TP - WAMA Diagnóstica Produtos para Laboratórios
Contents
1. DEL REACTIVO PREPARACI N 1 Reconstituir el contenido del frasco con el volumen de agua deionizada especificado en su r tulo 2 Recolocar la tapa y gentilmente mezclar el contenido del frasco hasta su completa disoluci n Dejar en reposo por 15 minutos antes de usar para asegurar su total hidrataci n ESTABILIDAD Almacenar entre 2 8 C Es estable hasta la fecha de vencimiento impresa en el r tulo del frasco siempre que sea cerrado y almacenado a la temperatura indicada Una vez reconstituido es estable por 5 d as siempre y cuando sea almacenado entre 2 8 C en su propio frasco MUESTRAS 1 Colecta de sangre con jeringa colectar sangre venosa con jeringa siliconizada o pl stica Inmediatamente transferir 9 ml de sangre para un tubo conteniendo 1 ml de citrato de sodio a 3 2 o 3 8 puede ser 4 5 de sangre para 0 5 de citrato de sodio mantener siempre la relaci n de 9 partes de sangre para 1 de citrato de sodio 2 Colecta de sangre con tubo al vac o usar tubo al vacio conteniendo citrato de sodio a 3 2 o 3 8 tapa azul Asegurarse de que el tubo de colecta est completo ya que la relaci n 9 partes de sangre y 1 parte de citrato de sodio es cr tica Se recomienda que la colecta se haga us ndose primero un tubo sin anticoagulante tubo seco En caso de que la colecta sea solamente para tests de coagulaci n colectar dos tubos con citrato de sodio y utilizar el segundo tubo para la realizaci n de los tests Si l2. by substances such as corticosteroids EDTA oral contraceptives asparaginase clofibrate erythromycin ethanol tetracycline and anticoagulants such as heparin and coumadin The PT may be shortned by substances including antihistamines butabarbital caffeine oral contraceptives phenobarbital and vitamin K PRECAUTIONS AND WARNINGS 1 Reagents for in vitro diagnostic use only 2 Do not use the reagents after the expiration date 3 Follow the instructions for use prior to testing 4 The reagents should be well mixed by inversion and sealed immediately after use 5 The samples and controls to be tested should be used simultaneously in order to maintain the same test conditions 6 Do notingest Avoid skin and eyes contact 7 Handle all samples as potentially infectious 8 Disposal in accordance with local regulactions 9 Use Good Laboratorial Practice at storing handling and material disposal WARRANT WAMA Diagn stica reploces this kit since it is not beyound expiratin date The returued kit must be evaluated by Wama s techinical support The warranty will be invalid and kit will not be replace if techinical support finds evidence that running houdling and storage were not properly fallow ed ESPA OL IMPORTANCIA CL NICA La finalidad de la coagulaci n sangu nea es formar un co gulo en el local de la lesi n vascular Adem s de la formaci n del co gulo que funciona como un tamp n para evitar la hemorragia esta ac
3. destas vias O resultado tamb m pode ser devido a certas drogas e medicamentos Procedimentos adicionais tais como a determina o do TTPA Tempo de Tromboplastina Parcial Ativado e estudos utilizando plasmas deficientes de fatores s o usualmente necess rios CONTROLE DE QUALIDADE A confiabilidade do teste deve ser monitorada dentro de cada rotina usando plasmas controles normais e anormais tais como os Plasma Controle N vel 1 COD 733001 C Plasma Controle N vel 2 COD 733002 C e Plasma Controle N vel 3 COD 733003 C da WAMA Diagn stica Cada laborat rio deveria estabelecer uma faixa controle para determinar a varia o permitida na performance di ria de cada plasma controle CARACTER STICAS DE DESEMPENHO Precis o a precis o dentro da rotina foi avaliada usando os Plasmas Controles N veis 1 2 e 3 da WAMA Diagn stica usando um instrumento com detec o tica e outro com detec o mec nica Os resultados s o mostrados na tabela abaixo Resultados da Precis o dentro da Rotina MLA Electra 900C Fibrometer ptico mec nico N vel 1 1 00 1 07 N vel 2 0 31 1 48 N vel 3 0 36 1 08 Amostras Correla o estudos de correla o foram realizados contra o reagente TP de um competidor usando o Coagulometro MLA Electra 900C Os resultados s o mostrados abaixo Resultados da Correla o Coeficiente de Regress o Inclina o Intercep o 0 91 1 01 0 01 Sensibilidade em um estudo compa
4. do plasma a ser testado ou do plasma controle em um tubo pl stico Incubar a 37 C por 1 minuto 3 Ap s esse tempo pipetar 200ul do reagente TP pr incubado disparando simultaneamente o cron metro 4 Delicadamente por leve invers o registrar o tempo de coagula o do plasma em segundos INTERPRETA O DOS RESULTADOS CALCULO DOS RESULTADOS Recomenda se realizar os testes em duplicata amostras e controles e calcular o tempo m dio A diferen a entre os resultados das duplicatas deve ser menor do que 5 Repetir oteste se necess rio O resultado do Tempo de Protrombina expresso em n meros de segundos levados desde a adi o do reagente TP at a forma o do co gulo de fibrina ver tabela anexa No resultado pode se incluir o Tempo de Protrombina o Percentual de Atividade hoje sem nenhuma import ncia a Rela o entre o Paciente e um Controle Normal obtido pela determina o do TP de um plasma ou pool de plasma conhecidamente normal e da Rela o Internacional Normalizada ou INR da sigla em ingl s International Normalized Ratio O INR deve sempre ser informado especialmente em pacientes submetidos a terapia anticoagulante INR RELA O INTERNACIONAL NORMALIZADA E sabido que cada combina o de reagentes e instrumentos Coagulometros de diferentes fabricantes torna se um problema quando se analisam os resultados de diferentes laborat rios O sistema INR foi desenvolvido num esfor o de padroniza
