rotachrom® heparin 8 - Annar Diagnóstica Import
Contents
1. AL ROTACHROM HEPARIN Determinaci n cromog nica de las heparinas HNF y HBPM y Fondaparinux AL ROTACHROM HEPARIN 4 e Contenido del kit 4 viales de Reactivo 1 Substrate 4 viales de Reactivo 2 F Xa 4 viales de Reactivo 3 Solvent REF 00612 AL ROTACHROM HEPARIN e Contenido del kit 8 viales de Reactivo 1 Substrate 8 viales de Reactivo 2 F Xa 8 viales de Reactivo 3 Solvent REF 00661 CE Enero 2013 Espa ol 11 1 UTILIZACI N DEL KIT Determinaci n en los aparatos de la l nea STA que pueden utilizar estos reactivos del efecto potenciador de las heparinas no fraccionadas HNF y de bajo peso molecular HBPM y del Fondaparinux FDPX sobre la antitrombina mediante la medida en el plasma de la actividad anti Xa obtenida por el m todo amidol tico competitivo 2 SUMARIO Las heparinas HNF y HBPM y el Fondaparinux son medicamentos anticoagulantes utilizados en los tratamientos curativos y preventivos de las enfermedades tromboemb licas La determinaci n de la actividad anti Xa de las heparinas HNF y HBPM del paciente permite monitorizar y adaptar el tratamiento 3 3 PRINCIPIO DEL TEST La funci n normal de una mol cula de factor Xa desde su aparici n en el plasma consiste en escindir su sustrato natural la protrombina para dar lugar a la trombina enzima responsable de la formaci n del co gulo de fibrina En presencia de heparina o F2. El resultado debe interpretarse en funci n del estado cl nico y biol gico del paciente Si el aparato se ala que los resultados obtenidos para los controles se sit an fuera del intervalo de valores indicado en la hoja incluida en los estuches STA Heparin Control STA Quality HBPM LMWH o STA Fondaparinux Control es preciso asegurarse del buen funcionamiento de todo el sistema condiciones operatorias reactivos calibraci n plasmas en los que se efect a el test etc Si es necesario repetir las muestras 11 LIMITACIONES e Obtenci n y tratamiento de la muestra la centrifugaci n debe ser cuidadosa y completa para evitar la liberaci n de factor 4 plaquetario v ase el cap tulo 6 Obtenci n y tratamiento de la muestra Se ha demostrado que la hemoglobina la bilirrubina y los triglic ridos no interfieren en la dosificaci n HNF HBPM y FDPX si sus concentraciones son inferiores respectivamente a 2 g l 66 mg l 113 umoles l y 3 6 g l 12 INTERPRETACI N DE LOS RESULTADOS La heparina Fondaparinux est ausente en los plasmas normales Las actividades anti Xa obtenida se debe analizar en funci n del tratamiento administrado al paciente tipo de anticoagulante posolog a modo de administraci n hora de la toma de la muestra y del grado de anticoagulaci n deseado 6 Sea cual sea la naturaleza de la heparina utilizada HNF o HBPM y sea cual sea la dosis curativa o preventiva se llevar n
3. 2 2 Ul REF 00661 por frasco liofilizado e Reactivo 3 disolvente para el Reactivo 2 vial de 4 ml REF 00612 o de 8 ml REF 00661 El Reactivo 3 contiene azida s dica lt 1 g l como conservante Es preciso eliminar con precauci n los reactivos que contienen azida s dica Si estas soluciones se vierten en el desag e del lavabo enjuagar con abundante agua para evitar la formaci n de azidas met licas que si est n concentradas pueden provocar explosiones Algunos reactivos de estes kits contienen productos de origen humano y o animal Cuando se ha utilizado plasma humano en la preparaci n de estos reactivos se excluye previamente la