Hoefer TE22 - Hoefer Inc
Contents
1. n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehk isty varusteille saattaa olla avuton T m v line suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen labo ratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan ennen yhdist minen k ytt j nnitelyijyj k ytt j nnit teeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautuk seen eik j hdytysnestel hteeseen miss vesi paine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n o piii m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumen eminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Information Importante French Si cet 6guipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par l quipement pourrait tre diminu e Cet instrumen2. Questo strumento disegnato per l uso di labora torio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente ricon osciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disin o piv serisce i piombi di potere prima di togliere il coper chio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cosi equipag giato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refriger ante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causera il danno irreparabile all unita Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en mate ikke spesi fisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svekket Dette instrumentet er utformet for innend rs labo ratoriumbruk bar
3. la esponja en la cinta abri sumergida y presione suavemente hasta que todo el aire Coloque una hoja de papel secante en la esponja y luego colocar la l mina sobre el papel secante Coloque el gel que contiene una muestra que se ha separado electrofor ticamente y se equilibr si es necesario con tamp n de transferencia en la membrana Suavemente rodar una pipeta de vidrio o tubo de ensayo sobre el gel para eliminar el aire atrapado entre la membrana y el gel Cubrir el gel con una hoja de papel secante y luego colocar una esponja del grosor adecuado ver el diagrama a continuaci n de nuevo presionando suavemente para eliminar el aire atrapado Q Cierre la bandeja y presione ligeramente para cerrar las pesta as El casete ensamblada debe sostener el gel en contacto firme con la membrana sin apretar el gel Si la pila parece flojo a adir hojas de papel secante si la pila parece apretada reemplazar la esponja superior por encima del gel con una hoja de papel secante Si se quita la esponja inferior por debajo del gel sustituir al menos dos hojas de papel secante para crear un espacio entre la membrana y el panel de casete una esponja de 3 mm de geles gt 1 5 mm 0 una esponja de 6 mm para geles lt 1 5 mm papel secante gel membrana papel secante un 3 mm de esponja Monte el cassette en una bandeja que contiene el tamp n de transferencia de unos 3 cm de profundidad Instale el cartucho
4. Los geles y las membranas se llevan a cabo por un casete que est sumergida en el tanque de transferencia Las mol culas migran bajo un campo el ctrico a la membrana donde est n unidos La temperatura de tamp n de transferencia puede ser controlado mediante la circulaci n de l quido enfriado a trav s del intercambiador de calor en la base El tamp n se separa del refrigerante por una placa conductora de calor de al mina Desembalaje Quite el envoltorio de los paquetes cuidadosa mente y comparar el contenido con la lista de empaque asegur ndose de que todos los elemen tos llegaron Si falta alguna pieza p ngase en contacto con Hoefer Inc Inspeccione todos los componentes de los da os que puedan haber ocurrido mientras la unidad estaba en tr nsito Si alguna parte est da ada p ngase en contacto de inmediato al transportista Aseg rese de guardar todo el material de embalaje para las reclamaciones por da os o utilizar en caso de ser necesario devolver la unidad Especificaciones Gel de tama o Potencia m xima Tensi n m xima Amperaje m ximo Temperatura m ximo Buffer requerido Ambiental condicionesde operaci n Para uso en interiores Humedad hasta Altitud hasta Categor a de instalaci n Grado de contaminaci n Dimensiones A x A xP Certificaciones del producto hasta cuatro de 9x10 cm geles 50 W 100 V 500 mA 45 C 1 5 litros dependiendo del n mero de casetes en lu
5. Pre himedo PVDF o otras membranas hidr fobas en metanol A continuaci n disfrutar de todo tipo de membrana en tamp n de transferencia durante 2 5 minutos e Abrir la cassette mediante la liberaci n de ambas lengiietas de enganche a lo largo del borde opuesto de las bisagras Coloque el cassette abierto en una bandeja llena con al menos 3 cm de tamp n de transferencia Montar la pila de transferencia de manera que las mol culas migrar n hacia la membrana Para macro mol culas cargadas negativamente tales como cidos nucleicos y la mayor a de las prote nas construir la pila en el medio gris de la casete y luego colocar la tapa de manera que el lado gris se enfrenta al plomo rojo o nodo Fig 2 Transferencia de montaje de la pila La pila est orientado de modo que las mol culas cargadas negativamente migran hacia el nodo grises Importante No overstuff la casete Nota Trate de colocar el gel correctamente la primera vez porque las prote nas pueden comenzar a transferir inmediata mente una vez la transferencia ha comenzado moviendo el gel distorsionar los resultados o hacer que las bandas de sombra en la mancha Los paneles de cassette est n codificados por colores negro arriba c todo lado gris abajo lado del nodo N ZS E 2 LL A W O 000 N 4 SZ ZS E P E ZS 4 SZ ZS O E ZS A W O W E ZS A p6 Coloque una de 3 mm de espesor de espuma de