5. have agreed on recommendations for the reporting of Prothrombin Time results as an International Normalized Ratio INR The INR is the relation of the Prothrombin Time among the patient and the normal time This normal time is adjusted to represent a result obtained if a standardized reagent were REA 730060 C 60 Determinations 1 Reagent PT 3 x 4ml 2 Instructions for use 730100 1 C 100 Determinations 1 Reagent PT 5 x 4ml 2 Instructions for use used to perform the same test The INR is calculated using the following formula INR Patient PT Mean Normal TP Where Patient PT Prothrombin Time from the evaluated sample Mean Normal PT Plasma normal control time Plasma Level 1 from WAMA Diagn stica or from a pool of normal plasma of 20 or more individuals where the mean PT is determined by the laboratory ISI Lot specific International Sensitivity Index for the reagent verify its value printed on the vial label The ISI represents the thromboplastin sensitivity to alterations on the levels of clotting factor WAMA Diagn stica determines the ISI value of thromboplastin by calibration against an International Reference Preparation IRP 67 40 with an assigned ISI of 1 0 Therefore ISI of 1 0 represents identical sensitivity to International Reference Reagent thatis ISI close to 1 0 more sensible will be the thromboplastin reagent EXPECTED VALUES PT results are influenced by the method of clot
6. part citrate is critical It is recommended that the collection be performed by using the first tube without anticoagulant dry tube In case of collection only for coagulation tests collect two tubes with sodium citrate and use the second tube for coagulation tests If multiple collections are needed the sample for coagulation test should be obtained after the collection in tube without anticoagulant dry tube prior to collection in tube containing EDTA 3 Plasma preparation Mix well by inversion and centrifuge at 2 500 x g for 15 minutes soon after the blood collection Unless the samples are to be processed immediately transfer the plasma into a plastic tube Plasma that is clearly hemolyzed or contains gt 10 000 platelets per cubic meter or red cells is not suitable for coagulation testing 4 Plasma storage Plasma samples may be stored at room temperature 18 to 26 C for up to 2 hours refrigerated 2 to 8 C for up to 4 hours frozen 20 C for up to 2 months or at 70 C for up to 6 months Plasma may be re centrifuged prior to freezing to assure that all cells are removed When testing frozen samples they should be quickly thawed and tested immediately The samples must not have any contact with glass Do not incubate at 37 C for longer than 5 minutes to avoid the loss of factors V and VII Loss of factor V can prolong the PT PROCEDURE This procedure is intended to use with manual testing For semi automated and automated sys
7. que cada laboratorio establezca los rangos de TP relevantes para su respectiva poblaci n de pacientes La relaci n TP Paciente TP Normal debe ser menor que 1 3 valores iguales o superiores significan la prolongaci n del Tiempo de Protrombina Resultados anormales obtenidos con un plasma de un paciente que no hace terapia con anticoagulante pueden indicar la deficiencia de uno o m s factores de la v a extr nseca o com n de la coagulaci n o de la presencia de un inhibidor de alguno de los factores de estas v as El resultado tambi n puede ser debido a ciertas drogas y medicamentos Procedimientos adicionales tales como la determinaci n del TTPa Tiempo de Tromboplastina Parcial activado y estudios utilizando plasmas deficientes de factores son usualmente necesarios CONTROL DE CALIDAD La confiabilidad del test deber a ser monitoreada dentro de cada rutina usando plasmas controles normales y anormales tales como los Plasma Control Nivel 1 COD 733001 C Plasma Control Nivel 2 COD 733002 C y Plasma Control Nivel 3 COD 733003 C de WAMA Diagn stica Cada laboratorio deber a establecer una rango control para determinar la variaci n permitida en la performance diaria de cada plasma control CARACTER STICAS DE DESEMPE O Precisi n la precisi n dentro de la rutina fue evaluada usando los Plasmas Controles Niveles 1 2 y 3 de WAMA Diagn stica usando un instrumento con detecci n ptica y otro con detecci n mec nica Los resultad
8. sigla en ingl s International Normalized Ratio El INR debe ser siempre informado especialmente en pacientes sometidos a terapia anticoagulante INR RELACI N INTERNACIONAL NORMALIZADA Es sabido que la combinaci n de reactivos e instrumentos Coagul metros de diferentes fabricantes se torna un problema cuando se analizan los resultados de diferentes laboratorios El sistema INR fue desarrollado en un esfuerzo por padronizar los resultados del TP As el Comit Internacional de Padronizaci n en Hematolog a y el Comit Internacional de Trombosis y Hemostasia est n de acuerdo en la presentaci n de los resultados del Tiempo de Protrombina como uma relaci n INR El INR es la relaci n del Tiempo de Protrombina entre el paciente y el normal que es ajustada para representar un resultado que deber a ser obtenido si un reactivo de referencia internacional fuese usado para la realizaci n del test La f rmula para calcular el INRes INR TP del paciente TP m dio normal Donde TP del paciente Tiempo de Protrombina de la muestra analizada TP medio normal es el tiempo del plasma normal control Plasma Nivel 1 de WAMA Diagn stica o de un pool de plasmas normales de 20 o m s individuos cuyo TP medio es establecido por el propio laboratorio ISI es el ndice de Sensibilidad Internacional suministrado por el fabricante es lote espec fico verificar valor en el r tulo del frasco del reactiv
