FLEX Monoclonal Mouse Anti-Vimentin Clone V9 Ready-to
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1. 1 For professional users 2 This product contains sodium azide NaN a chemical highly toxic in pure form At product concentrations though not classified as hazardous sodium azide may react with lead and copper plumbing to form highly explosive build ups of metal azides Upon disposal flush with large volumes of water to prevent metal azide build up in plumbing 3 As with any product derived from biological sources proper handling procedures should be used 4 Wear appropriate Personal Protective Equipment to avoid contact with eyes and skin 5 Unused solution should be disposed of according to local State and Federal regulations Store at 2 8 Do not use after expiration date sta mped on vial If reagents are stored under any conditions other than those specified the conditions must be verified by the user There are no obvious signs to indicate instability of this product Therefore positive and negative controls should be run simultaneously with patient specimens If unexpected staining is observed which cannot be explained by variations in laboratory procedures and a problem with the antibody is suspected contact Dako Technical Support The antibody can be used for labeling formalin fixed paraffin embedded tissue sections Tissue specimens should be cut into sections of approximately 4 um Pre treatment with heat induced epitope retrieval HIER is required using Dako PT Link Code PT100 PT101 For details please refer to t2. 9 FLEX Monoclonal Mouse Anti Vimentin Clone V9 Ready to Use CE Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS630 ENGLISH Intended use Summary and explanation Reagent provided Immunogen Specificity Precautions Storage Specimen preparation including materials required but not supplied Staining procedure including materials required but not supplied 115275 002 For in vitro diagnostic use FLEX Monoclonal Mouse Anti Vimentin Clone V9 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus is intended for use in immunohistochemistry together with Dako Autostainer Autostainer Plus instruments This antibody is useful for the identification of cells of mesenchymal origin in normal and neoplastic tissues and is of value in tumor diagnosis The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies using proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Vimentin is a 57 kDa intermediate filament IF protein which form part of the cytoskeleton of vertebrate cells Among the five classes of IFs comprising nine groups vimentin belongs to class Ill showing a high degree of specificity for cells of mesenchymal origin The cell type specificity displayed by each of the IF subtypes was initially thought to be retained in malignant cells as well as their normal counterp
3. Pr paration des chantillons 5 Proc dure de coloration 6 Contr le qualit 7 D pannage 8 Interpr tation de la coloration 9 Limites g n rales Anticorps monoclonal de souris pr t l emploi fourni sous forme liquide dans un tampon contenant une prot ine stabilisante et 0 015 mol L d azide de sodium Clone V9 Isotype Igi kappa Vimentine de cristallin de porc purifi e 3 Dans les analyses par Western blot de vimentine de porc purifi e l anticorps marque une seule bande de 57 kDa correspondant la vimentine Lors de l application d extraits cellulaires entiers de lign es cellulaires exprimant la vimentine plus la prot ine gliofibrillaire acide PGFA et la vimentine plus la desmine respectivement l anticorps marque sp cifiquement une bande de vimentine de 57 kDa Comme l indiquent de mani re directe ces exp riences l anticorps ne r agit pas aux deux prot ines FI les plus troitement apparent es la vimentine savoir la desmine et la PGFA 3 En immunocytochimie l anticorps marque les lign es cellulaires humaines IMR90 RD gliome et HeLa positives la vimentine 3 1 Pour utilisateurs professionnels 2 Ce produit contient de l azide de sodium NaN produit chimique hautement toxique dans sa forme pure Aux concentrations du produit bien que non class comme dangereux l azide de sodium peut r agir avec le cuivre et le plomb des canalisations et former des accumulations d a
