a la Sigatoka Negra (Mycosphaerella fijiensis
Contents
1. otras caracter sticas como producci n y respuesta a otros problemas fitosanitarios que tambi n deben ser consideradas al momento de realizar un elecci n del material a cultivar CONCLUSIONES La siembra directa de tejido afectado en medio de cultivo PDA result ser un m todo muy til y efectivo para el aislamiento del pat geno y para la obtenci n de cultivos monosp ricos en comparaci n con el m todo de descarga de ascosporas El m todo de conservaci n en papel filtro mostr ser una herramienta eficiente para el almacenamiento del hongo por largos periodos de tiempo adem s de ser importante porque mantiene la esporulaci n de los aislamientos y conserva las caracter sticas de crecimiento y virulencia de los mismos Se encontraron diferencias en la morfolog a y virulencia de 50 aislamientos de Mycophaerella fijiensis inoculados en pl ntulas de pl tano Domino Hart n La virulencia de los aislamientos M fijiensis no se relacion con su origen geogr fico ni con el genotipo del cual se obtuvieron Los genotipos de pl tano y banano mostraron un comportamiento diferencial frente a cinco aislamientos lo cual indica la presencia de razas del pat geno Los genotipos Topocho Maque o FHIA 20 FHIA 21 de pl tano y los genotipos Sedita y FHIA 23 de banano presentaron un mayor nivel de resistencia El m todo de evaluaci n temprana de resistencia a M fijiensis en cultivares de pl tano y banano es confiable y reproducibl2. VA Virulencia alta VM Virulencia media VB Virulencia baja VMB Virulencia muy baja 5860 Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Evaluaci n de resistencia de genotipos de pl tano Tabla 5 Calificaci n de las variables PI TES ABCDE y r para grupos de interacciones genotipo aislamiento conformados del an lisis de componentes principales ACP y an lisis de cl ster con el m todo UPGMA Grupo Interacciones Genotipo aislamiento pr TES ABCDE y I 12 316 B 237 M 12 B 012 B 5 II 13 200 A 316 B 22 B 010 B 8 In 18 236 M 176 A 61 M O03 M IV 5 176 A 22 M 79 M 024 M V 20 228 M 117 A 127 A 045 A VI 32 180 A 147 A 144 A 043 A ALTA A 16 22 10 19 12 19 0 33 0 5 Criterio MEDIA M 22 28 19 28 6 12 0 16 0 33 BAJA B 28 35 28 38 0 6 0 0 16 PI Periodo de incubaci n TES Tiempo de evoluci n de enfermedad y r Tasa de desarrollo Reacci n de los genotipos Musa spp frente a los aislamientos de M fijiensis La Tabla 6 muestra la susceptibilidad de muchos de los genotipos a la mayor a de los aislamientos en ese sentido los genotipos de pl tano Africa y los bananos Gross Michel Giant y Valery Cavendish se comportaron de manera susceptibles a todos los aislamientos evaluados otros genotipos de pl tano como FHIA 20 Topocho Maque o Dominico y Cubano negro se comportaron de manera diferencial ante los aislamientos presentando resistencia para al menos a uno de ellos mientras que en
3. al disminuir su capacidad fotosint tica De presentarse esta condici n la planta no logra extraer de las hojas los elementos nutritivos para llevarlos al racimo y llenarlo ste puede presentar madurez prematura y la fruta no sirve para la exportaci n Herrera 2007 1 Ingeniera Agr noma Programa Patolog a de Yuca y Frutas Tropicales Centro Internacional de Agricultura Tropical CIAT V a Cali Palmira km 17 Valle del Cauca Colombia lt alejata05UMhotmail com gt Fitopat loga Jefe del Programa de Patolog a de Yuca y Frutas Tropicales Centro Internacional de Agricultura Tropical CIAT V a Cali Palmira km 17 Valle del Cauca Colombia lt e alvarezOcgiar org gt 3 Fitopat logo Profesor Titular Universidad de Caldas Calle 65 No 26 10 Manizales Colombia lt jairo castano_zOudecaldas edu co gt Recibido Mayo 27 de 2010 aceptado Noviembe 28 de 2010 Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Las medidas de manejo de la enfermedad se han basado en el uso de productos qu micos que aunque permiten enfrentar de forma eficaz la enfermedad presenta desventajas por sus efectos sobre el medio ambiente sumado a la resistencia de las poblaciones del pat geno adquirida por la aplicaci n de ciertos fungicidas sist micos muy utilizados como los benzimidazoles y m s recientemente los triazoles Vega 2002 La problem tica de la Sigatoka negra va mas all de las p rdidas que ocasiona y de las c
4. ancho y n mero de septas de 30 conidias Para dichas variables se realiz un an lisis de varianza con un modelo de bloques complemente al azar Por su parte la caracterizaci n morfol gica de la colonia se hizo a los 35 d de crecimiento en medio de cultivo PDA donde se evalu el di metro la textura y el color de la colonia y se utiliz un dise o de bloques completos al azar con un disco de 3 mm de di metro del aislamiento por caja Petri y tres repeticiones por aislamiento Caracterizaci n patog nica Para la producci n de in culo los fragmentos de papel filtro colonizados por el hongo fueron reactivados mediante su siembra en cajas Petri con medio PDA Las cajas fueron incubadas en oscuridad a 24 C por 25 d para la producci n de conidias La inoculaci n del hongo se hizo Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 asperjando uniformemente una suspensi n conidial de una concentraci n de 5 000 conidias mL sobre el env s de las dos hojas m s j venes abiertas en pl ntulas de Dominico Hart n genotipo susceptible a la Sigatoka negra con 3 meses de edad Se evaluaron las variables periodo de incubaci n PI definido como el tiempo d as desde el momento de la inoculaci n hasta la aparici n de los primeros s ntomas tiempo de evoluci n de los s ntomas TES registrado como el tiempo d as desde la aparici n de los primeros s ntomas hasta el estado de mancha con centro necrosado rea bajo l
5. n patog nica de aislamientos La ndice de recombinaci n gen tica Manzo et al 2005 reacci n observada de Dominico Hart n ante los 50 y conlleva a una r pida aparici n de poblaciones del aislamientos evaluados Tabla 4 infiere que todas la hongo con nuevos genes de virulencia interacciones planta pat geno son decar ctercompatible el 78 de los aislamientos tuvieron una compatibilidad La alta variabilidad patog nica del M fijiensis en entre media alta y muy alta lo que demuestra que este Dominico Hart n demuestra la necesidad de evaluar a 5862 Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Evaluaci n de resistencia de genotipos de pl tano nivel de invernadero diferentes genotipos de Musa spp frente a una diversa y amplia gama de aislamientos del hongo que representen su variaci n patog nica y gen tica real que permita reconocer genotipos resistentes a las cepas del colombianas del pat geno y a su vez facilite la identificaci n de fuentes de resistencia confiables a la Sigatoka negra Evaluaci n de resistencia en genotipos de pl tano y banano Las interacciones planta pat geno observadas en el complejo Musa spp y M fijiensis se manifestaron de acuerdo a la hip tesis del gen x gen de Flor 1971 donde la resistencia result de la interacci n gen tica entre los genes de resistencia de la planta y los genes de avirulencia del pat geno la ausencia mutaci n o p rdida de uno de estos genes en cu
