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BPG FR.book - GE Healthcare Life Sciences

1. Fig 3 4 Ordre de d montage et de serrage des crous Attention Lorsque l on retire la bride rien ne soutient le tube de la colonne Veiller viter que le tube de la colonne ne bascule 4 Retirer avec pr caution la bride 5 5 Avec une cl molette d visser les tiges de soutien 8 de la pi ce terminale 14 6 Soulever le tube en verre 9 D poser avec pr caution le tube en verre un endroit s r Si le joint torique adh re au tube en verre ou la pi ce terminale humecter le joint torique avec de l thanol 20 avant de le retirer Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 25 3 Installation et test des fuites 3 1 D montage et montage 26 7 l aide d une cl annulaire retirer les boulons 21 et les rondelles 20 qui fixent la pi ce terminale 14 au support 19 S parer la pi ce terminale du support Montage de la colonne Pour le montage de la colonne BPG 300 se reporter la figure A 4 et proc der comme suit Remarque Humecter le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air pi g 1 Ense reportant la figure 4 5 contr ler que les l ments suivants sont correctement positionn s dans la pi ce terminale 14 e plaque de distribution 13 la face profil e doit se trouver face la pi ce terminale et la face plane face au tamis de soutien e tamis de soutien 12 e tamis 10 11 e joint torique 6 7 Fi
2. Les tiges fixent la bride et la pi ce terminale au tube en verre lequel est rendu herm tique par des joints toriques Les joints toriques isolent efficacement le tube en verre de tout contact direct avec les composants en acier inoxydable La plaque sup rieure de l adaptateur et l crou de r glage sont fix s par des colliers ou boulonn s la bride de la colonne L crou de r glage tourne sur une bague annulaire au niveau de la plaque sup rieure ce qui permet de modifier la hauteur de l adaptateur l int rieur du tube de la colonne Le joint torique de l adaptateur forme un joint d tanch it entre l adaptateur et la colonne en verre lorsqu il est comprim par l appareil d tanch it L tanch it est contr l e par la molette de r glage du joint d tanch it Le support est boulonn la pi ce terminale de la colonne et est quip de roulettes avec freins p dale Remarque Les colonnes BPG 100 sont dot es de pieds r glables Des roulettes sont disponibles en option Les colonnes BPG ne peuvent pas tre utilis es dans d autres buts par exemple e cuve de stockage pour produits chimiques etc e r cipient sous pression en g n ral e cuve fermentation e stockage de gaz 1 2 tiquetage de la colonne Le label CE sur l tiquette d identification indique que la colonne r pond aux exigences de la directive europ enne relative aux quipements sous pression PED 97 23 CE et ou celles
3. 27 sur le tube de l adaptateur 31 Visser la plaque sup rieure 19 23 en sens inverse des aiguilles d une montre 5 cm vers le bas sur le tube externe de l adaptateur 31 7 Tourner la molette de r glage 17 dans le sens des aiguilles d une montre au dessus de l adaptateur jusqu ce que les trous du tube de r glage interne 30 soient au m me niveau que les trous du tube externe de l adaptateur 31 8 Serrer la main les vis 26 vers le bas dans la moiti sup rieure du syst me d tanch it 27 en veillant ce qu elles restent de niveau et soient correctement align es avec les trous jusqu ce que 1 2 mm du filetage des vis soit apparent Enfin serrer les vis avec une cl annulaire 9 Monter le butoir 25 sur la plaque 21 l aide des vis 24 10 Monter le joint torique de l adaptateur 28 29 sur la plaque de l adaptateur 34 11 Humecter le tamis de filtration 36 avec de l thanol 20 Monter le tamis de soutien 35 et le tamis de filtration 36 sur la plaque de l adaptateur 34 Il peut tre utile de chauffer le tamis de filtration dans l eau pour en faciliter le montage sur l adaptateur Cela termine la proc dure de montage de l adaptateur Montage d une r hausse syst me de compactage packagel La r hausse est livr e mont e Le d montage ou le montage de la r hausse se font de la m me mani re que pour la colonne l exception des directives concernant le support Pour mon
4. Chapitre 3 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 15 1 Introduction 1 7 Objectif de ce manuel 16 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 2 D ballage de la colonne D ballage de la colonne 2 D baller soigneusement l quipement et contr ler les ventuels signes de dommages qui pourraient tre survenus pendant le transport 2 1 R f rences des tubes et des supports pour colonne Le tableau 2 1 ci dessous reprend les r f rences des tubes et supports pour colonnes correspondant aux diff rents diam tres de colonnes contr ler les r f rences du nouvel quipement afin d en v rifier la correspondance Tableau 2 1 R f rences des tubes et supports pour colonnes Diam tre de Longueur du tube de la colonne mm Support la colonne Imm 500 750 950 100 18 1103 01 18 1103 02 18 1103 03 18 1031 10 140 18 1113 08 18 1113 09 18 1031 20 200 18 1103 11 18 1103 12 18 1103 13 18 1031 20 300 18 1103 21 18 1103 22 18 1103 23 450 18 1103 71 18 1103 72 18 1103 73 La hauteur de tube de la colonne BPG 450 est de 1000 mm Remarque Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Il est n cessaire de commander la fois le support et la colonne pour recevoir une configuration compl te de colonne pour les mod les BPG 100 140 et 200 17 2 D ballage de la colonne 2 2 Composants fournis 2 2 Composants fournis V rifier que tous les compos
5. Pour le d montage de la colonne BPG 300 se reporter au tableau A 2 et aux figures A 3 et A 4 la fin du pr sent manuel et proc der comme suit 1 Desserrer l un des crous 4 du collier de la plaque sup rieure 1 qui fixe l adaptateur la bride 5 et retirer le collier Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 AVERTISSEMENT Si le joint torique d tanch it de l adaptateur est sec il risque d tre endommag par le mouvement forc de l adaptateur Humecter le joint torique avec de l eau ou une solution 20 d thanol NE PAS graisser A le joint torique 2 D visser de quelques tours l ajusteur du joint d tanch it 23 juste assez pour lib rer le joint torique d tanch it de l adaptateur 33 34 Retirer l adaptateur en veillant ce que l acier inoxydable ne vienne pas en contact avec le verre 3 Au moyen d une cl et dans l ordre illustr la figure 4 4 retirer les crous 2 et les rondelles ressort 3 qui fixent les tiges de soutien 8 la bride 5 Attention Ne pas d visser compl tement chaque crou en une seule fois Desserrer les crous petite petit dans l ordre illustr la figure 4 4 Trois quatre tours par crou suffisent d visser et retirer correctement les crous Il est n cessaire de placer une cl molette sur les parties aplaties des tiges pour viter que celles ci ne se d vissent
6. bit D bit cm h ii BPG 300 800 BPG 450 600 400 200 0 0 05 0 1 0 15 0 2 0 25 0 3 0 35 0 4 0 45 0 5 Pression en bars Fig 4 3 Courbes de pression d bit pour les colonnes BPG 300 et 450 vides 40 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC La colonne BPG 4 4 4 2 Courbes de pression d bit des colonnes compact es pack es Les figures 3 4 3 6illustrent les courbes de pression d bit pour les colonnes BPG compact es pack es obtenues par la m thode d crite la section 5 1 5 de ce manuel et avec la configuration illustr e la figure 3 1 D bit cm h BPG 100 70 60 0 BPG 200 BPG 300 40 30 20 10 0 0 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 Pression en bars Fig 4 4 Courbe de pression d bit pour le support Superdex 200 de qualit pr parative dans des colonnes BPG Hauteur de gel 60 cm D bit cm h 300 250 200 150 100 50 0 0 0 0 5 1 0 1 5 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 Pression en bars Fig 4 5 Courbe de pression d bit pour le support Q Sepharose High Performance dans des colonnes BPG 300 500 Hauteur de gel 10 cm Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 41 4 La colonne BPG 4 4 Courbes de pression d bit D bit cm h 400 300 200 100 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 7 Pression en bars Fig 4 6 Courbe de pression d bit d une colonne BPG 450 compact e pack e avec du gel Q Sepharose Fast Flow avec une hauteur de gel de 15 cm 42 Colonnes BPG
7. crou suffisent d visser et retirer correctement les crous I est n cessaire de placer une cl molette sur les parties aplaties des tiges pour viter que celles ci ne se d vissent Fig 3 1 Ordre de d montage et de serrage des crous AVERTISSEMENT Lorsque l on retire la bride plus rien ne soutient le tube de la colonne Veiller viter que le tube de la colonne ne bascule 4 Retirer pr cautionneusement la bride 10 5 Avec une cl molette d visser les tiges de soutien 2 de la pi ce terminale 12 6 Soulever le tube en verre 1 D poser avec pr caution le tube en verre un endroit s r Si le joint torique adh re au tube en verre ou la pi ce terminale humecter le joint torique avec de l thanol 20 avant de le retirer 7 l aide d une cl retirer les boulons 13 et les rondelles 14 qui fixent la pi ce terminale 12 au support 15 S parer la pi ce terminale du support Montage de la colonne Pour le montage des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter au tableau A 1 et Remarque 1 la figure A 2 la fin du pr sent manuel Proc der comme suit Humecter le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air pi g En se reportant la figure 4 2 ci apr s contr ler que les l ments suivants sont correctement positionn s dans la pi ce terminale 12 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et tes
8. marrer la pompe placer le tuyau sur le tamis inf rieur et extraire toutes les bulles d air qui demeurent pi g es sous le tamis Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 45 5 Fonctionnement 5 1 Compactage package de la colonne 46 TAPE 2 1 2 a 3 cm de tampon residuel Vanne fermee ba Fig 5 2 D termination du d bit optimal tape 2 TAPE 2 a Continuer pomper le tampon et l air jusqu ce qu il ne reste plus que 2 3 cm de tampon dans la colonne b Utiliser un niveau bulle pour v rifier que la colonne est parfaitement horizontale Corriger au moyen des pieds ou roulettes r glables si n cessaire TAPE 3 Fig 5 3 D termination du d bit optimal tape 3 TAPE 3 a M langer le tampon de compactage package avec le support pour donner naissance une suspension 75 c est dire volume s diment volume de suspension total 0 75 Remarque Ce volume de suspension convient pour les supports BioProcess Pour les autres supports pour chromatographie d terminer le volu me de suspension recommand en accord avec le fournisseur Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 TAPE 4 Vanne fermee d Fig 5 4 D termination du d bit optimal tape 4 TAPE 4 a Verser pr cautionneusement la suspension homog ne dans la colonne
9. ration e sa propre s curit et celle des autres personnes e la s curit de l quipement par le biais d une utilisation correcte et con forme aux descriptions et instructions fournies dans ces instructions d utilisation 1 3 2 Avertissements AVERTISSEMENT Le symbole d avertissement signale des instructions qui doivent imp rativement tre suivies de mani re stricte pour viter des blessures aux personnes Ne pas continuer avant d avoir clairement compris A les instructions et tant que toutes les conditions stipul es ne sont pas remplies 1 3 3 Notifications d attention ATTENTION Le symbole d attention signale des instructions ou des conditions qui doivent tre suivies afin d viter des dommages au produit ou d autres quipements Ne pas continuer avant d avoir clairement compris les instructions et tant que toutes les conditions stipul es ne sont pas remplies 1 3 4 Remarques Remarque Le symbole de remarque est utilis pour indiquer des informations importantes pour une utilisation sans probl me et optimale du produit 1 3 5 R sistance aux produits chimiques Des sp cifications comprenant la r sistance aux produits chimiques figurent au chapitre 3 de ces instructions d utilisation 1 3 6 Utilisation sous des atmosph res potentiellement explosives Les colonnes BPG ne contiennent aucun circuit lectrique N anmoins les pr cautions suivantes doivent toujours tre respec
