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Progesterone ELISA

1. Lire la densit optique 450 10 nm l aide d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques dans les 10 minutes apr s avoir ajout la Stop Solution 6 3 Calcul des r sultats Calculer les valeurs moyennes des densit s optiques pour chaque s rie de standards contr les et chantillons Etablir la courbe talon en reportant la densit optique moyenne de chaque valeur standard en fonction de sa concentration en posant la densit optique en axe des ordonn es et la concentration en axe des abscisses L utilisation de la densit optique moyenne pour chaque chantillon d termine la concentration correspondante partir de la courbe talon M thode automatique Les r sultats dans le IFU ont t calcul s de fa on automatique en utilisant une courbe de r gression 4 PL 4 Parameter Logistics D autres fonctions logistiques peuvent donner des r sultats l g rement diff rents La concentration des chantillons peut tre lue directement partir de cette courbe talon Les chantillons avec une concentration sup rieure celle du plus haut standard doivent tre dilu s de nouveau Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consid ration 6 3 1 Exemple typique de courbe talon Ci dessous est repr sent un exemple typique de courbe talon r alis e avec le DRG ELISA Unit s optiques 450 nm Standard 25 gt 0 Standard 6 40 ng mL Vers 5 0 Effectiv
2. lt oO In vitro diagnostic device In vitro Diagnostikum Ussage Diagnostic in vitro Diagn stico in vitro Per uso Diagnostica in vitro Nur f r Seulement dans le S lo para uso en un RUO For research use only Forschungszwecke cadre de recherches investigaci n GEESS Catalogue number Katalog Nr R f rence Numero de cat logo No di Cat Lot No Batch code Chargen Nr No de lot Numero de lote Lotto no Contains sufficient for lt n gt tests Ausreichend f r n Ans tze Contenu suffisant pour n tests Contenido suficiente para lt n gt ensayos Contenuto sufficiente per n saggi Storage Temperature Lagerungstemperatur Temperature de conservation Temperatura de conservacion Temperatura di conservazione Expiration Date Mindesthaltbarkeits datum Date limite d utilisation Fecha de caducidad Data di scadenza Era AB Legal Manufacturer Hersteller Fabricant Fabricante Fabbricante Distributed b Distributor Vertreiber Distributeur Distribuidor Distributtore y Content Content Inhalt Contenu Contenido Contenuto Volume No Volume No Volumen Anzahl Volume Num ro Volumen N mero Volume Quantit Microtiterwells Microtiterwells Mikrotiterwells Flagues de micros Placas multipocillo Micropozzetti titration Antiserum Antiserum Antiserum Antis rum Antisuero Antisiero Enzyme Enzyme Conjugate Enzymkonjugat Conjugu en
3. Les tubes contenant les chantillons doivent tre ferm s et peuvent tre stock s jusqu 24 heures 2 8 C avant d tre test s Les chantillons stock s pour un temps prolong doivent tre congel s 20 C avant d tre test s Les chantillons d congel s doivent tre retourn s plusieurs fois avant le test 5 3 Dilution de l chantillon Si lors d un test pr liminaire la concentration de l chantillon se r v le tre sup rieure celle du standard le plus concentr alors l chantillon doit tre dilu avec le Standard O et test de nouveau comme d crit dans R alisation du test Pour le calcul des concentrations ce facteur de dilution doit tre pris en consid ration Exemple a dilution 1 10 10 uL Serum 90 uL Standard O bien m langer b dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Standard O bien m langer 6 R ALISATION DU TEST 6 1 Remarques g n rales Tous les r actifs et chantillons doivent tre amen s temp rature ambiante avant utilisation Tous les r actifs doivent tre m lang s sans formation de mousse Une fois la proc dure engag e toutes les tapes doivent tre r alis es sans interruption Utiliser un nouveau c ne de pipette pour chaque standard contr le ou chantillon ceci afin d viter toute contamination L absorbance est fonction du temps d incubation et de la temp rature Avant de commencer le test il est recommand de pr
4. parer tous les r actifs bouchons ouverts de pr parer les puits des microplaques etc Cela garantira un intervalle de temps quivalent entre chaque tape sans interruption En r gle g n rale la r action enzymatique est lin airement proportionnelle au temps et la temp rature Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 31 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 6 2 R alisation du dosage Chaque test doit inclure une courbe talon 1 2 Disposer le nombre de puits de micro titration d sir dans le support D poser 25 uL de chaque Standard Control et les chantillons avec de nouveaux c nes de pipette dans les puits appropri s Incuber pendant 5 minutes temp rature ambiante D poser 200 uL d Enzyme Conjugate dans chaque puits Bien m langer pendant 10 secondes Il est important d obtenir un m lange parfait lors de cette tape Incuber pendant 60 minutes temp rature ambiante D canter le contenu des puits et rincer les puits 3 fois avec de la Wash Solution dilu e 400 uL par puits Tapoter les puits sur du papier absorbant afin d liminer les gouttelettes r siduelles Remarque importante La sensibilit et la pr cision de ce test sont fortement d pendantes de la bonne r alisation des tapes de lavage Ajouter 200 uL de Substrate Solution chaque puits Incuber pendant 15 minutes temp rature ambiante Stopper la r action enzymatique en ajoutant 100 pL de Stop Solution chaque puits
5. Efecto Gancho Dosis Elevada No se ha observado efecto gancho en este ensayo 11 ASPECTOS LEGALES 11 1 Fiabilidad de los Resultados El ensayo debe realizarse exactamente de acuerdo a las instrucciones del fabricante Mas a n el usuario debe ajustarse estrictamente a las reglas BPL Buenas Pr cticas de Laboratorio o a otros est ndares y o leyes nacionales aplicables Esto es especialmente relevante para el uso de reactivos control Es importante incluir siempre dentro del procedimiento de ensayo un n mero suficiente de controles para validar la exactitud y la precisi n del ensayo Los resultados del ensayo son v lidos s lo si todos los controles se encuentran dentro de los rangos especificados y si todos los otros par metros del ensayo se encuentran dentro de las especificaciones dadas para el ensayo En cado de alguna duda o inquietud por favor contactar con DRG 11 2 Consecuencias Terap uticas Las consecuencias terap uticas nunca deben basarse s lo en los resultados de laboratorio incluso si todos los resultados del ensayo est n de acuerdo con los asuntos fijados en el punto 11 1 Cualquier resultado de laboratorio es solamente una parte del cuadro cl nico de un paciente Solamente en los casos donde los resultados de laboratorio est n en acuerdo con todo el cuadro cl nico de un paciente se pueden derivar consecuencias terap uticas Nunca deben derivarse consecuencias terap uticas a partir de solamente el resultado obten
6. Hautreizungen und Verbrennungen verursachen e Nicht mit dem Mund pipettieren und den Kontakt von Kitbestandteilen und Proben mit Haut und Schleimh uten vermeiden e Inden Bereichen in denen Proben oder Kitbestandteile verwendet werden nicht rauchen essen oder Kosmetika verwenden e Beim Umgang mit Proben oder Reagenzien Einweg Latexhandschuhe tragen Die Verunreinigung von Reagenzien oder Proben mit Mikroben kann zu falschen Ergebnissen f hren e Der Gebrauch sollte gem der Vorschriften einer entsprechenden nationalen Gefahrenstoff Sicherheitsrichtlinie erfolgen e Reagenzien nicht nach dem auf dem Kit Etikett angegebenen Verfallsdatum verwenden e Alle im Kit Protokoll angegebenen Mengen m ssen genau eingehalten werden Optimale Ergebnisse k nnen nur durch Verwendung kalibrierter Pipetten und Mikrotiterplatten Leseger te erreicht werden e Komponenten von Kits mit unterschiedlichen Lotnummern nicht untereinander vertauschen Es wird empfohlen keine Wells von verschiedenen Platten zu verwenden auch nicht wenn es sich um das gleiche Lot handelt Die Kits k nnen unter anderen Bedingungen gelagert oder versendet worden sein so dass die Bindungscharakteristik der Platten leicht unterschiedlich ausf llt e Chemikalien und zubereitete oder bereits benutzte Reagenzien m ssen gem den nationalen Gefahrenstoffvorschriften wie gef hrlicher Abfall behandelt werden e Materialsicherheitsdatenbl tter f r dieses Produkt sind auf Anfrag
7. Logistics Altri funzioni usati per l elaborazioni dei dati possono dare risultati leggermente differenti La concentrazione dei campioni pu essere determinata direttamente dalla curva standard Campioni con una concentrazione piu elevata dello standard piu concentrato devono essere diluiti Di questo fattore di diluizione deve essere tenuto conto per il calcolo della concentrazione 6 3 1 Esempio di una curva standard In seguito riportato un esempio di una curva standard con DRG ELISA Standard O 0 ng mL Standard 1 0 3 ng mL Standard 2 1 25 ng mL Standard Densit ottiche 450 nm Standard 3 2 5 ng mL 069 Standard 4 5 0 ng mL Standard 5 15 ng mL Standard 6 40 ng mL Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 20 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 7 VALORI NORMALI E consigliabile che ogni laboratorio determini i propri valori normali e anormali In uno studio condotto su persone apparentemente sane usando il test DRG Progesterone ELISA i seguenti valori sono stati ottenuti Donne Fase follicolare 0 2 1 4 ng mL Fase luteale 4 25 ng mL Menopausa 0 1 1 ng mL Uomini 0 1 1 ng mL 8 CONTROLLO QUALIT consigliabile utilizzare i campioni controllo secondo le norme di legge Attraverso l utilizzo dei campioni controllo si pu raggiungere una verifica dei risultati giorno per giorno Dovrebbero essere adoperati campioni controllo sia con un livello normale sia con uno patologico Le referenze con
8. Nur eine solche Vorbereitung garantiert gleiche Zeiten f r jeden Pipettiervorgang ohne Pausen Als generelle Regel gilt dass die enzymatische Reaktion linear proportional zu Zeit und Temperatur ist Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 12 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 6 2 Testdurchf hrung Jeder Lauf muss eine Standardkurve beinhalten Pro NA a Die ben tigte Anzahl Wells in der Halterung befestigen Je 25 uL Standards Controls und Proben mit neuen Plastikspitzen in die entsprechenden Wells geben 5 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren 200 pL Enzyme Conjugate in jedes Well geben Fur 10 Sekunden gut sch tteln Es ist sehr wichtig in diesem Schritt eine komplette Durchmischung zu erreichen 60 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren Den Inhalt der Wells kraftig aussch tteln Wells 3mal mit verd nnter Waschl sung waschen Verbleibende Flussigkeit durch Ausklopfen der Wells auf saugfahigem Papier entfernen Achtung Die Sensitivitat und Prazision dieses Assays wird erheblich beeinflusst von der korrekten Durchf hrung des Waschschrittes 200 uL Substrate Solution in jedes Well geben 15 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren Die enzymatische Reaktion durch Zugabe von 100 uL Stop Solution in jedes Well abstoppen Die Optische Dichte bei 450 10 nm mit einem Mikrotiterplatten Leseger t innerhalb von 10 Minuten nach Zugabe der Stoppl sung bestimmen 6 3 Ergebnisermittlung Die durchschnittlichen Werte der Optisch
