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Manual de instrucciones – BioSpectrometer fluorescence

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1. Imag 3 1 Vista frontal y posterior md O un A U N Indicador 7 Conexi n a la red Compartimento de la cubeta 8 Puerto USB para conexi n de un ordenador PC Tapa del compartimento de la cubeta Puerto USB para memoria USB e impresora CONE Asa Para prespra 10 Conector hembra de Ethernet Interruptor de red 11 El Portaf sibles ementos de contro La placa de caracter sticas se encuentra atr s a la izquierda en el lado inferior del equipo 3 2 Alcance de suministro N mero Descripci n 1 BioSpectrometer fluorescence 1 Cable de alimentaci n 4 4 UVette Cubeta de pl stico original de Eppendorf embalada individualmente PCR clean Protein free 1 Instrucciones de uso en varios idiomas 15 16 Descripci n del producto Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 3 3 Caracteristicas del producto El BioSpectrometer fluorescence re ne dos procesos de medici n espectrosc picos la espectrofotometr a y la fluorimetr a Puede realizar mediciones espectrofotom tricas en el rango UV VIS de 200 nm a 830 nm as como mediciones fluorim tricas en dos combinaciones definidas de longitudes de onda en la parte visible del espectro excitaci n 470 nm emisi n 520 nm y excitaci n 470 nm emisi n 560 nm Est previsto para la medici n de l quidos en cubetas para la investigaci n y el desarrollo en los campos de la biolog a molecular biotecnolog
2. Sean 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 0 800 A Raster 100 nm 0 600 Min A Abs 0 400 0 050 0 200 Ar on 0 000 gt keys 230 260 20 320 Nm A curso j 5 J Peak table II Save Cancel ELELE process results peak detect Scan 2010 07 09 16 01 35 Abs A 03 ID 0 800 A Raster 20 nm 0 600 Min A Abs 0400 0 400 0 200 0 000 N 230 260 290 320 350 Move A curso A and Y keys Scan 2010 07 09 16 01 35 A Raster 20 nm Min A Abs 0 050 230 260 290 320 30 em ve cursor A and Y keys LC JE Peak tabie save J Cancel A Raster 100 nm Mind A Abs 0 050 El pico no es detectado porque la trama A es demasiado grande las extinciones en el borde izquierdo de la trama son m s grandes que la extinci n del pico A Raster 20 nm Mind A Abs 0 200 El pico no es detectado porque el valor predeterminado para Mind A Abs es demasiado grande La diferencia de la extinci n del pico y la extinci n m s baja en la trama es inferior a 0 2 A A Raster 20 nm Mind A Abs 0 050 El pico es detectado 6 5 7 print export M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 59 Espanol ES En el ltimo paso de m todo opcional puede reunir paquetes de datos para todas las muestras o para muestras seleccionadas de una serie de medidas para e Imprimirlos en la impresora Exportarlos a una memoria USB
3. Par metros Entrada Explicaci n Formula d ENtrada de valores S lo para el grupo de m todos Dual wavelength Valor para d en la Valor para d en las f rmulas a A1 b A2 c d y a A1 f rmula de evaluaci n b A2 c d L mite m x 5 digitos incluyendo el punto decimal Calculation Selecci n Procedimiento de evaluaci n para el c lculo de la Factor Standard concentraci n de la muestra a partir de la extinci n medida Factor Entrada de datos Factor para la conversi n de valores de extinci n RFU en Factor concentraci n L mite m x 6 digitos En los siguientes grupos de m todos tambi n es posible incluyendo el punto introducir factores negativos Dual wavelength Factor decimal En el grupo de m todos Dye labels los factores no se introducen individualmente durante los pasos del m todo Los factores se importan autom ticamente de la funci n General Method Parameters a trav s de la simple selecci n de biomol cula y colorante Protein Selecci n S lo para los grupos de m todos Dye labels y Proteins direct Lista de tipos de UV proteina que est n En la selecci n de la prote na tambi n se importa de la funci n incluidos en la funci n General Method Parameters Proteins el all programado General Method par metro correspondiente Factor Parameters Proteins Standards Entrada de valores N mero de las diferentes concentraciones patr n para la N mero de soluciones evaluaci n con
4. o oo 108 Informaci n para pedidos 0 cece ccc cc eee eee eee ee ee ee ee ee eee eee eens 109 Gertificad s 332222 ew A See ee ba 111 ndice Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Instrucciones de empleo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 1 Instrucciones de empleo 1 1 Utilizaci n de estas instrucciones Lea este manual de instrucciones completamente antes de que ponga en funcionamiento el equipo por primera vez Si fuera necesario lea tambi n las instrucciones de uso de los accesorios Este manual de instrucciones es parte del producto Cons rvelo en un lugar accesible Incluya siempre este manual de instrucciones cuando entregue el equipo a terceros Encontrar la versi n actual del manual de instrucciones en otros idiomas en nuestra p gina de Internet www eppendorf com 1 2 S mbolos de peligro y niveles de peligro Las indicaciones de seguridad en este manual tienen los siguientes s mbolos de peligro y niveles de peligro 1 2 1 S mbolos de peligro Electrocuci n Explosi n Sustancias t xicas Punto de peligro ee Da os materiales 1 2 2 Niveles de peligro PELIGRO Causar lesiones graves e incluso la muerte ADVERTENCIA Puede causar lesiones graves e incluso la muerte PRECAUCI N Puede causar lesiones ligeras a medianas ATENCI N Puede causar da os materiales Instrucciones de empleo Epp
5. gt Medir nuevamente bajo consideraci n de las posibles causas Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Soluci n de problemas 91 Espanol ES Sintoma mensaje El resultado tiene m s de 6 posiciones predecimales Causa e Concentraci n de muestra muy elevada La unidad de concentraci n no coincide con el rango esperado de la concentraci n de la muestra Ayuda Diluir la muestra y medir nuevamente Modificar la unidad de concentraci n par metro Unit y medir nuevamente El resultado se encuentra por m s de 5 fuera del rango de las concentraciones de soluci n patr n e En m todos con evaluaci n v a curvas de soluci n patr n m todo de evaluaci n no lineal El resultado de la muestra se encuentra por m s de 5 fuera del rango de las concentraciones de soluci n patr n Medir la muestra nuevamente bajo condiciones en las que el resultado se encuentre dentro del rango de las concentraciones de soluci n patr n diluir la muestra modificar las concentraciones de soluci n patr n y volver a medir e El c lculo no es posible ya que se est dividiendo entre cero El valor de extinci n es cero e Error en el c lculo Divisi n entre cero e En la evaluaci n se tuvo que dividir entre un resultado de extinci n con el valor cero Esto no es permisible matem ticamente Ejemplos c lculo de un factor en la calibraci n de punto final c l
6. Evite grandes fluctuaciones de temperatura gt Limpie el compartimento de la cubeta Elimine las sustancias perturbadoras Si no es posible eliminar las sustancias perturbadoras no se puede utilizar la fluorimetr a como m todo de medici n Cierre la cubierta del compartimento de la cubeta antes de la medici n Soluci n de problemas 84 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Error Los resultados de medici n son incorrectos Causa posible e M todo programado de forma err nea e Soluci n patr n no preparada correctamente e La extinci n del reactivo deriva e La cubeta no est posicionada correctamente Soluci n Cerci rese de que los par metros del m todo hayan sido introducidos correctamente Cerci rese de que se utilice la soluci n patr n correcta y que la soluci n de medici n sea preparada correctamente para la soluci n patr n En una extinci n del reactivo inestable y m todos de punto final en la medici n de una larga serie de muestras debe medir el blanco del reactivo no solamente al comienzo sino tambi n durante la serie de muestras En caso de deriva del valor del blanco el reactivo no es apropiado para mediciones libres de errores y debe sustituirse por un reactivo nuevo Posicione la cubeta en el compartimento de tal forma que las ventanas pticas se alen en direcci n del recorrido ptico Haz de luz de la f
7. Factor 10 pMol pL Corr A260 19 0 Corr A280 0 Keyboard JL abe l J ok J Cancel Teclas programables e OK guardar la entrada y retornar a la selecci n del grupo de par metros e Cancel retornar a la selecci n del grupo de par metros sin ninguna modificaci n Al programar un m todo de los grupos de m todos Dye labels o Proteins direct UV puede acceder a las entradas hechas en General Method Parameter Seleccione el nombre del colorante para importar el grupo de par metros correspondiente al P 1 3 z z r AP Jomm y aus programa de m todos A trav s de la selecci n Unit pg mL w A z u 3 pen e ane edit en el parametro Nucleic acid tambi n Nucleic acid ssDNA Y ot Sue puede acceder directamente a la funci n General Decimal places i Method Parameter y visualizar o editar all los Dye 1 Newdyelv par metros Correct A260 1 a Correct A280 1 m II Page dn Save Save As Cancel Tab 7 2 Par metros en General Method Parameter Par metros Explicaci n Prote nas Estos par metros son cargados en los par metros de m todo al seleccionar una prote na durante la programaci n de un m todo del grupo Dye labels o Proteins direct UV e Protein name Aparte del nombre y de la longitud de onda tambi n puede introducir los Factor siguientes datos para definir el factor para el c lculo de la concentraci n a e Ao 1 partir de la extinci n Ext coeff Fac
8. Si se eval a con m s de un est ndar pueden seleccionarse con la Curve fit en el paso de m todos measure standards new distintos procedimientos de evaluaci n para la curva recta est ndar ver Evaluaci n con curva l nea recta de soluci n patr n en p g 101 El c lculo del resultado de la diluci n se realiza como en los m todos fotom tricos ver Diluci n en p g 102 Informaci n para pedidos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 109 Espanol ES 13 Informacion para pedidos N de pedido Internacional 6135 000 009 N de pedido Norteamerica Descripci n Eppendorf BioSpectrometer basic 230 V 50 60 Hz conector de la red de distribuci n Europa 6135 000 017 6135000017 120 V 50 60 Hz conector de la red de distribuci n Am rica Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 6137 000 006 u 230 V 50 60 Hz conector de la red de distribuci n Europa 6137 000 014 6137000014 120 V 50 60 Hz conector de la red de distribuci n Am rica Juego de filtros de referencia BioSpectrometer fluorescence 6137 928 009 6137928009 juego de filtros para verificar la exactitud fotom trica y el error sistem tico de longitudes de onda seg n NIST y para verificar la precisi n fluorim trica error aleatorio y la linealidad Thermal Printer DPU S445 Incluye fuente de alimentaci n y cable de impresora 6135 011 000 230 V EU 6135 010 004 6135010004 115 V 110V USA JP 6135 012 007 2
9. Con las teclas programables Next gt y lt Back navega entre los pasos del m todo Con Abort y Finish puede cancelar y o finalizar la secuencia de medici n El nombre de esta tecla programable cambia de Abortl a Finish despu s de la primera medici n de una muestra Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 5 1 check parameters Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off Edit mote Page ur llas e Cuvette 10 mm Y Page 1 2 Wavelength 1595 nm Unit Hg mL y Calculation Standard Y Standards 6 Replicates 2 Decimal places 10 Autoprint m Kumber of raoui L Jhease up Jl Page an J _ Save Jl Save As Cancel GELAG check parameters save as Enter the name and storage location Method name Bradford_1 Target drectory AEMOMOSIM MONO OFavorites MyMethods v Teclas programables e Page dn y Page up para cambiar de p gina entre las 1 a 3 paginas de par metros e Edit conmutar al modo de edici n de par metros Modo de edici n de par metros Los par metros modificados est n marcados con un asterisco rojo mientras la modificaci n a n no ha sido guardada Teclas programables e Save y Save as guardar modificaciones Con Save as tiene que darle un nombre nuevo al m todo Eso siempre es el caso cuando modifica los m todos del gru
10. Quadratical regression Conc 924 41 A Conc Abs pg mL 5 rm 00 0700 134 52 A Xx 0 709 123 14 0 927 Coefficient of Standard 4 750 0 928 determination X 0 928 R 0 9970 1 047 Con la tecla sample mide sus muestras una tras Bradtord a MEE SUS measure samples ALA LATE Bradtord 2010 11 25 16 28 23 otra E Los resultados de blancos permanecen E a almacenados para una serie de medici n Una 0 900 213 nueva medici n de un blanco sin embargo se 0 393 Ass puede realizar en cualquier momento En la pai R ilustraci n aqu mostrada de una secuencia de medici n con evaluaci n via curva est ndar se muestra el gr fico de la evaluaci n adem s del 0 000 resultado de la muestra 0 300 600 900 1200 ml f Conc 213 Abs 0 393 a Dilution Edit ID Data Finish Next gt 30 Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 5 3 2 5 Finalizaci n de un m todo Bradford measure standards measure samples 3 samples igi go new series Braditord 2010 11 25 16 28 23 Abs A 15 an x ID oe 797 vom 0 929 Au 0 600 0 300 OA a L H a amper k 2 300 600 900 1200er ml NR A and Y keys Dilution Jl Edit 1D Data Finish lt Back Next gt 5 3 2 6 Opcional repasar resultados dsDNA measure samples Print amp export now series ds DNA 2010 07 16 16 32 54 A
11. Dye xxx F NA Unidad pmol ug ADN y o ARN Any LO Dye xxx 2 F NA FOI Ayyy extinci n del colorante Axxx extinci n del cido nucleico MM x masa molar media de los nucle tidos 330 g mol Fra factor para el c lculo del cido nucleico Epye Coeficiente de extinci n para el colorante unidad cm1M 1 M todo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 107 Espanol ES 12 6 3 Conversi n a cantidades de colorante El c lculo de la cantidad masa de colorante en todo el volumen de la muestra se realiza en el paso de m todo process results More calculations M CxV total M cantidad total calculada masa del colorante en el tubo de muestra Unidad pmol C concentraci n del colorante calculada a partir de la medici n Unidad pmol uL VP total volumen total de la muestra en el tubo de muestra es introducido por el usuario en More calculations Unidad uL 12 7 Dual wavelength Para m todos del grupo Dual Wavelength se pueden compensar las extinciones que se midieron en dos longitudes de onda antes de que la extinci n calculada sea incorporada en la siguiente evaluaci n con factor o soluci n patr n Para determinar la extinci n calculada es posible definir una evaluaci n mediante divisi n o mediante sustracci n en los par metros ae xc d bx A calc A ax A bx A xc d calc Az Az extinciones medidas a b c d
12. Exportarlos directamente a un ordenador v a cable USB Exportarlos por e mail as0NA feasure samples process resuns HANEESH om sores Seleccionar los paquetes de datos ds DNA 2015 06 04 10 16 30 Data packets Navegue con las teclas de cursor y confirme con enter Samples di Format QOData OXLS Seleccionar formato seh ror e XLS exportar o imprimir como tabla de Excel Graph data XLS only OXLS amp PDF PDE i see PDE exportar o imprimir com f Method parara P a GParameters int Teclas programables e Print iniciar una impresi n e Export iniciar una exportaci n Print Export Samples Finish lt Back Next gt Sample seleccionar resultados de muestras individuales Seleccionar los paquetes de datos Results Datos de resultado primarios no seleccionables porque siempre son transferidos Data Datos de resultado adicionales que se muestran durante la medici n en los indicadores de resultados al pulsar la tecla programable Datal Graph Espectro de longitud de onda de extinci n Graph data Los datos num ricos b sicos para el gr fico export only solo para la exportaci n no disponible para la impresi n Parameters Par metros de los m todos Standards Results Datos de resultados de la evaluaci n de soluci n patr n Standards Graph Solo en evaluaciones de soluci n patr n con varias soluciones patr n gr fico de extinci
13. Extinci n concentraci n escaneo espectro de longitudes de onda de extinci n Otros datos adicionales dependientes del m todo ratio FOI extinciones de fondo Fluorimetria RFU concentraci n Indicador Pantalla TFT de 5 7 VGA Idiomas de la guia del operador Ingl s franc s espa ol italiano alem n Interfaces USB Master para memoria USB e impresora t rmica DPU S445 USB Slave para la conexi n a un ordenador Interfaz serial RS 232 para la impresora t rmica DPU 414 Interfaz Ethernet RJ45 para conexi n con una red Los equipos conectados tienen que cumplir los requisitos de seguridad seg n la norma IEC 60950 1 Datos tecnicos 98 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 11 7 Par metros de aplicaci n M todos M todos preprogramados y libremente programables para todos los procedimientos de medici n y evaluaci n e Mediciones de extinci n en una o varias longitudes de onda escaneos e Mediciones de fluorescencia a 520 nm o 560 nm e cidos nucleicos y prote nas OD600 m todos de tinci n medici n paralela de biomol cula y marca de colorante e M todos con evaluaci n via factor soluci n patr n y serie est ndar e M todo de dos longitudes de onda con evaluaci n por subtracci n y divisi n Evaluaci n en funci n del m todo Extinci n concentraci n v a factor y soluci n patr n RFU concentraci n v a soluci n patr n Concentraci n
14. F factor calculado Cs concentraci n de la soluci n patr n introducida como par metro As extinci n medida de la soluci n patr n Si se program medici n m ltiple 2 6 3 r plicas para la soluci n patr n se forma el promedio de las extinciones medidas de las r plicas y se utiliza como As 12 3 Evaluaci n con curva l nea recta de soluci n patr n Si se realiza la evaluaci n con m s de una soluci n patr n es posible seleccionar con Curve fit en el paso de m todo measure standards new los siguientes m todos de evaluaci n para la curva l nea recta de soluci n patr n M todo de evaluaci n Descripci n M nimo n mero de puntos est ndar requerido linear interpolation Conexi n lineal de punto a punto M nimo 2 soluciones patr n en el gr fico de concentraci n y extinci n de la evaluaci n de soluci n patr n linear regression Regresi n polinomial para M nimo 3 soluciones patr n polinomio de primer grado u i i id i i ini uci In adratical regression Regresi n polinomial para Minimo 4 soluciones patr n polinomio de segundo grado cubical regression Regresi n polinomial para Minimo 5 soluciones patr n polinomio de tercer grado spline interpolation Interpolaci n mediante splines Minimo 3 soluciones patr n c bicos naturales Para m todos de regresi n se puede seleccionar adem s que la l nea recta de regresi n curva de regresi n pase por el punt
15. cidos nucleicos cantidades totales tras introducci n de un como biomol cula volumen Peak detection Detectar picos Peak en espectros de e Scan longitudes de onda de extinci ns dsDNA a measure samples print amp export new series dsDNA 2010 07 16 16 32 54 25 2 aim 0 504 a 0 270 230 260 290 320 Alam Z Mi Zoom Jove Ca oaa rm lt Back J _ Next gt dsDNA 2010 07 16 16 32 54 Abs A 01 ID 0 460 0 00 25 2m 0 504 Aso 0 340 A260 A280 1 86 0 280 0 220 Change image section H and Y keys 238 246 270 za Move A cursor d and gt keys os Iran tos Freier seve J carca Would you like to apply the change to all samples in the dsDNA 2010 07 02 14 series of measurements Yes Apply to all samples No Apply only to the current sample Jl J J Yes No Cancel M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 55 Espanol ES Las opciones para el retoque se ofrecen en las dos teclas programables de la izquierda En este ejemplo Zoom y More Calculations Despu s de las modificaciones puede salir del modo actual con las dos teclas programables de la derecha e Save guardar la modificaci n y retornar al paso de m todo process results e Cancel cancelar y retornar al paso de m todo process results Despu s de guardar las modificaciones puede transferirlas con Yes a todas las muestras de la serie
16. n Fusibles T 2 5 A 250 V 5 mm x 20 mm 2 unidades 11 2 Condiciones del entorno Funcionamiento Temperatura ambiente 15 C a 35 C Humedad relativa 25 a 70 Presi n atmosf rica 86 kPa a 106 kPa Presi n atmosf rica Utilizaci n hasta una altura de 2 000 m sobre el nivel del mar Proteger contra la luz solar directa 11 3 Peso dimensiones Peso 5 4 kg Dimensiones Ancho 295 mm Profundidad 400 mm Altura 150 mm Espacio requerido Ancho 500 mm con impresora t rmica 750 mm Profundidad 500 mm 96 Datos tecnicos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 11 4 Propiedades fotom tricas Principio de medici n Espectrofot metro de absorci n de un solo haz con haz de referencia Fuente de luz L mpara de destello de xen n Descomposici n espectral Rejilla c ncava hologr fica con correcci n de aberraciones Receptor de radiaci n Matriz de fotodiodos CMOS Longitudes de onda 200 nm a 830 nm Selecci n de la longitud de onda En funci n del m todo libremente seleccionable Ancho de banda espectral lt 4nm Ancho de paso m s peque o 1 nm Error de medici n sistem tico de 1 nm la longitud de onda Error de medici n aleatorio de la lt 0 5 nm longitud de onda Rango de medici n fotom trico 0Aa3 0A con 260 nm Exactitud de lectura AA 0 001 Error de
