MANEJO DE NEMATODOS ENTOMOPATÓGENOS EN
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1. MANEJO DE NEMATODOS ENTOMOPAT GENOS EN LABORATORIO Castillo C Gallegos P O a M Instituto Nacional Aut nomo de Investigaciones Agropecuarias INIAP Estaci n Experimental Santa Catalina EESC Departamento Nacional de Protecci n Vegetal DNPV Panamericana Sur de Quito km 1 E mail carmen castillo Oiniap gob ec Palabras clave control biol gico Steinernema Heterorhabditis INTRODUCCION Desde el a o 2004 el DNPV del INIAP ha trabajado en Nematodos Entomopat genos NEPs de los g neros Steinernema y Heterorhabditispara su uso en el control biol gico de plagas principalmente de cutzo Phyllophagasp INIAP 2004 gusano blanco de la papa Premnotrypes vorax y polilla de la papa Tecia solanivora INIAP 2006 En T solanivora se han encontrado mortalidades de 62 2 con Heterorhabditis y de 32 7 con Steinernema en laboratorio Argottiet al 2010 Durante estos a os se han adaptado y desarrollado t cnicas de laboratorio para el manejo de NEPs de forma eficiente INIAP 2006 y Castillo et al 2010 T cnicas de multiplicaci n y mantenimiento de estos organismos de control biol gico de alto potencial se presentan en este art culo Ofrecer metodolog as de multiplicaci n y mantenimiento de NEPs en laboratorio a t cnicos agropecuarios profesores universitarios y estudiantes MATERIALES Y METODOS Para el aislamiento de NEPs desde el suelo se utilizan insectos trampa y para recuperar los NEPs de estos insectos se utili2. orios IASA I Sangolqu Ecuador Castillo C Gallegos P Asaquibay C y O a M editores 2010 Gu a de prospecci n y producci n de nematodos entomopat genos INIAP EESC Departamento Nacional de Protecci n Vegetal Quito Manual T cnico No 88 15p INIAP 2004 Control del cutzo Phyllophagasp con Beauveria y Metarhyziumsp en el cultivo de tomate de rbol Informe Anual del Departamento Nacional de Protecci n Vegetal de la Est Exp Santa Catalina INIAP 2006 Colecci n identificaci n patogenicidad y caracterizaci n ecol gica de nematodos par sitos de insectos en gusano blanco Premnotrypes vorax y polilla guatemalteca Tecia solanivora de la papa en Ecuador Informe Anual del Departamento Nacional de Protecci n Vegetal de la Est Exp Santa Catalina
3. spensi n que contenga de 200 a 250 Jls sobre un papel filtro en una caja Petri 9cm di metro yse colocan 10 larvas de los insectos mencionados Las cajas no deben sellarse para permitir el intercambio de aire y deben ser envueltas en pl stico negro para evitar el paso de la luz y la evaporaci n del agua Se deben incubar a 20 24 C por cinco d as luego se deben abrir las cajas para mejorar la aireaci n y tapar nuevamente pero ya no se debe utilizar el pl stico Dejar por cinco d as m s las cajas dentro de la incubadora y proceder a la cosecha de los NEPs o a su empleo en el campo RESULTADOS Y DISCUSION Luego de la prospecci n de los NEPs en las principales zonas paperas de Ecuador se seleccionaron los mejores por sus ventajas en su multiplicaci n en laboratorio y por su efectividad en la mortalidad de las larvas de varios insectos Los NEPs seleccionados fueron multiplicados y conservados exitosamente el laboratorio CONCLUSIONES Los m todos de manejo de los NEPs en laboratorio est n siendo empleados con xito y se dispone de una publicaci n sobre esos procedimientos Se pueden distribuir NEPs obtenidos en el laboratorio para que los agricultores los multipliquen en composteras BIBLIOGRAFIA Argotti E Gallegos P Alc zar J y Kaya H 2010 Patogenicidad de nematodos entomopat genos del genero Steinernema y Heterorhabditis sobre larvas de Tecia solanivora en Ecuador Bolet n T cnico 9 Serie Zool gica 6 162 172 Laborat
4. zan trampas White Los NEPs en estado de juveniles infectivos JIs salen del cad ver del insecto y son retenidos en el agua de la trampa White En este punto los NEPs pueden ser contabilizados y almacenados Para contar los NEPs se afora a un volumen determinado la suspensi n de los nematodos se los contabiliza en10ul bajo un estereoscopio y se realizan los c lculos pertinentes Los NEPs pueden ser almacenados en cajas Petri de 15cm de di metro o en otros recipientes en los que se pueda mantener una delgada l mina de agua y que puedan ser tapados ligeramente En cada recipiente se puede colocar 30ml de agua destilada con una cantidad de 7200 a 16500NEPs Otro m todo de almacenamiento de NEPs consiste en colocar la suspensi n de agua con los nematodos en esponjas cortadas en tiras de aproximadamente 1x1x5 cm En una funda pl stica de 15x15cm se pueden poner 15 tiras de esponja y 120ml de agua con una concentraci n de 68000 NEPs Las cajas Petrio las fundas con las esponjas deben ser refrigeradas a 4 C El nivel del agua en las cajas debe ser revisadas continuamente y repuesto de ser necesario Los NEPs almacenados en cajas pueden permanecer tres meses y en esponjas seis meses Luego de este periodo los NEPs deben ser renovados en insectos La renovaci n y multiplicaci n de los NEPs tienen un mismo procedimiento solo varia en la cantidad de larvas de Galleria mellonella o de otros insectos como Phyllophagasp ySpodopterasp Se coloca 1ml de una su
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