FLEX Monoclonal Mouse Anti-Human CD30 Clone Ber-H2
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1. FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD30 Clone Ber H2 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS602 ENGLISH Intended use Synonym for antigen Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 115243 004 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD30 Clone Ber H2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody labels anaplastic large cell lymphoma ALCL and Reed Sternberg cells and is useful for the identification of ALCL and as a secondary marker for Hodgkin s disease 1 The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Ki 1 antigen 1 CD30 is a transmembrane cytokine receptor belonging to the tumor necrosis factor TNF receptor superfamily Mature CD30 has a molecular mass of 120 kDa and is derived from a 90 kDa precursor protein2. F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L Natriumazid enth lt Klon Ber H2 1 Isotyp IgG1 Kappa Co Zelllinien von einem Patienten mit Morbus Hodgkin der T Zelllinie 1 6 Anti Human CD30 Clone Ber H2 wurde bei dem der 4th International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 4 Internationale r Workshop und Konferenz ber menschliche Leukozyten differenzierende Antigene als Anti CD30 geclustert 7 Eine SDS PAGE Analyse der Immunpr zipitate die zwischen dem Lysat von I markierten COS Zellen die mit CD30 kodierender cDNA transfiziert wurden und dem Antik rper gebildet wurden zeigte eine Reaktion mit einem 120 kDa Protein das dem CD30 Protein entspricht Scheintransfizierte COS Zellen waren negativ Das vom Antik rper erkannte Epitop liegt zwischen den Aminos ureresten 112 und 412 8 Der Antik rper markiert Zelllinien die aus Morbus Hodgkin abgeleitet werden L428 L540 L591 Co Ho und KM H2 HTLV 1 transfizierte T Zelllinien Hut 102 und MT 2 EBV transformierte B Zelllinien Non Burkitt B95 8 Affe BJA B und Cess sowie die myeloische Zelllinie K 562 1 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige
3. chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Les cellules marqu es par l anticorps pr sentent une coloration cytoplasmique en pointill s et ou membranaire 1 Tissus sains Dans les coupes de tissus d amygdale de ganglions lymphatiques l anticorps marque les grandes cellules lympho des diss min es situ es autour des follicules lympho des et en marge des centres germinatifs Dans les coupes incluses en paraffine mais pas dans les coupes congel es une sous population de cellules plasmatiques est positive Dans le thymus seuls quelques thymocytes m dullaires sont marqu s Dans un grand nombre de tissus non lympho des aucun marquage par l anticorps n a t observ deux exceptions pr s le cytoplasme des cellules pancr atiques exocrines a t marqu de mani re diffuse la fois dans les coupes congel es et incluses en paraffine et le cytoplasme d un certain pourcentage de neurones corticaux c r braux et de cellules de Purkinje du cervelet a t marqu dans les coupes incluses en paraffine mais pas dans les coupes congel es L anticorps n a pas r agi aux monocytes ou aux lymphocytes p riph riques au repos 1 Les lymphocytes p rifolliculaires activ s dans l amygdale pr sentent une coloration mod r e forte Tissus tumoraux Dans les coupes de tissus inclus en paraffine de lymphomes anaplasiques
4. nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandelgewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Mit diesem Antik rper markierte Zellen weisen eine membran se und oder punkt hnliche zytoplasmatische F rbung auf 1 Gesundes Gewebe Bei Schnitten von Mandelgewebe und Lymphknoten markiert der Antik rper verstreute gro e Iymphoide Zellen die um die Lymphfollikel und am Saum der Keimzent
