QMS® Tacrolimus Immunoassay
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1. e Los hallazgos de la prueba deber n siempre tenerse en cuenta junto con la historia m dica del paciente los ex menes cl nicos y otros hallazgos Si los resultados no concuerdan con los datos cl nicos deber an realizarse an lisis adicionales para confirmar los resultados e Consulte en prospecto del envase de PROGRAF los efectos de la administraci n combinada de f rmacos y de f rmacos que pueden aumentar o reducir las concentraciones de tacrolimus VALORES ESPERADOS Con este ensayo no se ha establecido el intervalo terap utico ptimo para tacrolimus en sangre completa Los intervalos terap uticos de tacrolimus pueden variar en funci n de factores cl nicos y de la metodolog a utilizada Dado lo heterog neo del estado cl nico de los pacientes los m dicos deber an establecer el intervalo de control terap utico que deseen en funci n de su experiencia y de las necesidades cl nicas de cada paciente Los cambios en el tratamiento no deber an basarse exclusivamente en los valores de tacrolimus Las diferencias en la sensibilidad frente a los efectos inmunosupresores y nefrot xicos del tacrolimus la coadministraci n de otros inmunosupresores el tipo de trasplante la duraci n del periodo posoperatorio y toda una serie de distintos factores contribuyen a la necesidad de diferentes requisitos para obtener unas niveles sangu neos ptimos de tacrolimus Los intervalos ptimos pueden variar dependiendo de la prueba utili2. Acetamin feno Acicloguanosina Aciclovir 100 000 17 100 100 000 35 000 20 000 100 000 Alopurinol Sulfato de amikacina Metilprednisolona Atenolol 40 000 Metoclopramida 100 000 uomine 09 Sufatodemorina 100000 Bromocriptina 8 000 cido micofen lico 100 000 2 Bromo a ergocryptina 120 000 N acetilprocainamida 120 000 Anfotericina B Ampicilina Apresolina Hidralazina Tabla continuaci n Concen Concentraci n us traci n ind ng mL Clorpromazina Nicotina 20 000 conie 19 Ped ioo ETT o Prednisone 10000 Ciclosporina A Compuesto Compuesto Cefazolina Ceftriaxona Cefalosporina C 600 000 100 000 4 000 40 000 100 000 200 000 Diazepam Digitoxina Digoxina Diltiazem Disopiramida Eritromicina 100 000 Sulfato de Kanamicina A 100 000 Las siguientes sustancias end genas potencialmente interferentes cuando se analizaron con el inmunoensayo QMS Tacrolimus a las concentraciones indicadas mostraron una recuperaci n entre el 9296 y el 10896 150 000 Sustancia potencialmente interferente Concentraci n AHAM anticuerpos humanos antimurinos 12 64 Explicaci n de los s mbolos utilizados Dispositivo m dico para diagn stico in vitro C digo de lote Numero de lote Reactivo 1 Reactivo 2 N mero de cat logo Reactivo de extracci n Componentes ly I Proteger de la luz E Aten
3. cula por los sitios de uni n a los anticuerpos espec ficos del anticuerpo unido a tacrolimus El reactivo formado por micropart culas recubiertas de tacrolimus se aglutina r pidamente en presencia del reactivo anti tacrolimus en ausencia de cualquier f rmaco competidor en la muestra El ndice de cambio de la absorbancia se mide mediante espectrofotometr a a 700 nm Cuando se a ade una muestra que contiene tacrolimus se inhibe parcialmente la reacci n de aglutinaci n ralentizando as la tasa de cambio de la absorbancia Se puede obtener una curva cl sica de inhibici n de la aglutinaci n dependiente de la concentraci n utilizando la tasa m xima de aglutinaci n a la menor concentraci n de tacrolimus y la menor tasa de aglutinaci n a la m xima concentraci n de tacrolimus REACTIVOS Kit de reactivos QMS Everolimus 10015556 se presenta en un kit que consta de tres reactivos l quidos listos para su uso que contiene REAGENT 1 1 x 18 mL REAGENT 2 1 x 12 mL Reactivo de extracci n 1 x 50 mL Compuestos reactivos Componente Concentraci n componente REAGENT 1 Anticuerpo policlonal contra tacrolimus conejo lt 1 0 Azida s dica 0 09 REAGENT 2 Micropart culas recubiertas de tacrolimus lt 0 3 Azida s dica 0 09 EXT Azida s dica 0 09 Solo para uso en diagn stico in vitro MANIPULACI N Y ALMACENAMIENTO DE REACTIVOS e REAGENT 1 REAGENT 2 y Reactivo de extracci n Listo para su u