6. s gruesas geles pueden requerir tiempos m s largos de transferencia el tiempo de transferencia ptima para cada sistema debe ser determinado emp ricamente Despu s de la transferencia es completa Gire los valores de voltaje y corriente a cero y apague la fuente de alimentaci n Desconecte los cables de las tomas de suministro de energia e Levante la tapa Usa el gancho de pl stico alma cenado en el soporte en el lado de la unidad para levantar un casete s lo lo suficiente como para ser capaz de agarrar y lo coloca en una bandeja Abra cada cassette con cuidado y retire los geles y membranas Marca cada uno de membrana e indicar el lado de la muestra Levante la membrana s con unas pinzas romas y secar al aire o siga las instruc ciones que acompa an a su protocolo Q Deseche el papel secante pero volver a utilizar las esponjas Enjuague la unidad inmediatamente despu s de su uso Vea la secci n Cuidado y mantenimiento de la p gina siguiente EI uso de metanol lt 20 alcohol metilico en tampones de transferencia es la nica excepci n o plo Cuidado y mantenimiento Limpieza e No esterilizar en autoclave o calentar cualquier parte por encima de 45 C e No lo exponga a alcoholes o disolventes org nicos e Nunca use detergentes abrasivos e Si el uso de reactivos radiactivos descontami naci n de la unidad con un agente de limpieza tales como Co
7. b rico FW 61 83 900 mM 55 6 g EDTA soluci n 0 5 M pH 8 0 20 mM 40 0 ml EI agua destilada a 1 0 litros No ajustar el pH Diluir a 1X antes de su uso para producir 90 mM Tris 90 mM de cido b rico y 2 mM de EDTA Esta diluci n se utiliza com nmente pero diluciones hacia abajo a 0 1X puede ser utilizado en caso de que sea necesa rio para disminuir la cantidad de corriente en el sistema con el fin de controlar el sobrecalentamiento ARN de transferencia tamp n 10X 10X Tris acetato EDTA TAE pH 8 4 1 litro Tris FW 121 1 400mM 48 4 g cido ac tico glacial 17 4 M 200 mM 11 4 ml EDTA solution 0 5 M pH 8 0 10mM 20 0 ml EI agua destilada a 1 0 litros No ajustar el pH Diluir a 1X antes de su uso para producir 40 mM Tris 20 mM de acetato y 1 mM EDTA Esta diluci n se utiliza com nmente pero diluciones hacia abajo a 0 1X puede ser utilizado en caso de que sea necesa rio para disminuir la cantidad de corriente en el sistema con el fin de controlar el sobrecalentamiento Current Protocols in Molecular Biology 1993 A 2 1 PSambrook J and Russell D W 2001 Molecular Cloning A Laboratory Manual A1 17 e p19 ec Bibliografia Alwine J C Kemp D J and Stark G R Method for detection of specific RNAs in agarose gels by trans fer to DBM paper and hybridization with DNA probes Proc Natl Acad Sci USA 74 5350 5354 1977 Bittner M Kupferer P and Morris C F Elect
8. de gel y el tamp n de transferencia utili zados contribuyen a la transferibilidad de las macromol culas y debe tenerse en cuenta cuando se desarrolla un protocolo Especies moleculares muy peque as por ejemplo migran r pidamente pero a menudo no se unen as como las mol cu las m s grandes grandes mol culas se unen de manera m s eficiente pero no eluir del gel tan r pidamente La velocidad de eluci n tambi n se ve afectada por el tama o de los poros del gel y la orientaci n de las mol culas Adem s el grado en que las mol culas se unen a la membrana est influenciada por las caracter s ticas de la membrana tales como el tama o de poro y el tipo y las caracter sticas de amortigua miento como el tipo de sal pH y concentraci n y la presencia de detergentes tales como dodecil sulfato s dico SDS Condiciones necesarias para la eluci n eficiente puede no coincidir con las condiciones ptimas para la uni n Para encon trar las condiciones ptimas para la transferencia de la muestra un equilibrio entre estos efectos Si la velocidad de eluci n de la muestra es lento un per odo de tiempo de transferencia puede ser requerida En nuestra experiencia bajo las trans ferencias de tensi n por per odos m s largos no ofrecen grandes mejoras Si el enlace de la mues tra es inadecuada pruebe las diferentes condi ciones de amortiguamiento Para una revisi n completa consulte Gershoni y Palade 1983
9. for tico secante especialmente para las prote nas pero ninguna t cnica de transferencia cuantitativa se ha desarrollado todav a debido a la compleji dad de las reacciones Recuperaci n cuantitativa no es realmente necesaria para la mayor a de los prop sitos porque macromol culas de uni n a una membrana aumenta la sensibilidad de los m todos de detecci n tales como autorradiograf a y permite la detecci n de prote nas espec ficas por anticuer pos o etiquetas de afinidad y de cidos nucleicos espec ficos por hibridaci n con cadenas comple mentarias de ARN o ADN El tamp n puede ser elegido para dar lugar a una transferencia hacia el c todo sea o el nodo El pH debe ser tal que todas las especies de inte r s se cargan y migran en la misma direcci n La fuerza i nica no debe ser demasiado alta ya que esto producir una corriente excesiva y el calor Por esta raz n las condiciones elevadas de sal utilizadas por Southern Blot para capilar de ADN no puede ser utilizado Los sistemas tamp n m s ampliamente utilizados son los de Towbin et al para la transferencia de prote nas y de Bittner et al para la transferencia de cidos nucleicos Los sistemas tamp n para la transfe e pl3 o pl4 rencia de cada tipo de muestra se enumeran m s adelante en esta secci n Factores gue afectan a la transferencia Los par metros tales como caracteristicas de la muestra el tipo de membrana el tama o de los poros
