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1. BIOLABO DEl www biolabo fr TE FABRICANTE Les Hautes Rives 02160 Maizy France BIOLABO PROTEINAS U S M todo Rojo del Pyrogallo Reactivo para la determinaci n cuantitativa de las prote nas totale en orina y LCR humano REF 97016 R12x113mL R22x12mL R31x10mL SOPORTE TECNICO Y PEDIDOS Tel 33 03 23 25 15 50 Fax 33 03 23 256 256 AAA AAA SIGNIFICACION CL NICA 1 La determinaci n de las prote nas totales en orina y l quido cefalorraqu deo LCR se utiliza respectivamente para el diagn stico de enfermedades renales o del sistema nervioso central Una elevaci n de la concentraci n de las prote nas urinarias se encuentra en el momento de un esfuerzo vigoroso fiebre hipotermia gammapat as monoclonales nefritis nefropatia diab tica o infecci n de las v as urinarias La determinaci n de las prote nas totales en el LCR es una ayuda para el diagn stico de meningitis encefalitis poliomielitis neurosf filis tumores del sistema nervioso central o hemorragias cerebrales PRINCIPIO 4 7 El m todo descrito es el de Fujita modificado por Watanabe y al El Rojo de Pyrogallol combinado con molibdato de sodio forma un complejo coloreado rojo que se absorbe a 460 nm En medio cido la fijaci n de este complejo sobre las agrupaciones aminadas de las prote nas desplaza el pico de absorci n a 600 nm La intensidad de la coloraci n azul medida a 600 nm 578 612 es proporcional a la concentr2. 00 L mite de detecci n aproximadamente 5 mgd L Comparaci n con reactivo comercial y 0 7581 x 10 45 r 0 9777 nal z IVD K a LIMITE DE LINEALIDAD 6 Procedimiento n 1 alta sensibilidad Lineal hasta 150 mg dL Procedimiento n 2 baja sensibilidad Lineal hasta 600 mg dL M s all diluir la muestra con NaCl a 9 g L y hacer de nuevo la prueba teniendo en cuenta el factor de diluci n en el c lculo del resultado El l mite de linealidad depende de la relaci n de diluci n muestra reactivo MODO DE EMPLEO TECNICA MANUAL Poner los reactivos y muestras a temperatura ambiente Procedimiento n 1 Medir en tubos de ensayo bien identificados Reactivo de trabajo Agua desmineralizada Standard Muestra Nota 2 Mezclar bien Dejar reposar por lo menos 10 minutos a temperatura ambiente Leer las absorbencias a 600 nm 578 612 contra el blanco de reactivo Procedimiento n 2 O E Medir en tubos de ensayo bien identificados Reactivo de trabajo Agua desmineralizada Standard Muestra Nota 2 Mezclar bien Dejar reposar por lo menos 10 minutos a temperatura ambiente Leer las absorbencias a 600 nm 578 612 contra el blanco de reactivo Notas 1 Tras 30 minutos de incubaci n a temperatura ambiente las prote nas en concentraci n elevada pueden precipitar y falsear los resultados 2 Muestra Orina o LCR 3 Procedimientos espec ficos est n disponibles para los analizadores
3. valores muy sobreestimados El Rojo de Pyrogallol reconoce en parte los solutos de relleno vascular a base de gelatina y conduce a una interferencia positiva frecuente en los pacientes en reanimaci n El Rojo de Pyrogallol reconoce dif cilmente las cadenas ligeras de gamma globulinas Al d a de hoy ninguna interferencia medicamentosa ha sido descrita con el Rojo de Pyrogallo Young D S ha publicado una lista de las sustancias que interfieren con la prueba AAA A A REACTIVOS Y MATERIAL COMPLEMENTARIOS 1 Equipamiento de base del laboratorio de an lisis m dico 2 Controles urinarios y o LCR normales y patol gicos Versi n 28 07 2011 HS CALIBRACION e Standard de la caja vial R3 trazable sobre SRM 927d e O cualquier calibrador trazable sobre un m todo o un material de referencia La frecuencia de calibraci n depende de las prestaciones del analizador y de las condiciones de conservaci n del reactivo Es recomendado calibrar de nuevo en los siguientes casos 1 Cambio del lote de reactivo 2 Despu s operaciones de mantenimiento sobre el analizador 3 Los valores de control obtenidos se salen de los l mites de confianza incluso despu s de la utilizaci n de un segundo vial de suero de control recientemente reconstituido AS CONTROL DE CALIDAD CODIGO CNQ AX e Utilizar controles urinarios y o LCR normales y patol gicos titulados para este m todo Programa externo de control de calidad Se recomie