9. ERTENCIAS 1 Conjunto de reactivos solamente para diagn stico in vitro 2 No usar despu s de la fecha de vencimiento 3 Leer cuidadosamente las instrucciones de uso antes de realizar el test 4 Los reactivos deben ser homogeneizados levemente por inversi n y tapados inmediatamente despu s del uso 5 Las muestras testeadas y los controles deben ser utilizados al mismo tiempo para mantener las mismas condiciones del test 6 No ingerir Evitar el contacto con la piel y con los ojos 7 Manipular todas las muestras como si tuvieran agentes infecciosos 8 Descarte lo material em acuerdo con l s regulaciones locales 9 Seguir las Buenas Pr cticas de Laboratorio BPL en la conservaci n manipulaci n y descarte de las muestras TERMINO DE GARANTIA La WAMA Diagnostica garantiza el cambio de este conjunto diagnostico si desde el momento que el mismo est dentro el plazo de caducidad y sea comprobado por su accesoria t cnica de que no hubieron fallos en la ejecuci n manoseo y conservaci n de este producto La WAMA y sus distribuidores no se responsabilizan por los fallos en el desempe o del kit bajo sobre estas condiciones BIBLIOGRAFIA BIBLIOGRAPHY BIBLIOGRAF A 1 Deykin D Anticoagulant therapy In Colman R W Hirsh J Marder V Salzman EW Eds Heamostatis and Thrombosis JB Lippincott Philadelphia 1982 p1000 2 Errichette AM Holden A Ansell J Management of Oral Anticoagulant Therapy experience with an A
10. MS 10310030106 COAGULA O Kit para determina o do Tempo de Protrombina TP M todo de Quick em um s est gio Kit intended for use in performing the one stage Prothrombin Time PT Quick method Kit para la determinaci n del Tiempo de Protrombina TP M todo de Quick en una sola etapa 730050 C 730060 C 730100 C 100 determina es determinations determinaciones 730100 1 C 100 determina es determinations determinaciones 730200 C 50 determina es determinations determinaciones 60 determina es determinations determinaciones 200 determina es determinations determinaciones M WAMA Diagn stica Rua Aldo Germano Klein 100 CEAT CEP 13560 971 S o Carlos SP Brasil Fone 55 16 3377 9977 Fax 55 16 3377 9970 www wamadiagnostica com br OBELIS SA WAMA Boulevard G n ral Wahis 53 1030 Brussels BELGIUM Phone 32 2732 59 54 Fax 32 2732 60 03 www obelis net CE PORTUGU S IMPORT NCIA CL NICA A finalidade da coagulac o sangu nea formar um co gulo no local da les o vascular Al m da forma o do co gulo que funciona como um tamp o para evitar a hemorragia esta a o pr coagulante deve ser restrita ao local da les o ou seja ela n o pode disseminar se pelo sistema circulat rio Assim no momento em que ocorre a les o vascular tamb m se desencadeia a a o do sistema fibrinol tico e dos inibidores fisiol gicos da coagula o O model
11. amostras 8 Descarte o material de acordo com a regulamenta o local 9 Utilizar as Boas Pr ticas de Laborat rio BPLs na conserva o manuseio e descarte dos materiais TERMO DE GARANTIA A WAMA Diagn stica garante a troca deste conjunto diagn stico desde que o mesmo esteja dentro do prazo de validade e seja comprovado por sua Assessoria T cnica que n o houve falhas na execu o manuseio e conserva o deste produto A WAMA e seus distribuidores n o se responsabilizam por falhas no desempenho do kit sob essas condi es ENGLISH SUMMARY The aim of blood coagulation is form a clot in the vascular lesion region Besides the formation of this clot which acts as a blocker to avoid hemorraghia this pro coagulant action should be restrict to the lesion region that is it cannot be widespread in the circulatory system Thus the moment that occurs the vascular lesion it also starts the fibrinolytic system action and coagulation physiological inhibitors The cascade model proposed for Macfarlane and David amp Ratnoff in 1964 in order to explain the blood coagulation physiology still used today for didactic reasons divide the coagulation in extrinsic and intrinsic pathways which converge on the activation point of X factor start of the final pathway or common PT evaluates the extrinsic coagulation pathway therefore evaluates the VII factors extrinsic pathway and X V Il and common pathway PT is the metho