10. 1 du volume total de gel et la concentration sera de 1 0 v v de NaCl ou l quivalent lors de l utilisation d un tampon plus concentr On peut galement utiliser de l ac tone 1 0 v v Le d bit lin aire doit tre de 30 cm h pour des supports de 34 um et de 50 um et de 20 cm h pour des supports de 90 um Pour viter toute dilution de l chantillon appliquer celui ci le plus pr s possible de l entr e de la colonne Si le syst me comprend un pi ge air celui ci doit tre court circuit pendant l application de l chantillon afin d viter un r trom lange Calculer la valeur du param tre HEPT partir de la courbe de conductivit ou d absorption UV de la mani re suivante Le param tre HEPT sous sa forme la plus simple est exprim comme HEPT L N o L hauteur de gel cm N nombre de plateaux th oriques N est d fini par l quation N 5 54 Ve Ih o Ve volume d lution ml Ip largeur du pic mi hauteur ml Ve est mesur comme le volume ayant travers la colonne entre le milieu de l application de l chantillon et le maximum du pic Ip est mesur comme la largeur mi hauteur du pic de la base au sommet Dans l exemple de la figure 5 13 la valeur du param tre HEPT peut tre calcul e partir du chromatogramme de la mani re suivante Tableau 5 3 Calcul de HEPT Velmi Ip mI N N m HEPT cm Ac tone 18800 900 2417 4203 0 024 Des colonnes correctement comp
11. 27 8 Ecrou calotte sph rique 316 4 18 1143 25 18 1113 27 8 1113 27 9 Ecrou de r glage corps 316 1 0003 0 8 1113 26 8 1113 26 20 Bague annulaire POM 2 8 0264 0 18 0267 0 8 0267 0 21 Plaque sup rieure 316 8 1143 24 18 1113 24 22 Ecrou de r glage douille PEEK 18 0251 20 18 0252 20 8 0252 20 23 Vis Allen M8 x 45 316 5 19 6375 0 19 6375 0 9 6375 0 24 Vis Allen M4 x 14 316 5 19 6356 0 19 6356 0 9 6356 0 25 Butoir 316 8 1113 25 8 1113 25 26 Vis pour t te de l adaptateur 316 3 8 8457 0 18 8457 0 8 8457 0 27 Syst me d tanch it 316L 18 1147 47 18 1113 3 8 1147 48 28 Joint torique pour adaptateur EPDM 2 8 8475 0 18 1113 10 8 0275 0 29 Joint torique pour adaptateur FEP 18 0019 40 18 1113 1 8 0019 50 30 Tube interne pour adaptateur 316 18 1113 23 18 1113 23 8 1113 23 31 Tube externe pour adaptateur 316 8 1134 83 18 1134 83 8 1134 83 32 Vis M6 x 12 316L PTFE 3 18 1145 08 18 1145 08 8 1145 08 33 Ressort 316 L PTFE 8 8491 01 8 8491 01 8 8491 01 34 Plaque pour adaptateur S31803 8 1112 80 18 1113 30 8 1112 81 35 Tamis de soutien pour adaptateur PP 2 8 1103 04 18 1112 99 8 0252 56 36 Tamis 54 um pour adaptateur PP 2 18 1126 96 18 1126 98 8 1127 00 Tamis 23 um pour adaptateur PP 2 18 1103 08 18 1113 01 8 9253 01 Tamis 10 um pour adaptateur PA 2 18 1103 05 18 1113 03 8 0252 76 Tamis 12 um pour adaptateur PEEK 2 18 1148 37 18 1148 39 8 1148 41 37 Joint d tanch it 25 mm EPDM 2 8 0019 27 8 00
12. 4 D bits de compactage package recommand s pour les SupportsGE Healthcare sus haben 51 5 1 5 M thode de compactage package de la colonne 51 5 2 Evaluation de la colonne ss s sssssssssssssssssrssessrssossrssossrnssnrnsstrnsstrsnennrsnnt 56 5 2 1 Choix de l chantillon de test pour les colonnes ST 5 2 2 Calcul du param tre HEPT 58 5 2 3 Calcul du facteur d asym trie de pic 60 6 L APFVIGHONS MR A RAR ent die 61 aT EE ES nn ete Sa nn en 67 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Introduction 1 1 Introduction 11 G n ralit s Les colonnes BPG sont destin es aux applications industrielles qui exigent des normes d hygi ne tr s strictes Ces colonnes sont disponibles pour des volumes de support de s paration chromatographique allant jusqu 131 litres et permettent l utilisation de d bits lev s Lorsque les colonnes BPG sont utilis es en association avec des supports BioProcess par exemple le Sepharose Fast Flow et le Sephacryl High Resolution elles permettent de satisfaire aux exigences les plus s v res en mati re de r glementation Les mat riaux qui entrent dans la fabrication des colonnes BPG ont t soigneusement s lectionn s pour r sister aux produits de d contamination et de nettoyage par exemple l hydroxyde de sodium et l thanol Leurs sp cifications de pression et de faible r sistance l coulement font que ces colonnes conviennent pour tre utilis es ave
13. 450 Les num ros d identi ication font r f rence la figure A 5 Pi ce Description R f rence Mat riau En contact avec les Qt n liquides utilis s livr e 42 Tamis de soutien pour adaptateur 8 1104 34 PP 43 Tamis 54 um pour adaptateur 8 1127 04 PP Tamis 23 um pour adaptateur 8 1001 62 PP y Tamis 10 um pour adaptateur 8 1017 46 PA Tamis 12 um pour adaptateur 8 1148 45 PEEK 44 Vis M10 x 80 8 1109 59 316 2 45 Vis M10 x16 8 1109 60 316 2 46 Equerre 8 1109 61 316 47 Vis M5 x 16 8 1109 62 316 2 48 Tube d entr e inf rieur 8 1109 63 316L 50 Vis Allen M10 x 40 8 1109 65 316 2 51 Jambe 8 1109 66 316 52 Support pour roulette 8 1107 46 POM 316 53 Roulette 8 1177 75 Boulon il 8 1109 64 54 Butoir pour adaptateur 8 1115 18 316 Index C calcul de l asym trie du pic 60 calcul du param tre HEPT 58 choix de l chantillon de test pour les colonnes 57 colonne choix de l chantillon de test 57 compactage package 43 composants de base 9 d ballage 17 limination 14 valuation 56 fuites 19 installation 19 mat riaux 36 m thode de compactage package conseill e 51 mise la terre 32 montage et d montage 19 nombre de composants livr s 18 principes de fonctionnement 43 r f rences des tubes et supports 17 test pour l absence de fuites 19 connecteurs 32 courbes de d bit 38 D d ballage de la colonne 17 d m
14. Contr ler qu il n y a pas de bulles d air pi g es dans la suspension Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 47 5 Fonctionnement 5 1 Compactage package de la colonne TAPE 5 Vanne fermee Fig 5 5 D termination du d bit optimal tape 5 TAPE 5 Remarque Cette tape doit avoir lieu suffisamment rapidement pour que le sup port n ait pas le temps de s dimenter enti rement Ins rer l adaptateur Utiliser les quatre boulons BPG 100 140 et 200 ou le collier de adaptateur de la plaque sup rieure BPG 300 et 450 pour fixer en place l adaptateur de la colonne c Utiliser la poign e de l ajusteur de hauteur pour positionner l adaptateur 1 5 mm sous la surface sup rieure du liquide 48 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 TAPE 6 gt lt Vanne fermee Fig 5 6 D termination du d bit optimal tape 6 TAPE 6 a Fermer herm tiquement le joint torique de l adaptateur en tournant dans le sens des aiguilles d une montre la molette BPG 100 140 et 200 ou la poign e BPG 300 et 450 de r glage du joint d tanch it au dessus de l adaptateur b Une fois que le joint torique assure une fermeture herm tique descendre l adaptateur en le remplissant de tampon pour expulser l air pr sent dans le tube de l adaptateur Le tube de l adaptateur est plein l
15. Healthcare local pour obtenir des informations r centes GE Healthcare Europe GmbH unzinger Strasse 5 D 79111 Freiburg Allemagne GE Healthcare UK Limited Amersham Place Little Chalfont Buckinghamshire HP7 9NA Royaume Uni GE Healthcare Bio Sciences Corp 800 Centennial Avenue PO Box 1327 Piscataway NJ 08855 1327 Etats Unis GE Healthcare Bio Sciences KK Sanken Bldg 3 25 1 Hyakunincho Shinjuku ku Tokyo 169 0073 Japon Manuel de l utilisateur 18 1170 70 AC 03 2007 E Elanders sterv la 2007
16. Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 5 Fonctionnement AVERTISSEMENT Manipuler la colonne avec pr caution car les sp cifications de pression ne sont valables que si le tube en verre est intact et exempt de rayures Ne jamais souffler d air ou de gaz dans la colonne Remarque Avant de compacter packer la colonne pour la premi re fois il est conseill de rincer la colonne et les tuyaux avec la solution de net toyage en place par exemple du NaOH pour avoir l assurance que toutes les surfaces sont propres Se reporter la section 1 3 du guide d entretien de la colonne BPG Pour obtenir des performances optimales des colonnes BPG nous recommandons d utiliser les protocoles de compactage package de la colonne d crits aux paragraphes qui suivent Avant d utiliser les colonnes il est conseill de lire enti rement ce chapitre 5 1 Compactage package de la colonne Il existe de nombreuses m thodes de compactage package diff rentes en fonc tion de la colonne et de type de support utilis Dans le cas des colonnes BPG nous recommandons la m thode de compactage package d crite la sous section 5 1 5 Le d bit de compactage package optimal d pend de la temp rature du type de support du lot et de la quantit Par cons quent pour chaque syst me individuel il est n cessaire de d terminer le d bit optimal de mani re empirique en g n rant une courbe de pression d bit Le
17. an 14 17 Opj ctif de ce manuel 4 enr 15 2 D ballage de la colonne ssnesessessssessssessssessssersssersssesseeessee 17 2 1 R f rences des tubes et des supports pour colonne ss 17 2 20 Composants FOURNIS sentant 18 3 Installation et test des fuites 19 3 1 D montage et montage nn 19 3 1 1 BPG 100 140 et 200 ss nt sn ne tt tri es 19 3 1 2 BPG 300 3 1 3 BPG 450 32 Raccord m nts siens nn ANR RE ent 32 3 3 Mise la terre de la colonne ss sssssssssssissssssrssisssrssrsssrrsrssrsserssrsssesssrss 32 3 4 Test des fuites ire 33 4 Larcolonhe BPG nn amende 41 Sp cifications et caract ristiques 42 Mat riaux constitutifs de la colonne ss sssssssssssssssssrsssssssssrsssssssrssses 36 4 3 R sistance aux produits chimiques 4 3 1 R sistance chimique au chlorure de sodium 38 4 4 Courbes de pression d bit 19 1911911910011ses11srrsrrsrrsrrssrnrsnrsnrsrsnress 38 4 4 1 Courbes de pression d bit des colonnes vides 39 4 4 2 Courbes de pression d bit des colonnes compact es Dack eshs bu an nt an tnt ets 41 5 Fonctionnement ss 43 5 1 Compactage package de la colonne s sssssssssissssssisssrsrssrssisn 43 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 7 5 1 1 Quantit s de support requises par centim tre de hatdteurdegel rreen ss Msn T 44 5 1 2 Tailles de tamis recommand es 44 5 1 3 D termination du d bit optimal de compactage package 45 5 1
18. apr s 5 2 Evaluation de la colonne L efficacit d une colonne d pend de la qualit de son compactage package Une colonne mal compact e pack e engendre un d bit irr gulier ce qui r sulte en un largissement de la zone et une moins bonne r solution Il est donc important de disposer d une m thode permettant de tester la colonne avant sa mise en service Une telle m thode doit tre simple quantitative et ne pas introduire de mat riaux contaminants Il est galement avantageux de pouvoir utiliser la m me m thode pour contr ler les performances de la colonne au cours de sa dur e de vie utile de mani re pouvoir ais ment d terminer le moment o le support doit tre recompact repack ou remplac Les m thodes utilisant des compos s color s comme le bleu dextran sont viter car elles ne r pondent pas aux crit res ci dessus et ne peuvent pas tre utilis es avec les supports pour chromatographie d change d ions et d affinit L exp rience a d montr que la meilleure m thode pour exprimer l efficacit d une colonne consiste utiliser la hauteur quivalent un plateau th orique ou HEPT et le facteur d asym trie de pic ou Ces valeurs peuvent tre ais ment d termin es en appliquant sur la colonne un chantillon constitu par exemple d une solution de NaCl ou d ac tone Il est important que la colonne soit correctement quilibr e avant de proc der l valuation du compacta
