1 96 296 10096 99 696 pupa ius 20 2 9 TP 87 0 98 9 99 1 100 98 5 99 9 10096 99 696 99 696 PM 944 1 o 491 93 0 100 98 5 99 9 98 7 99 9 99 096 99 296 99 296 Complessiva 2056 202 2 15 1837 96 5 99 7 98 7 99 5 98 7 99 5 TVM tampone vaginale raccolto da un medico TE tampone endocervicale PCyt campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt Riproducibilit del dosaggio La riproducibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay stata valutata in tre siti utilizzando il PANTHER System Le analisi sono state eseguite nell arco di sei giorni utilizzando due lotti di reagenti del test e sei operatori due in ciascun sito Sono stati creati dei pannelli per la valutazione della riproducibilit aggiungendo la quantit appropriata di lisato di 7 vaginalis alla matrice di campioni di urina o di campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzi
10. crociata in presenza di microrganismi Specificit La specificit del APTIMA Trichomonas vaginalis Assay stata valutata analizzando vari microrganismi tra cui la comune flora batterica del tratto genitourinario gli organismi opportunisti e gli organismi strettamente affini Le analisi sono state condotte in un terreno di trasporto dei campioni TTC con 25 replicati per ciascun isolato L elenco degli organismi e le concentrazioni analizzate sono riportati nella Tabella 12 Su ciascuno degli organismi analizzati non stato osservato alcun affetto significativo n di reattivit crociata per l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Sensibilit La sensibilit del APTIMA Trichomonas vaginalis Assay stata valutata analizzando gli stessi organismi Tabella 12 in un terreno di trasporto dei campioni in cui stato aggiunto il lisato di T vaginalis fino a raggiungere una concentrazione finale di 2 5 TV mL 25 replicati per ciascun isolato La sensibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay non stata influenzata in modo significativo dalla presenza dei microrganismi analizzati eccetto Trichomonas tenax e Pentatrichomonas hominis nel qual caso sono stati osservati risultati dei segnali inferiori T tenax un batterio commensale della cavit orale e Pentatrichomonas hominis un commensale dell intestino crasso APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 36 502536IT Rev A Prestazioni del PANTHER System Assay Tabella 12 Microrga
11. della contaminazione necessario tenere in considerazione questi fattori Gli intervalli di monitoraggio della contaminazione vanno stabiliti in base alla prassi e alle procedure di ciascun laboratorio Per monitorare la contaminazione in laboratorio durante l utilizzo dell APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit kit di raccolta dei campioni di tamponi unisex per campioni di tamponi endocervicali e uretrali maschili possibile utilizzare la seguente procedura 1 Contrassegnare le provette di trasporto dei tamponi con etichette numerate corrispondenti alle aree da analizzare 2 Estrarre dalla confezione il tampone di raccolta del campione tampone con bastoncino blu e stampa verde inumidire il tampone nel terreno di trasporto e prelevare il campione nell area designata con movimento circolare 3 Inserire immediatamente il tampone nella provetta di trasporto 4 Spezzare il bastoncino del tampone in corrispondenza della linea indicatrice facendo attenzione a non disperdere il materiale prelevato 5 Chiudere bene il tappo della provetta 6 Ripetere le operazioni da 2 a 5 per tutte le aree da cui verranno prelevati i campioni Se risultati sono positivi vedere nterpretazione dell analisi QC Risultati dei pazienti Per ulteriori informazioni sul monitoraggio della contaminazione specifiche per il TIGRIS DTS System vedere il TIGRIS DTS System Operator s Manual Manuale per l operatore del TIGRIS DTS System APTIMA
12. di trasporto del campione per 5 minuti ad una forza centrifuga relativa Relative Centrifugal Force RCF di 420 per portare tutto il liquido verso il basso sul fondo della provetta Evitare gli schizzi e la contaminazione crociata Nota La spedizione dei campioni deve essere effettuata in conformit ai regolamenti applicabili relativi al trasporto nazionale e internazionale APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 8 502536IT Rev A TIGRIS DTS System TIGRIS um Di seguito sono riportati i reagenti per l APTIMA Trichomonas vaginalis ma Assay per il TIGRIS DTS System Accanto al nome dei reagenti sono elencati anche i simboli di identificazione dei reagenti Reagenti e materiali forniti APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Kit 250 test 2 scatole e 1 kit di controlli N cat 303164 100 test 2 scatole e 1 kit di controlli N cat 303174 APTIMA Trichomonas vaginalis Refrigerated Box scatola refrigerata scatola 1 di 2 alla ricezione conservare a temperature comprese tra 2 C e 8 C Quantit Simbolo Componente Kit da Kit da 250 test 100 test A APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification 1 fiala 1 fiala Reagent reagente di amplificazione Primer e nucleotidi essiccati in soluzione tamponata contenente lt 5 di agente di riempimento E APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reagent 1 fiala 1 fiala reagente enzimatico Trascrittasi inversa ed RNA polimerasi essiccate in soluzione tamponata HEPES contenente l
13. i reagenti e i campioni con coperture da banco di laboratorio pulite assorbenti e con parte posteriore plastificata B Ricostituzione dei reagenti Preparazione di un nuovo kit Nota La ricostituzione dei reagenti andrebbe eseguita prima di iniziare qualsiasi lavoro sul TIGRIS DTS System 1 Perricostituire i reagenti di amplificazione enzimatico e sonda unire i flaconi di reagente liofilizzato alla soluzione di ricostituzione Se refrigerate prima dell uso attendere che le soluzioni di ricostituzione raggiungano la temperatura ambiente a Abbinare ciascuna soluzione di ricostituzione al proprio reagente liofilizzato Prima di fissare il collare di ricostituzione accertarsi che la soluzione di ricostituzione e il reagente liofilizzato abbiano l etichetta dello stesso colore Controllare i numeri di lotto sulla scheda dei codici a barre del lotto master per assicurarsi che siano abbinati i reagenti appropriati Aprire la fiala del reagente liofilizzato e inserire con fermezza l estremit indentata del collare di ricostituzione nell apertura della fiala Figura 1 fase 1 Aprire il flacone della soluzione di ricostituzione corrispondente e appoggiare il tappo su una superficie di lavoro pulita e coperta Tenendo il flacone della soluzione di ricostituzione sul banco inserire con fermezza l altra estremit del collare di ricostituzione nell apertura del flacone Figura 1 fase 2 Capovolgere lentamente i flaconi asse
14. in laboratorio viene eseguito l APTIMA Trichomonas vaginal Assay l rRNA target viene isolato dai campioni con un metodo denominato cattura del target che prevede l uso di uno specifico oligomero di cattura e microparticelle magnetiche L oligomero di cattura contiene una sequenza complementare a una specifica regione della molecola target oltre a un filamento di residui di deossiadenosina Durante la fase di ibridizzazione la regione dell oligomero di cattura specifica per la sequenza si lega a una regione specifica della molecola target Il complesso di cattura oligomero target viene quindi catturato fuori soluzione diminuendo la temperatura della reazione fino ad arrivare a temperatura ambiente Questa riduzione della temperatura permette il verificarsi dell ibridizzazione fra la regione della deossiadenosina sull oligomero di cattura e le molecole di poli deossitimidina che sono unite con legame covalente alle particelle magnetiche Le microparticelle che comprendono le molecole target catturate legate ad esse vengono spinte sul lato del recipiente di reazione con dei magneti e il surnatante viene aspirato Le particelle vengono sottoposte a lavaggio per rimuovere la matrice residua del campione che potrebbe contenere inibitori dell amplificazione Una volta completate le fasi di cattura del target i campioni sono pronti per l amplificazione test di amplificazione si basano sulla capacit dei primer oligonucleotidici complementari di appaiarsi
15. in modo specifico per permettere l amplificazione enzimatica dei filamenti di acidi nucleici target La reazione TMA Gen Probe permette di amplificare una specifica regione della subunit ribosomiale minore di 7 vaginalis attraverso gli intermedi di DNA ed RNA generando molecole di ampliconi di RNA II rilevamento delle sequenze dei prodotti di amplificazione dell RNA si ottiene mediante l ibridizzazione degli acidi nucleici HPA Una sonda di DNA chemioluminescente a singolo filamento complementare a una regione dell amplicone target viene marcata con una molecola di estere di acridinio La sonda di DNA marcatasi lega all amplicone per formare ibridi stabili RNA DNA Il reagente di selezione differenzia le sonde ibridizzate da quelle non ibridizzate eliminando la generazione del segnale dalla sonda non ibridizzata Durante la fase di rilevamento la luce emessa dagli ibridi marcati RNA DNA viene misurata come segnali fotonici in un luminometro e riportati come unit di luce relativa Relative Light Units RLU APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 3 502536IT Rev A Avvertenze e precauzioni Avvertenze e precauzioni A Per l uso diagnostico in vitro B Per avvertenze e precauzioni specifiche supplementari consultare il TIGRIS DTS System Operator s Manual Manuale per l operatore del TIGRIS DTS System C Per avvertenze e precauzioni specifiche supplementari consultare il PANTHER System Operator s Manual Manuale per l operatore del
16. si capovolgono i reagenti 4 Evitare di riempire i flaconi dei reagenti fino all orlo II PANTHER System riconosce e rifiuta i flaconi riempiti fino all orlo D Manipolazione dei campioni 1 Prima del trattamento lasciare che i controlli e i campioni raggiungano la temperatura ambiente 2 Non miscelare i campioni con vortex 3 Controllare visivamente che ciascuna provetta del campione soddisfi i seguenti requisiti a La presenza di un singolo tampone di raccolta APTIMA blu in una provetta di trasporto dei campioni di tampone unisex b La presenza di un singolo tampone di raccolta APTIMA rosa in una provetta di trasporto dei campioni di tampone vaginale c Un volume finale di urina compreso tra le linee di riempimento nere di una provetta di trasporto del campione di urina d L assenza di un tampone nella provetta di trasporto dei campioni APTIMA per i campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt 4 spezionare le provette dei campioni prima di caricarle sulla rastrelliera a Se una provetta del campione contiene bolle nello spazio fra il liquido e il tappo centrifugarla per 5 minuti a 420 RCF per eliminarle b Se una provetta del campione presenta un volume inferiore a quello tipicamente osservato quando sono state seguite le istruzioni per la raccolta centrifugare la provetta per 5 minuti a 420 RCF per assicurarsi che non sia presente liquido nel tappo c Se il livello del liquido in una prov