17. E mail address confirme con enter Se abre una ventana en la que pueden editarse las direcciones de e mail email example com e Edit editar direcci n de e mail e New crear nueva direcci n de e mail e Delete borrar direcci n de e mail Edit New Delete OK Inicio de impresi n Los datos pueden imprimirse a trav s de una impresora en la red o una impresora USB conectada i Cuando el equipo est conectado a una red se detectan y muestran autom ticamente todas las impresoras compatibles en la red Si no hay ninguna conexi n con la red solo se puede seleccionar una impresora USB conectada B 2 Inicie con la impresi n de los datos con Print dh HP Color LaserJet 2605 Seiko DPU S445 Seiko DPU 414 IP address 192 168 20 10 Refresh Print Cancel 62 M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 5 8 Finalizar la serie de mediciones Despu s del ltimo paso de m todo print amp export puede iniciar una nueva serie de mediciones con el m todo seleccionado o seleccionar un nuevo m todo Finalizar la serie de mediciones e iniciar una nueva serie de mediciones Albumin A 280 Tecla programable Next gt llamar el paso de Albumin A 280 2010 11 19 18 32 05 m todo new series Tecla programable New llamar el paso de m todo measure samples e iniciar una nueva serie de mediciones i Info New JC J Finish lt B
18. El espectro de extinci n muestra en la longitud de onda de medici n un pico estrecho e La medici n no se realiza en el m ximo sino en el flanco de un pico Por ello verifique la exactitud del m todo mediante medici n de soluciones patr n En la fluorometr a no se pueden comparar los valores RFU de un equipo a otro sino que siempre se tienen que relacionar a soluciones patr n con una fluorescencia o concentraci n conocida 12 1 Valores de extinci n Los valores de extinci n se muestran como Ayxxy las XXX representan la longitud de onda Estas indicaciones equivalen siempre a los valores directamente medidos es decir sin correcciones que se incorporan en la posterior evaluaci n como p ej correcciones para espesores de capa pticos de la cubeta o correcciones de fondo 12 1 1 Valor de blanco Todos los valores de extinci n se refieren siempre al blanco medido la ltima vez Por ello una medici n del blanco es obligatoria al comienzo de cada serie de mediciones y tambi n es posible en cualquier momento durante una serie de mediciones En el caso ideal la medici n del blanco deber a poder compensar todas las posibilidades de influencia sobre el valor de extinci n de la soluci n de medici n Por ello el blanco se deber a medir con la misma soluci n tamp n utilizada para la medici n de la muestra as como en la misma cubeta como el valor de la muestra a menos que las cubetas utilizadas para la medici n del blan
19. de mediciones 56 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 5 6 process results opciones Zoom Presione la tecla programable Zoom y seleccione una de las siguientes variantes CONTA process results zoom Ss DNA 2010 07 16 16 32 54 Abs A 01 ID 0 460 0 400 25 Prater 0 504 Axo 0 340 0 280 0 220 238 248 254 2B2 270 278 spectra tree Jheset zoom Save Cancel dsDNA 2010 07 16 16 32 54 Abs A A 0 450 0 360 25 ER 0 504 Aso 0 270 0 180 0 090 0 000 238 246 254 282 270 278 Crear Jereo ree jeso zoon save J canca 45 DNA 2010 07 16 16 3254 i000 01 0 550 ID e 25 2v0m 0 370 0 504 Ayo 0 280 A260 A280 1 86 0 190 10 100 235 248 257 266 275 leal nax and and f o confirm PEER PEEN P SE ST ma Variante spectra Teclas de cursor y mover el cursor de longitud de onda Este determina el centro para el zoom en el eje X e Teclas de cursor y ampliar y reducir gradualmente la secci n mostrada del eje X seg n el procedimiento SpectraZoom La secci n mostrada del eje Y es adaptada autom ticamente en cada paso de modo que el m ximo y el m nimo de los datos representados aprovechan la secci n ptimamente Variante spectra 0 Se corresponde con la variante spectral con una excepci n El l mite inferior de la secci n representa
20. esta variante no es seleccionable Exportar al ordenador guardar datos en un ordenador e Exportar v a e mail enviar los datos a una direcci n de e mail J A I I Export 1 Cancel Exportaci n a una memoria USB 1 Inserte una memoria USB formateada con FAT32 en el puerto USB 4 ver Ilustraci n general en p g 15 2 Inicie con Export la Exportaci n a un soporte de memoria externo Exportaci n a un ordenador Requisitos del ordenador PC sistema operativo Windows XP SP2 o una versi n superior 1 Conecte el equipo al ordenador v a cable USB utilizando el puerto USB 8 ver Ilustraci n general en p g 15 2 Cerci rese de que en caso de repetir una exportaci n los datos exportados anteriormente hayan sido almacenados en el disco duro del ordenador ya que si no ser an sobreescritos por la nueva exportaci n de datos Inicie con Export la Exportaci n al ordenador w 4 El paquete de datos exportado es mostrado en su ordenador como soporte de datos intercambiable con el nombre eppendorf Abra el archivo en esta unidad y gu rdelo en el disco duro Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 61 Espanol ES Exportaci n a una direcci n de e mail 1 Seleccione una direcci n de e mail de la lista o seleccione Edit para crear una nueva direcci n de e mail 2 Inicie con Export el Env o a una direcci n de e mail ies e Seleccione Edit de la lista desplegable y
21. medici n aleatorio del fot metro lt 0 002conA 0 lt 0 005 0 5 conA 1 Error de medici n sistem tico del fot metro 1 conA 1 Porcentaje de destellos par sitos lt 0 05 11 5 Fluorimeter Principio de medici n Fluor metro de filtro confocal con haz de referencia Fuente de luz LED Descomposici n espectral Estructura de filtros dicroicos y de paso largo Receptor de radiaciones Fotodiodo Longitud de onda de excitaci n 470 nm Ancho de banda 25 nm Longitud de onda de emisi n 520 nm Ancho de banda 15 nm Longitud de onda de emisi n II 560 nm Ancho de banda 40 nm Campo de medida De 0 5 nM a 1 000 nM de fluoresce na longitud de onda de emisi n 520 nm Error de medici n aleatorio del fluorimetro 2 a 1 nM de fluoresceina longitud de onda de emisi n 520 nm Datos t cnicos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 97 Espanol ES 11 6 Otros par metros t cnicos Material de las cubetas Para mediciones en el rango UV Vidrio de s lice o pl stico transparente a la luz UV UVette de Eppendorf 220 nm a 1600 nm Para mediciones en el rango visible Vidrio o pl stico Compartimento de la cubeta 12 5 mm x 12 5 mm no calefactado Altura total de las cubetas Min 36 mm Altura del haz de luz en la cubeta 8 5 mm Teclado 22 teclas de membrana 6 teclas de membrana como teclas programables Emisi n de resultados
22. n como regresi n lineal Curve fit o regresi n no lineal e Indicaci n gr fica y tabular de los resultados est ndar e Es posible usar la ltima evaluaci n est ndar guardada e Hay un m todo preprogramado para la evaluaci n con curva de calibraci n 6 4 Par metros de m todo En este cap tulo se explican los par metros para la programaci n de los m todos El orden de los par metros as como es indicado en el equipo puede variar ligeramente en unos pocos m todos en comparaci n con el orden en la tabla para representar los par metros en la pantalla de una manera m s clara La tabla representa la totalidad de los par metros que est n disponibles para los diferentes m todos Para cada m todo solamente se requiere una peque a parte de estos par metros que son representados en la pantalla Par metros Entrada Explicaci n Cubeta Selecci n Recorrido ptico de la cubeta Los valores de extinci n siempre 1015121110 510 2 son convertidos autom ticamente por el equipo a un espesor 0 1 mm de capa de 10 mm de una cubeta est ndar ver Valores de extinci n en p g 99 Por ello factores como 50 para el c lculo de concentraciones de dsDNA no tienen que ser modificados por usted cuando modifique el par metro Cuvette No of Entrada de valores S lo para el grupo de m todos Multi A wavelengths Rango 2 a 6 N mero de las longitudes de onda en las que se debe medir Wavelength Entrada de valores Longi
23. n de la unidad de fluorescencia Functions Main Groups Sub Groups Functions B Fluorescence unit 2 Perform selftest Fluorescence unit calibration i Wavelength Ratio CV 520 nm 0 994 0 2 560 nm 0 979 0 2 Calibration completed Measure OK Coloque el filtro F1 en el compartimento de la cubeta Pulse la tecla programable Measure El equipo mide el filtro de prueba 15 veces en 2 longitudes de onda de emisi n Despu s de la medicion el indicador muestra 2 valores caracteristicos Ratio como medida para el ajuste correcto y CV como medida para el ruido Compare los valores caracteristicos con los valores de la tabla suministrada En caso de que los valores medidos no coincidan con el margen de valores permisible dir jase al servicio t cnico de Eppendorf 80 Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 8 3 3 Autocomprobaci n del equipo Puede ajustar la frecuencia de la autocomprobaci n duraci n aprox 1 minuto por medio de la funci n Device settings ver Device Settings en p g 68 El ajuste de f brica para el Intervalo de autocomprobaci n es semanalmente En la autocomprobaci n se comprueban los siguientes puntos Comprobaci n del detector Determinaci n del error de medici n aleatorio en todo el espectro disponible Comprobaci n de la fuente de luz Comprobaci n de la energ a m ximamente disponible de la fuente de luz y de la calidad de
24. o como la TrayCell Hellma pueden tener un blanco de hasta aprox A 1 El campo de medida fotom trico disponible es reducido por este valor Puede estimar el blanco de la cubeta si mide la cubeta llena de agua desmineralizada como muestra contra el compartimento de cubeta vac o como blanco El blanco de la Eppendorf uCuvette G1 0 se puede despreciar aprox A 0 Fluorimetr a una fluorescencia propia elevada de la cubeta t pica en las cubetas de pl stico puede limitar el rango de medici n disponible e Elimine la soluci n de medici n completamente despu s de la medici n y antes de que eche la siguiente soluci n de medici n para minimizar la contaminaci n por arrastre Si a causa de altas diferencias de concentraciones se espera que haya contaminaci n por arrastre de una muestra a la siguiente lave la cubeta entre las mediciones e En caso de diferencias de temperatura entre la l mpara y el entorno puede producirse una deriva fotom trica Por ello tiene que esperar a que un equipo proveniente de un entorno m s fr o alcance la temperatura ambiente Evite cambios de temperatura bruscos Realice una nueva medici n de blancos en caso de series de medici n prolongadas o en caso de mediciones despu s de un per odo de tiempo prolongado Manejo 32 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 33 Espanol ES 6 Metodos 6 1 Selecci n del m todo Los m todos y
25. resultado se encuentra en el centro iz de la pantalla a ha e Adem s del resultado tambi n se muestra el valor f a de extinci n que sirve de base de forma mas oO e00 900 120600 arm pequena a and Y Dilution Edit 1D Finish lt Back Next gt Otros datos e arriba a la derecha 1ra l nea N mero de muestra es un n mero consecutivo y es puesto a 1 para cada serie de mediciones nueva Diluci n de la muestra si es que se ha indicado e arriba a la derecha 2da linea Identificaci n de la muestra 1D si es que se ha indicado e arriba a la izquierda Nombre del archivo bajo el cual los datos son exportados como archivo Excel en el paso de m todo print and export ver en p g 59 Teclas programables e Dilution introducir la diluci n de la muestra Edit ID introducir la identificaci n de la muestra e Data indicar datos de resultados adicionales no en todos los m todos e Finish finalizar la serie de mediciones y retornar a la selecci n de m todos O Los valores de extinci n siempre se corresponden con los valores directamente medidos El factor de diluci n o de cubeta as como las extinciones de fondo se incluyen despu s en el c lculo del resultado que se realiza a continuaci n ver Valores de extinci n en p g 99 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 47 Espanol ES Introducir la diluci n La tecla programable Dilution estar activada despu s de ha
26. soluci n patr n y las muestras nuevamente Escaneo algunas extinciones medidas son demasiado altas y no son indicadas e En por lo menos una longitud de onda del escaneo la extinci n se encontraba por encima del campo de medida e Turbiedades en la soluci n de medici n e Mediciones en los l mites del campo de medida fotom trico Cuando los campos no indicados del escaneo son relevantes diluir la muestra y o eliminar la turbiedad por medio de centrifugaci n y repetir la medici n La extinci n en la long de onda de medici n es demasiado alta La emisi n en la long de onda de medici n es demasiado alta e Turbiedades en la soluci n de medici n e Las superficies pticas de la cubeta est n sucias e Cubeta introducida al rev s en el compartimento de la cubeta e Fotometr a extinci n demasiado elevada de la soluci n de medici n Fluorimetria emisi n demasiado elevada de la soluci n de medici n gt Medir nuevamente bajo consideraci n de las posibles causas El resultado calculado es negativo e Soluci n de medici n mal preparada e Factor introducido err neamente signo equivocado gt Medir nuevamente bajo consideraci n de las posibles causas Por lo menos uno de los resultados es negativo e En m todos con varios resultados p ej Dye labels e Soluci n de medici n mal preparada Factor introducido err neamente signo equivocado
27. ssDNA 9 0 pg mL 0 244 Aso molar 0 5 PO AE Batnpee Sr as Tras entrada del volumen de la muestra calcular ye pMoliy i la cantidad total en la muestra Cy3 0 214 pMoWuL 10 7 pmol total amount in sample t Colorante Tras entrada del volumen de la muestra calcular 7 7 a gt la cantidad total en la muestra I Jl Save Cancel O e Para dsDNA se supone que se trata de un cido nucleico bicatenario al calcular la concentraci n molar Para los m todos ssDNA RNA y Oligo se supone que se trata de un cido nucleico monocatenario e Para m todos que fueron programados en el grupo principal Routine grupo de m todos Nucleic acids mediante lt New Method gt siempre se parte de cidos nucleicos bicatenarios para el c lculo de la concentraci n molar Peak detection Presione la tecla programable Peaks Para la detecci n de picos Peak puede variar dos criterios e A Raster trama de evaluaci n en la escala de longitudes de onda para la detecci n de picos p ej 10 nm Ejemplo 10 nm se eval a la secci n del espectro de 5 nm a 5 nm en relaci n al pico a detectar e Mind A Abs m nima diferencia entre el pico a detectar y la extinci n m s baja en la trama de evaluaci n Al mismo tiempo ning n valor de extinci n en la trama debe ser superior al valor del pico p ej 0 5 58 M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Ejemplos EUA process results peak detect
28. tonos e Error en la medici n de una serie de soluciones patr n los valores de extinci n medidos de la serie no ascienden o descienden continuamente Repita las mediciones de soluci n patr n o borre el resultado de soluci n patr n medido err neamente No es posible introducir el ID e Fallo en la introducci n del ID de la muestra Diversas causas son posibles Para determinar la causa concreta prestar atenci n a la informaci n en el cuadro de ayuda V ase la informaci n en el cuadro de ayuda No es posible indicar la diluci n e Fallo en la introducci n de la diluci n Diversas causas son posibles Para determinar la causa concreta prestar atenci n a la informaci n en el cuadro de ayuda V ase la informaci n en el cuadro de ayuda El c lculo no es posible ya que se est dividiendo entre cero El resultado de la extinci n o el par metro Formula b es cero e En la evaluaci n de un m todo del tipo Divisi n grupo de m todos Longitud de onda dual se tuvo que dividir entre un resultado de extinci n con valor cero Esto no es permisible matem ticamente Compruebe los reactivos y muestras utilizados y repita la medici n No introduzca cero como valor para el par metro Formula b S lo se puede realizar una medici n m s en esta serie de mediciones Se ha alcanzado el m ximo n mero de mediciones en una serie de mediciones El n mero d
29. 0 e A A 75 ng mL 40 00 fs 53 7 RFU J Y 20 00 fi X Fi R A f Lat 20 40 680 BOC Pomi Conc 75 Fluor 53 70 A and Y Dilution Edit 1D J Finish lt Back Next gt Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con valor RFU en la longitud de onda de medici n e Gr fico de la evaluaci n de soluci n patr n con el resultado de la muestra trazado Prote nas An logamente a Nucleic acids v ase arriba Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con valor RFU en la longitud de onda de medici n e Gr fico de la evaluaci n de soluci n patr n con el resultado de la muestra trazado Grupo principal Basic Raw fluorescence Raw fluorescence check parameters measure samples ge JE 8 27 da u EM Raw fluorescence 2012 02 02 16 48 25 04 ID 1 43 Alk a v J Finish lt Back Next gt Dilution Edit 1D Indicaci n de resultados Valor RFU en la longitud de onda de medici n Solo en caso de diluci n indicacion adicional del valor RFU antes de la conversion Estandar Standard measure samples ILLAS Standard 2012 02 02 16 50 31 02 ID 5 Thom 72 8 RFU A and Y Dilution Edit 1D J Finish lt Back Next gt Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con valor RFU en la longitud de onda de medici n Metodos 54 Eppendorf
30. 30 V UK Papel t rmico 0013 021 566 952010409 5 rollos Eppendorf UVette 220 nm 1 600 nm Cubeta de pl stico original de Eppendorf PCR clean Protein free 0030 106 300 952010051 50 2 000 uL 80 unidades embaladas individualmente Eppendorf UVette routine pack 220 nm 1 600 nm Eppendorf Quality 0030 106 318 952010069 50 2 000 uL 200 unidades caja recerrable Eppendorf macro Vis Cuvettes 0030 079 345 0030079345 10 x 100 unidades Eppendorf semi micro Vis Cuvettes 0030 079 353 0030079353 10 x 100 unidades Soporte de cubetas 4308 078 006 940001102 para 16 cubetas Informaci n para pedidos 110 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES w u Co CS gg a gg 4 vw e ies CS sg La pg Sr mr ee S A ce Se ce Se ce ce ce ce ce ce E e ce Se ce te cee Ee eS KS eS ce ce Se che Ce ee CE ee eS ceS ce Se ce TAS ce Eu ce ce ce ce ce e ce T ce En ce En ce ce e ce ce ce ce e 7 C C ce ce Se ESE cee CE ee Ee ce AR TRATO TAS Let EG Konformit tserkl rung ART ARA EC Conformity Declaration ATAR Das bezeichnete Produkt entspricht den einschl gigen grundlegenden Anforderungen der gt ee aufgef hrten EG Richtlinien und Normen Bei einer nicht mit uns abgestimmten nderung des 4 ce Produktes oder einer nicht bestimmungsgem en Anwendung verliert diese Erkl rung ihre G ltigkeit 7 Ce The product named below fulfills the relevant fund
31. 7 The instrument is requalified regularly by the manufacturer and is confirmed and documented to perform within manufacturer s specifications The current instrument qualification is valid through April 2014 For the current instrument qualification the following NIST traceable certified secondary spectrometric calibration standards were used Alle Fre werden auf einem oa 100 Bio Referenz UV Vis Spektrophotometer Seriennummer EL99023107 durchgef hrt Dieses Instrument wird regelm ig vom Hersteller requalifiziert und die spezifikationsgem e Funktion dokumentiert Die aktuelle Qualifizierung ist bis April 2014 g ltig und verwendet folgende NIST r ckf hrbare und zertifizierte spektrometrische Sekund rstandards Starna RM O660HLKCSITX Hellma 666 F1 666 F2 666 F3 666 F4 SRM 2031a SN 667 valid through g ltig bis 12 2014 The valid certificates are part of the requalification documentation Die G ltigkeitszertifikate sind Teil der Qualifizierungsdokumentation Please protect against dust heat cold and liquid The limits are valid for max 2 years Bitte vor Staub Hitze K lte und Fl ssigkeiten sch tzen Signature Die Grenzwerte ge 3 Unterschrift Imag 8 1 Lado interior de la tapa de la caja de filtros muestra Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 77 Espanol ES 8 3 1 1 Comprobaci n de la exactitud fotometrica Functions Main Groups Sub Groups Fun
32. A Spectrometer Unit Device Calbration Check photometric accuracy 03 ID SAMPLE A3 Wavelength Mean VK 260 nm 1 404 A 0 3 280 nm 1 384 A 0 1 320 nm 1 382 A 0 3 405 nm 1 423 A 0 1 550 nm 1 412A 0 3 562 nm 1 406 A 0 3 595 nm 1 396 A 0 5 700 nm 1 359 A 0 2 o un 800 nm 1 342 A 0 3 4 Indicaci n de los resultados despu s de la medici n de un filtro de prueba para comprobar la exactitud fotom trica Mida los otros dos filtros de prueba A2 y A3 Indicaci n de resultados tras medici n de los 3 filtros de prueba para comprobar la exactitud fotom trica Con las teclas O y puede volver a ver los resultados de los diversos filtros de prueba Con Finish finaliza la comprobaci n Compare los valores medios y los valores cv con la tabla suministrada En caso de que los valores medidos no coincidan con el margen de valores permisible dir jase al servicio t cnico de Eppendorf Deje que el servicio t cnico de Eppendorf certifique los filtros nuevamente despu s de 2 a os 8 3 1 2 Comprobaci n de la veracidad de las longitudes de onda Para comprobar la veracidad de las longitudes de onda debe proceder correspondientemente aqu usted mide con 3 filtros de prueba en la respectiva longitud de onda Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 79 Seleccione en el grupo Device calibration la funci n Fluorescence unit Confirmelo con enter 8 3 2 Comprobaci