19. cm est n cessaire lors de l installation de l adaptateur sur le tube de la colonne si l on d monte la r hausse de compactage package 3 1 3 BPG 450 D montage de la colonne Pour le d montage de la colonne BPG 450 se reporter au tableau A 3 et la figure A 5 la fin du pr sent manuel et proc der comme suit 1 Lib rer le joint de l adaptateur en tournant la poign e 24 AVERTISSEMENT Si le joint torique d tanch it de l adaptateur est sec il risque d tre endommag par le mouvement forc de l adaptateur Humecter le joint torique avec de l eau ou une solution 20 d thanol NE PAS graisser le A joint torique 2 D placer l adaptateur de quelques millim tres vers le bas afin de lib rer le joint torique de la paroi de verre Le d placer ensuite le plus loin possible vers le haut 3 Retirer les boulons 26 et les rondelles 27 Lib rer le couvercle 17 et sortir l adaptateur Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 29 3 Installation et test des fuites 3 1 D montage et montage Remarque L adaptateur des colonnes BPG 450 est lourd Pour des raisons de s curit il est conseill de soulever l adaptateur l aide d un treuil fix aux boulons oeil du couvercle de la colonne Desserrer les boulons 44 pour s parer le tube de la colonne 12 avec les brides 3 de la pi ce terminale 1 Soulever avec pr caution le tube de la colonne Si le joint torique adh
20. colonne 750 Verre borosilicat 18 0251 02 8 1152 02 Tube pour colonne 950 Verre borosilicat 1 18 0251 03 18 1112 96 18 1152 03 2 Tige pour tube 500 316 T 18 1105 80 18 1105 83 18 1105 83 Tige pour tube 750 316 L 18 1105 8 8 1105 84 Tige pour tube 950 316 1 18 1105 82 18 1105 85 18 1105 85 3 Anneau de guidage PTFE 1 8 0251 22 18 1112 97 18 0252 22 4 Tamis 54 um pour pi ce terminale PP 2 18 1126 97 18 1126 99 18 1127 0 Tamis 23 um pour pi ce terminale PP 2 18 9252 0 18 1113 00 8 9254 0 Tamis 10 um pour pi ce terminale PA 2 18 0251 77 18 1113 02 18 0252 77 Tamis 12 um pour pi ce terminale PEEK 2 18 1148 38 18 1148 40 8 1148 42 5 Tamis de soutien pour pi ce terminale PP X 2 18 0251 55 18 1112 98 8 0252 55 6 Joint torique pour bride EPDM X 2 8 8494 0 8 1113 06 8 8489 0 7 Joint torique pour bride FEP X 1 8 0019 4 18 1113 07 8 0019 5 8 Ecrou M6 316 5 19 1582 01 E Ecrou M8 316 5 19 0763 01 9 0763 0 g Rondelle ressort 316 4 18 8482 0 18 8482 01 8 8482 0 0 Bride 316 18 1134 2 18 1113 21 8 1134 22 1 T ton de positionnement de la colonne PTFE 8 18 1003 00 8 1003 00 2 Pi ce terminale 316L 8 1144 18 8 1113 20 18 1112 62 3 Boulon M8 x 12 316 4 8 1113 28 8 1113 28 4 Rondelle 316 4 18 1143 26 18 1113 29 8 1113 29 5 Support complet 316L 8 1031 10 18 1031 20 8 1031 20 6 Collier 25 mm 304 18 1001 3 18 1001 31 8 1001 31 7 Molette de r glage PEEK 18 1109 27 18 1109 27 8 1109
21. de la directive concernant les quipements utilis s sous des atmosph res potentiellement explosives ATEX100 94 9 CE Les colonnes pour lesquelles le rapport du volume et de la pression autoris e est trop faible ne peuvent pas porter le label CE selon la directive PED Les quipements livr s en dehors de la communaut europ enne ne portent pas n cessairement le label CE BPG 100 950 Serial no Max column volume V 8 L Code no 18 1103 03 Design pressure PS 8bar g Year of manufacturing Maximum filling mass 12 kg Tare mass 17 kg PED fluid group cat 1 NA Operating temp TS CE Ers Fig 1 1 Exemple de plaque signal tique d une colonne BPG Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Introduction 1 13 S curit 1 3 1 G n ralit s Les informations fournies dans ces instructions d utilisation constituent les meilleures pratiques de fonctionnement conseill es et n auront en aucun cas la pr s ance par rapport aux responsabilit s individuelles ou aux r glementations locales Nous avons accord une attention toute particuli re la conception et la fabrication des diff rentes pi ces de cet quipement de mani re le rendre conforme toutes les r gles de s curit applicables pour ce type d quipement Au cours du fonctionnement et pendant tout autre travail utilisant un r cipient sous pression chaque individu a toujours la responsabilit de prendre en consid
22. en U 3 Fixer le tube la pi ce terminale avec les boulons 44 Serrer les boulons en diagonale l aide de la cl dynamom trique r gl e sur 8 Nm Chaque boulon doit tre serr en trois fois AVERTISSEMENT Le tube de la colonne risque de casser si l on exerce une pression excessive lors du serrage des boulons qui fixent la bride 3 et les tiges 8 au tube de la colonne Toujours utiliser une cl dynamom trique pour le serrage de ces boulons Voir le tableau 4 3 ci dessous pour les r glages de la cl A dynamom trique pour la colonne BPG 450 Tableau 3 3 R glages de la cl dynamom trique pour les colonnes BPG 450 l ment se reporter la figure A 5 R glage de la cl pour l emplacement dynamom trique Couvercle et boulons de la pi ce terminale 26 et 27 8 Nm Tube en verre vers brides 3 et tiges 8 4 Nm D montage de l adaptateur pour remplacer le joint torique 32 Pour remplacer le joint torique des colonnes BPG 450 se reporter au tableau A 3 et la figure A 5 et proc der comme suit voir galement les r glages de la cl dynamom trique au tableau 4 3 Retirer les boulons des vis de l adaptateur 39 Retirer le couvercle 17 et les vis de l adaptateur 29 Veiller ne pas plier le tube d entr e 31 3 Retirer le ressort 34 4 Retirer les vis 33 qui maintiennent le tube d entr e 5 Retirer le joint torique usag 32 et le jeter Cela termine le d montage de
23. fuites 33 67 68 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Re 10 0 LOC d a 41 e CI LUA j Figure A 1 Identification des pi ces des colonnes BPG 100 140 et 200 Figure A 2 Identification des pi ces des colonnes BPG 100 140 et 200 suite Figure A 3 Identification des pi ces des colonnes BPG 300 Figure A 4 Identification des pi ces des colonnes BPG 300 suite Figure A 5 Identification des pi ces des colonnes BPG 450 Pour conna tre les contacts locaux visiter le site www gelifesciences com contact www gelifesciences com GE Healthcare Bio Sciences AB Bjorkgatan 30 751 84 Uppsala Su de imagination at work GE imagination at work et le monogramme GE sont des marques de la General Electric Company BPG Sepharose Sephacryl Sephadex Superdex et Drop Design sont des marques de la General Electric Company outes les marques de tierces parties appartiennent leurs propri taires respectifs 2007 General Electric Company Tous droits r serv s Premi re publication f vrier 2003 ous les biens et les services sont vendus sous les conditions de vente de la compagnie de GE Healthcare qui les fournit Une copie de ces conditions de vente est disponible sur demande Contacter le repr sentant GE
24. l adaptateur Montage de l adaptateur 1 Placer le nouveau joint torique lubrifi thanol 20 32 entre le tube d entr e 31 et l adaptateur 38 Serrer les vis Allen 33 Glisser le ressort 34 sur le tube d entr e Faire descendre avec pr caution la vis de l adaptateur 29 et le couvercle 17 le long du tube d entr e 4 Visser les boulons 39 l int rieur de l adaptateur et les serrer L adaptateur est pr sent remont Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 31 3 Installation et test des fuites 3 2 Raccordements 32 Montage d une r hausse syst me de compactage packagel Le syst me de compactage package de la colonne BPG 450 est une r hausse en acier inoxydable Pour le montage d une r hausse sur la colonne BPG 450 proc der comme suit 1 Retirer l adaptateur de la colonne et placer la r hausse en acier inoxydable sur la bride sup rieure S assurer que le joint torique est correctement positionn dans la bride 2 Utiliser les boulons livr s avec la r hausse pour fixer la r hausse la colonne La colonne ainsi allong e est pr sent pr te pour la premi re tape du compactage package pour les proc dures de compactage package en deux tapes Remarque Retirer la r hausse apr s l tape de s dimentation initiale Ins rer l adaptateur et poursuivre le compactage package Un tube d une longueur de 15 cm est n cessaire lors de l installation de l ada
25. ments dans les figures et tableaux correspondants la fin du pr sent manuel AVERTISSEMENT Apr s r assemblage contr ler l tanch it de la colonne et l absence de fuites 3 1 1 BPG 100 140 et 200 D montage de la colonne Pour le d montage des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter au tableau A 1 et aux figures A 1 et A 2 la fin du pr sent manuel et proc der comme suit Retirer les crous calotte sph rique 18 et les rondelles 14 qui fixent l adaptateur la bride 10 AVERTISSEMENT Si le joint torique d tanch it de l adaptateur est sec il risque d tre endommag par le mouvement forc de l adaptateur humecter le joint torique avec de l eau ou une solution 20 d thanol Ne PAS graisser le joint torique 2 D visser la molette de r glage 17 de quelques tours afin de lib rer le joint torique d tanch it de l adaptateur 28 29 et retirer l adaptateur Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 19 3 Installation et test des fuites 3 1 D montage et montage A 20 3 Au moyen d une cl douille et dans l ordre illustr la figure 4 1 retirer les crous 8 et les rondelles ressort 9 qui fixent les tiges de soutien 2 la bride 10 AVERTISSEMENT Ne pas d visser compl tement chaque crou en une seule fois Desserrer les crous petit petit dans l ordre illustr la figure 4 1 Trois quatre tours par
26. plus sym trique possible C est g n ralement le cas pour les supports de filtration sur gel mais pour certains supports pour chromatographie d change d ions et d affinit il peut tre asym trique en raison d interactions avec le support Une modification de la forme du pic est habituellement la premi re indication d une d t rioration du gel chromatographique Le facteur d asym trie du pic As doit tre le plus proche possible de 1 Le facteur d asym trie du pic est calcul partir du diagramme de la figure 5 13 selon la formule suivante A b a o a distance entre le sommet du pic et 10 de la hauteur du pic du c t ascendant du pic b distance entre le sommet du pic et 10 de la hauteur du pic du c t descendant du pic Remarque La mesure des valeurs de HEPT et de A est le meilleur moyen de ju ger de la qualit de la colonne compact e pack e Une colonne compact e pack e peut para tre parfaite mais n cessiter malgr tout un compactage repackage pour des performances optimales Tou jours tester la colonne apr s compactage package et r guli rement entre les s parations pour garantir des performances optimales de la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 6 Abr viations Les abr via As DI EPDM FEP FF FPM HEPT HR IEX L Ih N NEP PA PEEK PFR POM PP PTFE PVC THF uv Abr viations 6 Facteur d asym trie de pic Diam tr
27. re au tube en verre ou la pi ce terminale humecter le joint torique avec de l thanol 20 avant de le retirer Pour remplacer les joints toriques des brides sup rieure et inf rieure desserrer les vis Allen 7 et sortir pr cautionneusement la bride sup rieure Retirer le tube en verre et remplacer le joint torique inf rieur Remettre en place le tube en verre et ajuster le nouveau joint torique sup rieur Enfin ajuster la bride sup rieure Aligner le tube en verre avec les brides Cela termine la proc dure de d montage de l adaptateur Montage de la colonne Pour le montage de la colonne BPG 450 se reporter la figure A 5 et au tableau A 3 et proc der comme suit En se reportant la figure 4 6 ci apr s contr ler que les l ments suivants sont correctement positionn s dans la pi ce terminale plaque de distribution 41 bouchon encliquer 36 tamis de soutien 2 tamis de filtration 5 joint d tanch it en U 4 mont sur le tamis de filtration Remarque Humecter le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air pi g Fig 3 6 Emplacement des composants de la pi ce terminale des colonnes BPG 450 30 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 2 Placer avec pr caution le tube de la colonne 12 sur le joint d tanch it en U 4 Contr ler que la bride 3 est centr e par rapport au joint d tanch it