12. angue eo anticoagulante centrifugar por 15 minutos a 2 500 x g aproximadamente a 3000 rpm Se as amostras n o forem processadas imediatamente o plasma deve ser transferido para um tubo pl stico Plasma hemolizado ou contendo mais que 10 000 plaquetas mm ou com hem cias presentes n o s o recomendados para os testes de coagula o 4 Armazenagem do plasma amostras de plasma podem ser armazenadas em temperatura ambiente 18 a 26 C por at 2 horas refrigeradas 2 a 8 C por at 4 horas congeladas 20 C por at 2 meses ou a 70 C por at 6 meses O plasma pode ser recentrifugado previamente ao congelamento para assegurar que todas as c lulas sejam removidas No momento de testar amostras congeladas elas devem ser rapidamente descongeladas e os testes realizados imediatamente As amostras armazenadas n o devem entrar em contato com vidro e n o incub las a 37 C por mais do que 5 minutos para evitar a perda dos fatores V e VII A perda do fator V pode prolongar o tempo de protrombina PROCEDIMENTO Este procedimento para a realiza o manual dos testes Para Sistemas Semi Autom ticos ou Autom ticos consultar o manual de instru es do equipamento 1 No momento do uso quando o reagente TP j estiver reconstitu do de acordo com o tem PREPARA O pr incubar a 37 C por no m nimo 10 minutos Manter a suspens o do reagente por agita o magn tica ou misturando por invers o antes do uso 2 Pipetar 100 ul
13. as colectas son m ltiples la muestra para los tests de coagulaci n debe ser obtenida despu s de la colecta de una muestra en tubo sin anticoagulante tubo seco siempre antes de la colecta en tubo conteniendo EDTA 3 Preparaci n del plasma Despu s de la colecta mezclar gentilmente por inversi n la sangre y el anticoagulante centrifugar por 15 minutos a 2 500xg cerca de 3000 rpm Si las muestras no van a ser procesadas inmediatamente el plasma debe ser transferido para un tubo pl stico Plasmas hemolizados o conteniendo m s de 10 000 plaquetas mm o con hemat es presentes no son recomendados para los tests de coagulaci n 4 Almacenamiento del plasma muestras de plasma pueden ser almacenadas a temperatura ambiente 18 a 26 C hasta por 2 horas refrigeradas 2 a 8 C hasta por 4 horas congeladas 20 C hasta por 2 meses o a 70 C hasta por 6 meses El plasma puede ser recentrifugado previamente al congelamiento para asegurar que todas las c lulas sean removidas En el momento de testear muestras congeladas deben ser r pidamente descongeladas y los tests realizados inmediatamente Las muestras almacenadas no deben entrar en contacto con vidrio y no deben ser incubadas a 37 C por m s de 5 minutos para evitar la p rdida de los factores V y VII La p rdida del factor V puede prolongar el tiempo de protrombina PROCEDIMIENTO Este procedimiento es para la realizaci n manual de los tests Para Sistemas Semi Autom ticos o Aut
14. ation control plasmas such as Control Plasma Level 1 COD 733001 C Control Plasma Level 2 COD 733002 C and Control Plasma Level 3 COD 733003 C from WAMA Diagn stica Each laboratory should establish control ranges in order to determine the allowed variation on control plasma performance PERFORMANCE CHARACTERISTICS Precision Within run precision was assessed using Control Plasma Levels 1 2 and 3 from WAMA Diagn stica on an optical and a mechanical instrument The results are shown in the following table Within run Precision Results Sample MLA Electra 900C Fibrometer optical mechanical Level 1 1 00 1 07 Level 2 0 31 1 48 Level 3 0 36 1 08 Correlation Correlation studies were performed against the PT reagent of a competitor on the MLA Electra 900C coagulometer The results are shown in the following table Correlation Results Regression coeficient Slope Intercept 0 91 1 01 0 01 Sensitivity A Sensitivity study was performed against a PT reagent of a competitor and Wama Diagn stica PT reagent showed 100 of sensitivity LIMITATIONS 1 To prevent spurious results ensure the blood to anticoagulant ratio is 9 1 2 Lipaemic jaundiced and hemolytic samples can yield errors on TP determination 3 Delay in test performing difficulties in blood collection and venipuncture close to the region of heparin therapy application may yield PT clotting times falsely prolonged 4 PT results can be prolonged
15. ci n pro coagulante debe ser restringida al local de la lesi n o sea no puede diseminarse por el sistema circulatorio As en el momento en el que ocurre la lesi n vascular tambi n se desencadena la acci n del sistema fibrinol tico y de los inhibidores fisiol gicos de la coagulaci n El modelo propuesto por Macfarlane y Davie amp Ratnoff en 1964 de la cascada para explicar la fisiolog a de la coagulaci n de la sangre usado aun hoy por razones did cticas divide la coagulaci n en una v a extr nseca y una v a intr nseca que convergen en el punto de activaci n del factor X inicio de la v a final o com n El TP eval a la v a extr nseca de la coagulaci n consecuentemente eval a los factores VII v a extr nseca y X V Ily I v a com n El TP es el test de elecci n para control de la terapia oral por anticoagulantes cumar nicos pues la formaci n del co gulo de fibrina se inicia por el factor VII el cual depende de la vitamina K para ser activado Los cumar nicos inhiben la s ntesis de la vitamina K y sin ella los factores II VII IX y X no pueden ser activados Es tambi n usado en las rutinas pre operatorias y en crisis hemorr gicas donde la presencia de deficiencia o inhibidores dela v a extr nseca y com n puede prolongar el Tiempo de Protrombina PRINCIPIO DEL METODO Para que haya formaci n de un co gulo de fibrina por v a extr nseca de la coagulaci n es necesaria la presencia del factor t