5. ration des cellules lympho des normales 2 Une forme soluble de 85 kDa du CD30 le SCD30 lib r e par la mol cule li e la membrane par clivage prot olytique peut tre d tect e dans le s rum des patients dont des n oplasmes expriment le CD30 3 4 L expression du CD30 est observ e dans les cellules de Hodgkin et Reed Sternberg H RS dans les cellules des lymphomes anaplasiques grandes cellules et sur les lymphocytes B et T activ s 2 Dans les n oplasmes et les tissus non Iymphoides l expression du CD30 a t confirm e dans les carcinomes embryonnaires les s minomes les cellules d ciduales et les m soth liomes 5 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4 Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone Ber H2 1 Isotype IgG1 kappa Lign e cellulaire Co tablie partir d une lign e de lymphocytes T de la maladie de Hodgkin 1 6 L anticorps Anti Human CD30 clone Be
6. 2 The extracellular domain of CD30 is homologous to that of TNF receptor superfamily members whereas there is no homology in the cytoplasmic domain suggesting major differences in signalling mechanisms 3 The intracellular part of CD30 possesses kinase activity indicating that CD30 plays a role in regulating the function differentiation and or proliferation of normal Iymphoid cells 2 A soluble 85 kDa form of CD30 sCD30 released from the membrane bound molecule by proteolytic cleavage can be detected in the sera of patients with CD30 expressing neoplasms 3 4 CD30 expression is found on Hodgkin and Reed Sternberg H RS cells anaplastic large cell lymphoma cells and on activated B and T lymphocytes 2 In non Iymphoid tissues and neoplasms CD30 expression has been confirmed in embryonal carcinomas seminomas decidual cells and mesotheliomas 5 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L sodium azide Clone Ber H2 1 Isotype IgG1 kappa Co cell line established from a patient with Hodgkin s disease of T cell
7. Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl schchen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenproben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen IS602 EFG SSM 2001 1 10 26 p 3 4 Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Der Ant
8. instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer instrument please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue should include tonsil and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 IS602 EFG SSM 20011 10 26 p 1 4 Staining interpretation Performance characteristics FRAN AIS Utilisation pr vue Synonyme de l antig ne Resume et explication Reactifs fournis
9. Immunogene Specificite Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni 115243 004 Cells labeled by the antibody display membrane and or a dot like cytoplasmic staining 1 Normal tissues In tonsil lymph node sections the antibody labels scattered large lymphoid cells localized around lymph follicles and at the margin of germinal centres In paraffin sections but not in frozen sections a subpopulation of plasma cells is positive In the thymus only a few medullary thymocytes are labeled In a large range of non lymphoid tissues no labeling with the antibody was observed with two exceptions the cytoplasm of exocrine pancreatic cells was labeled diffusely in both frozen and paraffin embedded sections and the cytoplasm of a proportion of cerebral cortical neurons and Purkinje cells of the cerebellum were labeled in paraffin embedded sections but not frozen sections The antibody did not react with any resting peripheral lymphocytes or monocytes 1 Activated perifollicular lymphocytes in tonsil show a moderate to strong staining reaction Abnormal tissues In paraffin embedded sections of anaplastic large cell lymphoma the antibody strongly labeled all of 60 cases No differences were observed in labeling between T B or null cell phenotypes In paraffin embedded sections of Hodgkin s disease 61 61 c
10. ases of nodular sclerosis 53 53 cases of mixed cellularity 8 10 cases of lymphocyte depleted and 4 13 cases of lymphocyte predominance type were labeled by the antibody In frozen sections all of 108 tested cases were positive 1 In non Hodgkin s Iymphomas a weak staining of a subpopulation of tumor cells was seen in 11 11 cases of lymphomatoid papulosis 62 93 cases of cutaneous pleomorphic angioimmunoblastic and Iymphoepithelioid T cell lymphomas and in 53 332 cases of chronic lymphocytic centrocytic small cleaved centroblastic centrocytic centroblastic and immunoblastic B cell lymphomas in frozen and paraffin