GlobalFiler Express PCR Amplification Kit
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1. n e Para perforaci n autom tica consulte la gu a del usuario del instrumento de perforaci n de disco autom tico o semiautom tico para obtener las instrucciones pertinentes technologies Preparaci n de las reacciones 1 2 JJ a oa a A 8 A ada muestras a la placa de reacci n A este estos pocillo s de una MicroAmp Optical 96 Well Ai A adir Reaction Plate Control negativo Disco en blanco 1 2 mm Muestras de test Disco de muestras 1 2 mm Control positivo e Para 25 y 26 ciclos 3 pl de Control DNA 007 IMPORTANTE No a ada un disco en blanco al pocillo de control e Para 27 ciclos 2 ul de Control DNA 007 positivo e Para 28 ciclos 1 pl de Control DNA 007 Nota Los vol menes de control positivo son cantidades sugeridas y pueden ajustarse si las alturas de los picos son demasiado altas o demasiado bajas para su n mero de ciclos optimizados Calcule el volumen de cada componente necesario para preparar las reacciones con ayuda de la tabla siguiente Componente de reacci n Volumen por reacci n Master Mix 6 0 pl Primer Set 6 0 pl Low TE Buffer 3 0 pl Nota Incluya reacciones adicionales en los c lculos para compensar la p rdida que se produce durante las transferencias de reactivos IMPORTANTE Este kit ha sido optimizado para un volumen de reacci n PCR de 15 ul para superar la inhibici n de la PCR prevista al amplificar muestras sin purificar El2. o de mucosa yugal recogidas en sustratos de papel tratado descrito en este documento de referencia r pida e Muestras de sangre o de mucosa yugal recogidas en sustratos de papel sin tratar y tratadas con Prep n Go Buffer descrito en el documento de referencia r pida Pub no 4481777 e Muestras de mucosa yugal recogidas en sustratos de torunda y tratadas con Prep n Go Buffer descrito en el documento de referencia r pida Pub no 4481759 Prerrequisitos Antes de comenzar coloque esta gu a en el rea del laboratorio donde se realicen las reacciones en cadena de la polimerasa PCR Pautas para la preparaci n de muestras e No a ada agua a los pocillos en la placa de reacci n antes de a adir los discos Si su laboratorio experimenta problemas de est tica con los discos de papel puede preparar y dispensar la mezcla de reacci n de 15 ul en los pocillos de la placa de reacci n antes de a adir los discos e Realice la perforaci n tan cerca como sea posible del centro de la muestra para garantizar una intensidad pico ptima Si aumenta el tama o de la perforaci n puede producirse inhibici n durante la amplificaci n de la PCR e Para perforaci n manual coloque la punta de un Harris Micro Punch de 1 2 mm en la tarjeta sujete el ca n del Harris Micro Punch no toque el mbolo presione suavemente y gire 1 4 de vuelta y a continuaci n expulse el disco dentro del pocillo correspondiente en la placa de reacci
3. uso de un volumen de reacci n PCR m s bajo puede reducir la capacidad de las caracter sticas qu micas del kit para generar perfiles completos de repeticiones cortas en t ndem Prepare los reactivos Descongele el Master Mix y el Primer Set y a continuaci n agite durante 3 segundos y centrifugue brevemente antes de abrir los tubos o frascos IMPORTANTE La descongelaci n solo es necesaria durante el primer uso del kit Despu s del primer uso los reactivos se conservan a una temperatura de entre 2 a 8 C y por tanto no requieren su descongelaci n posterior No vuelva a congelar los reactivos Pipetee los vol menes necesarios de los componentes en un tubo de polipropileno de tama o apropiado Agite la mezcla de reacci n durante 3 segundos y luego centrif guela brevemente Dispense 15 ul de la mezcla de reacci n en cada pocillo de reacci n de un MicroAmp Optical 96 Well Reaction Plate Cierre herm ticamente la placa con MicroAmpY9 Clear Adhesive Film Part no 4306311 o MicroAmp Optical Adhesive Film Part no 4311971 IMPORTANTE Recomendamos cerrar herm ticamente la placa con pel cula adhesiva para obtener un cierre uniforme de todos los pocillos y evitar la evaporaci n No utilice tapas pues puede que no ofrezcan un cierre uniforme en todos los pocillos IMPORTANTE Si utiliza el termociclador 9700 con bloque de plata o de plata chapado con oro ponga un MicroAmp9 Compression Pad Part
