obtenidos a partir del cv. ´cuba c- 2781` mediante las técnica
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1. Somaclones Comportamiento en Comportamiento en condiciones semi condiciones de controladas campo grado de la escala Control Altamente susceptible 2 00 Cuba C 2781 16 Moderadamente resistente 1 38 38 Moderadamente resistente 3 00 52 Moderadamente resistente 3 20 72 Moderadamente resistente 2 00 17 Resistente 3 71 24 Resistente 1 94 35 Resistente 2 60 58 Resistente 1 00 37 5 CONCLUSIONES gt La evaluaci n realizada en condiciones de campo permiti detectar variaciones en la respuesta de los somaclones estudiados en cuanto a los caracteres relacionados con el rendimiento y la respuesta frente al ataque de Alternaria solani lo cual evidencia la importancia de las t cnicas biotecnol gicas en la obtenci n de nueva variabilidad gen tica gt Se propone continuar los estudios con los somaclones 16 24 y 58 ya que muestran mayores valores de masa promedio de los frutos y peso total de los frutos que el cultivar original adem s de un mayor grado de tolerancia al ataque de Alternaria solani REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS lvarez M y Torres V 1993 An lisis de correlaciones de variedades y l neas de tomate Lycopersicon esculentum Mill Cultivos Tropicales 5 1 49 59 Al Zahim MA Ford Lloyd BV y Newbury HJ 1999 Detection of somaclonal variation in garlic Allium sativum L using RAPD and cytological analysis Plant Cell Rep 18 473 477 Capote A Gonz lez Ch vez M2. Murashige T y Skoog F 1962 A revised medium for rapid growth and bioassays tobacco tissue culture Physiol Plant 15 473 497 Nuez F 1995 El cultivo del tomate Madrid Ediciones Mundi Prensa 793 p g Peralta IE Knapp S y Spooner DM 2005 New species of wild tomatoes Solanum section Lycopersicon Solanaceae from northern Peru Systematic Botany 30 2 424 434 Pratta G Zorzoli R y Picardi LA 1996 Evaluaci n de caracteres de inter s agron mico en especies del g nero Lycopersicon Horticultura Argentina 15 3 25 32 Sheppard SKL y Sohndal MR 1986 Selection for early blight disease resistance in tomato Use of tissue culture with Alternaria solana culture filtrate 6 Int Congr Plant Tissue and Cell Culture Abstr Univ Minnesota Minneapolis E U p g 211
3. primeras componentes extrajeron el 79 31 de la variaci n total inducida en los somaclones evaluados tabla 2 Las variables morfoagron micas m s importantes fueron la masa promedio de los frutos PPF el n mero total de frutos NTF y el contenido de s lidos solubles SS lo cual indica el valor discriminatorio de estos caracteres en la clasificaci n de los somaclones seleccionados in vitro Tabla 2 Resultados del An lisis de Componentes Principales Ejes principales C1 C2 c3 Valores propios 2 8621 2 2295 1 2536 Contribuci n a la 35 77 27 86 15 67 variaci n total acumulado 35 77 63 64 79 31 Vectores propios PPF 0 4761 0 3427 0 0861 PTF 0 4154 0 3909 0 3062 DE 0 4080 0 3797 0 1316 DP 0 3639 0 2432 0 2010 NFT 0 3062 0 4991 0 2938 SS 0 2455 0 3197 0 5659 H 0 3445 0 2147 0 5058 Resist 0 1701 0 3588 0 4225 En la figura 2 se observa la distribuci n de las variables evaluadas en el plano formado por las componentes C1 y C2 y la posici n relativa de los genotipos con relaci n a ambos componentes lo que permite hacer un ordenamiento de los genotipos a partir de su proyecci n sobre los vectores ya que los m s pr ximos al origen de las coordenadas son los que tendr n un comportamiento m s estable La variabilidad en la respuesta de los genotipos evaluados que se observa en el gr fico de los componentes principales muestra la presencia de la variaci n somac