4. r Zellen mesenchymaler Abstammung Zun chst hatte man angenommen die von jeder IF Unterart gezeigte Zellentyp Spezifit t in gesunden Zellen bleibe in malignen Zellen erhalten Damit w ren IFs wichtige diagnostische Marker f r die Histogenese gewesen Die Koexpression intermedi rer Filamentproteine insbesondere von Vimentin und Zytokeratin wurde inzwischen in einer Reihe von gesunden Zellen Geweben und in neoplastischen L sionen nachgewiesen was f r die Differenzialdiagnose von Tumoren eine ganze Reihe von Antik rpertests erforderlich macht 2 Folgende Angaben bitte den Allgemeinen Richtlinien zur immunhistochemischen F rbung von Dako oder den Anweisungen des Detektionssystems f r IHC Verfahren entnehmen 1 Verfahrensprinzip 2 Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien 3 Aufbewahrung 4 Vorbereitung der Probe 5 F rbeverfahren 6 Qualit tskontrolle 7 Fehlersuche und behebung 8 Auswertung der F rbung 9 Allgemeine Beschr nkungen Gebrauchsfertiger monoklonaler Maus Antik rper in fl ssiger Form in einem Puffer der stabilisierendes Protein und 0 015 mol L NaN enth lt Klon V9 Isotyp Ig1 Kappa Gereinigtes Vimentin aus der Augenlinse vom Schwein 3 Beim Western Blotting von gereinigtem Schweine Vimentin markiert der Antik rper eine einzige Vimentin entsprechende Bande von 57 kDa Bei Verwendung von Vollextrakten Vimentin exprimierender Zelllinien plus GFAP fibrill res saures Gliaprotein und Vimentin b
5. 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Proc dure de coloration y compris le mat riel requis mais non fourni Interpr tation de la coloration Caract ristiques de performance DEUTSCH Zweckbestimmung Zusammenfassung und Erkl rung Geliefertes Reagenz Immunogen Spezifitat Vorsichtsma nahmen Lagerung 115275 002 Le systeme de visualisation recommand est le EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Ref K8010 Les tapes de coloration et d incubation sont preprogrammees dans le logiciel des instruments Dako Autostainer Autostainer Plus l aide des protocoles suivants Protocole mod le FLEXRTU2 volume de distribution de 200 uL ou FLEXRTUS3 volume de distribution de 300 uL Autoprogram VimV9 sans contre coloration ou VimV9H avec contre coloration L tape Auxiliary doit tre r gl e sur rinse buffer lors des cycles de coloration avec lt 10 lames Pour les cycles de coloration de gt 10 lames l tape Auxiliary doit tre r gl e sur none Cela garantit des temps de lavage comparables Toutes les tapes d incubation doivent tre effectu es temp rature ambiante Pour plus de d tails se r f rer au Manuel de l op rateur sp cifique l instrument Si les protocoles ne sont pas disponibles sur la plateforme Dako Autostainer utilis e contacter le service technique de Dako Les conditions optimales peuvent varier en fonction du pr l
6. Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr IS750 Das zellul re F rbemuster ist zytoplasmatisch Gesundes Gewebe Im Allgemeinen markierte der Antik rper die meisten menschlichen Mesenchymzellen einschlie lich Fibrozyten Lipozyten Zellen aus glatter Muskulatur vaskul re Endothelzellen Astrozyten periphere Nervenzellen Makrophagen auch Kupffer Zellen sowie Myoepithelzellen aus Schwei und Speicheldr sen und von der Brust sie allesamt stark markiert wurden Ebenfalls positiv wurden mit variabler Intensit t und Verteilung Follikelzellen der Schilddr se Nebennierenrinde und der distalen Nierenkan le sowie Mesangial und Endothelzellen des Nierenglomerulus und Azinuszellen des Pankreas 1 3 Im menschlichen Auge markiert der Antik rper die pigmentierten posterioren und anterioren Epithelien der Iris einschlie lich der Muskelportion der anterioren Epithelien Pupillenerweiterer und der pigmentierten und nicht pigmentierten Epithelien 5 In den Ziliark rperepithelien wurde Vimentin mit Zytokeratin koexprimiert 5 Skelettmuskel und Herzmuskelzellen Plattenepithelzellen Urothelzellen Gliazellen Neuronen sowie Zellen der Epidermis des Dickdarms und der Magenschleimhaut reagieren durchg ngig negativ auf den Antik rper 1 3 Pathologisches Gewebe Der Antik rper markierte 17 von 20 Sarkomen 16 von 18 Melanomen 4 von 4 Meningiomen und 3 von 3 Schwannomen und war das einzige intermedi re
