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Colonnes BPG - GE Healthcare Life Sciences

1. Pi ce Description Mat riau En contact Qt BPG 100 BPG 140 BPG 200 n avec les liq livr e R f rence R f rence R f rence uides utilis s 1 Tube pour colonne 500 Verre borosilicat X 1 8 0251 0 8 1112 95 8 1152 01 Tube pour colonne 750 Verre borosilicat X 1 8 0251 02 8 1152 02 Tube pour colonne 950 Verre borosilicat x 1 8 0251 03 8 1112 96 18 1152 03 2 Tige pour tube 500 316 k 8 1105 80 8 1105 83 8 1105 83 Tige pour tube 750 316 1 8 1105 8 5 8 1105 84 Tige pour tube 950 316 1 8 1105 82 8 1105 85 8 1105 85 3 Anneau de guidage PTFE 1 8 0251 22 8 1112 97 8 0252 22 4 Tamis 54 um pour pi ce terminale PP X 2 8 1126 97 8 1126 99 18 1127 0 Tamis 23 um pour pi ce terminale PP x 2 8 9252 0 8 1113 00 18 9254 0 Tamis 10 um pour pi ce terminale PA X 2 8 0251 77 8 1113 02 18 0252 77 Tamis 12 um pour pi ce terminale PEEK X 2 8 1148 38 8 1148 40 8 1148 42 5 Tamis de soutien pour pi ce terminale PP X 2 8 0251 55 8 1112 98 8 0252 55 6 Joint torique pour rebord EPDM X 2 8 8494 0 8 1113 06 8 8489 0 7 Joint torique pour rebord FEP X 1 8 0019 4 8 1113 07 8 0019 5 8 Ecrou M6 316 5 9 1582 01 Ecrou M8 316 9 0763 01 9 0763 0 9 Rondelle ressort 316 4 8 8482 0 8 8482 01 8 8482 0 0 Rebord 316 8 1134 2 8 1113 21 8 1134 22 1 T ton de positionnement de la colonne PTFE 8 8 1134 2 8
2. 13 3 4 2 Courbes de pression d bit des colonnes compact es DOCR ES LR a r AA E 14 Installation et test des fuites 17 4 1 D montage et montage ie 17 4 1 1 BPG 100 140 et 200 ns 17 412 BPGS300 nan eia Marennes 23 GES BPGASO SARA RENAN DAT AT Re SA nt 28 A2 ROECOrTEMENMES Lan RAA 30 4 3 Mise la terre de la colonne s ssssssssssss1ss1ss1ss1ssttstrstrorsseserntn 31 Er TESTUES FITE S nee Annee 32 FONCHOGNASMENE Le et 33 5 1 Compactage package de la colonne s s ssssssssss1s11151115112 33 5 1 1 Quantit s de support requises par centim tre de hotiteur de d lais 34 5 1 2 Tailles de tamis recommand es 34 5 1 3 D termination du d bit optimal de compactage 1181840 1e 3 RSR A 35 5 1 4 D bits de compactage package recommand s pour les supports Amersham Biosciences s 2s 12211221 42 5 1 5 M thode de compactage package de la colonne 42 5 2 Evaluationidel i olonnes sinsinnr ts cire 47 5 2 1 Choix de l chantillon de test pour les colonnes 48 5 2 2 Calcul du param tre HET en er nr 48 5 2 3 Calcul du facteur d asym trie de pic 50 Abr viations sara end ne Rene 51 Introduction 1 Introduction 1 1 G n ralit s Les colonnes BPG sont destin es aux applications industrielles qui exigent des normes d hygi ne s v res Ces colonnes sont disponibles pour des volumes de support de s paration chromatographique allant jusqu 131 litres et permettent l utilisation de d bits
3. e Mat riaux devant tre stock s un petit nombre de mat riaux et mati res non recyclables doivent tre stock s les sites de stockage sont r glement s par les autorit s locales 1 6 2 Colonnes BPG Avant d liminer l quipement constituant la colonne effectuer les op rations suivantes e La colonne doit tre vid e nettoy e et st rilis e e Pour les m taux non inflammables comme l acier inoxydable contacter un ferrailleur local agr 1 7 Objectif de ce manuel Ce manuel est destin servir d introduction g n rale et de guide au fonctionnement de la colonne Plus particuli rement le manuel couvre les sujets suivants e Introduction Chapitre 1 e D ballage de la colonne Chapitre 2 e La colonne BPG Chapitre 3 e Installation et test des fuites Chapitre 4 e Fonctionnement Chapitre 5 e Abr viations Chapitre 6 Le manuel qui l accompagne Guide d entretien des colonnes BPG couvre les sujets suivants Maintenance et entretien Chapitre 1 D pannage Chapitre 2 Informations de commande Chapitre 3 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB 2 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB D ballage de la colonne D ballage de la colonne D baller soigneusement l quipement et contr ler les ventuels signes de dommages qui pourraient tre survenus pendant le transport Le tableau 2 1 ci dessous reprend les r f rences des tubes et sup
4. p dale Remarque Les colonnes BPG 100 sont dot es de pieds r glables Des roulettes sont disponibles en option Les colonnes BPG ne peuvent pas tre utilis es dans d autres buts par exemple e cuve de stockage pour des produits chimiques etc e r cipient sous pression en g n ral e cuve pour fermentation e stockage de gaz 2 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Introduction 12 Etiquetage de la colonne Le label CE sur l tiquette d identification indique que la colonne r pond aux exigences de la directive europ enne relative aux quipements sous pression PED 97 23 CE et ou celles ode la directive concernant les quipements utilis s sous des atmosph res potentiellement explosives ATEX100 94 9 CE Les colonnes pour lesquelles le rapport du volume et de la pression autoris e est trop faible ne peuvent pas porter le label CE selon la directive PED Les quipements livr s en dehors de la communaut europ enne ne portent pas n cessairement le label CE a y AN Tm W BPG 100 500 Max column volume V 4 Code no 18 1103 01 Design pressure PS be g Year of manufacturing f 200 Test pressure PT 11 5 bar g date Tare mass 15 kg Maximum filing mass 6 ko Operating temp TS 44 c PED fluid group cat 1 NA r N Amorina Banon AR A c As k de y Bj rkgatan Ap Amersham C x II 3G 8 751 84 Uppsala TZ Biosciences LA Fig 1 1 Plaque signal tique de la col
5. tanch it de l adaptateur est sec il risque d tre endommag par le mouvement forc de l adaptateur Mouiller le joint torique avec de l eau ou une solution 20 d thanol Ne PAS graisser le joint torique 2 D visser la molette de r glage 17 de quelques tours afin de lib rer le joint torique d tanch it de l adaptateur 28 29 et retirer l adaptateur 3 Au moyen d une cl douille et dans l ordre illustr la figure 4 1 retirer les crous 8 et les rondelles ressort 9 qui fixent les tiges de soutien 2 au rebord 10 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 17 Installation et test des fuites DR AVERTISSEMENT Ne pas d visser compl tement chaque crou en une seule fois Desserrer les crous petite petit dans l ordre illustr la figure 4 1 Trois quatre tours par crou suffisent d visser et retirer correctement les crous Il est n cessaire de placer une cl molette sur les parties aplaties des A tiges pour viter que celles ci ne se d vissent 18 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites Fig 4 1 Ordre de d montage et de serrage des crous AVERTISSEMENT Lorsque l on retire le rebord le tube de la colonne n est plus soutenue par rien Veiller viter que le tube de la colonne ne bascule 4 Retirer pr cautionneusement le rebord 10 Avec une cl molette
6. 2 D visser de quelques tours l ajusteur du joint d tanch it 23 juste assez pour lib rer le joint torique d tanch it de l adaptateur 33 34 Retirer l adaptateur en veillant ce que l acier inoxydable ne vienne pas en contact avec le verre 3 Au moyen d une cl et dans l ordre illustr la figure 4 4 retirer les crous 2 et les rondelles ressort 3 qui fixent les tiges de soutien 8 au rebord 5 Attention Ne pas d visser compl tement chaque crou en une seule fois Desserrer les crous petite petit dans l ordre illustr la figure 4 4 Trois quatre tours par crou suffisent d visser et retirer correctement les crous Il est n cessaire de placer une cl molette sur les parties aplaties des tiges pour viter que celles ci ne se d vissent Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 23 Installation et test des fuites 24 Fig 4 4 Ordre de d montage et de serrage des crous Attention Lorsque l on retire le rebord le tube de la colonne n est plus soutenue par rien Veiller viter que le tube de la colonne ne bascule 4 Retirer pr cautionneusement le rebord 5 Avec une cl molette d visser les tiges de soutien 8 de la pi ce terminale 14 Soulever le tube en verre 9 D poser pr cautionneusement le tube en verre un endroit s r Si le joint torique adh re au tube en verre ou la pi ce terminale mouiller le joint tori
7. Toutes les colonnes BPG utilisent comme connecteurs des raccords sanitaires collier Attention Utiliser exclusivement des tuyaux et colliers homologu s pour la pression maximale de la colonne et r sistant aux produits chimiques qui seront utilis s Attention Placer la colonne en dehors d une zone de passage afin de la prot ger contre tout d placement ou collision accidentels Veiller ne pas marcher ou tr bucher sur les tuyaux qui se trouvent sur le sol 4 1 D montage et montage D monter et monter les colonnes et adaptateurs conform ment aux instructions des sections ci apr s Se reporter aux tableaux A 1 A 3 et aux figures A 1 A 5 pour l identification des l ments ces tableaux et figures se trouvent la fin du pr sent manuel Les num ros entre parenth ses dans les sections ci apr s font r f rence aux num ros identifiant les l ments dans les figures et tableaux correspondants la fin du pr sent manuel AVERTISSEMENT Apr s r assemblage contr ler l tanch it de la colonne et l absence de fuites 4 1 1 BPG 100 140 et 200 D montage de la colonne Pour le d montage des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter au tableau A 1 et aux figures A 1 et A 2 la fin du pr sent manuel et proc der comme suit 1 Retirer les crous calotte sph rique 18 et les rondelles 14 qui fixent l adaptateur au rebord 10 AVERTISSEMENT Si le joint torique d
8. en veillant ce qu elles restent de niveau et soient correctement align es avec les trous jusqu ce que 1 2 mm du filetage des vis soit apparent Enfin serrer les vis avec une cl annulaire 9 Monter le butoir 25 sur la plaque 21 l aide des vis 24 10 Monter le joint torique de l adaptateur 28 29 sur la plaque de l adaptateur 34 11 Mouiller le tamis de filtration 36 avec de l thanol 20 Monter le tamis de soutien 35 et le tamis de filtration 36 sur la plaque de l adaptateur 34 Il peut tre utile de chauffer le tamis de filtration dans l eau pour en faciliter le montage sur l adaptateur Ceci termine la proc dure de montage de l adaptateur Montage d une r hausse syst me de compactage packagel La r hausse est livr e mont e Le d montage ou le montage de la r hausse se font de la m me mani re que pour la colonne l exception des directives concernant le support Pour monter une r hausse sur une colonne BPG 100 140 ou 200 proc der comme suit 1 Retirer l adaptateur de la colonne et placer la r hausse sur le rebord sup rieur 10 de telle sorte que les tiges de la colonne s ajustent dans les trous perc s dans le rebord de la r hausse voir figure 4 3 ci dessous S assurer que le joint torique est correctement positionn dans le rebord Ps CD Fig 4 3 Emplacement des composants du syst me de compactage package PE 22 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170
9. it 30 en veillant ce qu elles restent de niveau et soient correctement align es avec les trous jusqu ce que 1 2 mm du filetage des vis soit apparent Enfin serrer les vis avec une cl annulaire 9 Placer la vis d arr t 28 et l crou de fixation 27 dans la plaque sup rieure 26 Tourner la vis d arr t jusqu ce qu elle s engage dans la rainure de tube externe de l adaptateur 36 de mani re emp cher tout d placement lat ral du tube sans entraver son d placement vertical Fixer la vis d arr t 28 en place l aide de l crou de fixation 27 10 Monter le joint torique de l adaptateur 33 34 sur la plaque de l adaptateur 39 11 Mouiller le tamis de filtration 41 42 avec de l thanol 20 pour liminer toutes les bulles d air emprisonn es dans le tamis de filtration Si le tamis de filtration est raide le chauffer dans de l eau 40 C 12 Monter la plaque de distribution 13 le tamis de soutien 40 et le tamis de filtration 41 42 sur la plaque de l adaptateur 39 Ceci termine la proc dure de montage de l adaptateur du BPG 300 Montage d une r hausse syst me de compactage packagel La r hausse est livr e mont e Le d montage ou le montage de la r hausse se font de la m me mani re que pour la colonne l exception des directives concernant le support Pour le montage d une r hausse sur la colonne BPG 300 se reporter la figure A 4 et proc der comme suit 1 Retir