4. B y calmodulina La formaci n del pent mero produce la inhibici n de la actividad fosfatasa de la calcineurina necesaria para activar factores de transcripci n para el transporte al interior del n cleo celular As la expresi n gen tica de los linfocitos T se ve especialmente afectada por citocinas tales como la IL 2 lo que produce un efecto inmunosupresor en los pacientes La distribuci n del tacrolimus entre la sangre entera y el plasma depende de varios factores tales como el hematocrito la concentraci n de f rmaco y la concentraci n de prote nas plasm ticas La media del cociente entre las concentraciones en sangre entera y en plasma fue de 35 intervalo de 12 a 67 5 El tacrolimus es metabolizado en gran medida por el sistema del citocromo P 450 principalmente CYP3A Se metaboliza el f rmaco en al menos 8 metabolitos M I M VIII mediante desmetilaci n e hidroxilaci n La semivida media estimada del tacrolimus in vivo es de 48 horas Tambi n se ha informado de la existencia de una gran variabilidad tanto intrapacientes como interpacientes en las concentraciones de tacrolimus en sangre entera Se recomienda un control cuidadoso y frecuente del tacrolimus FUNDAMENTOS DEL PROCEDIMIENTO El ensayo QMS Tacrolimus es un inmunoensayo turbidim trico potenciado mediante part culas homog neas El ensayo est basado en la competencia que existe entre el f rmaco presente en la muestra y el que recubre la micropart
5. mass spectrometry and NMR and evaluation of in vitro immunosuppressive activity Clin chem 1994 40 740 744 9 Gonschior AK Christians U Winkler M etal Tacrolimus FK506 metabolite patterns in blood from liver and kidney transplant patients Clin Chem 1996 42 1426 1432 10 Alak AM Measurement of tacrolimus FK506 and its metabolites a review of assay development and application in therapeutic drug monitoring and pharmacokinetic studies Ther Drug Monit 1997 19 338 351 11 Jusko WJ Analysis of tacrolimus FK506 in relation to therapeutic drug monitoring Ther Drug Monit 1995 17 596 601 12 Christians U Pokaiyavanichkul T Chan L Tacrolimus Applied Pharmacokinetics and Pharmacodynamics Principals of Therapeutic Drug Monitoring 4th Edition Lippincott Williams amp Wilkins Philadelphia PA 2005 529 562 13 Staatz CE Willis C Taylor PJ and Tett SE Population pharmacokinetics of tacrolimus in adult kidney transplant recipients Clin Pharmacol Ther 2002 72 660 669 14 PROGRAF prospecto del envase Deerfield IL Astellas Pharma US Inc 2012 15 Tholen DW Kallner A Kennedy JW et al NCCLS Evaluation of Precision Performance of Quantative Measurement Methods Approved Guideline Second Edition NCCLS document EP5 A2 ISBN 1 56238 542 9 NCCLS Wayne PA 2004 16 Deming WE Statistical adjustment of data New York Wiley 1943 Dover Publications edition 1985 Dover Publications New York 17 Bland JM Al
6. puede medirse con una precisi n interensayo de 20 CV El estudio se realiz utilizando muestras de sangre completa a las que se a adi tacrolimus en un intervalo del 0 5 al 5 0 ng mL para una medida cada vez dos veces al d a durante 30 d as y con un total de 60 puntos de datos En el l mite de confianza superior de 95 se calcul que el l mite de cuantificaci n LOQ era de 0 9 ng mL que admite el l mite inferior del ensayo de 1 0 ng mL La recuperaci n porcentual observada a 0 9 ng mL es del 102 0 Linealidad de diluci n Se realiz un estudio de linealidad diluyendo una muestra de tacrolimus de alta concentraci n con el calibrador OMS Tacrolimus A a concentraciones distribuidas uniformemente en el intervalo del ensayo El porcentaje de recuperaci n se determin dividiendo la concentraci n de tacrolimus medico por la concentraci n prevista Las concentraciones previstas se determinaron utilizando la alta concentraci n probada multiplicada por un factor de diluci n de muestra Concentraci n Concentraci n Recuperaci n elevada prevista ng mL medida ng mL 50 0 40 0 12 30 0 20 0 100 0 Tabla continuaci n Concentraci n Concentraci n Recuperaci n prevista ng mL medida ng mL de muestra elevada Concentraci n prevista de muestra de concentraci n elevada x concentraci n medida elevada Recuperaci n Concentraci n medida Concentraci n prevista x 100 99 6 Re