10. je li to vybav ena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapravi teln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifika cemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specifice ret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan m ske svaekkes Dette instrument er designet for indendors labora toriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan m ske bruges for drive funk tionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en str mforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt prove laboratorium Sikkerhedl get m v re p plads far forbinding stromforsyningsblyet til en stromforsyning Drejer alle stromforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet for fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 50 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen kolemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated
11. s Si la transferencia de s lo una o dos geles elegir las posiciones m s cercanas al centro de cassette Los casetes deben estar orientados de manera que el lado de la bisagra est hacia arriba y todos los paneles negros de los casetes se enfrentan el mismo lado de la unidad de transferencia Trabaje con rapidez cuando se mueve la cinta s montado en el tanque para evitar el drenaje de las esponjas Coloque la bandeja de la celebraci n de la cinta s cerca del tanque levante un dep sito a la vez y lo desliza en una serie de ranuras verticales No se deshaga de la memoria intermedia e Una vez en el lugar toque la cinta ligeramente hasta que la mayoria de las burbujas de aire son desaloja dos A pocas burbujas pequefias en las esponjas no es probable que interfiera con la transferencia Inspeccione el nivel de amortiguaci n A adir o elimi nar tamp n como se requiere para que el nivel cae entre las l neas de nivel m nimo y m ximo de amor tiguamiento Tamp n encima de la l nea tamp n nivel m ximo puede provocar la corrosi n de los contac tos el ctricos o p7 Nota cuidado en la orientaci n de la tapa de manera gue todas las especies migran hacia la membrana cuando el campo el ctrico se aplica La direcci n de migraci n depende de las caracter sticas de la muestra y el pH del tamp n de transferencia Si las especies de inter s est cargado negativamente en el tamp n de trans
12. sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar bort kraften blyen f re flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla d r vattnet trycket r unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten o pvi Espa ol 134 English R French R German R Italian 134 Swedish R EEE Residuos de Aparatos El ctricos y Electr nicos RAEE Este s mbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo This symbol indicates that the waste of electrical and elec tronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Ce symbole indique que les d chets relatifs a l quipement lectrique et lectronique ne
13. Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk opl sningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske oplosningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden Driver ikke med stodpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifica tions Overheding vil for rsage uboelig skade til enheden O pii Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligheidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleen glycol door de bitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar de waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmid delen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen z
14. O ual del usuario Espa ol Hoefer TE22 Tanque unidad de transferencia mu TE22 1M Spanish Rev G0 07 12 H O e fe r N Tabla de contenidos Informaci n Importante sssrini iins ii Residuos de Aparatos El ctricos y Electr nicos RAEE ssus snssaamaaa aan as amaanaaauaaamaamaaan vii Electroforesis Unidad de Transferencia funci n y la descripci n uuuouuso nunna naan 1 Especificaciones riiit edd debek dree ge SK e dee 2 Manual de Instrucciones mociones 4 Cuidado y mantenimiento nana 10 Soluci n de oroblemas AAA 11 Electrotransferencia notas ooocccccccnnnnnnnnninacinnnnnnns 13 Bibliografie EE 20 Orden inTormaciOn sisaassmssan ossaa saaa nananana nana aan ou Koos 22 Informaci n Importante Espa ol Si este equipo es utilizado en una manera no espe cificado por Hoefer Inc la protecci n proporcio nado por el equipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lugar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desco necta los plomos del poder ant
15. Si el sistema tamp n de transferencia es diferente del sistema de tamp n de electroforesis el gel debe ser equilibrada con el tamp n de transfe rencia antes de la transferencia para asegurar la hinchaz n o contracci n se produce antes de gue los contactos de gel de la membrana de trans ferencia Si se omite este paso la distorsi n de banda o la p rdida de resoluci n podr a resultar Directrices de instrumentos Enfriamiento Calor por efecto Joule considerable se genera durante toda transferencia debido a la alta corriente de empleado de enfriamiento de manera activa se recomienda especialmente para las trans ferencias que requieren m s de una hora las trans ferencias de las prote nas que deben ser retenidas actividad biol gica o la transferencia de los cidos nucleicos La alta conductividad del tamp n de fosfato utilizado por Bittner et al 1980 conduce a un aumento de temperatura relativamente r pida La temperatura del buffer no debe exce der de 45 C ya que los casetes y los soportes de los electrodos puede deformar Use un ba o de circulaci n establecido en 10 C si se utiliza agua como refrigerante Puede usar un ajuste m s bajo si el refrigerante es 50 50 de etileno glicol agua Nunca deje la unidad sin usar por m s de una hora en condiciones de alta potencia gt 250 mA Ajuste de potencia Si se utiliza una fuente de alimentaci n que se puede establecer en modo de voltaje de corriente con