9. Testbeginn bis zu 24 Stunden bei 2 8 C gelagert werden F r eine l ngere Aufbewahrung sollten die Proben eingefroren bei 20 C bis zum Testbeginn gelagert werden Nur einmal einfrieren Aufgetaute Proben sollten vor Testbeginn vorsichtig durchmischt werden ohne Schaumbildung 5 3 Probenverd nnung Wenn in einem ersten Testdurchlauf bei einer Probe eine Konzentration h her als der h chste Standard gefunden wird kann diese Probe 1 10 oder 1 100 mit Standard 0 weiter verd nnt und nochmals bestimmt werden Die Verd nnung muss jedoch bei der Berechnung der Konzentration beachtet werden Beispiel a Verd nnung 1 10 10 uL Serum 90 uL Standard O gr ndlich mischen b Verd nnung 1 100 10 uL Verd nnung a 1 10 90 uL Standard O gr ndlich mischen 6 TESTDURCHF HRUNG 6 1 Allgemeine Hinweise Alle Reagenzien und Proben m ssen vor Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht und gut durchgemischt werden Dabei sollte Schaumbildung vermieden werden Wenn die Testdurchf hrung einmal begonnen wurde muss sie ohne Unterbrechung zu Ende gef hrt werden F r jeden Standard jede Kontrolle oder Probe eine neue Plastikspitze verwenden um Verschleppungen zu vermeiden Die Optische Dichte ist abh ngig von Inkubationszeit und Temperatur Deshalb ist es notwendig vor Beginn der Testdurchf hrung alle Reagenzien in einen arbeitsbereiten Zustand zu bringen die Deckel der Flaschchen zu ffnen alle ben tigten Wells in den Halter zu setzen
10. con la Soluci n de parada Puede causar irritaci n y quemaduras en al piel 6 Wash Solution Soluci n de lavado 1 vial 30 mL concentrado 40X ver Preparaci n de los Reactivos BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane Bromonitrodioxano MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Metilisotiazolona Nota Se puede solicitar el Standard 0 para la diluci n de la muestra 4 1 1 Equipamiento y material requerido pero no provisto Lector de microplacas calibrado 450 10 nm ej DRG Instruments Microtiter Plate Reader Micropipetas de precisi n variable calibradas Papel absorbente Agua destilada 4 2 Almacenamiento y estabilidad del kit Cuando se almacena a 2 8 C los reactivos sin abrir mantienen su reactividad hasta la fecha de caducidad No utilizar los reactivos mas alla de esta fecha Los reactivos abiertos han de almacenarse a 2 8 C Las placas multipocillo han de almacenarse a 2 8 C Una vez se ha abierto la bolsa hay que tener cuidado y cerrarla de nuevo Los kits abiertos conservan su actividad durante dos meses si se almacenan como se ha descrito arriba 4 3 Preparaci n de los Reactivos Dejar que todos los reactivos y el n mero requerido de tiras alcancen la temperatura ambiente antes de usarse Wash Solution Mezclar 30 mL de Wash Solution concentrada con 1170 mL de agua desionizada hasta un volumen final de 1200 mL La soluci n del lavado diluida es estable durante 2 semanas a temperatura ambie
11. data di scadenza indicata Non usare reagenti oltre questa data Tutti i reagenti aperti devono essere magazzinati a 2 8 C micropozzetti devono essere magazzinati a 2 8 C Una volta aperti i pacchi questi devono essere richiusi accuratamente Test kits aperti rimangono attivi per due mesi se magazzinati alle condizioni sopra descritte 4 3 Preparazione dei reagenti Prima dell uso portare tutti i reagenti e il numero necessario di pozzetti a temperatura ambiente Wash Solution Diluire 30 mL della soluzione di lavaggio concentrata con 1170 mL di acqua deionizzata fino ad un volume finale di 1200 mL La soluzione di lavaggio diluita stabile per 2 settimane a temperatura ambiente 4 4 Smaltimento del kit Lo smaltimento del kit deve avvenire secondo le regole a norma di legge Informazioni particolareggiate per questo prodotto si trovano nel regolamento di sicurezza capitolo 13 4 5 Test kits danneggiati Nel caso di gravi danneggiamenti del kit o dei suoi componenti deve avvenire una dichiarazione scritta alla ditta DRG al piu tardi una settimana dopo il ricevimento del kit Componenti danneggiati non dovrebbero essere utilizzati per il test Questi componenti devono essere magazzinati fino ala soluzione del problema Dopo di che essi devono essere smaltiti secondo le norme ufficiali Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 18 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 5 CAMPIONI Siero o plasma EDTA Eparina or citrate plasma pu es
12. from the mean minus two standard deviations of twenty 20 replicate analyses of Standard 0 and was found to be 0 045 ng mL 9 4 Precision 9 4 1 Intra Assay Variation The within assay variability is shown below Mean ng mL CV 2 20 467 699 9 4 2 Inter Assay Variation The between assay variability is shown below 1 12 0 56 099 9 5 Recovery Samples have been spiked by adding Progesterone solutions with known concentrations in a 1 1 ratio The expected values were calculated by addition of half of the values determined for the undiluted samples and half of the values of the known solutions The Recovery has been calculated by multiplication of the ratio of the measurements and the expected values with 100 Added Concentration Measured Conc Expected Conc Recovery 1 1 v v ng mL ng mL ng mL in Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 7 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 9 6 Linearity Measured Conc Expected Conc Recovery ng mL ng mL None 1 63 1 63 1 2 0 75 0 82 92 0 1 1 4 0 46 0 41 111 9 1 8 0 20 0 20 99 1 1 16 0 11 0 10 107 0 10 LIMITATIONS OF USE 10 1 Interfering Substances Any improper handling of samples or modification of this test might influence the results Haemoglobin up to 4 mg mL Bilirubin up to 0 5 mg mL and Triglyceride up to 1 8 mg mL have no influence on the assay results 10 2 Drug Interferences Until today no substances drugs are know
13. i rispettivi risultati del laboratorio QC sono elencati nel QC certificato che allegato al kit valori riportati nel QC certificato si riferiscono al lotto del kit attuale e dovrebbero essere utilizzati per un raffronto dei risultati altres consigliabile di partecipare a programmi di sicurezza sulla qualit nazionali o internazionali per assicurarsi dell esattezza dei risultati Appropriati metodi statistici per l analisi dei valori controllo e delle rappresentazioni grafici dovrebbero essere adoperati Nel caso che i risultati del test non combaciano con il campo di accettazione indicato dal materiale di controllo i risultati dei pazienti devono essere considerati invalidi In questo caso si prega di controllare i seguenti fattori d errore pipette cronometri fotometro data di scadenza dei reagenti condizione di magazzinaggio e d incubazione metodi di aspirazione e di lavaggio Se dopo il controllo dei suddetti fattori non rilevabile alcun errore si prega di contattare il fornitore o direttamente la ditta DRG 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 9 1 Assay Dynamic Range Le concentrazioni determinabili con questo test stanno tra O 40 ng mL 9 2 Specificit degli anticorpi reazioni ad incrocio seguenti reagenti sono stati testati per la loro capacit di dare reazioni incrociate con questo test 11 Desoxycorticosterone DHEA S Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 21 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 9 3 Sensitiv
14. lot numbers It is advised not to exchange wells of different plates even of the same lot The kits may have been shipped or stored under different conditions and the binding characteristics of the plates may result slightly different e Chemicals and prepared or used reagents have to be treated as hazardous waste according the national biohazard safety guideline or regulation e Safety Data Sheets for this product are available upon request directly from DRG Instruments GmbH e The Safety Data Sheets fit the demands of EU Guideline 91 155 EC 4 KIT COMPONENTS 4 1 Contents of the Kit 1 Microtiterwells 12x8 break apart strips 96 wells Wells coated with anti Progesterone antibody polyclonal 2 Standard Standard 0 6 7 vials 1 mL ready to use Concentrations 0 0 3 1 25 2 5 5 15 40 ng mL Conversion 1 ng mL 3 18 nmol L contain 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate as preservative 3 Enzyme Conjugate 1 vial 25 mL ready to use Progesterone conjugated to horseradish Peroxidase contain 0 03 Proclin 300 0 015 BND and 0 010 MIT as preservative 4 Substrate Solution 1 vial 25 mL ready to use TMB 5 Stop Solution 1 vial 14 mL ready to use contains 0 5M H2SO Avoid contact with the stop solution It may cause skin irritations and burns 6 Wash Solution 1 vial 30 mL 40X concentrated see Preparation of Reagents DND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Note Additional S
15. mediante la adici n de 100 pL de Stop Solution a cada pocillo Leer la OD a 450 10 nm con un lector de microplacas dentro de los 10 minutos despu s de la adici n de la Stop Solution C lculo de los Resultados Calcular los valores de absorbancia media para cada conjunto de est ndares controles y muestras de pacientes Construir una curva est ndar mediante la representaci n de la absorbancia media obtenida para cada est ndar frente a su concentraci n con el valor de absorbancia en el eje vertical Y y la concentraci n en el eje horizontal X Usando el valor de absorbancia media de cada muestra determinar la concentraci n correspondiente a partir de la curva est ndar M todo automatizado Los resultados en la IFU se han calculado autom ticamente usando una curva de regresi n 4 PL 4 Par metros Log sticos Otras funciones de regresi n dar n lugar a resultados sensiblemente diferentes La concentraci n de las muestra puede leerse directamente de la curva de est ndares Las muestras con concentraciones superiores al mayor est ndar han de diluirse Para el c lculo de las concentraciones hay que tener en cuenta el factor de diluci n 6 3 1 Ejemplo de una Curva Est ndar Tipica Los siguientes datos son solamente para la explicaci n y no pueden ser utilizados en lugar de los datos generados en el momento del ensayo Unidades pticas 450 nm Standard 2 1 25 ng mL Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 26
16. 2 166 001 para plasma Heparina Sarstedt Monovette tapa naranja 02 165 001 para plasma Citrato Sarstedt Monovette tapa verde 02 167 001 5 2 Almacenamiento de las muestras Las muestras deben ser tapadas y pueden ser almacenadas hasta 24 horas a 2 8 C antes del ensayo Las muestras almacenadas por un per odo de tiempo mas largo han de congelarse s lo una vez a 20 C antes del ensayo Las muestras descongeladas deben invertirse varias veces antes del ensayo 5 3 Diluci n de las muestras Si en un ensayo inicial se encuentra una muestra que presenta valores mayores que el est ndar mas concentrado ha de diluirse con Standard 0 y volver a ensayarse como se describe en el Procedimiento de Ensayo Para el c lculo de las concentraciones habr que tener en cuenta el factor de diluci n Ejemplo a diluci n 1 10 10 pL Suero 90 uL Standard 0 mezclar totalmente b diluci n 1 100 10 uL diluci n a 1 10 90 uL Standard O mezclar totalmente 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 6 1 Consideraciones generales Todos los reactivos y muestras han de estar a temperatura ambiente antes de su uso Todos los reactivos deben mezclarse sin formar espuma Una vez se ha comenzado el ensayo deben completarse todos los pasos sin interrupci n Utilizar puntas de pipeta de pl stico nuevas para cada est ndar control o muestra para evitar combinaciones cruzadas La absorbancia es funci n del tiempo de incubaci n y
