Utilisation de la station d`hybridation TECAN HS 4800 Sommaire
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1. AN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 1 DESCRIPTION DE LA MACHINE Unit des liquides Unit d hybridation 1 1 L unit des liquides Elle est constitu e d un cran tactile et des liquides de lavage et rin age L cran tactile permet de param trer facilement la machine Il existe 6 bouteilles de liquides dont 4 sont situ es sur une plaque chauffante 60 C et 2 pour le rin age et le s chage des lames Le volume minimum requis pour un RUN classique est de 1000ml 1 2 L unit d hybridation Elle est constitu e d un cran cristaux liquides et de 3 blocs comprenant chacun 4 chambres d hybridation L cran cristaux liquides donne les instructions lors d un RUN Les blocs sont totalement ind pendants les uns des autres Dans sa configuration actuelle la station ne permet pas d hybrider des lames contenant plusieurs arrays format multi pack Agilent Sp cificit s des chambres d hybridations 63 5 X 20 Dimension mm Min Max La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TECAN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 1 Retirer du bloc l adaptateur de lame et le poser sur la paillasse 2 D licatement poser le haut de la lame en poussant la languette et d poser la lame sur l adaptateur cot spott vers le haut 3 R p ter2. D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TECAN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 Sommaire 1 DESCRIPTION DE LA MACHINE 5 55 2aeieerchet ntlenun less EREEREER E PERRERA segrdrolgeee dent stet enlaeuelnte ete ERER R EEEREN 1 1 L unit des liquides see 1 2 L unit d RyDriIdatons 2se serres dures rsdeeurs tentant envast inattendus NETOA NN dette andreas 2 INSERTION DES LAMES 2 2s282s02mtnencnnansetensnonnanennnngetenscedansunnssinnnancnanennsmsetenecedeneosues senenenssenenesetedi node 4 3 LANCER UN PROGRAMME 3 rente rel ure sente A E EAKR EE KANKRE ERARE EEPE tn TEKEE ARKE ARREK R EE PANK EEEREN RE ERAR EAE EARRA EREE EER d 3 1 Avant chaque HYOAASONM SSSR du lt 3 2 L 1 61h10 121 110 PP sirsikisissosroisnirsns isnende iavsi irasas saE Kea AEEA a aS ERASATEN EnS A VEK EERTE er 4 3 3 Apr s chaque hybridation sise 4 MAINTENANCE A S S E S end ne ni se ne seusdecnnedsenebete T 4 1 Tous les 2 mois a e AATE t 4 2 D sinfection des tuyaux 1 fois par an 408iiusiuuiuunenmuineeiennpessnrtereenneret t ATTENTION La station d hybridation est une machine fragile et n est donc pas disponible en libre service Vous devez contacter Caroline PROUX 3513 pour l utiliser La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TEC
3. e 2L d eau milli Q bonbonne sur l vier et mettre tous les tuyaux dans le fond de la bouteille 12 Lancer un RINSE INSTRUMENT RINSE environ 30min valider la case FULL SYSTEM DRYING MODULE ALL et faire OK 13 La fin du RINSE est indiqu e par une alarme sonore et un message appara t sur l cran cristaux liquides de l unit d hybridation Remove all tubes from all liquids enlever les tuyaux de la bouteille H2O les mettre dans la bouteille vide RINSE et presser OK sur l cran cristaux liquides 14 A la fin du RINSE un message sur l cran de l unit des liquides indique que le RINSE est fini 15 R p ter les tapes 11 14 16 Ouvrir les blocs compl tement et laisser s cher les petites gouttelettes d eau pr sentes sur les lames vierges et sur les chambres d hybridations l air libre pendant 5 minutes 17 Fermer les blocs en d posant d licatement le couvercle sur les lames sans actionner la manette de fermeture compl te 18 Eteindre la machine bouton l arri re de l unit des liquides puis bouton sous l cran de la fa ade de la m me unit La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TECAN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 19 Vider la poubelle des liquides La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc
4. es tuyaux dans le fond de la bouteille 7 Lancer un RINSE INSTRUMENT RINSE environ 30min valider la case FULL SYSTEM DRYING MODULE ALL et faire OK 8 La fin du RINSE est indiqu e par une alarme sonore et un message appara t sur l cran cristaux liquides de l unit d hybridation Remove all tubes from all liquids enlever les tuyaux de la bouteille H2O les mettre dans la bouteille vide RINSE et presser OK sur l cran cristaux liquides 9 A la fin du RINSE un message sur l cran de l unit des liquides indique que le RINSE est fini Ouvrir les blocs compl tement et laisser s cher les petites gouttelettes d eau pr sentes sur les lames vierges et sur les chambres d hybridations l air libre pendant 5 minutes 10 Fermer les blocs en d posant d licatement le couvercle sur les lames sans actionner la manette de fermeture compl te 3 2 L hybridation 1 Ins rer les lames hybrider dans les blocs cf paragraphe 2 Insertion des lames Noter pour chaque lame le num ro de bloc de chambre d hybridation ainsi que la cible utilis e pour l hybridation 2 Fixer les tuyaux dans les bouteilles correspondantes O O 3 Lancer un PRIME INSTRUMENT PRIME sur channel 1 environ 30s 4 Optionnel en fonction des chantillons ou des lames d naturer les cibles 95 pendant 3 minutes 5 Ouvrir un programme FILE OPEN A PROGRAM nom du programme hpr 6 V rifier le programme en cliquant sur l o