6. 4 1 64 1 41 IV VB 23 MCuS 5 1 23 15 11 5 0 5 0 59 1 12 VII VA 24 MCuS 6 2 31 10 6 9 0 6 0 12 1 37 VI VM 25 MCuV 2 2 21 9 16 7 0 7 2 63 0 67 VIII VMA 26 MCuV 3 2 23 10 14 8 0 7 2 16 0 41 VIII VMA 27 MCoP 1 1 29 15 4 9 0 5 1 31 0 V VM 28 MCoP 2 1 29 7 11 3 0 8 1 6 1 45 VI VM 29 MCoP 3 1 26 8 14 6 0 8 2 38 0 7 VI VM 30 MCoP 4 1 31 12 6 3 0 7 0 06 1 32 VI VM 31 MHP 1 1 26 10 11 3 0 7 1 25 0 3 V VM 32 MHP 3 1 22 10 16 8 0 7 2 46 0 56 VIII VMA 33 MMS 1 1 24 15 10 1 0 5 0 01 1 1 VII VA 34 MMS 1 2 26 13 10 7 0 6 0 56 0 22 V VM 35 MMS 1 3 22 15 13 0 5 0 94 1 33 VII VA 36 MMP 1 1 24 11 13 9 0 7 1 77 0 34 VIII VMA 37 MMV 2 1 30 13 5 7 0 5 1 0 45 V VM 38 MMV 2 2 23 14 10 6 0 5 0 37 1 VII VA 39 MMV 3 1 28 10 8 4 0 7 0 67 0 89 VI VM 40 MMV 4 1 29 13 6 4 0 5 0 79 0 43 V VM 41 MMV 5 1 26 12 8 5 0 5 0 14 0 2 V VM 42 MQA 1 1 34 9 3 8 0 4 1 43 1 85 IV VB 43 MQM 1 1 22 12 13 7 0 6 1 72 0 74 VIII VMA 44 MQM 2 1 29 17 3 4 0 3 2 2 0 36 TI VB 45 MQQ 1 1 31 11 6 1 0 5 0 7 0 99 VI VM 46 MQT 1 2 22 14 13 3 0 5 1 08 1 31 VII VA 47 MVC 2 1 26 8 12 7 0 7 1 82 0 6 VI VM 48 MVC 3 2 24 11 10 7 0 6 1 03 0 22 V VM 49 MVP 3 2 28 12 7 8 0 7 0 31 0 65 VI VM 50 MVV 1 2 29 11 8 1 0 7 0 41 0 95 VI VM Variables PI Periodo de incubaci n d as TES Tiempo evoluci n de s ntomas d as ABCDE rea bajo la curva del desarrollo de la enfermedad y r Tasa desarrollo de la enfermedad CP Componentes principales Virulencia VMA Virulencia muy alta
7. 49 MCuS 5 2 Cauca Sedita 91 MMV 6 2 Meta G Michel 9 MCP 1 2 Caldas frica 50 MCuS 6 1 Cauca Hart n 92 MQA 1 1 Quind o D Hart n 10 MCP 1 3 Caldas frica 51 MCuS 6 2 Cauca Hart n 93 MQA 1 2 Quind o D Hart n 11 MOP 2 1 Caldas D Hart n 53 MCuV 1 2 Cauca G Michel 94 MQA 1 3 Quind o D Hart n 12 MOP 2 2 Caldas D Hart n 54 MCuV 2 1 Cauca Topocho 95 MQT 1 1 Quind o FHIA 17 13 MOP 2 3 Caldas D Hart n 55 MCuV 2 2 Cauca Topocho 96 MQT 1 2 Quind o FHIA 17 14 MOP 2 4 Caldas D Hart n 56 MCuV 3 1 Cauca Hart n 97 MQT 1 3 Quind o FHIA 17 15 MCP 3 1 Caldas FHIA 20 57 MCuV 3 2 Cauca Hart n 98 MQM 1 1 Quind o Hart n 16 MCP 3 2 Caldas FHIA 20 58 MCoP 1 1 C rdoba Hart n 99 MQM 1 2 Quind o Hart n 17 MOP 3 3 Caldas FHIA 20 59 MCoP 1 2 C rdoba Hart n 100 MQM 1 3 Quind o Hart n 18 MOP 4 1 Caldas FHIA 21 60 MCoP 1 3 C rdoba Hart n 101 MQM 2 1 Quind o Guayabo 19 MOP 4 2 Caldas FHIA 21 61 MCoP 2 1 C rdoba Hart n 102 MQM 2 2 Quind o Guayabo 20 MCP 4 3 Caldas FHIA 21 62 MCoP 2 2 C rdoba Hart n 103 MQM 2 3 Quind o Guayabo 21 MCP 5 1 Caldas FHIA 25 63 MCoP 2 3 C rdoba Hart n 104 MQQ 1 1 Quind o D Hart n 22 MOP 5 2 Caldas FHIA 25 64 MCoP 3 1 C rdoba a 105 MQQ 1 2 Quind o D Hart n 23 MCP 5 3 Caldas FHIA 25 65 MCoP 3 2 C rdoba a 106 MQQ 1 3 Quind o D Hart n 24 MCqF 1 1 Caquet G Michel 66 MCoP 3 3 C rdoba a 107 MVC 1 1 Valle a 25 MCqF 1 2 Caquet G Michel 67 MCoP 4 1 C rdoba Topocho 108 MVC 1 2 Valle A 26
8. banano este mismo comportamiento solo se observ en tres genotipos FHIA 23 Sedita y Gran Enano El nico genotipo en presentar resistencia a todos los aislamientos fue el pl tano FHIA 21 el cual a n conserva su alta resistencia a la Sigatoka negra bajo condiciones de campo Por otra parte la comparaci n de las reacciones de cada uno los aislamientos ante el conjunto de genotipos evaluados comparaci n de filas Tabla 6 muestra un comportamiento diferencial de la virulencia del pat geno Los aislamientos MQM2 1 MCP4 2 y MCoP3 1 presentaron la mayor virulencia debido a que afectaron la mayor cantidad de genotipos 13 12 y 11 respectivamente esto a diferencia del aislamiento MAU1 3 que evidenci una menor virulencia ya que Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 s ntomas ABCDE rea bajo la curva del desarrollo de la s lo 5 genotipos expresaron susceptibilidad a esta cepa El aislamiento MMP1 1 presenta una virulencia media debido a que 9 genotipos fueron susceptibles a este aislamiento Esto es importante ya que si se observa la reacci n de virulencia de stos aislamientos en Dominico Hart n Ensayo de patogenicidad es claro que el comportamiento de alta o baja virulencia de una cepa espec fica frente a un solo genotipo no indica que dicho comportamiento sea el mismo frente a cualquier otro genotipo donde se eval e esto queda claramente confirmado con el aislamiento MQM2 1 quien present una baja virule
9. cultivo de pl tano Corporaci n Colombiana de Investigaci n Agropecuaria CORPOICA Litoas Manizales Colombia 114 p Manual T cnico Aricapa M y F Correa 1994 Almacenamiento de hongos sobre papel filtro Programa Patolog a de Arroz CIAT Ascolfi Informa Bolet n bimestral 20 3 29 30 Belalc zar S J Toro y R Jaramillo 1991 El cultivo del pl tano Musa AAB Simmonds en el tr pico Instituto Colombiano Agropecuario ICA Subgerencia de Investigaci n Centro Internacional de Investigaciones para el Desarrollo CIID Red Internacional para el Mejoramiento del Banano y el Pl tano INIBAP Cali Colombia 376 p Carlier J M Lebrun M Zapaten C Dubois and X Mourichon 1996 Genetic structure of the global population of banana black leaf streak fungus Mycosphaerella fijiensis Molecular Ecology 5 4 499 510 Carlier J D De Waele and J Escalant 2002 Global evaluation of Musa germplasm for resistance to Fusarium wilt Mycosphaerella leaf spot diseases and nematodes A V zina and C Picq eds INIBAP Technical Guidelines 6 The International Network for the Improvement of Banana and Plantain Montpellier France 68 p Casta o J y L Del R o Mendoza 1997 Manual para el diagn stico de hongos bacterias viru s y nematodos fitopat genos Zamorano Academic Press Universidad de Caldas Facultad de Ciencias Agropecuarias Manizales Colombia 210 p Du Pont 1982 Black and yellow sigatoka I
10. grupos de interacci n genotipo aislamiento Tabla 5 A raz n de que los grupos conformados son de interacciones y no de genotipos un mismo genotipo puede estar presente en varios grupos debido a su diferente reacci n ante el conjunto de aislamientos utilizados 5859 Cu llar A lvarez E Casta o J Tabla 4 Virulencia de 50 aislamientos de Mycoshaerella fijiensis Morelet inoculados en pl ntulas de pl tano Dominico Hart n en invernadero No Aislamiento Variables Cpx x Cl ster PI TES ABCDE r P1 P2 UPGMA Virulencia 1 MAS 1 1 27 9 9 4 0 6 0 79 0 63 VI VM 2 MAS 1 2 26 13 7 9 0 5 0 22 0 35 V VM 3 MAU 1 2 28 31 0 2 0 1 4 69 2 78 II VMB 4 MAU 1 1 28 9 10 8 0 7 1 26 1 01 VI VM 5 MAU 1 3 22 12 16 4 0 6 2 16 0 98 VIII VMA 6 MAU 1 4 24 16 8 7 0 5 0 25 1 11 VII VA 7 MCP 1 3 27 17 4 7 0 4 1 64 0 62 TI VB 8 MCP 2 4 25 19 8 1 0 5 0 8 1 36 VII VA 9 MCP 3 2 40 21 1 0 1 4 75 0 59 I VMB 10 MOP 4 1 26 10 9 8 0 6 0 83 0 26 V VM 11 MCP 4 2 26 10 9 2 0 6 0 48 0 3 V VM 12 MCP 5 1 25 8 11 7 0 6 1 39 0 26 V VM 13 MCP 5 2 34 22 3 2 0 4 3 12 0 26 II VB 14 MCP 5 3 29 16 5 7 0 3 1 71 0 37 TI VB 15 MCqF 1 1 33 10 5 0 6 0 89 1 74 IV VB 16 MCqF 3 1 26 11 8 5 0 6 0 32 0 23 V VM 17 MCqF 4 3 27 13 571 0 4 0 77 0 V VM 18 MCUP 1 2 34 12 2 5 0 3 2 18 1 42 IV VB 19 MCUP 2 1 23 13 12 1 0 5 0 67 1 06 VII VA 20 MCuS 1 1 29 16 4 3 0 3 2 14 0 36 TI VB 21 MCuS 2 2 23 12 12 7 0 5 0 9 0 97 VII VA 22 MCuS 4 1 33 10 4 0