embedded sections whereas a strong staining was seen in 20 67 cases of Iymphoplasmocytoid cytic B cell lymphomas 1 In non lymphoid neoplasms the antibody labels tumor cells in 48 50 cases of pure embryonal carcinoma EC or EC components of germ cell tumors In cases of mixed and pure germ cell tumors without EC components 0 27 was labeled In activated mesothelium 16 28 pleural and peritoneal effusions were positive with the antibody small foci of tumor cells in 2 8 mesotheliomas were also positive 5 No labeling was observed in 8 cases of Kaposi s sarcoma and 8 cases of teleangiectatic granuloma 9 A diffuse or finely granular cytoplasmic staining was observed in the endothelial cells in 21 33 cases of haemangioma 4 10 cases of Iymphangioma 4 9 cases of mixed tumors with both components and 6 10 cases of ang
11. cumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur II n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont ob
12. effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur l instrument Dako Autostainer utilis contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation d sire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp amp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance Il est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Ref K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre l amygdale et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les
13. es sans l ments embryonnaires aucun cas n a t marqu sur 27 Dans le m soth lium active 16 cas sur 28 d effusions pleurales et p riton ales se sont r v l positifs l anticorps de petits foyers des cellules tumorales ont galement t positifs dans 2 m soth liomes sur 8 5 Aucune coloration n a t observ e sur 8 cas de sarcome de Kaposi et 8 cas de granulome t langiectasique 9 Une coloration diffuse ou granulaire points fins a t observ e dans les cellules endoth liales dans 21 cas d hemangiome sur 33 4 cas de lymphangiome sur 10 4 cas de tumeurs mixtes deux composants sur 9 et 6 cas d angiol amp iomyome sur 10 9 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD30 Clone Ber H2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper markiert anaplastische groBzellige Lymphome ALCL und Reed Sternberg Zellen und dient der Erkennung von ALCL und als Sekund rmarker f r Morbus Hodgkin 1 Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit ordnungsgem en Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer Diagnostiktests des Patienten vorgenommen werden Ki 1 Antigen 1 CD30 ist ein transmembraner Zytokinrezeptor der zur Tumor Ne
14. grandes cellules l anticorps a fortement marqu chacun des 60 cas Aucune diff rence de marquage n a t observ e entre les ph notypes de lymphocytes B T ou de cellules nulles Dans les coupes incluses en paraffine de la maladie de Hodgkin 61 cas sur 61 de scl rose nodulaire 53 cas sur 53 de cellularit mixte 8 cas sur 10 de d pl tion lymphocytaire et 4 cas sur 13 de type pr dominance lymphocytaire ont t marqu s par l anticorps Dans les coupes congel es chacun des 108 cas test s s est av r positif 1 Dans les lymphomes non hodgkiniens une faible coloration d une sous population de cellules tumorales a t observ es dans 11 cas sur 11 de papulose lymphomato de 62 cas sur 93 de lymphomes lymphocytes T cutan s polymorphes angio immunoblastiques et lympho pith lio des et dans 53 cas sur 332 de lymphomes lymphocytes B lymphocytaires chroniques centrocytiques petites cellules cliv es centroblastiques centrocytiques centroblastiques et immunoblastiques dans des coupes congel es et incluses en paraffine tandis qu une forte coloration a t observ e dans 20 cas sur 67 de lymphomes lymphocytes B lymphoplasmocyto des lymphoplasmocytaires 1 Dans les n oplasmes non Iymphoides l anticorps marque les cellules tumorales dans 48 cas sur 50 de carcinome embryonnaire pur ou les l ments embryonnaires de tumeurs cellules germinales Dans les cas de tumeurs cellules germinales mixtes et pur
15. ik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code Nr K8005 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisier
16. ini B Pileri S Stein H Ber H2 A new anti Ki 1 CD30 monoclonal antibody directed at a formol resistant epitope Blood 1989 74 1678 89 2 de Bruin PC Gruss H J van der Valk P Willemze R Meijer CJLM CD30 expression in normal and neoplastic lymphoid tissue biological aspects and clinical implications review Leukemia 1995 9 1620 7 3 Falini B Pileri S Pizzolo G D rkop H Flenghi L Stirpe F et al CD30 Ki 1 molecule A new cytokine receptor of the tumor necrosis factor receptor superfamily as a tool for diagnosis and immunotherapy review Blood 1995 85 1 14 4 Stein H Foss H D D rkop H Marafioti T Delsol G Pulford K et al CD30 anaplastic large cell lymphoma a review of its histopathologic genetic and clinical features review Blood 2000 96 3681 95 5 D rkop H Foss H D Eitelbach F Anagnostopoulos Latza U Pileri S et al Expression of the CD30 antigen in non Iymphoid tissues and cells J Pathol 2000 190 613 8 6 Drexler HG Minowada J Hodgkin s disease derived cell lines a review review Hum Cell 1992 5 42 53 7 Schwarting R Stein H A3 Cluster report CD30 In Knapp W D rken B Gilks WR Rieber EP Schmidt RE Stein H et al editors Leucocyte typing IV White cell differentiation antigens Proceedings of the 4th International Workshop and Conference 1989 Feb 21 25 Vienna Austria Oxford New York Tokyo Oxford University Press 1989 p 419 22 8 D rkop H Latza U Hummel M Eitelbach F Seed B Stei
17. ioleiomyoma 9 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Human CD30 Clone Ber H2 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destin une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps marque les cellules de lymphomes anaplasiques grandes cellules LAGC et les cellules de Reed Sternberg et est utile pour l identification du LAGC et comme marqueur secondaire pour la maladie de Hodgkin 1 L interpr tation clinique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi Antig ne Ki 1 1 Le CD30 est un r cepteur transmembranaire de cytokine appartenant la superfamille des r cepteurs du facteur de n crose tumorale FNT Le CD30 mature a une masse mol culaire de 120 kDa et est d riv d une prot ine pr curseur de 90 kDa 2 Le domaine extracellulaire du CD30 est homologue celui des membres de la superfamille des r cepteurs FNT alors qu il n existe pas d homologie dans le domaine cytoplasmique indiquant des diff rences majeures dans les m canismes de signalisation 3 La partie intracellulaire du CD30 poss de une activit kinase ce qui indique que le CD30 joue un r le de r gulation de diff renciation et ou de prolif
18. krose Faktor Superfamilie TNF geh rt Reifes CD30 hat ein Molekulargewicht von 120 kDa und wird auf ein Vorl uferprotein mit 90 kDa zur ckgef hrt 2 Die extrazellul re Dom ne von CD30 ist homolog mit der extrazellur ren Dom ne der Mitglieder der TNF Rezeptor Superfamilie w hrend bei der zytoplasmatischen Dom ne keine Homologie vorliegt was auf gro e Unterschiede in den Signalisierungsmechanismen hinweist 3 Der intrazellul re Bereich von CD30 besitzt eine Kinaseaktivit t Dies bedeutet dass CD30 eine Rolle bei der Regulierung der Funktion Differenzierung und oder Proliferation von normalen Iymphoiden Zellen spielt 2 Eine l sliche Form von CD30 mit 85 KDa sCD30 die aus dem membrangebundenen Molek l durch proteolytische Spaltung freigesetzt wird kann im Serum von Patienten mit CD30 exprimierenden Neoplasmen nachgewiesen werden 3 4 Die CD30 Expression tritt auf Hodgkin und Reed Sternberg H RS Zellen anaplastischen gro zelligen Lymphomen und aktivierten B und T Zellen Lymphozyten auf In nicht lymphoiden Geweben und Neoplasmen wurde die CD30 Expression in embryonalen Karzinomen Seminomen Dezidualzellen und Mesotheliomen nachgewiesen 5 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5
19. lineage 1 6 Anti Human CD30 clone Ber H2 was clustered as anti CD30 at the Fourth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens 7 SDS PAGE analysis of immunoprecipitates formed between lysate of I labeled COS cells transfected with cDNA encoding CD30 and the antibody shows reaction with a 120 kDa protein corresponding to CD30 Mock transfected COS cells were negative The epitope recognized by the antibody is located between amino acid residues 112 and 412 8 The antibody labels cell lines derived from Hodgkin s disease L428 L540 L591 Co Ho and KM H2 HTLV 1 transfected T cell lines Hut 102 and MT 2 EBV transformed B cell lines non Burkitt B95 8 monkey BJA B and Cess and the myeloid cell line K 562 1 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expira