4. Peteira B Rodr guez N P rez O y Marrero N 2004 Selecci n in vitro y caracterizaci n de l neas de tomate Lycopersicon esculentum resistentes a Alternaria solani Memorias BioVeg 03 Ciego de Avila ISSN Carvalho JB de Brito L Boiteux L y Alberto M 1994 Cultivo do tomate Lycopersicon esculentum Mill para industriliza o Centro Nacional de Pesquisas de Hortali as CNPH 36 p g Garc a RL Veit a N Dita MA Berm dez Y Clavelo J Romero C y Garc a L 1998 Empleo del cultivo de tejidos y la mutag nesis in vitro para la mejora de resistencia a Alternaria solani en papa Solanum tuberosum L var Desir e Res menes Ill Encuentro Latinoamericano de Biotecnolog a Vegetal 1 5 Junio La Habana p g 203 Hern ndez MM Kowalski B Lorenzo P y Ortiz U 1991 Efectividad del empleo de filtrados de Alternaria solani Ellis y Martin Jones y Grout en la selecci n in vitro de formas resistentes en papa Solanum tuberosum L Cultivos Tropicales 12 2 48 50 Ingram DS y MacDonald MV 1985 Selection of mutants in vitro Text of lecture International Symposium on Nuclear Techniques and in vitro Culture for Plant Improvement Vienna Austria 19 23 August GNAU 2000 Manual T cnico de Organop nico y Huertos Intensivos Agrinfor 145 p g Miller JC y Tanksley SD 1990 RFLP analysis of phylogenetic relationship and genetic variation in the genus Lycopersicon Theor Appl Genet 80 437 448
5. cultivo Ingram y MacDonald 1985 La utilizaci n de los filtrados de A solani en trabajos de selecci n in vitro para la inducci n de variantes somaclonales ha sido reportada con resultados satisfactorios en cultivos como la papa Hern ndez et al 1991 Garc a et al 1998 y el tomate Sheppard y Sohndal 1986 El objetivo del presente trabajo fue evaluar el comportamiento en condiciones de campo de los somaclones de tomate seleccionados in vitro seg n su respuesta a A solani para detectar la posible variaci n inducida por las t cnicas biotecnol gicas MATERIALES Y METODOS Se emplearon semillas procedentes de 18 somaclones de tomate los cuales fueron seleccionados in vitro a partir del cultivo de segmentos nodales del cv Cuba C 2781 altamente susceptible en un medio MS Murashige y Skoog 1962 suplementado con 75 de filtrado crudo del hongo Alternaria solani como agente selectivo seg n la metodolog a desarrollada en el Laboratorio de Cultivos de Tejidos del INIFAT y que mostraron diferentes grados de susceptibilidad al ataque del pat geno tabla 1 al ser inoculados artificialmente en condiciones semi controladas Capote et al 2004 Los experimentos se desarrollaron en el Organop nico Van Troi ubicado en el Municipio Boyeros Ciudad de La Habana en el per odo comprendido de Septiembre 05 a Febrero 06 Las semillas se sembraron para su germinaci n en cepellones de 247 alv olos con un sustrato compuesto
6. por suelo Ferral tico Rojo 50 materia org nica 45 y cascarilla de arroz 5 A los 21 d as de germinadas fueron trasplantadas a canteros con un sustrato compuesto por suelo Ferral tico Rojo 65 y materia org nica esti rcol vacuno 35 a doble hilera con una distancia entre plantas de 30 cm Se sembraron 20 plantas de cada material A los 25 d as posteriores al trasplante se aplic humus de lombriz 1 Kg m Durante todo el experimento se emplearon las normas t cnicas del Instructivo de Cultivo Protegido para las labores de deshije deshoje y conducci n para los tomates de tipo indeterminado y el riego por microyet seg n las Normas T cnicas para Organop nicos Semanalmente se realizaron aplicaciones de Tabaquina y cal para el control de plagas y enfermedades Los valores de temperatura m xima media y m nima C humedad relativa y precipitaciones mm fueron registrados mensualmente durante todo el per odo en que se desarroll el experimento Tabla 1 Materiales de tomate seleccionados para su evaluaci n en condiciones de campo No Genotipos Clasificaci n seg n el comportamiento frente a la inoculaci n artificial del pat geno 1 Cuba C 2781 control Altamente susceptible 2 14 Susceptible 3 20 Susceptible 4 60 Susceptible 5 71 Susceptible 6 12 Moderadamente susceptible 7 29 Moderadamente susceptible 8 32 Moderadamente susceptible 9 44 Moderad
