EFECTOS DE EXTRACTOS ACETÓNICOS Y ACUOSOS
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1. Figura 2 se aprecia que la longevidad m xima es inferior a la mitad de aquella del testigo lo cual se corrobor con la prueba de ANVA para la variable en la Figura 3 En la misma se detallan los resul tados de la prueba de Tukey para la supervivencia m xima luego de obtener diferencias significativas para el ANVA F 28 11 p 0 0001 Las respuestas de comportamiento e ingesti n para los mismos extractos acet nicos resultaron invertidos As el extracto de trichillia que fue relativamente m s t xico en la dieta fue tambi n el menos repelente Esto sugiere la posibilidad de integrar la utilizaci n de los extractos para que cumplan diferentes funciones seg n sus propie dades y la respuesta producida en la poblaci n de hormigas Su uso integrado podr a mejorar los resultados a campo para el manejo de esta plaga La siguiente etapa de investigaci n deber focalizarse entonces en las pruebas de campo donde podr considerarse la repelencia para el acarreo que pro duce el extracto de ricino en el cultivo y el efecto t xico del extracto de trichillia para la fabricaci n de cebos con productos naturales a utilizar en los hormigueros Caffarini et al 2006 Efectos de extractos acet nicos y acuosos de Ricinus communis ricino Melia azedarach para so 63 Supervivencia d as 70 7 60 o 50 T 40 y 30 20 10 f TESTIGO PARAISO RICINO TRICHI2. 1978 Del ajuste se obtuvieron las variables de la funci n a que representar a la tasa media de mortalidad de la poblaci n y B que representar a su supervivencia media Se compar la longevidad m xima de los tratamientos mediante ANOVA y prueba a posteriori Tukey alfa 0 05 Zar 1999 RESULTADOS Y DISCUSI N EXPERIMENTO A En la Figura 1 fueron graficados los resultados correspondientes al experimento Los trozos de hoja de eucalipto topicados con extractos acet nicos y acuosos de ricino y para so fueron los menos aceptados efecto de repelencia mientras que tanto la trichillia como el testigo presentaron tiempos de acarreo menores prueba de Friedman para extractos acuosos T2 85 p 0 0001 para extractos cet nicos T2 5 50 p 0 0371 Este efecto de repelencia que produjo el ex tracto de ricino a bajas concentraciones podr a corresponderse con el efecto t xico que hallaron Mendes Acacio et al 1998 al ensayar la inges ti n y topicaci n de dicho extracto sobre obreras de Atta sexdens rubropilosa Efectos similares observaron Hebling et al 1996 y Kitamura et al 1999 Contrariamente a lo observado para varios insectos por Simmonds et al 2001 los extractos de trichillia no parecieron influir en la respuesta de aceptaci n del material vegetal tratado en las concentraciones ensayadas La tendencia en la respuesta a los extractos coincidi para ambos solventes de extracci n re sultando los
3. A Universidad Nacional de C rdoba 1ra Ed Editorial Brujas Argentina KITAMURA A E HEBLING M J TAKAMASHI DEL BIANCO M BUENO O C PAGNOCCA F C BACCIJR M FERN NDEZ J B VIEIRA P C 1999 Determinag o da toxicidade da ricinina para operarias de Atta sexdens L Hymenoptera Formicidae em laboratorio Rev Naturalia 24 n esp 307 309 KUSNEZOV N 1978 Hormigas argentinas claves para su identificaci n Miscel nea Tucum n Argentina 61 pp MENDES ACACIO BIGI M F HEBLING M J BUENO C O PAGNOCCA F C DA SILVA O A FERN NDEZ J B VIEIRA P C 1998 Toxicidade de extractos foliares de Ricinus communis L para operarias de Atta sexdens rubropilosa Forel Hymenoptera Formicidae Revta Bras Ent 41 2 4 239 243 PELICANO A CAFFARINI P CARRIZO P 1999 Sobrevivencia de operarias de Acromyrmex lundi y A striatus 64 IDESIA Chile Volumen 26 N 1 Enero Abril 2008 aisladas de hormigueros y alimentadas con dieta artificial IDESIA 17 91 99 Universidad de Tarapac Chile PELICANO A CAFFARINI P CARRIZO P FERRO M 2002 Eficacia de sustancias de origen vegetal sobre hormigas cortadoras XV Jornadas Fitosanitarias Argentinas R o Cuarto C rdoba SILVEIRA C HEBLING M J A ROCHA W C FERNANDES J B PAGNOCCA F C BUENO O C BACCI JR M VIEIRA P SILVA M F 2003 Toxicidade de duas especies do g nero trichillia para operarias de Atta sexden