17. vaginalis TV l agente della pi comune e curabile malattia sessualmente trasmessa sexually transmitted disease STD negli Stati Uniti con 7 4 milioni di nuovi casi diagnosticati ogni anno secondo le stime 1 2 Nelle donne le infezioni causano vaginiti uretriti e cerviciti Nel tratto genitourinario possono essere presenti perdite e piccole lesioni emorragiche Le complicanze possono includere travaglio prematuro scarso peso della prole alla nascita rottura prematura delle membrane e infezione conseguente ad aborto o isterectomia stata riportata un associazione tra malattia infiammatoria pelvica infertilit tubarica e cancro cervicale ed episodi pregressi di tricomoniasi Le donne sintomatiche affette da tricomoniasi generalmente lamentano perdite vaginali dolore e o irritazione vulvovaginale frequente anche la disuria Tuttavia si stima che le infezioni da 7 vaginalis sono asintomatiche in una percentuale di donne compresa tra il 10 e il 50 e che negli uomini tale percentuale pu essere addirittura superiore 3 4 5 Il rilevamento di 7 vaginalis con i metodi di coltura tradizionali tecnicamente impegnativo e richiede fino a 7 giorni Per ottenere una coltura di questi protozoi preferibile eseguire immediatamente l inoculazione nei terreni di coltura e sono necessarie condizioni di incubazione adeguate oltre a frequenti esami microscopici dei terreni di coltura Si stima che la sensibilit della coltura sia com
18. 06 UFC mL 1 3x106 UFC mL Peptostreptococcus anaerobius 2 2x108 UFC mL 2 2x108 UFC mL 1 1x108 UFC mL Prevotella bivia 5 2x108 UFC mL 5 2x108 UFC mL 2 6x108 UFC mL Propionibacterium acnes 1 6x108 UFC mL 1 6x108 UFC mL 1 6x108 UFC mL Proteus mirabilis 1 2x10 UFC mL 1 2x10 UFC mL 6 0x108 UFC mL Pseudomonas aeruginosa 1 5x108 UFC mL 1 5x108 UFC mL 1 5x108 UFC mL Staphylococcus aureus 2 8x108 UFC mL 2 8x108 UFC mL 2 8x108 UFC mL Staphylococcus epidermidis 3 0x108 UFC mL 3 0x108 UFC mL 1 5x108 UFC mL Streptococcus agalactiae 1 0x108 UFC mL 1 0x108 UFC mL 1 0x108 UFC mL Streptococcus pyogenes 1 0x108 UFC mL 1 0x108 UFC mL 8 9x10 UFC mL Trichomonas tenax 2 7x10 UFC mL 2 7x10 UFC mL 1 3x105 UFC mL Ureaplasma urealyticum 1 6x108 UFC mL 1 4x108 UFC mL 1 3x108 UFC mL APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System Interferenza Le seguenti sostanze alla concentrazione dell 1 v v tot o p v sono state aggiunte singolarmente a matrici di STM per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e campioni di urina e analizzati con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay lubrificanti intimi da banco spermicidi polveri o spray deodoranti farmaci antimicotici o antiprurito ormoni intravaginali muco gastrico di maiale acido acetico glaciale aceto e liquido semina
19. 1 95 3 99 8 96 8 84 6 99 9 100 97 1 100 PCyt 104 17 0 87 0 163 100 816 100 100 95 8 100 100 82 NC 100 96 3 100 Urna 136 1 0 135 0 0 100 20 100 100 972 100 100 64 NC 100 99 3 100 4 WM 146 1 0 14 0 07 1000 100 100 974 100 100 64 NC 100 99 3 100 TE 165 1 0 164 0 06 100 20 100 100 977 100 100 64 NC 100 99 4 100 PCyt 167 1 0 166 0 06 100 207 100 100 97 7 100 100 64 NC 100 99 4 100 Urna 88 17 1 69 1 205 944 74 2 990 98 6 92 3 997 94 4 76 7 99 8 98 6 93 4 100 Q TW 95 21 1 73 0 221 100845100 08 6 02 7 09 8 955 79 999 100 956 100 TE 98 21 1 76 0 214 100 845 100 98 7 93 0 99 8 95 5 79 5 99 9 100 95 8 100 PCyt 98 22 1 75 0 224 100 85 100 98 7 92 9 99 8 95 7 80 3 99 9 100 95 7 100 urina 105 7 1 97 0 67 100 646 100 99 0 944 99 8 87 5 56 3 996 100 97 2 100 WM 191 18 2 m 0 94 100 824 100 988 959 997 900 71 98 100 98 1 100 TE 193 18 1 174 0 93 100 824 100 99 4 96 B 99 9 94 7 76 6 99 9 100 98 1 100 PCyt 129 9 1 119 0 70 100 70 100 99 2 95 4 99 9 90 0 62 2 99 7 100 97 5 100 Urna 98 4 1 86 O 112 100 74 1 100 98 9 93 8 99 8 91 7 67 0 99 8 100 96 5 100 4 TM 95 n 1 83 0 116 100 741 100 988 936 998 91 7 67 0 99 8 100 964 100 TE 1 0 86 0 143 100 74 1 100 100 957 100 100 75 NC 100 96 5 100 PCyt 98 1 0 87 O 11 2 100 74 1 100 100 95 100 100 75 NC 100 96 5 100 Urna 66 18 1 52 0 197 100 77 2 100 98 1 90 1 99 7 92 9 70 9 998 100 94
20. 502536IT Rev A M Le prestazioni del campione di tampone vaginale non sono state valutate in donne incinte N Le prestazioni dei campioni di tampone vaginale e dei campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt non sono state valutate in donne di et inferiore ai 14 anni O Le prestazioni del TIGRIS DTS System non sono state determinate per altitudini superiori a 2 240 m Ulteriori verifiche volumetriche e studi specifici sul test verranno eseguiti prima o durante il processo di installazione e accettazione in laboratori situati ad un altitudine superiore ai 2 240 m P Le prestazioni del PANTHER System non sono state determinate per altitudini superiori a 2 000 m Q Se un campione presenta un numero ridotto di organismi di 7 vaginalis pu verificarsi una distribuzione disomogenea di questi tricomonadi con conseguente compromissione della capacit di rilevamento dell rRNA di T vaginalis nel materiale raccolto Se i risultati negativi derivanti dal campione non rispecchiano l impressione clinica potrebbe essere necessario un nuovo campione R Ciascun cliente deve convalidare in modo indipendente un processo di trasferimento al LIS S Le prestazioni dei campioni ginecologici raccolti in flacone con soluzione PreservCyt e analizzati con il sistema ThinPrep 2000 non sono state determinate per l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 26 502536IT Rev A Prestazioni del test
21. DTS System stato condotto utilizzando campioni residui campioni sono stati conservati a 70 C per un massimo di 18 mesi prima di essere analizzati con il PANTHER System Sono stati analizzati un totale di 2 082 campioni in tre siti utilizzando due lotti di reagenti del test ed stata calcolata la concordanza con i risultati del TIGRIS DTS System 2 082 campioni erano costituiti da 501 campioni di tamponi vaginali raccolti da un medico 540 campioni di tamponi endocervicali 495 campioni di urina femminile e 546 campioni per Pap test raccolti in liquido PreservCyt Dei 2 056 risultati validi la concordanza positiva complessiva tra il PANTHER System e il TIGRIS DTS System stata del 99 0 la concordanza negativa complessiva del 99 2 e la concordanza combinata complessiva del 99 2 Nella Tabella 10 sono riportate le percentuali di concordanza complessive per tipo di campione e gli intervalli di confidenza al 95 Per tutti i tipi di campione ad eccezione dei campioni di urina la concordanza positiva tra le due piattaforme strumentali stata del 100 Con il campione di urina la concordanza positiva tra il PANTHER System e il TIGRIS DTS System stata del 96 2 La concordanza negativa tra le piattaforme strumentali stata del 99 1 per i tamponi vaginali del 98 1 per i tamponi endocervicali del 100 per i campioni di urina e del 99 6 per i campioni raccolti in liquido PreservCyt La concordanza complessiva tra il PANTHER System e il
22. Enterococcus feacalis 1 5x10 UFC mL 9 2x10 UFC mL 1 5x10 UFC mL 9 2x10 UFC mL 1 0x10 UFC mL 9 2x10 UFC mL Escherichia coli 2 2x108 UFC mL 2 2x108 UFC mL 2 2x108 UFC mL Fusobacterium nucleatum 1 3x108 UFC mL 1 3x108 UFC mL 6 4x10 UFC mL Gardnerella vaginalis 8 2x108 UFC mL 8 2x106 UFC mL 4 1x108 UFC mL Haemophilus ducreyi 2 1x10 UFC mL 2 1x10 UFC mL 3 1x10 UFC mL Virus dell Herpes simplex I 2 0x105 TCIDso mL 2 0x105 TCIDsg mL 2 0x105 TCIDsg mL Virus dell Herpes simplex Il 2 0x105 TCIDso mL 2 0x105 TCIDsg mL 2 0x105 TCIDsg mL HIV 1 HPV 16 SiHa 3 0x10 copie mL 1 0x10 cellule mL 3 0x10 copie mL 1 0x10 cellule mL 3 0x10 copie mL 1 0x10 cellule mL Klebsiella oxytoca 9 6x108 UFC mL 9 6x108 UFC mL 4 8x108 UFC mL Lactobacillus acidophilus 1 0x108 UFC mL 1 0x108 UFC mL 5 2x10 UFC mL Lactobacillus jensenii 1 6x10 UFC mL 1 6x10 UFC mL 8 2x108 UFC mL Lactobacillus vaginalis Listeria monocytogenes 4 6x108 UFC mL 2 1x10 UFC mL 4 6x108 UFC mL 2 1x10 UFC mL 2 3x108 UFC mL 1 0x10 UFC mL Mobiluncus curtisii 4 1x107 UFC mL 4 1x10 UFC mL 4 1x107 UFC mL Mycoplasma hominis 1 0x108 UFC mL 1 0x108 UFC mL 1 0x108 UFC mL Neisseria gonorrhoeae 2 7x108 UFC mL 2 7x108 UFC mL 1 4x108 UFC mL Pentatrichomonas hominis 2 2x106 UFC mL 2 2x1
23. IGRIS DTS System N cat APTIMA System Fluid Preservative Kit conservante del liquido del 302380 sistema Puntali 1000 uL conduttivi rilevatori del livello di liquido 10612513 Tecan Kit procedurale del TIGRIS DTS System 301191 Unit multiprovetta 104772 02 Kit dei sacchi di rifiuti dei puntali MTU 900907 Deflettori di rifiuti delle MTU 900931 Coperchio di rifiuti delle MTU 105523 APTIMA Specimen Transfer Kit kit di trasferimento del campione 301154C per l uso con campioni in soluzione PreservCyt APTIMA Vaginal Swab Specimen Collection Kit kit di raccolta di 301162 campioni di tamponi vaginali APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit kit unisex di raccolta 301041 dei campioni di tampone per campioni di tamponi endocervicali e uretrali maschili APTIMA Urine Specimen Collection Kit kit di raccolta di urina per 301040 campioni di urina maschili e femminili APTIMA Urine Specimen Transport Tubes provette di trasporto dei 105575 campioni di urina per campioni di urina maschili e femminili Candeggina dal 5 al 7 da 0 7 M a 1 0 M soluzione di ipoclorito di sodio Acqua per il TIGRIS DTS System vedere il TIGRIS DTS System Operator s Manual Manuale per l operatore del TIGRIS DTS System per le specifiche tecniche Guanti monouso Standard di calibrazione SysCheck 301078 Tappi penetrabili APTIMA 105668 Tappi non penetrabili sostitutivi 103036A Tappi sostitutivi per kit da 250 test Soluz
24. TIGRIS DTS System Prestazioni del test TIGRIS DTS System Prevalenza La prevalenza di 7 vaginalis in differenti popolazioni dipende dai fattori di rischio dei pazienti quali ad esempio l et lo stile di vita la presenza o l assenza di sintomi e la sensibilit del test nel rilevamento dell infezione Nella Tabella 1 riportato un riepilogo sulla prevalenza di T vaginalis per tipo di campione in base ai risultati dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay nella sperimentazione clinica Tabella 1 Prevalenza di T vaginalis per tipo di campione e sito di raccolta in base ai risultati dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Tipo di mE z campione n positivi n analizzati Tutti i siti Sito 1 Sito 2 Sito 3 Sito 4 Sito 5 Sito 6 Sito 7 Sito 8 Sito 9 Urina 11 8 19 0 6 8 14 3 16 5 0 7 20 5 7 6 12 2 21 2 87 735 11 58 5 73 2 14 16 97 1 136 18 88 8 105 12 98 14 66 TVM 13 6 22 0 9 5 16 7 20 1 0 7 23 2 10 5 12 6 21 9 119 875 13 59 7174 2 12 28 139 1 146 22 95 20 191 12 95 14 64 TE 12 9 19 4 9 5 17 6 21 1 0 6 22 4 9 8 11 3 19 4 119 920 12 62 7 74 3 17 31447 1 165 22 98 19 193 11 97 13 67 11 8 19 4 8 5 17 6 16 3 0 6 23 5 7 8 11 2 19 4 Poyt 96 813 12 62 6 71 3 17 17 104 1 167 23 98 10 129 11 98 13 67 TVM tampone vaginale raccolto da un medico TE tampone endocervicale PCyt campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCy
25. TIMA Trichomonas vaginalis Assay nonch la prevalenza di 7 vaginalis nello stato di infezione in ciascun tipo di campione Le prestazioni sono risultate simili tra i vari tipi di campioni Tabella 2 Caratteristiche delle prestazioni dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Tipo di Sensibilit Specificit 9 VPP VPN n TP FP TN FN Prev campione 95 CI 9596 CI 95 CI 95 CI l 95 2 98 9 92 0 99 4 Pula dest Sed ces SSR cod 11 4 88 4 98 1 97 8 99 5 85 1 96 4 98 5 99 8 100 99 0 93 3 100 TWNUC RE a LR cei To 96 7 100 97 9 99 5 87 6 97 0 99 5 100 100 99 4 95 8 100 TR veu Tele RE IA Tes 96 7 100 98 6 99 7 90 7 98 6 99 6 100 100 99 6 96 9 100 We pim e 9 Wu CO dia 96 0 100 98 8 99 9 91 4 99 3 99 5 100 CI intervallo di confidenza TVM tampone vaginale raccolto da un medico TE tampone endocervicale FN falso negativo FP falso positivo PCyt campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt Prev prevalenza TN vero negativo TP vero positivo Intervallo di confidenza del punteggio 2Intervallo di confidenza del 95 del VPP calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza negativo intervallo di confidenza del 95 del VPN calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza negativo Nella Tabella 3 sono riportati la sensibilit la specificit il valore predittivo positi
26. Trichomonas vaginalis Assay 15 502536IT Rev A PANTHER System PANTHER System Ip mE AA R NUM m zm Di seguito sono riportati i reagenti per l APTIMA n Trichomonas vaginalis Assay per il PANTHER System Accanto al nome dei reagenti sono elencati anche i simboli di identificazione dei reagenti Reagenti e materiali forniti APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Kit 250 test 2 scatole e 1 kit di controlli N cat 303163 100 test 2 scatole e 1 kit di controlli N cat 303209 APTIMA Trichomonas vaginalis Refrigerated Box scatola refrigerata scatola 1 di 2 alla ricezione conservare a temperature comprese tra 2 C e 8 C Quantit Simbolo Componente Kit da Kit da 250 test 100 test A APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification 1 fiala 1 fiala Reagent reagente di amplificazione Primer e nucleotidi essiccati in soluzione tamponata contenente lt 5 di agente di riempimento E APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reagent 1 fiala 1 fiala reagente enzimatico Trascrittasi inversa ed RNA polimerasi essiccate in soluzione tamponata HEPES contenente lt 10 di agente di riempimento P APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reagent 1 fiala 1 fiala reagente sonda Sonde di DNA chemioluminescenti essiccate in soluzione tampone succinato contenente lt 5 di detergente TCR B APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Target 1x0 56 mL 1x 0 30 mL Capture Reagent B reagente di cattura del target Soluzione tamponata contenen
27. anismi Specificit La specificit del APTIMA Trichomonas vaginalis Assay stata valutata analizzando vari microrganismi tra cui la comune flora batterica del tratto genitourinario gli organismi opportunisti e gli organismi strettamente affini Le analisi sono state condotte in matrici di terreno di trasporto dei campioni STM per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e campioni di urina con 25 replicati per ciascun isolato per matrice L elenco degli organismi e le concentrazioni analizzate sono riportati nella Tabella 9 Su ciascuno degli organismi analizzati non stato osservato alcun affetto significativo n di reattivit crociata per l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Sensibilit La sensibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay stata valutata analizzando gli stessi organismi Tabella 9 in matrici di STM per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e campioni di urina a cui stato aggiunto un lisato di 7 vaginalis fino a raggiungere una concentrazione finale di 2 5 TV mL 25 replicati di ciascun isolato per matrice La sensibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay non stata influenzata in modo significativo dalla presenza dei microrganismi analizzati eccetto Trichomonas tenax e Pentatrichomonas hominis nel qual caso sono stati osservati risultati dei segnali inferiori T tenax un batterio commensale della cavit orale e Pentatrichomonas hominis un commensale dell intestino Crasso APTIMA T
28. atrice di campioni di urina Neg N A 108 108 100 1 0 02 246 00 00 03 283 00 00 07 723 0 8 814 HNeg 0 002 107 107 100 33 1 15 9 48 1 4 9 148 00 0 0 7 21 216 9 3 28 0 20 3 61 5 MPos 0 03 108 108 100 621 9 27 2 4 4 33 5 54 37 3 6 0 100 6 16 2 69 4 11 2 134 9 21 7 HPos 1 108 108 100 1208 3 288 24 0 0 00 00 00 140 4 11 6 415 34 1492 123 Concord concordanza Conc concentrazione CV coefficiente di variazione HNeg negativo alto HPos positivo alto MPos positivo moderato Neg negativo RLU unit di luce relativa DS deviazione standard Unit di concentrazione TV mL Nota Il valore di RLU riportato dal software corrisponde all RLU totale misurata diviso 1000 con arrotondamento delle cifre decimali La variabilit da alcuni fattori risultata numericamente negativa Tale circostanza si verifica se la variabilit dovuta a questi fattori molto piccola In questi casi il valore di DS e CV indicato come pari a 0 Sensibilit analitica I pannelli per la valutazione della sensibilit contenenti 0 1 TV mL in matrice di campioni di urina matrice di campioni per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e matrice di tamponi vaginali 120 replicati per matrice sono stati preparati con due ceppi di 7 vaginalis un ceppo sensibile a metronidazolo e un ceppo resistente a metronidazolo Le analisi hanno mostrato una positivit del 100 in tutte le matrici di campioni nonch in entrambi i ceppi di 7 vaginalis Reattivit
29. bilit a bordo di 72 ore J Evitare la contaminazione crociata durante la manipolazione e la conservazione dei reagenti Prima della conservazione applicare sempre a tutti i reagenti ricostituiti nuovi tappi per reagente K Il reagente sonda e il reagente sonda ricostituito sono fotosensibili Conservare i reagenti al riparo dalla luce L Non congelare i reagenti APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 6 502536IT Rev A Raccolta e conservazione dei campioni Raccolta e conservazione dei campioni L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay concepito per rilevare la presenza di 7 vaginalis in campioni di tamponi endocervicali e vaginali raccolti da un medico campioni di urina femminile e campioni per Pap test raccoti in liquido PreservCyt Le prestazioni con campioni diversi da quelli raccolti con i seguenti kit di raccolta dei campioni non sono state valutate e APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit kit unisex di raccolta dei campioni di tampone per campioni di tamponi endocervicali e uretrali maschili e APTIMA Urine Collection Kit kit di raccolta dell urina per campioni di urina maschili e femminili e APTIMA Vaginal Swab Specimen Collection Kit kit di raccolta di campioni di tamponi vaginali e APTIMA Specimen Transfer Kit kit di trasferimento dei campioni per l uso con campioni ginecologici raccolti in soluzione PreservCyt A Istruzioni per la raccolta 1 Per istruzioni specifiche sulla raccolta consultare il
30. ccolti in liquido in soluzione PreservCyt le prestazioni sono risultate simili tra i vari dispositivi di prelievo Tabella 5 Caratteristiche delle prestazioni dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay in campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt per tipo di dispositivo di prelievo Sensibilit Specificit VPP VPN Dispositivo di prelievo n TP FP TN FN Prev i P n 2 s 95 CI 95 CI 95 CI 95 CI Spazzolino per prelievo 100 99 7 98 100 endocervicale E EE a 133 94 2 100 98 5 100 91 8 100 99 1 100 100 99 4 93 9 100 Spatola cytobrush 366 31 2 333 0 8 5 89 0 100 97 8 99 8 81 2 99 2 99 0 100 CI intervallo di confidenza FN falso negativo FP falso positivo Prev prevalenza TN vero negativo TP vero positivo Intervallo di confidenza del punteggio 2Intervallo di confidenza del 95 del VPP calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza positivo intervallo di confidenza del 95 del VPN calcolato dall intervallo di confidenza esatto del 95 per il rapporto di verosimiglianza negativo Valori di predizione positiva e negativa per tassi di prevalenza ipotetici valori predittivi positivi e negativi VPP e VPN dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay per differenti tassi di prevalenza ipotetici sono riportati per ciascun tipo di campione nella Tabella 6 Questi calcoli si basano sulla sensibilit e specificit complessiva stimate per ciascun
31. d en progr APTSMA APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Per l uso diagnostico in vitro Solo per l esportazione dagli USA INDICE Informazioni generali iii 2 Finalit diSO 22 i ie ne O RR EE RCERq UE nd 2 Sommario e spiegazione del test 2 Principi della procedura 2 Avvertenze e precauzioni iii 4 Requisiti di manipolazione e conservazione dei reagenti 6 Raccolta e conservazione dei campioni lesser 7 Interpretazione dell analisi QC Risultati dei pazienti 24 Limitazioni 2 5 5 4 sucre am erac a 25 Prestazioni del test TIGRIS DTS System lslesesesesssse 27 Prevalernza eese ape xp Reed eed e Eun Ps pa aree Rae dra 27 Prestazione clinica 27 Valori di predizione positiva e negativa per tassi di prevalenza ipotetici 30 Distribuzione dei valori di RLU dei controlli APTIMA per Trichomonas vaginalis 31 Riproducibilit del dosaggio 0 31 Sensibilit analitica 2l 32 Reattivit crociata in presenza di microrganismi 32 Interferenza iii eek er eee erred Rede E Re dos ds oue Rak od i 34 Stabilit dei campioni LL 34 Prestazioni del PANTHER System Assay sseseseseseeeee 35 Studio di concordanza clinica 35 Riproducibilit del dosaggio n anaana aea 35 Sensibilit zanalitica iii i e DE 36 Reattivit crociata in presenza di microrganismi 36
32. ducibilit aggiungendo la quantit appropriata di lisato di T vaginalis alla matrice di campioni di urina o di campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt Le concentrazioni finali di T vaginalis variavano da 0 a 1 TV mL Nella Tabella 8 sono riportati per ciascun elemento del pannello i dati relativi all RLU ossia media deviazione standard DS e coefficiente di variazione CV tra i siti gli operatori i lotti le liste di lavoro all interno delle liste di lavoro e complessivi totali riportata inoltre la percentuale di concordanza con i risultati attesi Nelle analisi sono stati inclusi i campioni con risultati validi APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System Tabella 8 Studio di riproducibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Tra gli Tra le liste Alluntemo Tra i siti Die Tra i lotti delle liste Totale operatori di lavoro i di lavoro Concord Media CV 96 CV 96 CV 96 CV 96 CV 96 CV 96 N D D D D D D PM M Ru w S w S Jo S w S My S w Campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt in matrice Neg 106 100 0 2 0 1 1 56 8 0 0 0 0 0 0 0 0 04 21 3 0 8 42 5 15 744 HNeg 106 92 5 58 3 172 294 0 0 0 0 11 1 19 1 0 0 0 0 22 2 38 0 302 517 MPos 108 98 1 367 0 32 8 8 9 0 0 0 0 57 5 15 7 51 0 13 9 140 0 38 3 163 6 44 6 HPos 107 100 0 1110 4 53 9 4 9 0 0 0 0 109 6 9 9 609 5 77 1 6 9 156 8 14 1 Campioni di urina in