7. EVALUACI N DE SOMACLONES DE TOMATE SOLANUM LYCOPERSICUM L OBTENIDOS A PARTIR DEL CV CUBA C 2781 MEDIANTE LAS T CNICAS DE SELECCION N VITRO Y VARIACION SOMACLONAL Amelia Capote Alberto G Mart nez Odalys P rez Odalys Llorente Amarilys Cruz y Ma Onelia Sosa Instituto de Investigaciones Fundamentales en Agricultura Tropical INIFA T RESUMEN El presente trabajo se realiz con el objetivo de evaluar el comportamiento en condiciones de campo frente al tiz n temprano y las caracter sticas agron micas y morfol gicas de 18 somaclones de tomate obtenidos por las t cnicas de selecci n in vitro a partir del cv Cuba C 2781 en el Laboratorio de Cultivos de Tejidos del INIFAT Los experimentos se condujeron en el Organop nico Van Troi ubicado en el Municipio Boyeros Ciudad de la Habana en el per odo comprendido de Septiembre 05 a Febrero 06 Se evaluaron un total de 8 caracteres y con los datos obtenidos se realiz un an lisis de componentes principales y un an lisis de conglomerado utilizando la Distancia M trica Euclidiana seg n el programa estad stico Statgraphics Versi n 5 0 El ACP mostr que las 3 primeras componentes acumularon el 79 3 de la variabilidad total observada resultando las mayores contribuciones por componente para las variables masa promedio de los frutos PPF n mero total de frutos NTF y contenido de s lidos solubles SS componentes 1 2 y 3 respectivamente El an lisis de cong
8. Octubre 05 a Febrero 06 Como se puede observar la temperatura media oscil entre 20 9 y 25 3 C por lo que se mantuvieron dentro del rango establecido para el cultivo si tenemos en cuenta que seg n Carvalho et al 1994 las temperaturas optimas para los diferentes estadios de desarrollo del tomate oscilan entre 14 y 29 C Con relaci n a la humedad relativa los valores fluctuaron entre 75 y 84 con la tendencia a disminuir desde el mes de diciembre hasta febrero consider ndose seg n Nuez 1995 que los valores ptimos para el cultivo est n entre 70 y 80 Las precipitaciones mensuales presentaron una distribuci n variada el mes de octubre se caracterizo por un alto valor de precipitaciones 224 9 mm disminuyendo en el resto de los meses hasta alcanzar un valor cr tico en el mes de noviembre 05 8 8 mm a Temperatura b Humedad Relativa e M xima M nima Media Humedad relativa 40 85 Des 80 a ds g ON g 20 Danu ae Bees 75 10 70 T T T T T 1 i i A oct 05 nov 05 dic 05 ene 06 feb 06 oct 05 now05 dic 05 ene 06 feb 06 MESES MESES c Precipitaciones Precipitaciones oct 05 now05 dic 05 ene 06 feb 06 MESES Figura 1 Datos climatol gicos durante el per odo de desarrollo del experimento El An lisis de Componentes Principales efectuado teniendo en cuenta las variables de rendimiento y el comportamiento frente al pat geno permiti constatar que las tres
9. amente susceptible 10 48 Moderadamente susceptible 11 68 Moderadamente susceptible 12 16 Moderadamente resistente 13 38 Moderadamente resistente 14 52 Moderadamente resistente 15 72 Moderadamente resistente 16 17 Resistente 17 24 Resistente 18 35 Resistente 19 58 Resistente En un total de 10 plantas se evaluaron en el primer y segundo racimo un total de 7 caracteres PPF Masa promedio de los frutos g NTF N mero total de frutos PTF Masa total de los frutos g DE Di metro ecuatorial cm DP Di metro polar cm SS S lidos solubles y H Porcentaje de humedad Para la determinaci n del grado de tolerancia al ataque de A solani se emple una escala de 0 a 5 0 sin afectaci n 1 peque as manchas aisladas 2 25 del rea foliar afectada 3 50 del rea foliar afectada 4 75 