Pacific Hemostasis (R)
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1. Pacific Hemostasis R Manual de Instrucciones de APTT XL I Uso previsto Pacific Hemostasis APTT XL se utiliza para las pruebas del tiempo de tromboplastina parcial activada y para la valoraci n de factores basados en TTPA con cido elagico como activador ll Resumen y fundamento La prueba del TTPA es til como prueba discriminativa y como prueba cuantitativa para determinar los factores intr nsecos de la coagulaci n Se trata de una prueba sencilla y vers til que es sensible a las deficiencias de todos los factores de coagulaci n del plasma con la excepci n del factor VII Sin embargo se utiliza principalmente para detectar deficiencias en los Factores VIII IX XI XII y Precalicreina El TTPA tambi n se utiliza para monitorizar tratamientos con heparina dado que la prolongaci n del TTPA es directamente proporcional al aumento de la heparina Para realizar la prueba de TTPA se a ade a la muestra un reactivo que contiene un activador plasm tico y fosfol pidos La mezcla se incuba durante 3 minutos a 37 C para obtener una activaci n ptima Se a ade cloruro de calcio y se cronometra la formaci n del co gulo lll Reactivo Para uso diagn stico in vitro Composici n Acido el gico al 0 003 BSA al 0 005 fenol al 0 30 soluciones tamp n al 2 6 sales y estabilizantes Conservar los frascos sin abrir a 2 8 C No congelar Los frascos abiertos permanecen estables durante 30 d as cuando se conserv2. un tiempo de coagulaci n prolongado cuando se mezcla con muestras que tienen una actividad lt 30 40 de un factor Factor actividad TTPA segundos VIII lt 1 82 0 VIII 20 44 8 IX lt 1 83 5 IX 20 40 9 XI lt 1 134 2 XI 20 47 8 XII lt 1 gt 200 XII 20 36 2 Precalicreina lt 1 69 5 Adem s la sensibilidad de APTT XL frente al factor VIII ha sido determinada de la siguiente forma Factor VIII TTPA segundos 100 32 5 70 34 0 50 36 9 40 38 9 30 40 8 20 44 4 10 50 6 5 56 1 1 68 1 lt 1 83 6 Estos valores s lo deben servir de gu a Cada laboratorio debe establecer su propio indice de sensibilidad a los factores individuales empleando los instrumentos reactivos y t cnicas de an lisis utilizados habitualmente INFORMACI N PARA PEDIDOS N de ref Descripcion Contenido 100402 APTT XL 10x 4 ml 100403 APTT XL 10x 10 mL 100304 CaCl2 0 02M 10x10 mL GARANT A LIMITADA DE FISHER DIAGNOSTICS Fisher Diagnostics FD garantiza al comprador que s lo los productos de Fisher Diagnostics funcionar n tal y como se describe en sus etiquetas y documentaci n El comprador debe determinar si los productos de Fisher Diagnostics son id neos para sus aplicaciones espec ficas La nica obligaci n de Fisher Diagnostics ser a su elecci n la sustituci n de un producto defectuoso o que no c
3. an a 2 8 C Es posible que se forme un sedimento amarillo tras una conservaci n prolongada Mezclar con cuidado antes de utilizarlo Valores err neos valores de control de calidad fuera de los intervalos establecidos o variaciones del color del producto pueden indicar deterioro del mismo Sin embargo un funcionamiento deficiente del producto tambi n puede deberse a otros factores de la prueba IV Recogida de muestras Para las pruebas de coagulaci n se recomienda utilizar como anticoagulante citrato de tris dico al 3 2 0 105 M Evitar las hem lisis y la contaminaci n por los fluidos tisulares Rechazar las muestras con volumen de llenado inferior al 9 del volumen esperado Centrifugar la sangre durante 15 minutos a 2500 x g Realizar la prueba antes de las 2 horas si las muestras han sido conservadas a 22 24 C Para m s informaci n sobre la recogida y conservaci n de las muestras consultar el documento H21 A3 del NCCLS e No retrasar la mezcla de la sangre con el anticoagulante e Evitar la formaci n de espuma en la muestra e Utilizar nicamente recipientes de pl stico o de vidrio de borosilicato siliconado e Las muestras turbias ict ricas lip micas o hemolizadas pueden generar resultados err neos e La congelaci n y posterior descongelaci n del plasma con c lulas residuales puede romper las membranas de las c lulas afectando adversamente a los resultados e Las reacciones inflamatorias agudas pueden acort