17. DRG Progesterone ELISA EIA 1561 7 VALORESESPERADOS Se recomienda encarecidamente que cada laboratorio determine sus valores normales e inusuales En un estudio con adultos aparentemente sanos utilizando el DRG Progesterone ELISA se observaron los siguientes valores Mujeres Fase Folicular 0 2 1 4 ng mL Fase Luteal 4 25 ng mL Menopausia 0 1 1 ng mL Hombres 0 1 1 ng mL 8 CONTROL DE CALIDAD Se recomienda usar muestras control de acuerdo con las leyes estatales y federales El uso de muestras control ser recomienda para asegurar la validez diaria de los resultados Usar controles tanto a niveles normal como patol gico Los controles y los correspondientes resultados del Laboratorio de control de calidad est n fijados en el certificado de control de calidad que acompa an al kit Los valores y los rangos fijados en la hoja del control de calidad se refieren siempre al kit actual y deben usarse para la comparaci n directa de los resultados Es recomendable tambi n hacer uso de programas de Aseguramiento de la Calidad nacionales o internacionales para asegurar la exactitud de los resultados Utilizar m todos estad sticos apropiados para el an lisis de los valores y tendencia de los controles Si los resultados del ensayo no se ajustan a los rangos aceptables establecidos en los controles los resultados obtenidos de los pacientes han de considerarse inv lidos En este caso por favor comprobar las siguientes reas t cnicas
18. ERWARTETE WERTE Es wird empfohlen dass jedes Labor seine eigenen normalen und abnormalen Werte ermittelt In einer Studie wurden die Proben von gesunden Erwachsenen untersucht Dabei ergaben sich mit dem DRG Progesterone ELISA folgende Werte Frauen Follikelphase 0 2 1 4 ng mL Lutealphase 4 25 ng mL Menopause 0 1 1 ng mL M nner 0 1 1 ng mL 8 QUALITATS KONTROLLE Es wird empfohlen die Kontrollproben gem den nationalen gesetzlichen Bestimmungen einzusetzen Durch die Verwendung von Kontrollproben wird eine Tag zu Tag berpr fung der Ergebnisse erzielt Es sollten Kontrollen sowohl mit normalem als auch pathologischem Level eingesetzt werden Die Kontrollen mit den entsprechenden Ergebnissen des QC Labors sind im QC Zertifikat das dem Kit beiliegt aufgef hrt Die im QC Blatt angegebenen Werte und Bereiche beziehen sich stets auf die aktuelle Kitcharge und sollten zum direkten Vergleich der Ergebnisse verwendet werden Es wird ebenfalls empfohlen an nationalen oder internationalen Qualit tssicherungs Programmen teilzunehmen um die Genauigkeit der Ergebnisse zu sichern Es sollten geeignete statistische Methoden zur Analyse von Kontroll Werten und Trends angewendet werden Wenn die Ergebnisse des Assays nicht mit den angegebenen Akzeptanzbereichen des Kontrollmaterials bereinstimmen sollten die Patientenergebnisse als ung ltig eingestuft werden In diesem Fall berpr fen Sie bitte die folgenden Bereiche Pipetten und Zeit
19. Logistics curve fit 4 Parameter Logistics is the preferred method Other data reduction functions may give slightly different results The concentration of the samples can be read directly from this standard curve Samples with concentrations higher than that of the highest standard have to be further diluted For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account 1 Example of Typical Standard Curve The following data is for demonstration only and cannot be used in place of data generations at the time of assay Standard 3 2 5 ng mL 069 Standard 4 5 0 ng mL Standard 5 15 ng mL Standard 6 40 ng mL Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 5 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 7 EXPECTED VALUES It is strongly recommended that each laboratory should determine its own normal and abnormal values In a study conducted with apparently normal healthy adults using the DRG Progesterone ELISA the following values are observed Normal Women Follicular phase 0 2 1 4 ng mL Luteal phase 4 25 ng mL Menopause 0 1 1 ng mL Normal men 0 1 1 ng mL 8 QUALITY CONTROL Good laboratory practice requires that controls be run with each calibration curve A statistically significant number of controls should be assayed to establish mean values and acceptable ranges to assure proper performance It is recommended to use control samples according to state and federal regulations The use of contro
20. Pipeteo y tiempo empleado fot metro fecha de caducidad de los reactivos condiciones de almacenamiento e incubaci n m todos de aspiraci n y lavado Despu s de comprobar los asuntos mencionados arriba sin encontrar ning n error contactar con su distribuidor o con DRG directamente 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 9 1 Rango din mico del ensayo El rango del ensayo se encuentra entre 0 40 ng mL 9 2 Especificidad de los Anticuerpos Reactividad Cruzada Consultar el manual de usuario en ingl s 9 3 Sensibilidad Anal tica La sensibilidad anal tica se calcul a partir de la media menos dos desviaciones est ndar de veinte 20 r plicas del Est ndar 0 y result ser 0 045 ng mL 9 4 Precisi n Consultar el manual de usuario en ingl s 9 5 Recuperaci n Consultar el manual de usuario en ingl s 9 6 Linealidad Consultar el manual de usuario en ingl s Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 27 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 10 LIMITACIONES DE USO Cualquier manipulaci n inadecuada de las muestras o modificaciones del ensayo pueden influenciar los resultados 10 1 Sustancias que pueden interferir Hemoglobina hasta 4 mg mL Bilirrubina hasta 0 5 mg mL y Triglic ridos hasta 1 8 mg mL no influencian los resultados del ensayo 10 2 Interferencias con drogas Hasta ahora no se han encontrado sustancias drogas conocidas por nosotros que tengan influencia en la medida de Progesterona en una muestra 10 3
21. RECAUTIONS D UTILISATION 29 4 BESTANDTEILE DES KITS 11 4 COMPOSITION DU KIT 30 5 PROBENVORBEREITUNG 12 5 ECHANTILLON 2a 31 6 TESTDURCHEUHRUNG een 12 6 REALISATION DU TEST 31 7 ERWARTETE WERTE 14 7 VALEURS ATTENDUES 33 8 QUALIT TS KONTROLLE nnnnnneeee 14 8 CONTROLE DE QUALITE 33 9 ASSAY CHARACTERISTIKA 14 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 33 10 GRENZEN DES TESTS 15 10 LIMITES D UTILISATION 34 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 16 11 AGPECTSGSLEGAUSN i 34 12 REFERENZEN sas este 16 12 REFERENCES seien 34 1 INTRODUZIONE i 17 SYMBOLS USED WITH DRG ELISA S 35 2 PRINCIPIO DEL TEST eee 17 3 PRECAUZIONI ii 17 4 COMPONENTI DEL KIT 18 5 CAMPIONI issues iii 19 6 ATTUAZIONE DEL TEST 19 7 VALORI NORMALI ects eee teens 21 8 CONTROLLO QUALIT 21 9 CARATTERISTICHE DEL TEST 21 10 LIMITAZIONE DEL TEST ee 22 11 ASPETTI LEGALI iii 22 12 BIBLIOGRAFIA seer eeeneeees 22 Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 1 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 English 1 INTRODUCTION The DRG Progesterone Enzyme Immunoassay Kit provides materials for the quantitative deter
22. Users Manual Progesterone ELISA EIA 1561 Y 96 wells 08 07 w Legal Manufacturer Distributed by DRG DRG Instruments GmbH Germany Division of DRG International Inc Frauenbergstr 18 D 35039 Marburg Telefon 49 0 6421 17000 Fax 49 0 642 11 1700 50 Internet www drg diagnostics de E mail drg drg diagnostics de CE DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Contents Inhaltsverzeichnis Contenuti Contenido Contenu 1 INTRODUCTION 2 1 INTRODUCCI N ae 23 2 PRINCIPLE OF THE TEST 2 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO 23 3 PRECAUTIONS soitoista iaei 2 3 PRECAUCIONES i 23 4 KIT COMPONENTS in 3 4 COMPONENTES DEL KIT 24 5 SPECIMEN ns ee dE 4 5 MUESTRAS cca nt nn 25 6 TEST PROCEDURE 4 6 PROCEDIMIENTO DE ENSAYO 25 7 EXPECTED VALUES i 6 7 VALORES ESPERADOS n 27 8 QUALITY CONTROL 6 8 CONTROL DE CALIDAD ee 27 9 ASSAY CHARACTERISTICS 6 9 CARACTER STICAS DEL ENSAYO 27 10 LIMITATIONS OF USE eee 8 10 LIMITACIONES DE USO ee 28 11 LEGAL ASPECTS i 9 11 ASPECTOS LEGALES 28 12 gt REFERENCES eegener 9 12 REFERENCIAS eerie 28 1 EINLEITUNG 2 nenn 10 1 INTRODUCTION ii 29 2 TES TPRINZIP neu 10 2 PRINCIPE DU TEST 29 3 VORSICHTSMARNAHMEN 10 3 P
23. conto Esempio a diluizione 1 10 10 uL siero 90 uL Standard O agitare bene b diluizione 1 100 10 uL della diluizione a 90 uL Standard 0 agitare bene 6 ATTUAZIONE DEL TEST 6 1 Indicazioni generali Tutti i reagenti e i campioni devono essere portati a temperatura ambiente e ben mescolati prima dell uso Evitare la formazione di schiume Una volta iniziato il procedimento del test questo deve essere portato alla fine senza interruzione Per ogni componente standard controllo o campione necessario utilizzare una nuova punta monouso per evitare reazioni incrociate La densit ottica dipende dal tempo d incubazione e dalla temperatura Perci si rende necessario di preparare tutti i reagenti di aprire i tappi dei flaconi e di appostare tutti i pozzetti nelle appropriate posizioni Soltanto una tale preparazione garantisce gli stessi tempi per ogni processo di pipettamento Come regola generale vale che la reazione enzimatica si svolge linearmente proporzionale con il tempo e con la temperatura Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 19 6 2 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Eseguimento del test Ogni analisi deve includere una curva standard 1 2 6 3 Ni Fissare i pozzetti necessari sul supporto Pipettare 25 uL di ogni Standard controllo e campione nei pozzetti cambiando ogni volta la punta monouso Incubare per 5 minuti a temperatura ambiente Pipettare 200 HL Enzyme Con
24. cord avec l ensemble du tableau clinique du patient Le r sultat du test en lui m me ne doit en aucun cas tre le seul d terminant des suites th rapeutiques suivre 11 3 Responsabilit Toute modification du kit et ou change ou m lange d un des composants de diff rents lots d un kit un autre pourrait affecter de fa on n gative les r sultats attendus et la validit du test dans son ensemble De telles modifications ou changes invalident toute r clamation pour remplacement Toutes les r clamations soumises relatives au paragraphe 11 2 et dues une mauvaise interpr tation des r sultats de laboratoire de la part du client sont galement invalides N anmoins en cas de r clamation la responsabilit du fabricant n est pas de d passer les limites de la valeur du kit Tout dommage caus au kit lors de son transport n est pas du ressort de la responsabilit du fabricant 12 REFERENCES Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 34 SYMBOLS USED WITH DRG ELISA S DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Sym bol English Deutsch Francais Espanol Italiano C European Conformity Kee Conforme aux normes Conformidad europea Conformit europea kennzeichnung europ ennes z Consult instructions for use Gebrauchsanweisung beachten Consulter les instructions d utilisation Consulte las Instrucciones Consultare le istruzioni per l uso
25. ctive 08 2007 vk 29 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 COMPOSITION DU KIT 4 1 Contenu du kit 1 Microtiterwells Plaques de micro titratio 12x8 d tacher barrettes plaques de 96 puits Les puits sont recouverts avec un anticorps anti Progest rone polyclonal 2 Standard Standard 0 6 7 flacons 1 mL pr t l emploi Concentrations 0 0 3 1 25 2 5 5 15 40 ng mL Conversion 1 ng mL 3 18 nmol L Contient 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate comme agent de conservation 3 Enzyme Conjugate Conjugu enzymatique 1 flacon 25 mL pr t l emploi Progest rone conjugu e la HRP contient 0 03 de Proclin 300 0 015 BND et 0 010 MIT comme agent de conservation 4 Substrate Solution Solution substrat 1 flacon 25 mL pr t l emploi T tram thylbenzidine TMB 5 Stop Solution Solution d arr t 1 flacon 14 mL pr t l emploi contient 0 5M de H 504 Eviter les contacts avec la solution stop Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau 6 Wash Solution Solution de lavage 1 flacon concentr 40X voir Pr paration des r actifs BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane Bromonitrodioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one M thylisothiazolone Remarque Un Standard 0 suppl mentaire peut tre fourni sur demande 4 1 1 Equipementet mat riel requis mais non fournis Un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr 450 10 nm ex le lecteur de
