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Etude de la sensibilité aux antimicrobiens

1. c phalosporines 177 et 2 g n ration c fotaxime ceftriaxone ertap n me t tracyclines chloramph nicol trim thoprime quinolones ACINETOBACTER BAUMANNII ACINETOBACTER CALCOACETICUS aminop nicillines c phalosporines 1 et 2 m g n ration ertap n me fosfomycine trim thoprime furanes AUTRES BACILLES A GRAM NEGATIF FERMENTAIRES aminop nicillines c phalosporines 1 et 2 g n ration ertap n me Voir aussi le tableau V Tableau V R sistance naturelle chez les bacilles Gram n gatif non fermentaires TIC TCC PIP CTX CAZ IPM QUI C TMP FOS COL S maltophilia R R R R R R B cepacia R R R R R R R R A denitrificans R C meningosepticum R R R R R R R R O anthropi R R R R R R r sistance naturelle TIC ticarcilline TCC ticarcilline ac clavulanique PIP pip racilline CTX c fotaxime CAZ ceftazidime IPM imip n me QUI quinolones chloramph nicol TMP trim thoprime FOS fosfomycine COL colistine polymyxine B S MALTOPHILIA La r sistance intrins que aux aminosides est observ e uniquement apr s incubation 30 C Interpr ter un r sultat S obtenu apr s incubation 37 AEROMONAS Aminop nicillines sauf Aeromonas trota c phalosporines de 1ere de 2eme g n ration sauf Aeromonas veronii ertap n me
2. 18 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Haemophilus influenzae 19 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Neisseria meningitidis 19 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Neisseria gonorrhoeae 20 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Campylobacter Spp 20 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour les ana robies stricts 21 E TEST POUR L ETUDE DE LA SENSIBILIT AUX AGENTS 22 R sum et explicao Na te ee Penn tent teen nee a CERN ES 22 M thode 22 lt le 23 MYCOBIOGRAMME MYCOBIO T TEST DE SENSIBILITE DES MYCOBACTERIES AUX ANTIBIOTIQUES 24 Introduction ee DR 24 PTirie ET 24 am m a mn E 25 25 ANTIBIOGRAMME MILIEU SEMI GELOSE G ANTIBIOGRAMME POUR LES ENTEROBACTERIES n nrnna 26 Introduction et objet du test
3. et is pamicine ne peuvent tre utilis es Pour les valeurs lt interm diaires gt des diam tres le niveau de r sistance devra tre confirm par dilution en agar ou en bouillon contenant 500 ug mL de S ou G HNR gt 500 ug mL La combinaison SV KN est possible Chloramph nicol 30 ug lt 8 gt 8 gt 23 lt 23 Interpr tation valable pour thiamph nicol T tracycline 30 UI lt 1 gt 2 2 23 lt 21 Interpr tation valable pour les autres t tracyclines Interpr tation valable pour azithromycine clarithromycine Erythromycine 3891 lt 0 25 05 229 gt 24 daonel et TE 4 4 La r sistance la t lithromycine doit tre v rifi e par un T lithromycine 15 ug lt 0 25 gt 0 5 2 24 lt 21 test en l absence de CO qui permet la cat gorisation clinique Lincomycine 15 ug lt 2 gt 8 gt 21 lt 17 Interpr tation valable pour clindamycine Clindamycine lt 0 5 gt 0 5 Pristinamycine 15 ug lt 1 gt 2 gt 19 Interpr tation valable pour quinupristine dalfopristine sultam thoxazole PTE AE ES La r sistance acquise la fosfomycine est homog ne La Fosfomycine 50 ug lt 32 gt 32 gt 14 lt 14 pr sence de colonies dans la zone d inhibition ne doit pas tre prise en compte 16 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices
4. Aspect de la R sultat La souche est cupule clair S Sensible trouble R R sistante Lors de la lecture automatique de la galerie v rifier la propret de la partie centrale de la galerie afin de permettre la reconnaissance du code de la galerie par le lecteur v rifier la concordance entre l intitul imprim sur la galerie et l intitul de la galerie propos par le logiciel NOTES L absence de croissance dans une ou deux cupule s t moin invalide l antibiogramme qui doit tre recommenc Un r sultat c C est un non sens N r p ter le test avec une nouvelle galerie En lecture visuelle une croissance limit e la p riph rie de la cupule doit tre lue n gative sauf pour les tests Vancomycine et Teicoplanine voir Limites du Test Une galerie dont les cupules sont partiellement dess ch es suite l incubation peut induire de faux r sultats L antibiogramme doit tre recommenc Trim thoprime Sulfam thoxazole TSU Consid rer comme n gatif toute croissance inf rieure au t moin de croissance Pour les esp ces S epidermidis ou S haemolyticus ayant une sensibilit moindre vis vis de la Teicoplanine une cat gorisation Interm diaire au lieu de Sensible est souvent observ e avec la galerie ATB STAPH Cette cat gorisation Interm diaire peut tre confirm e par la r alisation d une CMI et doit tre diff renci e de la r sistance vraie
5. sise 26 SR A Re Re Me ee MA Mind int au u u au tte ane ts 26 MEET 26 Lecture et interpr tation iii 26 Contr le Ee E 27 M thodologie Fiche de r sultat sise 28 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications ATB STAPH ANTIBIOGRAMME POUR LES STAPHYLOCOQUES iii 29 Introduction et objet du test sise 29 Principe si iiiiiiiseseieerirereeeeereeeeeneeeenneneeeeeeeneeeeneeeee 29 Mode operatoire sise 29 Lecture et interpr tation issus 29 Contr le de qualit iii 31 M thodologie Fiche de r sultat sise 31 ATB UR ANTIBIOGRAMME POUR LES ENTEROBACTERIES D ORIGINE URINAIRE 32 Introduction et objet du test sise 32 el lte E 32 Mode operaltolre uu ma a EE 32 L CIUre LIM FPI TAION ET sma EE 32 Controle E a a 33 M thodologie Fiche de r sultat sise 34 DETECTION D ACTIVITE ENZYMATIQUE CEFINASE CEF F DETECTION RAPIDE DES BETA LACTAMASES I 35 Introduction et objet du test sise 35 PTI DO E 35 lee EE 35 Lecture et interpr tation iii 35 ANTIFONGIGRAMME EN MILIEU SEMI GELOSE ATB FUNGUS ANTIFONGIGRAMME POUR LES LEVURES ss 36 Introdu
6. Cas particulier Pour Staphylococcus aureus et pour l oxacilline sodium ou 37 C sur croissance appara t faible apr s 24 h milieu hypersal 2 diluer la suspension esp ces 5 saprophyticus 5 lugdunensis pr sentent fr quemment des valeurs interm diaires alors qu elles poss dent pas le g ne mech ou n expriment pas de PLP2a Ces souches sont consid r es comme sensibles aux isoxazolyl p nicillines inoculum au 1 10 10 UFC ml et incuber 30 sur milieu 4 Prolonger ventuellement l incubation jusqu 48 h si la C foxitine Moxalactam 30 ug 30 ug 227 lt 25 2 24 lt 23 1 La r sistance des staphylocoques aux isoxazolyl p nicillines oxacilline cloxacilline est recherch e l aide d un disque de c foxitine 30 ug ou de moxalactam 30 ug dans les conditions standards de l antibiogramme des staphylocoques en milieu de Mueller Hinton avec un inoculum 10 UFC mIl et incubation 18 24 h II ne doit pas tre tenu compte d une ventuelle zone fant me pour la lecture des diam tres d inhibition de la c foxitine Les souches pr sentant un diam tre sup rieur ou gal 27 mm c foxitine ou 24 mm moxalactam sont sensibles aux isoxazolyl p nicillines Les souches pr sentant un diam tre inf rieur 25 mm c foxitine ou 23 mm moxalactam sont r sistantes Pour les souches pr sentant un diam tre compris entre ces
7. 3 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications BACILLES A GRAM NEGATIF EXIGEANTS HAEMOPHILUS macrolides cycle 16 atomes spiramycine josamycine mid camycine lincosamides CAMPYLOBACTER aztr onam novobiocine streptogramines trim thoprime glycopeptides CAMPYLOBACTER JEJUNI CAMPYLOBACTER COLI ET CAMPYLOBACTER LARI c phalosporines de 1 g n ration CAMPYLOBACTER FETUS ET CAMPYLOBACTER LARI quinolones COQUES A GRAM POSITIF M cillinam aztr onam quinolones colistine STAPHYLOCOCCUS SAPROPHYTICUS fosfomycine novobiocine STAPHYLOCOCCUS COHNII ET STAPHYLOCOCCUS XYLOSUS novobiocine lincomycine MICROCOCCUS furanes STREPTOCOCCUS dont STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE aminoglycosides bas niveau p floxacine ENTEROCOCCUS oxacilline c phalosporines ertap n me aminoglycosides bas niveau p floxacine fosfomycine bas niveau sulfamides ENTEROCOCCUS FAECALIS lincosamides streptogramines ENTEROCOCCUS GALLINARUM ENTEROCOCCUS CASSELIFLAVUS FLAVESCENS glycopeptides PEDIOCOCCUS LEUCONOSTOC glycopeptides BACILLES A GRAM POSITIF M cillinam aztr onam colistine polymyxine B quinolones LISTERIA MONOCYTOGENES oxacilline c phalosporines lincosamides fosfomycine
8. B AMFOTERICIN AMFOTERYCYNA B FLUCONAZOLE FLUCONAZOL FLUCONAZOLO 2 FLUKONAZOL ITRACONAZOLE ITRACONAZOL ITRACONAZOLO ITPAKONAZOAH ITRAKONAZOL VORICONAZOLE VORICONAZOL VORICONAZOLO VORIKONAZOAH VORIKONAZOL WORIKONAZOL QC1 Candida parapsilosis ATCC 22019 S CMI MIC MHK EAN lt 0 5 mg l CMI MIC MHK EAN 1 4 mg l CMI MIC MHK EAN lt 0 125 0 25 mg l CMI MIC MHK EAN lt 0 06 0 125 mg l TEMOIN CONTROL KONTROLLE CONTROLLO CONTROLO EAETXOEZ KONTROLL KONTROLA FLUCYTOSINE FLUCYTOSIN FLUCITOSINA FLUCITOSIN FLUCYTOZYNA AMPHOTERICINE B AMPHOTERICIN B ANFOTERICINA B B AMFOTERICIN FLUCONAZOLE FLUCONAZOL FLUCONAZOLO 2 FLUKONAZOL ES ES ES N on ITRACONAZOLE ITRACONAZOL ITRACONAZOLO ITPAKONAZOAH ITRAKONAZOL H A Bu in VORICONAZOLE VORICONAZOL VORICONAZOLO VORIKONAZOAH VORIKONAZOL WORIKONAZOL N on h h sle n QC2 Candida krusei ATCC 6258 IR CMI MIC MHKEAN lt 0 5 2 mg l CMI IMICIMHKIEATI 8 32 mg l lt 0 125 0 5 mg l CMIMIC MHK EAN 0 125 0 5 40 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble
9. Un troisi me souchier provenant du CHU de Reims a permis d tablir la capacit du test oxacilline d tecter les Staphylocoques r sistants cet antibiotique comparativement la recherche du g ne mech et aux tests C foxitine et Oxacilline en m thode de diffusion Taux de concordance Le taux de concordance de la galerie ATB STAPH obtenu partir de 74 souches est de 91 4 Les taux d erreurs majeures et d erreurs tr s majeures obtenus avec la galerie ATB STAPH sont respectivement de 4 4 et 0 4 voir Notes du paragraphe Lecture et Interpr tation Les erreurs majeures obtenues sont tr s fr quemment en relation avec une meilleure d tection des r sistances aux antibiotiques par rapport la m thode de dilution en g lose particuli rement vis vis des aminosides et des cyclines Expression des m canismes de r sistance Ind pendamment du syst me expert Une tude portant sur 29 souches a permis de v rifier que les principaux m canismes de r sistance aux antibiotiques rencontr s chez les staphylocoques s expriment avec la galerie ATB Une autre tude portant sur 300 souches 200 S aureus et 100 staphylocoques coagulase n gative a montr comparativement au g ne mech une sensibilit de d tection des staphylocoques r sistants l Oxacilline de 96 pour la galerie ATB STAPH 85 pour la diffusion Oxacilline apr s 48 heures d incubation et 96 pour la diffusion C foxitine