16. ar la transferencia lo m s pronto posible despu s de la electroforesis para minimizar la difusi n de banda Cada paso se describe a continuaci n Preparar el tamp n Preparar un m nimo de 1 5 litros de la memo ria de transferencia apropiado Enfriar el b fer antes de su uso si es posible Prepare la unidad Enjuague el dep sito de la transferencia y casetes con agua destilada e Refrigeraci n activa es opcional pero altamente reco mendado Si no hay refrigeraci n activa se utilizar vaya al paso 3 Nota Conectar el intercambiador de calor para un ba o de circulador tales como la RCB20 PLUS Circular agua s lo o 50 50 de agua glicol de etileno para evitar da os a la unidad La bomba de circulaci n no debe generar una presi n mayor que 0 7 bar 10 psi encima de la presi n atmosf rica Ajuste la temperatura a 10 C o m s si la circulaci n de agua solamente Si se utiliza 50 50 de etilenglicol agua la temperatura puede ser inferior Inicio del ba o al mismo tiempo como la transferencia En primer lugar conecte la tuber a a la v lvula de alivio de presi n de color rojo entre la entrada y salida del agua e introducir el extremo libre en el ba o o en otro contenedor o drenaje para recoger el desborda miento de alivio de presi n La v lvula de seguridad se abre cuando la presi n dentro del intercambiador de calor superior a 10 psi Nota Aungue no se reguiere enfriamiento para e
17. doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obte nir des informations sur la mise au rebut de votre quipement Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlichen unsortierten Haus mill entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem auto risierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparec chiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalit di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrust ningar inte f r avyttras som osorterat hush llsavfall och m ste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information ang ende avyttring av utrustningen O pvii Electroforesis Unidad de Transferencia funci n y la descripci n El Hoefer TE22 unidad de transferencia del tanque transmite r pidamente las prote nas ADN ARN o de hasta cuatro de peque o formato de poliacrilamida o geles de agarosa a una membrana
18. e Bare tilbehor og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium Sikkerheten lokket m v re p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjolemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organi ske losemiddler vil forarsake irreparabel skade pa enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overop pheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Jezeli ten sprzet jest wykorzystywany w spos b nie okreslone przez Hoefer Inc do ochrony przewid zianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarc zone przez Hoefer Inc mog by wykorzystane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu kor
19. e electrodos Comprobar Durante la transferencia un flujo continuo de gas se libera a lo largo de toda la longitud de los electrodos Si las burbujas no se forman a lo largo de toda la longitud del electrodo reemplazar el electrodo Si casetes se arquean cuando est vac o reemplace El cassette de embalaje excesivo hace que se inclinan ver las instrucciones de montaje recomendadas en la p gina 6 A adir m s hojas de papel secante para aumentar la holgura entre el panel de casete y el gel Tenga cuidado de no overstuff el cassette el gel se debe sostener firmemente y de manera uniforme entre las esponjas pero no con tanta fuerza que se exprime Aumentar la intensidad de campo Aumentar el per odo de transferencia Trate de duplicar la misma No use la tinci n o agentes de fijaci n en el gel antes de la transferencia Utilizar un gel m s delgada Reducir la concentraci n de gel de acrilamida Comprobar que el pH es cercano al pH deseado La mayor a de los tampones no se debe ajustar hacer tamp n nuevo Utilizar 3 5 mM de SDS 0 1 en el tamp n de transferencia Evite incluir metanol en el tamp n de transferencia o reducir la canti dad al m nimo absoluto Utilizar sustancias de grado reactivo Aumentar la cantidad de tiempo Southern blot se depurinado Aumentar la carga neta de la prote na mediante el cambio a un tamp n de transferencia con un pH diferente Un pH m s bajo lt 6 7 aumenta la carga positiva sob
