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(Link) Nº de catálogo IR611
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1. n de la tinci n Caracter sticas de resultados Referencias bibliogr ficas Explicaci n de los s mbolos Referencia pH 50x n de cat logo K8000 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Link n de cat logo K8000 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software del Autostainer Link El volumen de reactivo recomendado es de 1 x 200 uL o 2 x 150 uL por portaobjetos Consulte la Gu a del usuario del Autostainer Link para ver instrucciones detalladas sobre la carga de portaobjetos y reactivos Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de
2. Dako Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Las condiciones ptimas pueden variar dependiendo de la muestra y del m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se pueden ajustar los tiempos de incubaci n y la elecci n del sistema de visualizaci n EnVision FLEX EnVision FLEX Se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el resultado del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n en hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Link n de cat logo K8008 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El control positivo de tejido debe incluir colon e h gado y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para estos tejidos en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Link n de cat logo IR750 Las c lulas marcadas por el anticuerpo muestran tinci n c
3. asa molecular de 42 kDa Las isoformas muestran una homolog a secuencial total que supera el 90 pero su homolog a s lo es del 50 60 en sus 18 residuos N terminales La regi n N terminal parece ser una zona antig nica importante 3 Existen distintas isoformas a espec ficas para los tejidos musculares es decir a m sculo esquel tico a m sculo card aco y a m sculo liso respectivamente 4 Las actinas B y y pueden estar presentes en las c lulas musculares como tambi n en casi todos los dem s tipos de c lulas del cuerpo inclusive en las c lulas no musculares 5 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n y 9 Limitaciones generales Anticuerpo monoclonal de rat n listo para su uso proporcionado en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizante y 0 015 mol L de azida de sodio Clon 144 El clon 144 es id ntico al anti asm 1 descrito en 3 Isotipo lgG2a kappa Decap ptido sint tico N terminal de la actina a m sculo liso junto con hemocianina de la lapa californiana KLH 4 En transferencias de Western e inmunotransferencias SDS PAGE de la is
4. itoplasm tica Tejidos normales El anticuerpo marca c lulas del m sculo liso en vasos sangu neos y adem s conductos salivales y c lulas mioepiteliales alrededor de los acinos en las gl ndulas salivales 2 Tambi n marc positivamente c lulas del m sculo liso en 35 36 miometrios uterinos normales 1 Adem s se ha observado un marcado temporal de c lulas hep ticas perisinusoidales 6 Las c lulas del m sculo liso en la mucosa de la lamina muscularis del colon muestran una reacci n de moderada a fuerte a la tinci n mientras que las c lulas del m sculo liso que recubren los sinusoides hep ticos tienen una reacci n de d bil a moderada Tejidos anormales El anticuerpo marc 24 26 leiomiomas 6 7 leiomiomas at picos y 21 25 leliomiosarcomas del tero como tambi n 13 13 leiomiosarcomas fusiformes no gastrointestinales extrauterinos 1 Adem s el anticuerpo marc una cantidad variable de c lulas en 8 8 tumores miofibrobl sticos seudosarcomatosos de la vejiga urinaria en ni os 7 En adenomas pleom rficos el anticuerpo marc c lulas epiteliales del tumor c lulas mioepiteliales en 19 20 casos 2 1 Rizeq MN van de Rijn M Hendrickson MR Rouse RV A comparative immunohistochemical study of uterine smooth muscle neoplasms with emphasis on the epithelioid variant Hum Pathol 1994 25 671 7 2 Brennan PA Umar T Zaki GA Langdon JD Spedding A Buckley J et al Are myoepithelial cells responsible for the wides
5. j 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
6. oforma a de la actina de m sculo liso el anticuerpo marca una banda que corresponde a la actina de m sculo liso 3 Como se demostr por transferencia de Western o inmunocitoqu mica el anticuerpo reacciona en forma cruzada con la prote na equivalente a la a actina de m sculo liso en pollos vacas y ratas 3 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida de sodio NaNz un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto de origen biol gico deber n aplicarse los procedimientos de manipulaci n adecuados 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n que no se utilice deber desecharse de acuerdo con las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 C No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario debe comprobar dichas condiciones No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles
7. positivo y negativo deber n analizarse de manera simult nea con las muestras del paciente En caso de observarse una coloraci n inesperada que no puede ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospecha la existencia de un problema con un anticuerpo comun quese con la Asistencia T cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8000 K8004 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High IR611 ES MNI 2009 12 04 p g 1 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci
8. pread expression of inducible nitric oxide synthase in pleomorphic adenoma An immunohistochemical study J Oral Pathol Med 2000 29 279 83 3 Skalli O Ropraz P Trzeciak A Benzonana G Gillessen D Gabbian G A monoclonal antibody against a smooth muscle actin a new probe for smooth muscle differentiation J Cell Biol 1986 103 2787 96 4 Roholl PJM Elbers HRJ Prinsen l Claessens JAJ van Unnik JAM Distribution of actin isoforms in sarcomas an immunohistochemical study Hum Pathol 1990 21 1269 74 5 Alberts B Bray D Lewis J Raff M Roberts K Watson JD The cytoskeleton In Alberts B Bray D Lewis J Raff M Roberts K Watson JD editors Molecular biology of the cell 2nd ed New York and London Garland Publishing 1989 p 613 629 6 Schmitt Gr ff A Kr ger S Bochard F Gabbiani G Denk H Modulation of alpha smooth muscle actin and desmin expression in perisinusoidal cells of normal and diseased livers Am J Pathol 1991 138 1233 42 7 Hojo H Newton WA Hamoudi AB Qualman SJ Wakasa H Suzuki S et al Pseudosarcomatous myofibroblastic tumor of the urinary bladder in children a study of 11 cases with review of the literature Am J Surg Pathol 1995 19 1224 36 o o e C Limitaci n de temperatura e Fecha de caducidad Dispositivo m dico para Contiene suficiente para lt n gt Fabricante IVD diagn stico in vitro ensayos W me mw 115503 002 IR611 ES MNI 2009 12 04 p g 2 2 Dako Denmark A S Produktionsve
9. y Uso previsto Ingreso de datos y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 115503 002 C FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Smooth Muscle Actin Clon 1A4 Ready to Use Link N de cat logo IR611 Para uso diagn stico in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Smooth Muscle Actin Clon 144 Ready to Use Link est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los Autostainer Link instruments Este anticuerpo marca c lulas del m sculo liso miofibroblastos y c lulas mioepiteliales y es til para identificar leliomiomas leiomiosarcomas 1 y adenomas pleom rficos 2 La identificaci n diferencial se complementa con los resultados de un panel de anticuerpos La interpretaci n cl nica de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un pat logo calificado dentro del contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas Las actinas citopl smicas que pertenecen al sistema de microfilamentos de las prote nas citoesquel ticas son algunas de las prote nas eucari ticas m s conservadas que se expresan en mam feros y aves La prote na actina est compuesta por seis isoformas con diversas secuencias de amino cidos pero todas poseen la misma m
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