4. ar los resultados de TTPA debido a la elevada tasa de fibrin geno Pacific Hemostasis R e LaS Meaestras de plasma con hematocritos fuera del intervalo de 20 55 pueden no resultar correctamente anticoaguladas y el anticoagulante debe ser ajustado adecuadamente V Procedimiento de la prueba Material suministrado APTT XL Reagent l quido 10x 10 mL o 10 x 4 mL Material necesario pero no suministrado Pacific Hemostasis Calcium Chloride Solution 0 02 M Cron metro Pipeta de precisi n 0 1 mL Controles normales y anormales tales como Pacific Hemostasis Coagulation Control Plasmas Level 1 2 y 3 APTT XL puede utilizarse con m todos manuales mec nicos foto pticos y otros para la detecci n de co gulos Siga las instrucciones del fabricante sobre el uso correcto del instrumento Para ensayos manuales A Precalentar el Calcium Chloride 0 02 M a 37 C B Poner 0 1 ml de plasma de prueba en la cubeta y precalentar a 37 C C A adir 0 1 ml de APTT XL al plasma de prueba Mezclar D Incubar la mezcla de plasma y reactivo a 37 C durante 3 5 minutos tiempo de activaci n Para garantizar unos resultados coherentes analizar todas la muestras de plasma con el mismo tiempo de activaci n E A adir fuertemente 0 1 ml de Calcium Chloride precalentado y cronometrar la formaci n del co gulo VI Control de calidad Los plasmas normales y anormales tales como los plasmas de Pacific Hemostasis Coagulation Contr
5. de recogida de sangre o el anticoagulante X Caracter sticas de funcionamiento Sensibilidad a la heparina La acci n anticoagulante de la heparina depende de muchos factores entre los que se encuentran un nivel adecuado de antitrombina lll la activaci n de plaquetas y la subsiguiente liberaci n del Factor 4 plaquetar durante la preparaci n de las muestras la presencia in vivo de otros f rmacos la tasa de metabolismo de la heparina el modo de administraci n de la heparina y el retraso en la manipulaci n de las muestras Aun cuando se reconozcan estas variables el laboratorio puede determinar la sensibilidad relativa de un determinado reactivo a la heparina a adiendo cantidades conocidas de heparina a una mezcla de plasmas normales y luego realizando una prueba de TTPA Por ejemplo los siguientes resultados se obtuvieron en un instrumento foto ptico con un lote de reactivo APTT XL Conc de heparina unid ml TTPA segundos 0 0 28 8 0 1 38 3 0 2 50 1 0 3 63 1 0 4 80 9 0 5 98 0 Cada laboratorio debe establecer su propia curva de sensibilidad a la heparina empleando la misma clase de heparina que utiliza el centro en sus tratamientos Pueden producirse variaciones debido a las diferencias entre las marcas de heparina el origen del tejido y la formulaci n de sales Sensibilidad a los factores Pacific Hemostasis R Un activo de TTPA con una sensibilidad adecuada debe demostrar
6. fic Hemostasis R ElBFdel plasma subir si ste queda expuesto al aire Guardar las muestras en frascos tapados e APTT XL est dise ado para funcionar a una temperatura de 37 C 0 5 C Compruebe frecuentemente la temperatura de todos los elementos calefactores e Todo el material del laboratorio debe estar limpio y exento de restos de detergentes e Siga cuidadosamente las instrucciones del fabricante sobre el mantenimiento correcto del instrumento Sustancias interferentes e Oxalato de sodio EDTA y heparina no son anticoagulantes adecuados e Es sabido que los contraceptivos orales los estr genos el embarazo los f rmacos derivados de la cumarina la heparina la asparaginasa y la naloxona afectan a los resultados de TTPA IX Valores previstos La valoraci n de APTT XL en una poblaci n normal dio los siguientes resultados media intervalo 2 DE Detec mec nica 29 9 24 0 35 2 Detec foto ptica 29 8 24 2 36 3 Estos valores s lo deben servir de gu a Cada laboratorio debe establecer su propio intervalo normal de referencia empleando los instrumentos los m todos de recogida de sangre y las t cnicas de an lisis utilizados habitualmente El intervalo normal de referencia debe restablecerse o al menos comprobarse cada vez que se cambie de n mero de lote del mismo reactivo debiendo establecerse un nuevo intervalo normal de referencia cada vez que se cambie el reactivo el instrumento las t cnicas