del rea foliar afectada 5 gt 75 del rea foliar afectada Con los datos obtenidos se realiz un an lisis de componentes principales y un an lisis de conglomerado utilizando la Distancia M trica Euclidiana seg n el programa estad stico StatGraphic Plus versi n 5 0 1994 2000 y se calcularon los principales estad grafos de tendencia central media y de dispersi n desviaci n est ndar y coeficiente de variaci n para cada grupo formado utilizando el Programa Excel de Microsoft Office 2003 RESULTADOS Y DISCUSION En la figura 1 se muestran los valores de los datos clim ticos registrados durante los meses de
10. an los grupos obtenidos Variables evaluadas Grupos Estad gratos PPF PTF DE DP SS H NFT Resist Media 182 49 2660 37 5 31 4 55 4 57 96 25 14 55 2 01 l DS 16 25 1075 27 0 37 0 28 0 55 0 89 5 72 0 65 CV 0 08 0 40 0 07 0 06 0 12 0 01 0 39 0 32 Media 140 37 3554 71 4 59 4 28 4 56 96 18 24 42 3 02 II DS 19 91 2007 58 0 41 0 17 0 67 1 09 12 31 0 48 CV 0 14 0 56 0 08 0 04 0 14 0 01 0 50 0 16 Media 137 02 1150 0 4 62 3 91 4 47 96 35 9 0 2 08 lII DS 12 51 531 08 0 19 0 47 0 31 0 30 5 14 0 35 CV 0 09 0 46 0 04 0 12 0 06 0 03 0 57 0 17 En la tabla 3 se muestran los estad grafos de tendencia central media y de dispersi n desviaci n est ndar y coeficiente de variaci n para cada grupo formado El grupo agrupa los materiales de mayor valor de las variables masa promedio de los frutos 182 49 g y menor afectaci n frente al ataque de A solani 2 01 el grupo ll se caracteriza por tener un mayor n mero de frutos por planta 24 42 y mayor grado de afectaci n frente al pat geno 3 02 mientras que el grupo III tiene los menores valores de los componentes del rendimiento En cuanto a los valores de porcentaje de humedad y s lidos solubles estos se mantuvieron muy similares en todos los grupos formados oscilando este ltimo entre los valores de 4 47 y 4 57 valores com
11. lomerados posibilit agrupar los materiales en 3 grupos el grupo con un total de 8 somaclones 42 1 el grupo Il integrado por 7 materiales 36 8 y el grupo IIl por 4 somaclones 21 1 donde se incluye el cultivar original utilizado como control Estos resultados indican que se obtuvieron un total de 15 somaclones 78 93 que difieren del cultivar original lo que evidencia la efectividad de las t cnicas biotecnol gicas empleadas para la obtenci n de nueva variabilidad gen tica en esta especie Palabras claves selecci n in vitro tomate variaci n somaclonal ASTRACT The present work was carried out with the objective to evaluate in field the behaviour to early blight and the agronomics and morphologic characteristics to eighteen somaclones of tomato obtained by in vitro selection from cv Cuba C 2781 in the Tissue Culture Laboratory of INIFAT The experiment was conducted in Organop nico Van Troi from Boyeros Ciudad de La Habana during September 05 to February 06 There were evaluated 8 characters and with the results were realized a principal components analysis ACP and a cluster analysis using a Euclidean distance metric by StatGraphics Program version 5 0 The ACP showed that 3 components have extracted the 79 3 of the variability and the variables fruit average weight total of fruit number y soluble solid content showed the higher weights by components 1 2 y 3 respectively Cluster analysis created 3 clus