10. le 75 ug trim thoprime sulfamide Notrofuranes 300 lt 64 gt 64 gt 15 lt 15 13 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications DETERMINATION DE L ACTIVITE IN VITRO DES GLYCOPEPTIDES SUR STAPHYLOCOCCUS AUREUS Cat gorisation clinique des souches suspect es d tre de sensibilit diminu e Introduction Des souches de S aureus de sensibilit diminu e aux glycopeptides GISA GRSA Hetero VISA des anglosaxons ont t d crites depuis plusieurs ann es En France cette sensibilit diminu e concerne presque exclusivement les souches simultan ment r sistantes la m ticilline et la gentamicine Crit res de suspicion de la sensibilit diminu e aux glycopeptides En routine par la m thode par diffusion en milieu g los lorsque le diam tre de la zone d inhibition est lt 17 mm autour du disque de l un des deux glycopeptides le diam tre de la zone d inhibition autour d un disque de teicoplanine est inf rieur d au moins 3 mm celui de la vancomycine quelques colonies sont pr sentes dans la zone d inhibition de l un des deux glycopeptides il existe un ph nom ne d interaction synergie ou antagonisme entre l un des glycopeptides et un disque d oxacilline 5 ug En routine p
11. CONDITIONS DE STOCKAGE ECHANTILLONS PRELEVEMENT ET PREPARATION La galerie ATB UR ne doit pas tre utilis e directement partir des pr l vements d origine clinique ou autres Les microorganismes tester doivent dans un premier temps tre isol s sur un milieu de culture adapt selon les techniques usuelles de bact riologie MODE OPERATOIRE Pr paration de la galerie Pr paration de l inoculum Pr parer une suspension bact rienne d opacit quivalente l talon 0 5 de McFarland Comparer au t moin d opacit du kit McFarland Standard ou utiliser le Densitom tre ATB ou le DENSIMAT Deux m thodes culture en bouillon jusqu obtention de l opacit indiqu e mise en suspension de 1 ou plusieurs colonies fra chement isol es souches cultiv es depuis moins de 48h dans une ampoule d API Suspension Medium ou d API NaCl 0 85 Medium ouvrir l ampoule comme indiqu au paragraphe Pr cautions d utilisation de la notice du produit Cette suspension doit tre utilis e extemporan ment NOTE il est recommand de contr ler la puret de l inoculum et de r isoler dans le cas de cultures mixtes Transf rer 10 ul de cette suspension dans ATB Medium l aide d une oese calibr e ou d une pipette Inoculation de la galerie Inoculation MANUELLE Homog n iser ATB Medium avec la Pipette Electronique ATB en vitant la formation de bulles Inoculer la galerie en distribuant 135 ul d A
12. Etambutol 3 1 4 1 Streptomycine 10 0 1 20 20 PAS 40 1 20 20 Rifamycine 40 1 Pyrazinamide 200 1 CONTROLE DE QUALITE Protocole Le contr le des milieux peut tre r alis l aide des souches suivantes Mycobacterium tuberculosis H37 e Mycobacterium kansasii ATCC 12478 vis vis de l antibiotique NH aux deux concentrations Suivre le mode op ratoire de la m thode indirecte en r alisant les dilutions et les ensemencements suivants Tubes t moins Tubes avec antibiotaiues Mycobaterium 10 107 tuberculosis H37 Rv 10 102 Mycobacterium 10 10 ATCC 12478 10 10 R sultats attendus 35 37 C Tubes t moins Tubes avec antibiotaiues du he Tubes avec Tubes t moins antibiotiques 10 x 10 X X 10 X Remarque pour l tude du pyrazinamide ensemencer les tubes t moin pH 5 5 Incubation Incuber l tuve 37 C capsule d bloqu e en position inclin e jusqu vaporation du liquide avant de revisser les tubes Le choix de la temp rature d incubation est la responsabilit de l utilisateur en fonction de l origine du pr l vement de l application et des normes en vigueur LECTURE ET INTERPRETATION La lecture est effectu e g n ralement entre le 21 me et le 28 me jour Compter le nombre de colonies apparues dans les tubes avec antibiotiques et dans les tubes
13. Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications E TEST POUR L ETUDE DE LA SENSIBILIT AUX AGENTS ANTIMICROBIENS bioM rieux 2009 08 75002288 MJ0132 UTILISATION PREVUE Lee Etest est une technique quantitative pour la d termination sur milieu g los de la Concentration Minimale Inhibitrice CMI des agents antimicrobiens vis vis des microorganismes et pour la d tection des m canismes de r sistance R SUM ET EXPLICATION Etest se compose d une mince bandelette de plastique inerte et non poreuse calibr e avec une chelle de exprim e en et un code pour identifier l agent antimicrobien ou les r actifs Un gradient pr d fini de concentrations d antibiotique ou d antifongique comprenant 15 dilutions correspondant aux m thodes de CMI conventionnelles est immobilis sur l autre surface du support Pour la d tection des BLSE B talactamase Spectre Etendu et des MBL M tallo b talactamases un gradient est pr sent sur les deux c t s de la bandelette et contient les r actifs appropri s leur d tection Lorsqu une bandelette Etest est appliqu e sur la surface d une g lose ensemenc e le gradient exponentiel pr form de l agent antimicrobien est imm diatement transf r dans la matrice de Le gradient de concentration continu et pr
14. Un m canisme de r sistance est exprim lorsque les r sultats de CMI ou de cat gorisation des antifongiques marqueurs sont compatibles avec le profil attendu Le troisi me souchier a permis d tablir la reproductibilit de la galerie ATB FUNGUS 3 Un r sultat est dit reproductible si les 3 r sultats de CMI d termin s demani re ind pendante sont identiques 1 dilution pr s Exactitude Le taux d exactitude de la galerie ATB FUNGUS 3 obtenu partir de 120 souches est de 97 5 pour la lecture visuelle et de 91 pour la lecture automatique et la m thode CLSI NCCLS Il est de 94 3 pour la lecture visuelle et de 88 3 pour la lecture automatique et la m thode EUCAST Le taux d exactitude en CMI pour FCA ITR AMB et VRC et le taux de concordance en cat gorie pour 5FC sont indiqu s dans le tableau ci dessous Lec arusa NA absence de recommandations EUCAST Expression des m canismes de r sistance L tude portant sur 20 souches a permis de v rifier que les principaux m canismes de r sistance aux antifongiques azol s s expriment avec la galerie ATB FUNGUS 3 avec les 2 modes de lecture Reproductibilit Le taux de reproductibilit global de la galerie ATB FUNGUS 3 est de 98 4 pour la lecture visuelle et de 99 pour la lecture automatique tabli avec 29 souches ELIMINATION DES DECHETS 1 Subcommittee of Antifungal Testing of the European Committee on Antibiotic Susceptib
15. che pas d obtenir un effet synergique bact ricide entre aminoglycoside et p nicilline un Streptomycine 500 pg lt 250 gt 500 8 lt 12 glycopeptide J una css de haut niveau HNR aux aminoglycosides d tect e gr ce des disques fortement charg s en streptomycine S 500 ug kanamycine K 1000 ug et gentamicine G 500 ug abolit cet effet synergique bact ricide Interpr tation des r sultats SBNR KD et GP gt D lt synergie possible avec les p nicillines ou les glycopeptides en cas de Kanamycine 100049 lt 250 gt 500 SS lt 10 Sensibilit ces derniers SM lt d gt C streptomycine peut tre utilis e K R lt d CMI gt et is pamicine peuvent tre utilis es GHR lt d gt tobramycine dib kacine amikacine gentamicine sisomicine n tilmicine et is pamicine ne peuvent tre utilis es Gentamicine 500 ug lt 250 gt 500 gt 17 lt 11 Pour les valeurs interm diaires des diam tres le niveau de r sistance devra tre confirm par dilution en agar ou en bouillon contenant 500 ug ml de S K ou G HNR CMI gt 500 ug ml La combinaison SIT est possible Chloramph nicol 30 ug lt 8 gt 8 gt 23 lt 23 Interpr tation valable pour thiamph nicol T tracycline 30 UI lt 1 50 gt 23 lt 21 Interpr
16. d termin es partir des CONTR LE DE QUALIT r sultats de CMI obtenues avec la m thode de dilution en g lose et compar es celles tablies par la galerie ATB G Il y a concordance lorsque les cat gorisations cliniques des deux m thodes sont identiques Le second souchier provenant du Centre National de R f rence des Antibiotiques Institut Pasteur Paris France permis de v rifier l expression des m canismes de r sistance Un m canisme de r sistance est exprim lorsque les r sultats de cat gorisation des antibiotiques marqueurs sont compatibles avec le profil attendu Enfin un r sultat est dit reproductible si les 3 r sultats de cat gorisation d termin s de mani re ind pendante sont identiques Taux de concordance Le taux de concordance de la galerie ATB G obtenu partir de 100 souches est de 93 Les taux d erreurs majeures et d erreurs tr s majeures obtenus avec la galerie ATB G sont respectivement de 2 et 1 Expression des m canismes de r sistance Ind pendamment du syst me expert l tude portant sur 45 souches a permis de v rifier que les principaux m canismes de r sistance aux antibiotiques rencontr s chez les ent robact ries s expriment avec la galerie ATB G Reproductibilit Le taux de reproductibilit global de la galerie ATB G est de 94 tabli avec un minimum de 10 souches par antibiotique ELIMINATION DES DECHETS ATB G r f 14 319 Ent robact
17. laborer une premi re liste d antibiotiques parmi ceux r f renc s dans le laboratoire du lyc e en fonction de l esp ce et ou du groupe bact rien isol Le lieu de l infection le contexte de l analyse ainsi que certains renseignements cliniques devront tre pris en compte le cas ch ant pour laborer la liste d finitive des antibiotiques tester 5 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique des notices techniques commerciales diff rentes publications Liste commune auxbacilles s 8 lt S a S AU Tableau VI Charge 32 E 9 S Gram n gatif non fermentaires 8 8 8 amp 5 8 5 55 509 SE S9 Eeer Sg 95 25 Famille7 aro pe ee disque no 5 maltophilia Burkholderia 5 99 s d anti 91 D nomination commune RW a o cepacia E D lt antibiotique P nicilline G P nicilline 6 ug P P nicilline M Oxacilline 5 ug OX CI Ampi
18. souches de C glabrata pr sentant un r sultat Sensible S au Fluconazole et ou l Itraconazole du fait d une moindre sensibilit naturelle de cette esp ce vis vis de ces antifongiques RESULTATS ATTENDUS Les profils de r sistance des tests antifongiques variant en fonction de la zone g ographique les r sultats attendus sont donc directement d pendants de l cologie microbienne locale esp ces m canismes de r sistance PERFORMANCES Les performances de la galerie ATB FUNGUS 3 ont t d termin es en utilisant trois souchiers comprenant les esp ces de levures suivantes Candida albicans Candida dubliniensis Candida famata Candida glabrata Candida guilliermondii Candida kefyr Candida krusei Candida lusitaniae Candida norvegensis Candida parapsilosis Candida tropicalis Cryptococcus neoformans Le premier souchier a permis d tablir le taux d exactitude des CMI ou de concordance en cat gorie 5FC pour chaque antifongique Les de r f rence ont t d termin es selon les recommandations CLSI NCCLS 2 et EUCAST 1 sauf pour l Amphot ricine B et sauf pour Cryptococcus neoformans qui ne disposent pas de recommandations EUCAST y a exactitude lorsque les obtenues avec ATB FUNGUS 3 sont identiques 2 dilutions pr s cellesd termin es par la m thode de r f rence Le second souchier a permis de v rifier l expression des m canismes de r sistance