26. der Komponenten muss die Firma DRG in schriftlicher Form spatestens eine Woche nach Erhalt des Kits informiert werden Stark besch digte Einzelkomponenten sollten nicht f r den Testlauf verwendet werden Sie m ssen gelagert werden bis eine endgultige L sung gefunden wurde Danach sollten Sie gem t den offiziellen Richtlinien entsorgt werden 5 PROBENVORBEREITUNG Serum oder Plasma EDTA Heparin oder Zitratplasma kann in diesem Test als Probenmaterial eingesetzt werden Lipamische ikterische und oder stark hamolysierte Proben sollten nicht verwendet werden Achtung Proben die Natriumazid enthalten sollten f r diesen Test nicht verwendet werden 5 1 Probenentnahme Serum Blut durch Venenpunktion entnehmen z B mit Sarstedt Monovette 02 1388 001 gerinnen lassen und das Serum durch Zentrifugation bei Raumtemperatur abtrennen Vor der Zentrifugation muss die Gerinnung vollstandig abgeschlossen sein Bei Patienten die Antikoagulantien erhalten kann die Gerinnungszeit langer dauern Plasma Die Blutentnahme erfolgt mit R hrchen die ein Antikoagulans enthalten Das Plasma wird als Uberstand nach einer Zentrifugation gewonnen z B f r EDTA Plasma Sarstedt Monovette roter Deckel 02 166 001 f r Heparinplasma Sarstedt Monovette oranger Deckel 02 165 001 f r Zitratplasma Sarstedt Monovette gr ner Deckel 02 167 001 5 2 Probenaufbewahrung Proben sollten stets gut verschlossen sein und k nnen vor
27. di prodotti cosmetici e Nella manutenzione dei campioni o reagenti del kit portare guanti di latex monouso La contaminazione dei reagenti o dei campioni con microbi pu dare risultati falsi e L utilizzo dovrebbe avvenire secondo regole che seguono le rispettive norme di sicurezza nazionali sulle sostanze nocive e Non utilizzare i reagenti dopo la scadenza indicata sul kit e Ogni indicazione sulla quantit indicata del protocollo del kit deve essere accuratamente seguito Risultati ottimali possono essere ottenuti soltanto con l uso di pipette calibrate e spettrofotometro calibrato e Componenti del kit con numeri di lotto diversi non devono essere combinati consigliabile di non utilizzare pozzetti di piastre diversi anche se si tratta dello stesso lotto kit potrebbero essere stati magazzinati o spediti a condizioni diverse cosicch le caratteristiche di legame potrebbero divergere leggermente e componenti chimici e reagenti preparati o gi utilizzati devono essere trattati e smaltiti secondo le norme di sicurezza nazionali sulle sostanze nocive e regolamenti di sicurezza di questo prodotto possono essere richiesti direttamente dalla ditta DRG Instruments GmbH regolamenti di sicurezza corrispondono alle norme EU 91 155 EC e 00 Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 17 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 COMPONENTI DEL KIT 4 1 Contenuto del kit 1 Microtiterwells Micropozetti 12x8 file separatamente staccab
28. e 08 2007 vk 32 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 7 VALEURS ATTENDUES Il est fortement recommand chaque laboratoire de d terminer ses propres valeurs normales ou anormales Dans une tude r alis e avec des adultes normaux et sains l aide du kit DRG Progesterone ELISA les valeurs suivantes sont observ es Femmes Phase folliculaire 0 2 1 4 ng mL Phase lut ale 4 25 ng mL m nopaus e 0 1 1 ng mL Hommes 0 1 1ng mL 8 CONTROLE DE QUALITE Il est recommand d utiliser les chantillons contr les selon les r glementations nationales en vigueur L utilisation des chantillons contr les est recommand afin de s assurer jour apr s jour de la validit des r sultats Utiliser les contr les de valeurs normales et pathologiques Les contr les et les r sultats correspondants issus du laboratoire QC sont mentionn s dans le certificat QC fourni avec le kit Les valeurs et les limites mentionn es sur la fiche QC font toujours r f rence au lot de kit courant et doivent tre utilis es pour une comparaison directe avec les r sultats Il est galement recommand d utiliser les programmes d valuation de qualit nationaux ou internationaux afin de s assurer de l exactitude des r sultats Utiliser les m thodes d analyses statistiques appropri es pour l analyse des valeurs contr les et des tendances Si les r sultats ne correspondent pas aux limites tablies des contr les les r sultats concer
29. e clinically used to confirm ovulation and normal function of the corpus luteum in non pregnant women If ovulation does not occur the corpus luteum is not formed and no cyclical rise of progesterone in plasma is observed Abnormal progesterone secretion has been implicated in premenstrual tension irregular shedding of endometrium dysmenorrhoea and luteal insufficiency Progesterone concentration can vary not only from subject to subject but also in the same person from day to day or even from hour to hour Consequently in gynecological disorders or abnormal pregnancies serial measurements rather than single ones are recommended for a proper interpretation of results During pregnancy progesterone is widely produced by placenta and plasma levels rise steadily achieving values as high as 200 ng mL at term 2 PRINCIPLE OF THE TEST The DRG Progesterone ELISA Kit is a solid phase enzyme linked immunosorbent assay ELISA based on the principle of competitive binding The microtiter wells are coated with a polyclonal antibody directed towards an antigenic site on the Progesterone molecule Endogenous Progesterone of a patient sample competes with a Progesterone horseradish peroxidase conjugate for binding to the coated antibody After incubation the unbound conjugate is washed off The amount of bound peroxidase conjugate is reverse proportional to the concentration of Progesterone in the sample After addition of the substrate solution the intensi
30. e direkt von der Firma DRG Instruments GmbH erh ltlich Die Materialsicherheitsdatenbl tter entsprechen den Verordnungen der EU Richtlinie 91 155 EC Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 10 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 BESTANDTEILE DES KITS 4 1 Kitinhalt 1 Microtiterwells 96 Wells 12x8 Wells einzeln brechbar Mit polyklonalen anti Progesteron Antik rper beschichtet 2 Standard Standard 0 6 7 Fl schchen je 1 mL gebrauchsfertig Konzentrationen 0 0 3 1 25 2 5 5 15 40 ng mL Umrechnungsfaktor 1 ng mL 3 18 nmol L Enthalt 0 03 Proclin 300 0 005 Gentamicinsulfat als Konservierungsstoff 3 Enzyme Conjugate Enzymkonjugat 1 Flaschchen 25 mL gebrauchsfertig Progesteron mit Meerrettichperoxidase konjugiert Enthalt 0 03 Proclin 300 0 015 BND und 0 010 MIT als Konservierungsstoff 4 Substrate Solution Substratl sung 1 Fl schchen 25 mL gebrauchsfertig Substratl sung TMB 5 Stop Solution Stoppl sung 1 Fl schchen 14 mL gebrauchsfertig enthalt 0 5M H SO Kontakt mit der Stoppl sung vermeiden Kann Hautreizungen und Verbrennungen verursachen 6 Wash Solution Waschl sung 40X konzentriert 1 Flaschchen 30 mL siehe Vorbereitung der Reagenzien BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Anmerkung Zus tzlicher Standard 0 zur Probenverd nnung ist auf Anfrage erh ltlich 4 1 1 Nicht im Kit enthaltene aber erforderliche Ger te und Mat
31. eingeleitet werden Das Testergebnis allein sollte niemals als alleinige Grundlage f r die Einleitung therapeutischer Konsequenzen dienen 11 3 Haftung Jegliche Ver nderungen des Testkits und oder Austausch oder Vermischung von Komponenten unterschiedlicher Chargen von einem Testkit zu einem anderen k nnen die gew nschten Ergebnisse und die G ltigkeit des gesamten Tests negativ beeinflussen Solche Ver nderungen und oder Austausch haben den Ausschluss jeglicher Ersatzanspr che zur Folge Reklamationen die aufgrund von Falschinterpretation von Laborergebnissen durch den Kunden gem Punkt 11 2 erfolgen sind ebenfalls abzuweisen Im Falle jeglicher Reklamation ist die Haftung des Herstellers maximal auf den Wert des Testkits beschr nkt Jegliche Sch den die w hrend des Transports am Kit entstanden sind unterliegen nicht der Haftung des Herstellers 12 REFERENZEN Angaben zu den Referenzen entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 16 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 1 INTRODUZIONE Il test immuno enzimatico DRG Progesterone contiene materiale per la determinazione quantitativa di Progesterone in siero e plasma Questo test kit adatto soltanto per l uso diagnostico 2 PRINCIPIO DEL TEST Il test Progesterone ELISA un test immunologico in fase solida con enzimi ancorati su un substrato ELISA basato sul principio del legame competitivo micropozzet
32. en Dichte OD f r jedes Set von Standards Controls und Patientenproben bestimmen Eine Standardkurve ermitteln durch Auftragen der mittleren Optischen Dichte jedes Standards gegen die Konzentration wobei der OD Wert auf der vertikalen Y Achse und die Konzentration auf der horizontalen X Achse eingetragen wird Unter Verwendung der mittleren OD wird f r jede Probe die entsprechende Konzentration aus der Standardkurve ermittelt Automatische Methode Die in der Arbeitsanleitung ermittelten Werte wurden automatisch mit Hilfe der 4 Parameter Gleichung 4PL 4 Parameter Logistics 4 Parameter Rodbard bestimmt Andere Auswertungsfunktionen k nnen leicht abweichende Werte ergeben Die Konzentration der Proben kann direkt von der Standardkurve abgelesen werden Proben die eine h here Konzentration als die des h chsten Standards enthalten m ssen verd nnt werden Dieser Verd nnungsfaktor muss bei der Berechnung der Konzentration beachtet werden 6 3 1 Beispiel f r eine Standardkurve Nachfolgend wird ein typisches Beispiel f r eine Standardkurve mit dem DRG ELISA gezeigt Diese Werte sollten nicht zur Berechnung von Patientendaten verwendet werden Standard Optische Dichte 450nm Standard O 0 ng mL Standard 1 0 3 ng mL Standard 2 1 25 ng mL 068 Standard 3 2 5 ng mL Standard 4 5 0 ng mL Standard 5 15 ng mL Standard 6 40 ng mL Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 13 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 7
33. erialien Kalibriertes Mikrotiterplattenleseger t mit 450 10 nm Filter z B das DRG Instruments Mikrotiterplattenleseger t Kalibrierte variable Pr zisions Mikropipette Saugf higes Papier Aqua dest 4 2 Lagerung und Haltbarkeit des Kits Die ungedffneten Reagenzien behalten bei Lagerung um 2 8 C ihre Reaktivitat bis zum Verfallsdatum Nach dem Verfallsdatum die Reagenzien nicht mehr verwenden Nach dem Offnen sollten alle Reagenzien bei 2 8 C gelagert werden Die Mikrotiterwells sollten bei 2 8 C gelagert werden Der einmal gedffnete Folienbeutel sollte stets sehr sorgfaltig wieder verschlossen werden Unter den beschriebenen Lagerbedingungen behalten gedffnete Kits zwei Monate ihre Reaktivitat 4 3 Vorbereitung der Reagenzien Alle Reagenzien sowie die ben tigte Anzahl von Wells sollen vor dem Gebrauch auf Raumtemperatur gebracht werden Wash Solution Die 40 fach konzentrierte Waschl sung 30 mL mit 1170 mL destilliertem Wasser auf ein Gesamtvolumen von 1200 mL verd nnen Die verd nnte Waschl sung ist bei Raumtemperatur f r 2 Wochen stabil 4 4 Entsorgung des Kits Die Entsorgung des Kits muss gem den gesetzlichen Vorschriften erfolgen Spezielle Informationen f r dieses Produkt finden Sie im Materialsicherheitsdatenblatt Kapitel 13 Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 11 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 5 Beschadigte Testkits Im Falle einer starken Besch digung des Testkits oder
