FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human Cytokeratin 19 Clone
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1. FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 19 Clone RCK108 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS615 ENGLISH Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied Staining interpretation 115238 003 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 19 Clone RCK108 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels epithelial cells expressing the cytokeratin 19 protein and is useful for the identification of epithelial tumors and may be useful in identifying cholangiocellular carcinomas 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Cytokeratin 19 CK19 belongs to the intermediate filaments which create a cytoskeleton in almost all cells In contrast to other intermediate filaments cytokeratins CKs are made up of a highly complex multigene family of polypeptides with molecular masses ranging from 40 to 68 kDa Twenty distinct CK polyp2. tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides Ref K8020 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTU3 volume de distribution de 300 UL Autoprogram CK19 sans contre coloration ou CK19H avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubat
3. Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Cytokeratin 19 CK19 geh rt zu den Intermedi rfilamenten die in fast allen Zellen ein Zytoskelett bilden Im Gegensatz zu anderen Intermedi rfilamenten bestehen Zytokeratine ZK aus einer hochkomplexen multigenen Familie von Polypeptiden deren Molekulargewicht von 40 bis 68 kDa reicht Bisher wurden 20 unterschiedliche ZK Polypeptide 2 3 in verschiedenen humanen Epithelzellen entdeckt 4 Die ZK lassen sich in einen sauren Typ A Klasse und einen neutral basischen Typ B Klasse Il unterteilen CK19 geh rt dem sauren Typ der Zytokeratine an Es handelt sich um ein Zytokeratin von niedrigem Molekulargewicht 40 kDa das typischerweise in einfachen Epithelzellen oberfl chlichen intermedi ren und basalen Zellen des bergangsepithels sowie in luminalen basalen und myoepithelialen Zellen einiger komplexer Epithelgewebe vorkommt CK19 wird normalerweise nicht in mehrschichtigem Plattenepithel exprimiert kann aber in modifiziertem Plattenepithel vorkommen das von Lymphozyten durchdrungen ist sowie in Basalzellen des nicht keratinisierenden mehrschichtigen Plattenepithelgewebes 2 4 5 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhi
4. 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Verwendungszweck Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 115238 003 Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique Tissus sains L anticorps marque la couche basale de l piderme marquage de cellules diss min es les cellules de Merkel les glandes s bac es la gaine ext rieure des follicules pileux la cellule s cr toire et les cellules canalaires luminales des glandes sudoripares eccrines l pith lium squameux non k ratinisant du larynx le m soth lium les cellules basales et pith liales cili es colonnaires des bronches les cellules pith liales alv olaires les cellules cubiques et basales de la glande parotide les cellules canalaires acinaires et basales des glandes salivaires mineures les cellules basales de l oesophage
5. Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Leber und Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr 15750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen ein zytoplasmatisches F rbemuster auf Gesundes Gewebe Der Antik rper markiert Basalzellen der Epidermis verstreute Zellmarkierung Merkel Zellen Talgdr sen u ere Zellen der Haarwurzelscheiden sekretorische Zellen der ekkrinen Schwei dr seng nge und Lumenauskleidungszellen nicht keratinisierendes Plattenepithel des Larynx Mesothel mit Zilien versehenes Zylinderepithel und Basalzellen der Bronchi Alveolarauskleidungszellen kuboide und basale Zellen der Parotis duktale azin re und basale Zellen der kleinen Speicheldr sen Basalzellen der Speiser hre sekretorische und neuroendokrine Zellen des Magens Epithel der Villi und der Krypten im D nndarm Dickdarmepithel Epithel der Acini und G nge des Pankreas Epithelzellen der Gallenwege und der Gallenblase Zylinderepithelzellen