20. n H Molecular cloning and expression of a new member of the nerve growth factor receptor family that is characteristic for Hodgkin s disease Cell 1992 68 421 7 9 Rudolph P Lappe T Schmidt D Expression of CD30 and nerve growth factor receptor in neoplastic and reactive vascular lesions an immunohistochemical study Histopathology 1993 23 173 8 Explanation of symbols Legende des symboles Erl uterung der Symbole 115243 004 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel Catalogue number Reference catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif medical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature limitation Use by Limites de temperature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS602 EFG SSM 2001 1 10 26 p 4 4 45 44 85 95 00 Fax 45 44 859595 CVR No 33 21 13 17
21. queous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 replacing the High pH Target Retrieval Solution from this kit with EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code K8005 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLEXRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram CD30 without counterstaining or CD30H with counterstaining Note The Autoprogram must be updated to reflect the change in target retrieval solution In the Programming Grid go to the Edit Lists tab choose Primary Antibody FLEX CD30 MxH IS602 change pre treatment from EnVision FLEX TRS High pH to EnVision FLEX TRS Low pH The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operators Manual for the dedicated
22. r H2 a t class comme un anti CD30 la Fourth International Workshop and Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens Quatri me Conf rence et Atelier Internationaux sur les Antig nes de Diff renciation des Leucocytes Humains 7 L analyse par immunoblot PAGE en pr sence de SDS des immunopr cipit s form s entre le lysat des cellules COS marqu es l iode I transfect es par l ADNc codant pour le CD30 et l anticorps pr sente une r action une prot ine de 120 kDa correspondant au CD30 Les cellules COS faussement transfect es taient n gatives L pitope reconnu par l anticorps est situ entre les r sidus d acides amin s 112 et 412 8 L anticorps marque les lign es cellulaires d riv es de la maladie de Hodgkin L428 L540 L591 Co Ho et KM H2 les lign es de lymphocytes T transfect es par HTLV 1 Hut 102 et MT 2 les lign es de lymphocytes B transform es par l EBV non Burkitt B95 8 singe BJA B et Cess ainsi que la lign e de cellules my lo des K 562 1 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d azides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute ac
23. ren lokalisiert sind Bei Paraffinschnitten jedoch nicht in Gefrierschnitten ist eine Subpopulation der Plasmazellen positiv Im Thymus werden nur wenige medull re Thymozyten markiert Bei vielen nicht Iymphoiden Gewebetypen kam keine Markierung mit dem Antik rper zustande mit zwei Ausnahmen das Zytoplasma exokriner Pankreaszellen war sowohl in paraffineingebetteten als auch bei Gefrierschnitten diffus markiert und das Zytoplasma eines Teils der zerebralen Kortexneuronen sowie der Purkinje Zellen des Kleinhirns zeigten bei paraffineingebetteten Schnitten eine F rbung jedoch nicht bei Gefrierschnitten Der Antik rper reagierte nicht mit ruhenden peripheren Lymphozyten oder Monozyten 1 Aktivierte perifollikul re Lymphozyten in Mandeln zeigen eine m ige bis starke F rbereaktion Pathologisches Gewebe Alle 60 paraffineingebetteten Schnitte von anaplastischem groBzelligem Lymphom wurden durch den Antik rper stark markiert Zwischen T B oder Null Zell Ph notypen konnten keine Unterschiede hinsichtlich der Markierung festgestellt werden Bei paraffineingebetteten Schnitten von Patienten mit Morbus Hodgkin wurden 61 von 61 F llen mit nodul rer Sklerose 53 von 53 gemischtzelligen F llen 8 von 10 F llen der lymphozyten Form sowie 4 von 13 F llen der Iymphozytenpr dominanten Form mit dem Antik rper markiert Alle 108 untersuchten Gefrierschnitte waren positiv 1 Bei Non Hodgkin Lymphomen war eine schwache F rbung einer Subpopulation der Tumo