4. LO QUE INCLUYE ENTRE OTRAS GARANT AS DE COMERCIABILIDAD DE ADECUACI N A UNA FINALIDAD CONCRETA O DE AUSENCIA DE INFRACCIONES EN LA MEDIDA PERMITIDA POR LA LEY EN NINGUN CASO SE PODR EXIGIR A LIFE TECHNOLOGIES Y O SUS FILIALES NINGUNA RESPONSABILIDAD CONTRACTUAL EXTRACONTRACTUAL DERIVADA DE NINGUNA GARANT A O DE NINGUNA LEY NI BAJO NING N OTRO SUPUESTO POR DA OS ESPECIALES INDICENTALES INDIRECTOS PUNITIVOS M LTIPLES O CONSECUENTES EN RELACI N CON O DERIVADOS DEL PRESENTE DOCUMENTO LO QUE INCLUYE ENTRE OTRAS POSIBILIDADES EL USO DEL MISMO O 2012 Life Technologies Corporation Reservados todos los derechos Las marcas mencionadas en el presente documento son propiedad de Life Technologies Corporation o de sus respectivos titulares Headquarters o 5791 Van Allen Way Carlsbad CA 92008 USA Phone 1 760 603 7200 Toll Free in USA 800 955 6288 For support visit lifetechnologies com support technologies lifetechnologies com October 2012
5. REFERENCIA R PIDA applied biosystems GlobalFiler Express PCR Amplification Kit by L fesonaosios PCR Setup Treated Paper Substrate Pub No 4481768 Rev A Translated from English Publication Number 4480904 Rev A Nota Si desea conocer las recomendaciones sobre seguridad y riesgos biol gicos consulte la secci n Seguridad en el documento GlobalFiler Express PCR Amplification Kit User Guide Pub no 4477672 Para cada uno de los productos qu micos consulte las fichas de seguridad SDS y siga las instrucciones de manipulaci n indicadas Use protectores oculares vestimenta protectora y guantes apropiados E Resumen del producida dado ii AO 1 PrerrequistOS 0 ia O A A A A A A A EA A 1 E Pautas para la preparaci n de Muestras 1 mM Preparaci n de las T ACCIONES ii A AS AAA A At 2 E Realice la reacci n en cadena de la polimerasa y la electroforesis CapilaT oooocococccccconaccronccccr ra 3 M Garantia limitada de produc midis rens A a a A da a AA 3 Resumen del producto El GlobalFiler Express Kit 200 reacciones Part no 4476609 o 1000 reacciones Part no 4474665 es un ensayo multiplex de repeticiones cortas en t ndem que amplifica 21 loci de repetici n autos micos Amelogenina 1 locus de repeticiones cortas en t ndem Y y 1 locus de inserci n borrado Y indel Y Est optimizado para permitir la amplificaci n directa de los siguientes tipos de muestras de una sola fuente e Muestras de sangre
6. no 4312639 en la parte superior de la placa para impedir todav a m s la evaporaci n durante el termociclado El Veriti Thermal Cycler no requiere una almohadilla de compresi n Centrifugue la placa a 3000 rpm durante 20 segundos en una centr fuga de sobremesa con reposaplacas Referencia r pida sobre el GlobalFiler Express PCR Amplification Kit PCR Setup Treated Paper Substrate Realice la reacci n en cadena de la polimerasa y la electroforesis capilar Para realizar la amplificaci n de la PCR y la electroforesis capilar CE consulte los documentos GlobalFiler Express PCR Amplification Kit PCR Amplification and CE Quick Reference Card Pub no 4481786 y GlobalFiler Express PCR Amplification Kit User Guide Pub no 4477672 Garant a limitada de producto Life Technologies Corporation y o sus filiales garantizan sus productos conforme a lo expuesto en los t rminos y condiciones generales de venta de Life Technologies expresados en el sitio web de Life Technologies en www lifetechnologies com termsandconditions Si tiene cualquier duda p ngase en contacto con Life Technologies en www lifetechnologies com support Limitado al uso forense o a las pruebas de paternidad La informaci n contenida en esta gu a est sujeta a cambios sin previo aviso EXENCI N DE RESPONSABILIDADES LIFE TECHNOLOGIES CORPORATION Y O SUS FILIALES NO OTORGAN NINGUNA GARANT A CON RESPECTO AL PRESENTE DOCUMENTO SEA EXPRESA O IMPL CITA
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