11. sobre el medio de cultivo Despu s de 15 h de descarga los discos de papel filtro con los fragmentos de tejido fueron retirados y con ayuda de un microscopio compuesto se identificaron las ascosporas Estas eran el pticas de 14 a 20 um de largo y 4 a 6 um de ancho hialinas y usualmente con dos c lulas Belalc zar et al 1991 Posteriormente en el estereoscopio y con una aguja de disecci n se tomaron ascosporas individuales y se pasaron a cajas Petri con medio PDA Los aislamientos se incubaron a 27 C durante 20 d en oscuridad para la producci n de micelio Una vez obtenido el micelio con un bistur se retir parte de ste y se coloc en un vial para microcentrifuga con 1 mL de agua destilada est ril y se macer hasta obtener una suspensi n homog nea Se tomaron 250 uL de la suspensi n y se distribuyeron uniformemente en cajas Petri con medio agar V 8 modificado 100 mL de jugo V 8 0 2 g de CaCO y 20 g de agar por litro de agua pH 6 Los cultivos se incubaron a 20 C bajo luz blanca continua durante 2 semanas para la producci n de conidias La metodolog a de siembra directa de tejido afectado consisti en cortar fragmentos de tejido de aproximadamente 15 mm de tal manera que incluyeran tejido enfermo como tejido sano Los fragmentos fueron lavados con agua deionizada Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Evaluaci n de resistencia de genotipos de pl tano durante 45 min y se desinfec
12. AA MQM2 1 R I I S S S S S S I R S S S S S S S MCP4 2 R R S I I S ll S S R I S S S S S S S MCoP3 1 R R R R I S S S S S I R S S I S S S S MMP1 1 R R R I S I S I S S R R I I S S S S S MAU1 3 R R R R R R I I I S R R I I S S S R S Reacci n campo Ri I S R S gt S2 S ogr S Reacci n R Resistente I Intermedio S Susceptible Aislamientos Virulencia en Dominico Hart n MQM2 1 Baja virulencia MCP4 2 y MCoP3 1 Media virulencia MMP1 1 y MAU1 3 Alta virulencia Genotipos de pl tano F21 FHIA 21 F20 FHIA 20 TP Topocho MQ Maque o DMH D Hart n DM Dominico CBN Cubano Negro GY Guayabo HT Hart n CB Cubano Blanco AF Africa Genotipos de banano F23 FHIA23 SD Sedita WC Williams Cavendish GN Guineo GMC Gross Michel Coco GM Gross Michel GC Giant Cavendish GEC Gran Enano Cavendish y VC Valery Cavendish Reacci n campo t Torrado y Casta o 2008 Guzm n y Casta o 2009 3 Aguirre y Casta o 2005 IDIAF 2004 La conservaci n del hongo en papel filtro a temperaturas genotipo no posee genes de resistencia a las poblaciones bajas result ser un m todo eficiente para el colombianas de M fijiensis Esto se correlaciona con la almacenamiento y para la posterior inducci n de reacci n de susceptibilidad de este genotipo en campo esporulaci n En la literatura no se encuentran estudios observada por Hoyos y Casta o 2007 en Colombia y previos de conservaci n del hongo mediante esta por Hern nde
13. Evaluaci n de Resistencia de Genotipos de Pl tano y Banano a la Sigatoka Negra Mycosphaerella fijiensis Morelet Evaluation of Resistance of Plantain and Banana Genotypes to Black Sigatoka Myscosphaerella fijiensis Morelet Alejandra Cu llar Quintero Elizabeth lvarez Cabrera y Jairo Casta o Zapata Resumen Con el objetivo de evaluar bajo condiciones de invernadero genotipos de pl tano y banano frente a poblaciones de Mycosphaerella fijiensis Morelet de diferente virulencia y origen se estableci una colecci n de 125 aislamientos monosp ricos obtenidos en 10 departamentos de Colombia Se seleccionaron 50 aislamientos por rea geogr fica y genotipo hospedante para la caracterizaci n morfol gica y patog nica del hongo en Dominico Hart n En las pruebas de patogenicidad y resistencia se realizaron inoculaciones de una suspensi n acuosa de 5 000 conidias mL la respuesta de las pl ntulas a la enfermedad se determin mediante las variables periodo de incubaci n PI tiempo de evoluci n de los s ntomas TES rea bajo la curva del desarrollo de la enfermedad ABCDE y tasa de desarrollo de la enfermedad r La inoculaci n de los 50 aislamientos en pl ntulas de Dominico Hart n permiti establecer cinco niveles de virulencia muy alta alta media baja y muy baja La virulencia de los aislamientos no se relacion con su origen geogr fico ni con el genotipo del cual se obtuvieron encontr ndose en una mis
14. MCgF 1 3 Caquet G Michel 68 MCoP 4 2 C rdoba Topocho 109 MVC 2 1 Valle A 27 MCqF 2 1 Caquet Guineo 69 MCoP 4 3 C rdoba Topocho 110 MVC 2 2 Valle A 28 MCgF 2 2 Caquet Guineo 70 MHP 1 1 Huila H Blanco 111 MVC 3 1 Valle A 29 MCqF 2 3 Caquet Guineo 71 MHP 1 2 Huila H Blanco 112 MVC 3 2 Valle A 30 MCgF 3 1 Caquet Maque o 72 MHP 2 1 Huila G Michel 113 MVP 1 1 Valle D Hart n 31 MCgF 3 2 Caquet Maque o 73 MHP 3 1 Huila Guineo 114 MVP 1 2 Valle D Hart n 32 MCgF 3 3 Caquet Maque o 74 MHP 3 2 Huila Guineo 116 MVP 2 1 Valle frica 33 MCqF 4 1 Caquet Guayabo 75 MMS 1 1 Magdalena Cavendish 117 MVP 2 2 Valle frica 34 MCqF 4 2 Caquet Guayabo 76 MMS 1 2 Magdalena Cavendish 118 MVP 3 1 Valle Topocho 35 MCqF 4 3 Caquet Guayabo 77 MMS 1 3 Magdalena Cavendish 119 MVP 3 2 Valle Topocho 36 MCuP 1 1 Cauca a 78 MMP 1 1 Meta Topocho 120 MVP 4 1 Valle G Michel 37 MCUP 1 2 Cauca a 79 MMP 1 2 Meta Topocho 121 MVP 4 2 Valle G Michel 38 MCuP 2 1 Cauca a 80 MMV 1 1 Meta G Michel 122 MVR 1 1 Valle Sedita 39 MCUP 2 2 Cauca a 81 MMV 1 2 Meta G Michel 123 MVR 1 2 Valle Sedita 40 MCuS 1 1 Cauca D 500 82 MMV 2 1 Meta G Michel 124 MW 1 1 Valle a 41 MCuS 1 2 Cauca D 500 83 MMV 2 2 Meta G Michel 125 MW 1 2 Valle a a Datos faltantes D Hart n Dominico Hart n G Michel Gros Michel Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 5857 Cu llar A lvarez E Casta o J Tabla 2 Caracterizaci n morfol gica de 50 aislamiento