33. Abs A min Libre programabilidad adicional de otras unidades en la funci n General Method Parameters Units M x 7 d gitos Unidad para el resultado de concentraci n La selecci n est limitada en los m todos fijamente preprogramados del grupo Routine a unidades que son tiles para estos m todos Formula type Selecci n division subtraction S lo para el grupo de m todos Dual wavelength Tipo de f rmula para el c lculo de las extinciones en las dos longitudes de onda antes de la evaluaci n con factor o soluci n patr n Formula a Entrada de valores S lo para el grupo de m todos Dual wavelength Valor para a en la Valor para a en las f rmulas a A1 b A2 c d y a A1 formula de evaluaci n b A2 c d L mite m x 5 digitos incluyendo el punto decimal Formula b Entrada de valores S lo para el grupo de m todos Dual wavelength Valor para b en la Valor para b en las f rmulas a A1 b A2 c d y a A1 f rmula de evaluaci n b A2 c d L mite m x 5 digitos incluyendo el punto decimal Formula c Entrada de valores S lo para el grupo de m todos Dual wavelength Valor para c en la f rmula de evaluaci n L mite m x 5 digitos incluyendo el punto decimal Valor para c en las f rmulas a A1 b A2 c d y a A1 b A2 c d 40 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES
34. BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Grupo de m todos Indicaci n de resultados Explicaci n Fluorimetr a Calibration curve An logamente a Nucleic acids v ase arriba Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con valor RFU en la longitud de onda de medici n e Gr fico de la evaluaci n de soluci n patr n con el resultado de la muestra trazado 6 5 5 process results Despu s de la medici n de muestras siguen en el m todo dos pasos opcionales process results y print amp export En el paso process results puede retocar los resultados en algunos de los m todos Ejemplo modificaci n de la secci n del espectro de un escaneo Igual que en la indicaci n de resultados puede navegar entre los resultados de las muestras de la serie de mediciones con las teclas de cursor O y O y seleccionar deliberadamente resultados para su retoque Tab 6 4 Opciones visi n general Opci n Explicaci n Disponible en el m todo Zoom Modificar la limitaci n de los ejes en el B sicamente todos los m todos para gr fico de extinci n longitud de onda para los que se ofrece el par metro Scan y limitar la representaci n a secciones ha sido activado ampliadas del gr fico e Multi A e Scan e cidos nucleicos Proteins direct UV e Dye labels More calculations Convertir los resultados de concentraciones cidos nucleicos en concentraciones molares as como en e Dye labels con
35. a bioqu mica y biolog a celular Puede utilizar cubetas de vidrio y de pl stico en el rango volum trico de 1 uL a 3 000 uL fotometr a y o de 60 uL a 3 000 uL fluorimetria 3 3 1 M todos Fotometr a Se han programado previamente m ltiples m todos para la determinaci n de la concentraci n de cidos nucleicos prote nas y cidos nucleicos y prote nas marcados con colorante as como el m todo OD 600 para la determinaci n de la densidad de las bacterias mediante turbidimetr a Adem s tambi n se han programado plantillas de m todos para diferentes procesos de medici n y evaluaci n mediciones de una o varias longitudes de onda registro de espectros evaluaciones con factor soluci n patr n y curva est ndar En base a los m todos y plantillas preprogramados se pueden crear m todos propios Con las plantillas del grupo de m todos Absorbance puede medir r pidamente extinciones o espectros sin evaluaciones adicionales Fluorimetr a Se han programado previamente m todos para la determinaci n de la concentraci n de cidos nucleicos con PicoGreen RiboGreen OliGreen y los reactivos Qubit as como de prote nas con NanoOrange Tambi n se incluyen variantes breves de los m todos de cido nucleico para una medici n r pida con solo dos soluciones patr n Al igual que con la espectrofotometr a tambi n se han programado previamente plantillas de m todos para procesos de evaluaci n diferentes mediante factor sol
36. a manera e Last call llamar la ltima evaluaci n de soluci n patr n guardada para este m todo para utilizarla para mediciones de muestras e Curve fit seleccionar el procedimiento para la evaluaci n de soluci n patr n Tambi n puede modificar el procedimiento posteriormente siempre y cuando el resultado no haya sido guardado En el cap tulo Procedimientos de evaluaci n ver Evaluaci n con curva linea recta de soluci n patr n en p g 101 encontrar indicaciones respecto a la selecci n del procedimiento de evaluaci n e Graph cambiar a la representaci n gr fica de los resultados de soluci n patr n Quadratical regression Conc 532 44 A 234 21 A 71 562 Standard 3 Coefficient of determination R 0 9998 Standard 4 Standard 5 1000 Ep teed Nex ey Last Curve Fit Graph Abort lt Back Next gt Abs A 7 Quadratical regression 1 200 Al Conc 924 41 A P N 134 52 A Pag 123 14 0 900 x A Coefficient of A i determination 0 600 R 0 9970 0 300 f 4 O XK m nn o 300 600 00 1206 ml ESF se yeah t Curve Fit Table Abort lt Back Next gt Teclas programables En cuanto se disponga del m nimo n mero de resultados para la evaluaci n con el procedimiento seleccionado Curve fit el resultado de evaluaci n es visualizado en la parte derecha de la pantalla Entonces es posible realizar un
37. a con la fuente de alimentaci n y el cable de alimentaci n suministrados accesorios de la impresora a la red el ctrica y encienda la impresora En las instrucciones de uso de la impresora encontrar indicaciones respecto a la impresora Instalaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 21 Espanol ES 4 6 Conexi n de un ordenador o memoria USB para la exportaci n de datos Puede conectar una memoria USB formateada en FAT 32 en el puerto USB 4 ver Ilustraci n general en p g 15 Alternativamente tambi n puede conectar el equipo directamente a un ordenador v a cable USB para la exportaci n de datos Requisitos e PC con Windows versi n XP SP2 o versi n superior Cable USB con un conector tipo A y uno tipo B respectivamente Conecte el equipo al ordenador enchufando el cable USB en el puerto USB 8 ver Ilustraci n general en p g 15 O e No se requiere ning n software para PC especial para la transmisi n de datos los paquetes de datos transmitidos son registrados por el ordenador como si se tratase de una memoria USB es decir como un soporte de datos intercambiable Para visualizar los datos nicamente tiene que abrir el paquete de datos registrado e La transferencia de datos a la memoria USB o al ordenador se inicia en el paso print amp export ver print amp export en p g 59 del m todo una vez finalizada la serie de mediciones Instalaci n 22 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espan
38. a instalaci n anana 19 4 2 Seleccionar UBICACI N ae ren ern Gee A eee eee OG 19 4 3 Conexi n del equipo a la red el ctrica 1 eee nee nee 19 4 4 Conexi n del equipo con una red ee een enrere 20 4 5 Conexi n de la impresora al puerto USB cette eee 20 4 5 1 Impresora t rmica DPU SA45 2 222 ee eee eee nee 20 4 6 Conexi n de un ordenador o memoria USB para la exportaci n de datos 21 O A E RO ARNO 23 5 1 Visi n general de los elementos de control 0 23 5 1 1 Introducci n de text aiii ia ee A aia 25 5 2 Insercion de la cubeta tt he bis Bay DS di IA A A an 26 5 3 Visi n general de la secuencia de Medici n ooo ooooooocoorror een 27 5 3 1 Preparaci n de la medici n ooooooooooooor tenes 27 5 3 2 Secuencia de mediciOn eee cc ee ee eee eens 28 5 3 3 Indicaciones importantes para las medicioneS 0 eee ee eee eee 31 ndice Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 Metodos ico ist o re ds Piatto elects BIG ake a s ae Area as Base Bea ae 33 6 1 Seleeci n delimet do u en A A un a a a sted sid wee 33 6 2 Descripci n de m todos fotometria 2 0 0 asane 34 6 2 1 Grupo de m todos AbSOTrbanCe ooccccoccccoc teee nee ene 34 6 2 2 Grupo de m todos Routine 1 2 ee teen nee 35 6 2 3 Grupo de m todos Basic arun eee tee ence eens 36 6 2 4 Grupo de m todos Advanced eee eee
39. able Keyboard seleccionar el car cter con las teclas de cursor y confirmarlo con enter Keyboard Mabe Jl ok cancel Teclas programables e Keyboard visualizar el teclado e abc cambiar entre letras en may scula y min scula al introducir texto v a teclado e OK confirmar la entrada del ID y retornar a la medici n de muestras e Cancel cancelar la entrada y retornar a la medici n de muestras 48 M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Resultado con diluci n e ID Bradford measure standards measure samples print amp export ew series Bradford 2010 12 02 17 08 03 Abs A 09 Dil 20 80 pL at w 1 200 im ID B12 a y 0 900 p 1 71 6 pg mL 0 566 Ar 0 600 0 300 M blank or samp 0 000 0 300 600 900 1206 vom Conc 343 Abs 0 566 a aston Jen Joa J Finn J Next gt 6 5 4 measure samples indicaciones de resultados Resultado con diluci n e ID de la muestra En esta secci n obtendr para todos los grupos de m todos una representaci n de indicaciones de resultados t picas as como una visi n general de otros datos de resultados que puede acceder a trav s de la tecla programable Data Grupo de m todos Indicaci n de resultados Fotometria Grupo principal Absorbance Explicaci n Single A TEA measure sampies EI Indicaci n de resultados Single A 2010 07 02 14 15 18
40. ack Finalizar la serie de mediciones y seleccionar un nuevo m todo e Tecla programable Finish finalizar la serie de mediciones y llamar la selecci n de m todos Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 63 Espanol ES 7 Funciones 7 1 Funciones del grupo principal User Con la tecla function o la tecla programable Function se accede a un men con funciones como ajustes del equipo o consulta de resultados almacenados Las funciones se encuentran dentro de 3 columnas igual que en la selecci n de m todos Las funciones en el grupo principal User son accesibles para usted Igual que en la selecci n de m todos se navega con las teclas de cursor para seleccionar primero el subgrupo deseado y luego la funci n deseada Con enter activa la funci n Functions Main Groups Functions User memory Albumin A 280 Gen method param JJB Abs spectra library Device settings Device calibration Info rre e pe e E 1777 Tecla programable Info llamar la versi n de firmware y el n mero de serie del BioSpectrometer fluorescence Tab 7 1 Visi n general de las funciones Subgrupo Explicaci n Results memory Mostrar valores almacenados Los resultados se pueden consultar estando estructurados seg n m todos y seg n series de medici n y se pueden imprimir y exportar desde la memoria General method parameters Los par metros que se pue
41. almacenamiento anticipado de la evaluaci n y cambiar a la medici n de muestras por medio de la tecla Next gt Representaci n gr fica de la evaluaci n de soluci n patr n Con las teclas de cursor y puede navegar entre las soluciones patr n para visualizar los resultados Si hay m s de una r plica por soluci n patr n puede cambiar entre los resultados de las r plicas con O y En la representaci n gr fica tambi n puede seleccionar y medir soluciones patr n individuales o medirlas nuevamente e Table cambiar a la representaci n en forma de tabla de los resultados de soluci n patr n e Next gt guardar la evaluaci n de soluci n patr n y cambiar a la medici n de muestras 46 M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 5 3 measure samples Con la tecla sample mide sus muestras una tras otra Los resultados de blanco permanecen almacenados para una serie de mediciones pero una medici n de blanco nueva es posible en cualquier momento Con las teclas O y puede navegar entre los resultados de muestras obtenidos hasta el momento en la serie de mediciones Bradford Indicaci n de resultados Bractord 2010 11 25 162823 El resultado de la concentraci n 6 d gitos con by 08 ais en coma flotante es resaltado claramente 1 200 Ae re e Con gr fico el resultado se encuentra en la parte 0 900 E Pag N derecha de la pantalla Ki 0 393 As e Sin gr fico el
42. amental requirements of c ce the EC directives and standards listed In the case of unauthorized modifications to the product ri ce ce ce or an unintended use this declaration becomes invalid ec C ce ce Produktbezeichnung Product name c e Eppendorf BioSpe _2004 108 EG EN 2011 65 EU c Vorstand Board of Management 07 08 2013 ce Hamburg Date EE ce Xe so el rr LK A ce ce c ce l 900 q pa ie eS ce l C ce r cf Eppendorf AG Barkhausenweg 1 22339 Hamburg Germany er C m Le 14 L ge ce as e u 3 x E gt ce ce LS C FE fe eal Ce CE ee CE ce Ch CE CE ee Ee Ee AA ES ch er ce CO We E eg Ce ce amp 6 Er CO Ne CE 7 CH ce amp ce 6 ce Evaluate Your Manual Give us your feedback www eppendorf com manualfeedback Your local distributor www eppendorf com contact Eppendorf AG 22331 Hamburg Germany eppendorf eppendorf com www eppendorf com eppendorf
43. ante la programaci n de par metros de m todo e Unit Introducir una unidad a n no programada para el resultado de concentraci n O e Los datos caracter sticos para prote nas que no han sido preprogramados en f brica se pueden determinar en la base de datos expasy http www expasy org tools protparam html e Tambi n encontrar una tabla con valores Ajo para muchas prote nas en C N Pace et al Protein Science 1995 4 2411 2423 tabla 5 Los valores Ajo se tienen que multiplicar por 0 1 para obtener los valores Ag 19 Necesarios 68 Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 7 1 3 Absorbance Spectra Library Functions Main Groups Sub Groups Functions Nitrophenol rie el oe eee eee GSONA Abs A 0 800 0 600 0 400 0 200 0 000 Functions Main Groups Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device set Device calibration Info Cone I JE JE JE mea En la columna derecha selecciona el espectro que desea llamar y lo confirma con enter Teclas programables Export y Printl exportar a una memoria USB o a un ordenador v a cable USB y o imprimir ver print export en p g 59 e OK retornar a la selecci n de funciones Los siguientes ajustes pueden adaptarse Device Settings General Network e E Mail e Date and Time General Devic
44. ar el dispositivo debe esperar por lo menos 3 h Una vez transcurrido este tiempo puede conectar el dispositivo a la red el ctrica AVISO Perjuicio del funcionamiento a causa de da os mec nicos gt Realice una comprobaci n del equipo tras un da o mec nico para asegurarse de que las funciones de medici n y evaluaci n del equipo funcionan correctamente AVISO Da os por sobrecalentamiento gt No coloque el dispositivo cerca de fuentes de calor p ej calefacci n armario de desecaci n gt No exponga el dispositivo a la radiaci n solar directa gt Aseg rese de que la circulaci n de aire no se obstaculice Mantenga una distancia m nima de 5 cm de todas las rendijas de ventilaci n AVISO Da os materiales debido a una aplicaci n equivocada Utilice el producto nicamente para el uso previsto que est descrito en el manual de instrucciones gt Preste atenci n a una suficiente resistencia del material al aplicar sustancias qu micas En caso de dudas consulte al fabricante de este producto Instrucciones generales de seguridad 14 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES AVISO Da os causados por un embalaje incorrecto La empresa Eppendorf AG no asume ninguna responsabilidad por da os resultantes de un embalaje inapropiado gt S lo almacene y transporte el dispositivo dentro de su embalaje original AVISO Da os a causa de una limpieza inadecuada del compartiment
45. berse medido el blanco tecla blank 1 Presione la tecla programable Dilutionl Enter dilution for next sample 2 Introduzca los vol menes para la muestra m ximo 3 d gitos y para el tamp n de diluci n m ximo 4 d gitos Los siguientes resultados de las muestras son multiplicados por el equipo con el factor de diluci n calculado 20 yl sample BQ yL diluent I Clear dit ok Cancel Teclas programables e Clear dil borrar los valores para la diluci n de muestras e OK confirmar la diluci n de muestras y retornar a la medici n de muestras e Cancel cancelar la entrada y retornar a la medici n de muestras La diluci n se utilizar para todos los resultados de muestras siguientes hasta que se modifique haciendo una entrada nueva Introducir la identificaci n de la muestra La identificaci n ID se aplica para el siguiente resultado de muestra Al introducir un ID aparece el ltimo ID que se introdujo para poder introducir r pidamente unos ID consecutivos No es posible asignar dos veces el mismo ID dentro de una serie de mediciones 1 Presione la tecla programable Edit ID 2 Introduzca el ID de la muestra m ximo 12 Enter a sample 1D for the next sample d gitos Alternativas para la entrada de texto sample 10 EEE e Bloque de teclas pulsando la tecla repetidas veces se pasa por las posibilidades de entrada de esta tecla e Superponer el teclado con tecla program
46. bs A 0 450 fe 0 360 0 270 0 180 FM Zoom More Caic Data I Finish J 5 3 2 7 Impresi n y exportaci n dsDNA Hmeasure samples process results print amp export few series dsDNA 2015 06 04 10 16 30 Data packets Samples Results Format Data xis GGraph OPDF Graph data XLS only OXLS amp PDF Method GParameters See eect keys Print I Export Samples Finish lt Back Next gt 1 Pulse Finish para finalizar la serie de mediciones y retornar a la selecci n de metodos 2 Despu s de la finalizaci n de todas las mediciones apague el equipo y cierre el compartimento de la cubeta para protegerlo contra suciedad En algunos m todos tiene la posibilidad de retocar los resultados en el paso process results Por ejemplo puede utilizar la funci n de zoom SpectraZoom en los espectros Seleccione con las teclas de cursor O y O los resultados de la serie de medici n que desee retocar 1 Compile paquetes de datos para todas las muestras o para muestras seleccionadas 2 Imprima los datos gu rdelos en una memoria USB o exp rtelos a un ordenador v a cable USB o por correo electr nico Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 31 Espanol ES 5 3 3 Indicaciones importantes para las mediciones O A tener en cuenta en cada medici n En caso de cubetas de pl stico cu ntas mediciones consecutivas se pueden reali
47. cciones 2 ene e reren 7 1 2 S mbolos de peligro y niveles de peligro 2 22 eee ete eee teenies 7 1 21 S mbolos de peligro senean ote eee ee hs ae ger ee ea 7 w22 TNiveles de Dell us 24 eee shacks e aS A A a dhe BBN A G 7 1 3 Convenci n de representaci n 0 0 eee nenne ernennen een nen 8 We Abreviat ras sa ee a etched oie elie cima aa BER 9 2 Instrucciones generales de seguridad cece ec eee cette eee eee eee 11 2 1 Uso de acuerdo con lO previsto 6 eee eee eee eee 11 2 2 Requerimiento para el usuario 1 eee ee tenet eee ne nnes 11 2 3 Peligros durante el USO previsto 1 na 11 2 3 1 Danos personales cuco aa ee re ee ee 11 2 3 2 DA OS en el equips e socias ne ee Ehe 13 2 4 Indicaciones relativas a la responsabilidad del productO 0 eee oo 14 2 5 Indicaciones de seguridad en el EQUIPO ee aerer 14 3 Descripci n del producto si erant ra cece ee ee ee ee eee eee eee eee teen teens 15 3 1 M straci ngen tal wendete een ee ee econo a ee 15 3 2 Alcance de UMSS Ot tr a A A ee ie 15 3 3 Caracter sticas del productO oo ooooocoooooo ene e ence eee 16 3 3 1 Metodos SS ee a aie A ae Set hate se Sei ee Er End 16 33 2 Manejo ote aie ae aa ee BB Ed wd ee BES ES 16 3 3 3 Emisi n d iresultados lt 2 A Soe eae Set Ge AG et GW eA Gee eee 17 3 3 4 Autocomprobaci n del equipo 0 cece cee eee 17 4 Instalaci n ii a RAE a a en a ae SME tue 19 4 1 Preparaci n de l
48. ci n Calibration curve An logamente a Proteins with reagent v ase arriba Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con extinci n en la longitud de onda de medici n e Gr fico de la evaluaci n de soluci n patr n con el resultado de la muestra trazado Grupo principal Advanced Dual wavelength Division heck parameters f measure samples Maa Division 2010 07 02 14 27 47 02 Dil 10 90 pL ID 20 08 won 0 803 A At 0 679 mo O A2 0 845 Ass A v Dilution Edit ID Finish lt Back Next gt Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n se calcula a partir de Aca c con factor o evaluaci n de soluci n patr n e Acaic se calcula con la f rmula definida en los par metros a partir de las extinciones medidas en las dos longitudes de onda Valores de extinci n que se midieron en las dos longitudes de onda de medici n Datos adicionales tecla programable Datal Si se activaron los par metros correspondientes Valor de extinci n para la longitud de onda de fondo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Metodos 53 Espanol ES Grupo de m todos Fluorimetr a Indicaci n de resultados Grupo principal Routine Explicaci n cidos nucleicos PicoGreen measure samples print amp export inew series PicoGreen 2012 02 02 17 03 27 Fluor RFU 03 Sf ID L 60 0