16. d of choice for monitoring oral anticoagulation therapy since the formation of fibrin clot starts by Factor VII which is vitamin K dependant to be activated Coumadin inhibit the synthesis of K vitamin and without this vitamin the Factors Il VII IX and X cannot be activated Itis also used in the pre surgery routines and hemorrhagic complaints where the presence of deficiency or inhibitors of extrinsic and common pathways can prolong PT PRINCIPLE OF METHOD The capacity of blood to form a fibrin clot by extrinsic pathway of coagulation requires thromboplastin calcium factors II V VII and X COAGULATION PT reagent provides a source of tissue thromboplastin and calcium that specifically activate factor VII and initiating the process that will lead to fibrin formation by extrinsic pathway of coagulation Thus when the mixture of thromboplastin and calcium is added to citrated normal plasma the mechanism of coagulation is initiated and a clot will be formed within a specific period of time PT level of extension is proportional to the severity of the deficiency of one or more factors involved in this pathway REAGENT PREPARATION COAGULATION PT from WAMA Diagn stica is a lyophilized preparation of rabbit brain calcium chloride buffer and 0 05 sodium azide as a preservative The International Sensitivity Index ISI lot number and expiry date of the reagent are shown on the vial s label KIT PRESENTATION 730050 C 50 Determi
17. detection and can vary from laboratory to laboratory In general PT tests performed with normal plasmas will give clotting times in the range of 13 to 15 seconds on a photo optical coagulometer from 11 to 15 seconds if a mechanical coagulometer is used and between 12 to 15 seconds if the manual method is applied However each laboratory should establish a normal range using individuals representative of its patient population A new range should be established with any change of instrumentation blood collection techniques or anticoagulant A Mean Normal PT range should be reestablished when changing lots ofthe same reagent Therapeutic ranges of INR for monitoring oral anticoagulation therapy is 2 4 to 2 5 Therapeutic ranges for monitoring oral anticoagulation therapy will vary from laboratory to laboratory Therefore it is essential that each laboratory establish relevant PT ranges for its respective patient population The ratio patient PT Mean Normal PT should be up to 1 3 Higher values mean a Prothrombin Time prolonged Abnormal results obtained with a plasma from a patient not on anticoagulant therapy may indicate a factor deficiency or the presence of an inhibitor The result may also be due to the effects of certain drugs and medications Additional procedures such as an APTT and mixing studies using factor deficient plasma are usually required QUALITY CONTROL The test performance should be monitored by using normal and abnormal coagul
18. isular Tromboplastina de calcio y de los factores de coagulaci n Il V VII y X El reactivo COAGULACION TP provee la Tromboplastina tisular y el calcio que especificamente activan el factor VII iniciando el proceso que llevar la formaci n de fibrina por v a extr nseca de la coagulaci n As cuando la mezcla de tromboplastina y calcio es adicionada a un plasma normal citratado el mecanismo de coagulaci n es iniciado y un co gulo se formar dentro de un per odo de tiempo espec fico El grado de prolongaci n del TP es proporcional a la gravedad de la deficiencia de uno o m s factores involucrados en esta v a REACTIVO COAGULACI N TP El reactivo COAGULACI N TP de WAMA Diagn stica es una preparaci n liofilizada de tromboplastina de cerebro de conejo cloruro de calcio tamp n y 0 05 de azida s dica como conservante El ndice de Sensibilidad Internacional ISI n mero de lote y fecha de vencimiento del reactivo son mostrados en el r tulo del frasco PRESENTACI N DEL KIT 730050 C 50 determinaciones 1 Reactivo TP 5x2 ml 2 Instrucci n de uso 730100 C 100 determinaciones 3 Reactivo TP 10x2 ml 4 Instrucci n de uso 730200 C 200 determinaciones 1 Reactivo TP 10x4ml 2 Instrucciones de uso MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO Agua deionizada Tubos pl sticos para test Pipeta autom tica Ba o Mar a 37 C Cron metro Recipiente para descartar material PREPARACIONY ESTABILIDAD
19. nations 1 Reagent PT 5x 2ml 2 Instructions for use 730100 C 100 Determinations 1 Reagent PT 10 x 2ml 2 Instructions for use 730200 C 200 Determinations 1 Reagent PT 10 x 4ml 2 Instructions for use MATERIAL NEDDED BUT NOT PROVIDED Purified water Tube Automatic pipette Double boiler 37 C Timer Container for material disposal PREPARATION AND STABILITY PREPARATION 1 Reconstitute the contents of the vial with the specified volume of purified water 2 Replace the stopper and thoroughly mix the vial contents Let stand for 15 minutes prior to use to assure complete hydration STABILITY Store at 2 8 C When the vial is tightly closed and stored at the recommended temperature it is stable up to its expiry date shown on the vial s label Once the reagent is reconstituted itis stable for 5 days when stored at 2 8 C in the original vial SPECIMEN COLLECTION 1 Blood collection using syringe method Draw venous blood into a plastic or siliconized syringe Immediately transfer 9 ml of blood into a tube containing 1 ml of 3 2 or 3 8 sodium citrate solution alternatively 4 5 of blood to 0 5 of sodium citrate keep the ratio of 9 parts blood to 1 part sodium citrate 2 Blood collection using an evacuated blood collection tube Draw venous blood into a vacuum tube containing 3 2 or 3 8 sodium citrate solution blue cap Insure that a full draw has been obtained since the ratio of 9 parts blood to 1