15. a curva del desarrollo de la enfermedad ABCDE y tasa de desarrollo r del progreso de la enfermedad Las variables PI y TES se determinaron con base en la escala de estadios de s ntomas de la Sigatoka negra establecida por Ar nzazu et al 2002 y las variables ABCDE y la r se determinaron con base en el uso de los diagramas est ndares de Stover modificados por Gauhl en 1990 para Sigatokas citado por Carlier et al 2002 donde grado O sin s ntomas 1 menos de un 1 de rea foliar afectada 2 1 a 5 de rea foliar afectada 3 6 a 15 de rea foliar afectada 4 16 a 33 de rea foliar afectada 5 34 a 50 de area foliar afectada y 6 51 a 100 de rea foliar afectada Se utiliz un dise o de bloques completos al azar con 50 aislamientos tratamientos y cinco repeticiones y con una pl ntula como unidad experimental Para cada una de las variables se hizo un an lisis de varianza y mediante un an lisis de componentes principales se caracterizaron los aislamientos en t rminos de las variables evaluadas Para determinar grupos de aislamientos de caracter sticas similares se hizo un an lisis de cl ster con el m todo de UPGMA group average unweighted pair group method using arithmetic averages y el criterio R Evaluaci n de resistencia Cinco aislamientos de diferente virulencia y origen fueron inoculados en 10 genotipos de pl tano y nueve de banano Las cepas a su vez fueron elegidas teniendo en cuenta el depart
16. ac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Evaluaci n de resistencia de genotipos de pl tano Tabla 3 Calificaci n de las variables PI TES ABCDE y r para los grupos de aislamientos de Mycosphaerella fijiensis Morelet conformados del an lisis de componentes principales ACP y an lisis de cl ster con el m todo UPGMA Grupo Aisla raid PI TES ABCDE I 1 398 B 2 0 B 09 B 0 13 B II 1 283 M 305 B 02 B 010 B III 5 300 B 176 B 42 B 032 B 5 IV 4 337 B 102 A 38 B 04 B 8 v 13 266 M 118 M 85 M 053 M E VI 11 284 M 96 A 93 M 067 A 9 VII 9 233 A 149 M 111 A 0 M VIII 6 223 A 106 A 154 A 067 A ALTA A 21 25 7 11 11 16 0 65 0 85 Criterio MEDIA M 25 30 11 15 6 11 0 45 0 65 BAJA B 30 40 15 30 0 6 0 0 45 PI Periodo de incubaci n TES Tiempo de evoluci n de s ntomas ABCDE rea bajo la curva del desarrollo de la enfermedad y r Tasa de desarrollo Es de mencionar que todos los aislamientos mostraron diferentes niveles de virulencia y que ninguno fue avirulento o no produjo enfermedad en Dominico Hart n A su vez no se pudo establecer ninguna relaci n entre las caracter sticas morfol gicas y la virulencia de los aislamientos ni relaci n entre el origen geogr fico o varietal pl tano o banano de los mismos con su virulencia Evaluaci n de resistencia en genotipos de pl tano y banano El an lisis de varianza para las variables evaluadas mostr en todos los casos interacciones altamente significativ
17. aerella fijiensis Morelet en el pl tano Instituto de Investigaciones Agropecuarias Jorge Dimitrov Granma Cuba 5865
18. alquiera de los dos organismos planta o pat geno es determinante para que la interacci n deje de ser de resistencia y se manifieste como susceptible En ese sentido la susceptibilidad o interacci n de compatibilidad observada en los genotipos Africa Gross Michel Giant y Valery Cavendish a todas las cepas utilizadas demuestra que ninguno de estos genotipos posee los genes de resistencia asociados a los genes de virulencia de los aislamientos utilizados El comportamiento de estos genotipos tambi n explica la reacci n de susceptibilidad en campo observada en los genotipos Africa y Gross Michel en Colombia Hoyos y Casta o 2007 y de Giant y Valery Cavendish en Rep blica Dominicana IDIAF 2004 Galv n y Rengifo 2004 e indica su condici n de susceptibilidad a la enfermedad en cualquier zona de Colombia donde se cultiven o deseen cultivar Por otra parte el comportamiento diferencial de los genotipos Musa spp a las diferentes cepas del hongo muestra mayores reacciones de resistencia en los genotipos de pl tano que en los bananos esto confirma lo mencionado por Tezenas 1990 y Belalc zar et al 1991 quienes afirman que la resistencia a enfermedades en Musaceas es mayor en aquellos materiales con genoma B Balbisiana Pl tanos que aquellos cultivares con genoma A Acuminata Bananos no obstante tambi n declaran que los cultivares diploides con genoma AA a pesar de no poseer genoma B presentan caracter stic
19. amento zona de mayor producci n y genotipo pl tano y banano del cual fueron aisladas Para la producci n de in culo se utiliz la misma metodolog a anteriormente mencionada en la prueba de patogenicidad As mismo se evaluaron las variables PI TES ABCDE y r 5855 Se utiliz un dise o de parcelas divididas con tres repeticiones por tratamiento como factor parcela principal los aislamientos y como subparcela los genotipos en un dise o completamente al azar Se hizo un an lisis de varianza para las variables PI TES ABCDE y r Mediante el an lisis de componentes principales se caracterizaron las interacciones genotipo aislamiento en t rminos de las variables evaluadas Para determinar grupos de interacciones de caracter sticas similares se hizo un an lisis de cl ster con el m todo de UPGMA y el criterio R Todos los datos fueron procesados mediante el programa estad stico Statistical Analysis System SAS versi n 9 RESULTADOS Colecci n y caracterizaci n morfol gica de aislamientos de M fijiensis Del procesamiento de las muestras foliares afectadas con s ntomas t picos de la enfermedad de la Sigatoka negra se conform una colecci n de 125 aislamientos monosp ricos de M fijiensis Tabla 1 El an lisis de varianza detect diferencias altamente significativas P lt 0 001 para las variables longitud ancho y n mero de septas de las conidias para los 50 aislamientos seleccionados La longitu
20. as P lt 0 001 entre los aislamientos y los genotipos lo cual indica el comportamiento diferencial de los genotipos frente a Cada uno de los aislamientos inoculados Mediante el an lisis de componentes principales se obtuvo la recodificaci n de las interacciones genotipo aislamiento en un nuevo sistema ortogonal con dicha informaci n traducida y con el m todo UPGMA y el criterio de R2 se determinaron seis grupos o cl ster cada uno de los cuales agrup las interacciones de caracter sticas m s similares Para cada grupo constituido se calcul el promedio de cada variable Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 el cual se calific dentro de una escala dise ada con base en los rangos obtenidos de PI TES ABCDE y r Tabla 5 Las calificaciones dentro y entre los grupos de interacciones conformados permitieron su distribuci n en tres niveles de reacci n resistente intermedio susceptible Los grupos de interacci n 1 y II mostraron reacci n resistente III y IV reacci n intermedia y V y VI reacci n susceptible Es de mencionar que los grupos de interacciones que conformaron cada nivel de reacci n difirieren entre s por el valor del PI lo cual indica que dicha variable no es determinante para el progreso de la enfermedad ya que las plantas pueden expresar los s ntomas tempranamente pero la enfermedad puede evolucionar de forma lenta Las variables ABCDE y r si explican bien la conformaci n de los