7. vement et des m thodes de pr paration et doivent tre d termin es par chaque laboratoire individuellement Si le pathologiste qui r alise l valuation desire une intensit de coloration diff rente un sp cialiste d application sp cialiste du service technique de Dako peut tre contact pour obtenir des informations sur la re programmation du protocole V rifier que l ex cution du protocole modifi est toujours valide en v rifiant que le sch ma de coloration est identique au sch ma de coloration d crit dans les Caract ristiques de performance I est recommand d effectuer une contre coloration l aide de EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus R f K8018 L utilisation d un milieu de montage permanent non aqueux est recommand e Des contr les positifs et n gatifs doivent tre r alis s en m me temps et avec le m me protocole que les chantillons du patient Le contr le de tissu positif doit comprendre le foie et amygdale et les cellules structures doivent pr senter des sch mas de r action tels que d crits pour ces tissus dans les Caract ristiques de performance pour tous les chantillons positifs Le contr le n gatif recommand est le FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus R f IS750 Le sch ma de coloration cellulaire est cytoplasmique Tissus sains En g n ral la plupart des cellules mesenchymateuses humaines sont marqu es par l a
8. Filamentprotein in diesen Tumoren Zus tzlich reagierten unterschiedliche Anteile 10 57 von Karzinomen neuroendokrinen Karzinomen Neuroblastomen Thymomen und Mesotheliomen positiv auf den Antik rper Mit Ausnahme der Neuroblastome wurde Zytokeratin mit Vimentin in diesen Tumoren koexprimiert Unter den Adenokarzinomen wurden mehr als 50 der Papillenkarzinome der Schilddr se sowie Karzinome der Nieren des Endometriums der Eierst cke und der Lunge durch den Antik rper markiert Zudem haben sie Keratine und Vimentin koexprimiert 1 References References Literatur 1 Azumi N Battifora H The distribution of vimentin and keratin in epithelial and nonepithelial neoplasms Am J Clin Pathol 1987 88 286 96 2 Herrmann H Aebi U Intermediate filaments and their associates multi talented structural elements specifying cytoarchitecture and cytodynamics Curr Opin Cell Biol 2000 12 79 90 3 Osborn M Debus E Weber K Monoclonal antibodies specific for vimentin Eur J Cell Biol 1984 34 137 43 A Bohn W Wiegers W Beuttenm ller M Traub P Species specific recognition patterns of monoclonal antibodies directed against vimentin Exp Cell Res 1992 201 1 7 5 Kivel T Fuchs U Tarkkanen A Cytoskeleton in neuroectodermally derived epithelial and muscle cells of the human iris and ciliary body J Histochem Cytochem 1992 40 1517 26 Explanation of symbols Explication des symboles Erl uterung der Symbole 115275 002 Catalogue nu
9. K8004 durchf hren Hinweis Nach dem F rben m ssen die Schnitte dehydriert gekl rt und mit permanentem Einbettmedium auf den Objekttr ger aufgebracht werden Entparaffinierte Schnitte Eine Vorbehandlung der entparaffinierten formalinfixierten paraffineingebetteten Gewebeschnitte mit Dako PT Link nach demselben Verfahren wie f r die paraffineingebetteten Schnitte beschrieben wird empfohlen Die Objekttr ger nach dem F rben mit einem w ssrigen oder permanenten Einbettmedium bedecken Die Gewebeschnitte d rfen w hrend der Behandlung oder des anschlie enden immunhistochemischen F rbeverfahrens nicht austrocknen Zur