33. e del TIGRIS DTS System e nelle Note procedurali APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 14 502536IT Rev A TIGRIS DTS System Note procedurali A Controlli 1 Perlavorare correttamente con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay software i controlli sono richiesti all inizio e al termine di una lista di lavoro Il controllo negativo APTIMA per Trichomonas deve trovarsi nella provetta che occupa la prima e la penultima posizione dell ultima rastrelliera della lista di lavoro Il controllo positivo APTIMA per Trichomonas deve trovarsi nella provetta che occupa la seconda e l ultima posizione dell ultima rastrelliera della lista di lavoro 2 Ciascuna provetta di controllo pu essere analizzata una sola volta tentativi di pipettare pi di una volta dalla provetta possono causare errori di volume insufficiente B Temperatura Per temperatura ambiente si intende una temperatura compresa tra 15 C e 30 C C Guanti Come in qualsiasi sistema di reazione il talco eccessivo in alcuni guanti pu causare la contaminazione delle provette aperte Si consigliano guanti privi di talco D Protocollo di monitoraggio della contaminazione in laboratorio per il TIGRIS DTS System Esistono numerosi fattori specifici del laboratorio che possono contribuire alla contaminazione tra cui il volume di analisi il flusso di lavoro la prevalenza di una malattia e altre attivit connesse al laboratorio Quando si stabilisce la frequenza di monitoraggio
34. ente a Abbinare ciascuna soluzione di ricostituzione al proprio reagente liofilizzato Prima di fissare il collare di ricostituzione accertarsi che la soluzione di ricostituzione e il reagente abbiano l etichetta dello stesso colore b Controllare i numeri di lotto sulla scheda dei codici a barre del lotto master per assicurarsi che siano abbinati i reagenti appropriati c Aprire la fiala del reagente liofilizzato e inserire con fermezza l estremit indentata del collare di ricostituzione nell apertura della fiala Figura 2 fase 1 d Aprire il flacone della soluzione di ricostituzione corrispondente e appoggiare il tappo su una superficie di lavoro pulita e coperta e Tenendo il flacone della soluzione di ricostituzione sul banco inserire con fermezza l altra estremit del collare di ricostituzione nell apertura del flacone Figura 2 fase 2 f Capovolgere lentamente i flaconi assemblati Attendere che la soluzione scenda dal flacone alla fiala di vetro Figura 2 fase 3 g Agitare ruotando delicatamente la soluzione nel flacone per miscelarla Evitare la formazione di schiuma mentre si agita il flacone Figura 2 fase 4 h Attendere che il reagente liofilizzato passi in soluzione quindi capovolgere di nuovo i due flaconi assemblati inclinandoli ad un angolo di 45 per ridurre al minimo la formazione di schiuma Figura 2 fase 5 Lasciar ridiscendere tutto il liquido nel flacone di plastica i Rimuovere il col
35. er la cattura del target l amplificazione e le fasi di rilevamento del test Secondo le linee guida o i requisiti dei regolamenti nazionali regionali e o locali o degli enti certificanti possono essere inclusi ulteriori controlli per la lisi cellulare e la stabilizzazione dell RNA Il controllo positivo per Trichomonas APTIMA contrassegnato come PC CONTROL TRICH contiene rRNA di T vaginalis non infettivo controlli APTIMA per Trichomonas vaginalis devono produrre i seguenti risultati del test Controllo RLU totali x1000 Risultato per T vaginalis NC Control TRICH 0 e 20 Negativo PC Control TRICH 500 e 2400 Positivo or seilim P rr i gt i Pe t oco i m rsc sstciczcozizeni Se la RLU misurata sul TIGRIS DTS System o PANTHER System compresa tra 0 e 999 nella colonna RLU totali 000s del rapporto della sessione di analisi viene riportato il risultato 0 valori RLU misurati inferiori a 690 vengono riportati come non validi valori RLU compresi tra 690 e 999 vengono riportati come validi Ciascun laboratorio deve implementare le appropriate procedure di controllo per soddisfare i requisiti dei regolamenti CLIA sezione 493 1256 Nota Per assistenza in caso di controlli fuori range contattare il servizio di assistenza tecnica di Gen Probe APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 24 502536IT Rev A Limitazioni A L uso di questo test va limitato al personale che stato add
36. estrato nella relativa procedura La mancata osservanza alle istruzioni fornite in questo foglietto illustrativo pu determinare risultati erronei B Gli effetti dell uso di tamponi e lavande vaginali nonch le variabili nella raccolta dei campioni non sono stati valutati per il loro impatto sul rilevamento di Trichomonas vaginalis C campioni di muco positivi a TV possono mostrare una diminuzione dei valori di RLU Per garantire un adeguato campionamento endocervicale necessario rimuovere il muco in eccesso D La raccolta di campioni di urina di tamponi vaginali e di campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt non concepita per sostituire gli esami cervicali e i campioni endocervicali per la diagnosi di infezioni dell apparato urogenitale femminile Le pazienti potrebbero essere affette da cervicite uretrite infezioni del tratto urinario o infezioni vaginali dovute ad altre cause o a infezioni concomitanti ad altri agenti patogeni E Questo test stato provato utilizzando solo i tipi di campioni indicati Le prestazioni con altri tipi di campioni non sono state valutate F Risultati affidabili dipendono da un appropriata raccolta dei campioni Poich il sistema di trasporto impiegato per questo test non permette la valutazione microscopica dell adeguatezza dei campioni necessario addestrare i medici sulle appropriate tecniche di raccolta dei campioni Per le istruzioni vedere Raccolta e conservazio
37. etta del campione di urina non rientra fra le due linee indicatrici nere il campione deve essere rifiutato Non forare una provetta troppo piena d Se una provetta del campione di urina contiene precipitato riscaldare il campione a 37 C per un massimo di 5 minuti Nel caso in cui il precipitato non rientri in soluzione controllare visivamente che il precipitato non impedisca il trasferimento del campione Nota La mancata osservanza dei procedimenti 4a 4c potrebbe determinare un traboccamento di liquido dal tappo della provetta del campione Nota Da ciascuna provetta del campione possono essere analizzate fino a tre aliquote separate tentativi di pipettare pi di 3 aliquote dalla provetta del campione possono causare errori di trattamento E Preparazione del sistema 1 Impostare il sistema in base alle istruzioni fornite nel PANTHER System Operator s Manual Manuale per l operatore del PANTHER System e nelle Note procedurali 2 Caricare i campioni APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 21 502536IT Rev A PANTHER System Note procedurali A Controlli 1 Per lavorare in modo adeguato con il PANTHER APTIMA Assay software necessaria una coppia di controlli Il controllo positivo per Trichomonas APTIMA e il controllo negativo per Trichomonas APTIMA possono essere caricati in qualunque posizione della rastrelliera o in qualunque corsia dello scomparto campioni del PANTHER System Il pipettaggio dei campioni dei pazienti avr
38. foglietto illustrativo del relativo kit di raccolta dei campioni B Trasporto e conservazione dei campioni prima dell analisi 1 Campioni di tampone a Dopo la raccolta trasportare e conservare il tampone fino al momento dell analisi nella provetta di trasporto del campione di tampone a temperature comprese fra 2 Ce30 C b Campioni peri test entro 60 giorni dalla raccolta Qualora sia necessario conservare i campioni per un periodo pi lungo congelare la provetta di trasporto del campione as 20 C per ulteriori 12 mesi 2 Campioni di urina a campioni di urina che si trovano ancora nel contenitore di raccolta principale devono essere trasportati al laboratorio a temperature comprese fra 2 C e 30 C Trasferire il campione di urina nella provetta di trasporto del campione di urina APTIMA entro 24 ore dalla raccolta b Conservare i campioni di urina a una temperatura compresa tra 2 C e 30 C ed eseguire il test entro 30 giorni dal trasferimento Qualora sia necessaria una conservazione per un periodo pi lungo conservare il campione di urina analizzato a lt 20 C per un massimo di 12 mesi dal trasferimento 3 Campioni raccolti in soluzione PreservCyt a Trasportare e conservare i campioni raccolti in soluzione PreservCyt a una temperatura compresa tra 2 C e 30 C per un massimo di 30 giorni b I campioni raccolti in soluzione PreservCyt devono essere trasferiti in una provetta di trasporto del cam
39. glietto illustrativo Le caratteristiche delle prestazioni dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sono state valutate confrontando i risultati con un algoritmo dello stato di paziente infetto Nell algoritmo la designazione di un soggetto come infetto o non infetto da 7 vaginalis stata effettuata sulla base dei risultati dei campioni di tamponi vaginali analizzati in coltura e o mediante esame microscopico a fresco Per determinare lo stato di paziente infetto era necessaria la positivit di almeno uno dei risultati del test di riferimento Per determinare lo stato di paziente non infetto entrambi i test di riferimento dovevano risultare negativi Dei campioni valutabili sono stati analizzati con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay un totale di 738 campioni di urina 877 tamponi vaginali 922 tamponi endocervicali e 813 campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt campioni con risultati iniziali non validi sono stati analizzati nuovamente Per tre 3 campioni di urina due 2 tamponi vaginali e due 2 tamponi endocervicali sono stati ottenuti risultati finali non validi a causa di errori dell hardware o problemi dei campioni questi campioni sono stati esclusi dalle analisi APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 27 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System Nella Tabella 2 sono riportati la sensibilit la specificit il valore predittivo positivo VPP e il valore predittivo negativo VPN dell AP
40. i siti di raccolta sono state riportate variazioni nella prevalenza Tabella 4 Caratteristiche delle prestazioni dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay per sito di raccolta A Goni SR VIEN RI pine i a RA pun ii Urna 58 10 1 46 1 190 909 62 3 984 97 9 88 9 99 6 90 9 66 5 99 7 97 9 91 2 99 9 TW 89 2 1 46 0 203 1000758100 97 9 68 9 99 6 92 3 69 3 09 8 100 93 7 100 TE 62 12 0 50 0 194 100 758 100 100 929 100 100 77 NC 100 94 0 100 PCyt 62 12 0 50 0 194 100 758 100 100 92 9 100 100 77 NC 100 94 0 100 Urina 78 5 0 67 1 82 83 3 43 6 97 0 100 946 100 100 60 NC 98 5 94 6 100 M_n 6 1 67 0 81 10061000 98 592 99 85 7 52 7 09 6 100 96 1 100 TE 74 6 1 67 0 81 100 610 100 98 92 1 99 7 857 52 7 996 100 96 1 100 PCyt 71 6 0 65 0 85 100 610 100 100 944 100 100 62 NC 100 959 100 Urina 14 1 1 12 0 71 100 207 100 92 3 66 798 6 50 0 8 97 5 100 92 1 100 M_n 2 0 10 0 167 1000942100 100 72 2 100 100 82 NC 100 85 100 TE 17 2 1 144 0 148 100 942 100 93 3 70 2 98 8 66 7 19 9 98 8 100 89 5 100 PCyt 17 2 1 14 0 148 100 34 2 100 93 3 70 2 98 8 66 7 19 9 98 8 100 89 5 100 Urna 97 15 1 80 1 165 938 717 989 98 8 93 3 99 8 93 8 74 4 99 8 988 94 4 100 a M_I 27 1 Mi 0 194 10087 5100 99 1 95 1 99 8 96 4 832 999 100 97 0 100 TE 147 30 1 116 0 204 100 88 6 100 99