21. as de alta resistencia al pat geno y que aquellos genotipos con alta frecuencia de genoma B es decir ABB expresan mayor resistencia que cultivares con genoma AAB Esto es importante ya que si se observa la Tabla 6 se identifican mayores reacciones de resistencia en las variedades de pl tano Topocho con genoma ABB Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 y banano Sedita con genoma AA que en los dem s genotipos con genoma AAA y AAB Sin embargo aunque Maque o presenta genoma AAB result ser un material interesante debido a que no exterioriza reacci n de susceptibilidad ante ninguno los aislamientos evaluados Este comportamiento lo convierte al igual que a Topocho y Sedita en un material promisorio tanto para el manejo preventivo de la enfermedad como para estudios de mejoramiento gen tico Por otro lado las mayores reacciones de resistencia de los genotipos FHIA Tabla 6 en comparaci n con las respuestas de los dem s genotipos ante el conjunto de aislamientos del pat geno evaluados confirman su resistencia de car cter horizontal FHIA 2008 la cual se adapta a la variabilidad patog nica de los aislamientos colombianos de M fijiensis Las mayores reacciones de resistencia de FHIA 21 que en FHIA 20 concuerdan con la resistencia en campo observada por Torrado y Casta o 2008 Las reacciones de resistencia en FHIA 23 a las cepas colombianas del pat geno aqu detectadas son tambi n importantes a raz n de que
22. d de las conidias fluctu entre 20 y 110 um CV 29 57 el ancho entre 2 5 y 5 um CV 16 85 y el n mero de septas entre 2 y 10 por conidia CV 24 80 Tabla 2 En la caracterizaci n morfol gica de la colonia a los 35 d as de crecimiento en medio de cultivo PDA se obtuvieron diferencias altamente significativas P lt 0 001 para la variable di metro Mediante el criterio del valor cr tico de Duncan 1 926 y el valor de la media general 12 72 mm se conformaron tres grupos de aislamientos de acuerdo a su tama o de colonia Grupo A aislamientos de colonias con di metro entre 13 83 16 33 mm media del grupo 14 68 mm Grupo B aislamientos de colonias con di metro entre 12 00 13 82 mm media del grupo 12 81 mm Grupo C aislamientos de colonias con di metro entre 9 50 11 99 mm media del grupo 10 74 mm Seg n esta agrupaci n los 50 aislamientos se distribuyen en un 24 en el grupo A 50 en el grupo B y 26 en el grupo C Tabla 2 Con respecto al color de la colonia es de anotar que en general para todos los aislamientos el color vari a trav s de los 35 d as del experimento el cual 5856 Cu llar A lvarez E Casta o J inicialmente fue verde gris ceo oscuro luego verde gris ceo verde gris ceo claro y finalmente blanco Para el d a 35 el 12 de los aislamientos ten an color verde gris ceo oscuro el 48 verde gris ceo el 22 verde gris ceo claro y el 16 blanco En cuanto a la t
23. e ya que permite evaluar respuestas marcadas seg n el nivel de resistencia y susceptibilidad del cultivar esto representa un ahorro en tiempo y recursos en comparaci n con las pruebas hechas a nivel de campo AGRADECIMIENTOS Se agradece a Germ n Alberto Llano Girlena Aricapa y Myriam Cristina Duque por su valioso conocimiento brindado y orientaci n A Silverio Gonz lez Director de FEDEPLATANO Luis Alfredo Rivera Vicente Rey Pedro Zapata Carlos Jara entre otros por apoyar esta investigaci n por medio de la obtenci n de muestras germoplasma y sobre todo por la ayuda desinteresada y conocimientos BIBLIOGRAF A Abadie C M Zapater L Pignolet J Carlier and X Mourichon 2008 Artificial inoculation on plants and banana leaf pieces with Mycosphaerella spp responsible 5864 Cu llar A lvarez E Casta o J for Sigatoka leaf spot diseases Fruits 63 5 319 323 Aguirre M J Casta o y L Zuluaga 1998 M todo r pido de diagn stico de Mycosphaerella musicola Leach y M fijiensis Morelet agentes de la Sigatoka amarilla y Sigatoka negra en Mus ceas Fitopatolog a Colombiana 23 1 45 47 Aguirre M y J Casta o 2005 Epidemiolog a de Mycosphaerella fjiensis Morelet y Mycosphaerella musicola Leach en siete genotipos de mus ceas Fitopatolog a Colombiana 29 1 7 11 Ar nzazu F J Valencia M Arcila C Castrill n M Bola os P Castellanos J P rez y J Rodr guez 2002 El
24. este banano ha demostrado ser resistente a las Sigatokas negra y amarilla en condiciones de campo Guzm n y Casta o 2009 Las reacciones observadas de los distintos genotipos a las diferentes cepas del pat geno indican la alta diversidad gen tica de los genotipos de Musa spp y evidencian la alta variabilidad en la virulencia de M fijiensis ya que todos los aislamientos presentaron comportamiento diferencial ante el conjunto de genotipos evaluados Esto coincide con lo planteado por Fullerton y Olsen 1995 quienes utilizaron 63 aislamientos del pat geno obtenidos de diferentes hospedantes de pl tanos y bananos procedentes de pa ses productores de As a y Am rica en donde una vez inoculados los aislamientos se demostraron diferencias en su virulencia y en el progreso de la enfermedad en los 20 genotipos estudiados Los genotipos Topocho Maque o y Sedita y los h bridos FHIA 20 FHIA 21 y FHIA 23 que presentaron mayores reacciones de resistencia a las cepas colombianas de M fijiensis podr an constituirse en fuentes de resistencia en programas de mejoramiento gen tico o en materiales promisorios para control de la enfermedad teniendo en cuenta que antes de introducir genotipos resistentes identificados en este y otros estudios de detenci n temprana se deber an evaluar ante un mayor n mero de aislamientos y bajo condiciones naturales como validaci n final de dicho comportamiento e igualmente evaluarlos frente a 5863
25. extura en general las colonias pasaron de tener una textura aterciopelada a algodonosa para el d a 35 el 76 de los aislamientos fueron aterciopelados y el 24 fueron algodonosos Se pudo observar que la textura de las colonias guarda relaci n directa con el color de las mismas ya que cuando las colonias ten an un aspecto aterciopelado su color era verde gris ceo o con las diferentes tonalidades ya mencionadas para el mismo color y cuando las colonias tomaban un aspecto algodonoso su color se tornaba blanco Tabla 2 Caracterizaci n patog nica de aislamientos de M fijiensis El an lisis de varianza para cada una de las variables evaluadas PI TES ABCDE y r mostr diferencias altamente significativas P lt 0 001 entre los aislamientos lo que indica que hubo diferencias en el progreso de la enfermedad Mediante el an lisis de componentes principales ACP se obtuvo la recodificaci n de los aislamientos en un nuevo sistema ortogonal Con dicha informaci n traducida y con el m todo UPGMA y el criterio de R se determinaron 8 grupos o cl ster cada uno de los cuales agrup los aislamientos de caracter sticas m s similares entre s Para cada grupo constituido se calcul el promedio de cada variable el cual se calific dentro de una escala dise ada con base en los rangos obtenidos de PI TES ABCDE y r de todos los aislamientos Tabla 3 Las calificaciones de cada una de las variables dentro y entre los grupos co