10. plaque sup rieure BPG 300 et 450 pour fixer en place l adaptateur de la colonne c Utiliser la poign e de l ajusteur de hauteur pour positionner l adaptateur 1 5 mm sous la surface sup rieure du liquide Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 39 Fonctionnement TAPE 6 fermee Fig 5 6 D termination du d bit optimal tape 6 a Fermer herm tiquement le joint torique de l adaptateur en tournant dans le sens des aiguilles d une montre la molette BPG 100 140 et 200 ou la poign e BPG 300 et 450 de r glage du joint d tanch it au dessus de l adaptateur b Une fois que le joint torique assure une fermeture herm tique descendre l adaptateur en le remplissant de tampon pour expulser l air pr sent dans le tube de l adaptateur Le tube de l adaptateur est plein lorsque le tampon forme un m nisque et qu il n appara t plus de bulles d air 40 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement TAPE 7 Vanne de s curit ST y Manometre Dz N Fig 5 7 D termination du d bit optimal tape TAPE 7 AVERTISSEMENT Toujours utiliser une vanne de s curit raccord e imm diatement apr s la pompe a D marrer la pompe et liminer l air qui se trouve dans le tuyau en provenance de la pompe en pompant faible d bit b Tout en pompant faible d bit raccorder un manom tre entre la
11. rience qu une colonne compact e pack e avec du gel Sephadex G 25 fournissant des valeurs du param tre HEPT sup rieures 0 05 cm n assure pas la s paration voulue Par cons quent l op rateur de la colonne d finira cette valeur comme tant la valeur maximale admissible c est dire la qualit minimale acceptable 5 2 3 Calcul du facteur d asym trie de pic La forme du pic doit tre la plus sym trique possible C est g n ralement le cas pour les supports de filtration sur gel mais pour certains supports pour chromatographie d change d ions et d affinit il peut tre asym trique en raison d interactions avec le support Une modification de la forme du pic est habituellement la premi re indication d une d t rioration du gel chromatographique Le facteur d asym trie du pic As doit tre le plus proche possible de 1 Le facteur d asym trie du pic As est calcul partir du diagramme de la figure 5 13 selon la formule suivante A b a o a distance entre le sommet du pic et 10 de la hauteur du pic du c t ascendant du pic b distance entre le sommet du pic et 10 de la hauteur du pic du c t descendant du pic Remarque La mesure des valeurs de HEPT et de A est le meilleur moyen de juger de la qualit de la colonne compact e pack e Une colonne compact e pack e peut para tre parfaite mais n cessiter malgr tout un compactage repackage pour des performances optimales Toujours
12. tester la colonne apr s compactage package et r guli rement entre les s parations pour garantir des performances optimales de la colonne Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB 6 Abr viations Abr viations 6 Les abr viations utilis es dans ce manuel sont d finies comme suit As DI EPDM FEP FF FPM HEPT HR IEX Ih NEP PA PEEK PFR POM PP PTFE PVC THE uv Facteur d asym trie de pic Diam tre int rieur Terpolym re thul ne propul ne di ne Ethyl ne propyl ne perfluor D bit rapide Fast Flow Copolym re d hexafluoropropul ne et de fluorure de vinulid ne Hauteur quivalent un plateau th orique Haute r solution Chromatographie d change d ions Hauteur de gel Largeur du pic mi pic hauteur Nombre de plateaux th oriques Nettoyage en place Polyamide Poly ther therc tone Elastom re base d hydrocarbures perfluor s Polyoxym thyl ne ou polyac tal 3 Polypropul ne Polyt trafluor thul ne Chlorure de polyvinyle T trahydrofuranne Ultraviolet Volume d lution Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 51 6 Abr viations 52 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Table A 1 Composants des colonnes BPG 100 140 et 200 Les num ros d identification font r f rence aux figures A 1 et A 2
13. viennent se placer dans les trous correspondants S assurer que le joint torique 6 7 du rebord est align avec le tube en verre Le tube en verre ne peut tre en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable sans cela le tube en verre risque de casser 6 Aligner la surface interne du tube en verre avec la surface interne du rebord AVERTISSEMENT Le tube en verre risque de casser si l on applique une pression excessive lors du serrage des quatre crous sur les tiges de soutien les tiges qui fixent le rebord et la pi ce terminale la colonne en verre Toujours utiliser une cl dynamom trique pour le serrage de ces crous Se reporter au tableau 4 2 pour les r glages de la cl dynamom trique 7 Placer les rondelles ressort 3 et les crous 2 sur les tiges de soutien 8 et les serrer la main 8 R gler la cl dynamom trique comme indiqu au tableau 4 2 ci dessous et serrer les crous 2 dans l ordre indiqu la figure 4 4 Serrer les crous petit petit pour viter toute pression m canique in gale sur le tube en verre Trois quatre tours par crou sont l amplitude recommand e Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 25 Installation et test des fuites 26 Table 4 2 R glages de la cl dynamom trique pour les colonnes BPG 300 El ment se reporter la figure A 4 R glage de la cl pour l emplacement dynamom trique Ecrous de la tige 2 6 Nm E
14. 00 Tamis 23 um pour adaptateur PP X 2 8 1103 08 8 1113 01 8 9253 01 Tamis 10 um pour adaptateur PA X 2 8 1103 05 8 1113 03 8 0252 76 Tamis 12 um pour adaptateur PEEK X 2 8 1148 37 8 1148 39 8 1148 41 37 Joint d tanch it 25 mm EPDM X 2 8 0019 27 8 0019 27 8 0019 27 38 Pieds pour support 316 1 8 1126 93 8 1126 93 8 1126 93 39 Roulette 3 8 1001 09 8 1001 09 8 1001 09 40 Vanne 4 ports 2 voies 316L PTFE 1 8 5757 01 8 5757 01 8 5757 01 41 Tuyau X ik 42 Rondelle PP 1 8 1142 79 NA NA 43 Rondelle PP d 8 1142 80 8 1142 80 8 1142 80 Voir tableau 3 3 du guide d entretien BPG Tube int 4 mm BPG 100 6 mm BPG 140 et 200 Comparable au 316L Table A 2 Composants des colonnes BPG 300 Les num ros d identification font r f rence aux figures A 3 et A 4 Pi ce Description R f rence Mat riau En contact avec les Qt n liquides utilis s livr e 1 Plaque sup rieure pour adaptateur 8 1012 48 316 1 2 Ecrou M12 8 1012 24 316 6 3 Rondelle ressort 8 1012 25 316 6 4 Ecrou M10 8 1012 44 316 5 5 Rebord 316 6 Joint torique 301 x 6 mm 8 1012 26 EPDM X 2 7 Joint torique 301 x 6 mm 8 1012 27 FEP X 1 8 Tige pour T300 500 8 1012 31 316 1 Tige pour T300 750 8 1012 32 316 1 Tige pour T300 950 8 1012 33 316 1 9 Tube p
15. 1 En se reportant la figure 4 6 ci apr s contr ler que les l ments suivants sont correctement positionn s dans la pi ce terminale e plaque de distribution 41 e bouchon encliquer 36 e tamis de soutien 2 e tamis de filtration 5 e joint d tanch it en U 4 mont sur le tamis de filtration Remarque Mouiller le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air emprisonn Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites Fig 4 6 Emplacement des composants de la pi ce terminale des colonnes BPG 450 2 Placer pr cautionneusement le tube de la colonne 12 sur le joint d tanch it en U 4 Contr ler que le rebord 3 est centr par rapport au joint d tanch it en U 3 Fixer le tube la pi ce terminale avec les boulons 44 Serrer les boulons en diagonale l aide de la cl dynamom trique r gl e sur 8 Nm Chaque boulon doit tre serr en trois fois AVERTISSEMENT Le tube de la colonne risque de casser si l on exerce une pression excessive lors du serrage des boulons qui fixent le rebord 3 et les tiges 8 au tube de la colonne Toujours utiliser une cl dynamom trique pour le serrage de ces boulons Voir le tableau 4 3 ci dessous pour les r glages de la cl A dynamom trique pour la colonne BPG 450 Table 4 3 R glages de la cl dynamom trique pour les colonnes BPG 450 El ment se reporter la figu
16. 1017 47 EPDM X Joint torique 419 x 10 8 1117 66 FEP X 41 Plaque de distribution 8 1106 04 PP xX Comparable au 316L suite la page suivante Suite des notes la page suivante Table A 3 Composants des co onnes BPG 450 Les num ros d identification font r f rence la figure A 5 Pi ce Description R f rence Mat riau En contact avecles Qt n liquides utilis s livr e 42 Tamis de soutien pour adaptateur 8 1104 34 PP X 43 Tamis 54 um pour adaptateur 8 1127 04 PP X Tamis 23 um pour adaptateur 8 1001 62 PP Xx Tamis 10 um pour adaptateur 8 1017 46 PA X Tamis 12 um pour adaptateur 8 1148 45 PEEK X 44 Vis M10 x 80 8 1109 59 316 2 45 Vis M10 x 16 8 1109 60 316 2 46 Equerre 8 1109 61 316 47 Vis M5 x 16 8 1109 62 316 2 48 Tube d entr e inf rieur 8 1109 63 316L X 50 Vis Allen M10 x 40 8 1109 65 316 2 51 Jambe 8 1109 66 316 52 Support pour roulette 8 1107 46 POM 316 53 Roulette 8 1177 75 Boulon il 8 1109 64 54 Butoir pour adaptateur 8 1115 18 316 Index c calcul de l asyum trie du pic calcul du param tre HEPT choix de l chantillon de test pour les colonnes u ssssssssssssss15111111111s1is1ss1trtr trst tsento nanasan nr nrst rnern 48 colonne choix de l chantillon de test compactage package composants de base d ballage limination valuation fuites installation mat
17. 1134 22 2 Pi ce terminale 316L Xx 8 1144 18 8 1113 20 8 1112 62 3 Boulon M8 x 12 316 4 s 8 1113 28 8 1113 28 4 Rondelle 316 4 8 1143 26 8 1113 29 8 1113 29 5 Support complet 316L 8 1031 10 8 1031 20 8 1031 20 6 Collier 25 mm 304 8 1001 3 8 1001 31 8 1001 31 7 Molette de r glage PEEK 8 1109 27 8 1109 27 8 1109 27 8 Ecrou calotte sph rique 316 4 8 1143 25 8 1113 27 8 1113 27 9 Ecrou de r glage corps 316 1 0003 0 8 1113 26 8 1113 26 20 Bague annulaire POM 2 8 0264 0 8 0267 0 8 0267 0 21 Plaque sup rieure 316 8 1143 24 8 1113 24 22 Ecrou de r glage douille PEEK 8 0251 20 8 0252 20 8 0252 20 23 Vis Allen M8 x 45 316 5 9 6375 0 9 6375 0 9 6375 0 24 Vis Allen M4 x 14 316 5 9 6356 0 9 6356 0 9 6356 0 25 Butoir 316 8 1113 25 8 1113 25 26 Vis pour t te de l adaptateur 316 3 8 8457 0 8 8457 0 8 8457 0 27 Syst me d tanch it 316L 8 1147 47 8 1113 3 8 1147 48 28 Joint torique pour adaptateur EPDM X 2 8 8475 0 8 1113 10 8 0275 0 29 Joint torique pour adaptateur FEP X 8 0019 40 8 1113 1 8 0019 50 30 Tube interne pour adaptateur 316 8 1113 23 8 1113 23 8 1113 23 31 Tube externe pour adaptateur 316 8 1134 83 8 1134 83 8 1134 83 32 Vis M6 x 12 316L PTFE 3 8 1145 08 8 1145 08 8 1145 08 33 Ressort 316 L PTFE 8 8491 01 8 8491 01 8 8491 01 34 Plaque pour adaptateur S31803 X 8 1112 80 8 1113 30 8 1112 81 35 Tamis de soutien pour adaptateur PP x 2 8 1103 04 8 1112 99 8 0252 56 36 Tamis 54 um pour adaptateur PP X 2 8 1126 96 8 1126 98 8 1127