6. ad nosquameux et 2 2 carcinomes du col cellules claires 13 13 carcinomes endom tro des et 3 3 carcinomes adenosquameux de l endom tre 5 5 carcinomes cellules squameuses de la vulve bien diff renci s et 1 4 mod r ment diff renci 8 8 adenocarcinomes de la prostate 3 3 t ratomes malins 2 2 choriocarcinomes 6 6 carcinomes des cellules r nales 9 9 carcinomes de la vessie 8 8 carcinomes de la glande thyro de 1 1 cas d ad amp nome chromophobe et 1 1 cas d adenome acidophile de l hypophyse 4 4 astrocytomes 4 4 m ningiomes et 5 13 l iomyosarcomes 1 Au cours d une autre tude l anticorps a marqu 5 8 cas de tumeurs malignes du sein m dullaires 26 28 tumeurs canalaires invasives 4 4 tumeurs lobulaires invasives 5 5 tumeurs mucineuses et 2 2 tumeurs tubulaires ainsi que 12 14 fibroad nomes 5 5 tumeurs phyllodes 3 3 adenomes tubulaires 1 1 cas d hamartome 3 4 papillomes intracanalaires 8 8 gyn comasties et 5 5 volutions fibrokystiques du sein 6 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 19 Clone RCK108 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert Epithelzellen auf denen Zytokeratin 19 Protein exprimiert wird und dient zum Nachweis von Epitheltumoren und kann bei der Identifizierung cholangiozellul rer Karzinomere hilfreich sein 1
7. adenosquamous carcinoma and 5 5 small cell lung carcinomas of the respiratory tract 5 5 pleomorphic adenomas 3 3 mucoepidermoid carcinomas and 1 1 acinic cell carcinoma of the parotis gland 6 6 squamous cell carcinomas of esophagus 4 4 adenocarcinomas 2 2 carcinoids and 1 1 Iymph node metastasis in the stomach 1 1 adenocarcinoma of the small intestine 1 1 carcinoid of the appendix 11 11 adenocarcinomas 2 2 Iymph node metastasis and 1 1 carcinoid of colon 7 7 adenocarcinomas of pancreas 6 6 cholangiocellular carcinomas 12 12 ductal carcinomas 4 4 lobular carcinomas 2 2 Iymph node metastasis and 4 4 combined ductal lobular carcinomas of the breast 2 2 Paget s disease 11 11 cystadenocarcinomas 2 2 clear cell carcinomas and 7 7 endometroidcarcinomas of the ovary 1 1 malignant Brenner tumor 4 4 squamous cell carcinomas 12 12 adenocarcinomas 8 8 adenosquamous and 2 2 clear cell carcinomas of cervix 13 13 endometrioid carcinomas and 3 3 adenosquamous carcinomas of endometrium 5 5 well and 1 4 moderately differentiated squamous cell carcinomas of vulva 8 8 adenocarcinomas of prostate 3 3 malignant teratomas 2 2 choriocarcinomas 6 6 renal cell carcinomas 9 9 urinary bladder carcinomas 8 8 thyroid gland carcinomas 1 1 chromophobic and 1 1 acidophil adenoma of the pituitary gland 4 4 astrocytomas 4 4 meningiomas and 5 13 leiomyosarcomas 1 In another study the antibody labeled 5 8 medullary 26 28 invasive ductal 4 4 invasive lobular 5 5
8. der Brustdr senl ppchen und g nge Zylinder und Reservezellen des Endozervix Basalzellen des Ektozervix Dr senepithel im Endometrium Zytotrophoblasten der Plazenta Dr sengangepithel Basalzellen und Samenbl schen der Prostata Rete testis Epithelzellen der Bowman Kapsel proximale und distale Tubuli sowie die Henlesche Schleife bergangsepithel der Harnblase und Follikelepithel der Schilddr se 1 In der Leber weisen die Epithelzellen der Galleng nge eine m ige bis starke zytoplasmatische F rbereaktion auf w hrend die Leberzellen negativ sind In Mandelgewebe zeigen die Plattenepithelzellen fokal eine schwache bis m ige zytoplasmatische F rbereaktion die in der Basalschicht st rker ist Pathologisches Gewebe In malignen humanen Geweben markierte der Antik rper 4 von 4 Basalzellen und 3 von 3 gut differenzierten keratinisierenden Plattenepithelkarzinomen der Epidermis 1 von 1 Keratoakanthom 1 von 3 und 1 von 2 gut differenzierten nicht keratinisierenden Plattenepithelkarzinomen der Lippe bzw der Zunge 1 von 5 m ig und 1 von 1 wenig differenzierten Plattenepithelkarzinomen der Zunge 1 von 1 Papillom und 3 von 3 Inversionspapillomen des Nasopharynx 1 von 3 gut 3 von 4 m ig und 1 von 1 wenig differenzierten Plattenepithelkarzinomen des Larynx 7 von 7 Platteneptihelkarzinomen 4 von 4 Adenokarzinomen 1 von 1 adenosquam sen Karzinom und 5 von 5 Kleinzellen Lungenkarzinomen des Respirationstrakts 5 von 5 pleomorphen Aden
