FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Muscle Actin Clon
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1. lo han confirmado Schmidt et al 1988 2 quienes descubrieron que 29 30 RMS incluidos subtipos pleomorfos botrioideos alveolares y embrionarios sin importar el grado de diferenciaci n daban un resultado positivo En un estudio en el que se analizaron 285 tumores de tejidos blandos bien caracterizados 17 17 RMS 31 32 LMS 23 23 LM y 3 5 pleomorphic liposarcomas dieron un resultado positivo 5 La mayor parte de los glomangiomas reaccionaron tambi n con el anticuerpo 5 8 En los tumores desmoides hubo c lulas que dieron un resultado positivo en 9 15 casos 5 Otros investigadores que descubrieron que 34 35 RMS 11 22 LMS 5 6 LM y 4 4 rhabdomyomas daban un resultado positivo ofrecieron resultados similares 6 Los miofibroblastos de algunas lesiones incluido el tejido reactivo las heridas en proceso de curaci n y las placas ateroscler ticas tambi n reaccionaron con el anticuerpo en la mayor parte de los casos 1 4 6 9 El anticuerpo se utiliz asimismo para diferenciar los tumores de mama no invasivos que sistem ticamente dieron resultados positivos cuando se trataba de actina de los tumores de mama no invasivos los cuales dieron resultados negativos cuando se trataba de actina 7 Los sarcomas de c lulas no musculares y las c lulas neopl sicas de los carcinomas melanomas y linfomas resultaron ser no reactivas 1 5 15700 ES SSM 2009 01 20 p 2 3 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark T2. con un anticuerpo cont ctese con la Asistencia T cnica de Dako El anticuerpo puede utilizarse para marcar cortes de tejido fijados con formol e incluidos en parafina Las muestras de tejido deben cortarse en secciones de aproximadamente 4 um Se requiere el tratamiento previo con recuperaci n del ep topo inducida por calor HIER usando Dako PT Link n de cat logo PT100 PT101 Para m s detalles consulte la Gu a del usuario de PT Link Se obtienen resultados ptimos al pretratar los tejidos con EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 15700 ES SSM 2009 01 20 p 1 3 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Procedimiento de tincion incluido material necesario pero no suministrado Interpretacion de la tinci n Caracter sticas de resultados 119547 001 Cortes incluidos en parafina se recomienda el tratamiento previo de los cortes de tejido fijados en formol e incluidos en parafina siguiendo el procedimiento de preparaci n de la muestra 3 en 1 para Dako PT Link Siga el procedimiento previo al tratamiento explicado en el prospecto de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x n de cat logo K8010 K8004 Nota Despu s de la tinci n se deben deshidratar enjuagar y montar los cortes usando un medio de montaje permanente Cortes desparafinados se recomienda el
3. de fuentes que no sean musculares c lulas endoteliales 4 1 Para usuarios profesionales 2 Este producto contiene azida de sodio NaNs un compuesto qu mico altamente t xico en su forma pura Aunque a las concentraciones presentes en el producto no est clasificada como peligrosa la azida de sodio puede reaccionar con ca er as de plomo y cobre formando acumulaciones de azidas met licas altamente explosivas Una vez desechado el producto deje correr abundante cantidad de agua para evitar acumulaciones de azidas met licas en las ca er as 3 Al igual que con cualquier producto derivado de fuentes biol gicas deber n aplicarse los procedimientos adecuados de manejo 4 Utilice el equipo de protecci n personal adecuado para evitar el contacto con los ojos y la piel 5 La soluci n no utilizada debe desecharse con arreglo a las normativas locales provinciales y nacionales Almacenar a 2 8 No utilizar despu s de la fecha de caducidad impresa en el vial Si los reactivos se almacenan en condiciones diferentes a las especificadas el usuario debe comprobarlas No existen signos evidentes que indiquen la inestabilidad de este producto Por lo tanto los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea con las muestras del paciente En caso de observarse una coloraci n inesperada que no pueda explicarse por las variaciones en los procedimientos del laboratorio y se sospeche de la existencia de un problema