18. 83 316 36 Tube externe pour adaptateur 8 1142 93 316L J 37 Vis M8 x 16 8 1145 10 316L PTFE 5 38 Ressort 8 1012 50 316 L PTFE 1 39 Plaque pour adaptateur 8 1112 82 531803 X 1 40 Tamis de soutien pour adaptateur 8 1012 53 PP x 2 41 Tamis 23 um pour adaptateur 8 1012 54 PP X 2 42 Tamis 10 um pour adaptateur 8 1012 55 PA X 2 Tamis 12 um pour adaptateur 8 1148 43 PEEK X 2 Tamis 54 um pour adaptateur 8 1127 02 PP Xx 2 43 Tuyau PVC X 44 Collier 25 mm 8 1001 31 304 1 45 Support pour roulette 8 1033 33 POM 316 1 Voir tableau 3 4 du guide d entretien BPG Tube int 10 mm Comparable au 316L Table A 3 Composants des colonnes BPG 450 Les num ros d identification font r f rence la figure A 5 Pi ce Description R f rence Mat riau En contact avecles Qt n liquides utilis s livr e 1 Pi ce terminale 8 1109 67 316L X 2 Tamis de soutien pour pi ce terminale 8 1104 35 PP xX 3 Rebord 8 1109 68 PP 316 X 4 Joint d tanch it en U 8 1104 40 EPDM X Joint d tanch it en U 8 1117 55 PFR X 5 Tamis 54 um pour pi ce terminale 8 1127 05 PP X Tamis 23 um pour pi ce terminale 8 1103 19 PP x Tamis 10 um pour pi ce terminale 8 1103 18 PA x Tamis 12 um pour pi ce terminale 8 1148 46 PEEK x 6 Joint torique pour rebord 446 x 6 8 1105 33 EPDM X 2 Joint torique
19. Ceci termine la proc dure de d montage de l adaptateur Montage de l adaptateur Pour le montage de l adaptateur des colonnes BPG 300 se reporter la figure A 3 et proc der comme suit 1 2 Positionner la bague annulaire 25 dans l encoche de la plaque sup rieure 26 A l aide des vis 32 fixer la douille de l crou de r glage 29 au corps de l ajusteur de la hauteur de l adaptateur 24 au travers de la plaque sup rieure 21 de telle mani re que l ajusteur de la hauteur de l adaptateur tourne sur les bagues annulaires 25 Glisser le ressort 38 le tube interne de l adaptateur 35 et le tube externe de l adaptateur 36 sur la plaque de l adaptateur 39 Fixer le tube externe de l adaptateur 36 la plaque de l adaptateur 39 l aide des vis 37 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites MMi 5 Glisser le syst me d tanch it 30 sur le tube externe de l adaptateur 36 6 Visser la plaque sup rieure 24 26 29 et 32 en sens inverse des aiguilles d une montre environ 5 cm vers le bas sur le tube externe de l adaptateur 36 7 Tourner la molette de r glage 23 dans le sens des aiguilles d une montre au dessus de l adaptateur jusqu ce que les trous du tube interne de l adaptateur 35 soient au m me niveau que les trous du tube externe de l adaptateur 36 8 Serrer la main les vis 31 dans la moiti sup rieure du syst me d tanch
20. XXIII Les mat riaux ont t test s in vitro l aide du test d lution etin vivo l aide du test d injection syst mique et du test intracutan Des extraits de NaCl 0 9 et d huile de s same ont t utilis s comme chantillons pour les tests in vivo Tous les mat riaux sont conformes aux exigences de la norme USP XXIII classe VI Les composants des colonnes peuvent tre consid r s comme contenant des parties humides susceptibles de se trouver en contact avec les liquides utilis s et des parties s ches Tous les mat riaux de construction sont des mat riaux de qualit sup rieure qui r pondent aux exigences d un environnement de production industriel Les tableaux A 1 A 2 et A 3 de l annexe illustrent les composants des colonnes et identifient les mat riaux de fabrication des parties humides et s ches de chacun des composants 3 3 R sistance aux produits chimiques Le tableau 3 3 est destin servir de guide pour conna tre la r sistance vis vis des solvants des mat riaux utilis s dans les colonnes BPG Ces informations ont t r unies partir de documents publi s en provenance de diff rentes sources et ne proviennent pas de tests individuels effectu s sur les composants de la colonne L op rateur doit par cons quent consid rer cette liste uniquement comme un guide indicatif du niveau de r sistance aux produits chimiques de chacun des mat riaux On notera que les effets d un produit ch
21. cl dynamom trique pour les colonnes BPG 100 140 et 200 Colonne BPG 100 140 200 Moment Nm 4 5 5 9 La colonne est pr sent pr te tre utilis e et l adaptateur peut tre ins r D montage de l adaptateur Pour le d montage de l adaptateur des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter au tableau A 1 et la figure A 1 et proc der comme suit 1 Retirer le tamis de filtration 36 en le courbant d licatement Retirer le tamis de soutien 35 Veiller ne pas rayer l adaptateur car cela pourrait provoquer des fuites 2 Retirer le butoir 25 de la plaque sup rieure 21 en d vissant les boulons 24 3 Lib rer le syst me d tanch it 27 et le tube interne de l adaptateur 30 en d vissant les boulons 26 situ s sur l anneau sup rieur du syst me d tanch it 4 Retirer pr cautionneusement la molette de r glage 17 Ceci rel che la tension exerc e sur le ressort 33 situ sous le tube interne de l adaptateur 30 5 Retirer la plaque sup rieure 19 23 et la s parer de l adaptateur externe 31 en la tournant dans le sens des aiguilles d une montre Retirer le syst me d tanch it 27 et le joint torique de l adaptateur 28 29 D monter le tube externe de l adaptateur 31 le tube interne de l adaptateur 30 et le ressort 33 en retirant les vis 32 8 La plaque sup rieure 19 23 peut tre d mont e en retirant les vis 23 Ceci termine la proc dure de d montage de l adaptateur
22. de gel 57 5 cm 3 Volume de gel 40 6 litres S Eluant Eau distill e f Echantillon 1 05 litres S lac tone 1 NaCl 1 2 D bit 19 cm h Vh Ve 18 8 ln 0 9 HEPT 0 024 cm 50 a 0 90 b 0 85 b a 0 85 0 90 4 10 A 0 94 Volume Fig 5 13 Chromatogramme de test illustrant le calcul des param tres HEPT et A 5 2 2 Calcul du param tre HEPT Le volume d chantillon doit tre gal environ 1 du volume total de gel et la concentration sera de 1 0 v v de NaCl ou l quivalent lors de l utilisation d un tampon plus concentr On peut galement utiliser de l ac tone 1 0 v v Le d bit lin aire doit tre de 30 cm h pour des supports de 34 um et de 50 um et de 20 cm h pour des supports de 90 um Pour viter toute dilution de l chantillon appliquer celui ci le plus pr s possible de l entr e de la colonne Si le syst me comprend un pi ge air celui ci doit tre court circuit pendant l application de l chantillon afin d viter un r trom lange Calculer la valeur du param tre HEPT partir de la courbe de conductivit ou d absorption UV de la mani re suivante 48 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement LE Le param tre HEPT sous sa forme la plus simple est exprim comme HEPT L N o L hauteur de gel cm N nombre de plateaux th oriques N est d fini par l quation N 5 54 Ve Ih o Ve volume d lution ml l largeur d
23. gorie EX de l quipement doit tre conforme au niveau de protection de la salle dans laquelle il est utilis Ex 113G Les quipements de cette cat gorie sont con us pour pouvoir tre utilis s conform ment aux param tres de fonctionnement d finis par le fabricant et garantir un niveau de protection normal Les quipements de cette cat gorie sont Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Introduction destin s tre utilis s dans des endroits o des atmosph res explosives produites par des gaz des vapeurs ou des brouillards n ont que peu de chances de se former ou si elles se forment n apparaissent que rarement et seulement pendant de br ves p riodes 1 4 Op rateurs agr s Une colonne BPG est une pi ce d quipement comparable un r cipient sous pression volume variable L op rateur doit avoir une exp rience suffisante de l utilisation de r cipients sous pression ainsi que des quipements d livrant un gel sous pression pour le contr le du compactage package par compression axiale Pour utiliser la colonne en toute s curit et correctement l op rateur doit avoir lu compris et m moris les instructions d utilisation en g n ral etles instructions de s curit en particulier Une utilisation incorrecte de la colonne risque d entra ner des dommages aux biens et des blessures aux personnes 15 Stockage La colonne doit tre stock e la temp rature sp cifi e et ne peut pas
24. lev s Lorsque les colonnes BPG sont utilis es en association avec des supports BioProcess par exemple le Sepharose Fast Flow et le Sephacryl High Resolution elles permettent de satisfaire aux exigences les plus s v res en mati re de r glementation Les mat riaux qui entrent dans la fabrication des colonnes BPG ont t soigneusement s lectionn s pour r sister aux produits de d conta mination et de nettoyage par exemple l hydroxyde de sodium et l thanol Leurs sp cifications de pression et de faible r sistance l coulement font que ces colonnes conviennent pour tre utilis es avec les supports BioProcess pour la chromatographie d change d ions d interaction hydrophobe d affinit et de filtration sur gel Le dessalage au Sephadex G 25 de calibres grossier Coarse moyen Medium fin Fine et superfin SuperFine peut galement tre utilis efficacement Le syst me de distribution de l coulement a t d velopp pour r pondre aux performances lev es des supports Amersham Biosciences Toutes les colonnes BPG sont livr es compl tes avec un adaptateur Des syst mes de compactage package sont disponibles pour les applications qui n cessitent des hauteurs de gel importantes Le montage de la colonne et des protocoles de compactage package de la colonne pour les supports BioProcess sont galement d crits dans ce manuel Un chapitre sp cial du guide d entretien des colonnes BPG chapitre 1 est consac
25. lorsqu il se trouve 0 5 1 cm au dessus du gel Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 45 Fonctionnement 46 TAPE 9 N Vanne de s curit 27 EN OG aa Y Manom tre Fig 5 12 M thode de compactage package de la colonne tape 9 TAPE 9 Fermer herm tiquement le joint torique de l adaptateur en tournant dans le sens des aiguilles d une montre la molette BPG 100 140 et 200 ou la poign e BPG 300 et 450 de r glage du joint d tanch it Ouvrir la vanne inf rieure D marrer la pompe R gler le d bit sur le d bit de compactage package Contr ler le manom tre pour s assurer que la pression ne d passe pas la pression maximale autoris e pour le support se reporter au mode d emploi du support utilis Le gel est nouveau comprim jusqu au niveau de la marque trac e sur la colonne lors de l tape 7 R p ter les tapes 7 et 8 jusqu ce que l adaptateur atteigne la marque trac e sur la colonne Remarque Lorsqu il ne reste plus qu un maximum de 1 cm de liquide ne pas ouvrir le joint torique de l adaptateur Au lieu de cela utiliser la poign e de l ajusteur de hauteur pour descendre l adaptateur sur le dernier centim tre Ne jamais descendre l adaptateur de plus de 5 mm dans le gel D brancher le tuyau au dessus de la colonne de mani re pouvoir liminer l exc s de tampon par le haut de l adaptateur Colon
26. pas tre utilis es avec les supports pour chromatographie d change d ions et d affinit L exp rience a d montr que la meilleure m thode pour exprimer l efficacit d une colonne consiste utiliser la hauteur quivalent un plateau th orique ou HEPT et le facteur d asym trie de pic ou A Ces valeurs peuvent tre ais ment d termin es en appliquant sur la colonne un chantillon constitu par exemple d une solution de NaCl ou d ac tone Il est important que la colonne soit correctement quilibr e avant de proc der l valuation du compactage package 2 fois le volume de la colonne Il est pr f rable d effectuer trois s parations de test afin de v rifier si les valeurs du test sont stables Si un mauvais r sultat s am liore au cours du test cela peut tre d un quilibrage incorrect de la colonne Pour contr ler que le gel est stable faire fonctionner la colonne sous 70 de sa pression de compactage package pendant 20 heures et la retester de pr f rence avec trois s parations de test On notera que des pics de pression risquent d engendrer un compactage package de mauvaise qualit craquelures Si cela se produit il convient d installer un pi ge air et une vanne de d compression entre la pompe et la colonne La vanne de d compression doit tre plac e entre le pi ge air et la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 47 Fonctionnement 5 2 1 Choix de l