besseren Haftung der Gewebeschnitte an den Glasobjekttr gern wird die Verwendung von FLEX IHC Microscope Slides Code Nr K8020 empfohlen Das empfohlene Visualisierungssystem ist EnVision M FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8010 Die F rbeschritte und Inkubationszeiten sind in der Software der Dako Autostainer Autostainer Plus Ger te mit den folgenden Protokollen vorprogrammiert Matrix Protokoll FLEXRTU2 200 uL Abgabevolumen oder FLEXRTU3 300 uL Abgabevolumen Autoprogram VimV9 ohne Gegenf rbung oder VimV9H mit Gegenf rbung Bei F rbedurchl ufen mit h chstens 10 Objekttr gern sollte der Zusatz Schritt auf Puffersp lgang eingestellt werden F r F rbedurchl ufe mit mehr als 10 Objekttr gern den Zusatz Schritt auf Keine einstellen Dieses gew hrleiste
10. PT100 PT101 Pour plus de d tails se r f rer au Guide d utilisation du PT Link Des r sultats optimaux sont obtenus en pr traitant les tissus l aide de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Coupes incluses en paraffine le pr traitement des coupes tissulaires fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide de la proc dure de pr paration d chantillon 3 en un pour le Dako PT Link Suivre la proc dure de pr traitement indiqu e dans la notice de la EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x R f K8010 K8004 Remarque apr s coloration les coupes doivent tre d shydrat es lav es et mont es l aide d un milieu de montage permanent Coupes d paraffin es le pr traitement des coupes tissulaires deparaffinees fix es au formol et incluses en paraffine est recommand l aide du Dako PT Link en suivant la m me proc dure que pour les coupes incluses en paraffine Apr s coloration un montage aqueux ou permanent des lames est recommand Les coupes de tissus ne doivent pas s cher lors du traitement ni lors de la proc dure de coloration immunohistochimique suivante Pour une meilleure adh rence des coupes de tissus sur les lames de verre il est recommand d utiliser des lames FLEX IHC Microscope Slides R f K8020 IS630 EFG MNI 2009 12 04 p 2 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85
11. XRTU3 300 uL dispense volume Autoprogram VimV9 without counterstaining or VimV9H with counterstaining The Auxiliary step should be set to rinse buffer in staining runs with lt 10 slides For staining runs with gt 10 slides the Auxiliary step should be set to none This ascertains comparable wash times All incubation steps should be performed at room temperature For details please refer to the Operator s Manual for the dedicated instrument If the protocols are not available on the used Dako Autostainer platform please contact Dako Technical Services Optimal conditions may vary depending on specimen and preparation methods and should be determined by each individual laboratory If the evaluating pathologist should desire a different staining intensity a Dako Application Specialist Technical Service Specialist can be contacted for information on re programming of the protocol Verify that the performance of the adjusted protocol is still valid by evaluating that the staining pattern is identical to the staining pattern described in Performance characteristics Counterstaining in hematoxylin is recommended using EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8018 Non aqueous permanent mounting medium is recommended Positive and negative controls should be run simultaneously using the same protocol as the patient specimens The positive control tissue IS630 EFG MNI 2009 12 04 p 1 4 Dako De