28. rel chant la tension exerc e sur le ressort 38 situ sous le tube interne de l adaptateur 35 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 27 3 Installation et test des fuites 3 1 D montage et montage 28 8 Retirer la plaque sup rieure 24 26 29 et 32 et la s parer du tube externe de l adaptateur 36 en la tournant dans le sens des aiguilles d une montre Retirer le syst me d tanch it 30 et le joint torique de l adaptateur 33 34 D monter le tube externe de l adaptateur 36 le tube interne de l adaptateur 35 et le ressort 38 en retirant les vis 37 La plaque sup rieure 24 26 peut tre d mont e en retirant les vis 32 Cela termine la proc dure de d montage de l adaptateur Montage de l adaptateur Pour le montage de l adaptateur des colonnes BPG 300 se reporter la figure A 3 et proc der comme suit 1 10 11 12 Positionner la bague annulaire 25 dans l encoche de la plaque sup rieure 26 l aide des vis 32 fixer la douille de l crou de r glage 29 au corps de ajusteur de la hauteur de l adaptateur 24 au travers de la plaque sup rieure 21 de telle mani re que l ajusteur de la hauteur de l adaptateur tourne sur es bagues annulaires 25 Glisser le ressort 38 le tube interne de l adaptateur 35 et le tube externe de adaptateur 36 sur la plaque de l adaptateur 39 Fixer le tube externe de l adaptateur 36 la plaque de l adapta
29. 0 voir remarque 7 Acide ac tique 25 voir remarque 7 Acide chlorhydrique 0 1M voir remarques 6 7 Acide nitrique 0 1M voir remarque 7 Acide trifluoroac tique 0 1 voir remarques 7 8 Alcool isopropylique 100 voir remarque 2 Chlorure de sodium 2M voir remarque 5 Cyclohexane 100 voir remarques 3 4 Ethanol 100 voir remarque 2 Ethyl ne glycol 50 OK Glyc rol 100 OK Hexane 100 voir remarques 2 7 Hydroxyde de sodium 2M OK M thanol 100 OK n Propanol 100 OK Triton x 100 100 OK Tween Phosphate de tri n butyle 1 0 3 OK Ur e 8M OK 1 Le test n inclut pas le tuyau en PVC 2 Le caoutchouc EPDM modifie les caract ristiques Pour une utilisation r p titive et long terme utiliser des joints toriques et des joints d tanch it en FEP PFR PTFE 5 Remplacer les joints toriques et les joints d tanch it par des mod les en FEP PFR PTFE La r sistance de polypropyl ne est assez bonne 5 Peut tre utilis sous des conditions de fonctionnement normales Ne pas utiliser de NaCl dans les solutions de stockage Garder l esprit que le NaCl peut engendrer une corrosion de l acier inoxydable dans des solutions acides pH inf rieur 4 5 6 Pas plus de 4 heures 7 Utilisation d conseill avec les tamis en PA 8 Le FEP modifie les caract ristiques Donc utiliser de caoutchouc EPDM Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 37 4 La colonne BPG 4 4 Courbes de press
30. 0 Boulon ergot 8 3001 07 316 3 1 Vis d arr t 9 4363 01 316 2 2 Tube en verre pour BPG 450 500 8 1103 14 Verre borosilicat Tube en verre 450 750 8 1103 15 Verre borosilicat Tube en verre 450 1000 8 1103 16 Verre borosilicat 3 Bouchon pour arr t pivotant 8 1107 43 POM 4 Arr t pivotant 8 1109 41 316L 5 Vis M8 x50 8 1109 40 316 5 6 Entretoise 8 1109 42 316L 7 Couvercle 8 1109 70 316 8 Bague annulaire 8 1109 43 PP 2 9 Ajusteur de hauteur de l adaptateur 8 1109 44 POM 20 Poign e 8 1109 45 316 21 Ecrou pour bride 8 1109 46 PEEK 23 Ajusteur de joint d tanch it 8 1109 47 PEEK 24 Poign e 8 1109 48 316 25 Molette 8 1109 49 PP 26 Vis M10 x 65 8 1109 50 316 2 27 Rondelle 10 5 x 20 8 1109 51 316 0 28 Ecrou calotte sph rique M10 avec rondelle 8 1103 20 316 29 Vis pour adaptateur 8 1109 54 316L 30 Tube de r glage 8 1109 55 316 31 Tube d entr e int 12 mm 8 1109 53 316L 32 Joint torique 12 3 x 2 4 8 1103 70 EPDM 5 2 Joint torique 12 3 x 2 4 8 1117 65 FEP 33 Vis M4 x 16 8 1109 56 316 2 34 Ressort 8 1107 44 316 L PTFE 35 Vis M5 x 10 8 1109 57 316 2 36 Bouchon encliquer 8 1107 45 PP 2 38 Plaque pour adaptateur 8 1109 71 S31803 39 Vis M8 x 25 8 1145 12 316L PTFE 3 40 Joint torique 419 x 10 8 1017 47 EPDM Joint torique 419 x 10 8 1117 66 FEP 41 Plaque de distribution 8 1106 04 PP Comparable au 316L suite la page suivante Suite des notes la page suivante Tableau A 3 Composants des colonnes BPG
31. 19 27 8 0019 27 38 Pieds pour support 316 t 18 1126 93 18 1126 93 8 1126 93 39 Roulette 3 18 1001 09 18 1001 09 8 1001 09 40 Vanne 4 ports 2 voies 316L PTFE 1 18 5757 01 18 5757 01 8 5757 01 41 Tuyau 1 42 Rondelle PP 18 1142 79 NA NA 43 Rondelle PP 1 18 1142 80 18 1142 80 8 1142 80 Voir tableau 3 3 du guide d entretien BPG Tube int 4 mm BPG 100 6 mm BPG 140 et 200 Comparable au 316L Tableau A 2 Composants des colonnes BPG 300 Les num ros d identification font r f rence aux figures A 3 et A 4 Pi ce Description R f rence Mat riau En contact avec les Qt n liquides utilis s livr e 1 Plaque sup rieure pour adaptateur 8 1012 48 316 1 2 Ecrou M12 8 1012 24 316 6 3 Rondelle ressort 8 1012 25 316 6 4 Ecrou M10 8 1012 44 316 5 5 Bride 316 6 Joint torique 301 x 6 mm 8 1012 26 EPDM 2 7 Joint torique 301 x 6 mm 8 1012 27 FEP 1 8 Tige pour T300 500 8 1012 31 316 1 Tige pour T300 750 8 1012 32 316 1 Tige pour T300 950 8 1012 33 316 1 9 Tube pour colonne T300 500 8 1012 28 Verre borosilicat 1 Tube pour colonne T300 750 8 1012 29 Verre borosilicat 1 Tube pour colonne T300 950 8 1012 30 Verre borosilicat 1 0 Tamis 23 um pour pi ce terminale 8 1012 34 PA 2 1 Tamis 10 um pour pi
32. 36 38 51 62 562 594 797 968 25 215 00 80x80x165 446 1562 100 61 64 72 78 953 1000 1125 1218 25 230 00 80x80x190 Les volumes de gel et les hauteurs de gel sont bas s sur une concentration de la suspension de 75 et une compression de compactage package de 15 La compression est la diff rence de volume entre un gel s diment et un gel sous pression 1 Ces chiffres sont obtenu sans utiliser de tube suppl mentaire 2 Les hauteurs et les volumes de gel peuvent tre obtenus avec un syst me de compactage package suppl mentaire au cours de la solidification du gel s di mentation La quantit totale de suspension de 75 doit pouvoir tre contenue dans la colonne lorsque le tube supl mentaire et l adaptateur sont en place 5 La hauteur et le volume de gel peuvent tre obtenus avec le tube de compactage suppl mentaire en place pendant l tape de compactage finale L adaptateur fermer herm tiquement le tube de la colonne sur au moins 5 cm afin de pr venir les fortes contraintes sur le tube en verre 4 Utiliser un manom tre pour contr ler la pression pour la commande voir chapitre 3 du guide d entretien BPG La temp rature de fonctionnement des colonnes BPG est de 4 C 40 C Tableau 4 2 Dimensions des entr es et sorties des colonnes BPG Taille de la colonne 100 140 200 300 450 Dimensions E S mm 4 6 6 10 12 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 35 4 La colonne BPG 4 2 Mat riaux con
33. GE Healthcare Colonnes BPG Instructions d utilisation Informations importantes pour les utilisateurs Tous les utilisateurs doivent lire enti rement ce manuel afin de bien comprendre l utilisation en toute s curit des colonnes BPG AVERTISSEMENT Le message AVERTISSEMENT signale des instructions qui doivent tre suivies afin de pr venir le risque de blessures Ne pas pour suivre avant que toutes les conditions indiqu es soient r unies et parfaitement comprises ATTENTION Le message ATTENTION signale des instructions qui doivent tre suivies afin de pr venir le risque d endommagement du produit ou des autres quipements Ne pas poursuivre avant que toutes les conditions indiqu es soient r unies et parfaitement comprises Remarque Le message Remarque sert indiquer des informations importantes pour une utilisation optimale et efficace du produit Certification CE Ce produit r pond toutes les exigences des directives CE en vigueur Une copie de la D claration de conformit correspondante est disponible sur demande Le symbole CE et la d claration de conformit correspondante sont valables pour l instrument lorsque celui ci est utilis en tant qu appareil ind pendant ou connect d autres instruments GE Healthcare portant le label CE ou connect d autres produits recommand s ou d crits dans ce manuel et utilis dans l tat o il a t livr par GE He
34. a colonne la terre raccorder l une des extr mit s du c ble de mise la terre un terminal de terre du r seau de mise la terre de l usine et l autre extr mit au terminal de terre de la colonne situ sur le support Le terminal de terre de la colonne est dot d un filet M6 3 4 Test des fuites Avant d abaisser l adaptateur v rifier que le joint torique est mouill Utiliser par exemple une solution 20 d thanol Test des fuites au niveau de l adaptateur 1 Remplir la colonne d eau ou de solution de d contamination puis positionner l adaptateur dans la colonne la hauteur laquelle on compte utiliser la colonne 2 Fermer herm tiquement l adaptateur avec l ajusteur de joint d tanch it 3 liminer l air pr sent dans la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 33 3 34 Installation et test des fuites 3 4 Test des fuites amp Fermer la vanne de sortie de la colonne Vanne d entr e de la colonne D lt Jauge de pression lt Adaptateur Colonne BPG Vanne de s curit Vanne d entr e de la colonne Fig 3 8 Disposition sch matique de la colonne des vannes et de la pompe pour le test des fuites au niveau Augmenter la pression jusqu la pression maximale de fonctionnement Attendre environ 15 minutes jusqu ce que la pression soit stabilis e Contr ler la perte de pression sur la jauge de pression La perte de pression ne peut pas d passe
35. act es pack es pr senteront des valeurs du param tre HEPT faibles N anmoins il n est possible de comparer que des Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 colonnes qui ont t compact es pack es avec le m me type de support et qui ont t test es sous des conditions identiques Comme r gle empirique g n rale une valeur correcte du param tre HEPT est de l ordre de deux trois fois le diam tre moyen des billes du support utilis condition que l chantillon n interagisse pas avec le support En pratique la corr lation entre la valeur du param tre HEPT et les performances de la colonne ne peuvent tre valu es que par les sp cifications internes du client Lorsque ce point a t tabli il est possible de d finir une norme pour pouvoir juger de l acceptabilit du compactage package de la colonne Par exemple l op rateur de la colonne peut savoir par exp rience qu une colonne compact e pack e avec du gel Sephadex G 25 fournissant des valeurs du param tre HEPT sup rieures 0 05 cm n assure pas la s paration voulue Par cons quent l op rateur de la colonne d finira cette valeur comme tant la Valeur maximale admissible c est dire la qualit minimale acceptable Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 59 5 Fonctionnement 5 2 Evaluation de la colonne 60 5 2 3 Calcul du facteur d asym trie de pic La forme du pic doit tre la
36. althcare l exception des modifications d crites dans ce manuel Pr cautions de s curit IMPORTANT Chaque fois que l on utilise la colonne toujours conserver port e de main le manuel d instructions de la colonne IMPORTANT L utilisateur final doit s assurer que toutes les op rations d installation d entretien de fonctionnement et d inspection sont effectu es par du personnel qualifi correctement form cet effet et capable de comprendre les instructions d utilisation AVERTISSEMENT Toujours utiliser des v tements de protection adapt s l application en cours afin de garantir la s curit des personnes au cours de l utilisation AVERTISSEMENT Se montrer particuli rement attentif lorsque l on travaille proximit de la colonne AVERTISSEMENT Ne JAMAIS introduire d air ou de gaz sous pression dans la colonne AVERTISSEMENT La pression de fonctionnement de la colonne ne doit jamais d passer la pression de service maximale sous peine d entra ner un risque de blessures au personnel et de dommages la colonne Un dispositif de s curit ad quat doit tre pr vu AVERTISSEMENT La plage de temp rature de fonctionnement de la colonne ne doit jamais se situer en dehors de la plage de temp rature de service maximale gt BB PPRPP Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 Edition AC gt gt D AVERTISSEMENT Ne p