27. pompe et la colonne puis raccorder le tuyau au dessus de la colonne c Ouvrir la vanne inf rieure D finir une courbe de pression d bit en commen ant faible d bit Le support commence s dimenter laissant une zone claire entre le gel et l adaptateur Ne PAS ajuster l adaptateur e Augmenter lentement la pression par incr ments et prendre note du d bit lorsque la pression s est stabilis e Le temps n cessaire pour que la pression se stabilise d pend du type de support et peut varier de quelques minutes plusieurs heures f Continuer augmenter la pression jusqu ce que le d bit ait atteint un plateau Une augmentation de pression n accro t plus le d bit Pour certains supports sous forme de gels rigides il n y a pas de plateau En pareil cas utiliser le d bit correspondant la pression maximale autoris e pour la colonne g Lorsque la pression maximale est atteinte mettre fin la d termination Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 41 Fonctionnement TAPE 8 Courbe de pression d bit D bit de compactage package 5 O a v D S 5 2 D 5 d en 59 S 70 100 D Pression Fig 5 8 D termination du d bit optimal tape 8 TAPE 8 a Tracer un diagramme de la relation pression d bit comme illustr dans l exemple ci dessus Le d bit de compactage package optimal est de 70 100 du d bit maximal Pour certains s
28. pour rebord 446 x 6 8 1117 67 FEP x 7 Vis Allen M8 x 50 8 1109 40 316 5 8 Tige pour BPG 450 500 8 1106 18 316 Tige pour BPG 450 750 8 1103 09 316 Tige pour BPG 450 1000 8 1103 10 316 9 Syst me d tanch it 8 1109 69 316L 0 Boulon ergot 8 3001 07 316 3 1 Vis d arr t 9 4363 01 316 2 2 Tube en verre pour BPG 450 500 8 1103 14 Verre borosilicat X Tube en verre 450 750 8 1103 15 Verre borosilicat X Tube en verre 450 1000 8 1103 16 Verre borosilicat X 3 Bouchon pour arr t pivotant 8 1107 43 POM 4 Arr t pivotant 8 1109 41 316L 5 Vis M8 x 50 8 1109 40 316 5 6 Entretoise 8 1109 42 316L 7 Couvercle 8 1109 70 316 8 Bague annulaire 8 1109 43 PP 2 9 Ajusteur de hauteur de l adaptateur 8 1109 44 POM 20 Poign e 8 1109 45 316 21 Ecrou pour rebord 8 1109 46 PEEK 23 Ajusteur de joint d tanch it 8 1109 47 PEEK 24 Poign e 8 1109 48 316 25 Molette 8 1109 49 PP 26 Vis M10 x 65 8 1109 50 316 2 27 Rondelle 10 5 x 20 8 1109 51 316 0 28 Ecrou calotte sph rique M10 avec rondelle 8 1103 20 316 29 Vis pour adaptateur 8 1109 54 316L 30 Tube de r glage 8 1109 55 316 31 Tube d entr e int 12 mm 8 1109 53 316L X 32 Joint torique 12 3 x 2 4 8 1103 70 EPDM X 2 Joint torique 12 3 x 2 4 8 1117 65 FEP X 33 Vis M4 x 16 8 1109 56 316 2 34 Ressort 8 1107 44 316 L PTFE 35 Vis M5 x 10 81109 57 316 2 36 Bouchon encliquer 8 1107 45 PP X 2 38 Plaque pour adaptateur 8 1109 71 S31803 X 39 Vis M8 x 25 8 1145 12 316L PTFE 3 40 Joint torique 419 x 10 8
29. riaux m thode de compactage package conseill e mise la terre ss montage et d montage nombre de composants livr s principes de fonctionnement r f rences des tubes et supports test pour l absence de fuites connecteurs courbes de d bit D d ballage de la colanne semaine a nement 7 d montage de l adaptateur colonnes 100 140 et 200 colonnes 300 colonnes 450 d montage de la colonne colonnes 100 140200 nn nur ann ne tb nn ia At ee rates 17 colonnes 300 colonnes 450 d termination du d bit optimal de compactage package s s ssssissisisistisisissisrssrisrssssisesssseseserees 35 E limination de la colonne pyri aa a a A e aa LE i A A AEA a AE 5 l installation d lg colonn inorri a a Re ne en a Jey L olor EE ER EEEE RE AAN A TAAR ERA OEE AEEA 3 M mise la terre de la colonne n sssssissssssssissssssiissississississssnsissssstistasnnasttanasstatanntsatnattannantnnanaartarnaaaatat nannat aeann 37 montage d une r hausse colonnes 100 140 et 200 eue 22 colonnes 300 colonnes 450 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 1 Index montage de l adaptateur colonnes 100 140 86200 tint n enr pe benne Med sun ut 21 colonnes 300 colonnes 450 montage de la colonne Colonnes 100 MMO et 200A Lu M en AE UN dre MERS A Aa E 19 colonnes 300 colonnes 450 N notifications d attention notifications d avertissement
30. tre expos e des fluctuations de temp rature extr mes L thanol 20 est recommand comme tampon de stockage 1 6 Elimination et recyclage Lorsque la colonne est parvenue au terme de sa dur e de vie elle doit tre limin e conform ment la l gislation et aux r glementations en vigueur sur les aspects environnementaux du recyclage et de l limination des quipements industriels Cette responsabilit incombe l utilisateur final ou son quivalent Contacter les autorit s locales pour d ventuelles questions relatives aux probl mes d environnement ou la l gislation en vigueur concernant le recyclage ou l limination des quipements industriels de ce type 1 6 1 Mat riaux et mati res Pour l limination les mat riaux utilis s sont g n ralement subdivis s selon les cat gories suivantes e inflammables e Bois e Composites par exemple mat riaux recouverts d une feuille de plastique ou de m tal e Papier e Non inflammables e M taux Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 5 Introduction Remarque Les m taux dangereux ou contenant des mati res dangereuses par exemple plomb cadmium mercure etc doivent tre s par s et limin s de mani re appropri e e Plastiques s par s en plastiques durs durcis et souples thermoplastiques e Mat riaux compostables tous les mat riaux ou mati res pouvant tre convertis en terre dans un avenir suffisamment proche
31. 0 1 M Cependant toujours v rifier les instructions accompagnant le support en ce qui concerne les tampons de compactage package TAPE 3 Mouiller les tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air emprisonn dans ceux ci TAPE 4 R gler le d bit de la pompe sur le d bit de compactage package sans raccorder la colonne la pompe Prendre note de la vitesse de la pompe afin de d buter le compactage package avec le d bit correct TAPE 5 Si le support se trouve d j dans la colonne retirer l adaptateur remuer pr cautionneusement le support et r p ter les tapes 5 et 6 de la section 5 1 3 Si le support ne se trouve pas encore dans la colonne r p ter les tapes 1 6 de la section 5 1 3 TAPE 6 Vanne de s curit mx A Manometre Fig 5 9 M thode de compactage package de la colonne tape 6 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 43 Fonctionnement 44 TAPE 6 D marrer la pompe Eliminer les bulles d air qui se trouvent dans le tuyau en provenance de la pompe en pompant faible d bit Tout en pompant faible d bit raccorder un manom tre entre la pompe et la colonne puis raccorder le tuyau au dessus de la colonne Ouvrir la vanne inf rieure R gler le d bit la valeur pr d finie Mesurer r guli rement le d bit et l ajuster si n cessaire La contre pression du gel augmente et r duit le d bit
32. 70 AB Installation et test des fuites MMi 2 Utiliser les rondelles et les crous calotte sph rique du couvercle adaptateur de la colonne pour fixer la r hausse la colonne La colonne ainsi allong e est pr sent pr te pour la premi re tape du compactage package pour les proc dures de compactage package en deux tapes Les boulons et les rondelles livr s avec la r hausse servent monter l adaptateur sur la r hausse Remarque Ne pas compacter packer la colonne avec des hauteurs de gel sup rieures la longueur de la colonne c est dire que l adaptateur doit se fermer herm tiquement contre la paroi de la colonne et NON contre la paroi de la r hausse Un tube d une longueur de 10 cm est n cessaire lors de l installation de l adaptateur sur le tube de la colonne si l on d monte la r hausse de compactage package 4 1 2 BPG 300 D montage de la colonne Pour le d montage de la colonne BPG 300 se reporter au tableau A 2 et aux figures A 3 et A 4 la fin du pr sent manuel et proc der comme suit 1 Desserrer l un des crous 4 du collier de la plaque sup rieure 1 qui fixe l adaptateur au rebord 5 et retirer le collier AVERTISSEMENT Si le joint torique d tanch it de l adaptateur est sec il risque d tre endommag par le mouvement forc de l adaptateur Mouiller le joint torique avec de l eau ou une solution 20 d thanol NE PAS graisser le A joint torique
33. Amersham Biosciences KK Sanken Bldg 3 25 1 Hyakunincho Shinjuku ku Tokyo 169 0073 Japan Asia Paci c Tel 852 2811 8693 Fax 852 2811 5251 Australasia Tel 61 2 9899 0999 Fax 61 2 9899 7511 e Austria Tel 01 57606 1619 Fax 01 57606 1627 e Belgium Tel 0800 73 888 Fax 03 272 1637 Canada Tel 800 463 5800 Fax 800 567 1008 e Central East amp South East Europe Tel 43 1 982 3826 Fax 43 1 985 8327 e Denmark Tel 45 16 2400 Fax 45 16 2424 e Finland amp Baltics Tel 358 0 9 512 39 40 Fax 358 0 9 512 39 439 e France Tel 01 69 35 67 00 Fax 01 69 41 96 77 e Germany Tel 0761 4903 490 Fax 0761 4903 405 e Italy Tel 02 27322 1 Fax 02 27302 212 e Japan Tel 81 3 5331 9336 Fax 81 3 5331 9370 Latin America Tel 55 11 3933 7300 Fax 55 11 3933 7304 Middle East amp Africa Tel 30 210 9600 687 Fax 30 210 9600 693 e Netherlands Tel 0165 580 410 Fax 0165 580 401 e Norway Tel 815 65 555 Fax 815 65 666 Portugal Tel 21 417 7035 Fax 21 417 3184 e Russia amp other C I S amp N I S Tel 7 095 23 2 0250 956 1137 Fax 7 095 230 6377 e South East Asia Tel 60 3 8024 2080 Fax 60 3 8024 2090 e Spain Tel 93 594 49 50 Fax 93 594 49 55 e Sweden Tel 018 612 1900 Fax 018 612 1910 e Switzerland Tel 0848 8028 12 Fax 0848 8028 13 UK Tel 0800 616928 Fax 0800 616927 e USA Tel 800 526 3593 Fax 877 295 8102 imagination at work Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Elanders Tofters 2005
34. GE Healthcare Colonnes BPG Instructions d utilisation Informations importantes pour les utilisateurs Tous les utilisateurs doivent lire enti rement ce manuel ainsi que le guide d entretien des colonnes BPG afin de bien comprendre l utilisation en toute s curit des colonnes BPG Amersham Biosciences AB qui se nommait pr c demment Amersham Pharmacia Biotech AB a adopt sa d nomination actuelle le 17 octobre 2001 Certification CE Ce produit r pond toutes les exigences des directives CE en vigueur Le symbole CE et la d claration de conformit correspondante sont valables pour l instrument lorsque celui ci est utilis en tant qu appareil ind pendant ou connect d autres instruments Amersham Biosciences portant le label CE ou connect d autres produits recommand s ou d crits dans ce manuel et utilis dans l tat o il a t livr par Amersham Biosciences l exception des modifications d crites dans ce manuel Termes et conditions de vente Tous les biens et services vendus sont soumis aux termes et conditions de vente de la soci t sauf accord contraire conclu par crit au sein du groupe Amersham Biosciences qui les a livr s Une copie de ces termes et conditions peut tre obtenue sur demande 1 Pr cautions de s curit gt Po PPI IMPORTANT Chaque fois que l on utilise la colonne toujours conserver port e de moin le manuel d instructions
35. Montage de l adaptateur Pour le montage de l adaptateur des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter la figure A 4 et au tableau A 1 pour les r glages de la cl dynamom trique et proc der comme suit 1 Positionner la bague annulaire 20 dans l encoche de la plaque sup rieure 21 2 Al aide des vis 23 fixer la douille de l crou de r glage 22 au corps de l crou de r glage 19 au travers de la plaque sup rieure 21 de telle mani re que le corps de l crou de r glage tourne sur la bague annulaire 20 3 Glisser le ressort 33 le tube interne de l adaptateur 30 et le tube externe de l adaptateur 31 sur la plaque de l adaptateur 34 4 Fixer le tube externe de l adaptateur 31 la plaque de l adaptateur 34 l aide des vis 32 5 Glisser le syst me d tanch it 27 sur le tube de l adaptateur 31 6 Visser la plaque sup rieure 19 23 en sens inverse des aiguilles d une montre 5 cm vers le bas sur le tube externe de l adaptateur 31 E Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 21 Installation et test des fuites EE 7 Tourner la molette de r glage 17 dans le sens des aiguilles d une montre au dessus de l adaptateur jusqu ce que les trous du tube de r glage interne 30 soient au m me niveau que les trous du tube externe de l adaptateur 31 8 Serrer la main les vis 26 vers le bas dans la moiti sup rieure du syst me d tanch it 27