7. 3 15 0 didemetil ep M VII 13 15 0 didemetil M VI 13 31 0 didemethyl 2 2 2 0 La reactividad cruzada observada del metabolito de tacrolimus M IV fue de lt 174 8 No se han evaluado los metabolitos de tacrolimus M V y M VIII para determinar la posible reactividad Las muestras de paciente con tacrolimus conten an bajas concentraciones de metabolitos de tacrolimus en comparaci n con el f rmaco original con aproximadamente el 6 de M I el 15 de M II el 6 de M III y pr cticamente indetectable el M IV 91219 Sustancias interferentes Se realizaron estudios de interferencia utilizando como gu a el protocolo CLSI EP7 A2 8 El inmunoensayo OMS Tacrolimus se analiz con f rmacos administrados en combinaci n con tacrolimus y con f rmacos comunes para comprobar posibles interferencias Los compuestos analizados se a adieron a muestras de sangre completa con aproximadamente 5 y 12 ng mL de tacrolimus y se analizaron utilizando el inmunoensayo QMS Tacrolimus Se consider que una recuperaci n de la concentraci n de tacrolimus superior a un 10 de error interferir a con el ensayo Los compuestos analizados en las concentraciones detalladas en la tabla siguiente no mostraron interferencia con el ensayo La recuperaci n porcentual media de tacrolimus oscil entre el 91 y el 109 Concentraci n Compuesto ng mL j 200 000 Sulfato de Kanamicina B 50 000 Labetalol Concen traci n ng mL 100 000 Compuesto
8. ENER UNOS RESULTADOS PTIMOS SIGA ESTOS PASOS CON TOTAL EXACTITUD DEBEN PROCESARSE LOS EXTRACTOS INMEDIATAMENTE DESPU S DE SU OBTENCI N 1 Preparar y etiquetar los tubos de microcentr fuga de base redondeada para la extracci n de las muestras calibradores y controles Preparar un tubo de microcentr fuga para cada muestra 2 Utilizar una pipeta para medir exactamente 200 uL de muestra calibrador o materiales de control en el tubo de microcentr gua etiquetado Succionar la muestra con la pipeta pasar suavemente la punta de la pipeta por el borde del vial de la muestra para eliminar cualquier exceso de muestra y a continuaci n afiadir la muestra al lado interior del tubo de microcentr fuga Nota Compruebe la punta de la pipeta para asegurarse de que no tiene burbujas de aire El aire en la punta puede causar imprecisiones 3 Utilice una pipeta para medir exactamente 200 uL de soluci n de extracci n en el tubo de microcentr fuga Al preparar varias muestras se recomienda una pipeta repetidora para succionar y afiadir la soluci n de extracci n Eliminar todas las burbujas de aire de la punta de la pipeta antes de a adir la soluci n de extracci n 4 Tapar y agitar de inmediato en un v rtex el tubo de microcentr fuga a la m xima velocidad durante un periodo de 15 a 30 segundos Comprobar que todos los tubos tienen una mezcla homog nea Si se detecta que hay una muestra sin mezclar separar la parte no mezclada y vuelva a agit
9. OMS Tacrolimus Immunoassay 10015556 Consulte este prospecto detenidamente antes de utilizar el Sistema de microesferas para an lisis cuantitativo QMS Deben seguirse las instrucciones incluidas en el prospecto tal y como vienen indicadas No se garantiza la fiabilidad de los resultados del ensayo si existen desviaciones con respecto a las instrucciones contenidas en este prospecto INDICACIONES El inmunoensayo de tacrolimus OMS est destinado a usarse en la determinaci n cuantitativa de tacrolimus en sangre completa humana mediante analizadores autom ticos de bioqu mica cl nica Los resultados que se obtengan se utilizar n para ayudar en el tratamiento de pacientes de trasplante de ri n h gado y coraz n que est n sometidos a terapia con tracolimus Este dispositivo de diagn stico n vitro est indicado solo para uso en laboratorio cl nico RESUMEN Y EXPLICACION DE LA PRUEBA El tacrolimus FK506 PROGRAF es un antibi tico macr lido de origen f ngico Streptomyces tsukubaensis con potentes efectos inmunosupresores tal como se prescribe para pacientes sometidos a trasplante de ri n e h gado El tacrolimus es un inhibidor de la calcineurina una fosfatasa que activa la proliferaci n de los linfocitos Anivel celular eltacrolimus se une a una familia de prote nas de uni n denominadas FKBP prote nas de uni n FK506 y a continuaci n forma un complejo pentam rico que incluye tacrolimus FKBP calcineurinas A y