presencia del ant geno HBs de los anticuerpos anti HCV anti HIV 1 y anti HIV 2 con los correspondientes an lisis Sin embargo ning n test puede garantizar de manera absoluta la ausencia de agentes infecciosos Por eso estos reactivos de origen biol gico han de ser manipulados con las precauciones habituales ya que se trata de productos potencialmente infecciosos 5 PRECAUCIONES El estuche intacto se debe conservar a 2 8 C S lo para uso diagn stico in vitro Estos reactivos s lo deben ser utilizados por personal autorizado del laboratorio Utilizar nicamente reactivos de un mismo kit o de un mismo lote Los residuos se eliminar n con arreglo a la reglamentaci n local vigente Los estuches STA Rotachrom Heparin est n indicados en los aparatos de la l nea STA que pueden util
4. P SAMAMA M M Assessment of three chromogenic and one clotting assays for the measurement of synthetic pentasaccharide fondaparinux Arixtra anti Xa activity J Thromb Haemostasis 2 346 379 2003 Los cambios significativos son indicados por las l neas punteadas en el margen DIAGNOSTICA STAGO S A S Las informaciones y o las im genes contenidas en este 9 rue des Fr res Chausson e documento est n protegidas por copyright y otros derechos de 92600 Asni res sur Seine France propiedad intelectual 2013 Diagnostica Stago todos derechos 33 0 1 46 88 20 20 Stago reservados Los logotipos y o los nombres de los productos de webmaster stago com Diagnostica Stago son marcas registradas Espa ol 12
5. a cabo recuentos plaquetarios regulares antes y durante el tratamiento a la b squeda de una eventual trombocitopenia inducida por heparina TIH 4 Esta trombocitopenia se podr poner en evidencia con la ayuda de los tests Asserachrom HPIA REF 00615 Asserachrom HPIA IgG REF 00624 o STic Expert HIT REF 01058 01059 que permiten detectar espec ficamente los anticuerpos anti heparina factor 4 plaquetario presentes en la mayor a de las TIH Seg n el contexto cl nico una dosificaci n de la antitrombina puede resultar de utilidad 13 CARACTER STICAS DEL M TODO e L mite de detecci n Intervalo de medici n El l mite de detecci n en el STA R para el m todo de HNF HBPM con el STA Hybrid Hep Calibrator es de 0 10 Ul ml y la linealidad para valorar las HNF est asegurada hasta 1 00 Ul ml y hasta 2 00 Ul anti Xa ml para valorar las HBPM El l mite de detecci n en los STA para el m todo HNF con el STA Hepanorm H es de 0 10 Ul ml y la linealidad est asegurada hasta 0 70 Ul ml El l mite de detecci n en los STA para el m todo HBPM con el STA Calibrator HBPM LMWH es de 0 10 UI anti Xa ml y la linealidad est asegurada hasta 2 00 UI anti Xa ml El l mite de detecci n en el STA R para el m todo Fondaparinux con el STA Fondaparinux Calibrator es de 0 10 ug ml y la linealidad est asegurada hasta 2 00 ug ml e Reproducibilidad Se han llevado a cabo estudios de reproducibilidad intra e inter seri
6. caso de la utilizaci n de tubo CTAD 5 Cuando la muestra se obtiene con citrato convencional es preferible efectuar una doble centrifugaci n 5 e Conservaci n El plasma se puede conservar durante 2 horas a 20 5 C con citrato convencional Para la dosificaci n de las heparinas el plasma se puede conservar durante 4 horas a 20 5 C en tubo CTAD 2 7 CONSERVACI N Y PREPARACI N DE LOS REACTIVOS Conservados a 2 8 C en su estado original los reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en el estuche e Reactivo 1 Reconstituir cada vial