36. aucune pi ce en acier inoxydable Aligner le tube avec le tamis de filtration 4 Visser les tiges de soutien 2 dans la pi ce terminale 12 Positionner le rebord 10 de telle sorte que les tiges de soutien 2 viennent se placer dans les trous correspondants S assurer que le joint torique 6 7 du rebord est align avec le tube en verre Le tube en verre ne peut tre en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable sans cela le tube en verre risque de casser Aligner la surface interne du tube en verre avec la surface interne du rebord Monter les rondelles ressort 9 et les crous 8 sur les tiges de soutien 2 et les serrer la main R gler une cl dynamom trique selon les sp cifications d finies au tableau 4 1 ci dessous et serrer les crous 8 et les rondelles ressort 9 afin de fixer les tiges de soutien 2 au rebord 10 Proc der dans l ordre illustr la figure 4 1 c est dire serrer successivement les crous diam tralement oppos s AVERTISSEMENT Le tube en verre risque de casser si l on applique une force excessive lors du serrage des quatre crous sur les tiges de soutien les tiges qui fixent le rebord et la pi ce terminale la colonne en verre Toujours utiliser une cl dynamom trique pour le serrage de ces crous Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites EE Table 4 1 R glages de la
37. chantillon de test pour les colonnes Le mat riau le plus appropri pour le test de la colonne est bien entendu l chantillon qui sera utilis dans l application mais pour des raisons pratiques ou conomiques cela n est pas toujours r alisable Comme alternative on peut utiliser une solution de NaCl ou d ac tone qui fournira une bonne indication de la qualit du compactage package de la colonne L luat est suivi par mesure de la conductivit ou de l absorption UV le profil d lution obtenu s utilise pour calculer la valeur du param tre HEPT L avantage de l utilisation d une solution de NaCI est qu une telle solution est imm diatement disponible et peut tre utilis e en toute s curit pour tester toutes les colonnes Un inconv nient est que le NaCl risque d interagir avec la matrice du gel en particulier dans le cas des matrices changeuses d ions et par cons quent de fournir des r sultats erron s L ac tone par contre n interagit pas avec la matrice et est d tectable par absorption UV 280 nm On peut galement augmenter d un facteur 10 la concentration du tampon de s paration et l utiliser comme chantillon de test La figure 5 13 ci dessous illustre le diagramme d absoption UV pour l ac tone obtenu avec une application classique utilisant une colonne BPG et fourni les valeurs calcul es des param tres HEPT et As Colonne BPG 300 Ve Support Sepharose 6 Fast Flow lt Hauteur
38. colonne BPG Pour obtenir des performances optimales des colonnes BPG nous recomman dons d utiliser les protocoles de compactage package de la colonne d crits aux paragraphes qui suivent Avant d utiliser les colonnes il est conseill de lire enti rement ce chapitre 5 1 Compactage package de la colonne Il existe de nombreuses m thodes de compactage package diff rentes en fonc tion de la colonne et de type de support utilis Dans le cas des colonnes BPG nous recommandons la m thode de compactage package d crite la sous section 5 1 5 Le d bit de compactage package optimal d pend de la temp ra ture du type de support du lot et de la quantit Par cons quent pour chaque syst me individuel il est n cessaire de d terminer le d bit optimal de mani re empirique en g n rant une courbe de pression d bit Les m thodes recomman d es sont d crites en d tail aux sections 5 1 3 et 5 1 5 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 33 Fonctionnement ps 5 11 Quantit s de support requises par centim tre de hauteur de gel Les quantit s de support requises par centim tre de hauteur de gel pour les colonnes BPG sont indiqu es ci apr s Table 5 1 Quantit s de support requises pour les colonnes BPG Quantit de support Quantit de support par centim tre de gel compact pack Support par litre de colonne rnr co
39. crous du collier de la plaque sup rieure 4 6 5 Nm La colonne est pr sent pr te tre utilis e et l adaptateur peut tre ins r D montage de l adaptateur Pour le d montage de l adaptateur des colonnes BPG 300 se reporter la figure A 3 et proc der comme suit 1 8 Localiser la petite encoche la base de l anneau du tamis de filtration Retirer le tamis de filtration 41 42 en faisant tourner une spatule ou une autre lame en acier inoxydable extr mit mouss e similaire dans l encoche Retirer le tamis de soutien 40 Retirer la vis d arr t 28 et l crou de fixation 27 de la plaque sup rieure 26 Lib rer le syst me d tanch it 30 et le tube interne de l adaptateur 35 en d vissant les boulons 31 situ s sur l anneau sup rieur du syst me d tanch it Retirer pr cautionneusement l ajusteur du joint d tanch it 23 en rel chant la tension exerc e sur le ressort 38 situ sous le tube interne de l adaptateur 35 Retirer la plaque sup rieure 24 26 29 et 32 et la s parer du tube externe de l adaptateur 36 en la tournant dans le sens des aiguilles d une montre Retirer le syst me d tanch it 30 et le joint torique de l adaptateur 33 34 D monter le tube externe de l adaptateur 36 le tube interne de l adaptateur 35 et le ressort 38 en retirant les vis 37 La plaque sup rieure 24 26 peut tre d mont e en retirant les vis 32
40. ctage package de 15 La compression est la diff rence de volume entre un gel s di ment et un gel sous pression 2 Utiliser un manom tre pour contr ler la pression pour la commande voir chapitre 3 du guide d entretien BPG 3 Les chiffres entre parenth ses peuvent tre obtenus avec un syst me de compactage package suppl mentaire 4 Les volumes de gel et les hauteurs de gel maximum sont bas s sur une concentration de la suspension de 80 et une compression de compactage package de 15 5 Les volumes de gel et les hauteurs de gel maximum sont bas s sur une concentration de la suspension de 85 et une compression de compactage package de 15 La temp rature de fonctionnement des colonnes BPG est de 4 C 40 C Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 9 La colonne BPG 10 Table 3 2 Dimensions des entr es et sorties des colonnes BPG Taille de la colonne 100 140 200 300 450 Dimensions E S mm 4 6 6 10 12 3 2 Mat riaux constitutifs de la colonne Les mat riaux utilis s dans la construction des colonnes BPG ont t soigneuse ment s lectionn s pour leur compatibilit avec les solvants les plus couramment utilis s au cours des tapes de purification chromatographique pour la main tenance des colonnes et lors des proc dures de nettoyage Les mat riaux polym res ont t test s pour leur r activit biologique conform ment la norme USP
41. d visser les tiges de soutien 2 de la pi ce terminale 12 6 Soulever le tube en verre 1 D poser pr cautionneusement le tube en verre un endroit s r Si le joint torique adh re au tube en verre ou la pi ce terminale mouiller le joint torique avec de l thanol 20 avant de le retirer 7 Alaide d une cl retirer les boulons 13 et les rondelles 14 qui fixent la pi ce terminale 12 au support 15 S parer la pi ce terminale du support Montage de la colonne Pour le montage des colonnes BPG 100 140 et 200 se reporter au tableau A 1 et la figure A 2 la fin du pr sent manuel Proc der comme suit Remarque Mouiller le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air emprisonn 1 En se reportant la figure 4 2 ci apr s contr ler que les l ments suivants sont correctement positionn s dans la pi ce terminale 12 e tamis de soutien 5 e tamis de filtration 4 e anneau de guidage en PTFE 3 e joint torique 6 7 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 19 Installation et test des fuites Fig 4 2 Emplacement des composants de la pi ce terminale pour les colonnes BPG 100 140 et 200 ND Fixer la pi ce terminale 12 au support 15 l aide des boulons 13 et des rondelles 14 Positionner pr cautionneusement le tube en verre 1 sur le joint torique 6 7 de la pi ce terminale 12 V rifier que le tube en verre n est en contact avec
42. de la colonne IMPORTANT L utilisateur final doit s assurer que toutes les op rations d installation d entretien de fonctionnement et d inspection sont effectu es par du personnel qualifi correctement form cet effet et capable de comprendreles instructions d utilisation AVERTISSEMENT Toujours utiliser des v tements de protection adapt s l application en cours afin de garantir la s curit des personnes au cours de l utilisation AVERTISSEMENT Se montrer particuli rement attentif lorsque l on travaille proximit de la colonne AVERTISSEMENT Ne JAMAIS introduire d air ou de gaz sous pression dans la colonne AVERTISSEMENT La pression de fonctionnement de la colonne ne peut jamais d passer la pression de service maximale sous peine d entra ner un risque de blessures au personnel et de dommages la colonne Un dispositif de s curit ad quat doit tre pr vu AVERTISSEMENT La plage de temp rature de fonctionnement de la colonne ne doit jamais se situer en dehors de la plage de temp rature de service maximale Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB gt amp D AVERTISSEMENT Ne pas utiliser d autres produits chimiques que ceux dont il a t d montr qu ils sont sans danger pour les parties humides de la colonne AVERTISSEMENT Les freins des roues doivent tre activ s en permanence durant le fonctionnement ou l
43. e stockage AVERTISSEMENT Se montrer particuli rement attentif lors du d placement de la colonne pour avoir l assurance que la colonne ne s incline pas ATTENTION S assurer que l eau utilis e avec la colonne est exempte de particules car les particules risquent de bloquer et d endommager les m ches Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Table des mati res 1 INtFOdUCtIQN 5er nn de nn nn 1 LL O N AINES Su ds dr d 1 1 2 Etiquetage d la Colonne ss usine 3 1 3 S c rit en AEA A NEOR 3 1 3 1 G n ralit s assine an aS 3 1 3 2 Avertissement Sesera i n 4 13 32 NOHICOIONSAHEQUON een tee 4 1 34 R MAQUES EEE RER tn Ne ee A 4 1 3 5 R sistance aux produits chimiques 4 1 3 6 Utilisation sous des atmosph res potentiellement ERDIOS VER RS Re nt 4 14 Op rateurs dre anisa E aa 5 RS CO Te I ANE S RC 5 1 6 lmnonometr cueldn ssssssas instant aNs 5 1 6 1 Mat riaux et MANerES nas net 5 16 2 Colonnes BPGren en astra 6 1 7 Objectif de ce manuel Essen set ren 6 D ballage de la colonne 7 La colonne BPGn aTe iieii EA teens 9 3 1 Sp cifications et Caract ristiques s ssss11s11111110111011111 9 3 2 Mat riaux constitutifs de la colonne n s ssssssss1ss1s1121151111111 10 3 3 R sistance aux produits chimiques ss sssss1sss1s11s11011110 10 3 4 Courbes de pression d bit 19111911119151115111151r1115111111 12 3 4 1 Courbes de pression d bit des colonnes vides