4. LLIA Figura 3 Supervivencia m xima d as para hormigas alimentadas con dieta y extractos cet nicos Se representan los promedios y el error est ndar de la media Las letras representan el ordenamiento entre las medias a partir de la prueba de Tukey una vez que la prueba de ANVA resultara significativa alfa 0 05 LITERATURA CITADA ACACIO BIGI M F M 1997 Determina o do efeito t xico de extractos foliares e derivados qu micos de Ricinus com munis L para operarias de Atta sexdens L Hymenoptera Formicidae Tese de Doutorado Instituto de Biociencias UNESP R o Claro 134 p BAIRD C 2001 Qu mica ambiental Parte II Sustancias t xi cas Cap 6 Compuestos qu micos t xicos Pp 300 388 Ed Reverte SA Barcelona Espa a 622 pp CAFFARINI P P CARRIZO A PELICANO 2006 Extractos c tricos como atrayentes para hormiguicidas con sustancias naturales Revista de la Facultad de Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Cuyo Mendoza 1 19 26 CONOVER W J 1980 Practical non parametric statistics Wiley NY DA SILVA M F DAS G E VICTOR S R RODR GUEZ GAMBOA T BELLINI A MAFEZOLI J GUERREIRO G AMBROZI A R P BIOVATTI M W FERN NDEZ J B VIEIRA P C CASTRO O C PAGNOCCA F C BUENO O C HEBLING M J A 2001 Integra ao entre plantas e formigas cortadei ras Perspectivas de utilizag o de plantas para o controle Sistem tica micromolecular da Ordem Rutal
5. Volumen 26 N 1 P ginas 59 64 IDESIA Chile Enero Abril 2008 EFECTOS DE EXTRACTOS ACET NICOS Y ACUOSOS DE RICINUS COMMUNIS RICINO MELIA AZEDARACH PARAISO Y TRICHILLIA GLAUCA TRICHILLIA SOBRE LA HORMIGA NEGRA COM N ACROMYRMEX LUNDI EFFECTS OF ACETONIC AND WATER EXTRACTS OF RICINUS COMMUNIS MELIA AZEDARACH Y TRICHILLIA GLAUCA ON BLACK COMMON CUTTING ANT ACROMYRMEX LUNDI Patricia Caffarini2 Paola Carrizo Alicia Pelicano Patricia Roggero Jos Pacheco RESUMEN Las hormigas cortadoras son importantes plagas en zonas agroforestales A fin de sustituir los plaguicidas sint ticos empleados para su control por otros naturales m s degradables y selectivos y menos agresivos para el ambiente se estudian diferentes especies de plantas que ocasionan variaciones comportamentales o t xicas para esta plaga o su hongo simbionte Sobre la hormiga negra com n se ensay en laboratorio la respuesta a extractos acet nicos obtenidos con Soxhlet y acuosos obtenidos por cocimiento de ricino para so y trichillia En hormiguero artificial en un ensayo sin libre elecci n se ofrecieron discos de hojas de eucalipto topicados con dichos extractos n 3 y se registr el tiempo de acarreo de todos los discos por tratamiento Los extractos de ricino y para so generaron mayor efecto repelente independientemente del solvente de extracci n utilizado Las pruebas de Friedman resultaron extractos acuosos T2 85 p 0 0001 acet ni