34. ido en el ensayo 11 3 Responsabilidad Cualquier modificaci n del kit y o cambio o mezcla de cualquier componente procedentes de kits de lotes diferentes puede afectar negativamente a los resultados esperados y en la validez de todo el test Esas modificaciones y o cambios invalidad cualquier reclamaci n de reposici n Las reclamaciones emitidas debidas a una mala interpretaci n de los resultados de laboratorio por parte del comprador referidos al punto 11 2 son tambi n inv lidas A pesar de todo en el caso de cualquier reclamaci n la responsabilidad del fabricante no excede el valor del kit Cualquier da o provocado al kit durante su transporte no est sujeto a la responsabilidad del fabricante 12 REFERENCIAS Consultar el manual de usuario en ingl s Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 28 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 f d E ce l s 1 INTRODUCTION Le kit de dosage immuno enzymatique DRG Progesterone ELISA propose les mat riaux requis pour la mesure quantitative de Progest rone dans le s rum ou le plasma Ce kit est utiliser uniquement dans le cadre de tests diagnostiques in vitro 2 PRINCIPE DU TEST Le kit DRG Progesterone ELISA est bas sur une r action immuno enzymatique comp titive Les micro plaques sont recouvertes avec un anticorps polyclonal dirig contre un antig ne sp cifique de la mol cule Progest rone Le La Progest rone endog ne contenu e dans l chantillon du patient entre en comp titi
35. ili 96 pozzetti pozzetti ricoperti con l anti Progesterone anticorpo policlonale 2 Standard Standard 0 6 7 flaconi 1 mL pronto all uso Concentrazioni 0 0 3 1 25 2 5 5 15 40 ng mL Conversione 1 ng mL 3 18 nmol l Contiene 0 03 Proclin 300 0 005 gentamicin sulfate come conservante 3 Enzyme Conjugate Tracciante enzimatico 1 flacone 25 mL pronto all uso Progesterone coniugato alla perossidasi di rafano Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND e 0 010 MIT come conservante 4 Substrate Solution Soluzione di substrato 1 flacone 25 mL pronto all uso TMB benzidine tetrametilico 5 Stop Solution Soluzione d arresto 1 flacone 14 mL pronto all uso contiene 0 5M HSC Evitare il contatto con la soluzione d arresto Pu causare irritazioni cutanee e ustioni 6 Wash Solution Soluzione di lavaggio 1 flacone 30 mL concentrata 40X vedi preparazione dei reagenti BND 5 bromo 5 nitro 1 3 dioxane MIT 2 methyl 2H isothiazol 3 one Nota Ulteriore Standard 0 per la diluizione dei campioni pu essere richiesto alla ditta 4 1 1 Materiali richiesti ma non contenuti nel kit Uno spettrofotometro calibrato per micropozzetti 450 10 nm p es il DRG Instruments Microtiterplate Reader Micropipette calibrate di precisione a volume variabile Carta assorbente Acqua distillata 4 2 Magazzinaggio e stabilit del kit A 2 8 C i reagenti non aperti rimangono reattivi fino alla
36. ita analitica La sensitivit analitica stata calcolata dai valori medi meno due deviazioni standard di venti 20 repliche dello Standard 0 ed erano 0 045 ng mL 9 4 Precisione Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 5 Ritrovato Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 9 6 Linearit Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese 10 LIMITAZIONE DEL TEST 10 1 Sostanze interferenti Ogni manutenzione impropria dei campioni o modificazione del protocollo pu influenzare risultati Emoglobina fino a 4 mg mL bilirubina fino a 0 5 mg mL e trigliceridi fino a 1 8 mg mL non influenzano i risultati di questo test 10 2 Droghe interferenti Fino ad oggi nessuna sostanza farmaco conosciuta a noi che abbia influenzato la determinazione di Progesterone nel campione 10 3 Effetto Hook di alti dosaggi Nessun effetto gancio effetto hook stato osservato in questo test 11 ASPETTI LEGALI 11 1 Affidabilit dei risultati Il test deve essere eseguito esattamente secondo il protocollo dato dal produttore Inoltre l utente deve seguire le regole del GLP Good Laboratory Practice o eventualmente altre regole comportamentali o disposizioni legali Questo vale soprattutto per l uso delle referenze molto importante utilizzare un numero appropriato di referenze in parallelo ai campioni test per poter controllare l esattezza e la precisione del test risultati del
37. jugate in ogni pozzetto Agitare bene per 10 secondi E molto importante raggiungere un completo mescolamento Incubare per 60 minuti a temperatura ambiente Rovesciare la piastra per vuotare i pozzetti Lavare i pozzetti 3 volte con soluzione di lavaggio diluita 400 uL in ogni pozzetto Rimuovere le gocce d acqua rimanenti rivoltando la piastra su carta assorbente Importante La sensibilit e la precisazione di questo kit sono fortemente influenzate dal corretto eseguimento del lavaggio Aggiungere 200 uL della Substrate Solution ad ogni pozzetto Incubare per 15 minuti a temperatura ambiente Fermare la reazione enzimatica aggiungendo 100 uL della Stop Solution ad ogni pozzetto Determinare la densit ottica a 450 10 nm con un fotometro per microtiter piastre entro 10 minuti dopo l aggiunta della Stop Solution Rilevamento dei risultati Determinare i valori medi della densit ottica per ogni set di standard controlli e campioni Costruire una curva standard riportare i valori medi della densit ottica OD di ogni standard contro la rispettiva concentrazione dove i valori delle OD si devono trovare sull asse verticale Y e le concentrazioni sull asse orizzontale X Utilizzando il valore medio delle OD per ogni campione si determina la rispettiva concentrazione dalla curva standard Metodo automatico risultati in IFU sono stati calcolati automaticamente usando un fitting avvicinamento con il 4 PL 4 Parameter
38. l samples is advised to assure the day to day validity of results Use controls at both normal and pathological levels The controls and the corresponding results of the QC Laboratory are stated in the QC certificate added to the kit The values and ranges stated on the QC sheet always refer to the current kit lot and should be used for direct comparison of the results It is also recommended to make use of national or international Quality Assessment programs in order to ensure the accuracy of the results Employ appropriate statistical methods for analysing control values and trends If the results of the assay do not fit to the established acceptable ranges of control materials patient results should be considered invalid In this case please check the following technical areas Pipetting and timing devices photometer expiration dates of reagents storage and incubation conditions aspiration and washing methods After checking the above mentioned items without finding any error contact your distributor or DRG directly 9 ASSAY CHARACTERISTICS 9 1 Assay Dynamic Range The range of the assay is between 0 40 ng mL 9 2 Specificity of Antibodies Cross Reactivity The following substances were tested for cross reactivity of the assay Cross Reaction Estriol Estradiol 178 Testosterone Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 6 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 9 3 Analytical Sensitivity The analytical sensitivity was calculated
39. l produttore 12 BIBLIOGRAFIA Per dettagli pi precisi consultare la metodica in inglese Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 22 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 1 INTRODUCCI N El Kit de inmunoensayo enzim tico DRG Progesterone proporciona los materiales necesarios para la determinaci n cuantitativa del Progesterona en suero y plasma Este ensayo est dise ado solo para diagn stico in vitro 2 FUNDAMENTO DEL ENSAYO El Kit DRG Progesterone ELISA es un ensayo en fase s lida de inmunoadsorci n unido a enzimas ELISA basado en el principio de uni n competitiva Los pocillos de las placas est n recubiertos con un anticuerpo policlonal dirigido contra un foci antig nico en la mol cula Progesterona En las muestras de los pacientes Progesterona compite con un conjugado Progesterona peroxidasa de r bano en la uni n al anticuerpo inmovilizado Despu s de la incubaci n el conjugado no unido se lava La cantidad de conjugado de peroxidasa unido es inversamente proporcional a la concentraci n de Progesterona en la muestra Despu s de la adici n de la soluci n sustrato la intensidad de color desarrollado es inversamente proporcional a la concentraci n de Progesterona en la muestra del paciente 3 PRECAUCIONES e Este kit es solamente para diagn stico in vitro e Para obtener informaci n de las sustancias peligrosas incluidas en el kit por favor mirar las hojas de los datos de seguridad del material e Todos los reac
40. la temperatura Antes de comenzar el ensayo se recomienda que todos los reactivos est n preparados tapas removidas todos los pocillos que se necesiten asegurados en recipiente etc Esto asegurar un tiempo similar para cada paso de pipeteo sin que haya interrupciones Como regla general la reacci n enzim tica es linealmente proporcional al tiempo y a la temperatura Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 25 6 2 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Procedimiento de ensayo Cada uno debe incluir una curva de est ndares Pea a Asegurar el n mero deseado de pocillos en el recipiente Dispensar 25 uL de cada Standard Control y muestras con puntas nuevas en los pocillos adecuados Incubar durante 5 minutes a temperatura ambiente Dispensar 200 uL de Enzyme Conjugate a cada pocillo Mezclar totalmente durante 10 segundos Es importante mezclar completamente en este paso Incubar durante 60 minutes a temperatura ambiente Sacudir en rgicamente el contenido de los pocillos Lavar los pocillos 3 veces con Wash Solution diluida 400 uL por pocillo Realizar un golpe seco de los pocillos contra el papel absorbente para eliminar las gotas residuales Nota importante La sensibilidad y la precisi n de este ensayo se ve marcadamente influenciada por la realizaci n correcta del proceso de lavado Adicionar 200 uL de Substrate Solution a cada pocillo Incubar durante 15 minutes a temperatura ambiente Parar la reacci n enzim tica
41. lity Any modification of the test kit and or exchange or mixture of any components of different lots from one test kit to another could negatively affect the intended results and validity of the overall test Such modification and or exchanges invalidate any claim for replacement Claims submitted due to customer misinterpretation of laboratory results subject to point 11 2 are also invalid Regardless in the event of any claim the manufacturer s liability is not to exceed the value of the test kit Any damage caused to the test kit during transportation is not subject to the liability of the manufacturer 12 REFERENCES 1 Filicori M Butler JP Crowley WF Jr Neuroendocrine regulation of the corpus luteum in the human J Clin Invest 73 1638 1984 2 Katt JA Duncan JA Herbon L et al The frequency of gonadotropin releasing hormone stimulation determines the number of pituitary gonadotropin releasing hormone receptors Endocrinology 1985 116 2113 3 Csapo Al Pulkkinen MO Wiest WG Effects of lutectomy and progesterone replacement therapy in early pregnancy patients Am J Obstet Gynecol 115 759 1973 4 Thomas Labor und Diagnose Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 9 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Deutsch 1 EINLEITUNG Der DRG Progesterone ELISA wird zur quantitativen Bestimmung von Progesteron in Serum und Plasma eingesetzt Nur f r In vitro Diagnostik 2 TESTPRINZIP Der DRG Progesterone ELISA ist ein Festphasen Enzymimmun