19. 0 5 gt 1 gt 25 lt 22 Enoxacine 5 ug lt 1 gt 2 gt 22 lt 19 La r sistance aux fluoroquinolones est crois e entre les i diff rentes mol cules mais son niveau d expression peut L vofloxacine lt gt z mg lt 1 gt 2 220 lt 17 varier pours chaque mol cule Les souches Lom floxacine 5 ug lt 1 gt 2 2 22 lt 19 d ent robact ries sensibles la norfloxacine NOR sont Moxifloxacine 5 ug lt 0 5 gt 1 gt 24 lt 21 sensibles aux autres fluoroquinolones Pour les souches 1 Norfloxacine 5 lt 05 s4 gt 25 lt 22 ou R NOR des diff rences d activit intrins que Hg RS x impliquent un test et une r ponse ind pendante pour les Ofloxacine 5 ug lt 0 5 gt 1 2 25 lt 22 autres mol cules P floxacine 5 ug lt 1 gt 4 gt 22 lt 16 50 pg La r sistance acquise la fosfomycine est homog ne La 2 gt pr sence de colonies dans la zone d inhibition ne doit pas 5 32 gt 32 14 lt 14 tre prise en compte Interpr tation valable pour la fosfomycine trom tamol Azithromycine lt 16 pour Salmonella s rotype Typhimurium et Shigella R gles de lecture interpr tativepour le tableau VII 1 Interpr ter 1 les r sultats S faible expression de la r sistance naturelle dans les cas suivants a Klebsiella pneumoniae Klebsiella oxytoca Citrobacter diversus et Escherichia hermannii S aux amino et ou aux carboxy et ou aux ur ido p nicillines b Ent
20. Interm diaire ou R sistante PRESENTATION Coffret pour 25 antibiogrammes COMPOSITION Galeries La composition de la galerie ATB STAPH est mentionn e dans le tableau Contr le de Qualit de cette notice Milieux ATB Na Medium 2 Mueller Hinton origine animale 1000 ml Glucose 2g NaCl 20 g Ca qsp 50 mg Mo qsp 20 mg Agar 1 50 pH 7 2 7 4 REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS R actifs et instruments API Suspension Medium R f 70 700 ATB Medium R f 14 960 McFarland Standard ou DENSIMAT ou Densitom tre ATB Pipette Electronique ATB ou Inoculateur ATB et Embouts Automate ATB ou mini API avec logiciel REACTIFS COMPLEMENTAIRES C finase R f 55 622 PRECAUTIONS D UTILISATION Pour diagnostic in vitro uniquement Ouvrir les ampoules d licatement comme suit Placer l ampoule dans le prot ge ampoule Tenir l ensemble verticalement dans une main bouchon blanc vers le haut Bien enfoncer le bouchon Exercer une pression horizontale avec le pouce sur la partie stri e du bouchon de fa on casser l extr mit de l ampoule Retirer l ampoule du prot ge ampoule et conserver le prot ge ampoule pour une utilisation ult rieure Enlever d licatement le bouchon CONDITIONS DE STOCKAGE Les galeries et milieux se conservent 2 8 C l obscurit jusqu la date limite d utilisation indiqu e sur le coffret ECHANTILLONS PRELEVEMENT ET PREPA
21. avec les autres b ta Aztr onam 30 ug lt 1 gt 16 gt 27 lt 19 Cf r gles 3 5 Ceftazidime 30 ug lt 8 gt 8 gt 19 lt 19 C f pime 30 ug lt 8 gt 8 gt 19 lt 19 Cf r gles 1 5 Cefpirome 30 ug lt 8 gt 8 219 lt 19 Tobramycine 10 ug lt 4 gt 4 gt 16 lt 16 Amikacine 30 ug lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Is pamicine 30 ug lt gt 16 2 17 lt 15 Cf r gles 6 et 7 Gentamicine qo U lt 4 gt 4 gt 16 lt 16 N tilmicine 30 ug lt 4 gt 4 gt 19 lt 19 En raison de l absence de corr lation CMI diam tre il y a w lieu de d terminer la CMI de la colistine en cas d utilisation STE 50 pg Se SC th rapeutique souche multir sistante Interpr tation valable pour polymyxine B Ciprofloxacine 5 ug lt 0 5 gt 1 2 25 lt 22 Rifampicine 30 ug lt 4 gt 16 2 19 lt 14 50 ug La r sistance acquise la fosfomycine est homog ne La Fosfomycine 50 ug lt 32 gt 32 2 14 lt 14 pr sence de colonies dans la zone d inhibition ne doit pas G6P tre prise en compte Sulfamides 200 pg lt 64 gt 256 gt 17 lt 12 5 valable uniquement pour les souches isol es R gles de lecture interpr tative du tableau VIII Abr viations TIC ticarcilline TCC ticarcilline acide clavulanique PIP pip racilline PTZ pip racilline tazobactam AZL azlocilline IPM imip n me ATM aztr onam CFZ c fop razone CFS cefsulodine CPO cefpirome FEP c f pime CAZ ceftazidim
22. bornes l expression d une PLP2a apr s induction par une b ta lactamine ou la pr sence d un g ne mecA doit tre recherch e par une technique appropri e Des souches de S saprophyticus et S lugdunensis pr sentent des valeurs inf rieures la borne basse pour les diam tres de la c foxitine ou du moxalactam Le g ne mecA ou la PLP2a sont rechercher pour ces souches En cas de n gativit ells sont consid r es comme sensibles aux isoxazolyl p nicillines 2 Les souches de staphylocoques r sistantes la c foxitine au moxalactam ou l oxacilline ou poss dant le g ne mecA ou exprimant la PLP2a apr s induction par une b ta lactamine doivent tre interpr t es r sistantes toutes les b ta lactamines p nicillines associ es ou non un inhibiteur b ta lactamase c phalosporines carbap n mes De rares staphylocoques coagulase n gative poss dant le g ne mecA ne sont pas identifi s comme r sistants la m ticilline par les tests la c foxitine environ 4 des cas et au moxalactam 1 Il est donc recommand de v rifier l absence du g ne mech ou de la PLP2a devant toute infection s v re staphylocoque coagulase n gative 4 Les souches p nicilline R oxacilline S sont sensibles aux isoxazolyl p nicillines aux p nicillines associ es inhibiteur de b ta lactamase aux c phalosporines et aux carbap n mes Ces mol cules sont utilisables dans les lim
23. d fini tabli le long de la bandelette reste stable pendant une longue p riode de temps permettant de couvrir les temps critiques d une large vari t de micro organismes Apr s une p riode d incubation d une nuit ou plus une ellipse d inhibition sym trique centr e le long la bandelette est form e La est lue directement partir de l chelle de graduation et exprim e en ug mL au point o l ellipse d inhibition croise la bandelette D autres profils de croissance inhibition peuvent aussi tre vus pour des m thodes de d tection de la r sistance REACTIFS STOCKAGE Etest doit toujours tre stock la temp rature indiqu e sur l emballage jusqu la date d expiration Les bandelettes non utilis es issues d un emballage ouvert sont garder l abri de l humidit en les conservant dans un r cipient herm tique avec un sachet dessicant actif et peuvent alors tre utilis es jusqu la date de p remption Les Etest conditionn s en cartouche en mousse peuvent galement tre stock s en clampant l emballage aluminium Les Etest utilis s sont prot ger de l humidit et de la chaleur ou N P 0 MANIPULATION Laisser revenir les bandelettes temp rature ambiante avant utilisation Ouvrir l emballage blister en coupant au sommet d un compartiment ou pour l emballage en cartouche au sommet de l emballage aluminium Les Etest peuvent tre saisis manuellem
24. et une sp cificit de 95 100 pour les m thodes de diffusion C foxitine et Oxacilline Reproductibilit Le taux de reproductibilit global de la galerie ATB STAPH est de 99 3 tabli avec un minimum de 10 souches par antibiotique ELIMINATION DES DECHETS 30 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens CONTROLE DE QUALITE 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications ATB STAPH R f 14 329 Staphylocoques mg l CQ1 01 PEN PENICILLINE 0 25 R OXACILLINE 2 s 02 KAN KANAMYCINE 8 s TOB TOBRAMYCINE 4 s 03 GENTAMICINE 4 8 s 04 ERY ERYTHROMYCINE 1 s TEL TELITHROMYCINE 0 5 s 05 LIN LINCOMYCINE 2 s FOS FOSFOMYCINE 32 s 06 PRI PRISTINAMYCINE 1 2 s 07 QDA QUINUPRISTINE DALFOPRISTINE 0 5 2 S 08 TET TETRACYCLINE 4 S MIN MINOCYCLINE 4 S 09 RFA RIFAMPICINE 0 5 16 S 10 LNZ LINEZOLID 2 4 S 11 FUC ACIDE FUSIDIQUE 2 16 S 12 LVX LEVOFLOXACINE 1 4 S 13 VAN VANCOMYCINE 4 16 S 14 TEC TEICOPLANINE 4 16 S 15 TSU TRIMETHOPRIME SULFAMETHOXAZOLE 2 38 S FUR NITROFURANTOINE 32 S CQ1 Staphylococcus aureus 29213 Les modifications de concentrations critiques li es l harmonisation Europ enne recommandations de l EUCAST ne sont pas appliqu es actuellement Elles feront l objet d une impl mentation globale l issue de leur publicati
25. fluoroquinolones bas niveau ERYSIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE glycopeptides CORYNEBACTERIUM UREALYTICUM CORYNEBACTERIUM JEIKEIUM b ta lactamines aminosides macrolides lincosamides sulfamides RHODOCOCCUS EQUI streptogramines lincosamides BACILLUS CEREUS p nicilline G amino et carboxy p nicillines c phalosporines NOCARDIA ASTEROIDES NOCARDIA FARCINICA trim thoprime vancomycine rifampicine fluoroquinolones LACTOBACILLUS sulfamides LACTOBACILLUS HETEROFERMENTAIRES glycopeptides COQUES A GRAM NEGATIF NEISSERIA trim thoprime glycopeptides NEISSERIA MENINGITIDIS NEISSERIA GONORRHOEAE lincosamides colistine polymyxine BRANHAMELLA CATARRHALIS lincosamides trim thoprime MORAXEL LA trim thoprime BACTERIES ANAEROBIES STRICTES Aminosides aztr onam sauf Fusobacterium trim thoprime quinolones BACTEROIDES DU GROUPE FRAGILIS aminop nicillines c phalosporines q g n ration c famandole c furoxime colistine polymyxine B glycopeptides fosfomycine PREVOTELLA glycopeptides fosfomycine PORPHYROMONAS fosfomycine colistine polymyxine FUSOBACTERIUM macrolides bas niveau FUSOBACTERIUM VARIUM FUSOBACTERIUM MORTIFERUM rifampicine CLOSTRIDIUM EUBACTERIUM PEPTOSTREPTOCOCCUS colistine polymyxine B fosfomycine CLOSTRIDIUM DIFFICILE c phalosporines CLOSTRIDIUM INNOCUUM vancomycine bas niveau ACTINOMYCES PROPIONIBACTERIUM c phal
26. gt 16 gt 19 lt 14 Cf r gle 1 Amoxicilline ac clavulanique 20 10 u lt 4 2 gt 16 2 gt 21 lt 14 r gle 1 C falotine H 30 ug lt 8 gt 32 gt 18 lt 12 Cf r gle 1 C fotaxime H 30 ug lt 1 gt 2 2 26 lt 23 Cf r gle 1 Streptomycine 100 lt 8 gt 16 gt 15 lt 13 Cf r gles 1 2 Gentamicine 15 pg 10 U lt 2 gt 4 gt 18 lt 16 Cf r gles 1 et 2 Kanamycine 30 UI lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Cf r gles 1 et 2 Tobramycine 10 ug lt 2 gt 4 gt 18 lt 16 Cf r gles 1 et 2 Erythromycine 150 lt 1 gt 4 2 22 lt 17 Cf r gles 1 Interpr tation valable pour clarithromycine Acide nalidixique 30 ug lt 8 gt 16 gt 20 lt 15 Cf r gle 1 Ciprofloxacine 5 ug lt 0 5 gt 1 gt 25 lt 22 Cf r gle 1 T tracycline 30 UI lt 4 gt 8 gt 19 lt 17 Chloramph nicol 30 pg lt 8 gt 16 2 23 lt 19 20 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications R gles de lecture interpr tative du tableau XVII Remarques selon les antibiotiques la corr lation entre CMI et diam tres est parfois difficile tablir En cas de doute sur les r sultats obtenus par diffusion en milieu g los il y a lieu de d terminer les CMI par une m thode de r f