44. er l adaptateur de la colonne et placer la r hausse sur le rebord sup rieur 5 S assurer que le joint torique est correctement positionn dans le rebord 2 Utiliser le collier de la plaque sup rieure pour fixer la r hausse la colonne La colonne ainsi allong e est pr sent pr te pour la premi re tape du compactage package pour les proc dures de compactage package en deux tapes Le collier suppl mentaire livr avec la r hausse sert monter l adaptateur sur la r hausse Remarque Ne pas compacter packer la colonne avec des hauteurs de gel sup rieures la longueur de la colonne c est dire que l adaptateur doit se fermer herm tiquement contre la paroi de la colonne et NON contre la paroi de la r hausse Un tube d une longueur de 10 cm est n cessaire lors de l installation de l adaptateur sur le tube de la colonne si l on d monte la r hausse de compactage package E Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 27 Installation et test des fuites 28 4 1 3 BPG 450 D montage de la colonne Pour le d montage de la colonne BPG 450 se reporter au tableau A 3 et la figure A 5 la fin du pr sent manuel et proc der comme suit 1 Lib rer le joint de l adaptateur en tournant la poign e 24 AVERTISSEMENT Si le joint torique d tanch it de l adaptateur est sec il risque d tre endommag par le mouvement forc de l adaptateur Mouiller le joint torique avec de l ea
45. imique sont plus s v res des temp ratures et sous des pressions plus lev es et que les effets combin s n ont pas t pris en consid ration En g n ral l utilisation des produits chimiques suivants dans les colonnes BPG doit tre vit e e oxydants puissants par exemple peroxydes e compos s halog n s e solvants chlor s par exemple le chlorure de m thyl ne e esters par exemple ac tates Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB La colonne BPG e hydrocarbures aromatiques par exemple tolu ne e acides forts fortes concentrations e chloroforme e THF e tolu ne e chlorure de m thyl ne Remarque Eviter les combinaisons de sels avec un pH inf rieur 4 Toujours laver la colonne avec au moins deux fois le volumes de la colonne d une solu tion pH neutre entre les utilisations de sels et de tampons pH bas Table 3 3 R sistance aux produits chimiques des mat riaux constitutifs des colonnes BPG Substance Concentration par 60 90 jours unit de volume Ac tate d thyle 100 voir remarque 4 Ac tone 10 OK Ac tonitrile 5 voir remarque 2 Ac tonitrile 50 voir remarques 3 4 Acide ac tique 10 voir remarque 7 Acide ac tique 25 voir remarque 7 Acide chlorhydrique 0 1M voir remarques 6 7 Acide nitrique 0 1M voir remarque 7 Acide trifluoroac tique 0 1 v
46. ion d bit les plus pr cises sont celles obtenues par des m thodes exp rimentales La figure 3 1 ci dessous montre la configura tion classiquement utilis e dans les laboratoires d Amersham Biosciences pour g n rer des courbes de pression d bit Q m gt Vers le cylindre Manom tre de MESUrEOU le d bitm tre Vanne de s curit me Zi 2 Pompe Cuve de tampon Remarques 1 La longueur de tuyau maximale autorisee entre le manometre et la sortie est de 1 5 m 2 Le diametre du tuyau est de 10 mm Fig 3 1 Configuration classique pour la d termination des courbes de pression d bit REMARQUE La colonne contient uniquement du tampon La d charge doit se trouver au m me niveau que le manom tre A 12 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB La colonne BPG 3 4 1 Courbes de pression d bit des colonnes vides Les figures 3 2 et 3 3 illustrent les courbes de pression d bit pour les colonnes BPG vides obtenues par la m thode d crite la section 5 1 3 de ce manuel et avec la configuration illustr e plus haut 3500 BPG 100 3000 2500 BPG 140 2000 1500 D bit cm h 1000 BPG 200 500 0 0 02 04 06 08 1 12 14 16 18 2 22 24 26 28 3 Pression en bars Fig 3 2 Exemples de courbes de pression d bit pour les colonnes BPG 100 140 et 200 vides D bit cm h 1000 BPG 300 800 BPG 450 600 400 200 0 0 05 01 015 0 2 0 25 03 0 35 04 O45 0 5 Pression en bars Fig 3 3 Courbe
47. iquement l adaptateur l aide de l ajusteur de joint d tanch it 3 Eliminer l air pr sent dans la colonne 4 Fermer la vanne de sortie de la colonne Vanne d entr e de la colonne lt jauge de pression lt Adaptateur Colonne BPG Vanne de s curit Vanne d entr e N l de la colonne 4 N Fig 4 8 Disposition sch matique de la colonne des vannes et de la pompe pour le test des fuites au niveau 1 Augmenter la pression jusqu la pression maximale de fonctionnement Attendre environ 15 minutes jusqu ce que la pression soit stabilis e 3 Contr ler la perte de pression sur la jauge de pression La perte de pression ne peut pas d passer 0 1 bar en 5 minutes Un enregistreur reli un contr leur de pression permet d obtenir des chiffres plus pr cis Ceci termine le test des fuites PE 32 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement 5 Fonctionnement AVERTISSEMENT Manipuler la colonne avec pr caution car les sp cifications de pression ne sont valables que si le tube en verre est intact et exempt de rayures Ne jamais souffler d air ou de gaz dans la colonne Remarque Avant de compacter packer la colonne pour la premi re fois il est conseill de rincer la colonne et les tuyaux avec la solution de nettoya ge en place par exemple du NaOH pour avoir l assurance que toutes les surfaces sont propres Se reporter la section 1 3 du guide d entre tien de la
48. lisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites 4 3 Mise la terre de la colonne Pour viter les d charges d lectricit statique la colonne peut tre mise la terre Remarque Le raccordement la terre est obligatoire si l quipement est destin tre utilis sous une atmosph re potentiellement explosive Pour cela un kit de mise la terre adapt est propos en option et un terminal de raccordement la terre est pr vu sur le support de la colonne comme illustr ci dessous Terminal c ble de mise la terre des colonnes BPG 100 140 200 et 450 am cn ef en un aus am ef mn a me nam Terminal c ble de mise la terre des colonnes BPG Fig 4 7 Terminal de terre de la colonne sur le support de la colonne Pour raccorder la colonne la terre raccorder l une des extr mit s du c ble de mise la terre un terminal de terre du r seau de mise la terre de l usine et l autre extr mit au terminal de terre de la colonne situ sur le support Le terminal de terre de la colonne est dot d un filet M6 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 31 Installation et test des fuites RE 4 4 Test des fuites Test des fuites au niveau de l adaptateur 1 Remplir la colonne d eau ou de solution de d contamination puis positionner l adaptateur dans la colonne la hauteur laquelle on compte utiliser la colonne Fermer herm t
49. mesure que le gel est compact pack S assurer que la pression affich e sur le manom tre ne d passe pas la pression maximale autoris e pour le support se reporter au mode d emploi du support utilis ou pour la colonne TAPE 7 Vanne de s curit co Manometre Marquer la limite sup rieure du gel gt Fig 5 10 M thode de compactage package de la colonne tape 7 a b a d TAPE 7 Lorsque le gel a s diment marquer la limite sup rieure du gel Arr ter la pompe Fermer la vanne inf rieure Desserrer le joint torique d tanch it de l adaptateur en tournant en sens inverse des aiguilles d une montre la molette de r glage BPG 100 140 et 200 ou la poign e de r glage du joint d tanch it BPG 300 et 450 au dessus de la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB TAPE 8 Vanne de s curit e Pompe Q Manometre Fonctionnement Fig 5 11 M thode de compactage package de la colonne tape 8 TAPE 8 a Abaisser rapidement l adaptateur en tournant la poign e de r glage de la hauteur dans le sens des aiguilles d une montre Le tampon entre le gel s diment et l adaptateur passe entre le joint torique de l adaptateur et la paroi de la colonne Au cours de cette op ration le gel commence monter Cesser de descendre l adaptateur
50. mpact e pack e BPG 100 BPG 140 BPG 200 BPG 300 BPG 450 DEAE Sepharose Fast Flow 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Sepharose Fast Flow 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 CM Sepharose Fast Flow 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 S Sepharose Fast Flow 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Phenyl Sepharose Fast Flow 1251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 1971 Sephadex G 25 qualit s C et M 250g 19 69 382 g 78 59 176g 394g Sephadex G 25 SF 280 g 220g 429 g 88 0 g 198 g 443g Sepharose 4 et 6 Fast Flow 1201 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 89 Sephacryl High Resolution 1 251 98 ml 192 ml 393 ml 882 ml 971 Superdex 75 et 200 qualit pr parative 1 20 I 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 891 Sepharose Q et SP High Performance 1 201 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 89 Phenul Sepharose High Performance 1201 94 ml 183 ml 377 ml 847 ml 891 5 1 2 Tailles de tamis recommand es Il est important de s lectionner des tamis d adaptateur et de pi ce terminale de porosit appropri e Les tamis sont disponibles avec des porosit s de 10 12 23 et 54 um Un mauvais choix de porosit du tamis risque d engendrer des probl mes de contre pression ou de fuites de gel Les tailles de tamis recommand es sont les suivantes Table 5 2 Tailles de tamis recommand es pour les colonnes BPG Taille de tamis um Mat riau Diam tre des billes um 10 PA lt 70 12 PEEK lt 70 23 PP Support FF 54 PP Support BB 1 Polyamide 2 Poly ther the
51. n aper u g n ral des sp cifications et caract ristiques des colonnes BPG 3 1 Sp cifications et caract ristiques Table 3 1 Principales sp cifications et caract ristiques des colonnes BPG Diam tre de Aire de Hauteur Hauteur Volume Pression Poids Poids de Dimensions la colonne section detube de get de ge 1 3 max total l adaptateur totales Imm cm2 cm cm litres bars kg kg cm min max min max PxlxH 00 79 50 O 26 48 0 0 2 0 38 8 15 7 48x48x127 00 79 75 25 41 66 20 32 52 8 16 7 48x48x152 00 79 95 45 54 83 35 42 66 8 17 7 48x48x172 40 154 50 O 26 48 0 0 4 0 7 4 6 25 1 59x59x127 40 154 75 25 41 66 39 6 3 102 6 26 4 59x59x152 40 154 95 45 54 83 69 8 3 128 6 27 1 59x59x172 200 314 50 O 26 48 0 0 8 2 15 1 6 34 3 59x59x127 200 314 75 25 41 66 73 129 20 7 6 36 3 59x59x152 200 314 95 45 54 83 14 1 16 9 26 1 6 39 3 59x59x172 296 688 50 O 26 48 00 179 33 0 4 68 29 69x69x133 296 688 75 25 41 66 17 2 28 7 45 4 4 73 29 69x69x158 296 688 95 45 54 83 310 37 2 57 1 4 78 29 69x69x178 446 1562 50 3 23 42 47 35 9 65 6 2 5 200 100 80x80x140 446 1562 75 22 39 58 344 60 9 90 6 2 5 215 100 80x80x165 446 1562 100 47 58 83 73 4 90 6 131 2 2 5 230 100 80x80x190 1 Les volumes de gel et les hauteurs de gel maximum sont bas s sur une concentration de la suspension de 75 et une compression de compa
52. nes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement Ceci termine la proc dure de compactage package de la colonne Essuyer les ventuels r sidus de tampon ou de suspension au dessus de l adaptateur L espace entre la t te de l adaptateur et le haut de la colonne doit tre sec et propre ou tre rempli d thanol 20 pour pr venir toute croissance bact rienne Remarque Avant d utiliser la colonne toujours contr ler les performances de la colonne compact e pack e Voir les instructions relatives cette proc dure la section 5 2 ci apr s 5 2 Evaluation de la colonne L efficacit d une colonne d pend de la qualit de son compactage package Une colonne mal compact e pack e engendre un d bit irr gulier ce qui r sulte en un largissement de la zone et une moins bonne r solution Il est donc important de disposer d une m thode permettant de tester la colonne avant sa mise en service Une telle m thode doit tre simple quantitative et ne pas introduire de mat riaux contaminants Il est galement avantageux de pouvoir utiliser la m me m thode pour contr ler les performances de la colonne au cours de sa dur e de vie utile de mani re pouvoir ais ment d terminer le moment o le support doit tre recompact repack ou remplac Les m thodes utilisant des compos s color s comme le bleu dextran sont viter car elles ne r pondent pas aux crit res ci dessus et ne peuvent