10. aciones de calibradores coinciden con los valores impresos en la tarjeta de asignaci n de valores Frecuencia de calibraci n Se recomienda la recalibraci n e Despu s del cambio del lote del calibrador o del reactivo kit e Despu s de realizar el mantenimiento mensual del instrumental e Tal como estipulen los siguientes procedimientos de control de calidad CONTROL DE CALIDAD Todos los requisitos de control de calidad se ajustar n a las normas o a los requisitos de acreditaci n locales regionales y o nacionales Siempre que proceda consulte los procedimientos estandarizados de trabajo y o el plan de garant a de calidad de su laboratorio para conocer otros requisitos de control de calidad y las posibles medidas correctivas Requisitos recomendados de control para el inmunoensayo QMS Tacrolimus e Se debe realizar al menos una muestra de cada nivel de controles cada vez que se extraen y analizan pruebas de pacientes e Sise necesita monitorizar los controles de manera m s frecuente se recomienda seguir los procedimientos de control de calidad establecidos en su laboratorio e Todos los requisitos de control de calidad se ajustar n a las directrices o a los requisitos de acreditaci n locales regionales y o nacionales e Silos resultados del control de calidad no est n dentro de los l mites aceptables definidos por su laboratorio los valores de los pacientes podr an no ser los correctos y no deber an reflejarse Deber n adopta
11. ar en el v rtex 5 Dejar que la mezcla del tubo de microcentr fuga se asiente a temperatura ambiente durante un periodo de 5 a 7 minutos 6 Colocar el tubo en una centr fuga y centrifugar durante 5 minutos a 13 000 rpm 1 Decantar el sobrenadante en un recipiente de muestras adecuado evitar que se formen burbujas e inmediatamente realizar la medici n para reducir al m nimo la evaporaci n de la muestra No golpear el recipiente para soltar la ltima gota de forma que pueda perjudicar a la bola 8 Desechartodos los extractos durante el an lisis Analizar de nuevo las muestras requiere extracciones frescos Nota Tambi n se dispone de m s sugerencias y recomendaciones de pasos para extracci n de muestras del inmunoensayo QMS tracolimus en el departamento de asistencia t cnica de Thermo Fisher Scientific Procedimiento de ensayo Para obtener una descripci n detallada de c mo realizar y calibrar un ensayo consulte el manual de instrucciones espec fico del instrumento Procedimiento de diluci n de muestras Emplear QMS tacrolimus CAL A 0 0 ng mL para diluir manualmente las muestras fuera del intervalo lineal del ensayo Protocolo de diluci n manual Se pueden diluir manualmente las muestras de pacientes que tengan concentraciones de tacrolimus mayores de 30 ng mL diluyendo la muestra del paciente con QMS tacrolimus CAL A 0 0 ng mL en una proporci n 1 1 antes de extraer la muestra Debe diluirse ya que la prueba con la
12. binadas de trasplante de ri n e h gado y coraz n OMS Tacrolimus comparado con ARCHITECT Tacrolimus OMS Tacrolimus comparado con LC MS MS sistema 1 L nea 1 1 7 L nea 1 1 Regr Deming l _ Regr Deming D 3 Li 15 O O E 10 E Z C 5 S 8 qw 1 2 EE 0 5 1 15 29 2 9 LC MS MS sistema 1 ng mL ARCHITECT Tacrolimus ng mL UL Desain P dn gend araneo UUDISDOISIUR OSEE TOS KEN AnS ge Gr fico de desviaci n Bland and Altman Gr fico de dispersi n para los resultados del a rm parado Zon B Ee MIS Stem l para muestras combinadas de QMS Tacrolimus comparado con el ensayo Abbott ARCHITECT Tacrolimus para muestras iraspiante gemnon higado y coraz n La desviaci n media se calcula dis la diferencia combinadas de trasplante de ri n e h gado La desviaci n media se calcula como la entre el inmunoensayo QMS Tacrolimus y los resultados del LC MS MS sistema 1 diferencia entre el inmunoensayo QMS Tacrolimus y los resultados del ARCHITECT Tacrolimus Diferencia de QMS Tacrolimus respecto a LC MS MS Diferencia de OMS Tacrolimus respecto a ARCHITECT Tacrolimus ams DESVIACI N 8 media ERT HA Desvia ci n media gt IC 95 C ng mL Tacrolimus ng mL Diferencia de QMS comparado con LC MS MS sistema 1 Diferencia de QMS respecto a ARCHITECT 0 5 10 15 20 25 30 6 Media de LC MS MS sistema 1 y QMS ng mL Media de ARCHITECT Tacrolimus y OMS ng mL Especificidad Se realizaron estudios
