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1. e Visite nuestras webs www hologic com o Www thinprep com Cat logos de Producto Informaci n de Contacto Bibliograf as completas Ginecolog a y no Ginecolog a Presentaci n de casos de Citolog a
2. ThinPrep General dia Citolog a General ThinPrep Preparaci n de Muestras No Ginecol gicas Beneficios de la Tecnolog a ThinPrep El uso de Citolog a General ThinPrep para muestras No ginecol gicas e Optimiza la preservaci n celular e Estandariza la preparaci n de las muestras e Simplifica el screening e Ofrece la versatilidad para desarrollar t cnicas adicionales ales Cri Mat Lista de Materiales Necesarios Procesador ThinPrep 2000 Portaobjetos ThinPrep Microscope e Filtros No Gine Azul e V rtex Multi Mix Racked e Soluciones CytoLyt and PreservCyt Lista de Materiales Necesarios Centr fuga capacidad tubos 50 ml Tubos de centr fuga de 50 ml sistema de tinci n y reactivos Pipetas de pl stico graduadas de 1 ml Fijador est ndar de laboratorio Cubreobjetos y medio de montaje cido ac tico glacial DTT y soluci n salina para la resoluci n de problemas Soluciones Medios Recomendados de Recogida e CytoLyt Plasma Lyte e Polysol e Soluciones electrol ticas equilibradas Medios de Recogida No Recomendados Mucollexx e Alcohol e L quidos que contengan carbowax e Saccomanno Medios de Recogida No Recomendados e Salino Normal e Medios de Cultivo e RPMI e PBS e Soluciones que contengan formalina Soluciones de Hologic e CytoLyt e PreservC yt Soluciones de H
3. u homogeneizar manualmente inyectando con una pipeta de pl stico hacia atr s y adelante Lavado con Cytolyt El prop sito de este paso es conservar la morfolog a celular a la vez que se lisan hemat es se disuelve el moco y se reduce la precipitaci n de prote na e A adir 30 ml de CytoLyt al pellet concentrar por centrifugaci n desechar el sobrenadante y agitar con el v rtex para resuspender el pellet Evaluar el Pellet e Siel pellet es blanco rosa p lido tostado o no visible A adir la muestra al Vial de PreservCyt Evaluar el Pellet e S el pellet es marcadamente rojo o marr n indicando la presencia de sangre Hacer un Lavado con CytoLyt l P 4 A adir 30ml de CytoLyt Concentrar por Centrifugaci n Desechar el Sobrenadante Agitar para Resuspender el Pellet Evaluar el Pellet e Para probar que est en forma l quida coger una peque a cantidad de muestra con una pipeta y dejar caer unas gotas en el tubo Si las gotas aparecen fibrosas o celatinosas el moco se debe licuar m s Evaluar el Pellet Lavado con Cytol yt 1 Agitaci n Mec nica 2 Concentrar por Centrifugaci n 3 Desechar el Sobrenadante 4 Agitar con el V rtex para Resuspender el Pellet A adir la muestra al vial de PreservCyt e Si el pellet es claramente visible y el volumen es lt Iml Agitar el pellet con el V rtex y tirar dos gotas a un vial n
4. Centrifugaci n Lavar con Cytol yt Desechar el sobrenadante y resuspender el pellet Evaluar el pellet Afiadir la muestra al Vial de PreservC yt Dejar reposar 15 minutos Poner en el Procesador ThinPrep usando Secuencia 2 Fijar Te ir y Evaluar T cnicas de Procesamiento de Muestras ThinPre araral Cytol Centrifugaci n 6002 x 10 minutos Concentrar el material celular para separar los componentes celulares del sobrenadante Consultar el Cap tulo referente a la Velocidad de Centrifugaci n en la pag 1 14 del Manual del operador del ThinPrep 2000 en la secci n de No Ginecolog a para determinar la velocidad correcta de la centr fuga para obtener una fuerza de 600g Agitaci n Mec nica Muestras Mucosas e M todo A Agitar el v rtex la muestra con CytoLyt 10 minutos en un v rtex autom tico e M todo B Mezclar la muestra con CytoLyt unos y segundos ThinPrep Daraa Cytetomy Desechar el sobrenadante e El prop sito de este paso es concentrar la muestra e Invertir el tubo de centr fuga 180 en un solo movimiento suave desechar todo el sobrenadante y retornar el tubo a su posici n original Resuspender el Pellet con el V rtex e El prop sito de este paso es aleatorizar el pellet celular y mejorar los resultados del lavado con Cytolyt Colocar el tubo de centr fuga en un v rtex y agitar el pellet 3 segundos