27. isolement bioM rieux suivants peuvent tre utilis s G lose Sabouraud 2 G lose Sabouraud 2 Glucose milieu recommand par l EUCAST 1 8 et le CLSI NCCLS 2 G lose Sabouraud Gentamicine Chloramph nicol 2 G lose CPS ID 3 G lose Columbia 5 sang de mouton G lose Trypcase Soja 5 sang de cheval G lose Chocolat PolyViteX G lose BCP G lose Candida ID 2 MODE OPERATOIRE Pr paration de la galerie Sortir la galerie de son emballage Noter l identifiant de la levure tester sur la languette lat rale de la galerie Pr paration de l inoculum Ouvrir une ampoule NaCl 0 85 Medium ou Suspension Medium comme indiqu au paragraphe Pr cautions d utilisation de la notice du produit A l aide d une pipette pr lever plusieurs colonies dont l ge n exc de pas 4 jours R aliser une suspension d opacit quivalente l talon 2 de McFarland Comparer au t moin d opacit du kit McFarland Standard utiliser le Densitom tre ou le DENSIMAT se reporter au manuel d utilisation Cette suspension doit tre utilis e extemporan ment NOTE il est recommand de contr ler la puret de l inoculum et r isoler dans le cas de cultures mixtes Transf rer 20 ul de cette suspension dans F2 Medium l aide d une pipette Inoculation de la galerie Inoculation MANUELLE ATB F2 Medium avec la Pipette El
28. la galerie sur un fond noir planche de lecture ATB FUNGUS 3 disponible aupr s de bioM rieux Pour chaque antifongique partir de la concentration la plus faible et noter sur la fiche de r sultats un score de croissance pour chacune des cupules comparativement aux cupules t moin D finition Score Absence de r duction de croissance 4 L g re r duction de croissance 3 R duction marqu e de croissance 2 Tr s faible croissance 1 Absence de Pour l Amphot ricine B AMB correspond la concentration la plus faible permettant d obtenir une inhibition compl te de la croissance score 0 Note une ou des colonie s isol e s ou un aspect de croissance en p riph rie de cupule doit tre lu avec un score 1 Pour le Fluconazole FCA l Itraconazole ITR et le Voriconazole du fait de la possibilit d un ph nom ne de croissance r siduelle la CMI correspond la concentration d antifongiques la plus faible permettant d obtenir un score 2 1 ou 0 Note un aspect de croissance en p riph rie d cupule doit tre lu avec un score 0 ou 1 2 Interpr tation de la Flucytosine 5FC Rechercher et quantifier dans les deux cupules une croissance par lecture visuelle ou automatique par l automate ou mini API se reporter aux manuels d utilisation Pour la Flucytosine test e deux concentrations Notes Candida krusei tant une esp ce intrins
29. moins les 4 souches ont pr sent une croissance abondante ELIMINATION DES DECHETS 25 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales de diff rentes publications ATB G ANTIBIOGRAMME POUR LES ENTEROBACTERIES INTRODUCTION ET OBJET DU TEST H bioM rieux r f 14 319 2008 01 La galerie ATB G permet de d terminer la sensibilit aux antibiotiques des ent robact ries en milieu semi solide dans des conditions tr s proches des techniques de r f rence de dilution en g lose ou de micro dilution selon les recommandations du CASFM ou CLSI NCCLS PRINCIPE La galerie ATB G comporte 16 paires de cupules La premi re sans antibiotique sert de t moin de croissance Les 15 suivantes contiennent des antibiotiques une seule ou deux concentrations c et C La bact rie tester est mise en suspension puis transf r e dans le milieu de culture et inocul e dans la galerie Apr s incubation la lecture de la croissance se fait soit visuellement soit avec l automate ATB ou mini API Le r sultat obtenu permet de cat goriser la souche Sensible Interm diaire ou R sistante PRESENTATION COMPOSITION DE LA GALERIE La composition de la galerie ATB G est mentionn e dans le tableau Contr le de Qualit de cette notice
30. of Haemophilus influenzae Antimicrob Agents and Chemother 1980 vol 17 n 1 p 80 83 3 MONTGOMERY RAYMUNDO L DREW W L Chromogenic cephalosporin spot test to detect betalactamase in clinically significant bacteria J Clin Microbiol 1979 vol 9 n 2 205 207 4 O CALLAGHAN C H MORRIS A KIRBY S M et al Novel method for detection of beta lactamases by using a chromogenic cephalosporin substrate Antimicrob Agents and Chemother 1972 vol 1 n 4 283 288 5 PEYRET M M canismes de la r sistance des bact ries aux antibiotiques Lyon Pharm 1991 vol 42 n 1 p 31 41 6 SKINNER A WISE R A comparison of three rapid methods for the detection of beta lactamase activity in Haemophilus influenzae J Clin Pathol 1977 vol 30 n 11 p 1030 1032 35 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications ATB FUNGUS 3 ANTIFONGIGRAMME POUR LES LEVURES 9 INTRODUCTION DU TEST bioM rieux r f 14 204 2008 04 La galerie ATB FUNGUS 3 permet de d terminer la sensibilit des Candida et Cryptococcus neoformans aux antifongiques en milieu semi solide dans des conditions tr s proches de la technique de r f rence de microdilution selon les recommandations de l E
31. perte d affinit ont t d crits Cette m thode rapide ne remplace pas les tests classiques de sensibilit aux antibiotiques Pour certaines esp ces de staphylocoques en particulier S epidermidis la pr sence d une lactamase inductible peut entra ner une r action faussement n gative Il est conseill de confirmer la r action n gative partir de colonies pr lev es en bordure d un disque de m ticilline PERFORMANCES Les performances ont t valu es sur 24 souches bact riennes staphylocoques ent rocoques Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoeae Branhamella catarrhalis et germes ana robies R sultats Les 12 souches poss dant une lactamase ont entra n une coloration rouge du disque en 1 mn Les 12 souches ne poss dant pas de B lactamase n ont pas provoqu l apparition d une coloration rouge apr s 1 heure ELIMINATION DES DECHETS II incombe chaque laboratoire de g rer les d chets et les effluents qu il produit selon leur nature et leur dangerosit et d en assurer ou faire assurer le traitement et l limination selon les r glementations applicables REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1 COUDRON P E MARKOWITZ S M WONG E S Isolation of a U lactamase producing aminoglycoside resistant strain of Enterococcus faecium Antimicrob Agents and Chemother 1992 vol 36 n5 1125 1126 2 MARKOWITZ S M Isolation of an ampicillin resistant non beta lactamase producing strain
32. quement r sistante au Fluconazole le test doit tre interpr t R syst matiquement pour l Amphot ricine une gt 2 mg l sugg re une r sistance 2 Donn es fournies titre informatif absence de recommandations officielles Concentrations critiques mg L recommand es par le CLSI NCCLS pour Candida spp Aspect des cupules R sultats La souche est 0 1 2 0 1 2 S Sensible 3 4 0 1 2 l Interm diaire 3 4 3 4 R R sistante Notes La d finition des scores de croissance est la m me que celle d crite ci dessus pour la d termination des CMI Un aspect de croissance en p riph rie de cupule doit tre lu avec un score 0 ou 1 3 Concentrations critiques utilis es Concentrations critiques mg L recommand es par le CLSI NCCLS pour Candida spp s 1 R Flucytosine lt 4 8 16 gt 32 Amphot rocine B ND ND ND Fluconazole lt 8 16 32 gt 64 Itrconazole lt 0 125 0 25 0 5 gt 1 Voriconazole lt 1 2 gt 4 ND Non formellement d fini par le CLSI NCCLS s 1 R Flucytosine lt 4 8 16 gt 32 Amphot rocine B ND ND ND Fluconazole lt 4 8 2 16 ltrconazole ND ND ND Voriconazole ND ND ND ND Non D fini R f rence bibliographique Note pour l Amphot ricine une gt 2 mg l sugg re une r sistance les CMI habituellement o
33. rence ou toute m thode ayant montr pour les antibiotiques concern s son quivalence avec la m thode de r f rence 1 Pour Campylobacter spp une absence de zone d inhibition autour des disques de b lactamines aminosides macrolides ou quinolones traduit une r sistance de haut niveau 2 Compte tenu des conditions d incubation ana robiose ou microa robiose les diam tres des zones d inhibition autour des disques d aminosides sont toujours r duits CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR LES ANAEROBIES STRICTS Tableau XIX Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d P nicilline G lt 0 25 gt 0 5 pi Interpr tation pour les ana robies Gram n gatif Cf lt Amoxicilline lt 0 5 gt 2 r gles 1 et 2 pie Interpr tation pour les ana robies Gram positif Cf r gle lt gt x Serie SN TEE 25 Se 8 E 3 Interpr tation valable pour p nicilline G et ampicilline Amoxicilline ac clavulanique 20 10 ug lt 4 2 gt 8 2 gt 21 lt 17 Cf r gle 4 Ticarcilline 75 ug lt 8 gt 16 2 24 lt 22 Interpr tation pour les ana robies Gram positif lt 16 gt 16 2 22 lt 22 Interpr tation pour les ana robies Gram n gatif Ticarcilline ac clavulanique 75 10 pg lt 8 2 gt 16 2 gt 24 lt 22 Pour Bacteroides fragilis l inte
34. ries mg l CQ1 01 4 16 5 1 02 CLAVULANIQUE 4 2 16 2 5 1 03 TICARCILLINE 16 s TICARCILLINE ACIDE CLAVULANIQUE 16 2 s 04 TZP PIPERACILLINE TAZOBACTAM 8 4 64 4 s 05 PIC PIPERACILLINE 8 s IMI IMIPENEME 4 s 06 CEFALOTINE 8 S R CEFOXITINE 8 s 07 CTX CEFOTAXIME 4 32 s 08 CAZ CEFTAZIDIME 4 32 s 09 CA1 CEFTAZIDIME 1 1 s FOS FOSFOMYCINE 32 s 10 FEP CEFEPIME 4 32 s 11 GEN GENTAMICINE 4 s TOBRAMYCINE 4 s 12 NET NETILMICINE 4 s AMIKACINE 8 5 13 TSU COTRIMOXAZOLE 2 38 s NAL ACIDE NALIDIXIQUE 8 s 14 OFL OFLOXACINE 1 4 s 15 CIP CIPROFLOXACINE 1 2 s CQ1 Escherichia coli ATCC 25922La galerie ATB G a t con ue en suivant les recommandations du comit CA SFM 2003 1 Les modifications de concentrations critiques li es l harmonisation Europ enne recommandations de l EUCAST nesont pas appliqu es actuellement Elles feront l objet d une impl mentation globale l issue de leur publication co mpl te 27 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications METHODOLOGIE FICHE DE RESULTAT ATB G REF 14 319 Origine WER EES CR Ee EEN EE API Suspension Medium API NaCl 0 85 Medium DE
35. s 24 heures d incubation le diam tre de la zone d inhibition autour du disque de l un des deux glycopeptides est lt 17 mm le diam tre de la zone d inhibition autour du disque de vancomycine est inf rieur dau moins 3 mm celui autour du disque de teicoplanine quelques colonies sont pr sentes dans la zone d inhibition de l un des deux glycopeptides lorsque les souches sont cat goris es 1 ou R au moins l un des deux glycopeptides par les m thodes automatis es en cas de culture sur un milieu additionn de vancomycine Il convient aussi de v rifier l identification notamment cas d infection s v re Enterococcus casseliflavus flavescens et Enterococcus gallinarum tant naturellement r sistants aux glycopeptides Trim thoprime sulfam thoxazo le 1 25 23 75 ug lt 0 03 10 6 gt 1 19 lt 10 Nitrofuranes 300 ug lt 64 gt 64 lt 15 Interpr tation valable uniquement pour les souches isol es des urines 15 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE Tableau XII Charge Concentratio