13. ci n Documentos de consulta incluidos Consultar las instrucciones de uso uBP L mites de temperatura Fecha l mite de uso caducidad Fabricante iE eo Contenido del kit Material potencialmente peligroso a nivel biol gico x Nocivo Marca de conformidad CE CN TA BIBLIOGRAFIA 1 Kino T Hatanaka H Miyata S et al FK 506 a novel immunosuppressant isolated from a streptomyces ll Immunosuppressive effect of FK 506 in vitro J Antibiotics 1987 40 1256 1265 2 Bierer BE Jin YJ Fruman DA et al FK506 and rapamycin molecular probes of T lymphocyte activation Transplant Proc 1991 23 2850 2855 3 Schreiber SL Chemistry and biology of the immunophilins and their immunosuppressive ligands Science 1991 251 283 287 4 Thomson AW Bonham CA and Zeevi A Mode of action of tacrolimus FK506 molecular and cellular mechanisms Ther Drug Monit 1995 17 584 591 5 Griffith JP Kim JL Kim EE et al X ray structure of calcineurin inhibited by the immunophilin immunosuppressant FKBP12 FK506 complex Cell 1995 82 507 522 6 Jusko WJ Thomson AW Fung J et al Consensus document therapeutic monitoring of tacrolimus FK 506 Ther Drug Monit 1995 17 606 614 7 Physicians Desk Reference 58th ed Thomson PDR at Montvale NJ 2004 PROGRAF 1323 1327 8 Lhoest GJ Maton N Latinne D et al 15 desmethyl FK 506 and 15 31 desmethyl FK 506 from human liver microsomes isolation identification by fast atom bombardment
14. ctos de control de calidad disponibles en el mercado ponerse en contacto con el departamento de asistencia t cnica de Thermo Fisher Scientific e Metanol grado HPLC gt 99 8 de pureza e Tubos de microcentr fuga con baseredondeada Analizador qu mico cl nico automatizado Preparaci n de la muestra Nota Para realizar los controles siga las instrucciones y las recomendaciones de manipulaci n espec ficas del proveedor en el prospecto del envase si se incluyen Antes de la extracci n esperar a que los calibradores y las muestras de pacientes alcancen la temperatura ambiente Antes de utilizarlos se deben mezclar bien los calibradores y las muestras de pacientes durante un periodo de 15 a 20 minutos y a temperatura ambiente Mezclar bien los calibradores y las muestras de pacientes invirti ndolos suavemente se recomienda utilizar un oscilador Evitar que se formen burbujas Preparaci n de la soluci n de extracci n 1 A adir exactamente 10 mL de reactivo de extracci n a temperatura ambiente en un frasco limpio seco y herm tico 2 A adir exactamente 40 mL de metanol de grado HPLC gt 99 8 de pureza al frasco y mezclar suavemente Etiquetar como soluci n de extracci n de trabajo de tacrolimus Anotar la fecha actual y la fecha de caducidad 2 semanas a partir de la fecha de fabricaci n en la etiqueta Conservar a temperatura ambiente Procedimiento de extracci n para muestras calibradores y controles PARA OBT
15. cuperaci n Se a adi a las muestras de sangre completa negativa cantidades de tacrolimus a concentraciones conocidas en todo el intervalo de ensayos Las concentraciones de tacrolimus de estas muestras fueron comprobadas por un LC MS MS y probadas con el inmunoensayo QMS Tacrolimus Los resultados se muestran a continuaci n Concentraci n Concentraci n prevista medida ng mL ng mL mean a a m ma mese a s Ww X wem n ww m 9 mees n m m3 Ww usaras n m m Recuperaci n 96 Concentraci n medida Concentraci n prevista x 100 ID de la IA 0 muestra Recuperaci n Precisi n Se evalu la precisi n utilizando muestras de sangre completa de pacientes adicionadas y agrupadas El estudio se realiz tal como se describe en el protocolo CLSI EP5 A2 Cada muestra se ensay por duplicado cada vez dos veces diarias durante 20 d as Se calcul la SD y el de CV medios intraensayos y totales A continuaci n se muestran los resultados representativos del estudio o ap uesaaiconade A w 30 w em 02 m mues aicnades w uo o2 m oa 98 Wusasionda w mo oa ioe w 50 Muestra opacos m 32 m em 02 02 Muestra de pecieme w wa o2 xm oa 98 WesstpimeC mw ma os zm w io Comparaci n de m todos Se realizaron estudios de correlaci n para comparar el inmunoensayo QMS Tacrolimus con dos m todos LC MS MS sistema 1 y sistema 2 y e