9. les cellules s cr toires et neuroendocrines de l estomac les villosit s et l pith lium cryptique de l intestin gr le l pith lium du c lon l pith lium canalaire et acinaire du pancr as l pith lium des canaux biliaires l pith lium de la v sicule biliaire les cellules colonnaires des lobules et canaux mammaires les cellules colonnaire et de r serve de l endocol les cellules basales de l exocol l epithelium glandulaire endom trial le cytotrophoblaste placentaire l pith lium canalaire les cellules basales et les vesicules s minales de la prostate le rete testis l pith lium de la capsule de Bowman les tubules proximaux distaux et la boucle de Henle l pith lium transitionnel de la vessie ainsi que l pith lium folliculaire de la glande thyro dienne 1 Dans le foie les cellules pith liales des canaux biliaires pr sentent une coloration cytoplasmique mod r e forte tandis que les cellules du foie sont n gatives Dans l amygdale les cellules de l Epithelium squameux pr sentent par endroits une coloration cytoplasmique faible mod r e qui est plus forte dans la couche basale Tissus tumoraux Dans les tissus humains malins l anticorps a marqu 4 4 des cellules basales et 3 3 des carcinomes cellules squameuses k ratinisant et bien diff renci s de l Epiderme 1 1 cas de k ratoacanthome 1 3 et 1 2 des carcinomes cellules squameuses non k ratinisants bien diff ren
10. 8 medull ren 26 von 28 invasiven duktalen 4 von 4 invasiven lobul ren 5 von 5 muzin sen und 2 von 2 tubul ren malignen Brustl sionen sowie 12 von 14 Fibroadenomen 5 von 5 Phyllodestumoren 3 von 3 tubul ren Adenomen 1 von 1 Hamartom 3 von 4 intradukt ren Papillomen 8 von 8 Gyn komastien und 5 von 5 fibrozystischen Ver nderungen der Brust 6 1 Kwaspen FHL Smedts FMM Broos A Bulten H Debie WMH et al Reproducible and highly sensitive detection of the broad spectrum epithelial marker keratin 19 in routine cancer diagnosis Histopathol 1997 31 503 16 a Or ei Moll R Franke WW Schiller DL Geiger B Krepler R The catalog of human cytokeratins patterns of expression in normal epithelia tumors and cultured cells Cell 1982 31 11 24 Moll R L we A Laufer J Franke WW Cytokeratin 20 in human carcinomas A new histodiagnostic marker detected by monoclonal antibodies Am J Pathol 1992 140 427 47 Moll R Cytokeratins as markers of differentiation in the diagnosis of epithelial tumors Subcell Biochem 1998 31 205 62 Lane EB Alexander CM Use of keratin antibodies in tumor diagnosis In Osborn M ed Seminars in Cancer Biology Antibodies in Diagnosis and Therapy Philadelphia Saunders 1990 165 79 Dalal P Shousha S keratin 19 in paraffin sections of medullary carcinoma and other benign and malignant breast lesions Mod Pathol 1995 8 413 6 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbol
11. chemistry on different human tissues the antibody labels only epithelia whereas cells known not to contain CK19 e g hepatocytes are not labeled 1 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date stamped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximate
12. ci s de la l vre et de la langue respectivement 1 5 cas de carcinomes cellules squameuses de la langue mod r ment diff renci et 1 1 cas mal diff renci 1 1 cas de papillome et 3 3 papillomes invers s du nasopharynx 1 3 carcinomes cellules squameuses laryng bien diff renci 3 4 mod r ment diff renci et 1 1 mal diff renci 7 7 carcinomes cellules squameuses 4 4 ad nocarcinomes 1 1 carcinome ad nosquameux et 5 5 carcinomes pulmonaires petites cellules des voies respiratoires 5 5 adenomes pl omorphes 3 3 carcinomes muco pidermo des et 1 1 cas de carcinome cellules acinaires de la glande parotide 6 6 carcinomes cellules squameuses de l oesophage 4 4 ad nocarcinomes 2 2 carcino des et 1 1 cas de m tastase des ganglions Iymphatiques dans l estomac 1 1 cas d adenocarcinome de l intestin gr le 1 1 cas de carcinoide de l appendice 11 11 ad nocarcinomes 2 2 m tastases des ganglions Iymphatiques et 1 1 cas de carcino de du c lon 7 7 ad nocarcinomes du pancr as 6 6 carcinomes cholangiocellulaires 12 12 carcinomes canalaires 4 4 carcinomes lobulaires 2 2 m tastases des ganglions lymphatiques et 4 4 carcinomes canalaires lobulaires associ s du sein 2 2 cas de maladie de Paget 11 11 cystad nocarcinomes 2 2 carcinomes cellules claires et 7 7 carcinomes endom tro des de l ovaire 1 1 tumeur maligne de Brenner 4 4 carcinomes cellules squameuses 12 12 ad nocarcinomes 8 8 carcinomes du col