36. sont celles pour lesquelles le succ s th rapeutique est impr visible Ces souches forment un ensemble h t rog ne pour lequel les r sultats obtenus in vitro ne sont pas pr dictifs d un succ s th rapeutique En effet ces souches peuvent pr senter un m canisme de r sistance dont l expression in vitro est faible avec pour cons quence leur classement dans la cat gorie S Cependant in vivo une partie de ces souches appara t r sistante au traitement peuvent pr senter un m canisme de r sistance dont l expression n est pas suffisante pour justifier un classement dans la cat gorie R mais suffisamment faible pour esp rer un effet th rapeutique dans certaines conditions fortes concentrations locales ou posologies accrues La cat gorie interm diaire est aussi une zone tampon qui tient compte des incertitudes techniques et biologiques ETABLISSEMENT DES VALEURS CRITIQUES DELIMITANT LES CATEGORIES CLINIQUES Les valeurs des concentrations et des diam tres critiques d finies pour chaque antibiotique sont tablies en tenant compte de plusieurs param tres la distribution des concentrations minimales inhibitrices CMI pour des populations de souches d finies et appartenant chacune des esp ces bact riennes impliqu es en pathologie humaine e les concentrations humorales et tissulaires qui sont obtenues avec les posologies recommand es dans le r sum des caract ristiques du produit RCP e la co
37. tation valable pour les autres t tracyclines sauf la minocycline Minocycline lt 0 5 gt 1 Tig cycline 15 ug lt 0 25 gt 0 5 gt 22 lt 22 Interpr tation valable pour les Streptococcus A B C G Interpr tation valable pour azithromycine clarithromycine Erythromycing lt 0 25 SE EE Set G t et EE Spiramycine 100 ug lt 1 gt 4 gt 24 lt 19 T lithromycine 15 ug lt 0 25 gt 0 5 2 24 lt 21 Devant une souche r sistante l rythromycine et sensible Lincomycine 15 ug lt 2 gt 8 gt 21 lt 17 lincomycine ou clindamycine rechercher le caract re inductible de cette r sistance antagonisme rythromycine lincomycine En l absence d induction r pondre sensible Clindamycine 20 lt 0 5 gt 0 5 la lincomycine clindamycine pr sence d induction r pondre r sistante lincomycine et clindamycine Pristinamycine 15 ug lt 1 gt 2 gt 22 lt 19 Interpr tation valable pour quinupristine dalfopristine L vofloxacine 5 Hg lt 1 gt 2 gt 20 lt 17 Moxifloxacine 5 ug lt 0 5 gt 1 gt 24 lt 21 Lin zolide 30 ug lt 2 gt 4 gt 28 lt 24 Teicoplanine 30 ug lt 4 gt 4 2 17 Pour les diam tres lt 17 mm il est recommand de mesurer Vancomycine 30 ug lt 4 gt 4 gt 17 la CMI et de v rifier l identification Daptomycine lt 1 gt 1 Interpr tation valable pour les Streptococcus G Rifampicine 30 ug lt 0 06 gt 0 5 gt 29 lt 24 Trim thoprime sulf
38. techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE Tableau XII suite Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque R ccs D R 9 L vofloxacine 5 ug lt 2 gt 2 gt 17 lt 17 Le d pistage des pneumocoques de sensibilit diminu e Moxifloxacine 5 ug lt 0 5 gt 0 5 gt 24 lt 24 aux fluoroquinolones est r alis sensibilit Si le diam tre autour du disque de norfloxacine charg 5 ug est inf rieur 10 mm et ou Ciprofloxacine 5 lt 0 12 gt 2 gt 30 lt 19 si la CMI est gt 16 mg L il existe un risque lev de s lection in vivo de mutants r sistants aux fluoroquinolones et d chec clinique Lin zolide 30 ug lt 4 gt 4 gt 24 lt 24 Teicoplanine 30 ug lt 4 gt 8 gt 17 Pour les diam tres lt 17 il est recommand Vancomycine 30 ug lt 4 gt 8 gt 17 d terminer la et de confirmer l identification Rifampycine 30 ug lt 0 06 gt 0 5 gt 29 lt 24 17 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publicat
39. valable pour josamycine et mid camycine Lincomycine lt 2 gt 8 Interpr tation valable pour clindamycine Devant une souche r sistante l rythromycine et sensible lincomycine et clindamycine rechercher le caract re inductible de cette r sistance antagonisme rythromycinelincomycine 15 Hg Si En dd r pondre sensible la lincomycine et clindamycine En pr sence d induction r pondre sensible lincomycine et clindamycine avec le message suivant de rares checs cliniques ont t rapport s par s lection de mutants constitutifs r sistants Clindamycine lt 0 25 gt 0 5 En cas de r sistance la clindamycine les activit s de la pristinamycine et de l association quinupristine dalfopristine sont diminu es Pristinamycine 15 ug gt 2 gt 22 lt 19 Quinupristine dalfopristine 15 Hg lt gt 2 gt 22 lt 19 Pour les souches dont le diam tre est 19 lt lt 22 mm d terminer la CMI Lin zolide 30 ug lt 4 gt 4 gt 24 lt 24 Mupirocine lt gt 19 P floxacine S ug lt 1 gt 4 gt 22 lt 16 P floxacine ofloxacine l vofloxacine et ciprofloxacine ont Ofloxacine lt 1 gt 4 gt 22 lt 16 une activit similaire sur les staphylocoques La r sistance L vofloxacine 5 Lg lt 1 s 4 gt 20 lt 15 est crois e entre ces mol cules et le r sultat obtenu en 5 lt 1 2 gt 22 19 testant l une d entre elles est valable pour les autres Ciprofloxacine Hg 5 S En c
40. 10 UFC cm pour N meningitidis en tampon phosphate M 15 pH 7 2 2 Dilution de la suspension inoculum Bact ries Dilution en bouillon Mueller Hinton ou solution saline 0 9 NaCl avec un couvillon introduit dans la suspension inoculum dilu e A 1 temps Orientation des stries temps A Orientation Orientation VI stries D p t des disques des FIN B Incubation et lecture Cat gorie clinique et CMI estim e Diam tre en mm Concentrations en ug om Apr s validation de la technique remplissage du tableau de lecture Zi ef 2 s s ojl 5 5 5 2 Es e 2 z 59 g ES 5255 E 2 2g e P 77 bd 02 ooo LEES 215555 251853 5 58 5155 S OZ 6 Puis phrase s de compte rendu de lecture interpr tative Neisseria gonorrhoeae dilution au 1 100 de la suspension inoculum 0 5 McF 10 UFC 0 1 dans 10 cm ou bien encore deux gouttes de pipette Pasteur dans 10 cm Enterobacteriaceae bacilles Gram negatives non fermentaires Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter spp Stenotrophomonas maltophilia Burkholderia cepacia Staphylococcus spp Enterococcus spp Streptococcus
41. 32 Amoxicilline S pneumoniae S ATCC 0016 256 AC S pPneumoniae 200 hors m ningite pneumoniae 49619 0125 Clinical Laboratory Standards Institute Inc 23 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications MYCOBIOGRAMME MYCOBIO T TEST DE SENSIBILIT DES MYCOBACTERIES AUX ANTIBIOTIQUES INTRODUCTION ET OBJET DU TEST bioM rieux r f 41 740 2002 09 L Le test Mycobiogramme est destin l tude de la sensibilit des mycobact ries aux antibiotiques par la m thode des proportions d crite par CANETTI PRINCIPE Le test Mycobiogramme est compos de milieux de L wenstein Jensen additionn s ou non d antibiotiques diff rentes concentrations Les chantillons sont ensemenc s diff rentes dilutions dans des tubes contenant 1 ou 2 concentrations d antibiotique ainsi que dans des tubes t moins sans antibiotique Le rapport entre la croissance observ e dans les tubes avec antibiotiques et dans les tubes t moins indique la proportion de bacilles r sistants pour la souche tudi e Une souche est dite r sistante un antibiotique lorsque la proportion de bacilles ou elle contient atteint ou d passe un certain pourcentage appe
42. 5 6 Len de dan eme ent nt en te pukunka 4 B cill s NEE Mee UE 4 Goq esa Gram E E 4 Ba ct ries na robies Sirict s 4 Gontr le de qualit int rn uwa sua EE AAE 5 Antibiotiques tudier par esp ce ou groupe bact riennes 5 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Enterobacteriaceae sssse1 7 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Pseudomonas aeruginosa 10 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Acinetobacter spp Stenotrophomonas maltophilia et Burkholderia cepacia ss 11 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Staphylococcus Spp 12 D termination de l activit in vitro des glycopeptides sur Staphylococcus aureus 14 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Enterococcus spp 14 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Streptococcus pneumoniae 16 Concentrations diam tres critiques et r gles de lecture interpr tative pour Streptococcus spp S pneumoniae exceptl
43. Acinetobacter spp Tobramycine 10 Hg lt 4 gt 4 gt 16 lt 16 Pour Acinetobacter spp Amikacine H 30 ug lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Pour Acinetobacter spp Is pamicine H 30 ug lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Pour Acinetobacter spp Gentamicine lt 4 gt 4 gt 16 lt 16 Pour Acinetobacter spp N tilmicine 30 ug lt 4 gt 4 gt 19 lt 19 Pour Acinetobacter spp Chloramph nicol 30 ug lt 8 gt 16 gt 23 lt 19 Interpr tation valable pour thiamph nicol T tracycline 30 UI lt 4 gt 8 gt 19 lt 17 Pour S maltophilia et B cepacia Les diam tres ont pour but de v rifier la r sistance naturelle de certaines esp ces mais ne permettent pas de d tecter E toutes les r sistances acquises ce qui impose de 50 pg ES SS SC lt 19 d terminer la CMI en cas d utilisation souche multir sistante Interpr tation valable pour polymyxine B P floxacine 5 ug lt 1 gt 4 gt 22 lt 16 Ofloxacine 5 ug lt 1 gt 4 gt 22 lt 16 La r sistance aux fluoroquinolones est crois e entre les Ciprofloxacine 5 ug lt 4 SE gt 22 lt 19 diff rentes mol cules mais son niveau d expression peut 2 e pour mol cule L vofloxacine 5 ug lt 1 gt 2 gt 20 lt 17 Rifampicine 30 ug lt 4 gt 16 gt 19 lt 14 Pour Acinetobacter spp et S maltophilia Trim thoprime sulfam thoxazo 1 25 23 7 Interpr tation valable uniquement pour les autres le 5 ug associations trim thoprimesulfamide S maltophilia l
44. C d lt lt D LECTURE INTERPR TATIVE DE L ANTIBIOGRAMME La lecture interpr tative de l antibiogramme fond e sur la connaissance des ph notypes de r sistance conduit dans certains cas transformer un r sultat initialement cat goris S en r sultat ou R en raison d un risque d chec th rapeutique De plus pour quelques couples bact rie antibiotique malgr une cat gorisation lt sensible gt le risque accru de s lection in vivo de mutants r sistants justifie un commentaire particulier destin au clinicien Ceci requiert au pr alable l identification correcte de la souche bact rienne et une m thode d antibiogramme standardis e L identification formelle du ou des m canisme s de r sistance impliqu s impose la mise en place de techniques sp cifiques Les r gles de lecture interpr tative sont mentionn es pour certaines esp ces ou pour certains groupes bact riens dans les notes additionnelles des tableaux VII XIX du suppl ment annuel HARMONISATION EUROPEENNE Octobre 2004 Vol 19 n 3 191 193 Bull Soc Fr Microbiol Le besoin d une harmonisation europ enne dans la m thodologie des tests de sensibilit aux antibiotiques et leur interpr tation a t ressenti il y a d j de nombreuses ann es Ceci a conduit en 2002 la cr ation de l EUCAST European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing qui est compos d une part d un General Committee qui comporte un re