4. tratamiento previo de los cortes de tejido desparafinados fijados en formol e incluidos en parafina usando Dako PT Link y siguiendo el mismo procedimiento descrito para los cortes incluidos en parafina Tras la tinci n los portaobjetos deben montarse utilizando un medio de montaje acuoso o permanente Los cortes de tejido no se deben secar durante el tratamiento ni durante el siguiente procedimiento de tinci n inmunohistoqu mica Para una mejor adherencia de los cortes de tejidos a los portaobjetos se recomienda el uso de FLEX IHC Microscope Slides n de cat logo K8020 El sistema de visualizaci n recomendado es EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8010 Los pasos de tinci n y los tiempos de incubaci n han sido preprogramados en el software de los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus usando los siguientes protocolos Plantilla del protocolo FLEXRTU2 volumen de aplicaci n 200 uL o FLEXRTU3 volumen de aplicaci n 300 uL Autoprograma ACTIN sin contratinci n o ACTINH con contratinci n El paso Auxiliar debe configurarse a tamp n de enjuague en sesiones de tinci n con lt 10 portaobjetos En el caso de sesiones de tinci n con gt 10 portaobjetos el paso Auxiliary debe configurarse a none De esta manera se aseguran tiempos de lavado semejantes Todos los pasos de incubaci n deben realizarse a temperatura ambiente Consulte el Manual del usuario para m s detall
5. Dako Uso previsto Resumen y explicaci n Reactivo suministrado Inmun geno Especificidad Precauciones Almacenamiento Preparaci n de las muestras incluido material necesario pero no suministrado 119547 001 CE FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Muscle Actin Clon HHF35 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus N de cat logo IS700 Para uso en diagn stico in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Muscle Actin Clone HHF35 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est indicado para su uso en inmunohistoqu mica junto con los instrumentos Dako Autostainer Autostainer Plus Este anticuerpo resulta til para la identificaci n de tumores de tejido blando con diferenciaci n muscular es decir leiomioma LM leiomiosarcoma LMS 1 y rabdomiosarcoma RMS 1 2 La interpretaci n de los resultados de cualquier tinci n o su ausencia debe complementarse con estudios morfol gicos con controles adecuados y debe evaluarla un anatomopat logo cualificado en el contexto de la historia cl nica del paciente y de otras pruebas diagn sticas La actina es una prote na altamente conservada de la que hay al menos seis isoformas diferentes que se pueden distinguir en funci n de sus secuencias de amino cidos as como de sus puntos isoel ctricos 1 3 Es una de las principales prote nas estructurales y es imprescindible para la contracci n de los m sculos No obstante se ha observado
6. a T Ross R Human atherosclerosis Il Immunocytochemical analysis of the cellular composition of humanatherosclerotic lesions Amer J Pathol 1986 125 191 207 Li 119547 001 Referencia Dispositivo m dico para dia gn stico in vitro de uso so 8 C Limitaci n de temperatura 2 Fecha de caducidad Contiene suficiente para z lt n gt ensayos me Fabricante 15700 ES SSM 2009 01 20 p 3 3 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
7. el 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Referencias bibliograficas Explicacion de los simbolos Tsukada T McNutt MA Ross R Gown A HHF35 A muscle actin specific monoclonal antibody Il Reactivity in normal reactive and neoplastic human tissues Amer J Pathol 1987 127 389 402 Schmidt R Cone R Haas J Gown A Diagnosis of rhabdomyosarcomas with HHF35 a monoclonal antibody directed against muscleactins Amer J Pathol 1988 131 19 28 Khatalina SY Functional specificity of actin isoforms Inter Rev Cytol 2001 202 35 98 Tsukada T Tippens D Gordon D Ross R Gown A HHF35 a muscle actin specific monoclonal antibody Immunocytochemical and biochemical characterization Amer J Pathol 1987 126 51 60 Miettinen M Antibody specific to muscle actins in the diagnosis and classification of soft tissue tumors Amer J Pathol 1988 130 205 15 Rangdaeng S and Truong LD Comparative immunohistochemical staining for desmin and muscle specific actin Amer J Clin Pathol1991 96 32 45 Gottlieb C Raju U Greenwald KA Myoepithelial cells in the differential diagnosis of complex benign and malignant breast lesions An immunohistochemical study Mod Pathol 1990 3 135 40 Porter P Bigler S McNutt M Gown A The immunophenotype of hemangiopericytomas and glomus tumors with special reference to muscle protein expression An immunohistochemical study and review of the literature Mod Pathol 1991 4 46 52 Gown AM Tsukad