37. ants repris au tableau 2 2 ci dessous sont pr sents Tableau 2 2 Nombre de composants livr s avec les colonnes BPG D signation Quantit BPG BPG BPG BPG BPG 100 140 200 300 450 Bride pleine avec joint d tanch it EPDM 2 2 2 2 2 Collier 23 mm 51 mm 2 2 2 2 2 Support 1 1 Tamis 23 um 2 2 2 2 2 Boulons pour fixation du support la colonne 6 4 Manuels d utilisation d entretien chacun 1 1 1 1 T 18 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 3 Installation et test des fuites Toutes les colonnes BPG utilisent comme connecteurs des raccords sanitaires collier Attention Utiliser exclusivement des tuyaux et colliers homologu s pour la pression maximale de la colonne et r sistant aux produits chimiques qui seront utilis s Attention Placer la colonne en dehors d une zone de passage afin de la prot ger contre tout d placement ou collision accidentel Veiller ne pas marcher ou tr bucher sur les tuyaux qui se trouvent sur le sol 3 1 D montage et montage D monter et monter les colonnes et adaptateurs conform ment aux instructions des sections ci apr s Se reporter aux tableaux A 1 A 3 et aux figures A 1 A 5 pour l identification des l ments ces tableaux et figures se trouvent la fin du pr sent manuel Les num ros entre parenth ses dans les sections ci apr s font r f rence aux num ros identifiant les l
38. as utiliser d autres produits chimiques que ceux dont il a t d montr qu ils sont sans danger pour les parties humides de la colonne AVERTISSEMENT Les freins des roues doivent tre activ s en permanence durant le fonctionnement ou le stockage AVERTISSEMENT Se montrer particuli rement attentif lors du d placement de la colonne pour avoir l assurance que la colonne ne s incline pas ATTENTION S assurer que l eau utilis e avec la colonne est exempte de particules car les particules risquent de bloquer et d endommager les m ches Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Table des mati res Pr cautions de s curit ssessessessesssesssossesseesseesseosseesse 5 L INETOQUETION een hd men nie net 9 Er G n rale Siea o Re NS tt 9 1 2 tiquetage de la Colonne nn 10 153 SS CUTIT ten da ne nn ne is 11 1 3 1 G N FANIT S sn nn tn an nn tant 11 1 3 2 Avertissements 11 1 3 3 Notifications d attention 11 1 3 4 Remarque Sinanin an SLI 1 3 5 R sistance aux produits chimiques 11 1 3 6 Utilisation sous des atmosph res potentiellement explosives 11 1 4 LOD FAt U TS AT T S nn te 12 15 Stockage des colonnes BPG conditionn es avec un SUPPO SUR EE nn RAR et UE ts 12 1 5 1 Nettoyage apr s utilisation avec du chlorure de sodium 13 16 limination et recyclage ne 14 1 6 1 Mat riqux el MOtIereS menaces 14 1 6 2 Colonnes BPG semien nn er A ent
39. ative on peut utiliser une solution de NaCl ou d ac tone qui fournira une bonne indication de la qualit du compactage package de la colonne L luat est suivi par mesure de la conductivit ou de l absorption UV le profil d lution obtenu s utilise pour calculer a valeur du param tre HEPT L avantage de l utilisation d une solution de NaCl est qu une telle solution est imm diatement disponible et peut tre utilis e en toute s curit pour tester toutes les colonnes Un inconv nient est que le NaCl risque d interagir avec la matrice du gel en particulier dans le cas des matrices changeuses d ions et par cons quent de fournir des r sultats erron s L ac tone par contre n interagit pas avec la matrice et est d tectable par absorption UV 280 nm On peut galement augmenter d un facteur 10 la concentration du tampon de s paration et l utiliser comme chantillon de test La figure 5 13 ci dessous illustre le diagramme d absoption UV pour l ac tone obtenu avec une application classique utilisant une colonne BPG et fourni les valeurs calcul es des param tres HEPT et A Ve Absorption UV 50 10 Volume Fig 5 13 Chromatogramme de test illustrant le calcul des param tres HEPT et A Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 57 5 Fonctionnement 5 2 Evaluation de la colonne 58 5 2 2 Calcul du param tre HEPT Le volume d chantillon doit tre gal environ
40. avec les supports BioProcess et est bas e sur l application d un d bit constant au travers de la colonne Pour pr parer la proc dure de compactage package de la colonne proc der comme suit AVERTISSEMENT Toujours utiliser une vanne de s curit raccord e imm diatement apr s la pompe Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 51 5 Fonctionnement 5 1 Compactage package de la colonne 52 TAPE 1 Contr ler que le d bit optimal pour la combinaison d quipement de colonne de type de support et de quantit utilis e a t d termin se reporter la section 5 1 3 TAPE 2 S assurer que l on dispose de suffisamment de tampon de compactage package Un tampon de compactage package classique est du NaCl 0 1 M Cependant toujours v rifier les instructions accompagnant le support en ce qui concerne les tampons de compactage package TAPE 3 Humecter les tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air pi g dans ceux ci TAPE 4 R gler le d bit de la pompe sur le d bit de compactage package sans raccorder la colonne la pompe Prendre note de la vitesse de la pompe afin de d buter le compactage package avec le d bit correct TAPE 5 Si le support se trouve d j dans la colonne retirer l adaptateur remuer pr cautionneusement le support et r p ter les tapes 5 et 6 de la section 5 1 3 Si le support ne se trouve pas encore dans la colonne r p ter l
41. c les supports BioProcess pour la chromatographie d change d ions d interaction hydrophobe d affinit et de filtration sur gel Le dessalage au Sephadex G 25 de calibres grossier Coarse moyen Medium fin Fine et superfin SuperFine peut galement tre utilis efficacement Le syst me de distribution de l coulement a t d velopp pour r pondre aux performances lev es des supports GE Healthcare Toutes les colonnes BPG sont livr es compl tes avec un adaptateur Des syst mes de compactage package sont disponibles pour les applications qui n cessitent des hauteurs de gel importantes Le montage de la colonne et des protocoles de compactage package de la colonne pour les supports BioProcess sont galement d crits dans ce manuel Un chapitre sp cial du guide d entretien des colonnes BPG chapitre 1 est consacr aux protocoles de maintenance de la colonne applicables aux exigences des proc d s individuels Les trois principaux groupes de composants qui constituent la colonne adaptateur colonne proprement dite et support sont illustr s par les sch mas clat s en plusieurs volets qui se trouvent la fin de ce manuel Les composants de base de la colonne sont e __tubeen verre e bride e joints toriques e tamis de filtration e tamis de soutien e pi ce terminale e tiges Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 9 1 Introduction 1 2 tiquetage de la colonne 10
42. ce terminale 8 1012 35 PP 2 Tamis 12 um pour pi ce terminale 8 1148 44 PEEK 2 Tamis 54 um pour pi ce terminale 8 1127 03 PP 2 2 Tamis de soutien pour pi ce terminale 8 1012 36 PP 2 3 Plaque de distribution 8 1012 37 PP 2 4 Pi ce terminale 8 1140 47 316L 5 Joint d tanch it 25 mm int 12 mm 8 0200 00 EPDM 5 6 Joint d tanch it 25 mm int 10 mm 8 1012 40 PTFE 5 7 Raccord 25 mm 10 mm PP 2 8 Vanne manuelle 4 ports 2 voies 8 1012 56 316L PTFE 1 9 Support complet 8 1012 38 316L 20 Rondelle 8 1012 61 316 6 21 Boulon M12 x 25 8 1012 65 316 6 22 Roulette 8 1001 09 1 23 Ajusteur de joint d tanch it 8 1012 41 PEE 1 24 Ajusteur de hauteur de l adaptateur 8 1128 31 316 1 25 Bague annulaire 8 1012 42 POM 2 26 Plaque sup rieure pour adaptateur 8 1129 06 316L 27 Ecrou M10 8 1012 44 316 5 28 Vis d arr t compl te 8 1012 43 316 POM 1 29 Ecrou de r glage douille 8 1012 45 PEE 1 30 Syst me d tanch it 8 1147 49 316L 31 Vis pour t te de l adaptateur M8 8 1012 46 316 3 32 Vis Allen M8 x 60 8 1012 47 316 5 33 Joint torique 274 x 8 mm 8 1012 51 EPDM 2 34 Joint torique 274 x 8 mm 8 1012 52 FEP 1 35 Tube interne pour adaptateur 8 1147 83 316 36 Tube externe pour adaptateur 8 1142 93 316L 1 37 Vis M8 x 16 8 1145 10 316L PTFE 5 38 Ressort 8 1012 50 316 L PTFE 1 39 Plaque pour adaptateur 8 1112 82 531803 1 40 Tamis de soutien pour adaptateur 8 1012 53 PP 2 41 Tamis 23 um po
43. e int rieur Terpolym re thul ne propyl ne di ne Ethyl ne propyl ne perfluor D bit rapide Fast Flow Copolym re d hexafluoropropyl ne et de fluorure de vinylid ne Hauteur quivalent un plateau th orique Haute r solution Chromatographie d change d ions Hauteur de gel Largeur du pic mi pic hauteur ombre de plateaux th oriques ettoyage en place Polyamide Poly ther therc tone Elastom re base d hydrocarbures perfluor s Polyoxym thul ne ou polyac tal 3 Polypropyl ne Polyt trafluor thul ne Chlorure de polyvinyle T trahydrofuranne Ultraviolet Volume d lution Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC tions utilis es dans ce manuel sont d finies comme suit 61 6 Abr viations 62 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Tableau A 1 Composants des colonnes BPG 100 140 et 200 Les num ros d identificati on font r f rence aux figures A 1 et A 2 Pi ce Description Mat riau En contact Qt BPG 100 BPG 140 BPG 200 n avec les liqui livr e R f rence R f rence R f rence des utilis s 1 Tube pour colonne 500 Verre borosilicat 1 18 0251 0 18 1112 95 18 1152 01 Tube pour
44. er la maintenance habituelle c est dire le remplacement des joints toriques etc 3 S cher consciencieusement tous les composants de la colonne 4 Assembler la colonne 5 Sceller tous les orifices d entr e et de sortie de la fa on indiqu e dans le protocole de stockage sec d crit ci apr s 6 Emballer la colonne dans un plastique afin qu elle ne soit pas expos e la poussi re ou d autres contaminants v hicul s par l air 7 Stocker la colonne une temp rature ambiante contr l e dans un endroit propre et sec Remarque viter de stocker la colonne dans un endroit susceptible de conna tre d importantes variations de temp rature 1 5 1 Nettoyage apr s utilisation avec du chlorure de sodium Si un processus implique l utilisation de solutions de chlorure de sodium la colonne doit tre parfaitement rinc e afin d en retirer tout r sidu potentiel de chlorure de sodium Rincer la colonne en la remplissant au moins cinq fois d eau L eau est la solution de rin age privil gi e en raison des propri t s de solubilit du chlorure de sodium dans l eau que l on ne retrouve pas avec d autres solutions de rin age comme l thanol Le protocole de rin age doit utiliser au moins cinq volumes de colonne d eau d min ralis e afin de garantir une limination optimale des ions chlorures r siduels potentiellement corrosifs pour l acier inoxydable dans le temps La conception de la colonne BPG permet de place
45. es tapes 1 6 de la section 5 1 3 TAPE 6 Vanne de s curit GE RTL E Manometre Fig 5 9 M thode de compactage package de la colonne tape 6 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 TAPE 6 D marrer la pompe Eliminer les bulles d air qui se trouvent dans le tuyau en provenance de la pompe en pompant faible d bit c Tout en pompant faible d bit raccorder un manom tre entre la pompe et la colonne puis raccorder le tuyau au dessus de la colonne d Ouvrir la vanne inf rieure e R gler le d bit la valeur pr d finie f Mesurer r guli rement le d bit et l ajuster si n cessaire La contre pression du gel augmente et r duit le d bit mesure que le gel est compact pack g S assurer que la pression affich e sur le manom tre ne d passe pas la pression maximale autoris e pour le support se reporter au mode d emploi du support utilis ou pour la colonne TAPE 7 CN Y Manometre Vanne de s curit Marquer la limite sup rieure du gel Fig 5 10 M thode de compactage package de la colonne tape 7 TAPE 7 a Lorsque le gel a s diment marquer la limite sup rieure du gel b Arr ter la pompe c Fermer la vanne inf rieure d Desserrer le joint torique d tanch it de l adaptateur en tournant en sens inver