12. an iris including the muscle portion dilator pupillae of the anterior epithelium as well as the nonpigmented and pigmented ciliary epithelia 5 In the ciliary epithelia vimentin was coexpressed with cytokeratin 5 Skeletal and cardiac muscle cells epidermal squamous urothelial colonic and gastric mucosal and glial cells as well as neurons are consistently negative with the antibody 1 3 Abnormal tissues The antibody labeled 17 20 sarcomas 16 18 melanomas 4 4 meningeomas and 3 3 schwannomas and was the sole intermediate filament present in these tumors In addition variable percentages 10 57 of carcinomas neuroendocrine carcinomas neuroblastomas thymomas and mesotheliomas were positive with the antibody With the exception of the neuroblastomas cytokeratin was coexpressed with vimentin in these tumors Among adenocarcinomas more than 50 of papillary carcinomas of the thyroid as well as renal endometrial ovarian and lung carcinomas were labeled by the antibody and coexpressed keratins and vimentin 1 Pour utilisation diagnostique in vitro FLEX Monoclonal Mouse Anti Vimentin Clone V9 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus est destine a une utilisation en immunohistochimie avec les instruments Dako Autostainer Autostainer Plus Cet anticorps facilite l identification des cellules d origine mesenchymateuse dans les tissus sains et n oplasiques et est utile pour le diagnostic des tumeurs L interpr tation clin
13. art which made IFs important as diagnostic markers in histogenesis The coexpression of intermediate filaments particularly vimentin and cytokeratin has now been demonstrated in a variety of normal cells tissues and in neoplastic lesions necessitating the use of a panel of antibodies in differential tumor diagnosis 2 Refer to Dako s General Instructions for Immunohistochemical Staining or the detection system instructions of IHC procedures for 1 Principle of Procedure 2 Materials Required Not Supplied 3 Storage 4 Specimen Preparation 5 Staining Procedure 6 Quality Control 7 Troubleshooting 8 Interpretation of Staining 9 General Limitations Ready to use monoclonal mouse antibody provided in liquid form in a buffer containing stabilizing protein and 0 015 mol L NaN Clone V9 Isotype Igi kappa Purifi ed vimentin from porcine eye lens 3 In Western blotting of purified porcine vimentin the antibody labels a single band of 57 kDa corresponding to vimentin When applying whole cell extracts of cell lines expressing vimentin plus glial fibrillary acidic protein GFAP and vimentin plus desmin respectively the antibody labels specifically the 57 kDa vimentin band As directly shown by these experiments the antibody does not react with the two IF proteins most closely related to vimentin i e desmin and GFAP 3 In immunocytochemistry the antibody labels the vimentin positive human cell lines IMR90 RD glioma and HeLa 3
14. he PT Link User Guide Optimal results are obtained by pretreating tissues using EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Paraffin embedded sections Pre treatment of formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using the 3 in 1 specimen preparation procedure for Dako PT Link Follow the pre treatment procedure outlined in the package insert for EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code K8010 K8004 Note After staining the sections must be dehydrated cleared and mounted using permanent mounting medium Deparaffinized sections Pre treatment of deparaffinized formalin fixed paraffin embedded tissue sections is recommended using Dako PT Link and following the same procedure as described for paraffin embedded sections After staining the slides should be mounted using aqueous or permanent mounting medium The tissue sections should not dry out during the treatment or during the following immunohistochemical staining procedure For greater adherence of tissue sections to glass slides the use of FLEX IHC Microscope Slides Code K8020 is recommended The recommended visualization system is EnVision FLEX High pH Dako Autostainer Autostainer Plus Code K8010 The staining steps and incubation times are pre programmed into the software of Dako Autostainer Autostainer Plus instruments using the following protocols Template protocol FLEXRTU2 200 uL dispense volume or FLE