20. egro es el c todo La refrigeraci n se recomienda Cualguier ajuste que se traduce en m s de 5W de potencia generar el calor suficiente como para requerir el control de calor activo Un bafio de circu lador refrigerado con agua se debe establecer en alre dedor de 10 C Si se utiliza 50 50 de etileno glicol agua la temperatura puede ser menor Sensaci n T rmica del b fer antes de su uso si es posible Los par metros t picos de transferencia Par metros para la muestra y el sistema de amortiguaci n debe ser determinada emp ricamente Prote na cidos nucleicos Buffer Towbin 1X TBE o 1X TAE Corriente A 0 4 0 3 Voltaje V 100 50 Tiempo transferencia 1 hora 1 hora Temp refrigerante 10 C 10 C o meno AAA o Nota Es una buena idea para te ir el gel para determinar la integridad de la transferencia Nota No almacenar b fer utilizado con el dep sito de la transferencia Sensaci n T rmica del tamp n a 10 C antes de su reutilizaci n Establecer la fuente de alimentaci n Modo de corriente constante se recomienda Si el modo de voltaje constante se selecciona examinar de cerca la actual mayor corriente de calentamiento de Joule aumenta Si la corriente excede 0 4 A disminuir la tensi n Si es posible ajustar el temporizador de la fuente de alimentaci n La mayoria de las transferencias son completa dentro de una hora pero las mol culas m s grandes o m
21. el con NaOH El lcali debe ser neutralizado y el gel equilibr en tamp n de transferencia antes de electrotransferencia Por tanto el ADN y ARN geles cualquier SDS tambi n debe ser eliminado para asegurar uni n eficaz Bittner y col 1980 geles de lavado tres veces a 20 minutos cada uno para asegurar la eliminaci n completa de desnaturalizantes y detergentes V ase Bittner et al para un estudio de la eficacia de transferencia de ADN de diferentes tama os El tamp n de transferencia Bittner contiene 25 mM de fosfato s dico pH 6 5 Tambi n se describe un m todo para la introducci n de muescas por limitada acci n nucleasa con el fin de facilitar la transferencia de fragmentos de ADN m s grandes Recomendados tampones de ADN incluyen el sodio Bittner tamp n fosfato ver referencia y de TBE Para el ARN se recomienda TAE TBE y recetas TAE acciones se enumeran a continuaci n Estos tampones se diluy con m s frecuencia a 1X pero la concentraci n puede oscilar hasta 0 1X La refrigeraci n se recomienda para estos buffers especialmente a altas concentraciones EDTA solutiona 0 5 M EDTA pH 8 0 100 ml Na2EDTA 2H20 FW 372 2 0 5 M 18 6 g Disolver en 70 ml de agua destilada Ajustar a pH 8 0 con 10 M de NaOH aproximadamente 5 ml a continuaci n afiadir agua destilada hasta 100 ml ADN tamp n de transferencia 10X 10X Tris borato EDTA TBE pH 8 2 1 litro Tris FW 121 1 900 mM 109 0 g cido
22. ent wird f r den Innenlaborge brauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann fur das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produk tes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem AnschlieBen der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen fiihrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers Athylens durch den Warmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder Kihlmittel Ouelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instru mentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen Uber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die Uberhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Informazioni Importanti Italian Se quest apparecchiatura usata in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita
23. es de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Reca lentar causar da o irreparable a la unidad Dulezit Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskyt nut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid mus b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ker nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethyleng lykolu prost ednictv m v m n k tepla
24. ferencia y la pila est montado de modo que la membrana es m s cercano al lado gris de la casete entonces este lado se enfrenta al nodo La mayor a de las prote nas migran hacia el nodo en la Towbin Tris glicina sistema tamp n metanol independiente de la presencia de SDS y la mayor a de condi ciones los cidos nucleicos est n cargadas negativamente y tambi n migran hacia el nodo Importante Nunca permita que la temperatura de la soluci n debe exceder los 45 C El calor exce sivo puede causar que la unidad se deforme El montaje final y la transferencia de Instale la tapa Los casetes estan codificados por color para que coin cida con los cables en la tapa Para transferir hacia el anodo orientar la tapa de manera que el medio gris de la cassette se enfrenta al anodo o plomo rojo y el medio negro de la cassette se enfrenta al catodo o plomo negro Aseg rese de que el asiento de banana en los conectores en la tapa e Utilice s lo una fuente de alimentaci n aprobadas tales como el Hoefer PS2A200 PS200HC o PS300B Aseg rese de que la fuente de alimentaci n est apagada y todos los controles se establecen en cero Conecte los cables codificados por color de la tapa de la unidad de transferencia en la oferta el poder rojo en el conector rojo de salida y el cable negro a la salida de gato negro En la mayor a de los sistemas el cable rojo es el nodo y el cable n
25. gar 4 40 C 80 2000 m I 2 14x24x16 5 cm EN 61010 1 UL 61010A 1 CSA C22 2 1010 1 Certificado CE Esta declaracion de conformidad es valida solamente cuando el instrumento es la siguiente e utilizarse en lugares de laboratorio e usado como liberado de Hoefer Inc a excepci n de las alteraciones descritas en el manual del usuario y e conectado a otros instrumentos de marcado CE o productos recomendados o aprobados por Hoefer Inc Fig 1 Tangue de componentes de transferencia de la unidad principal con c digo de color Una fuente de alimentaci n capaz de suministrar hasta 100 V y de 400 a 500 ma se reguiere cubrir tangue Hasta cuatro paneles de casetes encajen electrodos 2 electrodo de tornillo 4 de retenci n 2 7 J di niveles de llenado cassette de r gancho Pa Incluye pero no se muestran A e Los cartuchos de gel 4 e Las esponjas de espuma de 6 mm de espesor 4 puertos del sl asd 3 intercambiador as esponjas de espuma 3 mm de calor 2 de espesor 8 intercambiador de calor de seguridad de presi n de la v lvula e Papel secante hojas 25 Nota Consulte la secci n de electrotransferencia Notas para una discusi n de las membranas y los tampones Nota Para conexiones r pidas y f ciles instalar accesorios de fijaci n r pida de acoplamiento con las v lvulas en la l nea Manual de instrucciones Realiz