42. macenados bajo diferentes condiciones y las caracter sticas de uni n de las placas pueden resultar diferentes e Los compuestos qu micos y los reactivos preparados o utilizados han de tratarse como residuos peligrosos de acuerdo con las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas e Las hojas de los datos de seguridad de este producto est n disponibles bajo pedido directamente a DRG Instruments GmbH Las hojas de los datos de seguridad se ajustan a las demandas de las gu a europea EU Guideline 91 155 EC Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 23 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 COMPONENTES DEL KIT 4 1 Componentes del Kit 1 Microtiterwells Placas multipocillo 12x8 tiras separables 96 pocillos Pocillos recubiertos con anticuerpo anti Progesterona policlonal 2 Standard Standard 0 6 Est ndar 7 viales 1 mL listo para usar Concentraciones 0 0 3 1 25 2 5 5 15 40 ng mL Conversi n 1 ng mL 3 18 nmol L Contiene 0 03 Proclin 300 y 0 005 gentamicin sulfate como conservante 3 Enzyme Conjugate Conjugado enzim tico 1 vial 25 mL listo para usar Progesterona conjugado con la Peroxidasa de r bano Contiene 0 03 Proclin 300 0 015 BND y 0 010 MIT como conservante 4 Substrate Solution Soluci n de sustrato 1 vial 25 mL listo para usar Tetrametilbencidina TMB 5 Stop Solution Soluci n de parada 1 vial 14 mL listo para usar contiene 0 5M H2SO Evitar el contacto
43. mages importants survenus au kit ou ses composants informer la DRG au plus tard une semaine apr s r ception du kit Les composants endommag s ne doivent pas tre utilis s pour le test Ils doivent tre stock s jusqu ce qu une solution adapt e ait t trouv e Apr s cela ils doivent tre limin s selon les directives officielles en vigueur 5 ECHANTILLON S rum ou plasma EDTA H parine ou citrate plasma peuvent tre utilis s pour ce test Ne pas utiliser des chantillons h molys s ict riques ou lip miques Remarque Les chantillons contenant de l azide de sodium ne doivent pas tre utilis s pour ce test 5 1 Pr l vement et pr paration des chantillons S rum Pr lever le sang par ponction veineuse ex Sarstedt Monovette 02 1388 001 laisser coaguler puis s parer le s rum par centrifugation temp rature ambiante Ne pas centrifuger avant que la coagulation ne soit termin e Les patients sous traitement anti coagulant peuvent demander un temps de coagulation plus important Plasma Le sang total doit tre pr lev dans des tubes de centrifugation contenant un anti coagulant et centrifug imm diatement apr s le pr l vement ex pour EDTA plasma Sarstedt Monovette bouchon rouge 02 166 001 pour h parine plasma Sarstedt Monovette bouchon orange 02 165 001 pour citrate plasma Sarstedt Monovette bouchon vert 02 167 001 5 2 Conservation des chantillons
44. microplaques de DRG Instruments GmbH Des micro pipettes de pr cision variables et calibr es Du papier absorbant De l eau distill e 42 Stockage et stabilit du kit Les r actifs contenus dans des flacons non ouverts stock s 2 8 C seront stables jusqu la date d expiration inscrite sur l tiquette Ne pas utiliser les r actifs au del de cette date Les r actifs contenus dans des flacons ouverts doivent tre stock s 2 8 C Les micro plaques doivent tre stock es 2 8 C Une fois la capsule d aluminium ouverte attention bien refermer le flacon Les kits ouverts conservent leur activit durant deux mois s ils sont stock s comme pr c demment mentionn 4 3 Pr paration des r actifs Amener tous les r actifs et le nombre de barrettes n cessaires au test temp rature ambiante avant utilisation Wash Solution Diluer 30 mL de Wash Solution concentr e avec 1170 mL d eau d sionis e pour un volume final de 1200 mL Remarque La solution de lavage dilu e est stable deux semaines temp rature ambiante 4 4 Elimination des d chets relatifs au kit L limination des d chets relatifs au kit doit tre r alis e selon les r gles nationales en vigueur Les informations sp cifiques au kit sont pr sent es dans la fiche de s curit voir chapitre 13 Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 30 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 5 Kits endommag s Dans le cas de dom
45. mination of Progesterone in serum and plasma This assay is intended for in vitro diagnostic use only Progesterone pregn 4 ene 3 20 dione is a C21 steroid hormone containing a keto group at C 3 and a double bond between C 4 and C 5 A4 This steroid hormone is a female sex hormone which in conjunction with estrogens regulates the accessory organs during the menstrual cycle and it is particularly important in preparing the endometrium for the implantation of the blastocyte and in maintaining pregnancy In non pregnant women progesterone is mainly secreted by the corpus luteum whereas in pregnancy the placenta becomes the major source Minor sources are the adrenal cortex for both sexes and the testes for males Progesterone circulates in blood mainly bound to Corticosteroid Binding Globulin CBG Sex Hormone Binding Globulin SHBG and Albumin Only 2 10 of the total concentration circulates as free hormone Blood progesterone concentrations vary widely according to the phases of menstrual cycle they are lower than 1 ng mL 3 2 nmol L in the follicular phase and around 10 20 ng mL 32 64 nmol L in the luteal phase The maximal levels are achieved 4 7 days after ovulation and remain elevated for 4 6 additional days prior to falling to the preovulatory levels 24 hours before the onset of menstruation Since the rise and fall of progesterone parallel the activity of ovarian follicle and corpus luteum measurements of plasma progesterone ar
46. n to us which have an influence to the measurement of Progesterone in a sample 10 3 High Dose Hook Effect No hook effect was observed in this test Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 8 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 11 LEGAL ASPECTS 11 1 Reliability of Results The test must be performed exactly as per the manufacturer s instructions for use Moreover the user must strictly adhere to the rules of GLP Good Laboratory Practice or other applicable national standards and or laws This is especially relevant for the use of control reagents It is important to always include within the test procedure a sufficient number of controls for validating the accuracy and precision of the test The test results are valid only if all controls are within the specified ranges and if all other test parameters are also within the given assay specifications In case of any doubt or concern please contact DRG 11 2 Therapeutic Consequences Therapeutic consequences should never be based on laboratory results alone even if all test results are in agreement with the items as stated under point 11 1 Any laboratory result is only a part of the total clinical picture of a patient Only in cases where the laboratory results are in acceptable agreement with the overall clinical picture of the patient should therapeutic consequences be derived The test result itself should never be the sole determinant for deriving any therapeutic consequences 11 3 Liabi
47. n vitro In vitro diagnostik Diagnostik in vitro in vitro Siayvwortikd Ese tilsttr kkeligt til n test n tester Cat logo n Katalognummer Katalog nummer Ap du g karad you RUO No do lote Lot nummer Batch nummer Api8i c Naptidoc Indeholder Inneh ller tillr ckligt till Mepiex pevo errapk YIA n EgET GEI CESSE Temperatura de Opbevaringstemperatu F rvaringstempratur OeppoKpacia conserva o r aTTOOMKEUONG Prazo de validade Udigbsdato B st f re datum Hyepopnvia An n Fabricante Producent Tillverkare Kortaokeuaotng Distributed by Content Conte do Indhold Inneh ll Mepiexbpevo Volume No Volume N mero Volumen antal Volym antal Oykoc api H A Alv olos de SE Brunnar i Mnyad xkia Microtiterwells microtitula o Mikrotiterbrande Mikrotiterplatta MIKpOTITAO OT OEWG Antiserum Anti soro Antiserum Antiserum AVTIOP G Enzy me Conjugado enzim tico Enzymkonjugat Enzymkonjugat 2uZeuyu vo EVZUUO Conjugate Enzyme Complexo enzim tico Enzymkompleks Enzymkomplex ZUNTT OKO EVZUNOU Complex Substrate Solu o de substrato Substratoplgsning Substratl sning EE Solution UTTOOTPWNATOG Stop Solution Solu o de paragem Stopoplosning Stopp l sning AidAuya TEPNATIOHOU Zero Standard Padr o zero Standard 0 Standard 0 Mp turro Mnd v Standard Calibrador Standard Standard Npotutra Control Controlo Kon
48. nant ces patients doivent tre consid r es comme non valides Dans ce cas tester les zones techniques suivantes m canisme de pipettage et temps spectrophotom tre dates d expiration des r actifs conditions de stockage et d incubation m thodes d aspiration et de lavage Apr s avoir tester les points mentionn s si aucune erreur n est d tect e contacter votre distributeur ou directement la DRG 9 CARACTERISTIQUES DU TEST 9 1 Zone de mesure Les limites du dosage sont comprises entre 0 40 ng mL 9 2 Sp cificit des anticorps R action crois e Voir le manuel d utilisateur en version anglaise 9 3 Sensibilit de l analyse La sensibilit de analyse a t calcul e partir de la moyenne la plus faible de deux d viations standards de l analyse de vingt r plicats du Standard O et a t mesur e 0 045 ng mL 9 4 Pr cision Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 5 Recouvrement Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise 9 6 Lin arit Voir le manuel de l utilisateur en version anglaise Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 33 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 10 LIMITES D UTILISATION Toute utilisation impropre des chantillons ou toute modification du test peut influencer les r sultats 10 1 Substances parasites L h moglobine jusqu 4 mg mL la bilirubine jusqu 0 5 mg mL et les triglyc rides jusqu 1 8 mg mL n ont aucune influence sur les r s
49. nd to contain more than the highest standard the specimens can be diluted 10 fold or 100 fold with Standard 0 and reassayed as described in Assay Procedure For the calculation of the concentrations this dilution factor has to be taken into account Example a Dilution 1 10 10 uL Serum 90 uL Standard O mix thoroughly b Dilution 1 100 10 uL dilution a 1 10 90 uL Standard O mix thoroughly 6 TEST PROCEDURE 6 1 General Remarks All reagents and specimens must be allowed to come to room temperature before use All reagents must be mixed without foaming Once the test has been started all steps should be completed without interruption Use new disposal plastic pipette tips for each standard control or sample in order to avoid cross contamination Absorbance is a function of the incubation time and temperature Before starting the assay it is recommended that all reagents are ready caps removed all needed wells secured in holder etc This will ensure equal elapsed time for each pipetting step without interruption Asa general rule the enzymatic reaction is linearly proportional to time and temperature Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 4 6 2 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Assay Procedure Each run must include a standard curve Pe Nea a 6 3 Secure the desired number of Microtiter wells in the holder Dispense 25 uL of each Standard controls and samples with new disposable tips into app