49. ci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 10 3 Eliminaci n Si debe eliminar el producto debe tener en cuenta las normativas relevantes Informaci n sobre la eliminaci n de dispositivos el ctricos y electr nicos en la Comunidad Europea Dentro de la Comunidad Europea la eliminaci n de dispositivos el ctricos est regulada por normativas nacionales basadas en la directiva de la UE 2012 19 UE sobre equipos el ctricos y electr nicos RAEE De acuerdo con estas normativas los dispositivos suministrados despu s del 13 de agosto de 2005 en el mbito business to business al que pertenece este producto no pueden eliminarse como desechos municipales ni dom sticos Para documentarlos los dispositivos han sido marcados con la identificaci n siguiente Como las normativas de eliminaci n pueden variar de un pa s a otro dentro de la UE p ngase en contacto con su distribuidor en caso necesario 11 11 1 Datos t cnicos Datos t cnicos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 95 Suministro de corriente Suministro de tensi n 100 V a 240 V 10 50 Hz a 60 Hz Categoria de sobretensi n Grado de ensuciamiento 2 Consumo de potencia M xima potencia posible seg n la placa indicadora de tipo 25 W aprox 15 W durante el manejo aprox 5 W con pantalla atenuada Corte de electricidad admisible aprox 10 ms a 90 V aprox 20 ms a 230 V Clase de protecci
50. ci n molar y la masa molar relativa de la prote na es posible calcular Ag 1 a partir de all E Apr MM Ep coeficiente de extinci n molar de la prote na unidad cm 1M 1 MM p masa molar relativa de la prote na unidad Da introducci n en General Method Parameter en kDa 106 Metodo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 12 6 Procedimientos de evaluaci n especiales para los m todos de tinci n 12 6 1 C lculo del factor para el colorante a partir del coeficiente de extinci n En los m todos de tinci n se calcula la concentraci n del colorante con un factor de la extinci n medida ver Evaluaci n con factor o con soluci n patr n en p g 100 El factor se introduce en la funci n General Method Parameter Dyes para cada colorante Alternativamente a la entrada del factor tambi n se puede introducir el coeficiente de extinci n En este caso se calcula el factor de la siguiente manera 6 F pye La i Dye F factor para el colorante unidad pmol uL e coeficiente de extinci n para el colorante unidad cm MolL 12 6 2 C lculo de la FOI Como valor para la relaci n entre mol culas de colorante y cantidad de nucle tidos en el cido nucleico se calcula e indica la frecuencia de incorporaci n FOI en los m todos de tinci n El c lculo se puede seleccionar para dos diferentes unidades de resultado Unidad MOL CULAS dye kb Any 10 MM A FOI
51. cleic acids e Determinaci n de la concentraci n de cidos nucleicos mediante medici n a 260 nm y evaluaci n via factor e Diferentes m todos de cidos nucleicos como dsDNA o RNA est n preprogramados Los par metros se diferencian por el factor e M todo preprogramado para cubetas de microlitros medici n de ADN en vol menes de muestra en el rango de microlitros con un paso ptico de 1 mm con cubetas de microlitros como Eppendorf uCuvette G1 0 o Hellma TrayCell e Informaci n adicional acerca de la pureza del cido nucleico medido ratio A260 A280 ratio A260 A230 espectro de longitudes de onda de extinci n del cido nucleico extinci n de la longitud de onda de fondo preajuste 320 nm la extinci n del cido nucleico puro deber a ser aqu aprox cero e Una correcci n de turbiedad parcial a trav s del par metro Background es posible e Una conversi n de las concentraciones en concentraciones molares as como en cantidades de cido nucleico tras entrada del volumen de la muestra es posible paso de m todo process results Proteins direct UV e Determinaci n de la concentraci n de prote nas a trav s de una medici n a 280 nm y evaluaci n via factor o soluci n patr n e M todos preprogramados para la emisi n directa de las extinciones como resultado Protein A 280 asi como para la evaluaci n v a coeficiente de extinci n especifico de la alb mina Albumin A 280 e M todo preprogramado para cub
52. co y de la muestra hayan sido sintonizadas pticamente es decir tengan el mismo valor de extinci n en la longitud de onda de medici n 12 1 2 Correcci n de fondo Aplicaci n principal correcci n parcial de falsificaciones de la extinci n en mediciones de cidos nucleicos debido a turbiedades en la soluci n de medici n Por ejemplo la extinci n a 320 nm la cual deber a encontrarse aprox en 0 A en cidos nucleicos puros es restada de la extinci n a 260 nm que es la longitud de onda de medici n para cidos nucleicos A XXX corrBkgr Ayxx gt Apter AXxx korrBkgr extinci n corregida aritm ticamente en la longitud de onda XXX nm Axxx extinci n medida en la longitud de onda XXX nm ABkgr extinci n medida en la longitud de onda de fondo 100 Metodo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 12 1 3 Correcci n de cubeta Todos los valores de extinci n que se incorporan en los c lculos de resultados est n normalizados a un espesor de capa de la cubeta de 10 mm Si se utiliza una cubeta con otro espesor de capa este espesor de capa se tiene que definir en el par metro Cuvette En este caso las extinciones medidas son corregidas a resultados de medici n con una cubeta con un espesor de capa de 10 mm antes de la conversi n a resultados de muestras Esta correcci n se aplica a e M todos con evaluaci n v a factor e M todos del grupo Absorbance en donde solamente se
53. conversi n de las concentraciones en concentraciones molares asi como en cantidades de cidos nucleicos y colorantes tras la entrada del volumen de la muestra es posible paso de m todo process results Bacterial density e Medici n de la turbiedad para determinar la densidad de bacterias e La medici n a 600 nm ya est preprogramada e Informaci n adicional espectro de longitudes de onda de extinci n 6 2 3 Grupo de m todos Basic Factor Standard e Medici n en una longitud de onda y evaluaci n v a factor o soluci n patr n e Los m todos para la evaluaci n v a factor y soluci n patr n est n preprogramados Calibration curve e Medici n en una longitud de onda y evaluaci n posterior con una serie de 2 a 12 soluciones patr n e Diversos procedimientos de evaluaci n Curve fit como regresi n lineal y regresi n no lineal son seleccionables e Representaci n gr fica y en forma de tabla de los resultados de soluci n patr n e El uso de la ltima evaluaci n de soluci n patr n guardada es posible e Un m todo para la evaluaci n con curva de soluci n patr n est preprogramado M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 37 Espanol ES 6 2 4 Grupo de m todos Advanced Dual wavelength e Medici n en dos longitudes de onda y evaluaci n de los valores de extinci n medidos con ayuda de dos f rmulas b sicas subtracci n divisi n e Es posible definir variantes de las f rmulas b sicas e El
54. ct A 280 2 Selecci n S lo para el grupo de m todos Dye labels en la medici n de 2 on off colorantes An logamente al par metro Correct A 280 1 Show scan Selecci n En la medici n de muestras indicaci n de un escaneo gr fico on off de longitud de onda de extinci n adicionalmente al resultado Start A Entrada de valores Longitud de onda inicial para el registro del escaneo Longitud de onda en nm Rango 200 a 830 nm 42 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Par metros Entrada Explicaci n Stop A Entrada de valores Longitud de onda de detenci n para el registro del escaneo Longitud de onda en nm Rango 200 a 830 nm El valor tiene que ser mayor que el valor para Start A A260 A280 Selecci n S lo para cidos nucleicos on off En la medici n de muestras indicaci n de la ratio A260 A280 adicionalmente al resultado A260 A230 Selecci n S lo para cidos nucleicos on off En la medici n de muestras indicaci n de la ratio A260 A230 adicionalmente al resultado FOI Selecci n S lo para el grupo de m todos Dye labels none dye kb pmole En la medici n de muestras indicaci n de FOI adicionalmente ug al resultado La FOI frecuencia de incorporaci n es una medida para el n mero de mol culas de colorante incorporadas en el cido nucleico por mol cula del cido nucleico Las unidades son dye kb mol culas de colorante por 1000 ba
55. ctions B Spectrometer unit a Fluorescence unit OA y Perform selftest t Device calibration O Lo IAO JE JE Peres A spectrometer Unit 260 nm 280 nm 800 nm Check photometric accuracy Device Calibration Spectrometer Unit Device Calibration Check photometric accuracy ID insert filter AO and ress blank ada Seleccione en el grupo Device calibration la funci n Spectrometer unit y conf rmela con enter Seleccione aqu si desea comprobar la veracidad de las longitudes de onda o la exactitud fotom trica y confirme con enter Conmute con Next gt a la medici n Siga las instrucciones que aparecen en el indicador del equipo y mida primero el filtro de blanco AO y despu s el primer filtro de prueba Al El equipo mide el filtro de prueba 15 veces en 9 longitudes de onda e indica luego los valores medios asi como los valores cv de la serie de mediciones para las 9 longitudes de onda 78 Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES TIERE Spectrometer Unit Device Calibration Wavelength 260 nm 280 nm 320 nm 405 nm 550 nm 562 nm 595 nm 700 nm 800 nm Check photometric accuracy Mean 0 192 A 0 190 A 0 167 A 0 154 A 0 164 A 0 163 A 0 165 A 0 168 A 0 169 A VK 11 1 2 1 4 0 7 0 7 0 8 0 7 0 5 15 01 1D SAMPLE A1 into AMPLE A2 and if Abort lt Back Next
56. culas burbujas turbiedades en la fiabilidad de los resultados con estas extinciones tan reducidas es muy alta Para m s informaci n p ej la Userguide n 013 consulte nuestra p gina de Internet www eppendorf com 28 Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 5 3 2 Secuencia de medici n 5 3 2 1 Selecci n del m todo Method Selection Main Groups Methods Sub Groups A Bradford Bradford micro BCA BCA micro D Lowry Lowry micro El lt New Method gt Photometry Cut Jl Copy Rename Delete Paste rd check parameters measure standards measure samples Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Kilo Autoprint off E m Page up oF Page dn Edit Jl Page un Jl Page an Abort lt Sack Jl Next gt J 5 3 2 2 Comprobaci n de par metros A check parameters measure standards measure samples Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 lo Autoprint off Edi Show more parameters Page up or Page dn Page dn Abort lt Back Next gt Seleccione con las teclas de cursor el m todo deseado y ll melo pulsando la tecla enter En el siguiente cap tulo ver M todos en p g 33 encontrar una visi n general y u
57. culo de una relaci n 260 280 en mediciones de cidos nucleicos Compruebe los reactivos y muestras utilizados y repita la medici n El c lculo no es posible ya que se est dividiendo entre cero El resultado de la extinci n o el par metro Formula b es cero e En la evaluaci n de un m todo del tipo Divisi n grupo de m todos Longitud de onda dual se tuvo que dividir entre un resultado de extinci n con valor cero Esto no es permisible matem ticamente Compruebe los reactivos y muestras utilizados y repita la medici n No introduzca cero como valor para el par metro Formula b Soluci n de problemas 92 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Transporte almacenaje y eliminaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 10 Transporte almacenaje y eliminaci n 10 1 Transporte gt Utilice el embalaje original para el transporte Espa ol ES Transporte general Temperatura del aire 25 C 60 C Humedad relativa 10 95 Presi n atmosf rica 30 kPa 106 kPa Transporte a reo 40 C 55 C 10 95 30 kPa 106 kPa 10 2 Almacenamiento Temperatura del aire Humedad relativa Presi n atmosf rica En embalaje de 25 C 55 C 25 75 70 kPa 106 kPa transporte Sin embalaje de 5 C 45 C 25 75 70 kPa 106 kPa transporte 93 94 Transporte almacenaje y elimina
58. da del eje Y equivale siempre a 0 A Variante free Los l mites de intervalos se pueden introducir libremente para ambos ejes Navegaci n entre los campos de entrada con las teclas de cursor 0 9 O En las 3 variantes se retorna a la representaci n inicial del espectro con la tecla programable reset zoom More calculations Presione la tecla programable More calc process results more calc Gs DNA 2012 06 01 17 04 47 Entries 13 Total volume of sample 100 pL ID Molecular mass 297 basepairs 196 kDa Calculations 6 Orom dsDNA 6 0 pg mL 0 120 Axo 0 6 Hg total amount in sample 30 7 pmol mL 3 1 pmol total amount in sample Jl N Jl J _ Save Cancel process results more calc ssDNA Cy 3 2010 11 29 12 08 12 M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 57 Espanol ES Grupo de m todos Nucleic acids e Tras entrada de la masa molar alternativamente en bases pares de bases o en kDa convertir el resultado de la concentraci n en concentraci n molar Tras entrada del volumen de la muestra calcular la cantidad total en la muestra Grupo de m todos Dye labels cido nucleico ies 03 S bates 2 e Tras entrada de la masa molar alternativamente Total volume of sample 50 pL ID Molecular mass 2300 bases en bases pares de bases o en kDa convertir el EO kDa 9 0 resultado de la concentraci n en concentraci n Calculations UngmL
59. dadosamente 74 Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 8 1 1 Limpieza de la cubierta del compartimento de la cubeta Si no solamente quiere limpiar la superficie de la cubierta del compartimento de la cubeta la cual se puede acceder con facilidad tambi n puede desmontar la cubierta O gt No enjuague la cubierta del compartimento de la cubeta en un producto de limpieza gt Limpie la cubierta del compartimento de la cubeta de la manera descrita 1 Levante la cubierta del compartimento de la cubeta con una mano 2 Sujete la cubierta con la otra mano a la altura del pasador y jale la cubierta hacia la derecha hasta que el pasador haya salido por completo O e Jale la cubierta hacia la derecha en un ngulo de 90 grados 3 Limpie la cubierta con un pa o o un bastoncillo de algod n libre de hilachas previamente humedecido en un producto de limpieza suave 4 Vuelva a introducir el pasador en la carcasa hasta el tope El pasador desaparece por completo en la carcasa O Si no va a utilizar el fot metro cierre el compartimento de la cubeta con la cubierta azul para protegerlo contra polvo y otras contaminaciones Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 75 Espanol ES 8 2 Desinfecci n Descontaminaci n DA PELIGRO Descarga el ctrica debido a la penetraci n de l quidos gt Apague el dispositivo y desench felo de la alimentaci n el ctrica antes de em
60. de onda de medici n e Si est activado en los par metros escaneo Navegue en el gr fico entre los puntos de medici n que se pueden utilizar para el c lculo del resultado con y O Datos adicionales tecla programable Datal Si se activaron los par metros correspondientes e Valor de extinci n para 260 nm e Valor de extinci n para la longitud de onda de fondo Proteins with reagent Bradford measure standards measure samples 3 samples LA oad frew series Bradford 2010 11 25 16 28 23 Abs A z 08 1 200 ID gt 0 800 21 3vom A 0 393 Ass 0 600 ihe 0 300 f 0 000 0 300 600 900 1200 ymt Conc 213 Abs 0 393 A ar Dilution Edit 1D ta I Finish T Next gt Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con extinci n en la longitud de onda de medici n e En caso de evaluaci n con serie est ndar gr fico de la evaluaci n de soluci n patr n con el resultado de la muestra trazado Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 51 Espanol ES Grupo de m todos Indicaci n de resultados Explicaci n Fotometr a Dye labels EE measure samples MAA Indicaci n de resultados SSDNA Cy 3 2010 11 24 1437 18 e Resultados de concentraci n s 02 r N gt con extinci n en la longitud de 0 440 t z er onda de medici n de la 350 f 5 aa 10 05 biomol cula 0 260 N 0 269 Am Si
61. den utilizar para diversos m todos est n almacenados de manera central en el rea Functions Estos par metros se pueden editar modificar o crear aqu En el paso de m todo Check parameters se pueden seleccionar f cilmente los par metros que abarcan varios sectores a trav s de casillas de selecci n e Proteins Nucleic acids Dyes contienen par metros que se utilizan para m todos de los grupos Dye labels y Proteins direct UV e Units unidades para resultados de concentraci n que pueden ser utilizadas por muchos m todos Absorbance spectra library Espectros de longitudes de onda de extinci n de sustancias importantes p ej ADN Los espectros sirven de informaci n y se pueden utilizar para la comparaci n con el espectro de un resultado de muestra Device settings Ajustes de equipo editables p ej idioma 64 Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Subgrupo Explicaci n Device calibration e Posibilidad de comprobar el espectrofot metro Para ello se requiere un juego de filtros de Eppendorf e Posibilidad de comprobar la unidad de fluorescencia Info Licencias de software de fuentes abiertas e informaci n sobre marcas registradas 7 1 1 Results Memory Functions Functions Main Groups Sub Groups Albumin A 280 PicoGreen short B dsDNA E Bradford LON choose measurement series Parameters sample
62. desv an la radiaci n de la fuente de luz dentro de la cubeta de modo que la radiaci n de la fuente de luz tambi n puede salir por arriba si la tapa no est cerrada Cerci rese de que la tapa de la cubeta de microlitros est cerrada antes de iniciar una medici n ADVERTENCIA Da os para la salud a causa de sustancias qu micas t xicas radiactivas o agresivas as como a causa de l quidos infecciosos y g rmenes pat genos gt Observe las disposiciones nacionales sobre el manejo de estas sustancias el nivel de seguridad biol gica de su laboratorio as como las fichas de datos de seguridad e indicaciones de uso de los fabricantes gt P ngase su equipo de protecci n personal gt Encontrar amplias prescripciones respecto al manejo de g rmenes o material biol gico del grupo de riesgo ll o superior en el Manual de Bioseguridad en el Laboratorio fuente World Health Organisation Laboratory Biosafety Manual en la versi n actualmente vigente ADVERTENCIA Peligro para la salud debido a dispositivo y accesorios contaminados Descontamine el dispositivo y los accesorios antes de almacenarlo o enviarlo ATENCI N Riesgos de seguridad debido a accesorios y piezas de recambio equivocados Los accesorios y piezas de recambio no recomendados por Eppendorf merman la seguridad el funcionamiento y la precisi n del dispositivo Por da os producidos por accesorios y piezas de recambio no recomendados por Eppend
63. direcci n del haz de luz de atr s hacia adelante est marcada en la carcasa absorbance e Fluorimetr a la direcci n del haz de luz de derecha a izquierda y de vuelta atr s est marcada en la tapa del compatimento de la cubeta fluorescence fluorescence s0rbagce Imag 5 2 Identificaci n de los recorridos pticos 1 Posicione la cubeta as que la ventana ptica de la cubeta muestre en direcci n del recorrido ptico 2 Al insertar la cubeta presi nela hasta el fondo superando una ligera resistencia 3 Fluorimetr a cerrar la tapa del compartimento de la cubeta antes de la medici n 5 3 Visi n general de la secuencia de medici n 5 3 1 Preparaci n de la medici n 1 Encienda el equipo y tambi n la impresora dado el caso El equipo realizar una autocomprobaci n duraci n aprox 1 minuto y mostrar la selecci n de m todos Ponga las cubetas a disposici n para la medici n ver Inserci n de la cubeta en p g 26 Prepare las soluciones de medici n para las mediciones de los blancos en caso necesario de las soluciones patr n y de las muestras 4 Abra la tapa del compartimento de la cubeta O Las soluciones de medici n para soluciones patr n y muestras con extinciones inferiores a 0 05 A no deben utilizarse El l mite de determinaci n del equipo es mucho menor sin embargo la influencia de las perturbaciones procedentes de las soluciones de medici n p ej part
64. e Extinci n en esa longitud de 01 Bei in onda de medici n Solo en caso de diluci n o uso de una cubeta que no sea de 4 390 10 mm indicaci n adicional del A on DARK valor de extinci n antes de la conversi n A vi y Dilution Edit 1D Finish lt Back Next gt Multi A Indicaci n de resultados cd ee measure samples Multi A 2010 07 09 16 08 45 01 ID M1 0 349Az30 A2 0 735 Ayo 13 0 187 Ay A4 0 006 Aw A and Y key Dilution J Edit 10 J Finch J lt Gack Io nen gt Extinciones en las longitudes de onda de medici n Datos adicionales tecla programable Data Solo en caso de diluci n o uso de una cubeta que no sea de 10 mm valores de extinci n antes de la conversi n Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 49 Espanol ES Grupo de m todos Indicaci n de resultados Explicaci n Fotometr a Scan A cul measure samples print amp export ve Indicacion de resultados Sean 2010 07 09 16 08 18 e Scan grafico con indicaci n de 3 01 r A dis es extinci n longitud de onda 0 800 fiA e Navegue en el gr fico de un er punto de medici n a otro con 0 600 i yO 0 400 er E 0 000 ple keys 230 260 290 320 A aaj x A 305 Abs 0 012 lt gt key Edition Finish lt Back Next gt Grupo principal Routine Acidos nucleicos sDNA check parameters or sope frocessres