26. ia para mejorar la uni n a nitrocelulosa Par metros de membrana Use guantes para manipular las membranas Membranas Almacenar a temperatura ambiente fuera de la luz directa del sol para mantener las membranas activadas Utilizar una membrana con un tama o de poro m s peque o 0 10 0 20 um si las prote nas pasan a trav s de la membrana o utilizar un tipo diferente de membrana Lugar una membrana tanto encima y por debajo del gel si se sospe cha una prote na se mueve en la direcci n opuesta a la mayor a de as prote nas Compruebe las dos membranas de prote na s Compruebe si muestra demasiado est disponible para el rea de a superficie de uni n mediante la aplicaci n de dos membranas en lugar de uno Si soplar a trav s de ocurre reducir la carga de a muestra Para obtener m s consejos de soluci n de prob emas consulte Bjerrum O J et al 1988 e pl2 Electrotransferencia notas Ventajas de transferencia electrofor tica Transferencia electrofor tica de las prote nas y cidos nucleicos es mucho m s r pido que los m todos descritos por primera secante del Sur para el ADN Alwine et al Para el ARN o Renart et al para las prote nas El m todo de transferencia tanque utiliza corriente de alta para reducir el tiempo de transferencia de la mayor a de las muestras a 45 60 minutos Transferencia electrofor tica puede mejorar la eficiencia de transferencia a trav s de la no electro
27. l sistema el buffer debe ser distribuido con un agitador para evitar el agotamiento de bufer en los electrodos Nota Siempre use guantes al manipular las membranas para evitar dejar huellas en ellos ilmportante Tenga mucho cuidado en eliminar todas las burbujas de aire en cada paso porgue la pres encia de burbujas de aire espe cialmente entre la membrana y el gel la transferencia de blogues Prepare dos tramos de 9 mm de vinilo o de tubo de silicona Abrazaderas de las mangueras de diaposi tivas 4 en total en cada extremo de dos tramos de tuber a Conecte un extremo de cada tramo de tuber a a un puerto intercambiador de calor Coloque la libre extremos de cada tramo de tuber a a los puertos de circulaci n para el ba o uno a la entrada y el otro a la salida de asegurar las conexiones con las abrazad eras de manguera Lugar no deje a una barra magn tica de agitaci n en el tanque de reserva Dejar caer objetos en el tanque se puede romper la placa de al mina Establecer la unidad en un agitador magn tico y llenar tamp n de transferencia a la Iniciar el nivel de llenado l nea en la parte frontal del tanque Esto requiere aproximada mente 0 7 litros Q Establecer el agitador de baja media lo que lleva a cabo la circulaci n de b fer sin forzar b fer a trav s de los casetes Montar la cinta de transferencia Pre h medo nitrocelulosa o membranas de nylon con agua destilada
28. lizadas prote nas hacia el nodo Towbin tamp n 25 mM Tris 192 mM glicina 20 v v de metanol pH 8 3 2 litros Tris FW 121 1 25 mM 6 0 g Glycina FW 75 07 192 mM 28 8 g SDS FW 288 4 0 1 3 5 mM 2 0 g Disolver en 1 5 litros de agua destilada A adir metanol seg n sea necesario Llevar a 2 litros con agua destilada No ajustar el pH el cual debe estar entre 8 2 y 8 4 Opcional Chill antes de su uso Opcional agregar SDS puede mejorar la eficiencia de transferencia PDependiendo del tipo de membrana seleccionada a adiendo metanol puede mejorar los resultados de transferencia v ase la discusi n y la tabla anterior Debido a tampones que contengan metanol puede deteriorarse si se almacena por largos per odos con metanol como se requiere antes de transferir CAPS tamp n 1X CAPS 10 mM pH 11 0 2 litros CAPS FW 221 3 10mM 4 44 g 3 cyclohexylamino 1 propanesulfonic acid Disolver en 1 5 litros de agua destilada ajustar el pH a 11 0 con concentraci n de NaOH Ajuste el volumen a 2 0 litros o p17 e p18 Transferencias de acido nucleico Los cidos nucleicos normalmente deben ser transferidos en forma desnaturalizada por la uni n m s eficaz EI ARN es normalmente desnaturalizado con glioxal antes de la separa ci n o separados en geles de desnaturalizaci n que contengan formaldehido o mercurio de metilo Sin embargo el ADN de doble cadena es generalmente desnaturalizado en el g
29. membra nes Anal Biochem 128 302 311 1983 Matsudaira P Sequence from Picomole Quantities of Proteins Electroblotted onto Polyvinylidene Difluo ride Membranes J Biol Chem 262 10035 1987 Ohmsted J B Affinity purification of antibodies from diazotized paper blots of heterogeneous protein samples J Biol Chem 256 11955 1981 Renart Reiser J and Stark G R Transfer of proteins from gels to DBM paper and detection with anti sera a method for studying antibody specificity and structure Proc Natl Acad Sci USA 76 3116 1979 Sambrook J and Russell D W Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Labora tory Press A1 17 2001 Southern E M Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electrophoresis J Molec Biol 98 3 503 517 1975 Stellway E J and Dahlberg A E Electrophoretic transfer of DNA RNA and protein onto DBM paper Nucleic Acids Res 8 299 1980 Symington J Green M and Brackmann K Immu nological detection of proteins after electrophore tic transfer from gels to diazo paper analysis of adenovirus encoded proteins Proc Natl Acad Sci USA 78 177 181 1981 Towbin H Staehelin T and Gordon J Electro phoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets procedure and some applications Proc Natl Acad Sci USA 76 4350 4354 1979 e p21 Orden informaci n p