con 4 ml REF 00612 o 8 ml REF 00661 de agua destilada Dejar estabilizarse la soluci n durante 60 minutos a temperatura ambiente 18 25 C Homogenizar Luego a adir un STA Reducer nuevo REF 00797 o 00801 y el tap n perforado La estabilidad del Reactivo 1 despu s de su reconstituci n es para la dosificaci n de las heparinas HNF y HBPM en el vial original con STA Reducer y tap n perforado 0 7 d as en STA Compact y STA R REF 00612 00661 0 8 d as en STA Satellite REF 00612 00661 la REF 00612 solo se valida para el metodo STA Hybrid Hep Calibrator en el vial original tapado no a adir el STA Reducer 21 d as a 2 8 C REF 00612 para la dosificaci n de Fondaparinux 7 d as en STA Compact y STA R REF 00612 00661 en el vial original con STA Reducer y tap n perforado 21 d as a 2 8 C REF 00612 en el via
7. es en muestras que conten an heparina o Fondaparinux Los resultados obtenidos en el STA o STA R con el STA Rotachrom Heparin est n indicados en las tablas siguientes HNF methodolog a STA Hybrid Hep Calibrator Reproducibilitad Reproducibilitad intra serie inter serie Muestra Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 4 n 21 21 10 10 X UI mI 0 23 0 53 0 26 0 54 DS Ul ml 0 01 0 02 0 01 0 02 CV 4 6 3 1 4 8 4 0 HNF methodolog a STA Hepanorm H Reproducibilitad Reproducibilitad intra serie inter serie Muestra Muestra 1 Muestra Muestra 3 Muestra 4 on 21 21 10 10 X Ul mI 0 36 0 53 0 32 0 67 DS Ul ml 0 02 0 02 0 01 0 02 CV 9 4 4 3 2 4 3 2 8 HBPM methodolog a STA Hybrid Hep Calibrator Reproducibilitad Reproducibilitad intra serie inter serie Muestra Muestra a Muestra b Muestra c Muestra d PA n 21 21 10 10 X Ul anti Xa ml 0 83 1 49 0 80 1 41 DS UI anti Xa ml 0 02 0 05 0 03 0 07 CV 9 2 5 3 1 4 1 4 9 HBPM methodolog a STA Calibrator HBPM LMWH Reproducibilitad Reproducibilitad intra serie inter serie Muestra Muestra a Muestra b Muestra c Muestra d las n 21 21 10 10 X UI anti Xa ml 0 66 1 34 0 71 1 39 DS UI anti Xa mI 0 03 0 05 0 04 0 05 CV 4 6 3 8 5 9 3 6 FDPX methodolog a STA Fondaparinux Calibrator Repr
8. izar estos reactivos Antes de cualquier utilizaci n leer con atenci n el Manual del Operador del instrumento utilizado Tener cuidado en el manejo de estos reactivos y las muestras 6 OBTENCI N Y TRATAMIENTO DE LA MUESTRA La obtenci n de la muestra debe ajustarse a las recomendaciones para los ex menes de hemostasis Un tratamiento inadecuado de la muestra sangu nea puede provocar la aparici n en el plasma de factor 4 plaquetario PF4 inhibidor potencial de la heparina HNF Por consiguiente se pondr la mayor atenci n posible en la preparaci n de la muestra En el caso de una heparinoterapia discontinua se ha de precisar y conocer el plazo de tiempo que separa la obtenci n de la muestra de la inyecci n precedente o de la siguiente e Obtenci n de la muestra En un tubo con una soluci n de citrato tris dico 0 109 M 1 vol de citrato para 9 vol de sangre Para la dosificaci n de las heparinas utilizar de preferencia tubos CTAD que son especialmente indicados para prevenir la inactivaci n de la heparina 2 Centrifugaci n Se cuidar al m ximo la centrifugaci n con vistas a limitar la alteraci n de las plaquetas as como el n mero de plaquetas residuales Se centrifugar durante 15 minutos a 2000 2500 g a una temperatura cerca de los 18 C Esta centrifugaci n se llevar a cabo durante la hora siguiente a la obtenci n de la muestra sobre citrato convencional o durante las cuatro horas siguientes en el