15. ique de toute coloration ou son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques en utilisant des contr les appropri s et doit tre valu e en fonction des ant c dents cliniques du patient et d autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi La vimentine est une prot ine de filament interm diaire Fl de 57 kDa qui constitue le cytosquelette des cellules vert br es Parmi les cinq classes de Fl qui regroupent neuf groupes la vimentine appartient la classe Ill ce qui indique un degr lev de sp cificit pour les cellules d origine m senchymateuse On pensait au d part que la sp cificit pour le type de cellule indiqu e par chaque sous type de FI tait retenue dans les cellules tumorales ainsi que dans leurs homologues normales ce qui faisait des FI d importants marqueurs de diagnostic en termes d histogenese La co expression de filaments interm diaires notamment la vimentine et la cytok ratine a d sormais t d montr e dans diverses cellules normales tissus sains et dans des l sions n oplasiques ce qui implique d utiliser un panel d anticorps pour le diagnostic diff rentiel des tumeurs 2 Se r f rer aux Instructions g n rales de coloration immunohistochimique de Dako ou aux instructions du syst me de d tection relatives aux proc dures IHC pour plus d informations concernant les points suivants 1 Principe de proc dure 2 Mat riels requis mais non fournis 3 Conservation 4
16. mber R f rence catalogue Bestellnummer In vitro diagnostic medical device Dispositif m dical de diagnostic in vitro In vitro Diagnostikum Consult instructions for use Voir les instructions d utilisation Gebrauchsanweisung beachten Temperature limitation Use by Limites de temp rature Utiliser avant Zul ssiger Temperaturbereich Verwendbar bis Manufacturer Fabricant Contains sufficient for lt n gt tests Contenu suffisant pour lt n gt tests Inhalt ausreichend f r lt n gt Tests Hersteller Batch code Numero de lot Chargenbezeichnung IS630 EFG MNI 2009 12 04 p 4 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17
17. nmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Staining interpretation Performance characteristics FRAN AIS Utilisation pr vue R sum et explication R actifs fournis Immunog ne Sp cificit Pr cautions Conservation Pr paration des chantillons y compris le mat riel requis mais non fourni 115275 002 should include tonsil and liver and the cells structures should display reaction patterns as described for this tissue in Performance characteristics in all positive specimens The recommended negative control reagent is FLEX Negative Control Mouse Dako Autostainer Autostainer Plus Code IS750 The cellular staining pattern is cytoplasmic Normal tissues In general most human mesenchymal cells are labeled by the antibody including fibrocytes lipocytes smooth muscle cells vascular endothelial cells astrocytes peripheral nerve Schwann cells macrophages including Kupffer cells as well as myoepithelial cells of sweat and salivary glands and of breast which are all labeled strongly Also positive with variable intensity and distribution are the follicular cells of the thyroid adrenal cortex renal distal tubules and mesangial and endothelial cells of the renal glomerulus as well as pancreatic acinar cells 1 3 In the human eye the antibody labels the pigmented posterior and the anterior epithelia of the hum
18. nticorps y compris les fibrocytes les lipocytes les cellules du muscle lisse les cellules endoth liales vasculaires les astrocytes les cellules du nerf p riph rique Schwann les macrophages y compris les cellules de Kupffer ainsi que les cellules myo pith liales du sein et des glandes sudoripares et salivaires qui sont toutes fortement marqu es Autres mat riaux galement positifs avec une intensit et une r partition variables les cellules folliculaires de la thyro de le cortex surr nal les tubules r naux distaux et les cellules m sangiales et endoth liales du glom rule r nal ainsi que les cellules acinaires