41. ilevatori del livello di liquido 10612513 Tecan APTIMA Specimen Transfer Kit kit di trasferimento del campione 301154C per l uso con campioni in soluzione PreservCyt APTIMA Vaginal Swab Specimen Collection Kit 301162 kit di raccolta di campioni di tamponi vaginali APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit 301041 kit unisex di raccolta dei campioni di tampone per campioni di tamponi endocervicali e uretrali maschili APTIMA Urine Specimen Collection Kit kit di raccolta di urina 301040 per campioni di urina maschili e femminili APTIMA Urine Specimen Transport Tubes 105575 provette di trasporto dei campioni di urina per campioni di urina maschili e femminili Candeggina dal 5 al 7 da 0 7 M a 1 0 M soluzione di ipoclorito di sodio Guanti monouso Standard di calibrazione SysCheck 301078 Tappi penetrabili APTIMA 105668 Tappi non penetrabili sostitutivi 103036A Tappi sostitutivi per kit da 250 test Soluzioni di amplificazione e di ricostituzione del reagente sonda CL0041 100 tappi Soluzione di ricostituzione del reagente enzimatico 501616 100 tappi TCR e reagente di selezione CL0040 100 tappi Tappi sostitutivi per kit da 100 test Soluzioni di amplificazione di ricostituzione del reagente sonda e del reagente enzimatico CL0041 100 tappi TCR e reagente di selezione 501604 100 tappi Materiali facoltativi N cat APTIMA Trichomonas vaginalis Controls Kit kit dei controlli 302807 Trich
42. ione a temperatura ambiente riscaldare il flacone chiuso ad una temperatura che non superi i 60 C per un periodo compreso fra 1 e 2 minuti Al termine di questa fase di riscaldamento il reagente sonda pu essere utilizzato anche se resta un precipitato residuo Miscelare il reagente sonda per inversione APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 13 502536IT Rev A TIGRIS DTS System 3 Miscelare a fondo ciascun reagente delicatamente per inversione prima di caricarlo nel sistema Evitare la formazione di schiuma mentre si capovolgono i reagenti 4 Evitare di riempire i flaconi dei reagenti fino all orlo Il TIGRIS DTS System riconosce e rifiuta i flaconi riempiti fino all orlo D Manipolazione dei campioni 1 Prima del trattamento lasciare che i controlli e i campioni raggiungano la temperatura ambiente 2 Non miscelare i campioni con vortex 3 Controllare visivamente che ciascuna provetta del campione soddisfi i seguenti requisiti a La presenza di un singolo tampone di raccolta APTIMA blu in una provetta di trasporto dei campioni di tampone unisex b La presenza di un singolo tampone di raccolta APTIMA rosa in una provetta di trasporto dei campioni di tampone vaginale c Un volume finale di urina compreso tra le linee di riempimento nere di una provetta di trasporto del campione di urina d L assenza di un tampone nella provetta di trasporto dei campioni APTIMA per i campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzi
43. ione diverse da quelle raccomandate non stata determinata Se il laboratorio riceve una provetta di trasporto del campione di tampone che non contiene alcun tampone o contiene due tamponi un tampone di pulizia o un tampone non fornito da Gen Probe il campione va rifiutato Pertinenti al test O 9 ug EN ou Conservare i reagenti alle temperature specificate La prestazione del test pu essere compromessa dall uso di reagenti conservati in modo improprio Adottare le precauzioni universali durante la manipolazione dei controlli Evitare la contaminazione microbica e da ribonucleasi dei reagenti Non usare questo kit dopo la data di scadenza Non scambiare mescolare o combinare reagenti provenienti da kit con numeri di lotto diversi controlli e i reagenti possono essere scambiati APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 5 502536IT Rev A Requisiti di manipolazione e conservazione dei reagenti A seguenti reagenti sono stabili se vengono conservati a temperature comprese fra 2 C e 8 C APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification Reagent reagente di amplificazione APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme Reagent reagente enzimatico APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reagent reagente sonda APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Target Capture Reagent B reagente di cattura del target Controlli APTIMA Trichomonas vaginalis B seguenti reagenti sono stabili quando vengono conservati a temperatura ambiente compresa fra 15
44. ioni di amplificazione e di ricostituzione del reagente sonda CL0041 100 tappi Soluzione di ricostituzione del reagente enzimatico 501616 100 tappi Soluzioni per il TCR e il reagente di selezione CL0040 100 tappi Tappi sostitutivi per kit da 100 test Soluzioni di amplificazione di ricostituzione del reagente sonda e del reagente enzimatico CL0041 100 tappi TCR e reagente di selezione 501604 100 tappi Materiali facoltativi N cat APTIMA Trichomonas vaginalis Controls Kit kit dei controlli 302807 Trichomonas vaginalis APTIMA Potenziatore di candeggina GEN PROBE per la pulizia 302101 per la pulizia abituale di superfici e attrezzature APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 11 502536IT Rev A TIGRIS DTS System Procedura di analisi con il TIGRIS DTS System Nota Consultare il TIGRIS DTS System Operator s Manual Manuale per l operatore del TIGRIS DTS System per ulteriori informazioni procedurali su questo sistema A Preparazione dell area di lavoro 1 Pulire le superfici di lavoro destinate alla preparazione di reagenti e campioni Passare le superfici di lavoro con un panno imbevuto di soluzione di ipoclorito di sodio a concentrazioni comprese fra 2 5 e 3 5 da 0 35 M a 0 5 M Lasciare l ipoclorito di sodio a contatto con le superfici per almeno 1 minuto quindi risciacquare con acqua Non lasciare asciugare la soluzione di ipoclorito di sodio Coprire la superficie del banco sul quale verranno preparati
45. iportata sulla provetta di trasferimento I campioni potrebbero essere infettivi Nell eseguire questo test adottare le precauzioni universali Metodi adeguati di manipolazione e smaltimento devono essere stabiliti dal direttore del laboratorio L esecuzione di questa procedura diagnostica consentita solo a personale adeguatamente addestrato alla manipolazione di materiali infettivi J Durante le fasi di manipolazione dei campioni evitare la contaminazione crociata campioni possono contenere livelli di organismi estremamente alti Assicurarsi che i contenitori dei campioni non vengano in contatto reciproco e gettare i materiali facendo attenzione a non passare sopra i contenitori aperti Cambiare i guanti se vengono in contatto con i campioni K In certe condizioni si pu verificare una perdita di liquido dai tappi delle provette di trasporto APTIMA quando questi vengono forati Per maggiori informazioni fare riferimento alla procedura di analisi appropriata APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 4 502536IT Rev A Avvertenze e precauzioni BS Dopo l aggiunta dell urina il livello del liquido nella provetta di trasporto dell urina deve rientrare fra le due linee indicatrici nere marcate sull etichetta della provetta In caso contrario il campione va rifiutato Mantenere le corrette condizioni di conservazione durante la spedizione del campione per assicurarne l integrit La stabilit del campione in condizioni di spediz
46. lare di ricostituzione e la fiala di vetro Figura 2 fase 6 j Tappare il flacone di plastica Annotare sull etichetta le iniziali dell operatore e la data di ricostituzione Figura 2 fase 7 k Gettare il collare di ricostituzione e la fiala di vetro Figura 2 fase 8 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 19 502536IT Rev A PANTHER System Avvertenza Evitare la formazione di schiuma durante la ricostituzione dei reagenti La schiuma pregiudica il rilevamento del livello di liquido nel PANTHER System E el d o La Na i m CRI 5 Z d U X __ Figura 2 Processo di ricostituzione per il TIGRIS DTS System o il PANTHER System 2 Preparazione del reagente di cattura del target di lavoro Working Target Capture Reagent wTCR a Accoppiare i flaconi appropriati di TCR e TCR B b Controllare i numeri di lotto dei reagenti sulla scheda dei codici a barre del lotto master per assicurarsi che siano abbinati i reagenti appropriati c Aprire il flacone di TCR e appoggiare il tappo su una superficie di lavoro pulita e coperta d Aprire il flacone di TCR B e versarne l intero contenuto nel flacone di TCR normale che nel flacone di TCR B resti una piccola quantit di liquido e Tappare il flacone di TCR e agitare la soluzione ruotandola delicatamente per miscelare il contenuto Evitare la formazione di schiuma durante questa fase f Registrare sull etiche
47. le Campioni di sangue intero sono stati utilizzati alla concentrazione del 10 v v tot e il controllo per l esame delle urine KOVA Trol High Abnormal con urobilinogeno stato sostituito ai campioni di urina per analizzare livelli elevati di proteine glucosio chetoni bilirubina nitriti e urobilinogeno Non stata osservata alcuna interferenza in nessuna delle sostanze analizzate con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay eccetto per il muco gastrico di maiale che ha mostrato un risultato del segnale pi basso quando presente a una concentrazione finale dell 1 v v tot o p v Stabilit dei campioni I dati a sostegno delle condizioni raccomandate di spedizione e conservazione per tamponi vaginali campioni per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e campioni di urina sono stati generati con campioni clinici negativi aggiunti a T vaginalis fino a raggiungere una concentrazione finale di 250 TV mL In tutte le matrici tamponi vaginali campioni per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e campioni di urina stata osservata una positivit superiore al 95 per ogni periodo di tempo e temperatura analizzati a conferma della validit dei tempi e delle temperature di conservazione massimi descritti nel Raccolta e conservazione dei campioni APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 34 502536IT Rev A Prestazioni del PANTHER System Assay Studio di concordanza clinica Uno studio di concordanza clinica tra il PANTHER System e il TIGRIS
