FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human BCL2 Oncoprotein
Contents
1. FLEX Monoclonal Mouse Anti Human BCL2 Oncoprotein Clone 124 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code 15614 ENGLISH Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied Staining interpretation 115221 004 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human BCL2 Oncoprotein Clone 124 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels cells expressing BCL2 oncoprotein Positive results aid in the classification of follicular lymphomas and various diffuse Iymphoproliferative diseases 1 Differential classification is aided by the results from a panel of antibodies The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist This antibody is intended to be used after the primary diagnosis has been made by conventional histopathology using non im2. den Antikrebsmedikamenten und Strahlung 2 3 Das BCL2 Onkoprotein befindet sich auf der zytoplasmatischen Seite der u eren Mitochondrialmembran im endoplasmatischen Retikulum und in der nuklearen H lle 2 4 und verf gt ber eine Molek lmasse von 26 kDa 3 Das BCL2 Gen ist an der t 14 18 chromosomalen Translokation beteiligt die in 85 von menschlichen follikul ren Lymphomen und in 20 von diffusen B Zell Lymphomen vorkommt 4 Bei dieser Translokation wird das BCL2 Gen am Chromosomsegment 18q21 an die Ig Schwerkettenstelle bei 14932 angelagert was zu einer deregulierten Expression des BCL2 Onkoproteins f hrt 4 Siehe General Instructions for Immunohistochemical Staining Allgemeine Anweisungen zur immunhistochemischen F rbung oder Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon 124 1 Isotyp IgG1 Kappa Synthetisches Peptid das aus den Aminos uren 41 54 des menschlichen BCL2 Onkoproteins besteht 1 Beim Western Blotting von Extrakten gesunder menschlicher Milz 1 5 t 14 18 positiver follikul rer Lymphome 1 und myeloider leuk mischer Zelllinien 5 markiert der Antik rper ausschlie lich eine Bande von 26 kDa die dem BCL2 Onkoprotein sowohl unter nicht reduzierenden 1 als auch unter reduzierenden Bedingungen entspricht 1 5 Der Antik rper
3. f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide d h matoxyline EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e IS614 EFG SSM 2014 09 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Interpretation de la coloration Performances DEUTSCH Verwendungszweck Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifit t Vorsichtsma nahmen Lagerung Gewebevorbereitung und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 115221 004 Des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons de patients Le tissu de contr le positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action semblables ceux d crits pour ce tissu la section Performances pour tous les chantillons positifs Le r actif de contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique T
4. Le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine puis d paraffin es est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine d j d crite Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissu sur les lames de verre il est recommand d utiliser les lames FLEX IHC Microscope Slides r f K8020 Le syst me de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus r f K8010 Les tapes de coloration et les temps d incubation sont pr programm s dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume d application de 200 uL ou FLEXRTUS volume d application de 300 uL Programme automatique BCL2 sans contre coloration ou BCL2H avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de plus de 10 lames l tape dite Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r
5. SM 2014 09 p 1 4 Performance characteristics FRANCAIS Utilisation pr vue R sum et explication R actif fourni Immunog ne Sp cificit Pr cautions d emploi Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 115221 004 Normal tissues The antibody labels almost all peripheral blood lymphocytes In lymphoid tissue small lymphocytes in the mantle zones and T cell areas are positive whereas very few cells in germinal centres are labeled In the spleen many cells in both T and B cell areas and the red pulp are labeled by the antibody In the thymus many cells in the medulla are labeled while most cells in the cortex show weak or negative staining 1 In tonsil the lymphocytes in the peripheral mantle zone and interfollicular lymphocytes show a moderate to strong staining reaction whereas basal epithelial cells show a weak to moderate staining reaction Abnormal tissues The antibody labeled many neoplastic cells including 31 38 of cases of diffuse lymphoma and lymphoproliferative disorders of low and high grade including chronic Iymphocytic leukemia hairy cell leukemia T cell lymphoma B and T cell large cell type and anaplastic large cell Ki 1 lymphoma and 37 43 of neoplastic follicles in cases of follicular lymphoma 1 Expression of BCL2 oncoprotein was also detected in 15 19 of synovial sar