26. iopelada Verde gris ceo 17 MCqF 4 3 40 0 77 5 10 7 3 8 5 0 0 5 4 8 0 9 10 7 Aterciopelada Verde gris ceo 18 MCUP 1 2 30 0 87 5 16 9 3 8 5 0 0 6 3 8 1 4 10 0 Aterciopelada Verde gris ceo 19 MCUP 2 1 27 5 87 5 18 7 2 5 5 0 0 8 2 8 17 13 3 Aterciiopelada Verde gris ceo 20 MCuS 1 1 25 0 97 5 23 1 3 8 5 0 0 6 3 8 157 128 Aterciopelada Verde gris ceo 21 MCuS 2 2 30 0 108 0 24 2 3 8 5 0 0 6 4 9 1 7 12 3 Algodonosa Blanco 22 MCuS 4 1 27 5 85 0 16 7 3 8 5 0 0 5 3 7 1 4 10 7 Algodonosa Blanco 23 MCuS 5 1 30 0 87 5 14 7 2 5 6 3 0 8 3 8 1 2 14 8 Aterciopelada Verde gris ceo 24 MCuS 6 2 30 0 100 0 20 0 3 8 5 0 0 6 3 9 17 120 Aterciopelada Verde gris ceo oscuro 25 MCuV 2 2 30 0 92 5 18 0 2 5 5 0 0 7 3 9 17 11 2 Aterciopelada Verde gris ceo 26 MCuV 3 2 20 0 87 5 16 6 3 8 5 0 0 4 2 8 1 5 13 7 Algodonosa Verde gris ceo claro 27 MCoP 1 1 25 0 87 5 16 0 2 5 5 0 0 6 4 9 1 4 12 3 Aterciopelada Verde gris ceo 28 MCoP 2 1 25 0 57 3 8 3 3 8 5 0 0 5 3 7 1 1 11 3 Aterciopelada Verde gris ceo 29 MCoP 3 1 30 0 92 5 17 5 2 5 5 0 0 9 3 8 1 2 13 3 Aterciopelada Verde gris ceo 30 MCoP 4 1 25 0 77 5 14 8 3 8 5 0 0 6 2 8 1 3 13 0 Aterciopelada Verde gris ceo 31 MHP 1 1 32 5 87 5 12 5 2 5 5 0 0 5 2 9 1 4 12 3 Aterciopelada Verde gris ceo 32 MHP 3 1 275 92 5 17 6 2 5 5 0 0 7 3 8 1 9 15 0 Aterciopelada Verde gris ceo 33 MMP 1 1 25 0 97 5 22 5 2 5 5 0 1 0 2 8 1 6 13 8 Aterciopelada Verde gris ceo oscuro 34 MMS 1 1 45 0 100 0 12 5 2 5 5 0 0 8 5 9 1 2 13 8 Algodonosa B
27. la fijiensis Morelet Revista de la Facultad de Agronom a 23 3 292 297 Herrera M 2007 Manejo y control de la Sigatoka negra en pl tano y banano Asociaci n de Ingenieros Agr nomos del Valle de Cauca Revista ASIAVA 77 12 15 Hoyos J E y J Casta o 2007 Evaluaci n de resistencia de Mbouroukou Africa 1 y FHIA 03 a la Sigatoka negra Mycosphaerella fijiensis Morelet y Sigatoka amarilla Mycosphaerella musicola Leach Agronom a 15 2 67 76 Instituto Dominicano de Investigaciones Agropecuarias y Forestales IDIAF 2004 Mus ceas resultados de investigaci n Santo Domingo Rep blica Dominicana 117 p Jim nez I 2008 Effect of the nutritional status of banana Musa spp on leaf disease infestation by Mycosphaerella fijiensis Morelet in Ecuador Tesis postgrado Katholieke Universiteit Leuven Division of Crop Biotechnics B lgica 149 p Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Manzo G M Santos y G Guzm n 2001 Caracterizaci n morfol gica de Mycosphaerella fijiensis Morelet de la regi n del Pac fico centro de M xico y su desarrollo en medios de cultivo Revista Mexicana de Fitopatolog a 19 1 66 71 Manzo G G Guzm n C Rodr guez y A James 2005 Biolog a de Mycosphaerella fijiensis Morelet y su interacci n con Musa spp Revista Mexicana de Fitopatolog a 23 1 87 96 Orozco M L y M Aristiz bal 2006 Manejo de las sigatokas del pl tano Musa AAB y su relaci n co
28. lanco 35 MMS 1 2 37 5 100 0 14 4 2 5 5 0 0 5 3 8 1 3 10 8 Aterciopelada Verde gris ceo 36 MMS 1 3 27 5 82 5 17 0 3 8 5 0 0 6 3 7 1 4 11 3 Aterciopelada Verde gris ceo claro 37 MMV 2 1 20 0 100 0 16 4 2 5 5 0 0 6 4 8 1 2 125 Aterciopelada Verde gris ceo 38 MMV 2 2 32 5 85 0 15 4 2 5 5 0 0 7 3 8 1i 13 0 Aterciopelada Verde gris ceo claro 39 MMV 3 1 30 0 82 5 12 7 3 8 5 0 0 5 3 8 12 12 0 Aterciopelada Verde gris ceo oscuro 40 MMV 4 1 32 5 82 5 15 3 2 5 5 0 0 5 3 8 12 13 3 Aterciopelada Verde gris ceo claro 41 MMV 5 1 30 0 95 0 17 0 2 5 5 0 0 6 3 8 1 2 10 0 Aterciopelada Verde gris ceo 42 MQA 1 1 25 0 75 0 14 1 2 5 5 0 0 7 2 8 1 3 16 3 Aterciopelada Verde gris ceo 43 MQM 1 1 32 5 87 5 14 5 2 5 5 0 0 8 4 9 1 5 14 2 Aterciopelada Verde gris ceo claro 44 MQM 2 1 27 5 75 0 15 7 3 8 5 0 0 6 3 8 1 5 13 3 Algodonosa Verde gris ceo claro 45 MQQ 1 1 30 0 87 5 19 1 2 5 5 0 0 7 3 9 1 6 12 2 Aterciopelada Verde gris ceo 46 MQT 1 2 25 0 110 0 20 3 3 8 6 3 0 5 2 10 1 8 10 7 Algodonosa Blanco 47 MVC 2 1 25 0 87 5 18 8 2 5 50 0 9 2 8 1 6 15 5 Algodonosa Blanco 48 MVC 3 2 37 5 90 0 14 6 2 5 5 0 0 6 4 8 1 4 11 5 Algodonosa Verde gris ceo claro 49 MVP 3 2 25 0 92 5 177 2 5 5 0 0 7 4 9 1 7 13 2 Algodonosa Blanco 50 MWV 1 2 35 0 92 5 17 7 2 5 3 8 0 5 4 10 1 8 13 3 Aterciopelada Verde gris ceo Conidias min M nimo max M ximo std Desviaci n est ndar Colonias Morfolog a de la colonia a los 35 d as de crecimiento en medio de cultivo PDA 5858 Rev F
29. lish five levels of virulence very high high medium low and very low which were not related to their geographic origin nor to genotype of the isolates Isolates with different virulence level were present in the same zone and in the same genotype The resistance assay showed that plantain and banana genotypes can present a differential behavior to the M fijiensis isolates The disease severity measured in the genotypes allowed to classify the in three disease reactions levels resistance intermediate and susceptible genotypes The plantain genotypes Topocho Maqueno FHIA 20 and FHIA 21 and the banana genotype Sedita and FHIA 23 were characterized for having a higher level of resistance that was expressed as a lower disease severity and slower disease progress as compared with the other genotypes Palabras clave Musaceous pathogenicity virulence resistance La Sigatoka negra ocasionada por el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet anamorfo Paracercospora fijiensis Morelet Deigthon es considerada hasta el momento la enfermedad foliar de mayor importancia que afecta a los cultivos de pl tano y banano en todo el mundo produciendo p rdidas en rendimiento de hasta 100 si no se implementan medidas para su manejo Orozco y Aristiz bal 2006 La enfermedad provoca des rdenes significativos en el crecimiento vegetativo de la planta la cual sufre un severo deterioro del rea foliar y de la productividad del cultivo
