FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Amyloid A Clon mc1
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1. Uso previsto Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 117818 002 C FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Amyloid A Clon mc1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo 15605 Para uso en diagn stico in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Amyloid A Clon mc1 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo marca el amiloide A AA en tejidos y resulta til para la identificaci n y clasificaci n de la amiloidosis AA 1 La interpretaci n de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un anatomopat logo cualificado en el contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas Se denomina amiloidosis a un grupo de enfermedades que tienen en com n el dep sito extracelular de prote nas fibrilares con una conformaci n bioqu mica espec fica conocida como l minas plegadas fi Se han identificado aproximadamente 20 prote nas precursoras diferentes que se pueden depositar como fibrillas amiloides 2 Las prote nas amiloides depositadas en los tejidos se pueden identificar en una tinci n con rojo C2. CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tinci n incluido material necesario pero no suministrado Interpretaci n de la tinci n Caracter sticas de resultados Referencias bibliogr ficas K8010 K8004 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010
3. Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus usando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTU3 volumen de aplicaci n 300 uL Autoprogram AmA sin contratinci n o AmAH con contratinci n El paso Auxiliar debe configurarse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso Auxiliar debe configurarse a ninguno De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detalles sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de res
4. o m dico para v Contiene suficiente para atal Fabricante diagn stico in vitro 8 C o e Limitaci n de temperatura Fecha de caducidad lt n gt ensayos 2 de uso Consulte las ins tru ccion es LOT C digo del lote 117818 002 IS605 ES MNI 2009 12 04 p 2 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
5. ongo y clasificarse qu micamente mediante estudios de secuenciaci n de amino cidos inmunohistoqu mica o inmunocitoqu mica 1 El amiloide A AA es una prote na fibrilar insoluble depositada extracelularmente muy resistente a la degradaci n proteol tica y producida a partir de la prote na precursora el amiloide s rico A SAA 2 Antes de poder programar un tratamiento de una posible enfermedad amiloide debe asegurarse tanto la presencia del amiloide como su origen qu mico 3 Consulte las Instrucciones generales para la tinci n inmunohistoqu mica de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n 9 Limitaciones generales Anticuerpo monoclonal de rat n listo para usar suministrado en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizadora y 0 015 mol L de azida de sodio Clon mc1 4 5 Isotipo lgG2a kappa Una mezcla equivalente de amiloide A humano unido a peroxidasa de r bano y amiloide A humano unido a quinin geno de alto peso molecular 5 En un ensayo micro ELISA el anticuerpo reacciona con el amiloide A y con el precursor s rico del amiloide A lo que indica una reactividad cruzada entre la prote na amiloide A y el precursor
6. quipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n no utilizada debe desecharse con arreglo a las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario debe comprobarlas No existen signos evidentes que indiquen inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea con las muestras del paciente En caso de observarse una coloraci n inesperada que no pueda ser explicada por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospeche un problema con el anticuerpo comun quese con la Asistencia T cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo 1S605 ES MNI 2009 12 04 p 1 2 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95
7. s rico del amiloide A Por el contrario no se observa reactividad con otras prote nas fibrilares amiloides no AA o con prote nas s ricas humanas como la alb mina la transferrina y la IgG 4 5 Seg n se demuestra mediante inmunohistoqu mica en cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina el anticuerpo marca los tejidos de pacientes AA pero no muestra reactividad alguna con un hu sped de ant genos desconocidos en cortes de tejido de diversos rganos 5 ni con los tipos amiloides Ax AA y con las prote nas fibrilares amiloides en la polineuropat a amiloide familiar y la amiloidosis cardiovascular senil respectivamente De igual forma el anticuerpo no marca las placas amiloides de Alzheimer los amiloides en la microangiopat a el liquen amiloide ni los islotes de Langerhans seniles 5 7 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida s dica NaNs un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificado como peligroso la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto derivado de fuentes biol gicas deber n aplicarse procedimientos adecuados de manejo 4 Utilice el e
8. tras que las membranas basales de los glom rulos renales con dep sitos de amiloide A muestran una reacci n de tinci n de d bil a moderada 1 Linke RP G rtner HV Michels H High sensitivity diagnosis of AA amyloidosis using Congo Red and immunohistochemistry detects missed amyloid deposits J Histochem Cytochem 1995 43 863 9 2 Sipe JD Cohen AS History of the amyloid fibril review J Struct Biol 2000 130 88 98 3 Linke RP Highly sensitive diagnosis of amyloid and various amyloid syndromes using Congo red fluorescence Virchows Arch 2000 436 439 48 Linke RP Identification of amyloid protein AA with a monoclonal antibody Blut 1982 45 407 9 5 Linke RP Monoclonal antibodies against amyloid fibril protein AA Production specificity and use for immunohistochemical localization and classification of AA type amyloidosis J Histochem Cytochem 1984 32 322 8 6 Linke RP Identification of AA type amyloid in tissue sections using monoclonal antibodies In Peeters H editor Protides Biol Fluids Oxford Pergamon Press 1983 p 835 8 7 Linke RP Nathrath WBJ Eulitz M Classification of amyloid syndromes from tissue sections using antibodies against various amyloid fibril proteins report of 142 cases In Glenner CG Osserman EF Benditt EP Calkins E Cohen AS Zucker Franklin D editors Amyloidosis Amsterdam Plenum Publishing Corporation 1986 p 599 605 gt Explicaci n de los s mbolos Referencia IVD Dispositiv
9. ultados Se recomienda la contratinci n en hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El tejido de control positivo debe incluir ri n con amiloidosis y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de resultados en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15750 El amiloide A marcado por el anticuerpo se localiza extracelularmente la mayor a de los casos Tejidos normales el anticuerpo no marca el tejido normal 5 No obstante en ocasiones el anticuerpo marca el suero Tejidos anormales el anticuerpo marca el amiloide A en biopsias renales y rectales de pacientes con enfermedad inflamatoria pedi trica 1 Tambi n se marcan los tejidos de pacientes con un diagn stico cl nico de artritis reumatoide s ndrome de Muckle Wells espor dico polineuritis idiop tica amiloidosis idiop tica fiebre mediterr nea familiar y enfermedad de Still 5 En el ri n las c lulas de m sculo liso grandes con dep sitos de amiloide A muestran una reacci n de tinci n de moderada a fuerte mien
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