53. notifications de remarques 0 op rateurs dgr S sit E a a A A RE a aa ne 5 P pression courbes Q quantit s d SUPPOR rsrrtmennmantenntednnnmennunnurenp mens enennmeamennnnnte 34 R recommand d bits de compactage package tailles de tamis r f rences tubes et supports pour colonnes n s s sssssssiss1sisisiss15s1s111ttttnes tas tantnrst notast an tanen nan antatt rotan tan taten tenanan 7 r glages de la cl dynamom trique colonnes 100 140 et 200 colonnes 300 colonnes 450 r hausse montage sur les colonnes 100 140 et 200 montage sur les colonnes 300 montage sur les colonnes 450 r sistance aux produits chimiques S EV S E E E E AA E E atmosph res explosives cat gorie EX Stock g iiir a e a N e a N aE A a a ane a ie syst me de compactage package emplacement des composants on ss ss ss1ss1s1s111115111 1111111 1st tts tote nst rst tn trn tanan tenaa ntst totrt tanen nen tenanan trst 22 T test de la colonne pour l absence de fuites test des fuites Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Figur A 1 Identification des pi ces des colonnes BPG 100 140 et 200 Figur A 2 Identification des pi ces des colonnes BPG 100 140 et 200 suite Figur A 3 Identification des pi ces des c
54. oir remarques 7 8 Alcool isopropylique 100 voir remarque 2 Chlorure de sodium 2M voir remarque 5 Cyclohexane 100 voir remarques 3 4 Ethanol 100 voir remarque 2 Ethyl ne glycol 50 OK Glyc rol 100 OK exane 100 voir remarques 2 7 ydroxyde de sodium 2M OK thanol 100 OK n Propanol 100 OK Triton X 100 100 OK Tween Phosphate de tri n butyle 1 0 3 OK Ur e 8M OK 1 Le test n inclut pas le tuyau en PVC 2 Le caoutchouc EPDM modifie les caract ristiques Pour une utilisation r p titive et long terme utiliser des joints toriques et des joints d tanch it en FEP PFR PTFE E Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 11 La colonne BPG A 3 Remplacer les joints toriques et les joints d tanch it par des mod les en FEP PFR PTFE 4 La r sistance de polypropyl ne est assez bonne 5 Peut tre utilis sous des conditions de fonctionnement normales Ne pas utiliser de aCl dans les solutions de stockage Garder l esprit que le NaCI peut engendrer une corrosion de l acier inoxydable dans des solutions acides pH inf rieur 4 0 6 Pas plus de 4 heures 7 Utilisation d conseill avec les tamis en PA 8 Le FEP modifie les caract ristiques Donc utiliser de caoutchouc EPDM 3 4 Courbes de pression d bit En g n ral les courbes de pression d bit th oriques sont extr mement difficiles d terminer Les courbes de press
55. olonnes BPG 300 Figur A 4 Identification des pi ces des colonnes BPG 300 suite Figur A 5 Identification des pi ces des colonnes BPG 450 WWW ch romatog ra ph y BPG Sepharose Sephacryl Sephadex Superdex et Drop Design sont des 5 4 marques d Amersham Biosciences Limited Amersham et Amersham amershambiosciences com Biosciences sont des marques d Amersham plc Teflon est une marque de E l du Pont de Nemours et Co Triton est une marque de Rohm amp Haas Inc Une d claration de conformit reprenant les directives europ ennes et les GE Hea Ithcare normes harmonis es valables pour ce type d quipement est incluse i s par ment avec chaque appareil Amersham Biosciences AB Si vous avez des commentaires sur ce produit nous serons heureux que vous Bj rkgatan 30 nous les fassiez parvenir l adresse s 2005 General Electric Company Tous droits r serv s ppsala Su de Amersham Biosciences AB a General Electric company going to market as GE Healthcare GE Healthcare Amersham Biosciences AB Bj rkgatan 30 SE 751 84 Uppsala Su de GE Healthcare Amersham Biosciences Europe GmbH Munzinger Strasse 9 D 79111 Freiburg Germany GE Healthcare Amersham Biosciences UK Ltd Amersham Place Little Chalfont Buckinghamshire HP7 9NA UK GE Healthcare Amersham Biosciences Corp 800 Centennial Avenue PO Box 1327 Piscataway NJ 08855 1327 USA GE Healthcare
56. onne BPG 13 S curit 1 3 1 G n ralit s Les informations fournies dans ces instructions d utilisation constituent les meilleures pratiques de fonctionnement conseill es et n auront en aucun cas la pr s ance par rapport aux responsabilit s individuelles ou aux r glementations locales Amersham a accord une attention toute particuli re la conception et la fabrication des diff rentes pi ces de cet quipement de mani re le rendre conforme toutes les r gles de s curit applicables pour ce type d quipement Au cours du fonctionnement et pendant tout autre travail utilisant un r cipient sous pression chaque individu a toujours la responsabilit de prendre en consid ration e sa propre s curit et celle des autres personnes e la s curit de l quipement par le biais d une utilisation correcte et con forme aux descriptions et instructions fournies dans ces instructions d utilisation Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 3 Introduction A 1 3 2 Avertissements AVERTISSEMENT Le symbole d avertissement signale des instructions qui doivent imp rativement tre suivies de mani re stricte pour viter des blessures aux personnes Ne pas continuer avant d avoir clairement compris les instructions et tant que toutes les conditions stipul es ne sont pas remplies 1 3 3 Notifications d attention ATTENTION Le symbole d attention signale des instructions ou des condition
57. our colonne T300 500 8 1012 28 Verre borosilicat X 1 Tube pour colonne T300 750 8 1012 29 Verre borosilicat x 1 Tube pour colonne T300 950 8 1012 30 Verre borosilicat x 1 0 Tamis 23 um pour pi ce terminale 8 1012 34 PA xX 2 1 Tamis 10 um pour pi ce terminale 8 1012 35 PP X 2 Tamis 12 um pour pi ce terminale 8 1148 44 PEEK x 2 Tamis 54 um pour pi ce terminale 8 1127 03 PP x 2 2 Tamis de soutien pour pi ce terminale 8 1012 36 PP X 2 3 Plaque de distribution 8 1012 37 PP x 2 4 Pi ce terminale 8 1140 47 316L X 5 Joint d tanch it 25 mm int 10 mm 8 0200 00 EPDM X 5 6 Joint d tanch it 25 mm int 10 mm 8 1012 40 PTFE X 5 7 Raccord 25 mm 10 mm PP X 2 8 Vanne manuelle 4 ports 2 voies 8 1012 56 316L PTFE X 1 9 Support complet 8 1012 38 316L 20 Rondelle 8 1012 61 316 6 21 Boulon M12 x 25 8 1012 65 316 6 22 Roulette 8 1001 09 1 23 Ajusteur de joint d tanch it 8 1012 41 PEE 1 24 Ajusteur de hauteur de l adaptateur 8 1128 31 316 1 25 Bague annulaire 8 1012 42 POM 2 26 Plaque sup rieure pour adaptateur 8 1129 06 316L 27 Ecrou M10 8 1012 44 316 5 28 Vis d arr t compl te 8 1012 43 316 POM 1 29 Ecrou de r glage douille 8 1012 45 PEE 1 30 Syst me d tanch it 8 1147 50 316L 31 Vis pour t te de l adaptateur M8 8 1012 46 316 3 32 Vis Allen M8 x 60 8 1012 47 316 5 33 Joint torique 274 x8 mm 8 1012 51 EPDM X 2 34 Joint torique 274 x8 mm 8 1012 52 FEP X 1 35 Tube interne pour adaptateur 8 1147
58. ports pour colonnes correspondant aux diff rents diam tres de colonnes contr ler les r f rences du nouvel quipement afin d en v rifier la correspondance Table 2 1 R f rences des tubes et supports pour colonnes Diam tre de Longueur du tube de la colonne mm Support la colonne mm 500 750 950 100 18 1103 01 18 1103 02 18 1103 03 18 1031 10 140 18 1113 08 44 7320 47 18 1113 09 18 1031 20 200 18 1103 11 18 1103 12 18 1103 13 18 1031 20 300 18 1103 21 18 1103 22 18 1103 23 450 18 1103 71 18 1103 72 18 1103 73 La hauteur de tube de la colonne BPG 450 est de 1000 mm Remarque il est n cessaire de commander la fois le support et la colonne pour recevoir une configuration compl te de colonne pour les mod les BPG 100 140 et 200 V rifier que tous les composants repris au tableau 2 2 ci dessous sont pr sents Table 2 2 Nombre de composants livr s avec les colonnes BPG D signation Quantit BPG BPG BPG BPG BPG 100 140 200 300 450 Rebord aveugle avec joint d tanch it EPDM 2 2 2 2 2 Collier 23 mm 51 mm 2 2 2 2 2 Support 1 T Tamis 23 um 2 2 2 2 2 Boulons pour fixation du support la colonne 6 4 Manuels d utilisation d entretien chacun 1 1 1 1 1 7 D ballage de la colonne 8 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB La colonne BPG ES 3 La colonne BPG Ce chapitre propose u
59. que avec de l thanol 20 avant de le retirer 7 Alaide d une cl annulaire retirer les boulons 21 et les rondelles 20 qui fixent la pi ce terminale 14 au support 19 S parer la pi ce terminale du support Montage de la colonne Pour le montage de la colonne BPG 300 se reporter la figure A 4 et proc der comme suit Remarque Mouiller le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air emprisonn 1 En se reportant la figure 4 5 contr ler que les l ments suivants sont correctement positionn s dans la pi ce terminale 14 e plaque de distribution 13 la face profil e doit se trouver face la pi ce terminale et la face plane face au tamis de soutien e tamis de soutien 12 e tamis 10 11 e joint torique 6 7 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites Fig 4 5 Emplacement des composants de la pi ce terminale des colonnes BPG 300 2 Fixer la pi ce terminale 14 au support 19 l aide des boulons 21 et des rondelles 20 3 Positionner pr cautionneusement le tube en verre 9 sur le joint torique 6 7 de la pi ce terminale 14 V rifier que le tube en verre n est en contact avec aucune pi ce en acier inoxydable Aligner le tube en verre avec le tamis de filtration inf rieur 10 11 4 Visser les tiges de soutien 8 dans la pi ce terminale 14 Positionner le rebord 5 de telle sorte que les tiges de soutien 8
60. r aux protocoles de maintenance de la colonne applicables aux exigences des proc d s individuels Les trois principaux groupes de composants qui constituent la colonne adaptateur colonne proprement dite et support sont illustr s par les sch mas clat s en plusieurs volets qui se trouvent la fin de ce manuel Les composants de base de la colonne sont e tube en verre e rebord e joints toriques e tamis de filtration Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 1 Introduction tamis de soutien e pi ce terminale e tiges Les tiges fixent le rebord etla pi ce terminale au tube en verre lequel est rendu herm tique par des joints toriques Les joints toriques isolent efficacement le tube en verre de tout contact direct avec les composants en acier inoxydable La plaque sup rieure de l adaptateur et l crou de r glage sont fix s par des colliers ou boulonn s au rebord de la colonne L crou de r glage tourne sur une bague annulaire au niveau de la plaque sup rieure ce qui permet de modifier la hauteur de l adaptateur l int rieur du tube de la colonne Le joint torique de l adaptateur forme un joint d tanch it entre l adaptateur et la colonne en verre lorsqu il est comprim par l appareil d tanch it L tanch it est contr l e par la molette de r glage du joint d tanch it Le support est boulonn la pi ce terminale de la colonne et est quip de roulettes avec freins