7. ifferent Salts of Heparin on the Activated Partial Thromboplastin Time Amer J Clin Path 74 569 1980 6 Wujastyk J Triplett D A Selecting Instrumentation and Reagents for the Coagulation Laboratory Pathologist 37 398 1983 7 Christensen R L Triplett D A Factor Assay VIII and IX Results in the College of American Pathologists Survey Program 1980 1982 Amer J Clin Path 80 Suppl 633 1983 8 NCCLS One Stage Prothrombin time PT Test and Activated Partial Thromboplastin Time APTT Test Approved Guideline NCCLS Document H47 A NCCLS Wayne PA 1996 9 13 Informaci n procedente de un archivo de 510 K Fisher Diagnostics Fisher Scientific Company L L C 8365 Valley Pike Middletown VA 22645 0307 EE UU 1 800 528 0494 s lo en EE UU EC REP MDCI Ltd Arundel House 1 Liverpool Gardens Worthing West Sussex BN11 1SL R U
8. ol Level 1 2 y 3 deben ser analizados junto con el plasma del paciente El Level 1 es un plasma normal mientras que los Levels 2 y 3 han sido ajustados para simular plasmas moderada y seriamente deficientes respectivamente Debe analizarse un control normal y al menos un control anormal cada d a al inicio de las pruebas y al menos una vez en cada turno o con cada grupo de ensayos Asimismo los controles deben ser analizados con cada cambio de reactivo o cada vez que se haga un ajuste importante del instrumento En los laboratorios que realizan un elevado n mero de pruebas de TP y o TTPA es necesario realizar una prueba de control al menos cada 40 muestras8 Cada laboratorio debe establecer un intervalo de control que representa la variaci n diaria permisible para cada control Vil Resultados Informar de los tiempos de coagulaci n para cada plasma a la d cima de segundo m s pr xima Tambi n puede informarse de un intervalo de referencia normal para comparaci n No informar de los valores de los pacientes relacionados con los tiempos de coagulaci n de plasma de control comercial Dichos controles s lo se utilizan como garant a de calidad del sistema de prueba VIII Limitaciones El proceso bioqu mico de coagulaci n implica una serie de reacciones que est n influenciadas por m ltiples condiciones previas a la prueba Es necesario controlar estas variables si se desea obtener resultados reproductibles T cnica Paci
9. umpla con las especificaciones o bien la devoluci n del precio de compra FD RECHAZA CUALQUIER OTRA GARANTIA SEA EXPRESA O IMPLICITA INCLUYENDO LAS GARANTIAS DE COMERCIABILIDAD E IDONEIDAD PARA CUALQUIER PROP SITO DETERMINADO Ni FD ni sus afiliados podr n ser considerados responsables en ning n caso por las p rdidas o da os incidentales o consecuentes i Pacific Hemostasis R Pacifi Hemostasis es una marca registrada de Fisher Scientific Company L L C Fisher Diagnostics es una marca registrada de Fisher Scientific Company L L C XI Bibliografia 1 Brandt J T Triplett D A Laboratory Monitoring of Heparin Effect of Reagents and Instruments in the Activated Partial Thromboplastin Time Amer J Clin Path 76 530 1981 2 Thompson J M The Control of Heparin Therapy by the Activated Partial Thromboplastin Time Sensitivity of Various Thromboplastins to Heparin Standardization of Coagulation Assays An Overview Edited by D A Triplett College of American Pathologists Skokie IIl 1982 pp 195 3 NCCLS Collection transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays 3rd edition Approved guideline NCCLS Document H21 A3 Wayne PA 1998 4 Young D S Thomas D W Friedman R B et al Effect of Drugs on Clinical Laboratory Tests Clin Chem 18 1041 1972 5 Banez E L Triplett D A Koepke J Laboratory Monitoring of Heparin Therapy The Effect of D
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