45. Chez Prevotella la production de B lactamase conf re la r sistance p nicilline G et aux amino p nicillines c phalosporines 1 g n ration c furoxime et aux c phalosporines de 3 g n ration orales L activit est restaur e lors de l association avec un inhibiteur de B lactamase La d tection par la nitroc phine n est pas ais e faible affinit pour le substrat production bas niveau pigmentation des souches Les de l amoxicilline sont inf rieures 0 5mg L pour les souches non productrices de B lactamase La de l amoxicilline peut tre d termin e par toute technique ayant d montr pour cet antibiotique son quivalence avec la technique de r f rence par exemple l epsilom tre 3 Chez Clostridium butyricum C clostridioforme et C ramosum la production de B lactamase est d tect e par une m thode chromog nique d s l isolement Seule la B lactamase de C butyricum est inhib e aux concentrations th rapeutiques par les inhibiteurs de B lactamase 4 La r sistance l imip n me est d crite en France chez Bacteroides fragilis carbap n mase et B distasonis La r sistance est crois e pour l ensemble des B lactamines m me associ es des inhibiteurs de B lactamases 5 Pour Bacteroides du groupe fragilis interpr ter tout r sultat S aux c phalosporines de geme chromosomique g n ration B lactamase 21 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social
46. Cotrimoxazole trim sulfa 1 25 23 75 SXT ER C C C et association Sulfamides 200 ug 555 LEGENDE les noms d antibiotiques en gras correspondent ceux couramment utilis s laboratoire du lyc e une case noircie marque un antibiotique n cessaires l orientation th rapeutique en fonction de diff rents contextes pid mio cliniques la lettre S amp antibiogramme standard la lettre lt test compl mentaire la lettre Information aide la lecture interpr tative et ou l identification indications dans les tableaux VII et suivants 6 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR ENTEROBACTERIACEAE Tableau VII Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque cci ccs D d Ampicilline 10 yg lt 4 SE gt 19 lt 16 pour bacampicilline pivampicilline Cf Amoxicilline 25 ug lt 4 gt 8 gt 21 lt 16 r gles 1 et 2 Ampicilline sulbactam 1010 lt 4 8 gt 8 8 gt 19 lt 16 Cf r gle 10 Amoxicilline ac clavulanique 2010 lt 4 2 gt 8 2 gt 21 lt 16 Cf r gle 10 Ticarci
47. ET ET 0 5 McF _ 0 ATB Medium 32 x 135 ul O000000000000000 0000000000000000 ATB G 18 00 24 00 O2 36 2 C ATB G Note 28 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications ATB STAPH ANTIBIOGRAMME POUR LES STAPHYLOCOQUES INTRODUCTION ET OBJET DU TEST bioM rieux r f 14 329 2008 02 La galerie ATB STAPH permet de d terminer la sensibilit des staphylocoques aux antibiotiques en milieu semi solide dans des conditions tr s proches des techniques de r f rence de dilution en g lose ou de micro dilution selon les recommandations du CASFM ou CLSI La galerie ATB STAPH a t con ue en suivant les recommandations du comit CA SFM 2008 PRINCIPE La galerie ATB STAPH comporte 16 paires de cupules La premi re paire sans antibiotique sert de t moin de croissance Les 15 suivantes contiennent des antibiotiques une seule ou deux concentrations c et C La bact rie tester est mise en suspension puis transf r e dans le milieu de culture et inocul e dans la galerie Apr s incubation la lecture de la croissance se fait soit visuellement soit avec l automate ATB ou Le r sultat obtenu permet de cat goriser la souche Sensible
48. Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications DOCUMENTATION TECHNIQUE ETUDE DE LA SENSIBILIT AUX ANTIMICROBIENS Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications ANTIBIOGRAMME EN MILIEU GELOSE COMITE DE L ANTIBIOGRAMME DE LA SOCIETE FRAN AISE DE MICROBIOLOGIE CA SFM RECOMMANDATIONS 201022 Eeer EEN 1 Extrait de l avant propos des recommandations 2010 dition janvier 2010 1 D finition des cat gories cliniques a 1 Etablissement des valeurs critiques d limitant les cat gories cliniques 1 Proc dure et crit res de cat gorisation des souches 1 Lecture interpr tative de l antibiogramme sisi 1 1 M thodologie de r alisation de l antibiogramme par diffusion en milieu g los 2 R sistances naturelles aux antibiotiques des principales esp ces bact riennes d int r t m dical 3 Bacilles Gram n gatif non exigeants sise 3 Bacilles Gram n gatif non fermentaires iii 3 Ba cill s a Gramin gatit e EE 4 00006
49. PI Suspension Medium McFarland Standard DENSIMAT ou Densitom tre ATB Pipette Electronique consulter bioM rieux ou Inoculateur ATB et Embouts R f 15 710 Automate ATB ou mini API avec logiciel Mat riel Pipette Prot ge ampoule Portoir pour ampoules Boites herm tiques type Jarre lt GENbox bioM rieux Equipement g n ral de laboratoire de bact riologie PRECAUTIONS D UTILISATION Les performances pr sent es sont obtenues avec la m thodologie indiqu e dans cette notice Toute d viation de m thodologie peut alt rer les r sultats L interpr tation et la validation des r sultats de l antifongigramme doivent tre faites en tenant compte du contexte clinique de l origine du pr l vement de l identification de la souche ventuellement des r sultats de tests compl mentaires et des recommandations locales en vigueur L interpr tation et la validation sont facilit es par le syst me Expert ATB CONDITIONS DE STOCKAGE Les galeries et milieux se conservent 2 8 C l obscurit jusqu la date limite d utilisation indiqu e sur le coffret ECHANTILLONS PRELEVEMENT ET PREPARATION La galerie ATB FUNGUS 3 ne doit pas tre utilis e directement partir des pr l vements d origine clinique ou autres Les microorganismes tester doivent dans un premier temps tre isol s sur un milieu de culture adapt selon les techniques usuelles de microbiologie Les milieux d
50. RATION La galerie ATB STAPH ne doit pas tre utilis e directement partir des pr l vements d origine clinique ou autres Les microorganismes tester doivent dans un premier temps tre isol s sur un milieu de culture adapt selon les techniques usuelles de bact riologie MODE OPERATOIRE Sortir la galerie de son emballage Noter l identifiant de la bact rie tester sur la languette lat rale de la galerie Pr paration de l inoculum Pr parer une suspension bact rienne d opacit quivalente l talon 2 de McFarland Comparer au t moin d opacit du kit McFarland Standard ou utiliser le Densitom tre ATB ou le DENSIMAT Deux m thodes culture en bouillon jusqu obtention de l opacit indiqu e mise en suspension de 1 ou plusieurs colonies fra chement isol es souches cultiv es depuis moins de 48 heures dans une ampoule Suspension Medium ouvrir l ampoule comme indiqu au paragraphe Pr cautions d utilisation de la notice du produit Cette suspension doit tre utilis e extemporan ment NOTE il est recommand de contr ler la puret de l inoculum et r isoler dans le cas de cultures mixtes Transf rer 200 ul de cette suspension dans ATB Medium et 200 ul dans ATB Na Medium 2 pour le test l aide d une pipette Inoculation de la galerie Inoculation MANUELLE Homog n iser ATB Medium avec la Pipette Electronique ATB en vitant la formation de bulles Inoculer l
51. REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS R actifs et instruments API Suspension Medium ou API NaCl 0 85 Medium ou en fonction de la galerie d identification utilis e ATB Medium McFarland Standard R f 70 900 ou DENSIMAT ou Densitom tre ATB Pipette Electronique ATB ou Inoculateur ATB et Embouts Automate ATB ou mini avec logiciel consulter bioM rieux Mat riel PRECAUTIONS D UTILISATION Les performances pr sent es sont obtenues avec la m thodologie indiqu e dans cette notice Toute d viation de m thodologie peut alt rer les r sultats L interpr tation et la validation des r sultats de l antibiogramme doit tre faite en tenant compte du contexte clinique de l origine du pr l vement de l identification de la souche ventuellement des r sultats de tests compl mentaires et des recommandations locales en vigueur L interpr tation et la validation sont facilit es par le syst me Expert ATB CONDITIONS DE STOCKAGE ECHANTILLONS PRELEVEMENT ET PREPARATION La galerie ATB G ne doit pas tre utilis e directement partir des pr l vements d origine clinique ou autres Les microorganismes tester doivent dans un premier temps tre isol s sur un milieu de culture adapt selon les techniques usuelles de bact riologie MODE OPERATOIRE Pr paration de la galerie Pr paration de l inoculum Pr parer une suspension bact rienne d opacit quiv
52. S cci R ccs S D R d Remarques Streptomycine Kanamycine Gentamicine 500 ug 1000 ug 500 ug lt 250 lt 250 lt 128 gt 500 gt 500 gt 128 lt 12 lt 10 lt 11 Les ent rocoques pr sentent une r sistance naturelle de bas niveau BNR tous les aminoglycosides qui n emp chent pas d obtenir un effet synergique bact ricide entre un aminoglycoside et une p nicilline ou glycopeptide L acquisition d une r sistance de haut niveau aux aminoglycosides d tect e gr ce des disques fortement charg s en streptomycine S 500 ug kanamycine K 1000 et gentamicine G 500 ug abolit cet effet synergique bact ricide Interpr tation des r sultats SP KM et GPNR gt D lt synergie possible avec les p nicillines ou les glycopeptides en cas de sensibilit ces derniers antibiotiques SN lt d gt streptomycine peut tre utilis e KM lt d CMI gt amikacine et is pamicine ne peuvent tre utilis es GR lt d gt O tobramycine dib kacine amikacine gentamicine sisomicine n tilmicine et is pamicine ne peuvent tre utilis es Pour les valeurs lt interm diaires gt des diam tres le niveau de r sistance devra tre confirm par dilution en agar ou en bouillon contenant 500 ug mL de S K ou G HNR CMI gt 500 ug
53. TAT API NaCl 0 85 Medium Suspension Medium 0 A E ATB F2 Medium 4 32 x 135 ul 0000000000000000 0000000000000000 ATB FUNGUS 3 Candida spp 24 00 2 00 35 2 Cr neoformans 48 00 6 00 35 2 lt 24 00 Candida spp REF 14 204 Origine Source Herkunft Origen Origem Npotheuon Kalla Pochodzenie 0 1 2 3 4 Note Anmerkung Nota Notering Uwagi ATB FUNGUS 3 39 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications Contr le de qualit ATB FUNGUS 3 Levures Yeasts Hefen Levaduras Lieviti Leveduras Z pe Jastsvampar Drozdzaki Sigle Position Abbreviation Posici n Abk rzung Posizione Abreviatura Posi o Abbreviazione Oton Euvrolioypa gia REF 14 204 Antifongique Antifungal agent Antimykotikum Antif ngico Antimicotico AvrilluxKnrTiagiK Trap yovras Antimykotikum Lek przeciwgrzybowy Pozycja Forkortning TEMOIN CONTROL KONTROLLE CONTROLLO CONTROLO KONTROLL KONTROLA FLUCYTOSINE FLUCYTOSIN FLUCITOSINA FLUCITOSIN FLUCYTOZYNA AMPHOTERICINE B AMPHOTERICIN B ANFOTERICINA B