6. azedarach se ha detectado la presencia de compuestos de acci n insecticida como azadiractina y salanina Varias especies del g nero Trichillia Meliaceae contienen tetranortriterpenoides en sus ra ces con actividades disuasivas sobre varios insectos Simmonds et al 2001 Pelicano et al 2002 demostraron efectos de toxicidad en cole pteros causados por extractos de Trichillia glauca conteniendo limonoides como trichillina Silveira et al 2003 observaron un alto potencial insecticida por ingesti n para hormigas cortadoras en dos especies de Trichillia sobre operarias de Atta sexdens rubropilosa El alcaloide ricina extra do de la hoja de Ricinus communis Euphorbiaceae mostr alta toxicidad para operarias de Atta sexdens Ac cio Bigi 1997 OBJETIVO Estudiar los efectos que presentan extraccio nes acet nicas y acuosas de Ricinus communis ricino Melia azedarach para so y Trichillia glauca trichillia sobre la hormiga negra com n Acromyrmex lundi MATERIALES Y M TODOS Todos los experimentos se realizaron en labo ratorio en condiciones controladas a 24 2 C 70 80 HR y 12 hrs de fotoper odo OBTENCI N DE EXTRACTOS VEGETALES RICINO PARA SO Y TRICHILLIA Los extractos acet nicos se obtuvieron me diante Soxhlet a partir de hojas de cada especie previamente picadas y secadas en estufa Los extractos acuosos se obtuvieron por coci miento en agua de hojas de cada especie picadas Exp
7. cos T2 5 50 p 0 0371 por lo tanto se obtuvo una diferenciaci n m s clara entre los tratamientos para los extractos acuosos Se prob entonces para los extractos acet nicos el efecto t xico por ingesti n en confinamiento En cajas de Petri se suministr a las hormigas estos extractos con dieta base artificial n 5 y se registr la super vivencia diaria ajustando las curvas a Weibull obteniendo o tasa media de mortalidad y B supervivencia media y comparando la longevidad m xima por ANOVA y Tukey Ambos an lisis resultaron coincidentes y el extracto de trichillia menos repelente present la mayor toxicidad por ingesti n El uso integrado de los extractos en campo permitir a aprovechar el efecto repelente del extracto de ricino para la protecci n del cultivo y el efecto t xico del extracto de trichillia para el control de hormigueros Palabras clave Ricino para so trichillia hormiga cortadora ABSTRACT Leaves cutting ants are important pest in agroforestry Many plant species are studied in order to replace synthetic pesticides since they can produce behavior changes or toxic effects on the ants and on its symbiotic fungus In lab trials with the black common cutting ant its response to acetone and water extracts of M azedarach T glauca and R communis was assayed In artificial nest n 3 without chance of choice they were offered pieces of eucalyptus leaves with extracts applied on Carrying time by treatment was regist
8. de ricino y para so los m s efectivos como repelentes Sin embargo en la respuesta de repelencia se obtuvo una diferenciaci n m s clara para los extractos acuosos respecto de los extractos acet nicos Estos ltimos fueron entonces proba dos in vitro para determinar su efecto t xico por ingesti n EXPERIMENTO B En la Figura 2 se detall el progreso en las curvas de supervivencia para las hormigas expuestas a la dieta con extractos La pendiente de la curva de supervivencia diaria debida al tratamiento con trichillia es m s pronunciada mientras que las curvas correspon dientes a los dem s extractos no se diferenciaron tan netamente de aquella del testigo aunque son relativamente peores ya que implican una mayor tasa de mortalidad y una menor longevidad total ver 300 Tiempo de acarreo m n S d 250 abc 200 150 E 100 a ah I b a 50 0 T T E 1 Testigo Trichillia Melia Ricino O Cet nicos Acuosos Figura 1 Resultados para tiempo de acarreo para los extractos cet nicos y acuosos de Trichillia Melia Ricinus y Testigo solvente de extracci n Se representaron los promedios y el error est ndar de la media Las letras representan diferencias en la suma de rangos para las pruebas a posteriori luego que la prueba de Friedman resultara significativa alfa 0 05 dentro de cada m todo solvente de extracci n 62 IDESIA Chile Volumen 26 N 1 En