61. r que la colonne est parfaitement horizontale Corriger au moyen des pieds ou roulettes r glables si n cessaire PE 36 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement TAPE 3 Fig 5 3 D termination du d bit optimal tape 3 TAPE 3 a M langer le tampon de compactage package avec le support pour donner naissance une suspension 75 c est dire volume compact pack volume de suspension 0 75 Remarque Ce volume de suspension convient pour les supports BioProcess Pour les autres supports pour chromatographie d terminer le volume de suspension recommand en accord avec le fournisseur Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 37 Fonctionnement PE Vanne fermee dd Fig 5 4 D termination du d bit optimal tape 4 TAPE 4 a Verser pr cautionneusement la suspension homog ne dans la colonne Contr ler qu il n y a pas de bulles d air emprisonn es dans la suspension PE 38 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement TAPE 5 Vanne fermee Fig 5 5 D termination du d bit optimal tape 5 TAPE 5 Remarque Cette tape doit avoir lieu suffisamment rapidement pour que le support n ait pas le temps de s dimenter enti rement Ins rer l adaptateur Utiliser les quatre boulons BPG 100 140 et 200 ou le collier de adaptateur de la
62. rc tone 3 Polypropul ne 34 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement je 5 13 D termination du d bit optimal de compactage package Pour d terminer le d bit optimal de compactage package pour les colonnes BPG proc der comme suit TAPE 1 A Vanne ferm e Y AVERTISSEMENT Toujours conserver dans la mesure du possible les liquides T dangereux dans des r cipients ferm s afin d viter la pr sence de vapeurs ou Fig 5 1 D termination du d bit optimal tape 1 d claboussures dans la zone de travail TAPE 1 a Mouiller le tamis avec de l thanol 20 pour liminer l air emprisonn b Remplir la colonne avec 10 15 cm de tampon de compactage package c Vider les tubes pour liminer toutes les bulles d air d Raccorder un tuyau au c t aspiration d une pompe e D marrer la pompe placer le tuyau sur le tamis inf rieur et extraire toutes les bulles d air qui demeurent emprisonn es sous le tamis Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 35 Fonctionnement PE a de tampon residuel _ Vanne TL fermee Q Fig 5 2 D termination du d bit optimal tape 2 TAPE 2 a Continuer pomper le tampon et l air jusqu ce qu il ne reste plus que 2 3 cm de tampon dans la colonne b Utiliser un niveau bulle pour v rifie
63. re A 5 R glage de la cl pour l emplacement dynamom trique Couvercle et boulons de la pi ce terminale 26 et 27 8 Nm Tube en verre vers rebords 3 et tiges 8 4 Nm D montage de l adaptateur pour remplacer le joint torique 32 Pour remplacer le joint torique des colonnes BPG 450 se reporter au tableau A 3 et la figure A 5 et proc der comme suit voir galement les r glages de la cl dynamom trique au tableau 4 3 1 Retirer les boulons des vis de l adaptateur 39 2 Retirer le couvercle 17 et les vis de l adaptateur 29 Veiller ne pas plier le tube d entr e 31 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 29 Installation et test des fuites 30 3 Retirer le ressort 34 4 Retirer les vis 33 qui maintiennent le tube d entr e 5 Retirer le joint torique usag 32 et le jeter Ceci termine le d montage de l adaptateur Montage de l adaptateur 1 Placer le nouveau joint torique lubrifi thanol 20 32 entre le tube d entr e 31 et l adaptateur 38 Serrer les vis Allen 33 2 Glisser le ressort 34 sur le tube d entr e Faire descendre pr cautionneusement la vis de l adaptateur 29 et le couvercle 17 le long du tube d entr e 4 Visser les boulons 39 l int rieur de l adaptateur et les serrer L adaptateur est pr sent remont Montage d une r hausse syst me de compactage packagel Le syst me de compactage package de la colonne BPG 450 e
64. s qui doivent tre suivies afin d viter des dommages au produit ou d autres quipements Ne pas continuer avant d avoir clairement compris les instruc tions et tant que toutes les conditions stipul es ne sont pas remplies 1 3 4 Remarques Remarque Le symbole de remarque est utilis pour indiquer des informations importantes pour une utilisation sans probl me et optimale du produit 13 5 R sistance aux produits chimiques Des sp cifications comprenant la r sistance aux produits chimiques figurent au chapitre 3 de ces instructions d utilisation 13 6 Utilisation sous des atmosph res potentiellement explosives Les colonnes BPG ne contiennent aucun circuit lectrique N anmoins les pr cautions suivantes doivent toujours tre respect es e Eviter les d charges d lectricit statique en reliant la colonne la terre Utiliser un c ble de mise la terre reli au r seau de terre de l usine Un kit de mise la terre est propos en option e Seuls les outils con us pour tre utilis s sous des atmosph res potentielle ment explosives peuvent tre utilis s lors de l utilisation et de l entretien de la colonne e Toujours porter des v tements de protection adapt s lors de l utilisation dans des environnements potentiellement explosifs Cat gorie EX Le code de cat gorie EX figurant sur l tiquette d identification d finit le niveau de protection contre l explosion de l quipement La cat
65. s de pression d bit pour les colonnes BPG 300 et 450 vides Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 13 La colonne BPG 14 3 4 2 Courbes de pression d bit des colonnes compact es pack es Les figures 3 4 3 6illustrent les courbes de pression d bit pour les colonnes BPG compact es pack es obtenues par la m thode d crite la section 5 1 5 de ce manuel et avec la configuration illustr e la figure 3 1 D bit cm h BPG 100 70 60 BPG 200 BPG 300 40 30 20 10 0 0 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 Pression en bars Fig 3 4 Courbe de pression d bit pour le support Superdex 200 de qualit pr parative dans des colonnes BPG Hauteur de gel 60 cm D bit cm h 300 250 200 150 100 50 0 0 0 0 5 1 0 15 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 Pression en bars Fig 3 5 Courbe de pression d bit pour le support Q Sepharose High Performance dans des colonnes BPG 300 500 Hauteur de gel 10 cm Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB La colonne BPG D bit cm h 400 300 200 100 0 1 0 2 0 3 0 4 0 5 0 6 0 7 Pression en bars Fig 3 6 Courbe de pression d bit d une colonne BPG 450 compact e pack e avec du gel Q Sepharose Fast Flow avec une hauteur de gel de 15 cm Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 15 La colonne BPG 16 Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB Installation et test des fuites 4 Installation et test des fuites
66. st une r hausse en acier inoxydable Pour le montage d une r hausse sur la colonne BPG 450 proc der comme suit 1 Retirer l adaptateur de la colonne et placer la r hausse en acier inoxydable sur le rebord sup rieur S assurer que le joint torique est correctement positionn dans le rebord 2 Utiliser les boulons livr s avec la r hausse pour fixer la r hausse la colonne La colonne ainsi allong e est pr sent pr te pour la premi re tape du compactage package pour les proc dures de compactage package en deux tapes Remarque Retirer la r hausse apr s l tape de s dimentation initiale Ins rer l adaptateur et poursuivre le compactage package Un tube d une longueur de 15 cm est n cessaire lors de l installation de l adaptateur sur le tube de la colonne si l on d monte la r hausse de compactage package 4 2 Raccordements Plusieurs connecteurs diff rents sont disponibles pour raccorder les colonnes BPG aux diff rents types de tuyaux et de syst mes voir le chapitre 3 du guide d entretien des colonnes BPG Les raccords sanitaires collier hygi niques des colonnes BPG permettent le nettoyage en place Les autres connecteurs sont en polypropyl ne et dot s d une bonne r sistance aux produits chimiques Le diam tre ext rieur de tous les raccords collier BPG est de 25 mm Un collier de 51 mm est utilis avec les kits de manom tre et la vanne de s curit Colonnes BPG instructions d uti
67. u ou une solution 20 d thanol NE PAS graisser le joint torique 2 D placer l adaptateur de quelques millim tres vers le bas afin de lib rer le joint torique de la paroi de verre Le d placer ensuite le plus loin possible vers le haut 3 Retirer les boulons 26 et les rondelles 27 Lib rer le couvercle 17 et sortir l adaptateur Remarque L adaptateur des colonnes BPG 450 est lourd Pour des raisons de s curit il est conseill de soulever l adaptateur l aide d un treuil fix aux boulons oeil du couvercle de la colonne 4 Desserrer les boulons 44 pour s parer le tube de la colonne 12 avec les rebords 3 de la pi ce terminale 1 Soulever pr cautionneusement le tube de la colonne Si le joint torique adh re au tube en verre ou la pi ce terminale mouiller le joint torique avec de l thanol 20 avant de le retirer 5 Pour remplacer les joints toriques des rebords sup rieur et inf rieur desserrer les vis Allen 7 et sortir pr cautionneusement le rebord sup rieur Retirer le tube en verre et remplacer le joint torique inf rieur Remettre en place le tube en verre et ajuster le nouveau joint torique sup rieur Enfin ajuster le rebord sup rieur Aligner le tube en verre avec les rebords Ceci termine la proc dure de d montage de l adaptateur Montage de la colonne Pour le montage de la colonne BPG 450 se reporter la figure A 5 et au tableau A 3 et proc der comme suit
68. u pic mi hauteur ml Ve est mesur comme le volume ayant travers la colonne entre le milieu de l application de l chantillon et le maximum du pic Ip est mesur comme la largeur mi hauteur du pic de la base au sommet Dans l exemple de la figure 5 13 la valeur du param tre HEPT peut tre calcul e partir du chromatogramme de la mani re suivante Table 5 3 Calcul de HEPT Velm Jih ml N N m HEPT cm Ac tone 18800 900 2417 4203 0 024 Des colonnes correctement compact es pack es pr senteront des valeurs du param tre HEPT faibles N anmoins il n est possible de comparer que des colonnes qui ont t compact es pack es avec le m me type de support et qui ont t test es sous des conditions identiques Comme r gle empirique g n rale une valeur correcte du param tre HEPT est de l ordre de deux trois fois le diam tre moyen des billes du support utilis condition que l chantillon n interagisse pas avec le support En pratique la corr lation entre la valeur du param tre HEPT et les performances de la colonne ne peuvent tre valu es que par l op rateur de la colonne Lorsque ce point a t tabli il est possible de d finir une norme pour pouvoir juger de l acceptabilit du compactage package de la colonne Colonnes BPG Instructions d utilisation 18 1170 70 AB 49 Fonctionnement 50 Par exemple l op rateur de la colonne peut savoir par exp
69. upports particuli rement rigides il n y a pas de plateau en pareil cas utiliser le d bit correspondant la pression maximale autoris e pour la colonne 5 1 4 D bits de compactage package recommand s pour les supports Amersham Biosciences Les d bits de compactage package recommand s figurent dansles instructions qui accompagnent chaque livraison de support N anmoins pour un compactage package optimal il est conseill de proc der la d termination d une courbe de pression d bit pour chaque lot de support colonne ou configuration de syst me de la mani re d crite la section 5 1 3 5 15 M thode de compactage package de la colonne Cette m thode de compactage package peut tre utilis e avec les supports BioProcess et est bas e sur l application d un d bit constant au travers de la colonne Pour pr parer la proc dure de compactage package de la colonne proc der comme suit AVERTISSEMENT Toujours utiliser une vanne de s curit raccord e imm diatement apr s la pompe 42 Colonnes BPG instructions d utilisation 18 1170 70 AB Fonctionnement EEE S TAPE 1 Contr ler que le d bit optimal pour la combinaison d quipement de colonne de type de support et de quantit utilis e a t d termin se reporter la section 5 1 3 TAPE 2 S assurer que l on dispose de suffisamment de tampon de compactage package Un tampon de compactage package classique est du NaCl

Colonnes BPG - GE Healthcare Life Sciences

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