6. ative study of other soft tissue spindle cell sarcomas and an additional analysis by fluorescence in situ hybridization Hum Pathol 1996 27 1060 5 7 Soini Y P kk P bcl 2 is preferentially expressed in tumours of muscle origin but is not related to p53 expression Histopathology 1996 28 141 5 Explanation of symb ols Explicatio n des symboles Erl uterung der Symbole REF IVD Catalogue number R f rence catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostik um Temperature limitation Use by Limites de temp rature 2 Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich 1 C 2 C Verwendbar bis Contains sufficientfor lt n gt tests Manufacturer y Contenu suffisant pour lt n gt tests mal Fabricant Hersteller Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests 2 Consultinstructions for use Voir les instructions d utilisation LOT Gebrauchsanweisung beachten Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung 115221 004 IS614 EFG SSM 2014 09 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
7. bilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par des diff rences dans les proc dures du laboratoire et qu un probl me li l anticorps est suspect contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus incluses en paraffine et fix es au formol L paisseur des coupes d chantillons tissulaires doit tre d environ 4 um Le pr traitement avec une restauration d pitope induite par la chaleur HIER est n cessaire l aide du Dako PT Link r f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x r f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine Le pr traitement des coupes de tissus fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure 3 en 1 de pr paration des chantillons pour Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice pour la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Link r f K8010 K8004 Remarque Apres la coloration les sections doivent tre deshydratees claircies et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es
8. comas 6 and in muscle derived tumors 7 Labeling was only observed in 5 21 Burkitt lymphomas while 32 52 diffuse large B cell lymphomas were positive with the antibody 2 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human BCL2 Oncoprotein clone 124 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque les cellules exprimant l oncoprot ine BCL2 Les r sultats positifs aident classer les lymphomes folliculaires et diverses maladies Iymphoproliferatives diffuses 1 La classification diff rentielle est facilit e par les r sultats provenant d un panel d anticorps L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Cet anticorps est destin tre utilis apr s un diagnostic primaire par histopathologie traditionnelle utilisant des colorations histochimiques non immunologiques L oncoprot ine BCL2 est un bloqueur de l apoptose mort des cellules Les exp riences de transfert g nique ont d montr que des taux lev s de cette prot ine peuvent prot ger une grande vari t de cellules contre divers stimuli de mort cellulaire allant de la suppression d
9. e unerwartete Anf rbung beobachtet wird welche durch Anderungen in den Labormethoden nicht erkl rt werden kann und falls Verdacht auf ein Problem mit dem Antik rper besteht ist Kontakt mit dem technischen Kundendienst von Dako aufzunehmen Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Es ist eine Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER Verfahren mit dem Dako PTLink Code Nr PT100 PT101 erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PTLink Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Gewebevorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Eindeckmedium auf den Objekttr ger eingedeckt werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link und nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebettet
10. ein under both nonreducing 1 and reducing conditions 1 5 The antibody labels the myeloid leukemic cell lines HL 60 promyelocytic KG1 myeloblastic GM 1 monoblastic and K562 erythromyeloid 5 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date stam ped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections T
11. eten Schnitte beschrieben wird empfohlen Nach Durchf hrung des F rbeverfahrens m ssen die Objekttr ger unter Verwendung eines geeigneten permanenten Eindeckmediums eingedeckt werden W hrend der Gewebevorbehandlung oder w hrend des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens d rfen die Gewebeschnitte nicht austrocknen F r eine bessere Haftung der Gewebeschnitte an den Glas Objekttr gern werden FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen IS614 EFG SSM 2014 09 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Verwendungszweck Das empfohlene Detektionssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram BCL2 ohne Gegenf rbung oder BCL2H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit lt 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit gt 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Keine eingestellt werden Dies gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Al