30. ma zona y en un mismo genotipo aislamientos de diferente virulencia Los genotipos de pl tano y banano mostraron un comportamiento diferencial frente a cinco aislamientos de diferente virulencia y origen resultados que permitieron establecer tres niveles de reacci n de los genotipos frente a los aislamientos resistente intermedio y susceptible destac ndose los genotipos Topocho Maque o FHIA 20 FHIA 21 de pl tano y los genotipos Sedita y FHIA 23 de banano por presentar un mayor nivel de resistencia expresada como un progreso lento y menos severo de la enfermedad Palabras clave Mus ceas patogenicidad virulencia resistencia Abstract A study was conducted to evaluate plantain and banana genotypes with Mycosphaerella fijiensis Morelet isolates of different virulence and geographic origin The pathogenicity test and morphological characterization of the M fijiensis populations were performed with a group of fifty monosporic isolates representative of the geographic growing areas in Colombia For the pathogenicity and resistance assays an aqueous spore suspension of 5 000 conidias mL was used to inoculate seedlings of plantain and banana genotypes disease response of genotypes was rated by measuring the variables incubation period IP time of evolution of symptoms TES area under disease progress curve AUDPC and rate of disease development r The inoculation of fifty isolates on Dominico Harton cultivar allowed to estab
31. mproyed identification and management Du Pont Latin Am rica Coral Gables Florida 17 p Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Evaluaci n de resistencia de genotipos de pl tano Flor H H 1971 Currents status of the gene for gene concept Annual Review of Phytopathology 9 275 296 Fundaci n Hondure a de Investigaci n Agr cola FHIA 2008 Programas de Investigaci n En Banano y pl tano http www honduras com fhia default esp htm 1p consulta agosto 2009 Fullerton R A and T L Olsen 1995 Pathogenic variability in Mycosphaerella fijiensis Morelet cause of black Sigatoka in banana and plantain New Zealand Journal of Crop and Horticultural Science 23 1 39 48 Galv n E y D Rengifo 2004 Evaluaci n de bananos locales e introducidos en condiciones de producci n org nica pp 19 26 En Instituto Dominicano de Investigaciones Agropecuarias y Forestales IDIAP ed Mus ceas resultados de investigaci n Santo Domingo Rep blica Dominicana 117 p Guzm n O A y J Casta o 2009 Reacci n de los h bridos de pl tano FHIA 20 y de banano FHIA 23 a las Sigatokas negra Mycosphaerella fijiensis Morelet y amarilla Mycospaherella musicola Leach Agronom a 17 1 35 43 Hern ndez Y F Portillo M Portillo C Navarro M Rodr guez y J Velazco 2006 Densidad estom tica en materiales de pl tano Musa AAB AAAB y ABB susceptibles y resistentes a Sigatoka negra Mycosphaerel
32. n el clima Universidad de Caldas Departamento de Fitotecnia Resumen de investigaci n Bolet n Fitotecnia No 110 Ploetz R C G A Zentmyer W T Nishijima K G Rohrbach and H D Ohr 1994 Part I Banana pp 2 22 In Compendium of Tropical Fruit Diseases APS Press The American Phytopathological Society St Paul MN USA 88 p Rivas G M Zapater C Abadie and J Carlier 2004 Founder effects and stochastic dispersal atthe continental scale of the fungal pathogen of bananas Mycosphaerella fijiensis Molecular Ecology 13 2 471 482 Statistical Analysis System SAS Institute Inc 2004 SAS Online Doc Versi n 9 Cary NC Stover R H 1963 Leaf spot of bananas caused by Mycosphaerella musicola Associated ascomycetous fungi Canadian Journal of Botany 41 10 1481 1485 Tezenas du Montcel H 1990 Susceptibility of various cultivated bananas to Sigatoka diseases pp 272 289 In Fullerton R and R Stover ed Sigatoka leaf diseases of bananas Proceedings of an international workshop held at San Jose Costa Rica March 28 April 1 1989 International Network for the Improvement of Banana and Plantain Montpellier France Torrado M y J Casta o 2008 Incidencia y severidad de las sigatokas negra Mycosphaerella fijiensis Morelet y amarilla Mycosphaerella musicola Leach et Mulder del pl tano seg n los estados fenol gicos Agronom a Colombiana 26 3 435 442 Vega G 2002 La Sigatoka negra Mycosph
33. ncia en Dominico Hart n pero que al evaluarlo frente a una mayor gama de genotipos result ser el de mayor virulencia y a su vez con el aislamiento MAU1 3 quien present una alta virulencia en Dominico Hart n y fue el menos virulento ante los diferentes genotipos de estudio DISCUSI N Colecci n y caracterizaci n de aislamientos de M fijiensis La ausencia de contaminaci n en todos los aislamientos a partir del m todo de siembra directa de tejido afectado en comparaci n con el m todo de descarga de ascosporas en el cual se tuvo grandes contaminaciones en el momento de la obtenci n de los monoascosp ricos muestra que la siembra directa de tejido afectado es una 5861 Cu llar A lvarez E Casta o J metodolog a sencilla y efectiva para el aislamiento a la metodolog a que tradicionalmente se utiliza del hongo Este resultado conlleva a reducir la para el aislamiento del pat geno consistente en la dificultad previamente reportada para aislar M descarga de ascosporas Du Pont 1982 Abadie et fijiensis present ndose como una mejor alternativa a 2008 Jim nez 2008 Tabla 6 Reacci n de 19 genotipos Musa spp frente a cinco aislamientos de Mycosphaerella fijiensis Morelet de diferente virulencia y origen Genotipos de pl tano Genotipos de banano F21 F20 TP MQ DM CBN GY HT CB AF F23 SD WC GN GMC GM GC GEC VC Genoma AAAB AAAB ABB AAB AAB AAB AAB AAB AAB AAB AAAB AA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A
34. nformados permiti su distribuci n en cinco niveles de virulencia muy alta alta media baja y muy baja Tabla 4 Los aislamientos pertenecientes a los grupos I y II se consideran de muy baja virulencia los aislamientos del grupo III de baja los aislamientos del grupo V de media y los aislamientos del grupo VIII se consideran de muy alta virulencia Los aislamientos que conformaron los grupos IV VI y VII aunque estad sticamente difieren de los dem s presentaron tendencia a una virulencia baja media y alta respectivamente Rev Fac Nal Agr Medell n 64 1 5853 5865 2011 Evaluaci n de resistencia de genotipos de pl tano Tabla 1 Colecci n de aislamientos colombianos de Mycosphaerella fijiensis Morelet seg n su origen No Aislamiento Departamento Genotipo No Aislamiento Departamento Genotipo No Aislamiento Departamento Genotipo 1 MAS 1 1 Antioquia Hart n 42 MCuS 2 1 Cauca Hart n 84 MMV 3 1 Meta Hart n 2 MAS 1 2 Antioquia Hart n 43 MCuS 2 2 Cauca Hart n 85 MMV 3 2 Meta Hart n 3 MAS 1 3 Antioquia Hart n 44 MCuS 3 1 Cauca Hart n 86 MMV 4 1 Meta Hart n 4 MAU 1 1 Antioquia Cavendish 45 MCuS 3 2 Cauca Hart n 87 MMV 4 2 Meta Hart n 5 MAU 1 2 Antioquia Cavendish 46 MCuS 4 1 Cauca G Michel 88 MMV 5 1 Meta Topocho 6 MAU 1 3 Antioquia Cavendish 47 MCuS 4 2 Cauca G Michel 89 MMV 5 2 Meta Topocho 7 MAU 1 4 Antioquia Cavendish 48 MCuS 5 1 Cauca Sedita 90 MMV 6 1 Meta G Michel 8 MCP 1 1 Caldas frica