4. aci n en prote nas en la muestra REACTIVOS Molibdato de sodio Vial R2 ROJO DE PYROGALLOL TF R11 39 23 24 25 S7 16 36 37 45 0 04 mmol L Metanol 10 Rojo de Pyrogallol 0 06 mmol L T F Muy toxico Inflamable R11 F cilmente inflamable R39 Peligro de efectos irreversibles muy graves R23 24 25 Toxico por inhalaci n contacto con la piel y por ingesti n S7 Conservar el recipiente S16 Conservar apartado de toda llama S36 37 Poner vestimenta de protecci n y guantes adecuados S45 En caso de accidente o malestar consultar inmediatamente un medico ense arle la etiqueta del vial STANDARD Alb mina bovina 1 0 g L 100 mg dL PRECAUCIONES Los reactivos BIOLABO est n destinados nicamente a profesionales para uso in vitro e Verificar la integridad de los reactivos antes de su utilizaci n e Utilizar equipamientos de protecci n bata guantes gafas e No pipetear con la boca e En caso de contacto con la piel o los ojos enjuagar abundantemente y consultar al m dico e La ficha de datos de seguridad puede obtenerse por petici n e Eliminaci n de los deshechos respetar la legislaci n en vigor Por medida de seguridad tratar toda muestra como potencialmente infecciosa Respetar la legislaci n en vigor Made in France Ultima Versi n www biolabo fr CODIGO CNQ AX USO IN VITRO AAA A PREPARACION DE LOS REACTIVOS Reactivo de trabajo verter el contenido
5. autom ticos Contactar el servicio t cnico BIOLABO C E CALCULO El resultado est determinado seg n la siguiente f rmula Abs Prueba Resultado x concentraci n del Standard Abs Standard AA BIBLIOGRAFIA 1 TIETZ N W Text book of clinical chemistry 3 Ed C A Burtis E R Ashwood W B Saunders 1999 p 512 530 2 Clinical Guide to Laboratory Test 4th Ed N W TIETZ 2006 p 916 919 3 YOUNG D S Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests 4 Ed 1995 p 3 498 a 3 500 et 3 506 a 3 511 4 Watanabe N et al Clin chem 32 8 1986 1551 1554 5 Le Bricon T Ann Biol Clin 2001 59 p 701 715 6 Andries J Bakker Baukje Jellema Ann Clin Biochem 36 1999 p 163 167 7 Fujita Y et Al Color reaction between pyrogallol red molybdenum complex and Protein Bunseki Kagaku 1983 32 E379 E386 Soa Lii LOT AN E gt Fabricante Fecha de caducidad Uso in vitro Temperatura de conservaci n Referencia del producto Consultar instrucciones Numero de lote Protegido de la luz Suficiente para Diluir con Made in France Ultima Versi n www biolabo fr Versi n 28 07 2011
6. del vial R2 en el vial R1 Mezclar por inversi n para homogeneizar la soluci n AAA AA A A AA ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO A la recepci n almacenar el Standard vial R3 a 2 8 C Almacenar los reactivos vial R1 y R2 a 18 25 C y protegido de la luz e Estabilidad del Standard vial R3 transvasar la cantidad necesaria tapar de nuevo y almacenar a 2 8 C e En el vial de origen bien cerrado los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja si son utilizados y almacenados en las condiciones adecuadas e El reactivo vial R1 R2 es estable 1 a o en ausencia de contaminaci n e No utilizar el reactivo si hay turbidez o si la absorbencia a 600 nm es gt 0 600 lt 0 050 e No utilizar el reactivo de trabajo despu s de la fecha de caducidad indicada en la etiqueta de la caja TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA 2 Orina micci n o recogido fraccionado Orina de 24h Orina reci n recogida conservadas a 2 8 C sin conservante centrifugadas 10 minutos a 3000 RPM y en la cual el pH se ajusta a 7 0 LCR Reci n extra do y centrifugado antes del an lisis Las muestras no deben contener sangre Estabilidad en orina e M s de un a o a 20 C Estabilidad en LCR e hasta 72 h a 2 8 e 6 meses a 20 C e indefinidamente a 70 C AAA A AAA INTERFERENCIAS 3 5 Hemoglobina sobreestimaci n de 4 a 6 El Plasmion M interfiere y da
7. nda controlar en los siguientes casos e Al menos un control por rutina e Al menos un control cada 24 horas e Cambio de vial del reactivo e Despu s de operaci n de mantenimiento sobre el analizador Cuando un valor de control se encuentra fuera de los l mites de confianza recomendados aplicar las siguientes acciones correctivas 1 Repetir la operaci n utilizando el mismo control 2 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites utilizar otro vial de control y repetir el test 3 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites utilizar otro calibrador o un calibrador reci n reconstituido y repetir el test 4 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites calibrar de nuevo utilizando otro vial de reactivo y repetir el test 5 Si el valor obtenido queda fuera de los l mites contactar el servicio t cnico BIOLABO o el distribuidor local A INTERVALOS DE REFERENCIA 2 En orina micci n lt 14 0 mg dL En orina de 24 h en reposo lt 80 mg 24 h Despu s de ejercicio f sico intenso lt 250 mg 24 h En LCR mg dL Prematuro 15 130 Reci n nacido 40 120 lt 1 mes 20 80 gt 1 mes 15 40 Se recomienda a cada laboratorio definir sus propios valores usuales para la poblaci n estimada AS PRESTACIONES Seguir Procedimiento n 1 Intra serie Tasa Tasa Inter serie Tasa Tasa N 20 baja elevada N 20 baja elevada Media mg dL 13 1 Media mg dL 20 S D mg dL 1 0 S D mg dL 0 39 C V 2 98 C V 5
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