24. rzellen in 11 von 11 F llen von Iymphomatoider Papulosis und in 62 von 93 F llen von kutanen pleomorphen angioimmunoblastischen und Iymphoepithelioiden T Zell Lymphomen feststellbar 53 von 332 F llen der chronisch Iymphozytischen zentrozytischen small cleaved zentroblastisch zentrozytischen und immunoblastischen Form der B Zell Lymphome zeigten ebenfalls eine schwache F rbung sowohl bei paraffineingebetteten als auch bei Gefrierschnitten w hrend 20 von 67 lymphoplasmozytoiden zytischen B Zell Lymphomen stark markiert wurden 1 Bei nicht lymphoiden Neoplasmen markierte der Antik rper Tumorzellen in 48 von 50 F llen von reinem embryonalem Karzinom EC oder von EC Komponenten von Keimzelltumoren Bei gemischten und reinen Keimzelltumoren ohne EC Komponenten fand in O von 27 F llen eine Markierung statt In aktiviertem Mesothel testeten 16 von 28 Pleura und Peritoneum Exsudaten mit dem Antik rper positiv ebenso waren kleine Tumorzellherde bei 2 von 8 Mesotheliomen positiv 5 Bei 8 F llen von Kaposi Sarkom und 8 F llen von teleangiektatischem Granulom wurde keine F rbung beobachtet 9 Eine diffuse oder fein granul re zytoplasmatische F rbung wurde in den Endothelzellen in 21 von 33 F llen von H mangiomen 4 von 10 F llen von Lymphangiomen 4 von 9 F llen von gemischten Tumoren mit beiden Komponenten und 6 von 10 F llen von Angioleiomyomen beobachtet 9 References References Literatur 1 Schwarting R Gerdes J D rkop H Fal
25. stainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS volume de distribution de 300 uL Autoprogram CD30 sans contre coloration ou CD30H avec contre coloration IS602 EFG SSM 20011 10 26 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Interpretation de la coloration Caracteristiques de performance DEUTSCH Zweckbestimmung Synonym f r das Antigen Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifit t Vorsichtsma nahmen Lagerung 115243 004 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Remarque Le programme automatique doit tre actualis pour refl ter le changement de Target Retrieval Solution Dans la grille de programmation aller dans l onglet de modification des listes choisir l anticorps primaire FLEX CD30 MxH 15602 modifier le pr traitement pour remplacer EnVision FLEX TRS High pH par EnVision FLEX TRS Low pH L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre
26. tenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x R f K8005 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires d paraffin es fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 Le systeme de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8010 en rempla ant la solution High pH Target Retrieval Solution de ce kit par la solution EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x R f K8005 Les tapes de coloration et d incubation sont pr programm es dans le logiciel des instruments Dako Auto
27. tion date sta mped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to the PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code K8005 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using a
28. ungssystem ist EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 wobei die High pH Target Retrieval Solution dieses Kits durch EnVision FLEX Target Retrieval Solution Low pH 50x Code Nr K8005 ersetzt wird Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram CD30 ohne Gegenf rbung oder CD30H mit Gegenf rbung Hinweis Autoprogram muss aktualisiert werden um die Anderung bei der Demaskierungsl sung zu ber cksichtigen Im Programmierraster zur Registerkarte Edit Lists Listen bearbeiten gehen Primary Antibody FLEX CD30 MxH IS602 ausw hlen und die Vorbehandlung von FLEX TRS High auf FLEX TRS Low ndern Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleistet vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k
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