FLEX Monoclonal Mouse Anti-Vimentin Clon V9 Ready-to
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1. espec ficamente la banda de 57 kDa de la vimentina Estos experimentos muestran de manera directa que el anticuerpo no reacciona con las dos prote nas IF m s estrechamente relacionadas con la vimentina es decir la desmina y la GFAP 3 En inmunocitoqu mica el anticuerpo marca las l neas celulares humanas IMR90 RD glioma y HeLa 3 positivas para vimentina 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida de sodio NaNz un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto de origen biol gico deber n aplicarse los procedimientos de manipulaci n adecuados 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n que no se utilice deber desecharse de acuerdo con las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 C No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario deber comprobar dichas condiciones No existen signos evidentes que indiquen in2. arse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos Para sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso Auxiliar debe configurarse a ninguno Esto garantiza tiempos de lavado similares Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n con hematoxicilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El control positivo de tejido debe incluir am
3. da subtipo IF estaba retenida tanto en las c lulas malignas como en sus hom logas normales lo que convert a a los IF en importantes marcadores diagn sticos en histog nesis Ahora se ha demostrado la coexpresi n de los filamentos intermedios particularmente la vimentina y la citoqueratina en una variedad de tejidos y c lulas normales y en lesiones neopl sicas lo que exige un panel de anticuerpos para el diagn stico diferencial de tumores 2 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n y 9 Limitaciones generales El anticuerpo monoclonal de rat n listo para usar se suministra en forma l quida en una soluci n tamp n que contiene prote na estabilizante y 0 015 de mol L Nana Clon V9 Isotipo Ig1 kappa Vimentina purificada de cristalino porcino 3 En la transferencia de Western de vimentina porcina purificada el anticuerpo marca una nica banda de 57 kDa que corresponde a la vimentina Al aplicar extractos de c lulas enteras de l neas celulares que expresan vimentina m s prote na ac dica fibrilar glial y vimentina m s desmina respectivamente el anticuerpo marca
4. ed epithelial and muscle cells of the human iris and ciliary body J Histochem Cytochem 1992 40 1517 26 O a C Limitaci n de temperatura Fecha de caducidad Disposivam deapara m dico para pat suficiente para lt n gt Fabricante diagn stico n vitro in vitro ensayos o 116905 002 IS630 ES KRM 09 10 07 p g 2 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
5. estabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n analizarse de manera simult nea con las muestras del paciente En caso de observarse una coloraci n inesperada que no puede ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospeche un problema con el anticuerpo comun quese con la asistencia t cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de l
6. gdala e h gado y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15750 El patr n de tinci n celular es citoplasm tico Tejidos normales En general el anticuerpo marca la mayor a de c lulas mesenquimales humanas incluidos fibrocitos lipocitos c lulas del m sculo liso c lulas endoteliales vasculares astrocitos c lulas del nervio perif rico Schwann y macr fagos incluidas c lulas de Kupffer as como c lulas mioepiteliales de las gl ndulas sudor paras y salivales y de mama que son fuertemente marcadas Las c lulas foliculares de la tiroides la corteza suprarrenal y los t bulos renales distales y las c lulas mesangiales y endoteliales del glom rulo renal as como las c lulas pancre ticas acinares son positivas y tienen una distribuci n e intensidad variables 1 3 En el ojo humano el anticuerpo marca el epitelio pigmentado anterior y posterior del iris humano incluida la porci n muscular dilatadora de pupilas del epitelio anterior as como el epitelio ciliar pigmentado y no pigmentado 5 En el epitelio ciliar la vimentina se expres junto con la citoqueratina 5 Las c lulas del m sculo card aco y esquel tico las c lulas epid rmicas escamosas urotelia
7. les col nicas y de la mucosa g strica y las c lulas gliales fueron consistentemente negativas con el anticuerpo 1 3 Tejidos anormales El anticuerpo marc 17 20 sarcomas 16 18 melanomas 4 4 meningeomas y 3 3 schwanomas y fue el nico filamento intermedio presente en estos tumores Adem s porcentajes variables 10 57 de carcinomas carcinomas neuroendocrinos neuroblastomas timomas y mesoteliomas fueron positivos con el anticuerpo Con la excepci n de los neuroblastomas la citoqueratina se expres junto con la vimentina en estos tumores Entre los adenocarcinomas m s del 50 de los carcinomas papilares de tiroides as como los carcinomas renales endometriales ov ricos y pulmonares fueron marcados por el anticuerpo y coexpresaron queratinas y vimentina 1 1 Azumi N Battifora H The distribution of vimentin and keratin in epithelial and nonepithelial neoplasms Am J Clin Pathol 1987 88 286 96 2 Herrmann H Aebi U Intermediate filaments and their associates multi talented structural elements specifying cytoarchitecture and cytodynamics Curr Opin Cell Biol 2000 12 79 90 3 Osborn M Debus E Weber K Monoclonal antibodies specific for vimentin Eur J Cell Biol 1984 34 137 43 4 Bohn W Wiegers W Beuttenm ller M Traub P Species specific recognition patterns of monoclonal antibodies directed against vimentin Exp Cell Res 1992 201 1 7 5 Kivel T Fuchs U Tarkkanen A Cytoskeleton in neuroectodermally deriv
8. os cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente 1S630 ES KRM 09 10 07 p g 1 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de resultados Referencias bibliogr ficas Explicaci n de los s mbolos Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus utilizando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de dispensado de 200 uL o FLEXRTU3 volumen de dispensado de 300 uL Autoprograma VimV9 sin contratinci n o VIMV9H con contratinci n El paso Auxiliar debe configur
9. y Uso previsto Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 116905 002 C FLEX Monoclonal Mouse Anti Vimentin Clon V9 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo 1S630 Para uso en diagn stico in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Vimentin Clon V9 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo ayuda en la identificaci n de c lulas de origen mesenquimal en tejidos normales y neopl sicos y es til para diagnosticar tumores La interpretaci n cl nica de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un pat logo calificado dentro del contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas La vimentina es una prote na de filamentos intermedios IF con una masa molecular de 57 kDa que forma parte del citoesqueleto de las c lulas de los vertebrados La vimentina pertenece a la clase IIl de las cinco clases de IF que comprenden nueve grupos y muestra un alto grado de especificidad para las c lulas de origen mesenquimal Inicialmente se pens que la especificidad del tipo de c lula exhibida por ca
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