30. n hecido testando laborat rio A tampa de seguran a deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranca Circulam s agua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instru mento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade Nao opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especifica es t cnicas Super aquecer causar agress o irrepar vel unidade Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhan dah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaborato rium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller lever erade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som r CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng Vander
31. nrad 70 o Decon 90 Enjuague el dep sito casetes y esponjas con agua destilada despu s de cada uso Deje que la unidad se seque completamente Peri dicamente se lava con una soluci n diluida de un deter gente suave Extracci n del panel de electrodo s Para una limpieza m s a fondo o para sustituir los electrodos da ados quitar cada panel de electrodos aflojando el tornillo de sujeci n lo suficiente como para permitir que el panel se deslice hacia afuera Use el gancho en el panel lateral para sacar el panel de electrodos hacia arriba no tire del panel hacia arriba por el conector banana Tenga cuidado de no estirar o romper el hilo de platino al manipular el panel Soluci n de problemas problema soluci n Transferencia incompleta reas en blanco en la membrana Rejilla patr n en la membrana Las mol culas no migran fuera del gel Quite todas las burbujas de aire atrapadas en el montaje de la pila de transferencia montar la pila mientras se sumerge en tamp n de transferencia presione suavemente en cada una esponja ya que se agrega a la pila y rodar una pipeta de vidrio o tubo de ensayo sobre la membrana y el gel para eliminar todas las burbujas de aire Reducir la velocidad de agitaci n para evitar turbulencias Proceso de una sola tira o membrana en cada bandeja o cassette para evitar la superposici n Utilizar una soluci n tamp n con una fuerza i nica m s baja La continuidad d
32. ntaja de la membrana cati nica es que las manchas de prote nas tambi n se unen as de manera que la tinci n de fondo tiende a ser muy alta Adecuadamente inactiv sin embargo este documento puede ser utilizado para la detecci n de anticuerpos u otros m todos de superposici n de la identificaci n de prote nas Un resumen de tipo membrana y la concentraci n de metanol recomendada sigue Membrana tipo Metanol Nylon cargado 0 Nitrocelulosa lt 20 PVDF lt 15 Algunos investigadores han informado que noso tros que una baja concentraci n de SDS 0 1 mejora la transferencia de la prote na a partir de un gel de SDS Burnette 1981 y Symington et al 1981 investigaron el efecto del peso mole cular de prote nas Gibson 1981 describe un m todo para aumentar el grado de transferencia de grandes prote nas por escisi n con limitado pronasa durante la transferencia Tampones proteina de transferencia de Utilizar un tamp n con baja fuerza i nica tal como los dos se enumeran a continuaci n para evitar el sobrecalentamiento Utilizar el tamp n CAPS alternativa cuando Tris no se puede utili zar como en la secuenciaci n de p ptidos CAPS puede mejorar la transferencia debido a su efecto sobre la carga de la prote na ver Matsudaira 1987 Para las prote nas nativas le sugerimos utilizar el tamp n de electroforesis para la trans ferencia tambi n Utilizar el tamp n de Towbin para transferir SDS desnatura
33. re las prote nas un pH m s alto gt 6 7 aumenta la carga negativa de las prote nas o pll problema soluci n Patrones difusos de la banda Transferencia inmediatamente despu s de la separaci n electro for tica Si equilibrante antes de la transferencia acortar o elimi nar el tiempo de equilibrado o mover el gel a la habitaci n fr a durante equilibraci n Si tamp n de transferencia contiene metanol gt 10 equilibrar el gel en tamp n de transferencia durante 30 minutos para permitir que se contraiga antes de ensamblar la pila Nota Debido a metanol hace que el gel se encogen un poco las mol culas de gran tama o pueden migrar con mayor lentitud Tenga cuidado de que el gel se mantiene firmemente contra la membrana y que no se desplaza una vez se hace contacto Si se produce un exceso de calentamiento durante la transferencia bajar la temperatura del fluido de enfriamiento en el intercambiador de calor Comprobar que la superficie preferida de uni n de la membrana si lo hay en contacto con el gel Uni n a la membrana ineficiente Los par metros qu micos Fijar o reticular la mol cula en la membrana de acuerdo con los requisitos del cido nucleico prote na o tipo de membrana Preparar buffer de prote na de transferencia sin SDS Compruebe que la cantidad ptima de metanol necesario para el tipo de membrana y comprobar la soluci n tamp n A adir 10 20 de metanol para el tamp n de transferenc