12. issue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining
13. issus sains L anticorps marque presque tous les lymphocytes du sang p riph rique Dans le tissu lympho de les petits lymphocytes des zones du manteau et des zones lymphocytes T sont positifs alors que tr s peu de cellules des centres germinatifs sont marqu es Dans la rate de nombreuses cellules sont marqu es par l anticorps tant dans les zones lymphocytes T et B que dans la pulpe rouge Dans le thymus de nombreuses cellules de la medulla sont marqu es alors que la plupart des cellules du cortex pr sentent une coloration faible ou n gative 1 Dans les amygdales les lymphocytes de la zone du manteau p riph rique et les lymphocytes interfolliculaires pr sentent une coloration mod r e forte tandis que la coloration des cellules pith liales basales est faible mod r e Tissus anormaux L anticorps a marqu de nombreuses cellules n oplasiques dont 31 cas sur 38 de Iymphomes diffus et de syndromes Iymphoproliferatifs de faible et haute intensit y compris la leuc mie lymphocytaire chronique la leuc mie cellules chevelues le lymphome lymphocytes T le lymphome Ki 1 grandes cellules anaplasique et lymphocytes B et T et 37 follicules n oplasiques sur 43 dans les cas de lymphome folliculaire 1 L expression de l oncoprot ine BCL2 a galement t d tect e dans 15 cas sur 19 de sarcomes synoviaux 6 et dans les tumeurs d riv es du muscle 7 Seuls 5 cas de lymphomes de Burkitt sur 21 ont t marqu
14. le Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die Protokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Eindeckmedium Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Als Positivkontrollgewebe sollte Mandelgewebe verwendet werden und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungseigenschaften beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativkontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen ein zytoplasmatisches F rbemuster auf Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human BCL2 Oncoprotein Clone 124 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert Zellen die das BCL2 Onkoprotein exprimieren Positive Ergebnisse unterst tzen die Klassifizierung von follikul ren Lympho
15. markiert die myeloiden leuk mischen Zelllinien HL 60 promyelozytisch KG1 myeloblastisch GM 1 monoblastisch und K562 erythromyeloid 5 1 F r geschultes Fachpersonal 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Bei den in diesem Produkt verwendeten Konzentrationen kann Natriumazid obwohl nicht als gef hrlich klassifiziert mit in Wasserleitungen vorhandenem Blei oder Kupfer reagieren und zur Bildung von hochexplosiven Metallazid Anreicherungen f hren Nach der Entsorgung muss mit reichlich Wasser nachgesp lt werden um Metallazid Anreicherungen in den Leitungen zu vermeiden 3 Wie bei allen aus biologischen Materialien gewonnenen Produkten m ssen die ordnungsgem en Handhabungsverfahren eingehalten werden 4 Entsprechende pers nliche Schutzausr stung PSA tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend den rtlichen staatlichen und EU rechtlichen Bestimmungen zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Beh lter aufgedruckten Verfallsdatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer berpr ft werden Es gibt keine offensichtlichen Anhaltspunkte f r die m gliche Instabilit t dieses Produkts Es sollten daher die Positiv und Negativkontrollen gleichzeitig mit den Patientengewebeproben mitgef hrt werden Wenn ein
16. men und unterschiedlich diffusen Iymphoproliferativen Erkrankungen 1 Die Differenzialklassifikation wird durch die Ergebnisse eines Antik rper Panels unterst tzt Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Dieser Antik rper kommt nach der Prim rdiagnose durch konventionelle Histopathologie unter Verwendung von nicht immunologischen histochemischen F rbungen zum Einsatz References References Literatur 1 Pezzella F Tse AGD Cordell JL Pulford KAF Gatter KC Mason DY Expression of the bcl 2 oncogene protein is not specific for the 14 18 chromosomal translocation Am J Pathol 1990 137 225 32 IRN 79 1291 8 Adams JM Cory S The bcl 2 protein family Arbiters of cell survival Science 1998 281 1322 6 Kusenda J Bcl 2 family proteins and leukemia minireview Neoplasma 1998 45 117 22 Yang E Korsmeyer SJ Molecular thanatopsis A discourse on the BCL2 family and cell death review Blood 1996 88 386 401 Delia D Aiello A Soligo D Fontanella E Melani C Pezzella F et al bcl 2 proto oncogene expression in normal and neoplastic human myeloid cells Blood 1992 6 Hirakawa N Naka T Yamamoto I Fukuda T Tsuneyoshi M Overexpression of bcl 2 protein in synovial sarcoma A compar