16. de especificidad utilizando como gu a el protocolo CLSI EP7 A2 Se analiz la reactividad cruzada para los principales metabolitos disponibles de tacrolimus Tambi n se analizaron otras medicaciones administradas habitualmente con tacrolimus para determinar si estos compuestos pueden afectar a la determinaci n cuantitativa de tacrolimus mediante el inmunoensayo QMS Tacrolimus Se calcul la reactividad cruzada de los metabolitos mediante la f rmula Reactividad cruzada Concentraci n medida Concentraci n prevista x 100 Concentraci n de reactividad cruzada Reactividad cruzada con metabolitos de tacrolimus En la tabla siguiente se muestra la reactividad cruzada del inmunoensayo QMS Tacrolimus respecto a los principales metabolitos de tacrolimus Se afiadieron los compuestos analizados a muestras de sangre humana completa que conten an dos concentraciones del f rmaco tacrolimus y se analizaron en tres muestras id nticas Se calcul el porcentaje de reactividad cruzada Reac tividad cruzada 2 Concentraci n Concentraci n Concentraci n de metabolitos prevista medida ng mL ng mL ng mL Metabolitos de tacrolimus M I 13 O dimetil 7 7 9 7 M 11 0 31 0 dimetil T e al e ma i d F r ceo co M III 15 0 dimetil B 0 wo IE Recuperaci n 96 Concentraci n medida Concentraci n prevista x 100 M IV 12 hidroxi 9 5 Es co M VII 1
17. l ensayo Abbott ARCHITECT Tacrolimus En los estudios se utilizaron muestras EDTA de sangre humana completa obtenidas de pacientes con trasplante de rifi n h gado y coraz n que tomaban tacrolimus Todas las muestras analizadas proced an principalmente de pacientes adultos con un trasplante de la muestra que generalmente 9 meses A los pacientes analizados se les administr un tratamiento de f rmacos de tacrolimus solo o combinado con otros f rmacos inmunodepresores principalmente micofenolato de mofetilo MMF cido micofen lico MPA sirolimus everolimus o corticosteroides Los resultados del an lisis de regresi n Deming entre los distintos m todos se muestran en la tabla siguiente F E Coeficiente de Pendiente Intersecci n ut correlaci n IC 95 IC 95 R 1 111 0 53 de 1 084 a 1 137 de 0 31 a 0 76 0 972 1 130 0 71 de 1 092 a 1 167 de 0 42 a 1 01 0 46 1 126 0 03 de 1 071 a 1 181 de 0 63 a 0 56 0997 Intervalo de muestras QMS Tacrolimus de 1 0 a 30 8 ng mL Intervalo de muestras LC MS MS de 0 8 a 29 5 ng mL Intervalo de muestras ARCHITECT Tacrolimus de 2 4 a 28 1 ng mL Intervalo de confianza IC Gr fico de dispersi n para los resultados del OMS Tacrolimus comparado con el Gr fico de dispersi n para los resultados del OMS Tacrolimus comparado con el Abbott LC MS MS sistema 1 para muestras combinadas de trasplante de ri n h gado ARCHITECT Tacrolimus para muestras com
18. muestra diluida ofrece una sensibilidad mayor que la del ensayo que es de 1 ng mL La concentraci n obtenida deber multiplicarse entonces por el factor de diluci n manual para obtener la concentraci n final de muestra Concentraci n final de la muestra Concentraci n obtenida x Factor de diluci n manual Factor de diluci n manual Volumen de muestra Volumen de CAL A Volumen de muestra CALIBRACION El inmunoensayo QMS tracolimus debe calibrarse utilizando un m todo de calibraci n completa 6 puntos Para realizar una calibraci n completa pruebe los calibradores de QMS tracolimus A B C D E y F Solo deben utilizarse calibradores OMS Tacrolimus con el inmunoensayo OMS Tacrolimus No se puede obtener una determinaci n cuantitativa exacta de tacrolimus si no se usan los calibradores OMS Tacrolimus 10015573 en la calibraci n del inmunoensayo QMS Tacrolimus Es necesaria una calibraci n con cada nuevo n mero de lote Verificar la curva calibraci n con al menos una muestra de cada nivel de controles seg n lo dispuesto en los requisitos de control de calidad de su laboratorio Si los controles ofrecen resultados fuera de los l mites aceptables deber n adoptarse las medidas correctivas que procedan Nota Se incluye en cada kit de calibradores una tarjeta con la asignaci n de valores por calibrador Antes de utilizar un nuevo kit de calibradores compruebe los par metros qu micos para asegurarse de que las concentr