35. onsecuencias de su manejo hay que tener en cuenta que el xito de la enfermedad tambi n es debido a la alta variabilidad gen tica y patog nica de las poblaciones del hongo Carlier et al 1996 Fullerton y Olsen 1995 como a la plantaci n de variedades susceptibles Es claro que el esfuerzo para el manejo ptimo de la enfermedad debe ser idealmente preventivo en tal sentido la plantaci n de genotipos resistentes se constituye en la estrategia preventiva y econ mica para el productor en el control eficiente de la enfermedad Dadas las consideraciones anteriores se hace necesario realizar investigaciones como la del presente trabajo cuyo objetivo principal fue evaluar bajo condiciones de invernadero genotipos de pl tano y banano mediante el uso de aislamientos de M fijiensis de diferente nivel de virulencia y origen esto con el fin de identificar genotipos resistentes a las cepas colombianas del pat geno y conocer los que sirvan como fuentes de resistencia a la enfermedad que puedan ser utilizados en futuros programas de mejoramiento gen tico MATERIALES Y M TODOS La investigaci n se llev a cabo en el laboratorio e invernadero del Programa de Patolog a de Yuca y Frutas Tropicales del Centro Internacional de Agricultura Tropical CIAT Palmira bajo condiciones controladas de temperatura y humedad relativa Colecci n de aislamientos Con el objetivo de conformar un banco de aislamientos de M fijiensis se tomaron m
36. s de Mycosphaerella fijiensis Morelet Coonidias Colonias No Aislamiento Largo um Ancho jm Septas Di metro min max std min max std min max std mm Textura Color 1 MAS 1 1 25 0 825 170 3 8 5 0 0 5 3 8 1 5 15 2 Algodonosa Blanco 2 MAS 1 2 25 0 82 5 16 8 2 5 5 0 0 6 2 8 1 5 12 8 Aterciopelada Verde gris ceo 3 MAU 1 1 30 0 100 0 19 3 2 5 5 0 0 7 3 9 1 5 142 Aterciopelada Verde gris ceo 4 MAU 1 2 32 5 92 5 16 3 2 5 5 0 0 7 4 8 1 3 10 8 Aterciopelada Verde gris ceo 5 MAU 1 3 32 5 100 0 18 3 2 5 5 0 0 6 3 8 1 5 145 Algodonosa Verde gris ceo claro 6 MAU 1 4 35 0 95 0 19 5 2 5 5 0 0 9 4 7 1 0 12 8 Algodonosa Blanco 7 MOP 1 3 22 5 75 0 17 2 2 5 5 0 0 7 4 9 1 5 12 3 Aterciopelada Verde gris ceo 8 MCP 2 4 30 0 95 0 19 2 2 5 5 0 1 0 4 8 1 3 9 5 Aterciopelada Verde gris ceo oscuro 9 MCP 3 2 32 5 87 5 16 8 2 5 5 0 0 9 4 8 1 4 11 2 Aterciopelada Verde gris ceo oscuro 10 MCP 4 1 37 5 90 0 14 5 2 5 5 0 0 7 4 8 1 1 13 3 Aterciopelada Verde gris ceo claro 11 MCP 4 2 35 0 92 5 15 2 2 5 5 0 0 9 4 8 1 4 142 Aterciopelada Verde gris ceo claro 12 MCP 5 1 27 5 800 14 0 2 5 5 0 0 6 4 8 1 3 13 2 Aterciopelada Verde gris ceo 13 MCP 5 2 27 5 80 0 16 8 2 5 5 0 0 6 3 8 1 7 12 8 Aterciopelada Verde gris ceo oscuro 14 MCP 5 3 32 5 80 0 13 3 2 5 5 0 0 7 4 8 1 2 14 7 Aterciopelada Verde gris ceo 15 MCqF 1 1 30 0 105 0 20 4 2 5 5 0 0 7 4 8 1 3 125 Aterciopelada Verde gris ceo claro 16 MCqF 3 1 35 0 95 0 15 5 2 5 5 0 0 5 4 7 1 0 12 3 Aterc
37. taron en hipoclorito de sodio al 1 por 1 min y etanol al 70 por el mismo tiempo finalmente se lavaron con agua destilada est ril Casta o y del Rio Mendoza 1997 Los fragmentos secos se transfirieron a cajas Petri con PDA y se incubaron a 24 C durante 25 d Una vez esporulado el hongo se tomaron conidias individuales que se transfirieron una por cada caja Petri con el mismo medio Finalmente los aislamientos monosp ricos se incubar n a 24 C en oscuridad durante 25 d as para la producci n de conidias Para la identificaci n de Paracercospora fijiensis anamorfo de M fijiensis se observaron conidias en azul de lactofenol el cual produce una coloraci n m s intensa en la cicatriz hilio o punto de inserci n de las conidias en el conidi foro presente en P fijiensis y ausente en Pseudocercospora musae anamorfo de M mus cola causante de la Sigatoka amarilla Aguirre et al 1998 Los aislamientos monosp ricos se conservaron en papel filtro colonizado por el hongo a 4 y 20 C Aricapa y Correa 1994 y en glicerol al 15 a 80 C Abadie et al 2008 Caracterizaci n morfol gica y patog nica de aislamientos De la colecci n de aislamientos colombianos de M fijiensis se seleccionaron 50 procedentes de diferente zona geogr fica y genotipo hospedante los cuales se caracterizaron morfol gica y patog nicamente Caracterizaci n morfol gica Para cada aislamiento se tomaron datos morfol gicos de longitud
38. uestras de tejido foliar de cultivos establecidos y plantas individuales con s ntomas de la enfermedad de la Sigatoka negra procedentes de 10 departamentos de Colombia y diferentes genotipos de pl tano y banano De las muestras colectadas se procedi a realizar el aislamiento del pat geno siguiendo dos metodolog as 5854 Cu llar A lvarez E Casta o J descarga de ascosporas y siembra directa de tejido afectado Cada metodolog a se llev a cabo en c mara de flujo laminar y bajo condiciones as pticas utilizando material est ril La metodolog a de descarga de ascosporas Stover 1963 consisti en tomar la muestra que presentaba los s ntomas m s avanzados de la enfermedad e incubarla en cajas pl sticas transparentes con papel toalla humedecida Pasado el tiempo de incubaci n del tejido y con ayuda de un estereoscopio se seleccionaron y cortaron zonas de aproximadamente 2 cm que presentaban buen n mero de peritecios Cuatro fragmentos de hoja fueron adheridos por disco de papel filtro de 9 cm de di metro Posteriormente Cada papel filtro con los fragmentos de tejido se sumergieron en agua destilada est ril durante 5 min Los discos de papel filtro se colocaron en tapas de cajas Petri que conten an PDA papa dextrosa agar 39 g L de agua de modo que el env s de las hojas quedara hacia el agar ya que es el lugar donde se encuentran los peritecios y de esta manera promover mayor descarga de ascosporas
39. z et al 2006 en Venezuela metodolog a lo que hace que esta investigaci n se constituya en la primera referencia de conservaci n Este estudio a su vez muestra que la estructura de M fijiensis en papel filtro y en una metodolog a poblacional del hongo es muy variable ya quela virulencia efectiva de almacenamiento y producci n de in culo de las cepas de M fijiensisen Dominico Hart n no tiene ninguna asociaci n con su origen geogr fico ni con Los resultados de la caracterizaci n morfol gica de los la especie de la cual fueron aisladas Encontr ndose aislamientos mostraron rangos en longitud ancho en una misma zona geogr fica aislamientos de alta y y n mero de septas de las conidias que concuerdan baja virulencia y a su vez encontrando aislamientos con los indicados en la literatura para la identificaci n de diferente agresividad provenientes de un mismo del hongo Ploetz et al 1994 Aguirre et al 1998 genotipo Lo que se correlaciona con la alta diversidad Jim nez 2008 En cuanto a las caracter sticas de gen tica encontrada en aislamientos de M fijiensis di metro color y textura de las colonias coinciden obtenidos en una misma plantaci n e incluso entre con los informes previos de Manzo et al 2001 y aislamientos de una misma planta Rivas et al 2004 Jim nez 2008 para aislamientos de M fijiensis Esto se asocia con la reproducci n sexual y ciclo de vida corto del pat geno que provoca un elevado Caracterizaci
Download Pdf Manuals
Related Search