17. munological histochemical stains BCL2 oncoprotein is a blocker of apoptotic cell death Gene transfer experiments have shown that elevated levels of this protein can protect a wide variety of cells from diverse cell death stimuli ranging from growth factor withdrawal and cytotoxic Iymphokines to virus infection and DNA damaging anticancer drugs and radiation 2 3 BCL2 oncoprotein resides on the cytoplasmic side of the mitochondrial outer membrane endoplasmic reticulum and nuclear envelope 2 4 and has a molecular mass of 26 kDa 3 The BCL2 gene is involved in the t 14 18 chromosomal translocation found in 85 of human follicular lymphomas and 20 of diffuse B cell lymphomas 4 In this translocation the BCL2 gene at chromosome segment 18q21 is juxtaposed with the Ig heavy chain locus at 14432 resulting in deregulated expression of BCL2 oncoprotein 4 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone 124 1 Isotype IgG1 kappa Synthetic peptide comprising amino acids 41 54 of human BCL2 oncoprotein 1 In Western blotting of extracts of normal human spleen 1 5 t 14 18 positive follicular lymphoma 1 and myloid leukemic cell lines 5 the antibody labels solely a band of 26 kDa corresponding to BCL2 oncoprot
18. s tandis que 32 cas de lymphomes diffus grandes cellules B sur 52 taient positifs l anticorps 2 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human BCL2 Oncoprotein Clone 124 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert Zellen die das BCL2 Onkoprotein exprimieren Positive Ergebnisse unterst tzen die Klassifizierung von follikul ren Lymphomen und unterschiedlich diffusen Iymphoproliferativen Erkrankungen 1 Die Differenzialklassifikation wird durch die Ergebnisse eines Antik rper Panels unterst tzt Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Dieser Antik rper kommt nach der Prim rdiagnose durch konventionelle Histopathologie unter Verwendung von nicht immunologischen histochemischen F rbungen zum Einsatz Das BCL2 Onkoprotein blockiert den apoptotischen Zelltod Gentransfer Experimente haben gezeigt dass erh hte Konzentrationen dieses Proteins eine Vielzahl unterschiedlicher Zellen vor diversen Zelltod Stimuli sch tzen k nnen angefangen beim Wachstumsfaktor Entzug und zytotoxischen Lymphokinen bis hin zu Virusinfektionen und DNA Sch
19. steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram BCL2 without counterstaining or BCL2H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operators Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 Cells labeled by the antibody display cytoplasmic staining IS614 EFG S
20. t une bande de 26 kDa correspondant l oncoprot ine BCL2 la fois dans des conditions non r ductrices 1 et des conditions r ductrices 1 5 L anticorps marque les lign es cellulaires de leuc mie my lo des HL 60 promy locytaires KG1 my loblastiques GM 1 monoblastiques et K562 rythromy lo des 5 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN 3 produit chimique hautement toxique sous sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosives Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un quipement de protection individuelle appropri pour viter tout contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales nationales et europ ennes Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date de p remption imprim e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n existe pas de signe particulier pour indiquer l insta
21. u facteur de croissance et des Iymphokines cytotoxiques aux infections virales et m dicaments anticanc reux et rayons qui endommagent l ADN 2 3 L oncoprot ine BCL2 r side sur le c t cytoplasmique de la membrane mitochondriale externe du r ticulum endoplasmique et de l enveloppe nucl aire 2 4 et poss de une masse mol culaire de 26 kDa 3 Le g ne BCL2 est impliqu dans la translocation chromosomique t 14 18 observ e dans 85 des Iymphomes humains folliculaires et 20 des lymphomes lymphocytes B diffus 4 Dans cette translocation le g ne BCL2 sur le segment chromosomique 18q21 est juxtapos au locus de la cha ne lourde d Ig au segment 14q32 ce qui entra ne une expression d r gul e de l oncoprot ine BCL2 4 Se r f rer aux General Instructions for Immunohistochemical Staining Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du systeme de d tection relatives aux proc dures IHC Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone 124 1 Isotype IgG1 kappa Peptide synth tique comprenant des acides amin s 41 54 de l oncoprot ine BCL2 humaine 1 Lors de l analyse par Western blot d extraits de rate humaine saine 1 5 de lymphome folliculaire positif t 14 18 1 et de lign es cellulaires de leuc mie my lo de 5 l anticorps marque uniquemen
Download Pdf Manuals
Related Search