54. TB Medium par cupule avec la Pipette Electronique ATB environ2 x 105 germes ml ou x 104 germes cupule Incuber 18 24 heures 36 2 en a robiose LECTURE ET INTERPRETATION Rechercher dans chaque cupule la pr sence d un trouble par lecture visuelle ou automatique par l automate ATB ou mini API se reporter aux manuels d utilisation Pour les antibiotiques test s deux concentrations Aspect des cupules R sultats La souche est clair clair S Sensible trouble clair Interm diaire trouble trouble R R sistante Pour les antibiotiques test s une seule concentration Aspect de la R sultat La souche est cupule clair S Sensible trouble R R sistante Lors de la lecture automatique de la galerie v rifier la propret de la partie centrale de la galerie afin de permettre la reconnaissance du code de la galerie par le lecteur V rifier la concordance entre l intitul imprim sur la galerie et l intitul de la galerie propos par le logiciel NOTES e L absence de croissance dans une ou deux cupule s t moin invalide l antibiogramme qui doit tre recommenc e r sultat c C est un non sens N r p ter le test avec une nouvelle galerie e En lecture visuelle une croissance limit e la p riph rie de la cupule doit tre lue n gative e Une galerie dont les cupules sont part
55. UCAST 1 6 8 et du CLSI NCCLS 2 6 PRINCIPE La galerie ATB FUNGUS 3 comporte 16 paires de cupules La premi re paire sans antifongique sert de t moin de croissance Les 15 suivantes contiennent 5 antifongiques plusieurs concentrations permettant de d terminer des CMI et ou des cat gories cliniques La levure tester est mise en suspension puis transf r e dans le milieu de culture et inocul e dans la galerie Apr s incubation la lecture de la croissance se fait soit visuellement soit avec l automate ATB ou mini API Le r sultat obtenu permet de fournir Amphot ricine B AMB Fluconazole Itraconazole ITR Voriconazole VRC et ou de cat goriser la souche Sensible Interm diaire ou R sistante Flucytosine 5FC PRESENTATION COMPOSITION Galeries La composition de la galerie ATB FUNGUS 3 est mentionn e dans le tableau lt Contr le de Qualit gt de cette notice Milieu ATB F2 Medium Yeast Nitrogen Base 6 70 Glucose 6 5 g Asparagine 1 5g Phosphate disodique 2 50 Citrate trisodique 2 50 Nitrate de potassium 5 50 1 50 Eau d min ralis e 1000 ml pH 6 5 6 8 NOTE selon les ampoules d ATB F2 Medium il est possible d observer de l g res variations de coloration du milieu Ceci n engendre pas de modifications des performances du produit REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS R actifs et instruments API NaCl 0 85 Medium ou A
56. a galerie en distribuant 135 ul d ATB Medium par cupule avec la Pipette Electronique ATB environ 2x10 germes ml ou 3 10 germes cupule dans chaque de la galerie except e OXA Homog n iser ATB Na Medium 2 avec la Pipette Electronique ATB en vitant la formation de bulles et r partir 135 environ 2 10 germes mi ou 3x10 germes cupule avec la Pipette Electronique ATB dans la cupule OXA Inoculation AUTOMATIQUE Se reporter au manuel d utilisation de l inoculateur Mettre un couvercle sur la galerie Incuber 18 24 heures 36 2 C en a robiose Une incubation proche de 24 heures est toutefois recommand e pour les staphylocoques coagulase n gative LECTURE ET INTERPRETATION Rechercher dans chaque cupule la pr sence d un trouble par lecture visuelle ou automatique par l automate ATB ou mini API se reporter aux manuels d utilisation Pour les antibiotiques test s deux concentrations Aspect de la n cupule La souche est c C c C clair clair S Sensible trouble clair Interm diare trouble trouble R R sistante Pour les antibiotiques test s une seule concentration 29 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications
57. a sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONTROLE DE QUALITE Pour v rifier la standardisation de la m thode suivie des contr les de qualit avec la souche test indiqu e pour cette galerie doivent tre r alis s voir tableau Contr le de Qualit en fin de notice LIMITES DU TEST Un temps d attente entre les diverses tapes de la manipulation de la pr paration de l inoculum l incubation de la galerie peut affecter les r sultats Seules des cultures pures contenant un seul type de microorganisme doivent tre utilis es Des cultures mixtes ou contamin es peuvent affecter les r sultats RESULTATS ATTENDUS Les profils de r sistance des tests antibiotiques variant en fonction de la zone g ographique les r sultats attendus sont donc directement d pendants de l cologie microbienne locale esp ces m canismes de r sistance PERFORMANCES Les performances de la galerie ATB G ont t d termin es en utilisant deux souchiers comprenant les genres bact riens suivants Escherichia Enterobacter Hafnia Klebsiella Citrobacter Proteus Morganella Providencia Serratia Yersinia Le premier souchier a permis d tablir le taux de concordance des cat gorisations pour chaque antibiotique Les cat gorisations de r f rence ont t
58. alente l talon 0 5 de McFarland Comparer au t moin d opacit du kit McFarland Standard ou utiliser le Densitom tre ATB ou le DENSIMAT se reporter au manuel d utilisation Deux m thodes culture en bouillon jusqu obtention de l opacit indiqu e mise en suspension de 1 ou plusieurs colonies fra chement isol es souches cultiv es depuis moins de 48h dans une ampoule Suspension Medium ou d API NaCl 0 85 Medium Cette suspension doit tre utilis e extemporan ment NOTE il est recommand de contr ler la puret de l inoculum et de r isoler dans le cas de cultures mixtes Transf rer 10 ul de cette suspension dans ATB Medium l aide d une oese calibr e ou d une pipette Inoculation de la galerie Inoculation MANUELLE Homog n iser ATB Medium avec la Pipette Electronique ATB en vitant la formation de bulles Inoculer la galerie en distribuant 135 ul d ATB Medium par cupule avec la Pipette Electronique ATB environ 2 x 105 germes ml ou x 104 germes cupule Incuber 18 24 heures 36 2 en a robiose LECTURE ET INTERPRETATION Rechercher dans chaque cupule la pr sence d un trouble par lecture visuelle ou automatique par l automate ATB ou mini API se reporter aux manuels d utilisation Lors de la lecture automatique de la galerie v rifier la propret de la partie centrale de la galerie afin de permettre la reconnaissance du code de la galerie par le l
59. am thoxa 1 25 23 7 lt 1 19 2 38 gt 19 lt 16 Interpr tation valable pour les autres associations zole 5 ug trim thoprime sulfamide 18 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR HAEMOPHILUS INFLUENZAE Tableau XIV Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d La production de f lactamase d tect e par une technique ne chromog nique d s l isolement conf re la r sistance aux Ampicilline 209 SS E 2 20 lt 20 BCEE et ur ido p nicillines L activit des ces lactamines est restaur e lors de l association avec un inhibiteur de lactamases 2 La d tection d une sensibilit diminu e aux p lactamines C falotine 30 gt 8 lt 17 souches non productrices de B lactamase peut se faire l aide d un disque d ampicilline 2 ug diam tre lt 20 mm ou d faut d un disque de c falotine 30 ug diam tre lt 17 mm Certaines de ces souches poussant faiblement sur Amoxicilline ac clavulanique 20 10 ug A 1 2 21 lt 21 milieu HTM on utilise alors une g lose ch
60. apr s v rification de l identification interpr ter T Nt un r sultat G T et Nt r sistance naturelle par production d une AAC 2 l IMPORTANT Les ph notypes T Nt G T Nt G T Nt et G A demeurent improbables V rifier l identification et l antibiogramme ainsi que l interpr tation 9 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR PSEUDOMONAS AERUGINOSA Tableau VIII Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d Ticarcilline 75 ug lt 16 gt 16 2 22 lt 22 Ticarcilline ac clavulanique 75 10 ug lt 16 2 gt 16 2 2 22 lt 22 Cf r gles 1 4 Pip racilline 75 ug lt 16 gt 16 gt 18 lt 18 Pip racilline tazobactam 75 10 ug lt 16 4 gt 16 4 gt 19 lt 19 Imip n me 10 ug lt 4 gt 8 gt 22 lt 17 Une r sistance isol e aux carbap n mes correspond une imperm abilit s lective associ e une hydrolyse par la M rop n me 10 ug lt 2 gt 8 2 22 lt 15 c phalosporinase constitutive de l esp ce Dorip n me 10 ug lt 1 29 gt 24 lt 19 GE n est pas crois e
61. ar les m thodes automatis es lorsque les souches sont cat goris es ou R au moins l un des glycopeptides mise en vidence bas e sur une analyse de population non r alis e en routine voir Chesneau O A Morvan et N El Solh J Antimicrob Chemother 2000 45 887 890 par un test particulier la sensibilit diminu e est suspect e par la pr sence d au moins quatre colonies sur g lose Mueller Hinton MH additionn e de 5 mg L de teicoplanine ensemenc e par d p t de 10 ul d une suspension de 6 10 UFC mI McFarland 2 apr s incubation 35 37 C et lecture 24 et 48 heures Il est n cessaire d inclure dans chaque s rie de tests un t moin n gatif Staphylococcus aureus ATCC 25923 un t moin positif Staphylococcus haemolyticus CIP 107204 Cette derni re souche ne peut pas tre utilis e pour le contr le de qualit de la m thode de dilution car les CMI de teicoplanine varient de 2 8 mg L selon le lot de milieu de Mueller Hinton utilis Remarque la g lose coeur cervelle BHI additionn e de 6 mg L de teicoplanine et par d p t 10 ul d une suspension de 10 UFC ml McFarland 0 5 ne permet pas d obtenir des r sultats reproductibles d un lot l autre Cat gorisation Pour les souches suspectes d tre de sensibilit diminu e aux glycopeptides seule la d termination des CMI de la vancomycine et de la teicoplanine dans les conditions d crites dans ce
62. as de r sistance l une de ces mol cules il existe un Moxifloxacine 5 ug lt 0 5 gt 1 2 24 lt 21 risque lev de selection in vivo de mutants r sistants et d chec clinique pour les mol cules encore actives Chloramph nicol 30 ug lt 8 gt 8 gt 23 lt 23 Interpr tation valable pour thiamph nicol T tracycline 30 UI lt 1 gt 2 gt 23 lt 21 Minocycline 30 UI lt 0 5 gt 1 gt 23 lt 21 Interpr tation valable pour les autres t tracyclines sauf la Ee minocycline et la tig cycline Tig cycline 15 Hg lt 0 5 gt 0 5 gt 22 lt 22 Rifampicine 30 ug lt 0 06 gt 0 5 gt 29 lt 24 Fosfomycine 50 ug lt 32 gt 32 gt 14 lt 14 La r sistance acquise la fosfomycine est homog ne La Acide fusidique 10 ug lt 1 gt 1 gt 24 lt 24 pr sence de colonies dans la zone d inhibition doit pas tre prise en compte Teicoplanine H 30 ug lt 4 gt 8 217 Cf la remarque ci dessous pour la d tection des souches Vancomycine H 30 ug lt 4 gt 8 gt 17 de S aureus de sensibilit diminu e aux glycopeptides Daptomycine lt 1 gt 1 Sulfamides 200 ug lt 64 gt 256 gt 17 lt 12 Interpr tation valable uniquement pour les souches isol es des urines Trim thoprime 5 ug lt 2 gt 4 gt 20 lt 16 Interpr tation valable uniquement pour les souches isol es des urines Trim thoprime sulfam thoxazo 1 25 23 lt 2 38 gt 4 76 gt 16 lt 13 Interpr tation valable pour les autres associations