5. angre o protein ceas Tiene el porta un Diluir a adir a un halo de material mm vial de PreservCyt Si celular y o Yes el halo est presente polimorfonucleares en el nuevo porta contactar con el Servicio T cnico de Hologic Muestras con sangre o protein ceas El porta es escaso y contiene sangre prote nas o restos no BELL Centrifugar decantar y agitar con el v rtex Si el porta resultante es s escaso contactar con el Servicio T cnico de Hologic Contactar con el Servicio T cnico de Hologic Artefactos Comunes Detalle Nuclear Borroso Puede ser causado por el uso de PBS salino o RPMI como l quidos de recogida Recoger la muestra en fresco en CytoLyt oen soluci n de electrolitos equilibrada Artefactos Comunes Efecto de halo En muestras muy densas s lo el borde externo del material celular se transfiere al porta S el porta no es satisfactorio se puede realizar una segunda preparaci n utilizando los o mismos procedimientos de soluci n de problemas comentados anteriormente Artefactos Comunes Artefacto de Tinci n La preparaci n muestra una tinci n central roja o naranja principalmente en los grupos celulares que imita el secado al aire Utilizar ba os de alcohol nuevos o un ba o adicional despu s de la tinci n citoplasm tica Para m s informaci n e Consulte su Manual del Operador ThinPrep 2000 Para m s informaci n
6. oL yt tan pronto como sea posible Recogida Muestras Mucosas e Esputo Recoger directamente en QUID e Aspirados Lavados Recoger directamente con una soluci n electrol tica equilibrada Cepillados Depositar el cepillo de recogida directamente en un tubo rellenado previamente con CytoLyt Recogida L quidos Concentrar la muestra en fresco por centrifugaci n antes de a adir CytoLyt Si no es posible Recoger las muestras directamente en CytoLyt eLa relaci n m nima de CytoLyt y muestra debe ser de 1 3 Recogida Muestras Superficiales Cepillados y raspados superficiales son las nicas muestras no einecol gicas recogidas directamente en PreservC yt Preparaci n Punci n Asptraci n con Aguja Fina MD ma O Un U Concentrar por centrifugaci n lirar el sobrenadante y resuspender el pellet Evaluar el pellet celular A adir la muestra el vial de PreservCyt Dejar 15 minutos Poner en el Procesador ThinPrep utilizando la Secuencia 2 Fijar Te ir y Evaluar W N SO O p Preparaci n Muestras Mucosas Agitaci n Mec nica Concentrar por centrifugaci n Desechar el sobrenadante y resuspender el pellet Evaluar el pellet Afiadir la muestra al Vial de PreservC yt Dejar reposar 15 minutos Poner en el Procesador ThinPrep usando la secuencia 3 Fijar Te ir y Evaluar Preparaci n L quidos Concentrar por
7. ologic Soluci n CytoLyt e Soluci n conservante tamponada con base de Metanol lisa los hemat es previene la precipitaci n de prote nas disuelve el moco conserva la morfolog a de las c lulas citolog a general 8 d as a temperatura ambiente Soluciones de Hologic Soluci n CytoLyt Como medio de transporte e Se utiliza en la preparaci n de la muestra previamente al procesamiento con el ThinPrep2000 Soluciones de Hologic Soluci n PreservC yt eSoluci n tamponada con base de Metanol dise ada para mantener las c lulas durante el transporte y la preparci n del portaobjetos en el Procesador ThinPrep 2000 Las muestras deben ser transportadas y almacenadas en Soluci n PreservCyt previamente al procesamiento Soluciones de Hologic Soluci n PreservC yt e La soluci n PreservCyt no puede ser sustituida por ning n otro reactivo e Las c lulas en la Soluci n PreservCyt se conservan unas 3 semanas a temperatura de entre 4 SC Recogida y Preparaci n de la Muestra Recogida Punci n Asptraci n con Aguja Fina Depositar y disolver toda la muestra en un tubo de centr fuga que contenga 30 ml de Soluci n CytoLyt o en una soluci n electrol tica equilibrada como Polysol o Plasma Lyte Recogida Muestras Mucosas Recoger directamente en 30 ml de Soluci n CytoL yt e Si se recoge en fresco a adir 30 ml de Soluci n Cyt
8. uevo de PreservC yt A adir la muestra al vial de PreservCyt e Siel volumen del pellet es gt Iml A adir Iml de CytolL yt al tubo y agitar con el v rtex brevemente para resuspender el pellet Tirar gota de la muestra a un vial nuevo de vial PreservCyt A adir la muestra al vial de PreservCyt e S1el pellet no es visible o escaso A adir el contenido de un vial nuevo de PreservCyt al tubo y agitar brevemente para mezclar Tirar todo la muestra dentro del vial vacio de PreservC yt Soluci n de Problemas Muestras Mucosas mensaje Comprobar si la Sample is Dilute ss Celularidad es adecuada S S1 no utilizar m s pellet s1 lo hay ThinPrep Garar l Cytelomy Muestras Mucosas Tiene el porta un Diluir a adir a un halo de material vial de PreservC yt Si celular y o el halo est presente polimorfonucleares qa en el nuevo porta contactar con el Servicio T cnico de Hologic Muestras Mucosas El porta es escaso contiene moco y Centrifugar decantar y agitar con el v rtex Lavar con Soluci n CytoLyt S el porta resultante es escaso contactar con el Servicio T cnico de Hologtc Contactar con el Servicio T cnico de Hologtc Muestras con sangre o protein ceas Comprobar si la celularidad es adecuada S1 no utilizar m s pellet si lo hay mensaje sample is Dilute Muestras con s

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