du pancr as 1 3 Dans l il humain l anticorps marque les pith liums ant rieur et post rieur pigmentes de l iris humain notamment la partie musculaire muscle dilatateur de la pupille de l pith lium ant rieur ainsi que les pith liums ciliaires pigment s et non pigment s 4 Dans les pith liums ciliaires la vimentine tait co exprim e avec la cytok ratine 4 Les cellules des muscles squelettique et cardiaque les cellules pidermiques squameuses uroth liales de la muqueuse gastrique et du c lon les cellules gliales ainsi que les neurones sont syst matiquement n gatifs l anticorps 1 3 Tissus tumoraux L anticorps marque 17 sarcomes sur 20 16 m lanomes sur 18 4 meningiomes sur 4 et 3 schwannomes sur 3 et tait le seul filament interm diaire present dans ces tumeur
19. oben getestet werden Falls es zu einer unerwarteten F rbung kommt die sich nicht durch Unterschiede bei Laborverfahren erkl ren l sst und auf ein Problem mit dem Antik rper hindeutet ist der technische Kundendienst von Dako zu verst ndigen IS630 EFG MNI 2009 12 04 p 3 4 Dako Denmark A S Produktionsvej 42 DK 2600 Glostrup Denmark Tel 45 44 85 95 00 Fax 45 44 85 95 95 CVR No 33 21 13 17 Vorbereitung der Probe und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien F rbeverfahren und erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Auswertung der F rbung Leistungsmerkmale Der Antik rper eignet sich zur Markierung von formalinfixierten und paraffineingebetteten Gewebeschnitten Gewebeproben sollten in Schnitte von ca 4 um St rke geschnitten werden Die Vorbehandlung durch hitzeinduzierte Epitopdemaskierung HIER mit Dako PT Link Code Nr PT100 PT101 ist erforderlich Weitere Informationen hierzu siehe PT Link Benutzerhandbuch Optimale Ergebnisse k nnen durch Vorbehandlung der Gewebe mit EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010 K8004 erzielt werden Paraffineingebettete Schnitte Die Vorbehandlung der formalinfixierten paraffineingebetteten Schnitte mit dem 3 in 1 Probenvorbereitungsverfahren f r Dako PT Link wird empfohlen Vorbehandlung gem der Beschreibung in der Packungsbeilage f r EnVision FLEX Target Retrieval Solution High pH 50x Code Nr K8010
20. s En outre des pourcentages variables 10 57 de carcinomes de carcinomes neuroendocrines de neuroblastomes de thymomes et de m soth liomes taient positifs l anticorps A l exception des neuroblastomes la cytok ratine tait co exprim e avec la vimentine dans ces tumeurs Parmi les ad nocarcinomes plus de 50 de carcinomes papillaires de la thyro de ainsi que des carcinomes du rein de l endometre de l ovaire et du poumon taient marqu s par l anticorps et co exprimaient des k ratines et la vimentine 1 Zur In vitro Diagnostik FLEX Monoclonal Mouse Anti Vimentin Clone V9 Ready to Use Dako Autostainer Autostainer Plus ist zur Verwendung in der Immunhistochemie in Verbindung mit Dako Autostainer Autostainer Plus Ger ten bestimmt Dieser Antik rper dient zum Nachweis von Zellen mesenchymalen Ursprungs in gesundem und neoplastischem Gewebe und ist n tzlich bei der Tumordiagnose Die klinische Auswertung einer eventuell eintretenden F rbung sollte durch morphologische Studien mit geeigneten Kontrollen erg nzt werden und von einem qualifizierten Pathologen unter Ber cksichtigung der Krankengeschichte und anderer diagnostischer Tests des Patienten vorgenommen werden Vimentin ist ein 57 kDa schweres intermedi res Filamentprotein IF das einen Teil des Zytoskeletts von Wirbeltierzellen bildet Vimentin geh rt zur Klasse Ill der f nf Klassen von IFs die jeweils neun Gruppen umfassen Es zeigt eine hohe Spezifit t f