9. ered Pieces with ricinus and melia acetone and water extracts were the least accepted highest repellency effect according to Friedman tests water T2 85 p 0 0001 acetone T2 5 50 p 0 0371 However water extracts performed a most definite separation within Then toxic effects for ingestion from acetone extracts were tested in vitro In Petri dishes acetone extracts in basic diet were offered to the ants n 5 and daily survivors were registered Weibull function was adjusted to obtain mean rate of mortality and B daily survivorship besides maximum longevity was compared by means of ANVA and Tukey Both analysis obtained the same results and trichillia extract the least repellent caused the highest toxic effect That suggests taking advantage of both outdoors and to integrate the repellent effect of ricinus in the crops and the toxic effect of trichillia in nests Key words ricinus melia trichillia black cutting ant Proyecto UBACyT G 062 Bioinsumos para el manejo de plagas C tedra de Zoolog a Agr cola Facultad de Agronom a Universidad de Buenos Aires Av San Mart n 4453 C1417DSE Buenos Aires Argentina E mail caffarinO agro uba ar Fecha de Recepci n 12 Diciembre 2006 Fecha de Aceptaci n 08 Junio 2007 60 IDESIA Chile Volumen 26 N 1 Enero Abril 2008 INTRODUCCI N Las hormigas Familia Formicidae Orden Hymenoptera son insectos pol fagos siendo algunas especies importantes plagas de la agricult
10. erimento A En hormiguero artificial Della Lucia 1993 se plantearon dos ensayos sin libre elecci n con todos los extractos Para ello se topicaron hojas del tercio superior de plantines de 6 meses de edad de Eucalyptus camaldulensis especie preferida por las hormigas cortadoras Vendramin et al 1995 De ellas se extrajeron con sacabocado 15 discos de 5 mm de di metro colocados en tres grupos que se ofrecieron en la playa de forrajeo del hormiguero Se realizaron tres repeticiones n 3 a intervalos de 48 72 hrs Entre los ensayos se proporcion a las hormigas la dieta habitual hojas de ligustro y rosal avena y piel de frutos c tricos Observando peri dicamente la playa de forrajeo se registr el tiempo de acarreo final tiempo que las obreras emplearon en recoger todos los discos Los resultados se analizaron mediante Friedman y pruebas a posteriori alfa 0 05 Conover 1980 utlizando el software Infostat 1994 Experimento B Se llev a cabo en caja de Petri n 5 cada una con 6 hormigas con provisi n de agua y dieta base s lida Pelicano et al 1999 a la que se adicionaron los extractos acet nicos de ricino trichillia y melia o ning n extracto testigo Se llev a cabo el recuento Efectos de extractos acet nicos y acuosos de Ricinus communis ricino Melia azedarach para so 61 diario de hormigas sobrevivientes en la caja y las curvas obtenidas se ajustaron a la distribuci n de Weibull Daniel
11. ero Abril 2008 SOBREVIVIENTES 100 90 80 70 4 60 50 40 30 20 10 4 0 15 14552529 13 17 21 25 29 33 37 41 45 49 53 57 61 65 TESTIGO RICINO MELIA TRICHILLIA Her D as desde el inicio Figura 2 Progreso diario en la sobrevivencia de hormigas alimentadas con dieta y extractos acet nicos Tabla 1 Silveira et al 2003 observaron efectos similares trabajando con dos especies de trichillia en bioensayos de ingesti n en laboratorio con Atta sexdens rubropilosa La trayectoria de las curvas fue muy similar en la supervivencia diaria entre ricino y para so aunque resultaron en una reducci n en la supervivencia m xima del 27 y 35 respecto del testigo La prueba de ANVA sin embargo consider significativa tal reducci n Figura 3 s lo en el caso del extracto cet nico de trichillia cuando sta disminuy un 61 respecto del testigo Tabla 1 En la Tabla 1 a continuaci n se muestran las variables obtenidas en el ajuste Tabla 1 Variables obtenidas en el ajuste a la funci n de Weibull curvas de supervivencia Tratamiento a B Testigo 1 886 49 334 Melia 1 645 31 936 Ricino 1 324 36 154 Trichillia 1 900 19 296 En el ajuste obtenido para la funci n que describe la curva de mortalidad puede apreciarse que el efecto producido por el extracto de trichillia se origina en una alteraci n marcada en ambas variables En la