9. l original tapado no a adir el STA Reducer No se debe congelar Reactivo 2 Es necesario verificar que la totalidad del liofilizado se encuentra en el fondo del vial Si no es as antes de la apertura se golpear sobre una superficie s lida con el fin de hacer que descienda el liofilizado hasta el fondo Luego reconstituir cada vial de Reactivo 2 con el contenido de un vial de Reactivo 3 R3 incluido en el mismo estuche Dejar estabilizarse la soluci n durante 60 minutos a temperatura ambiente 18 25 C Homogenizar Luego a adir un STA Reducer nuevo REF 00797 o 00801 y el tap n perforado La estabilidad del Reactivo 2 despu s de su reconstituci n es para la dosificaci n de las heparinas HNF y HBPM en el vial original con STA Reducer y tap n perforado 0 7 d as en STA Compact y STA R REF 00612 00661 0 8 d as en STA Satellite REF 00612 00661 la REF 00612 solo se valida para el metodo STA Hybrid Hep Calibrator en el vial original tapado no a adir el STA Reducer 21 d as a 2 8 C REF 00612 para la dosificaci n de Fondaparinux 7 d as en STA Compact y STA R REF 00612 00661 en el vial original con STA Reducer y tap n perforado 21 d as a 2 8 C REF 00612 en el vial original tapado no a adir el STA Reducer e El Reactivo 3 R3 est listo para su empleo e NB Considerando las numerosas condiciones de almacenaje parcialmente en el sistema parcial
10. mente a 2 8 C de estos reactivos y auxiliares cada laboratorio deber a establecer la propia estabilidad conforme al uso que haga La misma no debe exceder los valores indicados que han sido obtenidos en condiciones controladas Cuando est n almacenados a 2 8 C atemperar los reactivos durante 30 minutos a temperatura ambiente 18 25 C 8 REACTIVOS Y MATERIAL AUXILIARES e STA Owren Koller REF 00360 e Calibraci n STA Hybrid Hep Calibrator REF 00687 para valorar las HNF y HBPM STA Hepanorm H REF 00684 para valorar las HNF STA Calibrator HBPM LMWH REF 00685 para valorar las HBPM STA Fondaparinux Calibrator REF 00354 para valorar las Fondaparinux e Control de calidad STA Heparin Control REF 00683 para valorar las HNF STA Quality HBPM LMWH REF 00686 para valorar las HBPM STA Fondaparinux Control REF 00355 para valorar las Fondaparinux e Instrumento de la l nea STA que puede utilizar estos reactivos e STA mini Reducer REF 00797 STA Rotachrom Heparin 0 o STA maxi Reducer REF 00801 STA Rotachrom Heparin e Equipamiento habitual en los laboratorios de an lisis cl nicos 9 PROCEDIMIENTO 9 1 Calibraci n La calibraci n se lleva a cabo con la ayuda de los estuches STA Hybrid Hep Calibrator HNF y HBPM STA Hepanorm H HNF STA Calibrator HBPM LMWH HBPM o STA Fondaparinux Calibrator FDPX Preparar los reactivos de estos estuches y tra
11. nsferir al aparato las informaciones contenidas en los c digos de barras de la hoja La curva de calibraci n se puede ver en la pantalla del instrumento con la ayuda del men Calibration ver el Manual del Operador 9 2 Plasmas a testar Los plasmas a testar se utilizan puros Introducirlos en el instrumento ver el Manual del Operador del aparato utilizado Seleccionar el los test s a efectuar en los plasmas de pacientes 9 3 Controles Estos controles son necesarios para verificar la exactitud y la reproducibilidad de los resultados Utilizar los estuches STA Heparin Control HNF STA Quality HBPM LMWH HBPM o STA Fondaparinux Control FDPX Preparar estos controles y transferir al aparato las