20. nticoagulation Clinic Arch Inter Medicine 144 p1966 1984 3 Furie B Furie BC Molecular and Cellular Biology of Blood Coagulation N Eng J Medicine 326 p800 1992 4 Hirsh J Dalen JE Deykin D Polter L Oral Anticoagulants Mechanisms of Action Clinical Effectiveness and Optimal Therapeutic Range Chest 102 suppl 312S 1992 5 Hougie C The Biochemistry of Blood Coagulation In Triplett DA Laboratory Evaluation of Coagulation American Society of Clinical Pathologists Press Chicago p2 1982 6 International Committee for Standardization in Haematology and International Committee on Thrombosis and Haemostasis Amer J Clin Path 88 p779 1985 7 Kirkwood T Calibration of Reference Thromboplastins and Standardization of the Prothrombin Time Ratio Thromb Haemostasis 49 p238 1983 8 Laposala M Connor A Hicks D Phillips D The Clinical Hemostasis handbook Year Book Medical Publishers Inc 1989 9 Miale JB Laboratory Medicine Hematology 4th edition CV Mosbe St Louis 1972 10 National Committee for Clinical Laboratory Standards One Stage Prothrombin Time PT Test and Activated Partial Thromboplastin Time APTT Test NCCLS Document H47 A 1996 11 WHO Expert Committee on Biological Standardization 33 Report Technical Report Series 687 WHO Geneva 1983 12 Young DS Thomas DW Friedman RB et al Effect of Drugs in Clinical Tests Clin Chem 18 p1041 1972 SIMBOLOGIA SIMBOLS SIMBOLOGIA N mero d
21. o TP El ISI representa la sensibilidad de la tomboplastina a cambios en la concentraci n del factor de coagulaci n WAMA Diagn stica determina el ISI de sus tromboplastinas por calibraci n contra una Preparaci n Internacional de Referencia IRP 67 40 cuyo ISI es igual a 1 0 Por lo tanto un ISI de 1 0 refleja sensibilidad id ntica al Reactivo de Referencia Internacional o sea cuanto m s pr ximo de 1 0 m s sensible es el reactivo tromboplastina VALORES ESPERADOS Los resultados del Tiempo de Protrombina son influenciados por el m todo de detecci n del co gulo de fibrina y pueden variar de un laboratorio a otro En general tests para TP con plasmas normales presentan tiempos de formaci n del co gulo que var an de 13 a 15 segundos cuando se realizan en un Coagul metro con detecci n fotom trica de 11 a 15 segundos en un Coagul metro de detecci n mec nica y entre 12 a 15 segundos mediante el m todo manual Sin embargo cada laboratorio deber a establecer un rango normal usando individuos de su poblaci n de pacientes Si ocurren cambios en el m todo usado manual o autom tico en la t cnica de colecta de sangre o en el anticoagulante usado deber a ser establecido un nuevo rango normal El promedio normal del TP debe ser reestablecido siempre que ocurra alg n cambio en el lote del mismo reactivo Rangos terap uticos para monitorear terapias con anticoagulante oral var an de un laboratorio a otro Por esto es recomendado
22. o lote Lot Number N mero del lote O conte do suficiente para n testes Quantity sufficient for n tests O contenido es suficiente para n testes Data limite de utiliza o Expiry Date Fecha de la caducidad N mero do cat logo Catalog Number N mero del cat logo Produto diagn stico in vitro In vitro diagnostic Produto diagn stico in vitro Limite de temperatura Temperature Limite de temperatura Proteger do calor Keep away from sunlight Consultar instru es para uso i Refer to user s instructions Proteger del calor Consultar las instrucciones para el uso Representante Europeu Fabricado por European Representative Manufactured by Representante Europeu Fabricado por Edi o Rev 11 2011
23. o proposto por Macfarlane e Davie amp Ratnoff em 1964 da cascata para explicar a fisiologia da coagula o do sangue usado ainda hoje por raz es did ticas divide a coagula o em uma via extr nseca e uma via intr nseca que convergem no ponto de ativa o do fator X in cio da via final ou comum O TP avalia a via extr nseca da coagula o portanto avalia os fatores VII via extr nseca eX V Il e I via comum O TP o teste de escolha para controle da terapia oral por anticoagulantes cumar nicos pois a forma o do co gulo de fibrina se inicia pelo fator VII o qual dependente da vitamina K para ser ativado Os cumar nicos inibem a s ntese da vitamina K e sem ela os fatores II VII IX e X n o podem ser ativados E tamb m usado nas rotinas pr operat rias e em queixas hemorr gicas onde a defici ncia dos fatores mencionados ou presen a de inibidores das vias extr nseca e comum pode prolongar o Tempo de Protrombina PRINCIPIO DO METODO Para que haja a forma o de um co gulo de fibrina pela via extr nseca da coagula o necess ria a presen a do fator tecidual Tromboplastina de c lcio e dos fatores de coagula o II V VII e X O reagente COAGULA O TP fornece a Tromboplastina tecidual e c lcio que especificamente ativam o fator VII iniciando o processo que levar a forma o de fibrina pela via extrinseca da coagula o Assim quando a mistura de tromboplastina e c lcio adicionada a