65. e Settings Language English vr Device name BioSpectrometer fluorescence Indication of light path Self test interval Weekly Y last self test 2015 06 04 09 52 46 Spectrometer unit Fluorescence unit ESE Wach TE ss JT cae Network Settings IP OGet IP settings via DHCP nnn IP address 192 168 20 61 Subnet mask 255 255 255 0 Default gateway 192 168 20 1 DNS Get DNS settings via DHCP Primary DNS server 192 168 20 1 Secondary DNS server 192 168 20 1 Test MAC Info Save Cancel Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 69 Espanol ES General Device Settings e Selecci n de idioma alem n ingl s franc s espa ol italiano Nombre de equipo e Frecuencia de la autocomprobaci n autom tica del equipo despu s del encendido e Aviso de indicaci n del paso ptico e Se muestra la informaci n sobre la ltima autocomprobaci n Teclas programables e Save guardar las modificaciones y retornar a la selecci n de funciones e Cancel retornar a la selecci n del grupo de par metros sin ninguna modificaci n Network Settings Pregunte a su administrador de red sobre qu ajustes son necesarios e Selecci n de realizaci n autom tica de los ajustes de IP por DHCP Los ajustes de IP pueden tambi n introducirse manualmente Direcci n IP Mascara de subred Gateway est ndar e Selecci n de realizaci n autom tica de los ajustes de DNS por DHCP solo d
66. e mediciones en una serie de mediciones est limitado a 99 Despu s de 99 mediciones se tiene que iniciar una nueva serie de mediciones 88 Soluci n de problemas Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Sintoma mensaje Causa Intervalo de zoom Fallo en el paso de m todo process no v lido results en el modo zoom Rango de zoom permisible para la escala de longitudes de onda e Intervalo de longitud de onda por lo menos 10 nm e Entradas de longitudes de onda s lo dentro del rango programado en los par metros para el m todo Rango de zoom permisible para la escala de extinci n e Intervalo de extinci n por lo menos 0 02 A e L mite superior e inferior para el intervalo de extinci n 3 A y o 3 A Ayuda gt Observe los l mites mencionados durante la aplicaci n del zoom 9 3 Identificaciones de resultados Soluci n de problemas Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 89 Las advertencias y mensajes de error referentes a los resultados aparecen en el cuadro de ayuda en la parte inferior derecha del indicador En caso de advertencias el fondo del encabezamiento del cuadro de ayuda es de color amarillo y en caso de mensajes de error es rojo Advertencias decida usted bajo consideraci n de la advertencia indicada si el resultado le sirve de algo Mensajes de error no se muestra ning n resultado el motivo es indicado en el mensaje de error S
67. elo de la alimentaci n el ctrica antes de empezar los trabajos de limpieza o de desinfecci n gt No deje entrar ning n l quido al interior de la carcasa gt No efect e ninguna limpieza o desinfecci n por pulverizaci n en la carcasa gt S lo vuelva a conectar el dispositivo a la red el ctrica si esta completamente seco por dentro y por fuera fp iPELIGRO Peligro de explosion zd gt No utilice el dispositivo en salas en donde se trabaje con sustancias explosivas gt No procese con este dispositivo sustancias explosivas o que reaccionen bruscamente gt No procese con este dispositivo sustancias que puedan crear una atm sfera explosiva Instrucciones generales de seguridad 12 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES A A ADVERTENCIA Descarga el ctrica por da os en el dispositivo o cable de alimentaci n gt S lo encienda el dispositivo si este y el cable de alimentaci n no presentan ning n da o Utilice nicamente dispositivos que hayan sido instalados o reparados correctamente En caso de peligro separe el dispositivo de la red el ctrica extrayendo el enchufe de alimentaci n del dispositivo o con ayuda del dispositivo de separaci n previsto para ello p ej el interruptor de emergencia del laboratorio ADVERTENCIA Da o a causa de radiaci n ultravioleta Las cubetas de microlitros como p ej Hellma TrayCell o cubetas de microlitros de construcci n similar
68. emiten valores de extinci n La correcci n no se aplica a e M todos con evaluaci n v a soluciones patr n ya que esto presupone que las soluciones patr n y las muestras son medidas en cubetas con el mismo espesor de capa e C lculos con divisi n m todo Division grupo de m todos Dual wavelength as como c lculo de ratios como A26 A2g0 en mediciones de cidos nucleicos 10 Ay XA Cuv A XXX corrCuv Axxx korrCuv eXtinci n corregida aritmeticamente en la longitud de onda XXX nm Axxx extinci n medida en la longitud de onda XXX nm Cuv espesor de capa de la cubeta 12 2 Evaluaci n con factor o con soluci n patr n C AxF C concentraci n calculada A extinci n F factor El factor esta programado en la lista de par metros y se puede modificar Se refiere siempre al grosor de la cubeta de 10 mm Si modifica el parametro Cuvette esta modificaci n sera considerada por el equipo al calcular el resultado No tiene que modificar el factor para la evaluaci n Si modifica la unidad de la concentraci n sin embargo tiene que prestar atenci n a que el factor est adaptado a la unidad seleccionada M todo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES El factor o bien es introducido directamente como par metro en el m todo de evaluaci n Factor o bien es calculado en el m todo de evaluaci n Soluci n patr n evaluaci n con una concentraci n patr n
69. endorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 1 3 Convenci n de representaci n Representaci n Significado 1 Acciones que deben realizarse en el orden preestablecido 2 gt Acciones sin un orden preestablecido Lista o Pulse esta tecla para realizar la acci n descrita o sample Zn Pulse esta tecla programable para realizar la acci n descrita Copy o Copy O Informaci n adicional Instrucciones de empleo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 1 4 Abreviaturas A Absorbancia Extinci n DNA Deoxyribonucleic acid cido desoxirribonucleico ADN dsDNA double stranded DNA ADN bicatenario M todos de tinci n M todos del grupo Dye labels para la medici n de biomol culas te idas con colorante FOI Frequency of Incorporation Frecuencia de incorporaci n medida para la cantidad de mol culas de colorante respecto al numero de nucle tidos en biomol culas te idas con colorante M mol L molar OD600 Densidad ptica con la longitud de onda 600 nm RFU Relative Fluorescence Unit unidad de fluorescencia relativa medida para la intensidad en mediciones de fluorescencia RNA Ribonucleic acid cido ribonucleico ARN ssDNA single stranded DNA ADN monocatenario UV Radiaci n ultravioleta Vis Visible light luz visible CV Coeficiente de variaci n desviaci n estandar valor medio en tanto por ciento Instrucciones de emple
70. eppendorf Register your instrument www eppendorf com myeppendorf fluorescence lt G fluorescence ce o o lt lt 0 o oo o 0 o os oo m 0200000111110 eee eee eee eee eee eee eee ve 0 o 0 00000000000000000000000 0 0 0 0 TI eee eee ee Manual de instrucciones Copyright 2015 Eppendorf AG Germany All rights reserved including graphics and images No part of this publication may be reproduced without the prior permission of the copyright owner Trademarks Cy is a registered trademark of GE Healthcare UK Ltd UK Hellma is a registered trademark of Hellma GmbH amp Co KG Germany OliGreen PicoGreen RiboGreen NanoOrange and Qubit are registered trademarks of Molecular Probes Inc USA Eppendorf and the Eppendorf logo are registered trademarks of Eppendorf AG Germany Eppendorf BioSpectrometer Eppendorf SpectraZoom and UVette are registered trademarks of Eppendorf AG Germany Registered trademarks and protected trademarks are not marked in all cases with or TM in this manual This product is manufactured under license to issued U S Patent No 6 122 052 Protected by U S Patent No 8 464 171 6137 900 058 03 062015 ndice Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES ndice 1 Instrucciones de empleo 2 1 cece eee eee eee eee rr 7 1 1 Utilizaci n de estas instru
71. ermisible de cada filtro est n impresos en una tabla en la tapa de la caja de filtros Si desea documentar los valores conecte la impresora t rmica de Eppendorf Mantenimiento 76 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES BioSpectrometer fluorescence eppendorf reference filter set Function Device calibration Spectrometer unit Order No Best Nr 6137 928 009 Set No Satz Nr 800 Limits measured against Blank A 0 at approx 20 C SN 6135 914 800 916 800 917 800 y r Sample Sample 260 nm 280 nm 0 159 0 183 0 154 0 178 0 982 1 005 1 703 1 735 0 147 0 170 0 977 1 001 1 668 1 699 0 143 0 166 0 985 1 008 1 615 1 647 0 142 0 165 0 955 0 984 1474 1513 _0 141 0 164 0 9620 989 1 469 1 503 0 139 0 162 0 955 0 981 1 439 1 474 0 130 0 153 0 917 0 966 1 364 1 417 1 015 1 166 0 127 0 150 0 896 0 948 1 308 1 367 Random error of wavelength Random error of photometer Limiting values CV Grenzwerte VK 3 0 52 0 515 550 800 nm 53 0 52 0 23 0 Fluorescence unit SN 6137 a en 0 95 1 05 0 95 1 05 Random error of fluorescence Zuf llige Messabweichung der Fluorescencemessung Pp Limiting values CV Grenzwerte VK Wavelength and photometric accuracy Wellenl ngen und photometrische Richtigkeit traceable to r ckf hrbar auf NIST SRM 2034 SN 04 A und SN 667 au characterization i is siamese ona Cay 100 Bio ran UV Vis spectrophotometer SN EL 9902310
72. es ya que la curva est ndar relaci n entre se al de medici n y concentraci n es aproximadamente lineal e Medici n de ADN con reactivos Qubit evaluaci n de curva recta est ndar Ning n short method ya que la curva est ndar no es lineal Prote nas Detecci n fluorim trica de la concentraci n de prote nas tras la reacci n con reactivos e Medici n de prote nas con NanoOrange evaluaci n de curva recta est ndar El m todo se basa en una especificaci n de trabajo de la empresa Invitrogen para este reactivo Ning n short method ya que la curva est ndar no es lineal Los m todos con reactivos Qubit varian de las especificaciones de trabajo de la empresa Invitrogen Deben realizarse ademas dos diluciones estandar Para la preparaci n de muestras y la realizaci n puede recibir mas informaci n de Eppendorf Los datos de contacto de Application Support se encuentran en la parte de atras del manual de instrucciones 38 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 3 2 Grupo de m todos Basic Raw fluorescence e Medici n de la RFU e Hay un m todo preprogramado para la medici n en la longitud de onda de medici n 520 nm Est ndar e Medici n de la RFU y evaluaci n con est ndar e Hay un m todo preprogramado para la evaluaci n con est ndar Calibration curve e Medici n de las RFU y evaluaci n con 2 a 12 est ndares e Se pueden seleccionar distintos procedimientos de evaluaci
73. es de onda a partir de 220 nm es transparente y por ello tambi n es adecuada para la medici n de cidos nucleicos Eppendorf o uni ee Cuvettes uCuvette G1 0 Hellma TrayCell UVette Ultra micro Semi micro Macro Basic area 12 5 mm x 12 5 mm Min overall height 36 mm Min filling level 10 mm Light path 8 5 mm Max height of base 7 mm O mm Min volume Photometry See manufacturer See manufacturer 50 uL 70 uL 400 uL 1000 uL information information Min volume Fluorimetry See manufacturer not suitable 60 uL 70 uL 400 uL 1000 uL information or similar microliter cuvette Requisitos e La cubeta est libre de contaminaci n causada por polvo o huellas digitales y libre de ara azos e El compartimento de la cubeta est libre de part culas polvo y l quido El volumen de medici n en la cubeta es suficiente Prestar atenci n al volumen de medici n m nimo e La soluci n de medici n est libre de part culas y burbujas Fluorimetr a la soluci n de medici n est libre de sustancias que muestren una fluorescencia propia no deseada o debiliten la fluorescencia de la sustancia a analizar e La temperatura de la cubeta se encuentra por encima de la temperatura del punto de roc o que vale para las condiciones ambientales humedad y temperatura Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 27 Espanol ES O La direcci n del recorrido ptico est marcada con un flecha en la carcasa e Fotometr a la
74. esione los resortes de pl stico 1 arriba y abajo y extraiga por completo el portafusible 2 Sustituya los fusibles defectuosos vuelva a insertar el portafusible Preste atenci n a la posici n correcta del riel gu a 3 Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 81 Espanol ES 8 5 Descontaminaci n antes del env o Cuando env e el equipo en caso de reparaci n al servicio t cnico autorizado o en el caso de eliminaci n del mismo a su concesionario tenga en cuenta lo siguiente ADVERTENCIA Riesgo para la salud debido a la contaminaci n del dispositivo A 1 Tenga en cuenta las indicaciones del certificado de descontaminaci n Encontrar estas indicaciones como fichero PDF en nuestra p gina de Internet www eppendorf com decontamination 2 Descontamine todas las piezas que desee enviar Adjunte al env o el certificado de descontaminaci n completamente rellenado Mantenimiento 82 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Soluci n de problemas Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 83 Espanol ES 9 Solucion de problemas 9 1 Errores generales Error Causa posible Soluci n Los resultados de medici n no son precisos e Fecha de caducidad del reactivo excedida e Reactivo no preparado correctamente e Pipeteo incorrecto Desarrollo de la incubaci n antes de la medici n incorrecto e Cubeta sucia Cubeta no llenada completamente y sin burbujas con la so
75. est activado en los A par metros escaneo 0 170 Dye 1 0 25 1pMotyt ki Ji Navegue en el gr fico de un Oz Info tss FETTE punto de medici n a otro con 280 360 440 520 600 Nam y O X 260 Abs 0 268 Land Dilution EditiD Data Finish lt Back Next gt Datos adicionales tecla programable Datal Si se activaron los parametros correspondientes e Ratio A260 A280 y ratio A260 A230 e Valores de extinci n para 280 nm y 230 nm as como para la longitud de onda de medici n del colorante e Valor FOI e Valores de extinci n para las longitudes de onda de fondo En la medici n de prote nas marcadas con colorante no se indican las ratios y la FOI Indicaci n de resultados Bacterial density da measure samples OD 600 2010 07 02 14 20 39 e Resultado calculado con a extinci n en la longitud de onda de medici n e Si esta activado en los 0 846 parametros escaneo res Navegue en el gr fico de un punto de medici n a otro con yO A ond Dilution Edit 1D L J Finish lt Back _Next gt M todos 52 Espa ol ES Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Grupo de m todos Fotometr a Grupo principal Basic Indicaci n de resultados Explicaci n Factor standard An logamente a Protein direct UV v ase arriba Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con extinci n en la longitud de onda de medi
76. etas de microlitros medici n de prote na en vol menes de muestra en el rango de microlitros con un paso ptico de 1 mm con cubetas de microlitro como Eppendorf Cuvette G1 0 o Hellma TrayCell e Informaci n adicional acerca de la pureza de la prote na medida extinci n de la longitud de onda de fondo preajuste 320 nm la extinci n de la prote na pura deber a ser aqu aprox cero e Una correcci n de turbiedad parcial a trav s del par metro Background es posible e En la programaci n de m todos se importa el factor correspondiente mediante la simple selecci n de la prote na de una lista predeterminada La definici n de los factores se realiza por separado en las funciones del grupo Gen method param Diferentes prote nas est n preprogramadas en Gen method param Puede a adir otras prote nas m s Proteins with reagent e Determinaci n de la concentraci n de prote nas mediante medici n seg n reacciones de color y evaluaci n v a soluciones patr n o factor t pico evaluaci n con curva de soluci n patr n e Los m todos Bradford Bradford micro Lowry Lowry micro BCA y BCA micro ya est n preprogramados Seg n el fabricante del reactivo tal vez se tenga que modificar el par metro Curve fit tipo de curva de soluci n patr n 36 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Dye labels Para biomol culas marcadas con colorante determinaci n de la concentraci n de la biomo
77. factores que se introducen en los par metros Tambi n se pueden introducir n meros negativos 108 M todo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 12 8 Fluorimetria 12 8 1 RFU Relative Fluorescence Unit las unidades de fluorescencia relativa RFU son una medida para la fluorescencia medida A diferencia de los valores de absorbancia en la fotometr a las RFU no se pueden comparar de dispositivo a dispositivo sino que deben referirse siempre a est ndares de fluorescencia o concentraci n conocida 12 8 2 Blanco Todas las RFU se refieren siempre al ltimo blanco medido Una medici n en blanco es obligatoria por tanto al principio de cada serie de medidas y tambi n posible durante una serie de medidas En caso ideal la medici n en blanco deber a poder compensar todas las posibilidades de influencia en la RFU de la soluci n de medici n El blanco deber a medirse por tanto con el tamp n utilizado tambi n para la medici n de muestras as como en la misma cubeta salvo si las cubetas utilizadas para la medici n del blanco y de la muestra est n igualadas pticamente entre si es decir tienen la misma RFU en la longitud de onda de medici n 12 8 3 Evaluaci n con est ndar y curva recta est ndar diluci n La evaluaci n con un est ndar o con una curva recta est ndar es an loga a la evaluaci n de m todos fotom tricos ver Evaluaci n con factor o con soluci n patr n en p g 100
78. iNaci n o oooo oocoocooo eee eee eens 75 8 3 Comprobaci n del eqUuipO 2 ect eens 75 8 3 1 Comprobaci n de la unidad espectrom trica 2 2 eee eee 75 8 3 2 Comprobaci n de la unidad de fluorescencia 22 0 eee eee ee 79 8 3 3 Autocomprobaci n del equipo 2 eee teens 80 8 4 S stit ir TUSIDIES 2s Le o A AS 80 8 5 Descontaminaci n antes del envio 2 eee etn e eens 81 9 Soluci n de problemas eiii Siva wile Gils ne Ka lerne AA 83 9 1 Erf res generales 2 iss ns ee A A u He Es 83 9 2 Mensajes de error zusehen A Bra a A ak u ee Aue Se La de 85 9 3 Identificaciones d resultados cord 22 Bee Bis ans Sea hl ln des uber Br ds Bine a A A 89 10 Transporte almacenaje y eliminaci n oooooooocnonononononononococooco ooo 93 WO Transp rter se are ae a a Deo io 93 10 2 Almacen Mit vic A ee ne 93 10 35 ElMINACI N sra EAE RANN a e A oot ai 94 11 12 13 ndice Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Batos tecnicos 3 nee ee nee et 95 TEL Suministrorde corfiente curra ner Hate Be nn ee 95 11 2 Condiciones delentorniO resani 2 02 2220 er RR ar aye 95 11 3 PESO diMENSIONES ien E a ea ee et 95 11 4 Propiedades fotometricas 4 42 ee ea 3 Saree Be ae Dt 96 11 5 FOME 2 cst aie RN IA RE ROR eee PEG 96 11 6 Otros par metros tecni COS 4 020 save age tered ae ewes apa Er chee Wee abet fe Habe 97 11 7 Par metros de aplicaciOn oinn o
79. ieee eect ene tenn eee eens 98 Metodo derev luacion an ar A arena 99 12 1 Valores de extinci n sse sea ne aeea naai a essen nee a a eaa er nenn 99 12 1 1 Valor de blancd ue u nn ss EA 99 121 2 Correcci n de TOMO ici ia 99 12 1 3 Correcci n de cubeta 0 ec ee eet eee e eens 100 12 2 Evaluaci n con factor o con soluci n patr n 0 20 0 eee eee 100 12 3 Evaluaci n con curva linea recta de soluci n patrOn 0 eee eee 101 12 4 1 Dicta ae are re bes wae dak ede da 102 12 5 Procedimientos de evaluaci n especiales para cidos nucleicos y prote na UV 103 12 5 1 Correcci n A260 y Correcci n Aggy 1 22 nen nennen en cece een eae 103 12 5 2 Ratio A260 A280 y ratio A260 A230 2 2 22 eens 103 12 5 3 Conversi n en concentraciones molares y cantidades de cidos nucleicos 104 12 5 4 C lculo del factor para prote na en General Method Parameter 105 12 6 Procedimientos de evaluaci n especiales para los m todos de tinci n 106 12 6 1 C lculo del factor para el colorante a partir del coeficiente de extinci n 106 12 6 2 Calculo dela FO Le it at Aa 106 12 6 3 Conversi n a cantidades de colorante 0 eee eee eee ee 107 12 7 Dual w velength e a pi A een Ata 107 12 8 Fl orimetnia nen AAA e E 108 12 8 RR HR IE 108 125822 BIANCO sessed NN 108 12 8 3 Evaluaci n con est ndar y curva recta est ndar diluci n