46. g 3 5 Emplacement des composants de la pi ce terminale des colonnes BPG 300 2 Fixer la pi ce terminale 14 au support 19 l aide des boulons 21 et des rondelles 20 3 Positionner avec pr caution le tube en verre 9 sur le joint torique 6 7 de la pi ce terminale 14 V rifier que le tube en verre n est en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable Aligner le tube en verre avec le tamis de filtration inf rieur 10 11 4 Visser les tiges de soutien 8 dans la pi ce terminale 14 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 5 Positionner la bride 5 de telle sorte que les tiges de soutien 8 viennent se placer dans les trous correspondants S assurer que le joint torique 6 7 de la bride est align avec le tube en verre Le tube en verre ne peut tre en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable sans cela le tube en verre risque de casser 6 Aligner la surface interne du tube en verre avec la surface interne de la bride AVERTISSEMENT Le tube en verre risque de casser si l on applique une pression excessive lors du serrage des quatre crous sur les tiges de soutien tiges qui fixent la bride et la pi ce terminale la colonne en verre Toujours utiliser une cl dynamom trique pour serrer ces crous Se reporter au tableau A 4 2 pour les r glages de la cl dynamom trique 7 Placer les rondelles ressort 3 et les crous 2 su
47. ge package 2 fois le volume de la colonne Il est pr f rable d effectuer trois s parations de test afin de v rifier si les valeurs du test sont stables Si un mauvais r sultat s am liore au cours du test cela peut tre d un quilibrage incorrect de la colonne Pour contr ler que le gel est stable faire fonctionner la colonne sous 70 de sa pression de compactage package pendant 20 heures et la retester de pr f rence avec trois s parations de test On notera que des pics de pression risquent d engendrer un compactage package de mauvaise qualit craquelures Si cela se produit il convient d installer un pi ge air et une vanne de d compression entre la pompe et la colonne La vanne de d compression doit tre plac e entre le pi ge air et la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Colonne BPG 300 Support Sepharose 6 Fast Flow lt gt Hauteur de gel 57 5 cm Volume de gel 40 6 litres Eluant Eau distill e Echantillon 1 05 litres ac tone 1 NaCl 1 D bit 19 cm h Ve 18 8 lh 0 9 HEPT 0 024 cm a 0 90 b 0 85 b a 0 85 0 90 A 0 94 Fonctionnement 5 5 2 1 Choix de l chantillon de test pour les colonnes Le mat riau le plus appropri pour le test de la colonne est bien entendu chantillon qui sera utilis dans l application mais pour des raisons pratiques ou conomiques cela n est pas toujours r alisable Comme altern
48. ion d bit 38 4 3 1 R sistance chimique au chlorure de sodium Les colonnes BPG sont dot es de composants mouill s en acier inoxydable et doivent donc tre correctement entretenues lorsqu elles sont expos es au chlorure de sodium au cours des processus chromatographiques Si un processus implique l utilisation de solutions de chlorure de sodium la colonne doit tre parfaitement rinc e afin d en retirer tout r sidu potentiel de chlorure de sodium Rincer la colonne en la remplissant au moins cinq fois d eau L eau est la solution de rin age privil gi e en raison des propri t s de solubilit du chlorure de sodium dans l eau que l on ne retrouve pas avec d autres solutions de rin ages comme l thanol Le protocole de rin age doit utiliser au moins cinq volumes de colonne d eau d min ralis e afin de garantir une limination optimale des ions chlorures r siduels potentiellement corrosifs pour l acier inoxydable dans le temps La conception de la colonne BPG permet de placer le tampon sur le dessus de l adaptateur au moment du conditionnement Une fois le conditionnement effectu et le joint torique scell il est essentiel que toute trace de tampon comprenant des ions chlorure soit limin e de cet espace afin de pr venir la corrosion dans le temps 4 4 Courbes de pression d bit En g n ral les courbes de pression d bit th oriques sont extr mement difficiles d terminer Les courbes de pression d bit les p
49. itu sous le tube interne de l adaptateur 30 5 Retirer la plaque sup rieure 19 23 et la s parer de l adaptateur externe 31 en la tournant dans le sens des aiguilles d une montre Retirer le syst me d tanch it 27 et le joint torique de l adaptateur 28 29 D monter le tube externe de l adaptateur 31 le tube interne de l adaptateur 30 et le ressort 33 en retirant les vis 32 8 La plaque sup rieure 19 23 peut tre d mont e en retirant les vis 23 Cela termine la proc dure de d montage de l adaptateur Montage de l adaptateur Pour le montage de l adaptateur des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter la figure A 4 et au tableau A 1 pour les r glages de la cl dynamom trique et proc der comme suit Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 1 Positionner la bague annulaire 20 dans l encoche de la plaque sup rieure 21 2 l aide des vis 23 fixer la douille de l crou de r glage 22 au corps de l crou de r glage 19 au travers de la plaque sup rieure 21 de telle mani re que le corps de l crou de r glage tourne sur la bague annulaire 20 3 Glisser le ressort 33 le tube interne de l adaptateur 30 et le tube externe de l adaptateur 31 sur la plaque de l adaptateur 34 4 Fixer le tube externe de l adaptateur 31 la plaque de l adaptateur 34 l aide des vis 32 Glisser le syst me d tanch it
50. liser le d bit correspondant la pression maximale autoris e pour la colonne g Lorsque la pression maximale est atteinte mettre fin la d termination 50 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 TAPE 8 Courbe de pression d bit D bit de compactage package a Q Do Ko OD el 2 D 2 3 E 2 v D 5 E c O E K 8 a v v 70 100 ge Pression Fig 5 8 D termination du d bit optimal tape 8 TAPE 8 a Tracer un diagramme de la relation pression d bit comme illustr dans l exemple ci dessus Le d bit de compactage package optimal est d environ 70 du d bit maximal Pour certains supports particuli rement rigides il n y a pas de plateau en pareil cas utiliser le d bit correspondant la pression maximale autoris e pour la colonne 5 1 4 D bits de compactage package recommand s pour les supports GE Healthcare Les d bits de compactage package recommand s figurent dans les instructions qui accompagnent chaque livraison de support N anmoins pour un compactage package optimal il est conseill de proc der la d termination d une courbe de pression d bit pour chaque lot de support colonne o configuration de syst me de la mani re d crite la section 5 1 3 5 15 M thode de compactage package de la colonne Cette m thode de compactage package peut tre utilis e
51. lus pr cises sont celles obtenues par des m thodes exp rimentales La figure 3 1 ci dessous montre la configuration classiquement utilis e dans les laboratoires GE Healthcare pour g n rer des courbes de pression d bit Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC La colonne BPG 4 Q gi Vers le cylindre Manom tre de mesure ou le d bitm tre Vanne de s curit 1x N 2 Pompe Cuve de tampon Remarques 1 La longueur de tuyau maximale autorisee entre le manometre et la sortie est de 1 5 m 2 Le diametre du tuyau est de 10 mm Fig 4 1 Configuration classique pour la d termination des courbes de pression d bit Remarque La colonne contient uniquement du tampon La d charge doit se trouver au m me niveau que le manom tre 4 4 1 Courbes de pression d bit des colonnes vides Les figures 3 2 et 3 3 illustrent les courbes de pression d bit pour les colonnes BPG vides obtenues par la m thode d crite la section 5 1 3 de ce manuel et avec la configuration illustr e plus haut 3500 BPG 100 3000 2500 BPG 140 2000 1500 D bit cm h 1000 BPG 200 500 0 0 0 2 04 06 08 1 12 14 16 18 2 22 24 26 28 3 Pression en bars Fig 4 2 Exemples de courbes de pression d bit pour les colonnes BPG 100 140 et 200 vides Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 39 4 La colonne BPG 4 4 Courbes de pression d
52. ne BPG est une pi ce d quipement comparable un r cipient sous pression volume variable L op rateur doit avoir une exp rience suffisante de l utilisation de r cipients sous pression ainsi que des quipements d livrant un gel sous pression pour le contr le du compactage package par compression axiale Pour utiliser la colonne en toute s curit et correctement l op rateur doit avoir lu compris et m moris les instructions d utilisation en g n ral et les instructions de s curit en particulier Une utilisation incorrecte de la colonne risque d entra ner des dommages aux biens et des blessures aux personnes 1 5 Stockage des colonnes BPG conditionn es avec un support Les colonnes BPG conditionn es avec un support sont stock es dans la solution bact riostatique recommand e pour le support Avant d appliquer la solution bact riostatique il est d une importance capitale que la colonne soit nettoy e avec 0 5M d hydroxyde de sodium ou d une autre solution NEP recommand e pour le support Il est galement important de rincer la colonne pour la d barrasser de tous les ions chlorure r siduels La rincer l eau d min ralis e Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Introduction 1 apr s le nettoyage NEP avec au moins cinq volumes de colonne Appliquer ensuite la solution bact riostatique La colonne est pr te tre stock e Protocole de stockage sec 1 D monter la colonne 2 R alis
53. ontage de l adaptateur colonnes 100 140 et 200 22 colonnes 300 27 colonnes 450 31 d montage de la colonne colonnes 100 140 et 200 19 colonnes 300 24 colonnes 450 29 d termination du d bit optimal de compactage packa ge 45 E limination de la colonne 14 installation de la colonne 19 L label CE 10 M mise la terre de la colonne 32 montage d une r hausse colonnes 100 140 et 200 23 colonnes 300 29 colonnes 450 32 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC montage de l adaptateur colonnes 100 140 et 200 22 colonnes 300 28 colonnes 450 31 montage de la colonne colonnes 100 140 et 200 20 colonnes 300 26 colonnes 450 30 N notifications d attention 11 notifications d avertissement 11 notifications de remarques 11 0 op rateurs agr s 12 P pression courbes 38 Q quantit s de support 44 R recommand d bits de compactage package 51 tailles de tamis 44 r f rences tubes et supports pour colonnes 17 r glages de la cl dynamom trique colonnes 100 140 et 200 22 colonnes 300 27 colonnes 450 31 r hausse montage sur les colonnes 100 140 et 200 23 montage sur les colonnes 300 29 montage sur les colonnes 450 32 r sistance aux produits chimiques 11 36 37 S s curit 11 atmosph res explosives 11 cat gorie EX 12 storage 12 syst me de compactage package emplacement des composants 24 T test de la colonne pour l absence de fuites 19 test des
54. orsque le tampon forme un m nisque et qu il n appara t plus de bulles d air Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 49 5 Fonctionnement 5 1 Compactage package de la colonne TAPE 7 TN ba Manometre Vanne de s curit Fig 5 7 D termination du d bit optimal tape 7 TAPE 7 AVERTISSEMENT Toujours utiliser une vanne de s curit raccord e imm diatement apr s la pompe a D marrer la pompe et liminer l air qui se trouve dans le tuyau en provenance de la pompe en pompant faible d bit b Tout en pompant faible d bit raccorder un manom tre entre la pompe et la colonne puis raccorder le tuyau au dessus de la colonne Ouvrir la vanne inf rieure D finir une courbe de pression d bit en commen ant faible d bit Le support commence s dimenter laissant une zone claire entre le gel et l adaptateur Ne PAS ajuster l adaptateur e Augmenter lentement la pression par incr ments et prendre note du d bit lorsque la pression s est stabilis e Le temps n cessaire pour que la pression se stabilise d pend du type de support et peut varier de quelques minutes plusieurs heures f Continuer augmenter la pression jusqu ce que le d bit ait atteint un plateau une augmentation de pression n accro t plus le d bit Pour certains supports sous forme de gels rigides il n y a pas de plateau En pareil cas uti