24. om ticos consultar el manual de instrucciones del equipamiento 730060 C 60 determinaciones 1 Reactivo TP 3 x 4 ml 2 Instrucci n de uso 730100 1 C 100 determinaciones 3 Reactivo TP 5x4 ml 4 Instrucci n de uso 1 En el momento del uso cuando el reagente TP estiver reconstituido de acuerdo con el iten Preparaci n preincubarlo a 37 C por 10 minutos como minimo 2 Pipetar 100 pl del plasma a ser testeado o del plasma control en un tubo pl stico Incubar a 37 C por 1 minuto 3 Pasado ese tiempo pipetar 200 pl del reactivo TP preincubado disparando simultaneamente el cron metro 4 Delicadamente por leve inversi n registrar el tiempo de coagulaci n del plasma en segundos CALCULO DELOS RESULTADOS Se recomienda realizar los tests en duplicata muestras y controles y calcular el tiempo promedio La diferencia entre los resultados de las duplicatas deben ser menores que 5 Repetir el test si se considera necesario El resultado del Tiempo de Protrombina es expresado en n meros de segundos llevados desde la adici n del reactivo TP hasta la formaci n del co gulo de fibrina vease el cuadro adjuntos En el resultado se puede incluir el Tiempo de Protrombina el Porcentual de Actividad hoy sin importancia la Relaci n entre el Paciente y un Control Normal obtenido por la determinaci n del TP de un plasma o pool de plasma que se sabe normal y de la Relaci n Internacional Normalizada o INR de la
25. os son mostrados en el siguiente cuadro Resultados de la Precisi n dentro Intra Rutina MLA Electra 900C detecci n ptica Fibrometer mec nico Muestras N vel 1 1 00 1 07 N vel 2 0 31 1 48 N vel 3 0 36 1 08 Correlaci n estudios de correlaci n fueron realizados contra el reactivo TP de un competidor usando el Coagul metro MLA Electra 900C Los resultados son mostrados abajo Resultados de la Correlaci n Coeficiente de Regresi n Inclinaci n Intercepci n 0 91 1 01 0 01 Sensibilidad en un estudio comparativo con otro reactivo del mercado el reactivo TP mostr sensibilidad de 100 LIMITACIONES DEL METODO 1 Resultados discrepantes pueden ser prevenidos asegur ndose de que la relaci n entre sangre y anticoagulante sea de 9 1 2 Muestras lip micas ict ricas y hemolisadas pueden producir errores en la determinaci n del TP 3 Atraso en la realizaci n del test dificultad en la colecta de la muestra y venopunci n pr xima al local de aplicaci n de terapia con heparina pueden determinar resultados falsamente prolongados de TP 4 Los resultados del TP pueden ser prolongados por sustancias como corticosteroides EDTA contraceptivos orales asparaginasa clofibrate eritromicina etanol tetraciclina y anticoagulantes como heparina y cumar nicos pudiendo estar disminuidos por uso de antihistam nicos cafe na contraceptivos orales fenobarbital y vitamina K RECAUCIONES Y ADV
26. r os resultados do TP Assim o Comit Internacional de Padroniza o em Hematologia e o Comit Internacional de Trombose e Hemostasia est o de acordo na apresenta o dos resultados do Tempo de Protrombina como uma rela o INR O INR a rela o do Tempo de Protrombina entre o paciente e o normal que ajustada para representar um resultado que deveria ser obtido se um reagente de refer ncia internacional fosse usado para a realiza o do teste Af rmula para calcular o INR INR TP do paciente TP m dio normal Onde TP do paciente Tempo de Protrombina da amostra analisada TP m dio normal o tempo do plasma normal controle Plasma N vel 1 da WAMA Diagn stica ou de um pool de plasmas normais de 20 ou mais indiv duos cujo TP m dio estabelecido pelo pr prio laborat rio ISI o ndice de Sensibilidade Internacional fornecido pelo fabricante lote espec fico verificar valor no r tulo do frasco do reagente TP O ISI representa a sensibilidade da tromboplastina a mudan as na concentra o do fator de coagula o A WAMA Diagn stica determina o ISI de suas tromboplastinas por calibra o contra uma Prepara o Internacional de Refer ncia IRP 67 40 cujo ISI igual a 1 0 Portanto um ISI de 1 0 reflete sensibilidade id ntica ao Reagente de Refer ncia Internacional ou seja quanto mais pr ximo de 1 0 mais sens vel o reagente tromboplastina VALORES ESPERADOS Os res
27. rativo com outro reagente do mercado o reagente TP mostrou sensibilidade de 100 LIMITACOES DO METODO 1 Resultados discrepantes podem ser prevenidos assegurando se de que a rela o entre sangue e anticoagulante de 9 1 2 Amostras lip micas ict ricas e hemolisadas podem produzir erros na determinag o do TP 3 Atraso na realiza o do teste dificuldade na coleta da amostra e venopung o pr xima do local de aplicac o de terapia com heparina podem determinar resultados falsamente prolongados de TP 4 Os resultados do TP podem ser prolongados por subst ncias como corticoster ides EDTA contraceptivos orais asparaginase clofibrate eritromicina etanol tetraciclina e anticoagulantes como heparina e cumar nicos ou podem ser diminu dos por uso de anti histam nicos cafe na contraceptivos orais fenobarbital e vitamina K PRECAU ES E ADVERTENCIAS 1 Somente para diagn stico in vitro N o usar ap s data de validade 2 Ap s aberto e reconstitu do manter sob refrigera o 2 8 C e utilizar at 5 dias 3 Ler cuidadosamente as instru es de uso antes de realizar o teste 4 N o ingerir Evitar contato com a pele e com os olhos 5 N o comer beber ou fumar no local onde a amostra ou os kits s o manuseados 6 Manusear todas as amostras como se tivessem agentes infecciosos como tamb m seguir as precau es contra os riscos microbiol gicos 7 Usar jaleco luvas ou prote o nos olhos no manuseio das