13. cretory and neuroendocrine cells of the stomach villus and crypt epithelium of the small intestine colon epithelium ductal and acinar epithelium of pancreas bile duct epithelium gall bladder epithelium columnar cells of lobuli and ducti in breast columnar and reserve cells of endocervix basal cells of ectocervix endometrial glandular epithelium placental cytotrophoblast ductal epithelium basal cells and seminal vesicles of prostate rete testis epithelium of Bowman s capsule proximal distal tubuli and Henle s loop transitional epithelium of the bladder and follicle epithelium of the thyroid gland 1 In liver the epithelial cells of bile ducts show a moderate to strong cytoplasmic staining reaction whereas the liver cells are negative In tonsil the squamous epithelial cells focally show a weak to moderate cytoplasmic staining reaction that is strongest in the basal layer Abnormal tissues In malignant human tissues the antibody labeled 4 4 basal cell and 3 3 well differentiated keratinizing squamous cell carcinomas of epidermis 1 1 keratoacanthoma 1 3 and 1 2 well differentiated non keratinizing squamous cell carcinomas of the lip and tongue respectively 1 5 moderately and 1 1 poorly differentiated tongue squamous cell carcinomas 1 1 papilloma and 3 3 inverted papillomas of the nasopharynx 1 3 well 3 4 moderately and 1 1 poorly differentiated laryngeal squamous cell carcinomas 7 7 squamous cell carcinomas 4 4 adenocarcinomas 1 1
14. e 115238 003 Catalogue number Reference catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif medical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature limitation Use by Limites de temperature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS615 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17
15. eptides 2 3 have been revealed in various human epithelial cells 4 They can be divided into an acidic type I and a neutral basic type II subfamily CK19 belongs to the acidic type of cytokeratins and is a low molecular mass cytokeratin 40 kDa typically expressed in simple epithelia superficial intermediate and basal cells of transitional epithelium as well as luminal basal and myoepithelial cells in a few complex epithelia CK19 is normally not expressed in stratified squamous epithelia but may be present in modified squamous epithelium invaded by Iymphocytes as well as in basal cells in non keratinizing stratified squamous epithelium 2 4 5 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone RCK108 Isotype IgG1 kappa Cytoskeletal preparation from human bladder cancer cell line T24 1 In Western blotting of cytoskeleton preparations from the T24 and RT4 cell lines as well as the human squamous carcinoma cell line HaCaT the antibody labels a single band corresponding to CK19 1 In immunohisto
16. er CK19H mit Gegenf rbung IS615 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale References R f rences Literatur Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX
17. humaine 1 Dans les analyses par Western blot des pr parations cytosquelettiques issues des lign es cellulaires T24 et RT4 ainsi que de la lign e cellulaire HaCaT de carcinome squameux humain l anticorps marque une seule bande correspondant la CK19 1 Dans l immunohistochimie de diff rents tissus humains l anticorps marque uniquement les pith liums tandis que les cellules connues pour ne pas contenir de CK19 par exemple les h patocytes ne sont pas marqu es 1 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditi
18. ines 4 Les CK peuvent tre divis es en sous familles type acide et type II neutre basique De type acide la CK19 est une cytok ratine de faible masse mol culaire 40 kDa exprim e de mani re typique dans les pith liums simples superficiels et interm diaires et dans les cellules basales de l Epithelium transitionnel ainsi que dans les cellules luminales basales et myo pith liales de quelques rares pith liums complexes La CK19 n est normalement pas exprim e dans les pith liums squameux stratifi s mais peut tre pr sente dans l pith lium squameux modifi envahi par les lymphocytes ainsi que dans les cellules basales dans l pith lium squameux stratifi non k ratinisant 2 4 5 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone RCK108 Isotype IgG1 kappa Pr paration cytosquelettique issue de lign e cellulaire T24 de cancer de la vessie
19. ion doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de Envision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre le foie et l amygdale et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les IS615 EFG MNI 2009
20. ly 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the sof