55. portant de s lectionner des tamis d adaptateur et de pi ce terminale de porosit appropri e Les tamis sont disponibles avec des porosit s de 10 12 23 et 54 um Un mauvais choix de porosit du tamis risque d engendrer des probl mes de contre pression ou de fuites de gel Les tailles de tamis recommand es sont les suivantes Tableau 5 2 Tailles de tamis recommand es pour les colonnes BPG Taille de tamis um Mat riau Diam tre des billes um 10 PA 30 70 12 PEEK 30 70 23 PP3 Support FF 54 PP3 Support BB 1 Polyamide 2 Poly ther therc tone 3 Polypropyl ne Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 5 13 D termination du d bit optimal de compactage package Pour d terminer le d bit optimal de compactage package pour les colonnes BPG proc der comme suit TAPE 1 D Pompe 4 Vanne ferm e yY AVERTISSEMENT Toujours conserver dans la mesure du possible les liquides dangereux dans des r cipients ferm s afin d viter la pr sence de vapeurs ou Fig 5 1 D termination du d bit optimal tape 1 d claboussures dans la zone de travail TAPE 1 Humecter le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air pi g Remplir la colonne avec 10 15 cm de tampon de compactage package Vider les tubes pour liminer toutes les bulles d air Raccorder un tuyau au c t aspiration d une pompe panga D
56. ptateur sur le tube de la colonne si l on d monte la r hausse de compactage package 3 2 Raccordements Plusieurs connecteurs diff rents sont disponibles pour raccorder les colonnes BPG aux diff rents types de tuyaux et de syst mes voir le chapitre 3 du guide d entretien des colonnes BPG Les raccords sanitaires collier hygi niques des colonnes BPG permettent le nettoyage en place Les autres connecteurs sont en polypropyl ne et dot s d une bonne r sistance aux produits chimiques Le diam tre ext rieur de tous les raccords collier BPG est de 25 mm Un collier de 51 mm est utilis avec les kits de manom tre et la vanne de s curit 3 3 Mise la terre de la colonne Pour viter les d charges d lectricit statique la colonne peut tre mise la terre Remarque Le raccordement la terre est obligatoire si l quipement est destin tre utilis sous une atmosph re potentiellement explosive Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 Pour cela un kit de mise la terre adapt est propos en option et un terminal de raccordement la terre est pr vu sur le support de la colonne comme illustr ci dessous Terminal c ble de mise la terre des colonnes BPG 100 140 200 et 450 Terminal c ble de mise la terre des colonnes BPG 300 Fig 3 7 Terminal de terre de la colonne sur le support de la colonne Pour raccorder l
57. r 0 1 bar en 5 minutes Un enregistreur reli un contr leur de pression permet d obtenir des chiffres plus pr cis Cela termine le test des fuites Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC La colonne BPG 4 4 La colonne BPG Ce chapitre propose un aper u g n ral des sp cifications et caract ristiques des colonnes BPG 4 1 Sp cifications et caract ristiques Tableau 4 1 Principales sp cifications et caract ristiques des colonnes BPG Diam tre Aire de Hau Hauteur de gelt3 cm Volume de gel 13 litre Pression Poids Poids de Dimen de la section teur max total l adapta sions tota colonne cm de bar g kg teur les Imm tube kg em cm PxlxH Min 1 2 3 Min 1 2 3 4 100 78 5 50 0 26 34 45 00 20 27 35 8 15 7 48x48x127 100 78 5 75 25 4 55 65 20 32 43 51 8 16 7 48x48x152 100 78 5 95 45 54 72 78 35 42 57 6l 8 17 7 48x48x172 140 154 50 0 26 34 45 00 40 52 69 6 25 1 59x59x127 140 154 75 25 4 55 65 39 63 85 100 6 26 1 59x59x152 140 154 95 45 54 72 78 69 83 111 120 6 27 1 59x59x172 200 314 50 0 26 34 45 00 82 107 141 6 34 3 59x59x127 200 314 75 25 4 55 65 78 129 173 204 6 36 3 59x59x152 200 314 95 45 54 72 78 141 170 226 24 5 6 39 3 59x59x172 296 688 50 0 26 34 45 00 179 234 310 4 68 29 69x69x133 296 688 75 25 4 55 65 172 282 378 447 4 73 29 69x69x158 296 688 95 45 54 72 78 310 372 495 537 4 78 29 69x69x178 446 1562 50 11 22 30 45 172 344 469 703 25 200 00 80x80x140 446 1562 75
58. r dans de l eau 40 C Monter la plaque de distribution 13 le tamis de soutien 40 et le tamis de filtration 41 42 sur la plaque de l adaptateur 39 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Installation et test des fuites 3 Cela termine la proc dure de montage de l adaptateur du BPG 300 Montage d une r hausse syst me de compactage packagel La r hausse est livr e mont e Le d montage ou le montage de la r hausse se font de la m me mani re que pour la colonne l exception des directives concernant le support Pour le montage d une r hausse sur la colonne BPG 300 se reporter la figure A 4 et proc der comme suit 1 Retirer l adaptateur de la colonne et placer la r hausse sur la bride sup rieure 5 S assurer que le joint torique est correctement positionn dans la bride 2 Utiliser le collier de la plaque sup rieure pour fixer la r hausse la colonne La colonne ainsi allong e est pr sent pr te pour la premi re tape du compactage package pour les proc dures de compactage package en deux tapes Le collier suppl mentaire livr avec la r hausse sert monter l adaptateur sur la r hausse Remarque Ne pas compacter packer la colonne avec des hauteurs de gel sup rieures la longueur de la colonne c est dire que l adaptateur doit se fermer herm tiquement contre la paroi de la colonne et NON contre la paroi de la r hausse Un tube d une longueur de 10
59. r le tampon sur le dessus de l adaptateur au moment du conditionnement Une fois le conditionnement effectu et le joint torique scell il est essentiel que toute trace de tampon comprenant des ions chlorure soit limin e de cet espace afin de pr venir la corrosion dans le temps Consulter galement la section 4 3 R sistance chimique pour plus de d tails sur le chlorure de sodium Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 13 1 Introduction 1 6 limination et recyclage 16 limination et recyclage Lorsque la colonne est parvenue au terme de sa dur e de vie elle doit tre limin e conform ment la l gislation et aux r glementations en vigueur sur les aspects environnementaux du recyclage et de l limination des quipements industriels Cette responsabilit incombe l utilisateur final ou son quivalent Contacter les autorit s locales pour d ventuelles questions relatives aux probl mes d environnement ou la l gislation en vigueur concernant le recyclage o limination des quipements industriels de ce type 1 6 1 Mat riaux et mati res Pour l limination les mat riaux utilis s sont g n ralement subdivis s selon les cat gories suivantes e inflammables e Bois e Composites par exemple mat riaux recouverts d une feuille de plastique ou de m tal e Papier e Non inflammables e M taux Remarque Les m taux dangereux ou contenant des mati res dangereuses par e
60. r les tiges de soutien 8 et les serrer la main 8 R gler la cl dynamom trique comme indiqu au tableau 4 2 ci dessous et serrer les crous 2 dans l ordre indiqu la figure 4 4 Serrer les crous petit petit pour viter toute pression m canique in gale sur le tube en verre Trois quatre tours par crou sont l amplitude recommand e Tableau 3 2 R glages de la cl dynamom trique pour les colonnes BPG 300 l ment se reporter la figure A 4 R glage de la cl pour l emplacement dynamom trique crous de la tige 2 6 Nm crous du collier de la plaque sup rieure 4 6 5 Nm La colonne est pr sent pr te tre utilis e et l adaptateur peut tre ins r D montage de l adaptateur Pour le d montage de l adaptateur des colonnes BPG 300 se reporter la figure A 3 et proc der comme suit 1 Localiser la petite encoche la base de l anneau du tamis de filtration Retirer le tamis de filtration 41 42 en faisant tourner une spatule ou une autre lame en acier inoxydable extr mit mouss e similaire dans l encoche Retirer le tamis de soutien 40 Retirer la vis d arr t 28 et l crou de fixation 27 de la plaque sup rieure 26 Lib rer le syst me d tanch it 30 et le tube interne de l adaptateur 35 en d vissant les boulons 31 situ s sur l anneau sup rieur du syst me d tanch it 4 Retirer avec pr caution l ajusteur du joint d tanch it 23 en
61. s m thodes recommand es sont d crites en d tail aux sections 5 1 3 et 5 1 5 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 43 5 Fonctionnement 5 1 Compactage package de la colonne 5 1 1 Quantit s de support requises par centim tre de hauteur de gel Les quantit s de support requises par centim tre de hauteur de gel pour les colonnes BPG sont indiqu es ci apr s Tableau 5 1 Quantit s de support requises pour les colonnes BPG Quantit de support Quantit de support par centim tre de gel compact pack Support par litre de colonne compact e pack e BPG 100 BPG 140 BPG 200 BPG 300 BPG 450 DEAE Sepharose Fast Flow 1251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Sepharose Fast Flow 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 CM Sepharose Fast Flow 1251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 S Sepharose Fast Flow 1251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Phenyl Sepharose Fast Flow 1251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Sephadex G 25 qualit s C et M 250g 19 6 g 3829 78 59 176g 394g Sephadex G 25 SF 280g 220g 4299 88 0 g 198 g 443 g Sepharose 4 et 6 Fast Flow 1201 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 1891 Sephacryl High Resolution 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Superdex 75 et 200 qualit pr parative 1 20 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 1891 Sepharose Q et SP High Performance 1 201 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 1891 Phenyl Sepharose High Performance 1201 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 1891 44 5 1 2 Tailles de tamis recommand es Il est im
62. se des aiguilles d une montre la molette de r glage BPG 100 140 et 200 ou la poign e de r glage du joint d tanch it BPG 300 et 450 au dessus de la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 53 5 Fonctionnement 5 1 Compactage package de la colonne TAPE 8 Vanne de s curit 27 me p ba Manometre gt lt Vanne fermee Fig 5 11 M thode de compactage package de la colonne tape 8 TAPE 8 a Abaisser rapidement l adaptateur en tournant la poign e de r glage de la hauteur dans le sens des aiguilles d une montre Le tampon entre le gel s diment et l adaptateur passe entre le joint torique de l adaptateur et la paroi de la colonne Au cours de cette op ration le gel commence monter Cesser de descendre l adaptateur lorsqu il se trouve 0 5 1 cm au dessus du gel 54 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Fonctionnement 5 TAPE 9 Vanne de s curit Q mn IL P Manom tre Fig 5 12 M thode de compactage package de la colonne tape 9 TAPE 9 Fermer herm tiquement le joint torique de l adaptateur en tournant dans le sens des aiguilles d une montre la molette BPG 100 140 et 200 ou la poign e BPG 300 et 450 de r glage du joint d tanch it a b Ouvrir la vanne inf rieure c D marrer la pompe d R gler le d bit s
63. sort 9 afin de fixer les tiges de soutien 2 la bride 10 Proc der dans l ordre illustr la figure 4 1 c est dire serrer successivement les crous diam tralement oppos s AVERTISSEMENT Le tube en verre risque de casser si l on applique une force excessive lors du serrage des quatre crous sur les tiges de soutien tiges qui fixent la bride et la pi ce terminale la colonne en verre Toujours utiliser une cl dynamom trique pour le serrage de ces crous Tableau 3 1 R glages de la cl dynamom trique pour les colonnes BPG 100 140 et 200 Colonne BPG 100 140 200 Moment Nm 4 5 5 9 La colonne est pr sent pr te tre utilis e et l adaptateur peut tre ins r D montage de l adaptateur Pour le d montage de l adaptateur des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter au tableau A 1 et la figure A 1 et proc der comme suit 1 Retirer le tamis de filtration 36 en le courbant d licatement Retirer le tamis de soutien 35 Veiller ne pas rayer l adaptateur car cela pourrait provoquer des fuites 2 Retirer le butoir 25 de la plaque sup rieure 21 en d vissant les boulons 24 3 Lib rer le syst me d tanch it 27 et le tube interne de l adaptateur 30 en d vissant les boulons 26 situ s sur l anneau sup rieur du syst me d tanch it 4 Retirer pr cautionneusement la molette de r glage 17 Cela rel che la tension exerc e sur le ressort 33 s