80. imiento 8 1 Limpieza A PELIGRO Descarga el ctrica debido a la penetraci n de l quidos gt Apague el dispositivo y desench felo de la alimentaci n el ctrica antes de empezar los trabajos de limpieza o de desinfecci n gt No deje entrar ning n l quido al interior de la carcasa gt No efect e ninguna limpieza o desinfecci n por pulverizaci n en la carcasa S lo vuelva a conectar el dispositivo a la red el ctrica si est completamente seco por dentro y por fuera AVISO Corrosi n producida por productos de limpieza y desinfecci n agresivos gt No utilice productos de limpieza corrosivos ni disolventes agresivos o abrillantadores gt No incube los accesorios durante un tiempo prolongado en productos de limpieza o desinfectantes agresivos 1 Limpie las superficies con un pa o humedecido en un detergente suave Limpieza del compartimento de la cubeta 2 Limpie el compartimento de la cubeta nicamente con un bastoncillo de algod n libre de hilachas humedecido en etanol o isopropanol Evite que entre l quido en el compartimento de la cubeta Si fue necesario humedecerlo con agua para eliminar la suciedad debe utilizar un nuevo bastoncillo de algod n humedecido en etanol o isopropanol para acelerar el secado del compartimento de la cubeta En el lado interior izquierdo del compartimento de la cubeta se encuentra un vidrio que est montado directamente en el recorrido ptico Limpie el vidrio cui
81. inicializar la e Impresora mal configurada gt Configurar la impresora nuevamente impresora Los ajustes de la impresora para una configuraci n correcta est n especificados en la descripci n de la instalaci n ver Conexi n de la impresora al puerto USB en pag 20 Medici n de e La soluci n de blanco utilizada para la Comprobar la soluci n de blanco y blancos la intensidad en uno de los p xeles con influencia sobre una longitud de onda principal secundaria o de medici n del blanco tiene una extinci n demasiado alta Soluci n de blanco turbia o equivocada En escaneos el rango de longitudes de onda es demasiado grande ya que la muestra absorbe fuertemente en medir el blanco nuevamente dado el caso En escaneos adaptar el rango de longitudes de onda al espectro de la muestra escaneo es una parte del rango de longitudes de demasiado baja onda Medici n de e La soluci n de blanco utilizada para la gt Comprobar la soluci n de blanco y blancos la emisi n en la longitud de onda de medici n es demasiado alta medici n del blanco tiene una fluorescencia demasiado alta Soluci n de blanco turbia o equivocada medir el blanco nuevamente Soluci n de problemas Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Sintoma mensaje El nombre introducido no es v lido Causa e Error en la entrada de nombres Diversas causas son posibles Para determinar la ca
82. ioSpectrometer fluorescence Espanol ES Instalaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 19 Espanol ES 4 Instalacion 4 1 Preparaci n de la instalaci n Guarde la caja de cart n y el material de embalaje para un eventual almacenaje o para un posterior transporte seguro Compruebe la integridad del suministro en base a los datos referentes al alcance de suministro ver Alcance de suministro en p g 15 Compruebe que ninguna pieza presente da os de transporte 4 2 Seleccionar ubicaci n Seleccione el lugar de emplazamiento del BioSpectrometer fluorescence seg n los siguientes criterios 2 enchufes con toma de tierra para el BioSpectrometer fluorescence y para la impresora Mesa de laboratorio fija con tabla de trabajo horizontal Espacio requerido por el equipo 50 cm de ancho con impresora 75 cm 50 cm de profundidad e Temperatura 15 C a 35 C e Evite fluctuaciones de temperatura p ej debido a ventanas abiertas e Evite la luz solar directa e Humedad 25 al 70 de humedad relativa O Preste atenci n de que no se encuentren objetos debajo del equipo p ej hojas sueltas cuadernos que puedan obstaculizar el suministro de aire 4 3 Conexi n del equipo a la red el ctrica 1 Coloque el BioSpectrometer fluorescence sobre una superficie de trabajo apropiada 2 Cerci rese de que la tensi n de la red y la frecuencia de la red coincidan con las indicaciones en la placa de caracter s
83. ir la muestra nuevamente bajo condiciones en las que el resultado se encuentre dentro del rango de las concentraciones de soluci n patr n diluir la muestra o modificar las concentraciones de soluci n patr n y volver a medir Soluci n de problemas Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Sintoma mensaje El coeficiente de determinaci n es lt 0 8 Causa e En m todos con evaluaci n de series de soluci n patr n v a m todos de regresi n el coeficiente de determinaci n para la evaluaci n de regresi n indica que hay una desviaci n considerable de los puntos de medici n de la recta de regresi n e Turbiedades en la soluci n de medici n e Mediciones en los l mites del campo de medida fotom trico Ayuda gt Aceptar el resultado de la evaluaci n de soluci n patr n o medir las soluciones patr n nuevamente Prestar atenci n de que las soluciones de medici n sean claras El coeficiente de determinaci n para la evaluaci n de regresi n de la serie de soluci n patr n es lt 0 8 En m todos con evaluaci n de series de soluci n patr n v a m todos de regresi n la advertencia aparece despu s de mediciones de muestras cuando la evaluaci n de regresi n de la serie de soluci n patr n no fue lineal pero el usuario acepta la evaluaci n de la soluci n patr n Utilizar los resultados de las muestras con la reserva mencionada o medir la serie de
84. isponible cuando los ajustes de IP se realizan autom ticamente por DHCP Los siguientes ajustes de DNS pueden introducirse manualmente Servidor DNS primario Servidor DNS secundario Teclas programables e MAC Info informaci n sobre ajustes de red Savel guardar las modificaciones y retornar a la selecci n de funciones e Cancel retornar a la selecci n del grupo de par metros sin ninguna modificaci n 70 Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES E Mail Settings SMTP server mailserver example com Port 25 Sender e mail address biospec example com use SMTP authentication Nearnane Password ed Recipient e mail address gmailOexample com jv Test ABC Save Cancel ETA E Mail Addresses E mail address Edit New Delete OK Region Europe dl T City Berlin KA Current time 2015 06 04 10 16 00 Manual time setting Date 2015 06 04 YYYY MM DD Time 10 15 10 HH MM SS ONetwork time Time server pool ntp org Lt tS save Jl cancer 7 1 5 Device Calibration Email Settings Pregunte a su administrador de red sobre qu ajustes son necesarios Servidor SMTP introducir servidor de e mail e Introducir puerto Emisor introducir nombre de equipo e Utilizar autentificaci n SMTP si fuera necesaria una autentificaci n debe introducirse un nombre de usuario y una contrase a e Direcci n de e mail de
85. l recorrido ptico a trav s del equipo Determinaci n del error de medici n aleatorio de una se al en el sensor de referencia Determinaci n de la altura de la se al en el sensor de referencia Determinaci n separada de la intensidad de la luz en la parte ultravioleta del espectro Determinaci n del error de medici n sistem tico y aleatorio de la longitud de onda Posici n de un pico de intensidad en la parte ultravioleta del espectro Precisi n de la posici n de un pico de intensidad en la parte ultravioleta del espectro Determinaci n del error de medici n aleatorio de la luz de excitaci n ruido err tico Determinaci n de la altura y desviaci n de la se al de la luz emitida Seleccione en el grupo Device calibration la funci n Perform selftest y conf rmelo con enter Una vez transcurrida la autocomprobaci n el indicador muestra el siguiente mensaje PASSED Si el indicador muestra el mensaje FAILED la autocomprobaci n ha fallado Si este error no se deja solucionar ver Mensajes de error en p g 85 dir jase al servicio t cnico de Eppendorf 8 4 Sustituir fusibles IN PELIGRO Descarga el ctrica gt Apague el dispositivo y desconecte el enchufe de la red antes de empezar con el mantenimiento o la limpieza El portafusible se encuentra entre la hembrilla de conexi n a la red el ctrica y el interruptor de la red Extraiga el conector de red Pr
86. l cula cido nucleico o prote na mediante medici n a 260 y o 280 nm y del colorante en un solo procedimiento de medici n e Evaluaci n con factor Aparte de la biomol cula tambi n se pueden medir paralelamente hasta dos colorantes a dos distintas longitudes de onda e Adem s evaluaci n de la frecuencia de incorporaci n del colorante FOI Selecci n entre dos diferentes m todos de c lculo de FOI e M todos ya preprogramados ssDNA marcado con Cy 3 y o Cy 5 e La correcci n de la influencia del espectro del colorante sobre la exactitud de la medici n de las biomol culas es posible e Una correcci n de turbiedad parcial a trav s del par metro Background es posible e Informaci n adicional acerca de la pureza de las sustancias medidas ratio A260 A280 y ratio A260 A230 valores de ratio solamente para cidos nucleicos espectro de longitudes de onda de extinci n e En la programaci n de m todos se importan diversos par metros correspondientes como longitudes de onda de medici n y factores de evaluaci n a partir de unas listas predeterminadas mediante simple selecci n de la biomol cula y del colorante La definici n de estos par metros se realiza por separado en las funciones del grupo Gen method param Diferentes cidos nucleicos prote nas y colorantes est n preprogramados en Gen method param Puede a adir otros cidos nucleicos prote nas y colorantes m s S lo para cidos nucleicos marcados una
87. l quido y vapores agresivos e El filtro est colocado de modo que la etiqueta adhesiva con el nombre del filtro est frente al detector Comprobaci n de la unidad espectrom trica la etiqueta adhesiva queda hacia delante Comprobaci n de la unidad de fluorescencia la etiqueta adhesiva queda hacia la derecha e El compartimento de la cubeta est libre de suciedad 8 3 1 Comprobaci n de la unidad espectrom trica Para comprobar la exactitud fotom trica y la veracidad de las longitudes de onda Eppendorf ofrece un juego de filtros juego de filtros de referencia BioSpectrometer El juego contiene un filtro de blanco AO y tres filtros A1 A2 y A3 para comprobar la exactitud fotom trica as como 3 filtros para comprobar la veracidad de las longitudes de onda en el rango de 260 nm a 800 nm Las extinciones de los filtros se miden compar ndolos con el filtro de blanco AO Adem s de la informaci n sobre la exactitud tambi n recibir informaci n sobre la precisi n a partir de las 15 mediciones por cada longitud de onda no solamente se calcula el valor medio sino tambi n el coeficiente de variaci n cv Para la medici n inserte primero el filtro de blanco para la medici n del blanco y luego inserte los filtros de prueba y las cubetas en el compartimento de la cubeta Los valores de extinci n medidos para los filtros de prueba son comparados con el margen de valores permisible Los valores l mite para el margen de valores p
88. l receptor lista con direcciones de e mail Edici n de direcciones de e mail Seleccione Edit de la lista desplegable y confirme con enter Se abre una ventana en la que pueden editarse las direcciones de e mail Teclas programables Edit editar direcci n de e mail e New crear nueva direcci n de e mail Delete borrar direcci n de e mail Date and Time Settings e Seleccionar regi n e Seleccionar ciudad e Indicaci n de la hora actual e Ajuste manual de la hora introducir fecha y hora Hora de la red Servidor horario introducir servidor horario deseado Teclas programables Savel guardar las modificaciones y retornar a la selecci n de funciones e Cancel retornar a la selecci n del grupo de par metros sin ninguna modificaci n La comprobaci n del equipo est descrita por separado ver Comprobaci n del equipo en p g 75 7 1 6 Functions Main Groups Info Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device settings Device calibration Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 71 Espanol ES Bajo el punto de men Copyright encontrar informaci n sobre licencias para software de fuentes abiertas e informaci n sobre marcas registradas Funciones 72 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Mantenimiento Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 73 Espanol ES 8 Manten
89. las plantillas de m todos ya est n preprogramados en el momento de la entrega Los dos grupos principales Photometry y Fluorimetry est n divididos en subgrupos Mothod Selection Main Groups Sub Groups dsDNA 1mm ssDNA D RNA Oligo lt New Method gt MEA E Loans Jf Paste M todos protegidos Los m todos m s importantes de la biolog a molecular Pueden contra escritura modificar los par metros pero luego solamente guardarlos bajo un nuevo nombre de m todo M todos no Pueden modificar los par metros de cualquier forma y despu s de protegidos contra guardarlos pueden empezar directamente con la medici n escritura Plantillas para Cada grupo de m todos contiene una plantilla que ya est m todos nuevos EA preprogramada con juegos de par metros completos para facilitar la programaci n de m todos nuevos Los par metros se pueden modificar sin ninguna restricci n y luego guardar bajo un nombre nuevo Para llamar un m todo seleccione con las teclas de cursor primero el grupo principal luego el subgrupo y finalmente el m todo Conf rmelo con enter Tab 6 1 M todos fotom tricos Absorbance M todos para mediciones de extinci n r pidas y sencillas sin evaluaciones adicionales Routine M todos de la biolog a molecular utilizados con frecuencia Los m todos est n preprogramados fijamente Una modificaci n de par metros es posible guardando el
90. luci n de medici n Turbiedades en la soluci n de medici n El espectrofot metro deriva e Compartimento de la cubeta sucio Fluorimetr a las sustancias perturbadoras refuerzan o debilitan la se al de fluorescencia Fluorimetr a la cubierta del compartimento de la cubeta est abierta gt Cerci rese de que el reactivo a n no haya caducado y que sea preparado correctamente gt Utilice para la preparaci n si es que se necesita agua desmineralizada limpia que tenga la calidad adecuada gt Cerci rese de que la pipeta est calibrada y que pipetee correctamente gt Si el m todo requiere una incubaci n antes de la medici n aseg rese de que la temperatura y la duraci n de la incubaci n sean respetadas exactamente gt Limpie y lave la cubeta Preste atenci n al cambiar la cubeta que la ventana ptica de la cubeta no se ensucie y no sea tocada con los dedos Si la ventana de la cubeta est manchada con huellas dactilares limpiela mediante frotamiento con un pa o libre de pelusa humedecido en etanol o isopropanol Cerci rese de que se alcance el volumen m nimo de la cubeta que se requiere para una medici n y que la soluci n de medici n no contenga burbujas Centrifugue las soluciones de medici n turbias que contengan part culas y utilice el sobrenadante claro Dir jase al servicio t cnico de Eppendorf At ngase a las condiciones ambientales prescritas
91. m todo bajo un nombre nuevo Basic M todos para la evaluaci n de mediciones de extinci n con factor soluci n patr n o curva l nea recta de soluci n patr n Advanced M todos para la evaluaci n de procedimientos de medici n de dos longitudes de onda Favorites En Favorites puede crear sus propias carpetas con lt New Folder gt y copiar los m todos frecuentemente utilizados a estas carpetas para poder acceder a estos m todos con m s rapidez 34 Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Tab 6 2 M todos fluorim tricos Routine Mediciones fluorim tricas de cidos nucleicos y prote nas con los reactivos de la empresa Invitrogen Es posible que se requiera una licencia de la empresa Molecular Probes Inc Eugene OR EE UU o de la empresa Invitrogen Corporation Carlsbad CA EE UU para la realizaci n de estos procedimientos Basic e M todos para la evaluaci n de mediciones de fluorescencia con soluci n patr n o curva l nea recta de soluci n patr n e M todo Raw fluorescence para la medici n r pida de la fluorescencia sin ninguna evaluaci n En todas las carpetas puede crear nuevos m todos con lt New Method gt En Favorites puede crear sus propias carpetas p ej para una asignaci n orientada a personas renombrarlas y borrarlas Tab 6 3 Teclas programables en la selecci n de m todos Cut y Paste Recortar e insertar m todo
92. n concentraci n En funci n del m todo y del ajuste de los par metros solamente se proporcionan los paquetes de datos disponibles respectivamente 60 M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Selecci n de resultados de muestra individuales Seleccionar muestras e Presione la tecla programable Samples para llamar la selecci n de muestras 01 0 000 Azs 01 0 33mg mL e Navegue con las teclas de cursor y confirme con 02 1 34mg mL enter 03 0 33mg mL 04 0 89mg mL 05 0 11mg mL Sample selection Teclas programables Select alll seleccionar todas las muestras u e De Sel all deseleccionar todas las muestras Prit Export Select all De sel alll OK Cancel Inicio de exportaci n Los datos se transmiten como archivo Excel xls o PDF Los archivos Excel se pueden leer con versiones de Excel a partir de 97 Para cada uno de los paquetes de datos seleccionados se crear una hoja de c lculo en el programa Excel El nombre del archivo est compuesto por el nombre del m todo la hora y la fecha de la serie de mediciones Seleccionar la variante de exportaci n Navegue con las teclas de cursor y confirme con Select an export method O Export to external storage medium enter OExport to PC A Exportar a un soporte de almacenamiento email example com externo guardar los datos en una memoria USB Si no hay conectada una memoria USB
93. na descripci n detallada de todos los m todos Wizard el wizard en el borde superior de la pantalla le guiar paso a paso a trav s del procedimiento del m todo Cuadro de ayuda en cada paso del procedimiento aparecen textos de ayuda en la parte inferior derecha de la pantalla Teclas programables con las teclas programables lt Back y Next gt se desplaza un paso hacia adelante O hacia atr s dentro del wizard Compruebe los ajustes de los par metros Con las teclas programables Page dn y Page up llama las p ginas de la lista de par metros Con Edit modifica y guarda los par metros Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 29 Espanol ES 5 3 2 3 Mediciones de blancos y soluciones patr n O En una evaluaci n sin soluciones patr n p ej mediciones de ADN no se requiere este paso de m todo min 1 Mida primero un blanco tecla blank 2 Luego mida sucesivamente todas las soluciones Conc Abs Linear regression x atr n tecla standard Di patr n En el indicador est marcada la siguiente soluci n m patr n que se tiene que medir Con las teclas programables Graph y o Table puede cambiar la 50 visualizaci n de resultados Standard 2 2 Standard 3 500 Measure blank Sande 4 en E Last Gal Curve Fit Graph Abort lt Back Next gt gt Con Next acepta la evaluaci n calculada a partir de los resultados de las soluciones patr n
94. na nueva entrada en la lista en General Method Parameter para poder recurrir a ella al programar un nuevo m todo Intervalo de zoom inv lido En el proceso de zoom con entrada libre de l mites tecla programable Free e Los valores han caido por debajo de los l mites inferiores del intervalo de zoom Introduzca los valores de tal forma que el intervalo no caiga por debajo de los l mites del rango de 0 02 A y 10 nm Las concentraciones de soluci n patr n introducidas no ascienden y o descienden mon tonamente Por favor corregir las concentraciones de soluci n patr n e V ase el texto de error gt Introducir las concentraciones de soluci n patr n de tal forma que la primera soluci n patr n obtenga la concentraci n m s baja y las siguientes concentraciones de soluci n patr n formen una secuencia ascendente Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Soluci n de problemas 87 Espanol ES Sintoma mensaje Por lo menos dos concentraciones de soluci n patr n son id nticas Por favor corregir las concentraciones de soluci n patr n Causa e V ase el texto de error Ayuda Introducir las concentraciones de soluci n patr n de tal forma que la primera soluci n patr n obtenga la concentraci n m s baja y las siguientes concentraciones de soluci n patr n formen una secuencia ascendente Los valores de medici n no son estrictamente mon
95. nee nee 37 6 3 Descripci n de m todos fluorimetria 2 0 0 tenes 37 6 3 1 Grupo de M todos rutinad 2 ee recae 37 6 3 2 Grupo de m todos Basic 1 1 enaner 38 6 4 Par metros de m todo 0 eee tte n ene e tte nee 38 6 5 Pasos de Metod OS secese aai esee E rs ee Re 43 6 5 1 Check paramet Sinnen AA en i pea aed 44 6 5 2 measure st nd rds 2 u Hu A E che pd E E E SE 45 6 5 3 Mmeas re samples oeae aeea kiea 000 Geta en en ee a een 46 6 5 4 measure samples indicaciones de resultados 2 00 eee eee eee eee 48 6 5 5 PFOCESSAFESUITS su een ee ee ee Gon Hoenn Gee Be i bok 54 6 5 6 process results OPCIONES 1 neuan nra 56 6 5 7 Print GX A o ns ede Gee ee ees 59 6 5 8 Finalizar la serie de mediciones 2 2 0 eee eee 62 TO CRUNCIONGS wide ek eee Ges A ee Pe I DE es ee LH LER 63 7 1 Funciones del grupo principal User 2 2 2 eee nee 63 7 1 1 Results Memory ii re ale ne aed ea Ge bag 64 7 1 2 General Method Parameters 0 0 cece eects 65 7 1 3 Absorbance Spectra Library si eiei e n o ee eee 68 TAA Device Settings causes sav webs nr N cased dee pei pe ee 68 719 gt Device Calibration uti re ah es wa te geet 70 7 126 NFOs A A AA A A 71 8 Mantenimientos lcd race anne Da taa et eaves eye Di art 73 8 1 Limpieza ii iS A na 73 8 1 1 Limpieza de la cubierta del compartimento de la Cubeta o ooooo o 74 8 2 Desinfecci n DescontaM