21. mucinous and 2 2 tubular malignant breast lesions as well as 12 14 fibroadenomas 5 5 Phyllodes tumors 3 3 tubular adenomas 1 1 Hamartoma 3 4 intraduct papillomas 8 8 gynaecomastias and 5 5 fibrocystic changes of the breast 6 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human Cytokeratin 19 Clone RCK108 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destine a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque les cellules pith liales exprimant la prot ine de cytok ratine 19 et facilite l identification des tumeurs pith liales et peut s av rer utile pour l identification des carcinomes cholangiocellulaires 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi La cytok ratine 19 CK19 fait partie des filaments interm diaires qui cr ent un cytosquelette dans presque toutes les cellules la diff rence des autres filaments interm diaires les cytok ratines CK sont constitu es d une famille multig nique hautement complexe de polypeptides dont les poids mol culaires varient entre 40 et 68 kDa Vingt polypeptides de CK distincts 2 3 ont t identifi s dans diverses cellules pith liales huma
22. nitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram CK19 ohne Gegenf rbung od
23. ogischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schch en aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Sch
24. omen 3 von 3 Mucoepidermoidkarzinomen und 1 von 1 Azin rzellenkarzinom der Parotisdr se 6 von 6 Plattenepithelkarzinomen der Speiser hre 4 von 4 Adenokarzinomen 2 von 2 Karzinoiden und 1 von 1 Lymphknotenmetastase im Magen 1 von 1 Adenokarzinom des D nndarms 1 von 1 Karzinoid des Appendix 11 von 11 Adenokarzinomen 2 von 2 Lymphknotenmetastasen und 1 von 1 Karzinoid des Dickdarms 7 von 7 Adenokarzinomen der Bauchspeicheldr se 6 von 6 cholangiozellul ren Karzinomen 12 von 12 duktalen Karzinomen 4 von 4 lobul ren Karzinomen 2 von 2 Lymphknotenmetastasen und 4 von 4 gemischt duktalen lobul ren Karzinomen der Brust 2 von 2 F llen von Paget Krankheit 11 von 11 Zystadenokarzinomen 2 von 2 Klarzellkarzinomen und 7 von 7 Eierstock Endometroidkarzinomen 1 von 1 malignen Brenner Tumor 4 von 4 Plattenepithelkarzinomen 12 von 12 Adenokarzinomen 8 von 8 adenosquam sen und 2 von 2 Klarzellkarzinomen des Zervix 13 von 13 Endometrioidkarzinomen und 3 von 3 adenosquam sen Karzinomen des Endometriums 5 von 5 gut und 1 von 4 m ig differenzierten Plattenepithelkarzinomen der Vulva 8 von 8 Prostata Adenokarzinomen 3 von 3 malignen Teratomen 2 von 2 Choriokarzinomen 6 von 6 Nierenzellkarzinomen 9 von 9 Harnblasenkarzinomen 8 von 8 Schilddr senkarzinomen 1 von 1 chromophoben und 1 von 1 azidophilen Hypophysendenom 4 von 4 Astrozytomen 4 von 4 Meningiomen und 5 von 13 Leiomyosarkomen 1 In einer anderen Studie markierte der Antik rper 5 von
25. ons autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L epaisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec d masquage d Epitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent
26. s should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include liver and tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for these tissues in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Cells labeled by the antibody display cytoplasmic staining IS615 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 9595 CVR No 33 21 13 17 Performance characteristics FRANCAIS Utilisation prevue Resume et explication Reactifs fournis Immunogene Specificite Precautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 115238 003 Normal tissues The antibody labels basal layer of epidermis scattered cell labeling Merkel cells sebaceous glands external root sheath of hair follicles secretory coil and luminal duct cells of eccrine sweat glands non keratinizing squamous epithelium of larynx mesothelium columnar ciliated epithelial and basal cells of bronchi alveolar lining cells cuboidal and basal cells of the parotis gland ductal acinar and basal cells of minor salivary glands basal cells of esophagus se
27. stochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon RCK108 Isotyp IgG1 Kappa Zellger stpr paration aus menschlicher Harnblasenkarzinom Zelllinie T24 1 Beim Western Blotting der Zellger stpr parate aus den Zelllinien T24 und RT4 sowie aus der HaCaT Zelllinie von menschlichem Plattenepithelkarzinom markiert der Antik rper eine CK19 entsprechende Bande 1 Immunhistochemisch markiert der Antik rper an unterschiedlichen menschlichen Geweben ausschlie lich Epithelzellen w hrend andere Zellen die bekanntlich kein CK19 enthalten z B Hepatozyten nicht markiert werden 1 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biol
28. tware of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTUS3 300 uL dispense volume Autoprogram CK19 without counterstaining or CK19H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative control
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