48. led Am J Obstet Gynecol 190 1 281 290 Cotch M F J G Pastorek II R P Nugent S L Hillier R S Gibbs D H Martin et al 1997 Trichomonas vaginalis associated with low birth weight and preterm delivery The Vaginal Infections and Prematurity Study Group Sex Transm Dis 24 353 360 4 Sorvillo F J A Kovacs P Kerndt A Stek L Muderspach and L Sanchez Keeland 1998 Risk factors for trichomoniasis among women with HIV infection at a public clinic in Los Angeles County Implications for HIV prevention Am J Trop Med Hyg 58 495 500 5 Niccolai L M J J Kopicko A Kassie H Petros R A Clark and P Kissinger 2000 Incidence and predictors of reinfection with Trichomonas vaginalis in HIV infected women Sex Transm Dis 27 284 288 6 Nye M B J R Schwebke and B A Body 2009 Comparison of APTIMA Trichomonas vaginalis transcription mediated amplification to wet mount microscopy culture and polymerase chain reaction for diagnosis of trichomoniasis in men and women Am J Obstet Gynecol 200 188 e1 188 e7 7 Wendel K A E J Erbelding C A Gaydos and A M Rompalo 2002 Trichomonas vaginalis polymerase chain reaction compared with standard diagnostic and therapeutic protocols for detection and treatment of vaginal trichomoniasis Clin Infect Dis 35 5 576 580 sl CE EMERGO EUROPE Gen Probe Incorporated Molenstraat 15 San Diego CA 92121 USA 2513 BH L Aia Paesi Bassi Infor
49. lis 1x108 UFC mL Staphylococcus aureus 1x108 UFC mL Haemophilus ducreyi 1x108 UFC mL Staphylococcus epidermidis 1x108 UFC mL Virus dell Herpes simplex I 2x105 TCIDgo mL Streptococcus agalactiae 1x106 UFC mL Virus dell Herpes simplex Il 2x105 TCIDgo mL Trichomonas tenax 1x106 cellule mL HIV 1 2 5x106 copie mL Ureaplasma urealyticum 1x106 UFC mL Interferenza Le seguenti sostanze sono state aggiunte singolarmente a un terreno di trasporto dei campioni fino a raggiungere una concentrazione finale dell 196 v v tot o p v lubrificanti intimi deodoranti intimi spermicidi antimicotici ormoni intravaginali muco gastrico di maiale liquido seminale di 25 donatori e sangue intero concentrazione finale del 10 Gli effetti dei metaboliti dell urina sono stati analizzati aggiungendo il controllo per l esame delle urine KOVA Trol I High Abnormal con urobilinogeno diluito nel terreno di trasporto dell urina TTU al posto dell urina Questo materiale di controllo per l esame delle urine a base di urina umana contiene sostanze potenzialmente interferenti quali ad esempio proteine albumina bilirubina glucosio chetoni eritrociti nitriti urobilinogeno e leucociti L acido acetico glaciale stato analizzato aggiungendolo al terreno di trasporto dei campioni con PreservCyt concentrazione finale del 10 Non stata osservata alcuna interferenza in nessuna delle sostanze analizzate co
50. lis Assay 23 502536IT Rev A Interpretazione dell analisi QC Risultati dei pazienti Interpretazione dell analisi QC Risultati dei pazienti A B Interpretazione dell analisi risultati del test del saggio vengono interpretati automaticamente dall APTIMA Trichomonas Assay Software del TIGRIS DTS System o del PANTHER System Un risultato dell analisi pu essere negativo positivo o non valido secondo quanto determinato in base alle RLU totali rilevate nella fase di rilevamento vedere sotto Un risultato dell analisi pu essere non valido a causa di valori RLU che non rientrano negli intervalli normali attesi risultati iniziali dell analisi non validi vanno ripetuti Riportare il primo risultato valido Interpretazione dell analisi RLU totali x1000 Negativo da 0 a 100 Positivo da 100 a 2400 Non valido 0 oppure 2400 Se la RLU misurata sul TIGRIS DTS System o PANTHER System compresa tra 0 e 999 nella colonna RLU totali 000s del rapporto della sessione di analisi viene riportato il risultato 0 valori RLU misurati inferiori a 690 vengono riportati come non validi valori RLU compresi tra 690 e 999 vengono riportati come validi Risultati di controllo della qualit e accettabilit Il controllo negativo per Trichomonas APTIMA contrassegnato come NC CONTROL TRICH e il controllo positivo per Trichomonas APTIMA contrassegnato come PC CONTROL TRICH fungono da controlli p
51. matrice Neg 108 100 0 2 1 10 45 7 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 3 62 4 17 773 HNeg 107 97 2 60 2 11 2 18 7 0 0 0 0 96 15 9 9 8 16 2 12 0 19 9 214 35 6 MPos 107 1000 781 6 532 638 0 0 0 0 666 8 5 560 72 83 7 10 7 131 9 16 9 HPos 108 98 1 11228 495 44 150 13 119 3 10 6 1092 9 7 106 9 9 5 200 17 9 Concord concordanza Conc concentrazione CV coefficiente di variazione HNeg negativo alto HPos positivo alto MPos positivo moderato Neg negativo RLU unit di luce relativa DS deviazione standard Nota Il valore di RLU riportato dal software corrisponde all RLU totale misurata diviso 1000 con arrotondamento delle cifre decimali La variabilit da alcuni fattori risultata numericamente negativa Tale circostanza si verificata se la variabilit dovuta a questi fattori risultata molto piccola In questi casi il valore di DS e CV indicato come pari a 0 Sensibilit analitica Gli elementi del pannello per la valutazione della sensibilit contenenti 0 1 TV mL in matrice di campioni di urina matrice di campioni per Pap test raccolti in liquido PreservCyt e matrice di tamponi vaginali 90 replicati per matrice sono stati preparati con due ceppi di 7 vaginalis un ceppo sensibile a metronidazolo e un ceppo resistente a metronidazolo Le analisi hanno mostrato una positivit del 100 in tutte le matrici di campioni nonch in entrambi i ceppi di 7 vaginalis Reattivit crociata in presenza di microrg
52. mazioni per contattarci negli USA e nel resto del mondo Servizio clienti 1 858 410 8002 customerservice gen probe com Assistenza tecnica 1 858 410 8511 technicalsupport gen probe com Numero verde per chi chiama da USA e Canada Servizio clienti 1 800 523 5001 Assistenza tecnica 1 888 484 4747 www gen probe com GEN PROBE GEN PROBE e relativo logo APTIMA APTIMA e relativo logo DTS PANTHER e TIGRIS sono marchi commerciali di Gen Probe Incorporated PRESERVCYT e THINPREP sono marchi commerciali di Cytyc Corporation KOVA TROL un marchio commerciale di Hycor Biomedical Inc Qualsiasi altro nome di marchio che potrebbe apparire in questo foglietto illustrativo appartiene al suo rispettivo titolare 2009 2012 Gen Probe Incorporated 502536IT Rev A 2011 12 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 38 502536IT Rev A
53. mblati Lasciar scendere la soluzione dal flacone di ricostituzione nella fiala di vetro del reagente Figura 1 fase 3 Agitare ruotando delicatamente la soluzione nella fiala per miscelarla Evitare la formazione di schiuma durante questa fase Figura 1 fase 4 Attendere che il reagente liofilizzato passi in soluzione quindi capovolgere di nuovo i due flaconi assemblati inclinandoli ad un angolo di 45 per ridurre al minimo la formazione di schiuma Figura 1 fase 5 Lasciar ridiscendere tutto il liquido nel flacone di plastica Rimuovere il collare di ricostituzione e la fiala di vetro Figura 1 fase 6 Chiudere il flacone di plastica con il relativo tappo Figura 1 fase 7 Annotare sull etichetta le iniziali dell operatore e la data di ricostituzione Gettare il collare di ricostituzione e la fiala di vetro Figura 1 fase 8 APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 12 502536IT Rev A TIGRIS DTS System Avvertenza Evitare la formazione di schiuma durante la ricostituzione dei reagenti La schiuma pregiudica il rilevamento del livello di liquido nel TIGRIS DTS System DI o Lo Na i m CRI 5 Z d U X __ Figura 1 Processo di ricostituzione per il TIGRIS DTS System o il PANTHER System 2 Preparazione del reagente di cattura del target di lavoro Working Target Capture Reagent wTCR a Accoppiare i flaconi appropriati di TCR e TCR B b Con
54. n l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay eccetto per il muco gastrico di maiale che ha mostrato un risultato del segnale pi basso quando presente a una concentrazione finale dell 196 v v tot o p v Contaminazione crociata nel PANTHER System Per dimostrare che il PANTHER System in grado di ridurre al minimo il rischio di risultati falsi positivi derivanti da contaminazione crociata stato condotto uno studio analitico in pi giornate utilizzando i pannelli su tre PANTHER System a cui stato aggiunto un lotto di reagenti per l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Nello studio sono stati utilizzati pi del 20 di campioni di 7 vaginalis a elevata concentrazione di target contenenti 10 000 TV mL APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 37 502536IT Rev A Bibliografia che sono stati posizionati tra i campioni negativi contenenti TTC Durante lo studio 698 campioni a elevata concentrazione di target e 2 266 campioni negativi sono stati analizzati sui tte PANTHER System Sono stati ottenuti 0 risultati falsi positivi per una percentuale di contaminazione crociata pari allo 0 Questi risultati dimostrano che nel PANTHER System la contaminazione crociata ridotta al minimo Bibliografia 1 Weinstock H S Berman and W Cates Jr 2004 Sexually transmitted diseases among American youth incidence and prevalence estimates 2000 Perspect Sex Reprod Health 36 1 6 10 2 Soper D 2004 Trichomoniasis under control or undercontrol
55. ne dei campioni Per informazioni dettagliate consultare le relative istruzioni per l uso G Il successo o il fallimento terapeutico non possono essere determinati con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay perch l acido nucleico potrebbe persistere dopo la terapia antimicrobica appropriata H I risultati ottenuti con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay devono essere interpretati congiuntamente ad altri dati clinici disponibili al medico I Un risultato negativo non preclude una possibile infezione perch i risultati dipendono da un appropriata raccolta dei campioni risultati dell analisi possono essere influenzati da un inadeguata raccolta dei campioni da errori tecnici scambi di campioni o livelli target inferiori al limite di rilevamento del test J Un risultato negativo non preclude la possibilit di un infezione perch la capacit di rilevamento dell rRNA di T vaginalis pu essere influenzata dalla presenza nel campione di Trichomonas tenax o Pentatrichomonas hominis Per i dettagli vedere Reattivit crociata in presenza di microrganismi K L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay fornisce risultati qualitativi Non pu quindi essere tracciata una correlazione fra l intensit di un segnale positivo del test e il numero di organismi in un campione L L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay non stato convalidato per l uso con campioni di tamponi vaginali raccolti dalle pazienti APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 25