12. lonal en tomate teniendo en cuenta la dispersi n de los somaclones en relaci n con el cultivar original Cuba C 2781 Biplot C2 Figura 2 Biplot con las variables estudiadas y la posici n relativa de los somaclones En cuanto a las variables estudiadas se observa una clara tendencia a la disminuci n de los componentes del rendimiento con el grado de resistencia mostrado Estos resultados confirman la relaci n existente entre estas variables y la resistencia a A solani aspecto planteado anteriormente por otros autores Alvarez y Torres 1983 Dendrogram Ward s Method Squared Euclidean 40 y 30 O Z 20 2 A 10 a 58 72 14 16 24 68 29 17 52 60 35 20 38 44 71 2781 Figura 3 Dendrograma obtenido a partir de las distancias gen ticas entre los materiales estudiados Los n meros coinciden con los de la Tabla 1 El An lisis de Conglomerados posibilit agrupar los materiales en 3 grupos el grupo con un total de 8 somaclones 42 1 el grupo Il integrado por 7 materiales 36 8 y el grupo lll por 4 somaclones 21 1 donde se incluye el cultivar original utilizado como control Estos resultados indican que se obtuvieron un total de 15 somaclones 78 93 que difieren del cultivar original lo que evidencia la efectividad de las t cnicas biotecnol gicas empleadas para la obtenci n de nueva variabilidad gen tica en esta especie Tabla 3 Estadigrafos fundamentales que caracteriz
13. prendidos en el rango que caracteriza a la mayor a de las variedades de tomate 4 5 y 5 5 Pratta et al 1996 Al analizar el comportamiento en condiciones de campo de los somaclones de tomate ante el ataque de Alternaria solani figura 4 se observa que el 32 de los materiales mostraron una afectaci n menor grado 1 1 99 que el control el cv Cuba C 2781 grado 2 determinada seg n el grado de la escala utilizada Sin embargo solamente se encontr una correlaci n del 37 5 entre la respuesta obtenida en condiciones semi controladas y la obtenida en condiciones de campo tabla 4 resultando los somaclones identificados como 16 24 y 58 menos afectados ante el ataque del pat geno que el cultivar original Figura 4 Comportamiento de los somaclones de tomate seg n su respuesta a Alternaria solani E1 1 99 m2 2 99 O3 3 99 21 47 Estos tres somaclones est n ubicados en el grupo seg n el An lisis de Conglomerados realizado el cual presenta mayores valores de masa promedio de los frutos 181 94 g y peso total de los frutos 3688 33 g que el cultivar original 117 6 g y 1900 g respectivamente por lo que pueden ser propuestos para continuar estudios encaminados a la b squeda de genotipos con tolerancia a Alternaria solani que presenten rendimientos aceptables Tabla 4 Correspondencia entre el comportamiento de los somaclones en condiciones semi controladas y condiciones de campo
14. ters the cluster with 8 members 42 1 the cluster Il with 7 members 36 8 and the cluster lll with 4 members 21 1 among them the original cultivar Cuba C 2781 control The results indicated that was possible to obtaine 15 somaclones 78 93 different of original cultivar It demonstrated the effectively of biotechnological techniques in order to induce a new genetic variability in this specie Key words in vitro selection tomato somaclonal variation INTRODUCCION Una de las principales enfermedades que afecta el cultivo del tomate Solanum lycopersicum L Peralta et al 2005 syn L esculentum Mill es el tiz n temprano causada por el hongo Alternaria solani sin embargo la obtenci n de nuevos genotipos tolerantes o resistentes a este pat geno esta limitada debido a las dificultades dadas por la baja variabilidad existente en la especie Miller y Tanksley 1990 y las limitaciones para la transferencia de genes por m todos convencionales de mejoramiento gen tico Alvarez y Torres 1983 Las t cnicas de cultivo de tejidos posibilitan la obtenci n de nueva variabilidad y de hecho han sido ampliamente utilizadas para el mejoramiento gen tico de un gran n mero de especies Al Zahim et al 1999 Dentro de ellas la selecci n in vitro permite la inducci n de variantes tolerantes a estr s abi tico o bi tico sometiendo las c lulas a una presi n de selecci n al utilizar un agente selectivo en el medio de
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