28. tems please refer to your instrument manual 1 Pre incubate the reconstituted PT reagent at 37 C for at least 10 minutes Maintain the suspension of the reagent by magnetic stirring or mixing by inversion immediately prior to use 2 Pipette 100 ul of test or plasma control into a test cuvette Incubate at 37 C for 1 minute 3 Rapidly add 200ul of the pre incubated PT reagent simultaneously starting the timer 4 Slightly by inversion record the clotting time in seconds CALCULATION OF RESULTS It is recommended to calculate the mean clotting time of duplicate samples and controls Differences between duplicate results should be less than 5 Repeat the test if necessary The PT result may be reported in seconds since the adding of the PT reagent up to form a clot see the table attached PT percent activity ratio of patient clotting time to mean normal clotting time or International Normalized Ratio INR may also be reported in the test result The INR is recommended for use with patients undergoing anti coagulation therapy INR INTERNATIONAL NORMALIZED RATIO Itis largely known that the combination of reagents and instruments Coagulometers from different manufacturers may cause problems when the results from different laboratories are recorded INR system was developed in an effort to standardize the TP results The International Committee for Standardization in Hematology and the International Committee on Thrombosis and Hemostasis
29. ultados do Tempo de Protrombina s o influenciados pelo m todo de detec o do co gulo de fibrina e pode variar de laborat rio para laborat rio Em geral testes para TP com plasmas normais apresentar o tempos de forma o do co gulo que variam de 13 a 15 segundos quando realizados em um Coagulometro com detec o fotom trica de 11 a 15 segundos em um Coagulometro de detec o mec nica e entre 12 a 15 segundos se usado o m todo manual No entanto cada laborat rio deveria estabelecer uma faixa normal usando indiv duos de sua popula o de pacientes Se ocorrer mudan as no m todo usado manual ou autom tico t cnica de coleta de sangue ou anticoagulante usado uma nova faixa normal deveria ser estabelecida A m dia normal do TP deve ser restabelecida sempre que ocorrer mudan a no lote do mesmo reagente Faixas terap uticas para monitora o de terapia com anticoagulante oral podem variar de laborat rio para laborat rio Assim recomendado que cada laborat rio estabele a as faixas de TP relevantes para sua respectiva popula o de pacientes A rela o TP Paciente TP Normal deve ser menor que 1 3 valores iguais ou superiores significam prolongamento do Tempo de Protrombina Resultados anormais obtidos com um plasma de um paciente que n o faz uso de terapia com anticoagulante pode indicar uma defici ncia de um ou mais fatores da via extr nseca ou comum da coagula o ou da presen a de um inibidor de algum dos fatores
30. um plasma normal citratado o mecanismo de coagula o iniciado e um co gulo se formar dentro de um per odo de tempo espec fico Ograu de prolongamento do TP proporcional a severidade da defici ncia de um ou mais fatores envolvidos nesta via APRESENTA O DO KIT 730050 C 50 determina es 1 Reagente TP 5x2ml 2 Instru o para uso 730100 C 100 determina es 1 Reagente TP 10x 2ml 2 Instru o para uso 730200 C 200 determina es 1 Reagente TP 10x 4ml 2 Instru o para uso _ N MATERIAL NECESSARIO MAS NAO FORNECIDO Agua purificada Tubo Pipeta autom tica Banho Maria 37 C Cron metro 730060 C 60 determina es 1 Reagente TP 3 x 4ml 2 Instrug o para uso 730100 1 C 100 determina es 1 Reagente TP 5 x 4ml 2 Instrug o para uso Recipiente para descarte de material PREPARACAO E ESTABILIDADE DOS REAGENTES O reagente COAGULA O TP da WAMA Diagn stica uma prepara o liofilizada de tromboplastina de c rebro de coelho cloreto de c lcio tamp o e 0 05 de azida s dica como conservante O ndice de Sensibilidade Internacional ISI n mero de lote e data de vencimento do reagente s o mostrados no r tulo do frasco PREPARACAO 1 Reconstituir o conte do do frasco com o volume de gua deionizada especificado em seu r tulo 2 Recolocar a tampa e gentilmente misturar o conte do do frasco at a sua completa dissolu o Deixar em repo
31. uso por 15 minutos antes do uso para assegurar sua total hidrata o ESTABILIDADE Armazenar entre 2 8 C Quando fechado e armazenado na temperatura indicada est vel at a data de vencimento impressa no r tulo do frasco Uma vez reconstitu do est vel por 5 dias quando armazenado entre 2 8 C em seu pr prio frasco AMOSTRAS 1 Coleta de sangue com seringa colher sangue venoso com seringa siliconizada ou pl stica Imediatamente ap s transferir 9 ml de sangue para um tubo contendo 1 ml de citrato de s dio a 3 2 ou 3 8 pode ser 4 5 de sangue para 0 5 de citrato de s dio manter sempre a rela o de 9 partes de sangue para 1 de citrato de s dio 2 Coleta de sangue com tubo v cuo usar tubo v cuo contendo citrato de s dio a 3 2 ou 3 8 tampa azul Assegurar se de que o tubo ap s coleta esteja completo uma vez que a rela o 9 partes de sangue e 1 parte de citrato de s dio cr tica Recomenda se que a coleta seja feita usando se primeiro um tubo sem anticoagulante tubo seco No caso da coleta ser somente para testes de coagula o coletar dois tubos com citrato de s dio e utilizar o segundo tubo para a realiza o dos testes Se coletas m ltiplas a amostra para os testes de coagula o deve ser obtida ap s a coleta de amostra em tubo sem anticoagulante tubo seco sempre antes da coleta em tubo contendo EDTA 3 Prepara o do plasma logo ap s a coleta misturar gentilmente por invers o o s
Download Pdf Manuals
Related Search