56. nismi analizzati con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay nel PANTHER System Concentrazione Concentrazione Microrganismo Microrganismo Acinetobacter Iwoffi Actinomyces israelii 1x108 UFC mL 1x106 UFC mL HPV 16 HPV 6 2 5x108 copie mL 2 5x106 copie mL Atopobium vaginae 1x106 UFC mL Klebsiella pneumoniae 1x106 UFC mL Bacteroides fragilis 1x106 UFC mL Lactobacillus acidophilus 1x106 UFC mL Bifidobacterium adolescentis 1x106 UFC mL Lactobacillus crispatus 1x106 UFC mL Campylobacter jejuni 1x108 UFC mL Listeria monocytogenes 1x106 UFC mL Candida albicans 1x108 UFC mL Mobiluncus curtisii 1x106 UFC mL Chlamydia trachomatis 1x106 UFC mL Mycoplasma genitalium 2 5 x108 copie mL Clostridium difficile 1x106 UFC mL Mycoplasma hominis 1x106 UFC mL Corynebacterium genitalium 1x106 UFC mL Neisseria gonorrhoeae 1x106 UFC mL Cryptococcus neoformans 1x106 UFC mL Pentatrichomonas hominis 1x106 cellule mL Cytomegalovirus 2x105 TCIDgy mL Peptostreptococcus magnus 1x108 UFC mL Dientamoeba fragilis 1x106 UFC mL Prevotella bivia 1x106 UFC mL Enterobacter cloacae 1x106 UFC mL Propionibacterium acnes 1x106 UFC mL Enterococcus feacalis 1x106 UFC mL Proteus vulgaris 1x106 UFC mL Escherichia coli 1x106 UFC mL Pseudomonas aeruginosa 1x106 UFC mL Gardnerella vagina
57. omonas vaginalis APTIMA Potenziatore di candeggina GEN PROBE per la pulizia 302101 per la pulizia abituale di superfici e attrezzature APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 18 502536IT Rev A PANTHER System Procedura di analisi per il PANTHER System Nota Per ulteriori informazioni procedurali per il PANTHER System vedere il PANTHER System Operator s Manual Manuale per l operatore del PANTHER System A Preparazione dell area di lavoro 1 Pulire le superfici di lavoro destinate alla preparazione di reagenti e campioni Passare le superfici di lavoro con un panno imbevuto di soluzione di ipoclorito di sodio a concentrazioni comprese fra 2 5 e 3 5 da 0 35 M a 0 5 M Lasciare l ipoclorito di sodio a contatto con le superfici per almeno 1 minuto quindi risciacquare con acqua Non lasciare asciugare la soluzione di ipoclorito di sodio Coprire la superficie del banco sul quale verranno preparati i reagenti e i campioni con coperture da banco di laboratorio pulite assorbenti e con parte posteriore plastificata B Ricostituzione dei reagenti Preparazione di un nuovo kit Nota La ricostituzione dei reagenti andrebbe eseguita prima di iniziare qualsiasi lavoro sul PANTHER System 1 Per ricostituire i reagenti di amplificazione enzimatico e sonda unire i flaconi di reagente liofilizzato alla soluzione di ricostituzione Se refrigerate prima dell uso attendere che le soluzioni di ricostituzione raggiungano la temperatura ambi
58. one PreservCyt 4 Ispezionare le provette dei campioni prima di caricarle sulla rastrelliera a Se una provetta contiene delle bolle nello spazio fra il liquido e il tappo centrifugarla per 5 minuti a 420 RCF per eliminarle b Se una provetta del campione presenta un volume inferiore a quello tipicamente osservato quando sono state seguite le istruzioni per la raccolta centrifugare la provetta per 5 minuti a 420 RCF per assicurarsi che non sia presente liquido nel tappo c Se il livello del liquido in una provetta del campione di urina non rientra fra le due linee indicatrici nere il campione deve essere rifiutato Non forare una provetta troppo piena d Se una provetta del campione di urina contiene precipitato riscaldare il campione a 37 C per un massimo di 5 minuti Nel caso in cui il precipitato non rientri in soluzione controllare visivamente che il precipitato non impedisca il trasferimento del campione Nota La mancata osservanza dei procedimenti 4a 4c potrebbe determinare un traboccamento di liquido dal tappo della provetta del campione Nota Da ciascuna provetta del campione possono essere analizzate fino a tre aliquote separate tentativi di pipettare pi di 3 aliquote dalla provetta del campione possono causare errori di volume insufficiente E Preparazione del sistema Impostare il sistema e la lista di lavoro in base alle istruzioni contenute nel TIGRIS DTS System Operator s Manual Manuale per l operator
59. one PreservCyt Le concentrazioni finali di 7 vaginalis variavano da 0 a 1 TV mL Nella Tabella 11 sono riportati per ciascun elemento del pannello i dati relativi all RLU ossia media deviazione standard DS e coefficiente di variazione CV tra i siti gli operatori i lotti le liste di lavoro all interno delle liste di lavoro e complessivi totali riportata inoltre la percentuale di concordanza con i risultati attesi Nelle analisi sono stati inclusi i campioni con risultati validi APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 35 502536IT Rev A Prestazioni del PANTHER System Assay Tabella 11 Studio di riproducibilit riportata la riproducibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay in base all elemento del pannello compresi i campioni con risultati del test discordanti All interno Tra le delle Tra gli sessioni sessioni Livello Tra i siti operatori Tra i lotti analitiche analitiche Totale di Conc Concord RLU CV CV CV CV CV CV conc target N Concorde media DS DS DS 96 DS 99 DS DS 96 Matrice di campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt Neg N A 108 107 99 1 235 00 0 0 27 116 00 0 0 0 0 0 0 37 5 159 7 37 6 160 1 HNeg 0 003 108 98 90 7 693 5 0 73 45 65 6 1 88 14 8 214 16 0 23 1 23 6 34 1 MPos 0 02 108 105 97 2 348 1 303 8 7 33 1 9 5 33 1 95 77 0 22 1 62 9 18 1 114 0 32 8 HPos 1 108 108 100 11855 0 0 0 0 17 0 14 0 0 00 28 0 24 342 29 474 40 M
60. pione APTIMA conformemente alle istruzioni riportate sul foglietto illustrativo dell APTIMA Specimen Transfer kit kit di trasferimento dei campioni c Dopoil trasferimento in una provetta di trasporto del campione APTIMA i campioni possono essere conservati per ulteriori 14 giorni a temperature comprese tra 15 C e 30 C o per 30 giorni a temperature comprese tra 2 C e 8 C d Qualora sia necessaria una conservazione per un periodo pi lungo il campione raccolto in soluzione PreservCyt o il campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt diluito nella provetta di trasferimento del campione pu essere conservato a lt 20 C per un massimo di 12 mesi dal trasferimento APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 7 502536IT Rev A Raccolta e conservazione dei campioni C Conservazione dei campioni dopo l analisi 1 1 campioni che sono stati analizzati devono essere conservati su una rastrelliera in posizione verticale 2 Le provette di trasporto dei campioni vanno coperte con una pellicola di plastica o un foglio di alluminio nuovi e puliti 3 Sei campioni analizzati devono essere congelati o spediti rimuovere i tappi penetrabili e sostituirli con nuovi tappi non penetrabili sulle provette di trasporto del campione Qualora sia necessario inviare i campioni presso altri laboratori di analisi necessario mantenerli alle temperature consigliate Prima di rimuovere i tappi necessario centrifugare le provette
61. presa tra il 38 e l 8296 rispetto ai metodi molecolari a causa dei problemi nella visualizzazione di numeri ridotti di organismi o a causa della motilit dei protozoi 6 7 T vaginalis pu essere rilevato anche mediante preparazioni a fresco miscelando secrezioni vaginali con soluzione salina su un vetrino ed esaminando il vetrino al microscopio Tuttavia l esame microscopico a fresco offre una sensibilit compresa tra il 35 e l 8096 rispetto alla coltura 7 La sensibilit del metodo a fresco altamente dipendente dall esperienza del microscopista e dalla durata del trasporto del campione al laboratorio L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay un test dell acido nucleico che utilizza le tecnologie Target Capture amplificazione mediata dalla trascrizione transcription mediated amplification TMA e dosaggio con protezione dell ibridizzazione hybridization protection assay HPA Principi della procedura L APTIMA Trichomonas vaginalis Assay comprende le tecnologie di cattura del target amplificazione mediata da trascrizione TMA e analisi con protezione dell ibridizzazione hybridization protection assay HPA APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 2 502536IT Rev A Informazioni generali campioni vengono raccolti e trasferiti nelle rispettive provette di trasporto del campione La soluzione di trasporto all interno delle provette rilascia l rRNA target e lo protegge dalla degradazione durante la conservazione Quando
62. richomonas vaginalis Assay 32 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System Tabella 9 Microrganismi analizzati con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Microrganismo Acinetobacter Iwoffi Concentrazione analizzata STM 4 6x107 UFC mL PreservCyt 4 6x107 UFC mL Urina 2 3x107 UFC mL Actinomyces israelii 2 1x108 UFC mL 2 1x108 UFC mL 1 1x10 UFC mL Atopobium vaginae 6 2x108 UFC mL 6 2x106 UFC mL 6 2x108 UFC mL Bacteroides fragilis 6 4x108 UFC mL 6 4x108 UFC mL 3 2x108 UFC mL Bifidobacterium adolescentis 7 2x10 UFC mL 7 2x10 UFC mL 3 6x10 UFC mL Campylobacter jejuni 7 2x10 UFC mL 7 2x10 UFC mL 3 6x107 UFC mL Candida albicans 1 2x108 UFC mL 1 2x108 UFC mL 5 9x107 UFC mL Candida glabrata Candida parapsilosis 1 3x108 UFC mL 9 2x10 UFC mL 1 4x10 UFC mL 9 2x10 UFC mL 6 4x10 UFC mL 4 6x107 UFC mL Candida tropicalis 1 8x107 UFC mL 1 8x107 UFC mL 9 1x106 UFC mL Chlamydia trachomatis 2 0x104 TCIDgo mL 2 0x10 TCIDgo mL 2 0x10 TCIDao mL Clostridium difficile 2 6x10 UFC mL 2 6x10 UFC mL 1 3x107 UFC mL Clostridium perfringens 1 9x108 UFC mL 1 9x108 UFC mL 9 4x10 UFC mL Corynebacterium genitalium 2 8x10 UFC mL 2 8x10 UFC mL 1 4x107 UFC mL Cryptococcus neoformans 5 8x10 UFC mL 5 8x10 UFC mL 2 9x10 UFC mL Enterobacter aerogenes
63. s vaginalis Assay 30 502536IT Rev A Prestazioni del test TIGRIS DTS System Distribuzione dei valori di RLU dei controlli APTIMA per Trichomonas vaginalis Nella Tabella 7 riportata la distribuzione dei valori di RLU per l APTIMA Trichomonas vaginalis Negative Control controllo negativo e l APTIMA Trichomonas vaginalis Positive Control controllo positivo da tutte le liste di lavoro valide dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay eseguite durante lo studio delle prestazioni cliniche Tabella 7 Distribuzione dei valori di RLU dei controlli positivi e negativi APTIMA per Trichomonas vaginalis Controllo Statistiche RLU totale x1000 N 58 Media 2 5 DS 1 93 Negativo Mediana 2 0 Minimo 1 Massimo 10 CV 96 78 3 N 58 Media 1206 3 DS 91 37 Positivo Mediana 1191 5 Minimo 986 Massimo 1381 CV 96 7 6 RLU unit di luce relativa Nota Il valore di RLU riportato dal software ha costituito la base per l analisi Il valore di RLU riportato corrisponde all RLU totale misurata diviso 1000 con arrotondamento delle cifre decimali Riproducibilit del dosaggio La riproducibilit dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay stata valutata in tre laboratori esterni statunitensi con il TIGRIS DTS System Le analisi sono state eseguite nell arco di sei giorni utilizzando tre lotti di reagenti del test e sei operatori due in ciascun sito Sono stati creati dei pannelli per la valutazione della ripro