19. ogidas en tubos EDTA Siga las indicaciones de procesamiento del fabricante para todos los tubos de recogida de muestras Debe prestarse especial cuidado a la integridad de la muestra desde el momento de la recogida hasta la realizaci n del ensayo Deber an etiquetarse las muestras con la hora de la recogida de sangre y de la ltima administraci n del f rmaco e Se deben tapar y analizar las muestras en un plazo de 7 d as si se almacenan a una temperatura de 2 a 8 C o en un plazo de 6 meses si se almacenan a lt 20 C 5 0 Evitar congelar y descongelar repetidamente No inducir la formaci n de espuma en las muestras ME T La luz puede afectar a la estabilidad de las muestras Mantener las muestras m alejadas de la luz PROCEDIMIENTO Materiales proporcionados e Kit de reactivo de tacrolimus OMS REF 10015556 Materiales necesarios pero no incluidos e Calibradores OMS Tacrolimus REF 10015573 CAL A 1 x 4 mL CAL B F 1 x 2 mL cada uno e Productos con control de calidad Materiales recomendados e Controles Rap Tac CsA de MORE Diagnostics Nivel 1 280 1 4x4 mL cada uno Nivel 2 280 2 4x 4 mL cada uno Nivel 3 280 3 4 x 4 mL cada uno e Bio Rad Lyphocheck Controles inmunodepresores de sangre completa Nivel 1 274 6x 2 mL cada uno Nivel 2 275 6x 2 mL cada uno o nivel 4 277 6 x 2 mL cada uno Nivel 3 276 6 x 2 mL cada uno Nivel 5 278 6x 2 mL cada uno o minipack nivel 5 279X 5 x 2 mL cada uno ePara otros produ
20. rse medidas correctivas RESULTADOS Los resultados del inmunoensayo QMS Tacrolimus se dan en ng mL Informes de los resultados Los laboratorios deber an informar que los resultados se obtienen mediante el m todo de QMS Tacrolimus C digos de error de los resultados Algunos resultados pueden contener c digos de error de resultados Consulte el manual de instrucciones espec fico del instrumento para obtener una descripci n de los c digos de error AGES DE LOS PROCEDIMIENTOS Las concentraciones de tacrolimus en una muestra dada determinada con ensayos de distintos fabricantes puede variar como consecuencia de las diferencias en los m todos de an lisis y en la especificidad del reactivo Se recomienda un control uniforme con un ensayo e Losinmunoensayos no son espec ficos ni de reactividad cruzada con metabolitos Como consecuencia los inmunoensayos pueden sobreestimar la concentraci n de tacrolimus v ase la secci n de comparaci n de m todos Cuando la eliminaci n de tacrolimus es reducida se pueden acumular metabolitos en mayor medida y provocar una sobreestimaci n a n mayor En estos casos se deber a plantear el uso de un ensayo espec fico por ejemplo el m todo cromatogr fico e Pueden aparecer anticuerpos heter filos interferentes con poca frecuencia en la poblaci n Estos anticuerpos pueden conducir a resultados err neos incluidos resultados err neamente bajos debidos a la aglutinaci n de reactivo
21. s necesarias para la manipulaci n de todos los reactivos de laboratorio e No mezclar materiales de kits con diferentes n meros de lote e No utilizar los kit de reactivos m s all de su fecha de caducidad LN ATENCI N Se han llevado a cabo an lisis en los materiales de origen humano para comprobar la existencia de HIV1 y 2 Hepatitis B y Hepatitis C seg n un m todo aprobado por la FDA y los resultados fueron negativos No obstante dado que ning n m todo puede descartar con absoluta certeza el riesgo de posible infecci n debe manipularse el material con el mismo cuidado con que se manipula la muestra de paciente En caso de exposici n deben seguirse las directivas de los responsables sanitarios y AN ATENCI N Los reactivos incluidos con el inmunoensayo QMS Tacrolimus conten an menos de un 0 1 de azida s dica Ev tese el contacto con piel y membranas mucosas Aclarar las zonas afectadas con abundante agua Buscar asistencia m dica inmediata si se ingieren reactivos o si han entrado en contacto con los ojos La azida s dica puede reaccionar con tuber as de plomo o de cobre formado azidas met licas potencialmente explosivas Al desechar estos reactivos se debe aclarar siempre con un gran volumen de agua para evitar la acumulaci n de azidas Limpiar las superficies met licas expuestas con una soluci n de hidr xido s dico al 1096 RECOGIDA Y MANIPULACION DE MUESTRAS e Solo pueden utilizarse muestras de sangre completa rec