informaciones contenidas en los c digos de barras de la hoja Estos controles se utilizan puros 9 4 An lisis Para la realizaci n de la dosificaci n seguir los protocolos HNF HBPM o FDPX descritos en los Standardized Operating Procedures del instrumento El aparato lleva a cabo autom ticamente la medici n de la heparina HNF o HBPM o Fondaparinux de los plasmas en los que se va a efectuar el test a 405 nm a medida que se van introduciendo las muestras 10 RESULTADOS El nivel de heparina o Fondaparinux de las muestras en las que se ha llevado a cabo el test se muestra en tiempo real en Ul ml HNF UI anti Xa ml HBPM o ug ml FDPX en la pantalla del aparato ver el Manual del Operador
12. oducibilitad Reproducibilitad intra serie inter serie Muestra Muestra A Muestra B Muestra C Muestra D MM 21 21 10 10 X ug ml 0 55 1 37 0 56 1 38 DS ug ml 0 02 0 03 0 02 0 04 CV 2 9 2 3 3 4 2 9 BIBLIOGRAF A 1 KAKKAR V V Low dose heparin in the prevention of venous thromboembolism Thromb Diath Haemorrh 33 87 96 1974 2 CONTANT G GOUAULT HEILMANN M MARTINOLI J L Heparin inactivation during blood storage lts prevention by blood collection in citric acid theophylline adenosine dipyridamole C T A D mixture Thromb Res 31 365 374 1983 3 SCULLY M F DECOUSUS H A ELLIS V PARKER C GIRARD P KAKKAR V V Measurement of heparin in plasma influence of inter subject and circadian variability in heparin sensitivity according to method Thromb Res 46 447 455 1987 4 BARROWCLIFFE T W THOMAS D P Heparin and low molecular weight heparin in Haemostasis and Thrombosis Bloom A L Forbes C D Thomas D P Tuddenham E G D Edinburgh Churchill Livingstone third edition 2 1417 1438 1994 5 Etude des diff rents param tres intervenant dans les variables pr analytiques revue de la litt rature Sang Thromb Vaiss 10 5 18 1998 6 BONEU B POTRON G GRUEL Y NGUYEN P AIACH M Utilisation des h parines en pratique m dicale courante Sang Thromb Vaiss 12 12 25 2000 7 DEPASSE F GEROTZIAFAS G T BUSSON J VAN DREDEN
13. ondaparinux se produce una competencia entre este mecanismo y el mecanismo de inhibici n propio del complejo heparina FDPX antitrombina inhibici n que es ampliamente responsable de la acci n anticoagulante de la heparina 1 o Fondaparinux 7 El m todo propuesto es un m todo en un tiempo basado en un principio comparable a partir de la adici n del factor Xa a la mezcla plasma sustrato se producen simult neamente dos reacciones hidr lisis del sustrato por parte del factor Xa inhibici n del factor Xa por parte del complejo heparina FDPX antitrombina Tras el periodo de tiempo necesario para el establecimiento del equilibrio de la reacci n de competici n la liberaci n de paranitroanilina es inversamente proporcional a la concentraci n de heparina o Fondaparinux presente en el medio El complejo heparina FDPX antitrombina se forma a partir de la heparina o del Fondaparinux y de la antitrombina AT propias del plasma testado 4 COMPOSICI N DEL KIT Cada estuche de STA Rotachrom Heparin contiene una hoja con c digo de barras Este c digo de barras contiene las informaciones siguientes n mero de lote referencia del estuche referencias de los reactivos fecha de caducidad e Reactivo 1 sustrato crom geno CBS 52 44 liofilizado aproximadamente 4 2 umoles REF 00612 o 8 4 umoles REF 00661 por frasco de MAPA Gly Arg pNA AcOH e Reactivo 2 factor Xa bovino aproximadamente 1 1 Ul REF 00612 o
Download Pdf Manuals
Related Search