64. stitutifs de la colonne 4 2 Mat riaux constitutifs de la colonne Les mat riaux utilis s dans la construction des colonnes BPG ont t soigneuse ment s lectionn s pour leur compatibilit avec les solvants les plus couramment utilis s au cours des tapes de purification chromatographique pour la main tenance des colonnes et lors des proc dures de nettoyage Tous les mat riaux polym res mis en oeuvre au cours du processus sont conformes aux exigences de la norme USP classe VI d crites dans le document Biological Reactivity Tests In Vivo Tests de r activit biologique in vivo Les composants des colonnes peuvent tre consid r s comme contenant des parties humides susceptibles de se trouver en contact avec les liquides utilis s et des parties s ches Tous les mat riaux de construction sont des mat riaux de qualit sup rieure qui r pondent aux exigences d un environnement de production industriel Les tableaux A 1 A 2 et A 3 de l annexe illustrent les composants des colonnes et identifient les mat riaux de fabrication des parties humides et s ches de chacun des composants 4 3 R sistance aux produits chimiques Le tableau 3 3 est destin servir de guide pour conna tre la r sistance vis vis des solvants des mat riaux utilis s dans les colonnes BPG Ces informations ont t r unies partir de documents publi s en provenance de diff rentes sources et ne proviennent pas de tests individuels effect
65. t es Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 11 1 Introduction 14 Op rateurs agr s 12 e viter les d charges d lectricit statique en reliant la colonne la terre Utiliser un c ble de mise la terre reli au r seau de terre de l usine Un kit de mise la terre est propos en option e Seuls les outils con us pour tre utilis s sous des atmosph res potentiellement explosives peuvent tre utilis s lors de l utilisation et de l entretien de la colonne e Toujours porter des v tements de protection adapt s lors de l utilisation dans des environnements potentiellement explosifs Cat gorie EX Le code de cat gorie EX figurant sur l tiquette d identification d finit le niveau de protection contre l explosion de l quipement La cat gorie EX de l quipement doit tre conforme au niveau de protection de la salle dans laquelle il est utilis Exl3G Les quipements de cette cat gorie sont con us pour pouvoir tre utilis s conform ment aux param tres de fonctionnement d finis par le fabricant et garantir un niveau de protection normal Les quipements de cette cat gorie sont destin s tre utilis s dans des endroits o des atmosph res explosives produites par des goaz des vapeurs ou des brouillards n ont que peu de chances de se former o si elles se forment n apparaissent que rarement et seulement pendant de br ves p riodes 1 4 Op rateurs agr s Une colon
66. t des fuites 3 e tamis de soutien 5 e tamis de filtration 4 e anneau de guidage en PTFE 3 e joint torique 6 7 6 7 Fig 3 2 Emplacement des composants de la pi ce terminale pour les colonnes BPG 100 140 et 200 2 Fixer la pi ce terminale 12 au support 15 l aide des boulons 13 et des rondelles 14 3 Positionner pr cautionneusement le tube en verre 1 sur le joint torique 6 7 de la pi ce terminale 12 V rifier que le tube en verre n est en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable Aligner le tube avec le tamis de filtration 4 4 Visser les tiges de soutien 2 dans la pi ce terminale 12 Positionner la bride 10 de telle sorte que les tiges de soutien 2 viennent se placer dans les trous correspondants S assurer que le joint torique 6 7 de la bride est align avec le tube en verre Le tube en verre ne peut tre en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable sans cela le tube en verre risque de casser Aligner la surface interne du tube en verre avec la surface interne de la bride Monter les rondelles ressort 9 et les crous 8 sur les tiges de soutien 2 et les serrer la main Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 21 3 Installation et test des fuites 3 1 D montage et montage 22 A 8 R gler une cl dynamom trique selon les sp cifications d finies au tableau 4 1 ci dessous et serrer les crous 8 et les rondelles res
67. ter une r hausse sur une colonne BPG 100 140 ou 200 proc der comme suit 1 Retirer l adaptateur de la colonne et placer la r hausse sur la bride sup rieure 10 de telle sorte que les tiges de la colonne s ajustent dans les trous perc s dans la bride de la r hausse voir figure 4 3 ci dessous S assurer que le joint torique est correctement positionn dans la bride Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 23 3 Installation et test des fuites 3 1 D montage et montage 24 Fig 3 3 Emplacement des composants du syst me de compactage package 2 Utiliser les rondelles et les crous calotte sph rique du couvercle adaptateur de la colonne pour fixer la r hausse la colonne La colonne ainsi allong e est pr sent pr te pour la premi re tape du compactage package pour les proc dures de compactage package en deux tapes Les boulons et les rondelles livr s avec la r hausse servent monter l adaptateur sur la r hausse Remarque Ne pas compacter packer la colonne avec des hauteurs de gel sup rieures la longueur de la colonne c est dire que l adaptateur doit se fermer herm tiquement contre la paroi de la colonne et NON contre la paroi de la r hausse Un tube d une longueur de 10 cm est n cessaire lors de l installation de l adaptateur sur le tube de la colonne si l on d monte la r hausse de compactage package 3 1 2 BPG 300 D montage de la colonne
68. teur 39 aide des vis 37 Glisser le syst me d tanch it 30 sur le tube externe de l adaptateur 36 Visser la plaque sup rieure 24 26 29 et 32 en sens inverse des aiguilles d une montre environ 5 cm vers le bas sur le tube externe de l adaptateur 36 Tourner la molette de r glage 23 dans le sens des aiguilles d une montre au dessus de l adaptateur jusqu ce que les trous du tube interne de l adaptateur 35 soient au m me niveau que les trous du tube externe de l adaptateur 36 Serrer la main les vis 31 dans la moiti sup rieure du syst me d tanch it 30 en veillant ce qu elles restent de niveau et soient correctement align es avec les trous jusqu ce que 1 2 mm du filetage des vis soit apparent Enfin serrer les vis avec une cl annulaire Placer la vis d arr t 28 et l crou de fixation 27 dans la plaque sup rieure 26 Tourner la vis d arr t jusqu ce qu elle s engage dans la rainure de tube externe de l adaptateur 36 de mani re emp cher tout d placement at ral du tube sans entraver son d placement vertical Fixer la vis d arr t 28 en place l aide de l crou de fixation 27 Monter le joint torique de l adaptateur 33 34 sur la plaque de l adaptateur 39 Humecter le tamis de filtration 41 42 avec de l thanol 20 pour liminer toutes les bulles d air pi g es dans le tamis de filtration Si le tamis de filtration est raide le chauffe
69. u s sur les composants de la colonne L op rateur doit par cons quent consid rer cette liste uniquement comme un guide indicatif du niveau de r sistance aux produits chimiques de chacun des mat riaux On notera que les effets d un produit chimique sont plus s v res des temp ratures et sous des pressions plus lev es et que les effets combin s n ont pas t pris en consid ration En g n ral l utilisation des produits chimiques suivants dans les colonnes BPG doit tre vit e e oxydants puissants par exemple peroxydes e compos s halog n s e solvants chlor s par exemple le chlorure de m thyl ne e esters par exemple ac tates e hydrocarbures aromatiques par exemple tolu ne e acides forts fortes concentrations e chloroforme e THF e tolu ne e chlorure de m thyl ne 36 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC La colonne BPG 4 Remarque viter les combinaisons de sels avec un pH inf rieur 4 Toujours laver la colonne avec au moins deux fois le volumes de la colonne d une solu tion pH neutre entre les utilisations de sels et de tampons pH bas Tableau 4 3 R sistance aux produits chimiques des mat riaux constitutifs des colonnes BPG Substance Concentration par 60 90 jours unit de volume Ac tate d thyle 100 voir remarque 4 Ac tone 10 OK Ac tonitrile 5 voir remarque 2 Ac tonitrile 50 voir remarques 3 4 Acide ac tique 1
70. ur adaptateur 8 1012 54 PP 2 42 Tamis 10 um pour adaptateur 8 1012 55 PA 2 Tamis 12 um pour adaptateur 8 1148 43 PEEK 2 Tamis 54 um pour adaptateur 8 1127 02 PP 2 43 Tuyau PVC 44 Collier 25 mm 8 1001 31 304 1 45 Support pour roulette 8 1033 33 POM 316 1 Voir tableau 3 4 du guide d entretien BPG Tube int 10 mm Comparable au 316L Tableau A 3 Composants des colonnes BPG 450 Les num ros d identi ication font r f rence la figure A 5 Pi ce Description R f rence Mat riau En contact avec les Qt n liquides utilis s livr e 1 Pi ce terminale 8 1109 67 316L 2 Tamis de soutien pour pi ce terminale 8 1104 35 PP 3 Bride 8 1109 68 PP 316 4 Joint d tanch it en U 8 1104 40 EPDM Joint d tanch it en U 8 1117 55 PFR 5 Tamis 54 um pour pi ce terminale 8 1127 05 PP Tamis 23 um pour pi ce terminale 8 1103 19 PP Tamis 10 um pour pi ce terminale 8 1103 18 PA Tamis 12 um pour pi ce terminale 8 1148 46 PEEK 6 Joint torique pour bride 446 x 6 8 1105 33 EPDM 2 Joint torique pour bride 446 x 6 8 1117 67 FEP 7 Vis Allen M8 x 50 8 1109 40 316 5 8 Tige pour BPG 450 500 8 1106 18 316 Tige pour BPG 450 750 8 1103 09 316 Tige pour BPG 450 1000 8 1103 10 316 9 Syst me d tanch it 8 1109 69 316L
71. ur le d bit de compactage package Contr ler le manom tre pour s assurer que la pression ne d passe pas la pression maximale autoris e pour le support se reporter au mode d emploi du support utilis Le gel est nouveau comprim jusqu au niveau de la marque trac e sur la colonne lors de l tape 7 e R p ter les tapes 7 et 8 jusqu ce que l adaptateur atteigne la marque trac e sur la colonne Remarque Lorsqu il ne reste plus qu un maximum de 1 cm de liquide ne pas ouvrir le joint torique de l adaptateur Au lieu de cela utiliser la poi gn e de l ajusteur de hauteur pour descendre l adaptateur sur le dernier centim tre Ne jamais descendre l adaptateur de plus de 5 mm dans le gel D brancher le tuyau au dessus de la colonne de mani re pouvoir liminer l exc s de tampon par le haut de l adap tateur Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC 55 5 Fonctionnement 5 2 Evaluation de la colonne 56 Ceci termine la proc dure de compactage package de la colonne Essuyer les ventuels r sidus de tampon ou de suspension au dessus de l adaptateur L espace entre la t te de l adaptateur et le haut de la colonne doit tre sec et propre ou tre rempli d thanol 20 pour pr venir toute croissance bact rienne Remarque Avant d utiliser la colonne toujours contr ler les performances de la colonne compact e pack e Voir les instructions relatives cette proc dure la section 5 2 ci
72. xemple plomb cadmium mercure etc doivent tre s par s et limin s de mani re appropri e e Plastiques s par s en plastiques durs durcis et souples thermoplastiques e Mat riaux compostables tous les mat riaux ou mati res pouvant tre convertis en terre dans un avenir suffisamment proche e Mat riaux devant tre stock s un petit nombre de mat riaux et mati res non recyclables doivent tre stock s les sites de stockage sont r glement s par les autorit s locales 1 6 2 Colonnes BPG Avant d liminer l quipement constituant la colonne effectuer les op rations suivantes e La colonne doit tre vid e nettoy e et st rilis e e Pour les m taux non inflammables comme l acier inoxydable contacter un ferrailleur local agr 14 Colonnes BPG Instructions d utilisations 18 1170 70 AC Introduction 1 1 7 Objectif de ce manuel Ce manuel est destin servir d introduction g n rale et de guide au fonctionnement de la colonne Plus particuli rement le manuel couvre les sujets suivants e Introduction Chapitre 1 e D ballage de la colonne Chapitre 2 e La colonne BPG Chapitre 3 e Installation et test des fuites Chapitre 4 e Fonctionnement Chapitre 5 e Abr viations Chapitre 6 Le manuel qui l accompagne Guide d entretien des colonnes BPG couvre les sujets suivants e Maintenance et entretien Chapitre 1 e D pannage Chapitre 2 e Informations de commande

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