96. ntoma mensaje La curva est ndar no es mon tona Por favor seleccionar otro Curve Fit Causa e En la evaluaci n de una curva de soluci n patr n con los m todos Curve Fit spline interpolation quadratical regression o cubical regression no se obtuvo ning n resultado aprovechable Ayuda gt Seleccionar otro m todo Curve Fit Algunos valores de extinci n en longitudes de onda secundarias son demasiado altos y no son indicados e En por lo menos una longitud de onda secundaria la extinci n se encontraba por encima del campo de medida Las longitudes de onda secundarias no se utilizan para el c lculo del resultado de concentraci n sino para otros fines Por ejemplo el m todo dsDNA extinci n a 280 nm para el c lculo de Ratio 260 280 Turbiedades en la soluci n de medici n e Mediciones en los l mites del campo de medida fotom trico gt Cuando los valores de extinci n de las longitudes de onda secundarias son relevantes diluir la muestra y o eliminar la turbiedad por medio de centrifugaci n y repetir la medici n El resultado se encuentra fuera del rango de las concentraciones de soluci n patr n e En m todos con evaluaci n v a curvas de soluci n patr n m todos de evaluaci n no lineales el resultado de la muestra se encuentra fuera del rango de las concentraciones de soluci n patr n por un valor de hasta 5 gt Aceptar el resultado de medici n o med
97. o 10 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Instrucciones generales de seguridad Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 11 Espanol ES 2 Instrucciones generales de seguridad 2 1 Uso de acuerdo con lo previsto El campo de aplicaci n del BioSpectrometer fluorescence son los laboratorios de investigaci n especializados en biolog a molecular bioqu mica y biolog a celular El BioSpectrometer fluorescence est dise ado exclusivamente para el uso en interiores Se tienen que respetar los requisitos de seguridad espec ficos de cada pa s para el uso de equipos el ctricos en laboratorios El BioSpectrometer fluorescence sirve para la determinaci n fotom trica de la concentraci n de analitos en l quidos y para el registro de espectros de longitudes de onda de extinci n en cubetas Adem s se pueden realizar mediciones de fluorescencia para la cuantificaci n de biomol culas Utilice exclusivamente accesorios de Eppendorf o accesorios recomendados por Eppendorf 2 2 Requerimiento para el usuario El equipo y los accesorios s lo pueden ser manejados por personal cualificado Antes de la utilizaci n lea cuidadosamente el manual de instrucciones y las instrucciones de uso de los accesorios y familiaricese con el funcionamiento del equipo 2 3 Peligros durante el uso previsto 2 3 1 Danos personales Y PELIGRO Descarga el ctrica debido a la penetraci n de l quidos IN gt Apague el dispositivo y desench f
98. o cero 101 102 Metodo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 0 Utilice para lineas rectas de calibraci n el m todo linear regression Pruebe en trayectos en curva qu m todo de evaluaci n regresi n cuadr tica regresi n c bica interpolaci n spline resulta ser la funci n mejor adecuada para la evaluaci n de soluci n patr n La interpolaci n spline une los puntos de medici n por medio de polinomios c bicos mientras que los m todos de regresi n colocan una funci n cuadr tica y o c bica de tal modo entre los puntos de medici n que para los puntos de medici n resulten unas desviaciones relativamente peque as de la funci n En los m todos de regresi n tambi n se muestra el coeficiente de determinaci n coefficient of determination como medida para la dispersi n de los puntos de medici n en torno a la funci n calculada aparte de la ecuaci n de regresi n calculada Con un valor de lt 0 8 para el coeficiente de determinaci n el resultado estar provisto de una advertencia Si la primera soluci n patr n tiene la concentraci n 0 seleccione el ajuste para que la l nea recta de regresi n curva de regresi n pase por el punto cero En caso de que ninguno de los m todos recomendados para trayectos en curva produzca resultados satisfactorios seleccione el m todo linear interpolation 12 4 Diluci n Las diluciones introducidas en el paso de m todo measure
99. o de la cubeta gt Limpie el compartimento de la cubeta nicamente con un bastoncillo de algod n h medo ver Limpieza en p g 73 gt No deje que ning n l quido entre en el compartimento de la cubeta gt No toque el interior del compartimento de la cubeta con los dedos 2 4 Indicaciones relativas a la responsabilidad del producto Los siguientes casos pueden reducir la protecci n prevista del aparato La entidad explotadora asume entonces la responsabilidad por las lesiones personales y da os materiales producidos El equipo no es utilizado de acuerdo con lo especificado en el manual de instrucciones El equipo no es utilizado de acuerdo con lo prescrito El equipo se utiliza con accesorios o consumibles no recomendados por Eppendorf e El equipo es mantenido o reparado por personas que no han sido autorizadas por Eppendorf AG El usuario realiza modificaciones no autorizadas en el equipo 2 5 Indicaciones de seguridad en el equipo Representaci n Significado Lugar peligroso gt Tenga en cuenta el manual de instrucciones Lugar Parte trasera del equipo Ger t nach dem ffnen justieren Adjust device after opening Si se abre el equipo tiene que ser calibrado nuevamente gt No abrir el equipo Lado inferior del equipo 3 Descripci n del producto Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Descripcion del producto 3 1 Ilustraci n general
100. ol ES Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 23 Espanol ES 5 Manejo 5 1 Visi n general de los elementos de control Imag 5 1 Elementos de control del BioSpectrometer fluorescence 24 Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Tecla Funci n Teclado introducci n de texto y n meros Teclas 1 a 9 y O durante la introducci n de texto usted tambi n puede introducir letras y caracteres especiales aparte de n meros mediante pulsaci n repetida de una tecla Alternativamente puede conmutar a un teclado superpuesto con Keyboard 000 ERIT Fuera de los campos de entrada llamar la selecci n de m todos Fuera de los campos de entrada llamar la selecci n de funciones Edit a Tecla programable selecci n de funciones La asignaci n de la tecla cambia con el di logo del software La funci n actual es indicada en el indicador directamente encima de la tecla Mover el cursor hacia la izquierda derecha hacia arriba y hacia abajo Navegar entre los campos de entrada e Teclas de cursor y dentro de un campo de entradas navegar dentro de una secuencia de caracteres Teclas O y dentro de una indicaci n de resultados navegar entre los resultados de una serie de mediciones e Teclas y dentro de un gr fico navegar en el eje x del gr fico para p ej indicar los valores de extinci n dependientes de la longitud de onda en un e
101. orf o por un uso incorrecto Eppendorf queda eximido de cualquier responsabilidad o garant a gt Utilice exclusivamente accesorios y piezas de recambio recomendados por Eppendorf 2 3 2 Instrucciones generales de seguridad Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 13 Espa ol ES Da os en el equipo E AVISO Da os por sustancias qu micas agresivas gt De ninguna manera utilice sustancias qu micas agresivas como por ejemplo bases fuertes o d biles cidos fuertes acetona formaldeh dos hidr geno halogenado o fenol con el dispositivo y sus accesorios gt Limpie el dispositivo inmediatamente con un producto de limpieza suave en caso de una contaminaci n con una sustancia qu mica agresiva AVISO Da os en el dispositivo por fumigaci n con sustancias qu micas agresivas gt No realice ninguna desinfecci n en el dispositivo por medio de fumigaci n AVISO Corrosi n producida por productos de limpieza y desinfecci n agresivos gt No utilice productos de limpieza corrosivos ni disolventes agresivos o abrillantadores gt No incube los accesorios durante un tiempo prolongado en productos de limpieza o desinfectantes agresivos AVISO Da os en los componentes electr nicos debido a la formaci n de condensaci n Despu s de transportar el dispositivo de un entorno fr o a un entorno m s caliente se puede formar l quido de condensaci n en el dispositivo gt Despu s de emplaz
102. os deseados en el paso de m todo print amp export al final de la serie de mediciones e imprimirlos Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 43 Espanol ES 6 5 Pasos de metodos Bradtord Sock parameters a Ep El asistente Wizard en el borde superior de la pantalla le guiar a trav s de los pasos del m todo El q tomm aii paso de m todo activo est resaltado Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off ed rape un Pago dn Abort ll Bs Next gt Un m todo comprende un m ximo de 5 pasos El paso activo es resaltado pticamente Despu s del ltimo paso print amp export de una serie de mediciones se ofrece como paso adicional el inicio de una nueva serie de mediciones Esta comienza de nuevo con la medici n de las muestras Paso de m todo Explicaci n check parameters Comprobar los par metros del m todo Realizar una modificaci n en caso necesario measure standards Solo en m todos con una evaluaci n de soluciones patr n Medir y evaluar soluciones patr n Alternativamente es posible utilizar la ltima evaluaci n de soluciones patr n guardada measure samples Medici n de muestras process results Solo en algunos m todos retocar los resultados p ej zoom de ampliaci n reducci n de gr ficos de escaneos print amp export Reunir los paquetes de datos para la impresi n o exportaci n de los datos
103. otometr a de atr s hacia adelante Haz de luz de la fluorimetr a de derecha a izquierda 9 2 Mensajes de error Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Soluci n de problemas 85 Espa ol ES Las indicaciones de mensajes de error se pueden abandonar pulsando la tecla programable OK Los errores de sistema requieren una evaluaci n por parte del servicio t cnico Estos errores son visualizados en ingl s System error En estos casos dir jase por favor al servicio t cnico Otros mensajes de error en los que usted mismo puede tomar medidas para su soluci n est n explicados en la siguiente tabla S ntoma mensaje Fallo en la autocomprobaci n Causa e La cubierta del compartimento de la cubeta estaba abierta durante la autocomprobaci n El compartimento de la cubeta no estaba vac o durante la autocomprobaci n Ayuda gt Repita la autocomprobaci n con el compartimento de la cubeta vacio y cerrado e El equipo est defectuoso Dirijase al servicio t cnico de Eppendorf No fue posible exportar el fichero En la exportaci n de datos Memoria USB mal formateada o defectuosa Memoria USB extra da demasiado temprano del equipo durante la exportaci n Formatear la memoria USB de nuevo o reemplazarla Volver a conectar la memoria USB y repetir la exportaci n No fue posible e Impresora no conectada o apagada Conectar la impresora y encenderla
104. pezar los trabajos de limpieza o de desinfecci n gt No deje entrar ning n l quido al interior de la carcasa gt No efect e ninguna limpieza o desinfecci n por pulverizaci n en la carcasa S lo vuelva a conectar el dispositivo a la red el ctrica si est completamente seco por dentro y por fuera 1 Limpie el aparato con un detergente suave antes de la desinfecci n ver Limpieza en p g 73 2 Seleccione un m todo de desinfecci n que cumpla con las determinaciones legales y directrices vigentes para su rea de aplicaci n 3 Utilice p ej alcohol etanol isopropanol o desinfectantes que contengan alcohol 4 Limpie las superficies con un pa o que haya humedecido previamente con un desinfectante suave Si es necesario desmontar la tapa del compartimento de la cubeta para realizar la desinfecci n debe proceder de la manera descrita para desmontar y montarla ver Limpieza de la cubierta del compartimento de la cubeta en p g 74 6 Puede desinfectar la tapa desmontada del compartimento mediante desinfecci n por pulverizaci n 8 3 Comprobaci n del equipo Condiciones e Atenerse a las condiciones ambientales ver Condiciones del entorno en p g 95 e Realizar la comprobaci n a aprox 20 C Evitar fluctuaciones de temperatura p ej debido a ventanas abiertas Solo extraer el filtro brevemente de su caja y protegerlo contra contaminaci n o deterioro e Proteger el filtro contra polvo calor
105. po Routine preprogramados por Eppendorf e Cancel salir del modo de edici n sin guardar los cambios Guardar el m todo bajo un nombre nuevo Puede guardar el m todo o bien en la misma carpeta de donde llam el m todo o bien en el grupo de m todos Favorites en una carpeta libremente seleccionable Puede introducir el nombre m ximo 20 caracteres a trav s de un teclado superpuesto tecla programable Keyboardl o directamente a trav s del teclado ver Introducci n de texto en p g 25 Despu s de guardar los datos retornar a la pantalla check parameters 6 5 2 measure standards A measure standards new Conc Abs Linear regression pg mL Asos not calculated Standard 1 100 Sane 8 Standard 2 250 x Standard 3 500 x erca A Las Curve Fit Graph Jl Abort Jl lt Back Jl Nex Teclas programables Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 45 Espanol ES La primera soluci n patr n a medir est marcada en la pantalla Despu s del blanco tecla blank mida todas las soluciones patr n una tras otra tecla standard Si mide m s de una r plica por soluci n patr n se calcular y mostrar autom ticamente la media para cada soluci n patr n Con las teclas de cursor O y tambi n puede seleccionar unas soluciones patr n determinadas para la medici n Una nueva medici n de soluciones patr n individuales tambi n es posible de est
106. po de m todos Dye labels Correcci n de la influencia del espectro del colorante sobre la extinci n en la longitud de onda de medici n de la biomol cula 260 y o 280 nm Los espectros de los colorantes tienen en parte una extinci n reducida a 260 y 280 nm Estas extinciones falsifican los c lculos para los cidos nucleicos y o las prote nas de estos m todos Para minimizar esta falsificaci n se utilizan factores de correcci n siempre y cuando estos se conocen para los respectivos colorantes Si el par metro es activado el factor de correcci n es importado de la funci n General Method Parameters Dyes Correct A 280 1 Selecci n on off S lo para el grupo de m todos Dye labels Para la explicaci n v ase la descripci n del par metro arriba mencionado Correct A 260 1 Dye 2 active Selecci n on off S lo para el grupo de m todos Dye labels Existe la posibilidad de medir paralelamente un segundo colorante Aplicaci n marcaci n de una biomol cula con dos colorantes Dye 2 Selecci n Lista de los colorantes que est n incluidos en la funci n General Method Parameters Dyes S lo para el grupo de m todos Dye labels en la medici n de 2 colorantes Selecci n del segundo colorante vgl Parameter Dye 1 Correct A260 2 Selecci n S lo para el grupo de m todos Dye labels en la medici n de 2 on off colorantes An logamente al par metro Correct A 260 1 Corre
107. resultado se puede evaluar con un factor una soluci n patr n o una serie est ndar e Los m todos para el c lculo v a subtracci n as como v a divisi n y la evaluaci n posterior con factor est n preprogramados 6 3 Descripci n de m todos fluorimetr a 6 3 1 Grupo de m todos rutina Los m todos del grupo Routine est n preprogramados como m todos fijos Despu s de modificar los par metros de m todo en los m todos preprogramados debe adjudicarse un nuevo nombre para el m todo Los siguientes m todos preprogramados se basan en las especificaciones de trabajo de la empresa Invitrogen para el reactivo correspondiente La realizaci n de este proceso podr a requerir una licencia de la empresa Molecular Probes Inc Eugene OR EE UU o Invitrogen Corporation Carlsbad CA EE UU cidos nucleicos Detecci n fluorim trica de la concentraci n de cidos nucleicos tras la reacci n con reactivos e Medici n de ADN con PicoGreen evaluaci n de curva recta est ndar e Medici n de ARN con RiboGreen evaluaci n de curva recta est ndar e Medici n de oligonucle tidos con OliGreen evaluaci n de curva recta est ndar Las variantes del programa de m todos se han programado como short methods En short methods puede medir con s lo dos est ndares el est ndar cero y otro est ndar Los resultados no son tan precisos como en la medici n con varios est ndares sin embargo la exactitud es suficiente para muchos fin
108. results D dsDNA 2010 07 09 15 07 35 dsDNA 2010 07 08 11 02 35 dsDNA choose measurement series parameters sample results Cuvette 10 mm Page 1 2 Unit g mL Molar Unit pmol mL Factor 50 Decimal places 1 A260 A280 on A260 A230 ot Autoprint off he de Dre para a ers Lo Page uj Page dn Abort lt Back Next gt gt Seleccione en la columna derecha el m todo cuyos resultados guardados desea consultar gt Confirmelo con enter gt Seleccione la serie de mediciones deseada con ayuda de las teclas de cursor Confirmelo con enter Igual como en los pasos de un m todo usted aqu tambi n puede navegar por orden a trav s de los indicadores de los par metros de las soluciones patr n de los resultados de muestras y finalmente a trav s de los paquetes de datos para la impresi n y exportaci n La asignaci n de las teclas programables se corresponde con la asignaci n en los pasos del m todo dsDNA parameters DNA 2012 06 29 155728 Data packets Samples Results Data OGraph Graph data not for printing Method GParameters sample results print 4 export Print_ Jl Export Samples Finish lt Back Nox gt 7 1 2 General Method Parameters Functions Main Groups Sub Groups Functions Proteins Nucleic acids General Method Parameter Dye name
109. s Copy y Paste Copiar e insertar m todos Delete Borrar m todos Rename Renombrar m todos Puede insertar los m todos copiados o recortados o bien en otra carpeta bajo Favorites o bien bajo un nombre nuevo en la carpeta original Navegue con las teclas de cursor a la columna Methods de la carpeta deseada y pulse paste para insertar el m todo 6 2 Descripci n de m todos fotometria En este capitulo se describen los m todos y las plantillas de m todos preprogramados 6 2 1 Grupo de m todos Absorbance Single A e Medici n de extinci n en una sola longitud de onda e Ninguna evaluaci n posterior Multi A e Mediciones de extinci n en dos a seis longitudes de onda e Ninguna evaluaci n posterior Scan e Medici n de un espectro de longitudes de onda de extinci n a lo largo de un rango de longitudes de onda definido e Indicaci n de longitud de onda y extinci n en el espectro mediante navegaci n con un cursor de longitudes de onda e La modificaci n de la secci n del espectro a trav s de 3 diferentes variantes de zoom es posible e Detecci n de pico Peak posible Metodos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 6 2 2 Grupo de m todos Routine Los m todos del grupo Routine est n preprogramados como m todos fijos Por ello despu s de la modificaci n de par metros de m todos en los m todos preprogramados de manera fija se tiene que otorgar un nombre de m todo nuevo Nu
110. samples son tomadas en consideraci n en el c lculo del resultado C Dil korr C x Vo Vos 7 V P Coil korr resultado convertido con el factor de diluci n Vp volumen de la muestra en la soluci n de medici n Vp volumen del diluente en la soluci n de medici n M todo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 103 Espanol ES 12 5 Procedimientos de evaluaci n especiales para cidos nucleicos y prote na UV Este apartado se ocupa de la evaluaci n de cidos nucleicos y o prote nas en los grupos de m todos Nucleic acids y Proteins direct UV as como de componentes biomoleculares correspondientes del grupo de m todos Dye labels 12 5 1 Correcci n A269 y correcci n A280 Aplicaci n correcci n de la influencia de la extinci n de colorante sobre la extinci n de cidos nucleicos y o prote nas a 260 y 280 nm en los m todos del grupo Dye labels La aplicaci n del procedimiento de evaluaci n se puede activar en los par metros Correct A260 y o Correct A280 A Avy CF x Apy XXX corr Axxx korr extinci n corregida aritm ticamente en la longitud de onda 260 nm y o 280 nm Axxx extinci n medida en la longitud de onda 260 nm y o 280 nm CF factor de correcci n para la longitud de onda 260 nm y o 280 nm los dos factores de correcci n para 260 nm y para 280 nm son espec ficos para un colorante y se programan en General Method Parameter Dyes en el rea Functions Ayy