21. t vergleichbare Waschzeiten Alle Inkubationsschritte sollten bei Raumtemperatur durchgef hrt werden N here Einzelheiten bitte dem Benutzerhandbuch f r das jeweilige Ger t entnehmen Wenn die F rbeprotokolle auf dem verwendeten Dako Autostainer Ger t nicht verf gbar sind bitte den Technischen Kundendienst von Dako verst ndigen Optimale Bedingungen k nnen je nach Probe und Pr parationsverfahren unterschiedlich sein und sollten vom jeweiligen Labor selbst ermittelt werden Falls der beurteilende Pathologe eine andere F rbungsintensit t w nscht kann ein Anwendungsspezialist oder Kundendiensttechniker von Dako bei der Neuprogrammierung des Protokolls helfen Die Leistung des angepassten Protokolls muss verifiziert werden indem gew hrleistet wird dass das F rbemuster mit dem unter Leistungsmerkmale beschriebenen F rbemuster identisch ist Die Gegenf rbung in H matoxylin sollte mit EnVision FLEX Hematoxylin Dako Autostainer Autostainer Plus Code Nr K8018 ausgef hrt werden Empfohlen wird ein nichtw ssriges permanentes Fixiermittel Positiv und Negativkontrollen sollten zur gleichen Zeit und mit demselben Protokoll wie die Patientenproben getestet werden Das positive Kontrollgewebe sollte Mandel und Lebergewebe enthalten und die Zellen Strukturen m ssen in allen positiven Proben die f r dieses Gewebe unter Leistungsmerkmale beschriebenen Reaktionsmuster aufweisen Das empfohlene Negativ Kontrollreagenz ist FLEX
22. zides m talliques hautement explosifs Lors de l limination rincer abondamment l eau pour viter toute accumulation d azide m tallique dans les canalisations 3 Comme avec tout produit d origine biologique des proc dures de manipulation appropri es doivent tre respect es 4 Porter un v tement de protection appropri pour viter le contact avec les yeux et la peau 5 Les solutions non utilis es doivent tre limin es conform ment aux r glementations locales et nationales Conserver entre 2 et 8 Ne pas utiliser apr s la date de p remption indiqu e sur le flacon Si les r actifs sont conserv s dans des conditions autres que celles indiqu es celles ci doivent tre valid es par l utilisateur Il n y a aucun signe vident indiquant l instabilit de ce produit Par cons quent des contr les positifs et n gatifs doivent tre test s en m me temps que les chantillons de patient Si une coloration inattendue est observ e qui ne peut tre expliqu e par un changement des proc dures du laboratoire et en cas de suspicion d un probl me li l anticorps contacter l assistance technique de Dako L anticorps peut tre utilis pour le marquage des coupes de tissus inclus en paraffine et fix s au formol L amp paisseur des coupes d chantillons de tissu doit tre d environ 4 um Un pr traitement avec d masquage d pitope induit par la chaleur HIER est n cessaire avec le Dako PT Link R f
23. zw Vimentin plus Desmin markiert der Antik rper spezifisch die 57 kDa Vimentinbande Diese Versuche beweisen unmittelbar dass der Antik rper nicht mit den beiden IF Proteinen reagiert die Vimentin am n chsten verwandt sind also Desmin und GFAP 3 Bei der Immunzytochemie markiert der Antik rper die Vimentin positiven menschlichen Zelllinien IMR90 RD Glioma und HeLa 3 1 Nur f r Fachpersonal bestimmt 2 Dieses Produkt enth lt Natriumazid NaN eine in reiner Form u erst giftige Chemikalie Natriumazid kann auch in als ungef hrlich eingestuften Konzentrationen mit Blei und Kupferrohren reagieren und hochexplosive Metallazide bilden Nach der Entsorgung stets mit viel Wasser nachsp len um Metallazidansammlungen in den Leitungen vorzubeugen 3 Wie alle Produkte biologischen Ursprungs m ssen auch diese entsprechend gehandhabt werden 4 Geeignete Schutzkleidung tragen um Augen und Hautkontakt zu vermeiden 5 Nicht verwendete L sung ist entsprechend rtlichen bundesstaatlichen und staatlichen Richtlinien zu entsorgen Bei 2 8 aufbewahren Nach Ablauf des auf dem Fl sch chen aufgedruckten Verfalldatums nicht mehr verwenden Werden die Reagenzien unter anderen als den angegebenen Bedingungen aufbewahrt m ssen diese Bedingungen vom Benutzer validiert werden Es gibt keine offensichtlichen Anzeichen f r eine eventuelle Produktinstabilit t Positiv und Negativkontrollen sollten daher zur gleichen Zeit wie die Patientenpr
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