64. t Prestazione clinica Un importante sperimentazione clinica prospettica multicentrica stata condotta per stabilire le caratteristiche delle prestazioni per l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Nella sperimentazione sono state inserite milleventicinque 1 025 donne sintomatiche e asintomatiche provenienti da 9 siti clinici statunitensi tra cui cliniche di ginecologia e ostetricia centri di medicina della riproduzione e per le malattie a trasmissione sessuale MTS Da ciascun soggetto sono stati raccolti fino a 6 campioni 1 campione del primo getto di urina 3 tamponi vaginali 1 tampone endocervicale e 1 campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt Tutti i campioni sono stati raccolti da un medico eccetto i campioni di urina campioni per Pap test raccolti in liquido PreservCyt sono stati prelevati con uno spazzolino per prelievo endocervicale o mediante campionamento combinato con spatola e cytobrush Due dei campioni di tamponi vaginali sono stati analizzati con un sistema di coltura disponibile in commercio ed esame microscopico a fresco per determinare lo stato di infezione restanti 4 campioni sono stati preparati per l analisi con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay in base alle istruzioni riportate nel foglietto illustrativo del relativo kit di raccolta dei campioni APTIMA Le analisi con l APTIMA Trichomonas vaginalis Assay sono state condotte in tre laboratori esterni in base alle istruzioni riportate nel fo
65. t 10 di agente di riempimento P APTIMA Trichomonas vaginalis Probe Reagent 1 fiala 1 fiala reagente sonda Sonde di DNA chemioluminescenti essiccate in soluzione tampone succinato contenente lt 5 di detergente TCR B X APTIMA Trichomonas vaginalis Assay Target 1x0 56 mL 1x 0 30 mL Capture Reagent B reagente di cattura del target Soluzione tampone contenente 5 di detergente APTIMA Trichomonas vaginalis Room Temperature Box scatola a temperatura ambiente scatola 2 di 2 alla ricezione conservare a temperatura ambiente tra 15 C e 30 C Quantit Simbolo Componente Kit da Kit da 250 test 100 test AR APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification 1 x 27 7 mL 1x 11 9 mL Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per l amplificazione Soluzione acquosa contenente conservanti APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 9 502536IT Rev A TIGRIS DTS System APTIMA Trichomonas vaginalis Room Temperature Box scatola a temperatura ambiente scatola 2 di 2 alla ricezione conservare a temperatura ambiente tra 15 C e 30 C Continua ER APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme 1x 11 1 mL 1x6 3mL Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per l enzima Soluzione tamponata HEPES contenente un tensioattivo e glicerolo PR APTIMA Trichomonas vaginalis Probe 1x35 4 mL 1x15 2mL Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per la sonda Soluzione tampone succinato contenente lt
66. te 596 di detergente APTIMA Trichomonas vaginalis Room Temperature Box scatola a temperatura ambiente scatola 2 di 2 alla ricezione conservare a temperatura ambiente tra 15 C e 30 C Quantit Simbolo Componente Kit da Kit da 250 test 100 test AR APTIMA Trichomonas vaginalis Amplification 1x 27 7 mL 1x 11 9 mL Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per l amplificazione Soluzione acquosa contenente conservanti APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 16 502536IT Rev A PANTHER System APTIMA Trichomonas vaginalis Room Temperature Box scatola a temperatura ambiente scatola 2 di 2 alla ricezione conservare a temperatura ambiente tra 15 C e 30 C Continua ER APTIMA Trichomonas vaginalis Enzyme 1x 11 1 mL 1x6 3mL Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per l enzima Soluzione tamponata HEPES contenente un tensioattivo e glicerolo PR APTIMA Trichomonas vaginalis Probe 1x35 4 mL 1x15 2mL Reconstitution Solution soluzione di ricostituzione per la sonda Soluzione tamponata con succinato contenente 596 di detergente S APTIMA Trichomonas vaginalis Selection Reagent 1x 108 mL 1x43 0 mL reagente di selezione Soluzione tampone borato 600 mM contenente un tensioattivo TCR APTIMA Trichomonas vaginalis Target Capture 1x54 0 mL 1x 26 0 mL Reagent reagente di cattura del target Soluzione tamponata contenente oligomeri di cattura e particelle magnetiche
67. tipo di campione Tabella 6 VPP e VPN ipotetici per APTIMA Trichomonas vaginalis Assay per tipo di campione Tipo di campione Prevalenza VPP VPN 1 47 2 100 2 64 4 99 9 5 82 3 99 7 Urina 10 90 8 99 5 12 92 4 99 3 15 94 0 99 2 20 95 7 98 8 25 96 7 98 4 1 49 1 100 2 66 1 100 5 83 4 100 10 91 4 100 TVM 12 92 9 100 15 94 4 100 20 96 0 100 25 97 0 100 1 62 0 100 2 76 7 100 5 89 5 100 10 94 7 100 TE 12 95 6 100 15 96 6 100 20 97 6 100 25 98 2 100 1 70 8 100 2 83 0 100 5 92 7 100 10 96 4 100 Ron 12 97 0 100 15 97 7 100 20 98 4 100 25 98 8 100 TVM tampone vaginale raccolto da un medico TE tampone endocervicale PCyt campione per Pap test raccolto in liquido in soluzione PreservCyt I VPP e i VPN vengono ricavati per differenti tassi di prevalenza ipotetici utilizzando le stime di sensibilit e specificit ottenute dallo studio delle prestazioni cliniche La sensibilit nei campioni di urina risultata pari al 95 2 mentre nei tamponi vaginali endocervicali e nei campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt risultata pari al 100 stata osservata un specificit del 98 9 nei campioni di urina 99 0 nei campioni di tamponi vaginali 99 4 nei campioni di tamponi endocervicali e 99 6 nei campioni per Pap test raccolti in liquido in soluzione PreservCyt APTIMA Trichomona
68. trollare i numeri di lotto dei reagenti sulla scheda dei codici a barre del lotto master per assicurarsi che siano abbinati i reagenti appropriati c Aprire il flacone di TCR e appoggiare il tappo su una superficie di lavoro pulita e coperta d Aprire il flacone di TCR B e versarne l intero contenuto nel flacone di TCR normale che nel flacone di TCR B resti una piccola quantit di liquido e Tappare il flacone di TCR e agitare la soluzione ruotandola delicatamente per miscelare il contenuto Evitare la formazione di schiuma durante questa fase f Registrare sull etichetta le iniziali dell operatore e la data corrente g Gettare il flacone e il tappo del TCR B 3 Preparazione del reagente di selezione a Controllare i numeri di lotto dei reagenti sulla scheda dei codici a barre del lotto master per assicurarsi che siano abbinati i reagenti appropriati b Registrare sull etichetta le iniziali dell operatore e la data corrente Nota Miscelare accuratamente tutti i reagenti capovolgendoli delicatamente prima di caricarli nel sistema Evitare la formazione di schiuma mentre si capovolgono i reagenti C Preparazione dei reagenti per reagenti precedentemente ricostituiti 1 I reagenti sonda di amplificazione ed enzimatico precedentemente ricostituiti devono essere portati a temperatura ambiente da 15 C a 30 C prima di iniziare il test 2 Se il reagente sonda ricostituito contiene precipitato che non rientra in soluz
69. tta le iniziali dell operatore e la data corrente g Gettare il flacone e il tappo del TCR B 3 Preparazione del reagente di selezione a Controllare i numeri di lotto dei reagenti sulla scheda dei codici a barre del lotto master per assicurarsi che siano abbinati i reagenti appropriati b Registrare sull etichetta le iniziali dell operatore e la data corrente Nota Miscelare accuratamente tutti i reagenti capovolgendoli delicatamente prima di caricarli nel sistema Evitare la formazione di schiuma mentre si capovolgono i reagenti C Preparazione dei reagenti per reagenti precedentemente ricostituiti 1 reagenti sonda di amplificazione ed enzimatico precedentemente ricostituiti devono essere portati a temperatura ambiente da 15 C a 30 C prima di iniziare il test 2 Se il reagente sonda ricostituito contiene precipitato che non rientra in soluzione a temperatura ambiente riscaldare il flacone chiuso ad una temperatura che non superi i 62 C per un periodo compreso fra 1 e 2 minuti AI termine di questa fase di riscaldamento il reagente sonda pu essere utilizzato anche se resta un precipitato residuo Miscelare il reagente sonda per inversione prima di caricarlo nel sistema evitando la formazione di schiuma APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 20 502536IT Rev A PANTHER System 3 Miscelare a fondo ciascun reagente delicatamente per inversione prima di caricarlo nel sistema Evitare la formazione di schiuma mentre
70. vo VPP e il valore predittivo negativo VPN dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay nonch la prevalenza di 7 vaginalis nello stato di infezione in ciascun tipo di campione in base alla presenza o all assenza di sintomi soggetti sono stati classificati come sintomatici se hanno riportato dei sintomi Se invece non hanno riportato alcun sintomo sono stati classificati come asintomatici Per ciascun tipo di campione le prestazioni sono risultate simili nei soggetti sintomatici e asintomatici La prevalenza stata pi alta nelle donne sintomatiche Tabella 3 Caratteristiche delle prestazioni dell APTIMA Trichomonas vaginalis Assay in base alla presenza o all assenza di sintomi 7 J Presenza o EM Da lit 9 f 9 VPP 9 VPN Tod Sssenzadi n TP FP TN PN prey Coo Pinos Specificit ii campione sintomi 95 CI 95 CI 95 CI 95 CI 95 5 99 0 87 5 99 7 d Asintomatico 324 21 3 299 1 6 8 78 2 99 2 97 1 99 7 71 4 96 9 98 4 100 i 95 2 98 9 93 7 99 1 Sintomatico 411 59 4 345 3 15 1 86 7 98 3 97 1 99 6 85 7 98 1 97 7 99 8 100 98 8 85 7 100 Si Asintomatico 345 24 4 317 0 7 0 86 2 100 96 8 99 5 70 3 95 6 98 9 100 100 99 1 95 6 100 Sintomatico 530 87 4 439 0 16 4 95 8 100 97 7 99 6 89 5 98 8 99 2 100 100 99 7 96 3 100 1a Asintomatico 372 26 1 345 0 7 0 87 1 100 98 4 99 9 82 4 99 9 99 0 100 100 99 1 95 7 100 Sintomatico 548 88 4 456 0 16 1 95 8 100
71. zione questi fattori Gli intervalli di monitoraggio della contaminazione vanno stabiliti in base alla prassi e alle procedure di ciascun laboratorio Per monitorare la contaminazione in laboratorio durante l utilizzo dell APTIMA Unisex Swab Specimen Collection Kit kit di raccolta dei campioni di tamponi unisex per campioni di tamponi endocervicali e uretrali maschili possibile utilizzare la seguente procedura 1 Contrassegnare le provette di trasporto dei tamponi con etichette numerate corrispondenti alle aree da analizzare 2 Estrarre dalla confezione il tampone di raccolta del campione tampone con bastoncino blu e stampa verde inumidire il tampone nel terreno di trasporto e prelevare il campione nell area designata con movimento circolare 3 Inserire immediatamente il tampone nella provetta di trasporto 4 Spezzare il bastoncino del tampone in corrispondenza della linea indicatrice facendo attenzione a non disperdere il materiale prelevato 5 Chiudere bene il tappo della provetta APTIMA Trichomonas vaginalis Assay 22 502536IT Rev A PANTHER System 6 Ripetere le operazioni da 2 a 5 per tutte le aree da cui verranno prelevati i campioni Se risultati sono positivi vedere nterpretazione dell analisi QC Risultati dei pazienti Per ulteriori informazioni sul monitoraggio della contaminazione specifiche per il PANTHER System contattare il servizio di assistenza tecnica Gen Probe APTIMA Trichomonas vagina

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