34. roducto cantidad c digo Hoefer TE22 del tanque de transferencia de la unidad 1 TE22 Incluye 4 cartuchos de gel 8 esponjas de espuma de 3 mm de espesor 4 esponjas de espuma de 6 mm de espesor 25 hojas de papel secante Accesorios y repuestos Gel de casete 2 esponjas de espuma 3 mm de espesor 1 TE24 y una esponja de espuma de 6 mm de espesor Las esponjas de espuma 9x 10 5 cm de 6 mm de espesor 4 TE25 Las esponjas de espuma 9x 10 5 cm 3 mm de espesor 4 TE25F 1 8 Electrodo del panel I TE23 Seguridad tapa con cables 1 TE29 Alta tensi n conduce par SE6056 HV Quick cuerpo en forma enganche hembra 2 QF3 8 para adaptarse a 9 5 mm tubo de Identificaci n Quick cuerpo en forma enganche hombre 2 QFX3 8 para adaptarse a 9 5 mm tubo de Identificaci n Papel secante Papel secante hojas 9x 10 5 cm 50 TE26 Productos complementarios Hoefer PS2A200 fuente de alimentaci n 200 V 2A 1 PS2A200 Hoefer PS200HC fuente de alimentaci n 200 V 2A 1 PS200HC Hoefer PS300B fuente de alimentaci n 300 V 0 5A 1 PS300B e p22 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Llamada gratuita 1 800 227 4750 Telefono 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support amp hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer es una marca registrada de Hoefer Inc Contrad 70 y Decon 90 son marcas comerciales de descon taminaci n de laboratorio O 2012 Hoefer Inc Todos los derechos reservados Impreso en el USA Hoefer
35. ropho retic transfer of proteins and nucleic acids from slab gels to diazobenzyloxymethyl cellulose or nitrocellulose sheets Anal Biochem 102 459 471 1980 Bjerrum O J Larsen K and Heegaard N CRC Handbook of Immunoblotting of Proteins Vol 1 Section 7 CRC Press 1988 Burnette W N Western blotting electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein A Anal Biochem 112 195 1981 Gallagher S Winston S E Fuller S A and Hurrell J G R Immunoblotting and Immunodetection In Current Protocols in Molecular Biology 10 8 1 10 8 17 Greene Publishing and Wiley Interscience NY 1993 Gershoni J M Davis EE and Palade G E Protein blotting in uniform or gradient electric fields Anal Biochem 144 32 40 1985 Gershoni J M and Palade G E Electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels to a positively charged membrane filter Anal Biochem 124 396 405 1982 Gershoni J M and Palade G E Protein Blotting Principles and Applications Anal Biochem 131 1 15 1983 Gibson W Protease facilitated transfer of high mole cular weight proteins during electrotransfer to nitrocellulose Anal Biochem 118 1 1981 e p20 Lin W and Kasamatsu H On the electrotransfer of polypeptides from gels to nitrocellulose
36. stante o constante se recomienda que se fije para operar en modo de corriente cons tante Tamp n conductividad aumenta con la temperatura Durante secante en una c mara sin refrigeraci n calentamiento por efecto Joule y la conductividad en aumento puede resultar en un sobrecalentamiento peligroso si la fuente de alimentaci n se ajusta para mantener el voltaje constante Si una fuente de voltaje constante se debe utilizar controlar y ajustar la tensi n para mantener una corriente igual o inferior a 400 mA e pl5 o pl6 Las transferencias de proteinas Res menes de estudios Gershoni y Palade 1982 investigaron los facto res que afectan la recuperaci n de prote nas a partir de geles de SDS a nitrocelulosa o papel de DBM De acuerdo con sus conclusiones metanol en el sistema de tamp n Towbin es necesario para conseguir la uni n eficientes a nitrocelulosa El metanol mejora de uni n en parte mediante la eliminaci n de la prote na unida a SDS En ausen cia de metanol etiquetados alb mina de suero bovino BSA pasa a trav s de al menos cinco capas de membranas El metanol puede causar un gel para reducir el tama o sin embargo por lo que la velocidad de eluci n disminuye Mediante el uso de una membrana cati nica tal como nylon que se une a las prote nas m s eficien temente y omitiendo metanol desde el tamp n de transferencia y Gershoni Palade obtiene una transferencia mucho m s cuantitativo La desve
37. t est con u pour l usage de labora toire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entrete nir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationale ment reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre sa place avant connecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur a un robinet d eau ou a la source d agent de refroidissement ou la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de l instrument Les dissolvants organiques causeront des dommages irr parables a l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irreparables a l unit Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verwendet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrum
38. ullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not speci fied by Hoefer Inc the protection provided by the eguipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating main taining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified technical specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa Finnish Jos t t varusteita k ytet
39. zysta jedynie zasilacza e jest nosz ce ozna kowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organ icznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informac es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira nao especificada por Hoefer Inc que a protecc o forne cida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que 6 CE marcou ou seguranca registrada por um nacionalmente reco
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