22. so e nvi rtase varias veces antes del uso para evitar que se formen burbujas e Retirar las burbujas de aire que haya en el frasco de reactivo O como alternativa deje reposar el reactivo a la temperatura de conservaci n adecuada para que las burbujas se disipen Para minimizar la p rdida de volumen de l quido no utilice pipetas de transferencia para quitar las burbujas e Cuando el frasco de reactivo 0 se gaste reemplazar ambos reactivos y comprobar la calibraci n con al menos una muestra de cada nivel de controles conforme a lo dispuesto en los requisitos de control de calidad de su laboratorio Si los controles dan como resultado valores fuera de los l mites aceptables puede que se necesite recalibrar e Consultar la hoja de par metros del sistema para el ensayo espec fica del analizador para obtener informaci n sobre la estabilidad del reactivo utilizado y tambi n informaci n espec fica del sistema AN ATENCION Las burbujas de reactivo pueden interferir en la adecuada detecci n del nivel de reactivo en el frasco provocando una succi n insuficiente de reactivo que podr a afectar a los resultados 8 C 5 E i Los reactivos sin abrir son estables hasta su fecha de caducidad si se almacenan a una temperatura de entre 2 y 8 C No congelar los reactivos ni exponerlos a temperaturas superiores a 32 C AN ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES e Solo para uso en diagn stico in vitro Ejercitar las precauciones habituale
23. tener actualizaciones de prospectos visite www thermoscientific com diagnostics 10015557 2 ES Thermo 2013 07 SCIENTIFIC
24. tman DG Statistical methods for assessing agreement between two methods of clinical measurement Lancet 327 8476 1986 307 310 18 McEnroe RJ Burritt MF Powers DM et al Clinical and Laboratory Standards Institute Interference Testing in Clinical Chemistry Approved Guideline Second Edition CLSI document EP7 A2 ISBN 1 56238 584 4 Clinical and Laboratory Standards Institute Wayne PA 2005 19 Mancinelli LM Frassetto L Floren LC Dressler D Carrier S Bekersky l Benet L and Christians U The pharmacokinetics and metabolic disposition of tacrolimus A comparison across ethnic groups Clin Pharmacol Ther 2001 69 24 31 tad Fabricante Representante autorizado en Microgenics Corporation la U E 46360 Fremont Blvd C Microgenics GmbH Fremont CA 94538 6406 USA Spitalhofstrasse 94 US Toll Free 800 626 0690 D 94032 Passau Germany Tel 49 0 851 886 89 0 Servicio de atenci n al cliente Fax 49 0 851 886 89 10 N mero gratuito en EE UU 1 800 232 3342 Otros pa ses P nase en contacto con el representante local de Microgenics Bio Rad Lyphocheck es una marca comercial registrada de Bio Rad MORE Diagnostics Controls son propieadad de MORE Diagnostics Inc ARCHITECT es una marca comercial registrada de Abbott Laboratories Todas las dem s marcas son propiedad de Thermo Fisher Scientific Inc y de sus subsidiarias O 2013 Thermo Fisher Scientific Inc Todos los derechos reservados CR Para ob
25. zada y por lo tanto se deber an establecer para cada prueba comercial Los valores obtenidos mediante diferentes ensayos no pueden usarse de manera intercambiable dadas las diferencias metodol gicas y la reactividad cruzada ni tampoco deben emplearse factores de correcci n Se recomienda utilizar un ensayo de manera individual para cada paciente CARACTERISTICAS ESPECIALES DE FUNCIONAMIENTO A continuaci n se muestran resultados representativos del procedimiento del ensayo obtenidos en un analizador autom tico de la bioqu mica cl nica disponible comercialmente que utiliza un an lisis turbidim trico cuantitativo A menos que se indique lo contrario todos los ensayos han sido realizados seg n el procedimiento de ensayo aqu incluido y utilizando el analizador Beckman AU680 Los resultados obtenidos laboratorios individuales pueden diferir de estos datos Para obtener m s informaci n sobre el funcionamiento concreto de un analizador consultar el protocolo de aplicaci n espec fico del analizador o pedir ayuda al departamento t cnico de Thermo Fisher Scientific Intervalo recogido en los informes El intervalo recogido en los informes para el inmunoensayo OMS Tacrolimus es de 1 ng mL valor m nimo que debe recogerse en los informes dependiendo de la sensibilidad funcional a 30 ng mL tacrolimus Sensibilidad funcional L mite de cuantificaci n La sensibilidad funcional representa la concentraci n m s baja de tacrolimus que
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