8. es sobre el instrumento correspondiente Si todav a no est n disponibles los protocolos en el instrumento Dako Autostainer utilizado comun quese con el servicio t cnico de Dako Las condiciones ptimas pueden variar seg n la muestra y el m todo de preparaci n y deber n determinarse individualmente en cada laboratorio Si el pat logo encargado de la evaluaci n desea otra intensidad de tinci n se puede solicitar informaci n a un especialista en aplicaciones de Dako o a un especialista del servicio t cnico para reprogramar el protocolo Verifique que el rendimiento del protocolo ajustado siga siendo v lido confirmando que el patr n de tinci n sea id ntico al descrito en Caracter sticas de resultados Se recomienda la contratinci n en hematoxilina usando EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo K8018 Se recomienda un medio de montaje no acuoso permanente Los controles positivo y negativo deber n realizarse de manera simult nea empleando el mismo protocolo que para las muestras del paciente El control positivo de tejido debe incluir colon y lengua y las c lulas estructuras deben exhibir patrones de reacci n como se describe para este tejido en Caracter sticas de rendimiento en todas las muestras positivas El reactivo de control negativo recomendado es FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus n de cat logo 15750 Las c lulas marcadas por el an
9. que tambi n regula la transducci n de se ales la actividad de las enzimas y las prote nas transmembrana y que participa en la transcripci n el transporte de mRNA y su traducci n y en las transmisiones sin pticas 3 La actina se expresa en muy diversas c lulas entre ellas las c lulas musculares del esqueleto las c lulas del m sculo liso los pericitos y las c lulas mioepiteliales 4 Consulte las General Instructions for Immunohistochemical Staining de Dako o las instrucciones del sistema de detecci n de los procedimientos de IHQ para 1 Principio del procedimiento 2 Material necesario pero no suministrado 3 Almacenamiento 4 Preparaci n de la muestra 5 Procedimiento de tinci n 6 Control de calidad 7 Soluci n de problemas 8 Interpretaci n de la tinci n y 9 Limitaciones generales Anticuerpo monoclonal de rat n listo para usar suministrado en forma l quida en un tamp n que contiene prote na estabilizadora y 0 015 mol L de azida de sodio Clon HHF35 1 4 Isotipo IgG1 kappa Fracci n proteica del miocardio humano extra da de SDS de un caso de estenosis suba rtica hipertr fica idiop tica En la inmunotransferencia de Western de actina purificada de los m sculos del esqueleto de un conejo as como de extractos de aorta tero diafragma y coraz n de mono el anticuerpo marca la prote na de 42 kDa correspondiente a la actina muscular de los isotipos a y y pero no llega a reaccionar con la actina a
10. ticuerpo muestran tinci n citoplasm tica Tejidos normales en el colon las c lulas del m sculo liso que conforma la l mina propia muestran una reacci n de tinci n de moderada a fuerte En la lengua las gl ndulas salivares y las mucosas muestran una reacci n de tinci n de d bil a moderada En el tejido normal el anticuerpo marca las fibras estriadas de los m sculos del esqueleto los m sculos lisos de las arterias y las venas y los pericitos de las arterias m s peque as la l mina muscular del tracto gastrointestinal el miometrio del tero el estroma de pr stata las c lulas de la c psula en varios rganos parenquimatosos incluidos el ri n el h gado los n dulos linf ticos y el bazo y las capas mioepiteliales de los conductos y las gl ndulas mamarias as como las gl ndulas exocrinas salivares bronquiales y sudor paras 1 4 7 5 7 Otras c lulas no musculares son no reactivas entre ellas se encuentran el tejido conectivo las c lulas epiteliales las c lulas linfoides los macr fagos las c lulas neurales y las c lulas endoteliales vasculares 1 4 6 7 Tejidos anormales en tejidos patol gicos ha quedado demostrado que este anticuerpo es un marcador fiable para los tumores de tejidos blandos con diferenciaci n muscular p ej los leiomyomas LM leiomyosarcomas LMS y los rhabdomyosarcomas RMS tumores para los que exhibi un mayor grado de sensibilidad que los anticuerpos para la desmina 1 As
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