50. nehmer Photometer Verfallsdatum der Reagenzien Lagerungs und Inkubationsbedingungen Absaug und Waschmethode Sollten Sie nach berpr fung der vorgenannten Bereiche keinen Fehler erkannt haben setzen Sie sich bitte mit Ihrem Lieferanten oder direkt mit der Firma DRG in Verbindung 9 ASSAY CHARACTERISTIKA 9 1 Messbereich Der Messbereich des Testes liegt zwischen 0 40 ng mL 9 2 Spezifit t der Antik rper Kreuzreaktivit t Folgende Substanzen wurden auf m gliche Kreuzreaktion im Progesterone ELISA gepr ft 100 00 17a OH Progesteron Estradiol 178 Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 14 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 9 3 Analytische Sensitivit t Die analytische Sensitivit t definiert als Mittelwert minus der zweifachen Standardabweichung des Standards 0 n 20 betr gt 0 045 ng mL Die Daten zu 9 4 Pr zision 9 5 Wiederfindung 9 6 Linearit t entnehmen Sie bitte der ausf hrlichen englischen Arbeitsanleitung 10 GRENZEN DES TESTS 10 1 Interferenzen Jede unsachgem e Behandlung von Proben oder Modifikationen dieses Tests k nnen die Ergebnisse beeinflussen H moglobin bis zu 4 mg mL Bilirubin bis zu 0 5 mg mL und Triglyceride bis zu 1 8 mg mL haben keinen Einfluss auf das Testergebnis 10 2 Beeinflussung durch Medikamente Uns sind bislang keine Stoffe Medikamente bekannt geworden deren Einnahme die Messung des Progesteron Gehaltes der Probe beeinflussen w rde 10 3 High Dose H
51. nte 4 4 Eliminaci n del Kit La eliminaci n del kit debe realizarse de acuerdo con las leyes nacionales En las hojas de datos de seguridad se proporciona informaci n especial de este producto ver cap tulo 13 4 5 Kits de ensayo da ados En caso de que exista cualquier da o severo del kit de ensayo o de sus componentes ha de informarse por escrito a DRG no mas tarde de una semana despu s de recibir el kit No deben utilizarse componentes da ados para llevar a cabo un ensayo Han de almacenarse hasta que se encuentre una soluci n Despu s de esto deben ser eliminados de acuerdo con las leyes oficiales Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 24 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 5 MUESTRAS En este ensayo pueden usarse suero o plasma plasma EDTA Heparina o citrato No usar muestras hemol ticas ict ricas o lip micas Tener en cuenta No deben usarse muestras que contengan acida s dica 5 1 Toma de muestras Suero Recoger la sangre por punci n en la vena ej Sarstedt Monovette 02 1388 001 permitir coagulaci n y separar el suero por centrifugaci n a temperatura ambiente No centrifugar antes de la coagulaci n completa Las muestras de pacientes que reciben terapia anticoagulante requieren m s tiempo para coagular Plasma Toda la sangre ha de recogerse en tubos de centrifuga que contengan anticoagulante y centrifugar inmediatamente tras la recogida Ej Para plasma EDTA Sarstedt Monovette tapa roja 0
52. oassay der auf dem Prinzip der kompetetiven Bindung basiert Die Wells der Mikrotiterplatten sind mit einem polyklonalen Antik rper beschichtet der gegen eine Antik rper Bindungsstelle des Progesteron Molek ls gerichtet ist Die Proben werden in die beschichteten Wells gegeben und zusammen mit einem Progesteron Enzymkonjugat inkubiert W hrend der Inkubation konkurriert das Progesteron aus der Probe mit dem Progesteron Enzymkonjugat um die freien Bindungsstellen auf den beschichteten Wells Das nicht gebundene Konjugat wird durch Waschen der Wells entfernt AnschlieRend wird die Substratl sung zugegeben und die Farbentwicklung nach einer definierten Zeit gestoppt Die Intensit t der gebildeten Farbe ist umgekehrt proportional der Progesteron Konzentration in der Probe Die Extinktion wird bei 450 nm mit einem Mikrotiterplattenleser gemessen 3 VORSICHTSMARNAHMEN e Dieser Kit ist nur zum in vitro diagnostischen Gebrauch geeignet e Informationen zu im Kit enthaltenen gef hrlichen Substanzen entnehmen Sie bitte dem Materialsicherheitsdatenblatt e Alle Bestandteile dieses Testkits die humanes Serum oder Plasma enthalten wurden mit FDA gepr ften Methoden auf HIV I II HbsAg und HCV getestet und als negativ best tigt Jedoch sollten alle Bestandteile im Umgang und bei der Entsorgung wie m gliche Gefahrenstoffe betrachtet werden e Der Kontakt mit der Stop Solution sollte vermieden werden da sie 0 5 M H2SO enth lt Schwefels ure kann
53. on avec le conjugu e la HRP pour la liaison l anticorps Apr s incubation le conjugu non li est limin durant le lavage des puits La quantit de peroxidase li e est inversement proportionnelle la concentration de Progest rone contenue dans l chantillon Suite l addition de solution substrat l intensit de coloration obtenue est inversement proportionnelle la concentration de Progest rone contenue dans l chantillon 3 PRECAUTIONS D UTILISATION e Ce kit est uniquement destin aux tests diagnostiques in vitro e Les informations concernant la toxicit des r actifs contenus dans ce kit sont pr sent es dans la fiche de s curit Material Safety Data Sheets e Tous les r actifs de ce kit contenant du s rum ou du plasma humain ont t test s avec des r sultats n gatifs pour le VIH I II le HBsAg et le HCV selon les normes FDA en vigueur N anmoins lors de leur utilisation tous les r actifs de ce kit doivent tre manipul s avec pr caution e Eviter les contacts avec la Stop Solution celle ci contient 0 5 M de H2SO Cela pourrait engendrer irritations ou br lures de la peau e Ne jamais pipeter avec la bouche et viter tout contact de la peau ou des muqueuses avec les r actifs ou les chantillons e Ne pas fumer manger boire ou utiliser des produits cosm tiques dans les zones o les chantillons ou le kit ont t mani s e Porter des gants d examen lors de l utilisation de
54. ook Effekt Ein Hook Effekt tritt in diesem Test nicht auf Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 15 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 11 RECHTLICHE GRUNDLAGEN 11 1 Zuverl ssigkeit der Ergebnisse Der Test muss exakt gem der Testanleitung des Herstellers abgearbeitet werden Dar ber hinaus muss der Benutzer sich strikt an die Regeln der GLP Good Laboratory Practice oder andere eventuel anzuwendende Regeln oder gesetzliche Vorgaben halten Dies betrifft besonders den Gebrauch der Kontrollreagenzien Es ist sehr wichtig bei der Testdurchf hrung stets eine ausreichende Anzahl Kontrollen zur berpr fung der Genauigkeit und Pr zision mitlaufen zu lassen Die Testergebnisse sind nur g ltig wenn alle Kontrollen in den vorgegebenen Bereichen liegen und wenn alle anderen Testparameter die vorgegebenen Spezifikationen f r diesen Assay erf llen Wenn Sie bez glich eines Ergebnisses Zweifel oder Bedenken haben setzen Sie sich bitte mit der Firma DRG in Verbindung 11 2 Therapeutische Konsequenzen Therapeutische Konsequenzen sollten keinesfalls nur aufgrund von Laborergebnissen erfolgen selbst dann nicht wenn alle Testergebnisse mit den in 11 1 genannten Voraussetzungen bereinstimmen Jedes Laborergebnis ist nur ein Teil des klinischen Gesamtbildes eines Patienten Nur in F llen in denen die Laborergebnisse in akzeptabler bereinstimmung mit dem allgemeinen klinischen Bild des Patienten stehen sollten therapeutische Konsequenzen
55. ropriate wells Incubate for 5 minutes at room temperature Dispense 200 uL Enzyme Conjugate into each well Thoroughly mix for 10 seconds It is important to have a complete mixing in this step Incubate for 60 minutes at room temperature Briskly shake out the contents of the wells Rinse the wells 3 times with diluted Wash Solution 400 ul per well Strike the wells sharply on absorbent paper to remove residual droplets Important note The sensitivity and precision of this assay is markedly influenced by the correct performance of the washing procedure Add 200 uL of Substrate Solution to each well Incubate for 15 minutes at room temperature Stop the enzymatic reaction by adding 100 uL of Stop Solution to each well Determine the absorbance OD of each well at 450 10 nm with a microtiter plate reader It is recommended that the wells be read within 10 minutes after adding the Stop Solution Calculation of Results Calculate the average absorbance values for each set of standards controls and patient samples Construct a standard curve by plotting the mean absorbance obtained from each standard against its concentration with absorbance value on the vertical Y axis and concentration on the horizontal X axis Using the mean absorbance value for each sample determine the corresponding concentration from the standard curve Automated method The results in the IFU have been calculated automatically using a 4 PL 4 Parameter
56. s chantillons ou des r actifs Une contamination microbienne des chantillons ou des r actifs pourrait fausser les r sultats e L utilisation de ce kit devra tre en accord avec les normes ou recommandations nationales de s curit en vigueur concernant les produits risque biologique e Ne pas utiliser les r actifs au del de la date d expiration inscrite sur l emballage e Tous les volumes indiqu s doivent tre scrupuleusement respect s comme indiqu dans le protocole exp rimental Seule l utilisation de pipettes calibr es ou d un spectrophotom tre lecteur de micro plaques calibr garantit l obtention de r sultats optimaux ce test e Ne pas m langer ou utiliser des r actifs contenus dans des kits de lots diff rents Il est conseill de ne pas changer les puits de diff rentes plaques m me si celles ci proviennent du m me lot Les kits peuvent avoir t transport s ou stock s diff remment et les caract ristiques de liaison de chaque plaque pourraient ainsi tre modifi es e L limination des solutions chimiques et des r actifs contenus dans ce kit utilis s ou non doit tre en accord avec la r glementation nationale en vigueur concernant l limination des d chets risque biologique e La fiche de s curit concernant ce produit peut tre obtenue en contactant directement DRG Instruments GmbH Les fiches de s curit sont en accord avec les directives europ ennes EU 91 155 EC Vers 5 0 Effe
57. sere usato per questo test Non usare campioni emolitici itterici o lipemici Attenzione Se i campioni contengono sodio azide non devono essere utilizzati per questo test 5 1 Collezione dei campioni Siero Collezionare sangue tramite puntura venale p es Sarstedt Monovette 02 1388 001 far coagulare e separare il siero centrifugando a temperatura ambiente Non centrifugare prima che la coagulazione sia completata Campioni di pazienti con una terapia anticoagulante possono richiedere pi tempo per la coagulazione Plasma Il sangue dovrebbe essere collezionato in tubetti da centrifuga contenenti un anticoagulante e centrifugando immediatamente dopo la puntura P es per EDTA plasma Sarstedt Monovette red cap 02 166 001 per eparina plasma Sarstedt Monovette orange cap 02 165 001 per citrate plasma Sarstedt Monovette green cap 02 167 001 5 2 Magazzinaggio dei campioni campioni dovrebbero essere magazzinati ben chiusi fino a 24 ore a 2 8 C Campioni magazzinati per un periodo pi lungo dovrebbero essere congelati solo una volta a 20 C prima dell analisi Congelare soltanto una volta Invertire campioni scongelati alcune volte prima dell uso 5 3 Diluizione dei campioni Se in un campione di siero viene trovata una concentrazione oltre lo standard piu alto questo campione pu essere diluito 10 o 100 volte con lo Standard 0 e nuovamente determinato Della diluizione deve essere per tenuto