12. es e suas im plica oes frente ao fungo Leucoagaricus gongylophorus Anais do XV Encontro de Mirmecologia 2001 Londrina Brasil pp 105 108 DANIEL D W 1978 Applied nonparametric statistics Houghton Mifflin Co USA 503 pp DELLA LUC A T M C ED 1993 As formigas cortadeiras Vi osa Mina Gerais Brasil 262 pp FARJI BRENER A G A RUGGIERO 1994 Leaf cutting ants Atta and Acromyrmex inhabiting Argentina pat terns in species richness and geographical range sizes J Biogeography 21 390 391 FORTI L C CASTELLANI BOARETTO 1997 Formigas cortadeiras Biolog a ecolog a danos e controle Botucatu SP 61 pp FOWLER H G L C FORTI C R F BRANDAO J H C DELABIE E H L VASCONCELOS 1991 En Ecolog a nutricional de insectos e suas implica es no manejo de pragas A Panizzi amp J Parra Ed Manole Ltda 359 pp S o Paulo HEBLING M J A PAGNOCCA F C BUENO O C FERNANDES J B BACCI JR M VIEIRA P C DA SILVA M F 2001 Compuestos extraidos de plantas con perspectivas de utilizacion en el control de hormigas cortadoras Anais do XV Encontro de Mirmecologia 2001 Londrina Brasil HEBLING M J BUENO O C PAGNOCCA F C BACCI JR M FERN NDEZ J B VIEIRA P C 1996 A utiliza o de produtos naturais para o controle de formigas cortadeiras e ou fungo simbionte Rev Naturalia 24 n esp 311 313 INFOSTAT VERSI N 2004 Manual del Usuario Grupo InfoStat FC
13. s rubropilosa Hymenoptera Formicidae Anais do XVI Simposio de Mirmecolog a Florianopolis Sc P SIMMONDS M S STEVENSON P C PORTER E A VEITCH N C 2001 Insect antifeedant activity of three tetranortriterpenoides form Trichillia pallida J Natural products Columbus 64 8 1117 1120 VENDRAMIN J D SILVEIRA NETO S CERIGNONI J A 1995 Nao Preferencia de Atta sexdens rubropilosa Forel Hymen ptera Formicidae por especies de Eucaliptus Ecosistema 20 87 92 ZAR J H 1999 Biostatistical analysis 4th ed Prentice Hall Inc Simon and Schuster A Viacom Co New Jersey USA 663 pp
14. ura por los da os econ micos que causan Forti y Castellani Boaretto 1997 La subfamilia Myrmicinae es la m s abundante en especies y presenta la mayor diversidad de h bitos Fowler et al 1991 en ella las hormigas cortadoras tribu Attini colectan material vegetal que utilizan como sustrato para el desarrollo del hongo simbionte que es alimento para larvas y adultos Da Silva et al 2001 Estas hormigas se encuentran ampliamente distribuidas en la Argentina Acromyrmex lundi u hormiga negra com n es una de las especies m s difundidas en las zonas agroforestales del pa s extendi ndose desde el norte argentino hasta el paralelo 44 S Kusnezov 1978 Farji Brener y Ruggiero 1994 Habitualmente se ha recurrido para su control a productos t xicos de s ntesis involucrados en su mayor a con efectos adversos causados al ambiente u otros organismos no blanco Desde la prohibici n del uso de los insecticidas clorados hay un creciente inter s en la investigaci n sobre productos eficaces m s selectivos y ambientalmente menos agresivos Baird 2001 As han sido estudiadas diversas especies de plantas que presentan actividad repe lente disrupci n comportamental o t xicas para las hormigas y o inhibitorias del hongo simbionte Hebling et al 2001 debido a la presencia de metabolitos secundarios como alcaloides terpenos fenoles y aceites esenciales En algunas especies de Meli ceas como Azadiractha indica y Melia
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