5. les tapes 1 et 2 pour toutes les lames 4 V rifier que les lames sont bien ins r es en appliquant une l g re pression sur les 4 coins de la lame D poser d licatement l adaptateur dans le bloc chauffant Fermer fond tr s doucement le bloc ou Attention Ne pas toucher la partie spott e de la lame Si moins de 4 lames sont utilis es dans un bloc il faut ins rer des lames vierges aux emplacements vides Ne pas toucher la station d hybridation sans gants 3 LANCER UN PROGRAMME En cas de doute se reporter au manuel d utilisation disponible dans le classeur de la machine bureau N 6 ou contacter C Proux 3 1 Avant chaque hybridation 1 Allumer l unit des liquides l aide du bouton sur la fa ade juste en dessous de l cran puis du bouton l arri re de la station 2 V rifier que la bonbonne de gaz est 2 5 Bar environ 3 V rifier que la poubelle d chets liquides est vide pos e sur le sol 4 Mettre les liquides chauffer dans le menu INSTRUMENT START HEATING BOTTLES La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TECAN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 5 Ins rer des lames vierges dans tous les blocs 12 lames au total et fermer les blocs d licatement 6 Remplir la bouteille H20 de 2L d eau milli Q et mettre tous l
6. manifold arriv e sortie des liquides et azote et la chambre d hybridation 4 2 D sinfection des tuyaux 1 fois par an 1 Remplir la bouteille H2O de 2L d eau milli Q bonbonne sur l vier et mettre tous les tuyaux dans le fond de la bouteille 2 Lancer un RINSE INSTRUMENT RINSE environ 30min valider la case FULL SYSTEM DRYING MODULE ALL et faire OK 3 A la fin du RINSE la machine sonne et un message appara t sur l cran cristaux liquides de l unit d hybridation Remove all tubes from all liquids enlever les tuyaux de la bouteille H20 les mettre dans la bouteille vide RINSE et presser OK sur l cran cristaux liquides 4 A la fin du RINSE un message sur l cran de l unit des liquides indique que le RINSE est fini 5 Pr parer 500ml de Microcide SQ d sinfectant diluer au 1 64 dans la bouteille pr vue cet effet 6 Placer les tuyaux dans la bouteille Microcide 7 Lancer un PRIME sur les channels 1 6 les uns apr s les autres INSTRUMENT PRIME sur channel 1 environ 30s puis INSTRUMENT PRIME sur channel 2 environ 30s 8 Laisser reposer 30 min 9 Remplir la bouteille H20 de 2L d eau milli Q bombonne sur l vier et mettre tous les tuyaux dans le fond de la bouteille 10 Lancer un PRIME sur les channel 1 6 les uns apr s les autres INSTRUMENT PRIME sur channel 1 pour 1 min puis INSTRUMENT PRIME sur channel 2 pour 1 min 11 Remplir la bouteille H2O d
7. nglet Program Tree 7 Lancer le programme INSTRUMENT RUN choisir les blocs utilis s apr s avoir v rifi les points de contr le que la machine demande faire OK et le programme d marre 8 Apr s une dizaine de minutes la machine sonne et demande l injection des cibles 110 ul 9 L cran de l unit d hybridation indique Probe Injection faire OK dernier bouton droite 10 Sur l cran de l unit d hybridation la machine indique par une croix la premi re injection faire Ouvrir le bouchon blanc correspondant et injecter d licatement les 110 ul de cible L injection se fait en d posant le c ne au fond du trou de la chambre d hybridation la perpendiculaire par rapport la machine voir photo suivante La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TECAN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 11 Refermer le bouchon sans forcer 12 Appuyer sur OK sur l cran de l unit d hybridation La machine indique par une croix dans quelle chambre d hybridation doit ce faire l injection suivante R p ter les tapes 10 et 11 si n cessaire 14 Apr s les injections l hybridations est lanc es automatiquement Sa dur e est indiqu e sur l cran de l unit des liquides 3 3 Apr s chaque hybridation 1 La fin du RUN est signal par une alarme sonore Faire OK sur l c
8. ran de l unit d hybridation qui indique RUN FINISH 2 Ouvrir d licatement les blocs les lames peuvent tre coll es dans la chambre d hybridation 3 Eteindre le chauffage des liquides de lavage INSTRUMENT STOP HEATING BOTTLES 4 R cup rer les lames elles sont pr tes tre scann es 5 Lancer un RINSE tapes 6 9 du paragraphe 3 2 6 Eteindre la machine bouton l arri re de l unit des liquides puis bouton sous l cran de la fa ade de la m me unit 7 Vider la poubelle des liquides Il est obligatoire de proc der aux tapes de nettoyage et rin age apr s hybridation L utilisation de la station est soumis au respect tr s strict de cette proc dure La version garantie jour est celle disponible sur l intranet IP Canal Doc D INSTITUT PASTEUR Plate forme Puces ADN Utilisation de la station d hybridation TECAN HS 4800 Version 1 Responsable machine Caroline PROUX 3513 4 MAINTENANCE 4 1 Tous les 2 mois 1 Enlever les chambres d hybridation des blocs et les rincer l eau milli Q 2 Changer les joints de chaque chambre laisser tremper les joints neufs 1h dans de l eau milli Q enlever doucement les vieux joints des chambres d hybridation s cher l air libre les joints neufs et les installer sur les chambres 3 Nettoyer les filtres des tubes plongeant dans les 6 bouteilles contenant les diff rents liquides 4 V rifier les petits joints noirs faisant connexion entre le
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