58. tandard 0 for sample dilution is available on request 4 1 1 Equipment and material required but not provided A microtiter plate calibrated reader 450410 nm e g the DRG Instruments Microtiter Plate Reader Calibrated variable precision micropipettes Absorbent paper Aqua dest 42 Storage and stability of the Kit When stored at 2 8 C unopened reagents will retain reactivity until expiration date Do not use reagents beyond this date Opened reagents must be stored at 2 8 C Microtiter wells must be stored at 2 8 C Once the foilbag has been opened care should be taken to close it tightly again Opened kits retain activity for two months if stored as described above 4 3 Preparation of Reagents Allow all reagents and required number of strips to reach room temperature prior to use Wash Solution Add deionized water to the 40X concentrated Wash Solution Dilute 30 mL of concentrated Wash Solution with 1170 mL deionized water to a final volume of 1200 mL The diluted Wash Solution is stable for 2 weeks at room temperature Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 3 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 4 4 Disposal of the Kit The disposal of the kit must be made according to the national official regulations Special information for this product is given in the Material Safety Data Sheets see chapter 13 4 5 Damaged Test Kits In case of any severe damage of the test kit or components DRG have to be informed wri
59. test sono validi soltanto se tutte le referenze cadono nei margini prestabiliti e se tutti gli altri parametri del test soddisfano la specificazione per questo test Se esistono dubbi o domande su questi risultati si prega di contattare la ditta DRG 11 2 Conseguenze terapeutiche Soltanto sulla base dei risultati dei laboratori non dovrebbero essere intraprese delle conseguenze terapeutiche di alcun tipo anche se i risultati del test sono d accordo con gli aspetti articolati nel punto 11 1 Ogni risultato di laboratorio soltanto una parte di un quadro clinico completo di un paziente Soltanto in casi in cui i risultati di un test del laboratorio si accordano con il quadro clinico dell ammalato si possono intraprendere delle conseguenze terapeutiche Il risultato del test da solo non base sufficiente per lo stabilimento di una terapia 11 3 Responsabilit legali Ogni cambiamento del protocollo del test e o lo scambio o il mescolamento di componenti provenienti da cariche diverse possono influenzare negativamente i risultati e compromettere la validit del test Questi cambiamenti e o scambi annullano ogni diritto al risarcimento Si respingano inoltre tutti i richiami risultanti da interpretazioni sbagliate da parte dell utente secondo il paragrafo 11 2 Nel caso di reclamazione la garanzia del produttore limitato al valore massimo del test kit Ogni danno provocato durante il trasporto del kit non sottost alla responsabilit de
60. ti sono ricoperti con un anticorpo policlonale diretto contro un unico sito antigenico della molecola Progesterone Progesterone endogena di un campione compete con il Progesterone coniugato alla per ossidasi di rafano per il sito di legame sull anticorpo ancorato nel micropozzo Dopo l incubazione il coniugato non legato lavato via La quantit della perossidasi coniugata legata inversamente proporzionale alla concentrazione di Progesterone nel campione Dopo l aggiunta della soluzione substrato l intensit del colore sviluppato inversamente proporzionale alla concentrazione di Progesterone nel campione del paziente PRECAUZIONI Questo kit adatto soltanto per l uso diagnostico in vitro Informazioni su sostanze pericolose contenute nel kit sono riportate nel regolamento di sicurezza Tutti i componenti del kit che contengono siero o plasma umano sono controllati e confermati negativi per la presenza di HIV I II HbsAg e HCV con metodi conformi alle norme FDA Ciononostante tutti i componenti dovrebbero essere trattati come potenziali sostanze nocive nella manutenzione e nello smaltimento e Il contatto con la soluzione stop dovrebbe essere evitato perch contiene 0 5 M H2SO L acido solforico pu provocare irritazioni cutanee e ustioni e Non pipettare con la bocca ed evitare il contatto con componenti del kit con la pelle o con le mucose e Nelle aree in cui il test viene utilizzato non fumare mangiare bere o fare uso
61. tivos en este kit de ensayo que contienen suero o plasma humano se han ensayado y confirmado ser negativos para HIV III HBsAg y HCV mediante procedimientos aprobados por la FDA Sin embargo todos los reactivos deben ser tratados tanto en su uso como dispensaci n como potencialmente biopeligrosos e Evitar contacto con Stop Solution que contiene H2SO 0 5 M Puede provocar irritaci n y quemaduras en la piel e Nunca pipetear con la boca y evitar el contacto de los reactivos y las muestras con la piel y con membranas mucosas e No fumar comer beber o usar cosm ticos en reas donde las muestras o los reactivos del kit est n siendo usados e Usar guantes de l tex cuando se utilicen las muestras y los reactivos La contaminaci n microbiana de los reactivos o las muestras puede dar resultados err neos e El manejo debe realizarse de acuerdo a los procedimientos definidos por las gu as o regulaci n nacionales de seguridad de sustancias biopeligrosas e No utilizar los reactivos despu s de su fecha de caducidad que aparece en las etiquetas del kit e Todos los vol menes indicados han de ser realizados de acuerdo con el protocolo Los resultados ptimos del ensayo se obtienen solo cuando se utilizan pipetas y lectores de microplacas calibrados e No mezclar o usar componentes de kits con distinto n mero de lote Se recomienda no intercambiar pocillos de distintas placas incluso si son del mismo lote Los kits pueden haber sido enviados o al
62. trol Kontroll E EYXOS Assay Buffer Tamp o de teste Assay buffer Assay Buffer o Arakupa Wash Solution Solu o de lavagem Vaskebuffer Tv tt l sning AraAupa TA OEWG 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1 N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI Sample Diluent Conjugate Diluent Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 36
63. tten latest one week after receiving the kit Severely damaged single components should not be used for a test run They have to be stored until a final solution has been found After this they should be disposed according to the official regulations 5 SPECIMEN Serum or plasma EDTA Heparin or citrate plasma can be used in this assay Do not use haemolytic icteric or lipaemic specimens Please note Samples containing sodium azide should not be used in the assay 5 1 Specimen Collection Serum Collect blood by venipuncture e g Sarstedt Monovette 02 1388 001 allow to clot and separate serum by centrifugation at room temperature Do not centrifuge before complete clotting has occurred Patients receiving anticoagulant therapy may require increased clotting time Plasma Whole blood should be collected into centrifuge tubes containing anti coagulant and centrifuged immediately after collection E g for EDTA plasma Sarstedt Monovette red cap 02 166 001 for Heparin plasma Sarstedt Monovette orange cap 02 165 001 for Citrate plasma Sarstedt Monovette green cap 02 167 001 5 2 Specimen Storage Specimens should be capped and may be stored for up to 24 hours at 2 8 C prior to assaying Specimens held for a longer time should be frozen only once at 20 C prior to assay Thawed samples should be inverted several times prior to testing 5 3 Specimen Dilution If in an initial assay a specimen is fou
64. ty of colour developed is reverse proportional to the concentration of Progesterone in the patient sample 3 PRECAUTIONS e This kit is for in vitro diagnostic use only e For information on hazardous substances included in the kit please refer to Material Safety Data Sheets e All reagents of this test kit which contain human serum or plasma have been tested and confirmed negative for HIV I II HBsAg and HCV by FDA approved procedures All reagents however should be treated as potential biohazards in use and for disposal Avoid contact with Stop Solution containing 0 5 M H2SO It may cause skin irritation and burns Never pipet by mouth and avoid contact of reagents and specimens with skin and mucous membranes Do not smoke eat drink or apply cosmetics in areas where specimens or kit reagents are handled Wear disposable latex gloves when handling specimens and reagents Microbial contamination of reagents or specimens may give false results e Handling should be in accordance with the procedures defined by an appropriate national biohazard safety guideline or regulation e Do not use reagents beyond expiry date as shown on the kit labels e All indicated volumes have to be performed according to the protocol Optimal test results are only obtained when using calibrated pipettes and microtiter plate readers Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 2 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 e Do not mix or use components from kits with different
65. ultats du dosage 10 2 Drogues parasites Jusqu pr sent nous ne connaissons aucune substance drogues capable d influencer la mesure de Progest rone dans un chantillon 10 3 Effet de surdosage Aucun effet de surdose n a t observ avec ce test 11 ASPECTS LEGAUX 11 1 Fiabilit des r sultats Ce test doit tre exactement utilis selon les instructions d utilisation du fabricant De plus les utilisateurs doivent strictement respecter les r gles de la bonne pratique de laboratoire ou autres lois nationales Cela est sp cialement le cas pour l utilisation des r actifs contr les Pour chaque test il est important d inclure un nombre suffisant de contr les afin de pouvoir valider l exactitude et la pr cision du test Les r sultats du test sont valides si et seulement si tous les contr les sont compris dans les gammes de mesure mentionn es et si tous les autres param tres du test sont galement compris dans les instructions de ce test En cas de doute ou d inqui tude contacter la DRG 11 2 Cons quences th rapeutiques Les suites th rapeutiques ne devront jamais tre bas es sur les r sultats de laboratoire seuls m me si les tous les r sultats du test sont en accord avec les points mentionn s dans le paragraphe 11 1 Tout r sultat n est qu une partie du tableau clinique complet d un patient Les suites th rapeutiques peuvent d couler des r sultats de laboratoire si et seulement si ceux ci sont en ac
66. zymatique Conjugado enzim tico Tracciante enzimatico Conjugate Enzyme Enzyme Complex Enzymkomplex Complexe Complex enzim tico Complesso enzimatico Complex enzymatique Substrate Substrate Solution Substratl sung Solution substrat Soluci n de sustrato Soluzione di substrato Solution Stop Solution Stop Solution Stoppl sung Solution d arr t Soluci n de parada Soluzione d arresto Zero Standard Zero Standard Nullstandard Zero Standard Est ndar cero Standard zero Standard Standard Standard Standard Est ndar Standard Control Control Kontrolle Contr le Control Controllo Assay Buffer Assay Buffer Assaypuffer Tampon d essai Tampon de ensayo Tampone del test Wash Solution Wash Solution Waschl sung Solution de lavage Soluci n de lavado Soluzione di lavaggio 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH 1N NaOH e La siarassido di 1 N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI 1N HCI Sample Diluent Sample Diluent i on Ep ponr dilution ii dilution Diluente dei campioni mo Conjugate Diluent e da Moo dilution SE diluci n Diluente del tracciante Vers 5 0 Effective 08 2007 vk 35 DRG Progesterone ELISA EIA 1561 Sym bol Portugues Dansk Svenska EAAnvik C Conformidade com as Europaeisk Europeisk Eupwsraikt normas europeias overensstemmelse verensst mmelse Zuup pwon Corisulte as instru es Se brugsanvisning Se bruksanvisningen Eyxeipidio xp oTN de utiliza o Diagn stico i

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