111. scaneo Teclas O y en un espectro de longitudes de onda de extinci n modificar la secci n de imagen m todo SpectraZoom ver Tab en p g 56 delete Salir de la selecci n actual al siguiente nivel superior Borrar la entrada En una secuencia de caracteres se borra el caracter a la izquierda del cursor e Activar el m todo o la funci n seleccionados e Abrir la lista de selecci n e Confirmar la entrada o selecci n standard Iniciar la medici n de la soluci n patr n Iniciar la medici n del blanco Iniciar la medici n de la muestra Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 25 Espanol ES 5 1 1 Introducci n de texto Es posible entrar texto para darle un nombre a un m todo o para indicar la unidad del resultado Limitaci n para nombres de m todos s lo est n permitidos n meros y letras as como el gui n bajo _ o Con las teclas de cursor y O puede navegar dentro Enter ihe name and storage location del campo de entrada y modificar posiciones Method name dsDNA individuales en el nombre Target directory CIEAVMOSIMy Melo E Teclas programables e Keyboard visualizar el teclado e abc cambiar entre letras en may scula y min scula al introducir texto v a teclado e Save guardar el texto introducido e Cancel cancelar la entrada de texto OFavorites MyMethods v in Favorites Keyboard abc Save Cancel Introducci n a
112. ses o pmole ug pmol de colorante por ug de cido nucleico none ning n c lculo de la FOI Background Selecci n Antes del c lculo del resultado de una muestra se resta la on off extinci n de una longitud de onda de fondo en la que el analito a medir debe mostrar la extinci n cero de la extinci n de la longitud de onda de medici n Aplicaci n frecuente correcci n de turbiedad parcial en la medici n de cidos nucleicos longitud de onda de fondo para ello 320 nm 340 nm Wavelength Longitud de onda en Longitud de onda en la que se va a medir el fondo En forma nm Rango 200 a 830 nm pura el analito a medir deber a tener aqu el valor de extinci n cero Background for dyes Selecci n on off S lo para el grupo de m todos Dye labels Aplicaci n de la correcci n de fondo a la medici n del colorante v ase el par metro Background Wavelength Longitud de onda en S lo para el grupo de m todos Dye labels nm Longitud de onda en la que se debe medir el fondo para el Rango 200 a 830 nm colorante En forma pura no contaminada el colorante a medir deber a tener en esta longitud de onda el valor de extinci n cero Autoprint Selecci n Impresi n de un resultado de medici n con la impresora on off termica directamente despues de la medici n Solamente se imprimen los datos de resultado esenciales Para la emisi n de datos m s detallados puede reunir los paquetes de dat
113. so de m todo process results More calculations 12 5 3 1 C lculo de la cantidad Aplicaci n c lculo de la cantidad masa de cido nucleico en todo el volumen de la muestra M CxV gesamt M cantidad total calculada masa del cido nucleico en el recipiente de la muestra Unidad ug C concentraci n del cido nucleico calculada a partir de la medici n Unidad g mL o ng pL Vp gesamt volumen total de la muestra en el recipiente de la muestra Introduzca este valor en More calculations Unidad uL 12 5 3 2 C lculo de la concentraci n molar Aplicaci n c lculo de la concentraci n molar del cido nucleico a partir de la concentraci n en masa y la masa molar relativa La masa molar o bien se introduce directamente o bien es calculada por el equipo a partir del n mero de bases y o pares de bases por mol cula de cido nucleico introducido Cx10 C Mol MM Cmo concentraci n molar calculada del cido nucleico Unidad pmol mL C concentraci n en masa del cido nucleico calculada a partir de la medici n Unidad ug mL o ng pL MM masa molar relativa Unidad kDa M todo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES En caso de que en More calculations se introdujo el n mero de bases y o pares de bases por molecula de cido nucleico en lugar de la masa molar relativa la MM se calcular a partir del n mero de bases y o pares de bases Para dsDNA MM bpx2x330
114. soluciones patr n patr n En algunos m todos el rea para el n mero de soluciones Rango 1 a 12 patr n est limitada a un rea m s peque a que del 1 al 12 Replicates Entrada de valores N mero de las mediciones de repetici n para las diferentes N mero de r plicas concentraciones patr n por soluci n patr n Rango 1 a 3 Std Conc Entrada de valores Seg n el n mero de soluciones patr n este par metro se Valores de concentraci n de las soluciones patr n L mite m x 6 d gitos incluyendo el punto decimal ofrece para todos las soluciones patr n p ej Std Conc 1 Std Conc 2 Decimal places Entrada de valores N mero de partes decimales para el resultado Rango 0 a 3 N mero de partes decimales para el resultado de concentraci n calculado M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 41 Par metros Dye 1 Entrada Selecci n Lista de colorantes que est n incluidos en la funci n General Method Parameters Dyes Explicaci n S lo para el grupo de m todos Dye labels En la selecci n del colorante tambi n se importan de la funci n General Method Parameters Dyes los par metros all programados que corresponden al colorante factor longitud de onda factores de correcci n para la medici n a 260 y o 280 nm v ase la descripci n del siguiente par metro Correct A260 1 Selecci n on off S lo para el gru
115. ticas Conecte el equipo a la red el ctrica y enci ndalo accionando el interruptor principal 4 Retire la l mina protectora del indicador 20 Instalaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 4 4 Conexi n del equipo con una red O La conexi n del equipo con una red es opcional Tambi n puede utilizar el equipo sin conexi n a la red Informaci n sobre ajustes de red ver Device Settings en p g 68 Requisitos Cable Ethernet RJ45 1 Conecte el cable de Ethernet con el conector hembra de la red 2 Conecte el cable de Ethernet con el conector hembra de Ethernet 10 ver Ilustraci n general en p g 15 O Impresora de red El equipo detecta una impresora de red autom ticamente con las condiciones siguientes e La impresora se encuentra en el mismo segmento de red que el equipo e La impresora es compatible con el protocolo Zeroconf e La impresora es compatible con PostScript 4 5 Conexi n de la impresora al puerto USB 4 5 1 Impresora termica DPU S445 Requisitos En el equipo est instalado el software de la versi n 3 4 4 0 o superior En los ajustes de la impresora se ha seleccionado la impresora t rmica DPU S445 ver Device Settings en p g 68 Conecte la impresora t rmica DPU S445 al puerto USB para impresoras 1 Conecte el cable de impresora al puerto USB para impresoras 4 ver Ilustraci n general en p g 15 Conecte el cable de impresora con la impresora Conecte la impresor
116. tor 0 Ag 70 O coeficiente de extinci n y masa molar e Molecular mass Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 67 Espanol ES Par metros Explicaci n cidos nucleicos Estos par metros se cargan en los par metros del m todo al seleccionar un cido nucleico durante la programaci n de un m todo del grupo Dye labels NA name El factor se utiliza para calcular la concentraci n a partir de la extinci n Factor El par metro Double stranded tiene influencia sobre el c lculo de la e Double stranded concentraci n molar del cido nucleico ver Conversi n en concentraciones molares y cantidades de cidos nucleicos en p g 104 Dyes Estos par metros se cargan en los par metros del m todo al seleccionar un colorante Dyes durante la programaci n de un m todo del grupo Dye labels Dye name Aparte del nombre tambi n puede introducir los siguientes datos para Wavelength definir el factor para el c lculo de la concentraci n a partir de la e Ext coeff extinci n e Factor Factor o coeficiente de extinci n e Corr A260 Los factores de correcci n para las extinciones a 260 y o 280 nm se e Corr A280 utilizan cuando la funci n de correcci n est activada en los par metros del m todo Encontrar m s informaci n en el cap tulo sobre la evaluaci n ver Correcci n A269 y correcci n A gt gg en p g 103 Units Puede seleccionar una unidad de todas las unidades disponibles dur
117. trav s del teclado superpuesto Con las teclas de cursor selecciona los caracteres Enter tha namei and storagallocation superpuestos y los confirma pulsando la tecla enter nador d Method name EGEIBIEd Igual que en un teclado de ordenador usted puede conmutar con la tecla Shift y o tecla fijadora entre Target directory Favorites MyMethods y gt escritura en may sculas y min sculas para la OFavorites MyMethods v E sie siguiente y o para todas las siguientes entradas Teclas programables Inl lalslasiel7e 9 0 e Numbers cambiar a entrada v a teclado EA ICA PA AB A O ES Save guardar el texto introducido amp als al olhTiTx 1 1 gt ya 7 I lar zix elv b nm 1 Numeric keypad e Cancel cancelar la entrada de texto Numbers Space Numbers abc Save Cancel 26 Manejo Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 5 2 Inserci n de la cubeta En el compartimento de la cubeta puede insertar cubetas rectangulares de vidrio o pl stico habituales en el mercado e Medidas exteriores 12 5 mm x 12 5 mm e Altura del recorrido ptico 8 5 mm sobre el fondo de la cubeta e Altura total por lo menos 36 mm Las cubetas tienen que ser pticamente transparentes a la respectiva longitud de onda de medici n Para mediciones en el sector ultravioleta del espectro Eppendorf ofrece con la UVette una cubeta de pl stico que en longitud
118. tud de onda de medici n en base a la extinci n medida Longitud de onda de en esta longitud de onda se calcula la concentraci n medici n en nm En los grupos de m todos Multi A y Dual wavelength se Rango 200 a 830 nm introduce m s de una longitud de onda Para algunos grupos de m todos p ej Nucleic acids y Proteins direct UV las longitudes de onda est n preprogramadas fijamente En el grupo de m todos Dye labels no introduce las longitudes de onda de medici n individualmente durante los pasos del m todo Usted las importa autom ticamente de la funci n General Method Parameters a trav s de la simple selecci n de biomol cula y colorante M todos Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 39 Par metros Wavelength em Entrada Selecci n 520 nm 560 nm Explicaci n S lo para el grupo de m todos fluorim tricos Basic Longitud de onda de medici n en base a la fluorescencia medida en esta longitud de onda longitud de onda de emisi n se calcula la concentraci n En los m todos del grupo Routine la longitud de onda est preprogramada de manera fija Wavelength ex Ninguna entrada posible Longitud de onda 470 nm S lo para los grupos de m todos fluorim tricos Se muestra la longitud de onda de excitaci n de 470 nm Unit Selecci n mg mL ug mL ng mL pg mL ug uL mg dL umol mL nmol mL pmol mL pmol uL U U mL U L
119. uci n patr n y curva est ndar 3 3 2 Manejo Los m todos y plantillas preprogramados est n resumidos en grupos claros de los cuales puede seleccionar r pidamente su m todo deseado Despu s de llamar el m todo ser guiado paso a paso a trav s de la secuencia de medici n Un cuadro de ayuda en el indicador le proporciona indicaciones en caso necesario Los 3 botones de medici n circulares standard blank sample permiten el inicio directo y r pido de una medici n Descripci n del producto Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 17 Espanol ES 3 3 3 Emisi n de resultados El BioSpectrometer fluorescence emite los resultados a trav s del indicador del equipo o a trav s de una impresora que se puede adquirir a trav s de Eppendorf Los resultados se pueden transferir a una memoria USB a una impresora o directamente a un ordenador a trav s del puerto USB del equipo Cuando el equipo est conectado a una red los resultados pueden imprimirse en una impresora de red o enviarse por e mail No es posible guardar los resultados en una unidad de red 3 3 4 Autocomprobaci n del equipo Directamente despu s del encendido el equipo comprueba autom ticamente el funcionamiento correcto de la unidad espectrom trica y de la unidad de fluorescencia Para comprobar el equipo de una manera m s completa active la funci n Device calibration ver Autocomprobaci n del equipo en p g 80 Descripci n del producto 18 Eppendorf B
120. usa concreta prestar atenci n a la informaci n en el cuadro de ayuda Ayuda gt V ase la informaci n en el cuadro de ayuda Ya existe un m todo o una carpeta tinci n prote na cido nucleico unidad con este nombre El nombre con el cual se quiere almacenar el m todo ya ha sido utilizado para otro m todo en la misma carpeta Este mensaje tambi n aparece cuando se editan nombres que ya han sido otorgados a una carpeta o bajo General Method Parameter a un cido nucleico colorante prote na unidad de concentraci n gt Modificar el nombre Los siguientes valores de par metro no est n definidos en General Method e Al abrir un m todo cuyo par metro recurre a General Method Parameter se ha constatado que por lo menos un par metro colorante cido nucleico prote na unidad ya gt Seleccione otro par metro de la lista existente Si es necesario programe una nueva entrada en la lista en General Method Parameter para poder recurrir a ella al programar un Parameter no existe all es decir que nuevo m todo probablemente ha sido borrado El valor del Este mensaje de error aparece al editar Seleccione otro par metro de la lista par metro marcado con no est definido en los Gen Meth Param Por favor corrija el par metro par metros de m todo e El par metro no est definido en General Method Parameter existente Si es necesario programe u
121. uts Indicaci n de resultados dsDNA 2010 07 16 16 32 54 Resultado de la concentraci n 3 01 r he A con extinci n en la longitud de 0 450 H onda de medici n 0 504 Ase par metros ratio A260 A280 0 360 Ny DE D am Si est activado en los 4 0 270 Si est activado en los 0 180 A260 A280 1 86 a N parametros escaneo ar Ni SSE Navegue en el grafico entre los e a ae key puntos de medici n que se X 260 Abs 0 504 s lt and key pueden utilizar para el c lculo Dilution EdtiD Data Finish lt Back Next gt del resultado con y O Datos adicionales tecla programable Datal Si se activaron los par metros correspondientes Valor de extinci n para 280 nm Ratio A260 A230 y valor de extinci n para 230 nm e Valor de extinci n para la longitud de onda de fondo M todos 50 Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES Grupo de m todos Fotometr a Proteins direct UV Indicaci n de resultados ue A cu Measure samples pe o Albumin A 280 2010 12 16 18 05 23 Abs A 30 f N ID 0 800 A 1 46 moi 0 800 0 966 Am 0 400 0 200 0 000 lt lt JJJJJJ e 260 280 320 tam 7 Dilution Fi Data Finish lt Back J Next gt Explicaci n Indicaci n de resultados e Resultado de la concentraci n con extinci n en la longitud
122. v a serie est ndar e Regresi n lineal e Regresi n no lineal polinomio de 2do y 3er grado e Evaluaci n de Spline e Interpolaci n lineal evaluaci n de punto a punto C lculos de extinci n v a subtracci n y divisi n Datos adicionales para cidos nucleicos ratio 260 280 y 260 230 concentraci n molar rendimiento total Datos adicionales para m todos de tinci n FOI frecuencia de incorporaci n densidad de marcado Escaneos zoom evaluaci n de picos Memoria de m todos gt 100 programas de m todos Memoria de valores de medici n y memoria de calibraci n Memoria para gt 1 000 resultados con todos los datos de la evaluaci n del resultado y de la soluci n patr n n mero de la muestra nombre de la muestra fecha y el juego de par metros utilizado del programa de m todo El n mero de los resultados almacenados depende del n mero de los m todos almacenados M todo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence 99 Espanol ES 12 Metodo de evaluaci n Este cap tulo describe los m todos de evaluaci n disponibles en los programas de m todos as como el c lculo de una diluci n a trav s del software del dispositivo Tenga en cuenta al comparar los resultados de medici n con resultados de otros fot metros espectrofot metros que los valores pueden depender del ancho de banda de los dispositivos En los siguientes casos las diferencias pueden ser considerables e
123. x10 Para ssDNA RNA Oligo MM bx330x10 MM masa molar relativa calculada unidad kDa bp n mero introducido de los pares de bases por mol cula b n mero introducido de las bases por mol cula O Para dsDNA se parte de un cido nucleico bicatenario en el c lculo de la concentraci n molar Para los m todos ssDNA RNA y Oligo se parte de un cido nucleico monocatenario Para m todos que fueron programados en el grupo principal Routine grupo de m todos Nucleic acids mediante lt New Method gt siempre se parte de cidos nucleicos bicatenarios para el c lculo de la concentraci n molar 12 5 4 C lculo del factor para prote na en General Method Parameter Este apartado solamente vale para el c lculo del componente de prote na en los grupos de m todos Dye labels y Proteins direct UV En estos grupos de m todos se selecciona el componente de prote na en los par metros ver Par metros de m todo en p g 38 Al componente de prote na le est asignado un factor que se introduce en la funci n General Method Parameter Proteins para cada prote na Alternativamente al factor tambi n se puede introducir o bien Ag 70 0 bien el coeficiente de extinci n m s la masa molar de la prote na En este caso el factor se calcula del siguiente modo 1 Avia F factor para la proteina unidad g L Fp Ao 1 extinci n de la prote na a una concentraci n de 0 1 1 g L Al entrar el coeficiente de extin
124. y extinci n medida en la longitud de onda del colorante Los valores de extincion mostrados en los indicadores de resultados son los valores de extinci n directamente medidos y no corregidos 12 5 2 Ratio A260 A280 y ratio A260 A230 Aplicaci n informaci n acerca de la pureza del cido nucleico medido La aplicaci n del procedimiento de evaluaci n se puede activar en los par metros A260 280 y o A260 A230 Ratio denomina el cociente de las extinciones medidas en las longitudes de onda mencionadas Valores de bibliograf a para los valores ratio en cidos nucleicos puros A260 A280 e ADN 1 8 a 1 9 e ARN 1 9 a 2 0 Current Protocols in Molecular Biology 1994 104 Metodo de evaluaci n Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES A260 A230 Para la ratio A260 A230 se encuentran diferentes indicaciones en la bibliografia respecto a cidos nucleicos puros e ADN 2 3 a 2 5 The Nucleic Acids 1955 ADN 1 9 Current Protocols in Molecular Biology 1994 Los valores dependen fuertemente del valor del pH Por ello los cidos nucleicos no se deber an medir en agua sino en una soluci n tamp n con un valor pH de 7 a 7 2 p ej soluci n tamp n TE 12 5 3 Conversi n en concentraciones molares y cantidades de cidos nucleicos La conversi n solamente se puede aplicar para cidos nucleicos y m todos de tinci n con cidos nucleicos como componente biomolecular La conversi n se efect a en el pa
125. y5 Wavelength 650 nm Ext coeff 250000 L mol cm y Factor la pMol pL Corr A260 lo Corr A280 0 05 E selactec Edit Jl New Jl Delete Jl OK Teclas programables e Edit editar el grupo de par metros seleccionado e New crear un grupo de par metros nuevo Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES 65 gt Si desea imprimir o exportar resultados seleccione los paquetes de datos El proceso para impresi n y exportaci n as como el significado de las teclas programables se corresponden con el paso de m todo print amp export Seleccione en la columna derecha el grupo de par metros en el cual desea editar par metros Conf rmelo con enter En este ejemplo se han juntado grupos de par metros para diversas tinciones componentes de colorantes para los m todos de tinci n y se han guardado bajo un nombre cada uno Bajo este nombre se puede importar el grupo de par metros deseado al programa de m todo al editar un m todo de tinci n Indicador e izquierda nombre del colorante Seleccione con Oy e derecha par metros correspondientes e Delete borrar el grupo de par metros seleccionado OK retornar a la selecci n de funciones 66 Funciones Eppendorf BioSpectrometer fluorescence Espanol ES u el e con O y O el par metro a editar Dye name ais gt Confirmelo con enter Wavelength 550 nm J Ext coeff 100000 L mol cm
126. zar de modo fiable en la cubeta e Mida el blanco de la cubeta antes de realizar mediciones de muestras o de soluciones patr n para compensar el blanco del reactivo y tambi n el de la cubeta e Los resultados de blancos permanecen almacenados para una serie de mediciones Una nueva medici n de blanco sin embargo es posible en cualquier momento incluso entre mediciones de muestras e Los valores de extinci n y valores RFU indicados siempre se corresponden con los valores directamente medidos El factor de diluci n o de cubeta y las extinciones de fondo no se incluyen hasta llegar al c lculo del resultado posterior ver Valores de extinci n en p g 99 Desde el inicio de una medici n hasta la indicaci n de un resultado de medici n transcurre t picamente un tiempo de aprox 2 a 3 segundos Si cae poca luz sobre el receptor con valores de extinci n altos o valores RFU bajos el tiempo de medici n se puede prolongar autom ticamente hasta 9 segundos fotometr a y o hasta 6 segundos fluorimetr a para aumentar la precisi n de la medici n e Preste atenci n de que los valores de extinci n medidos no excedan el l mite superior del campo de medida fotom trico En este caso deseche el resultado de la medici n El l mite superior del campo de medida fotom trico no s lo depende de la longitud de onda ver Propiedades fotom tricas en p g 96 sino tambi n del blanco de la cubeta Las ultra microcubetas con diafragma peque

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