63. btenues pour Cr neoformans sont 0 5 et 1 mg l NOTES Lors de la lecture automatique de la galerie v rifier la propret de la partie centrale de la galerie afin de permettre la reconnaissance du code de la galerie par le lecteur v rifier la concordance entre l intitul imprim sur la galerie et l intitul de la galerie propos par le logiciel L absence de croissance dans une ou deux cupule s t moin invalide l antifongigramme qui doit tre Une galerie dont les cupules sont partiellement dess ch es suite l incubation peut induire de faux r sultats L antifongigramme doit tre recommenc Pour l Amphot ricine B AMB et en cas de lecture automatique il est recommand de contr ler visuellement l absence de colonies isol es ou de croissance en p riph rie de cupule interpr ter avec un score 1 Pour le Fluconazole FCA l Itraconazole ITR et le Voriconazole VRC la cat gorisation Interm diaire obtenue avec ATB FUNGUS 3 est assimil e la cat gorisation SDD Sensibilit Dose D pendante d finie par le CLSI NCCLS 2 CONTROLE DE QUALITE Pour v rifier la standardisation de la m thode suivie des contr les de qualit avec les souches tests indiqu es pour cette galerie doivent tre r alis s voir tableau Contr le de Qualit en fin de notice II est de la responsabilit de l utilisateur de s assurer que le contr le de qualit est mis en uvre conform m
64. cilline 10 ug AM dl Amoxicilline 25 ug AMX Amoxicilline ac clavulanique 20 10 ug AMC E Carboxy Ticarcilline 75 ug TIC C C p nicilline Ticarcilline ac clavulanique 75 10 C C Ur idop nicilline Pip racilline 75 ug PIP C C ka Pip racilline tazobactam 75 10ug TZP C C 8 Carbapenem Imip n me 10 ug IPM C m Monobactame Aztr onam 30 ug ATM C C falotine C1G 30 ug CF CI C phalosporines LC efoxitine C2G 30 ug FOX C si C fotaxime C3G 30 ug CTX 5 Ceftazidime 30 CAZ Streptomycine 10 UI S C C Streptomycine 500 ug STR C C C Spectinomycine 100 ug SPT Kanamycine 30 UI K C C C C 1000 C C C Aminosides Gentamicine 15 ug GM C ES Gentamicine 500 ug GEN Tobramycine 10 ug TM C C N tilmicine 30 NET C C C Amikacine 30 ug AN Ba Phenicoles Chloramph nicol 30 ug C C C C C C C C C C T tracyclines T tracycline 30 UI TE C C C C Macro Macrolides Erythromycine 15 UI E C lides Lincosamides Lincomycine 15 ug L CI Streptogramines Pristinamycine 15 ug PT CI C Acide nalidixique 30 ug NA CI Quinolones Norfloxacine 5 ug NOR Ciprofloxacine 5 ug CIP CI C C Ofloxacine 5 ug OFX C CI C C C CI Polypeptides Colistine 50 ug Cs Wm CI Glycopeptides Vancomycine 30 ug VA C Rifampicine 30 ug RA C C C Divers Nitrofurane 300 ug FT Eg C Fosfomycine 50 ug FOS C C M tronidazole 4 ug MTR Sulfamides
65. communiqu annuel Voir M thodologie de r alisation de l antibiogramme par diffusion en milieu g los permet leur cat gorisation clinique S 1 R selon les concentrations critiques indiqu es ci dessus Les CMI peuvent aussi tre d termin es par toute technique ayant d montr pour ces antibiotiques son quivalence avec la technique de r f rence CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR ENTEROCOCCUS SPP Tableau XI Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d Pour E faecalis l interpr tation est valable pour p nicilline G amoxicilline ur idop nicillines et carbap n mes nie Le traitement des infections s v res ent rocoques Ampl illiie 10 SS Se SS ampicilline 5 1 n cessite des doses lev es d une p nicilline associ e un aminoglycoside pour obtenir une activit bact ricide 14 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR ENTEROCOCCUS SPP Tableau XI suite Antibiotiques Charge disque Concentrations critiques mg L Diam tres critiques mm
66. ction et Get OT tags ge LA ee 36 uya a ua Saa aa m u m m s m S 36 raai 36 Lecture et interpr tation iii 37 M thodologie Fiche de r sultat sisi 39 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications COMITE DE L ANTIBIOGRAMME DE LA SOCIETE FRAN AISE DE MICROBIOLOGIE CA SFM RECOMMANDATIONS 2010 SF M EXTRAIT DE L AVANT PROPOS DES RECOMMANDATIONS 2010 EDITION JANVIER 2010 DEFINITION DES CATEGORIES CLINIQUES Trois cat gories cliniques ont t retenues pour l interpr tation des tests de sensibilit in vitro Sensible S R sistant R et Interm diaire l e Les souches cat goris es S sont celles pour lesquelles la probabilit de succ s th rapeutique est forte dans le cas d un traitement par voie syst mique avec la posologie recommand e dans le r sum des caract ristiques du produit RCP r dig par l Agence Fran aise de S curit Sanitaire des Produits de Sant AFSSAPS e Les souches cat goris es R sont celles pour lesquelles il existe une forte probabilit d chec th rapeutique quels que soient le type de traitement et la dose d antibiotique utilis e e Les souches cat goris es
67. cul s sur 400 tests BER Pseudomonas Staphylococcus Providencia Antibiotique Charge Ce aeruginosa aureus stuartii CIP 76110 CIP 7625 CIP 107808 P nicilline G 6 ug 10 UI 31 0 38 5 Oxacilline 5 ug S 27 0 34 0 Amoxicilline 25 ug 22 0 26 5 6 0 7 0 Amoxicilline ac clavulanique 20 10 ug 22 0 27 0 6 0 8 0 Ticarcilline 75 ug 25 0 30 5 Pip racilline 75 ug S 27 5 32 5 C falotine 30 ug 18 0 23 0 6 0 6 5 C foxitine 30 ug 28 35 C fotaxime 30 ug 32 5 37 5 25 0 32 0 Ceftazidime 30 ug 25 5 31 5 Imip n me 10 ug 24 5 29 5 i Gentamicine 15 ug 10 UI 22 0 26 5 15 5 22 5 24 0 28 5 13 0 17 0 Tobramycine 10 ug 20 5 26 5 30 ug 21 5 26 0 20 0 26 0 24 5 29 0 Acide nalidixique 30 ug 25 5 30 5 P floxacine 5 ug 29 0 35 5 25 5 29 5 6 0 7 5 Ciprofloxacine 5 ug 31 0 38 0 29 0 36 5 17 5 22 5 Trim thoprime sulfam thoxazole Siimo zole 1 25 23 75 ug 25 5 30 5 28 0 32 5 Erythromycine 15 UI 26 5 31 5 Lincomycine 15 ug 24 5 29 5 S Pristinamycine 15 ug 26 5 32 0 Rifampicine 30 ug 34 0 39 0 Acide fusidique 10 ug 28 5 34 5 Fosfomycine 50 ug 24 0 35 0 i Colistine 50 ug 17 0 22 0 Vancomycine 30 ug S 17 5 20 5 i Teicoplanine 30 ug S 17 0 20 0 S Tableau I
68. de b ta lactamase est extr mement rare Elle est d tect e Oxacilline 5 Hg gt 18 par une technique chromog nique 19 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications Tableau XV suite Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque Se R ccs S D R d C fotaxime H lt 0 12 Ceftriaxone lt 0 12 Chloramph nicol 30 ug lt 2 gt 4 gt 30 Rifampicine 30 ug lt 0 25 gt 30 Antibiotique utilis uniquement en prophylaxie Spiramycine 100 ug lt 1 gt 4 Antibiotique utilis uniquement en prophylaxie Ciprofloxacine lt 0 03 gt 0 06 H Antibiotique distribu en mieu hospitalier CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR NEISSERIA GONORRHOEAE Tableau XVI Concentrations Diam tres Antibiotiques critiques mg L critiques mm Remarques S cci R ccs S D R d La production de f lactamase doit tre d tect e par une SEN technique chromog nique d s l isolement Elle conf re la P nicilline G lt 0 06 gt 1 r sistance la p nicilline G aux carboxy et ur ido p nicillines L activit
69. de ces est restaur e lors de l association avec un inhibiteur de f lactamase La d tection d une sensibilit diminu e aux p nicillines sera Amoxicilline lt 0 25 gt 2 effectu e routine d termination G sur g lose chocolat PolyViteX si m thode E test est utilis e ensemencer par couvillonnage Ceftriaxone lt 0 12 z S C fixime lt 0 12 Spectinomycine 100 ug lt 64 gt 64 gt 20 lt 20 Chloramph nicol lt 4 gt 16 2 Interpr tation valable pour la doxycycline et la minocycline T tracycline 30 UI lt 0 5 gt 1 lt 19 Un diam tre lt 19 mm fait suspecter une r sistance due la pr sence du g ne tetM Azithromycine lt 0 25 gt 0 5 Acide nalidixique 30 ug lt 25 La d tection d une sensibilit diminu e ou d une r sistance Ofloxacine lt 0 12 gt 0 25 aux fluoroquinolones est effectu e l aide d un disque d acide nalidixique 30 ug Si le diam tre est inf rieur Ciprofloxacine lt 0 03 gt 0 06 25 mm mesurer les de l ofloxacine ou de la ciprofloxacine CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR CAMPYLOBACTER SPP Tableau XVII Concentrations Diam tres Antibiotiques s critiques mg L critiques mm Remarques S cci R ccs S D R d Ampicilline 10 ug lt 4
70. de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR ACINETOBACTER SPP STENOTROPHOMONAS MALTOPHILIA ET BURKHOLDERIA CEPACIA Tableau IX Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d Activit antibact rienne propre valuer par d termination S lbactam H 58 I de la CMI pour k neu spp et B Se Ticarcilline H 75 ug lt 16 gt 64 gt 22 lt 18 Pour Acinetobacter spp Ticarcilline ac clavulanique 75 10 lt 16 2 gt 64 2 gt 22 lt 18 Pour Acinetobacter spp et S maltophilia Pip racilline H 75 lt 16 gt 64 gt 18 lt 12 Pour Acinetobacter spp et B cepacia Pip racilline tazobactam H 75 10 lt 16 4 gt 64 4 gt 19 lt 14 Pour Acinetobacter spp Imip n me H 10 ug lt 2 gt 8 gt 24 lt 17 M rop n me H 10 ug lt 2 gt 8 gt 22 lt 15 Dorip n me H 10 ug lt 1 gt 4 gt 24 lt 19 Ceftazidime 30 ug lt 4 gt 8 gt 21 lt 19 Synergie possible sulbactam ceftazidime pour Acinetobacter spp C f pime H 30 ug lt 4 gt 8 gt 21 lt 19 Synergie possible sulbactam c f pime pour Acinetobacter spp Cefpirome H 30 ug lt 4 gt 8 gt 21 lt 19 ardie possible sulbactam cefpirome pour
71. de p remption Ne pas utiliser des tubes pr sentant une suspicion de contamination e Avant utilisation s assurer de l int grit de la capsule des tubes Les performances pr sent es ont t obtenues avec la m thodologie indiqu e dans cette notice Toute d viation de m thodologie peut modifier les r sultats L interpr tation des r sultats du test doit tre faite en tenant compte du contexte clinique des aspects macro et microscopiques et ventuellement des r sultats d autres tests CONDITIONS DE STOCKAGE e Les tubes se conservent entre 2 C et 8 C en position horizontale dans leur coffret jusqu la date de p remption Conserver l abri de la lumi re ECHANTILLONS Les milieux peuvent tre ensemenc s partir d un pr l vement d expectoration trait fluidification et d contamination m thode directe partir d une souche provenant de pr l vements d origines diverses et isol e sur milieu de Lowenstein Jensen m thode indirecte II convient de respecter les bonnes pratiques en terme de pr l vements de transport et de traitement adapt es la recherche des mycobact ries 24 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales diff rentes publications MODE OPERATOIRE Laisser les t
72. de v rifier que les principaux m canismes de r sistance aux antibiotiques rencontr s chez les ent robact ries s expriment avec la galerie ATB UR Reproductibilit Le taux de reproductibilit global de la galerie ATB UR est de 94 tabli avec un minimum de 10 souches par antibiotique ELIMINATION DES DECHETS CONTR LE QUALIT ATB UR r f 14 339 Ent robact ries urinaires mg l CQ1 01 AMOXICILLINE 4 16 5 1 02 AMOXICILLINE ACIDE CLAVULANIQUE 4 2 16 2 5 1 03 TICARCILLINE 16 64 S 04 CFT CEFALOTINE 8 32 5 1 05 CA1 CEFTAZIDIME 1 1 s CXT CEFOXITINE 8 S 06 CTX CEFOTAXIME 4 32 s 07 CFM CEFIXIME 1 S FOS FOSFOMYCINE 32 S 08 CAZ CEFTAZIDIME 4 32 s 09 GEN GENTAMICINE 4 s TOB TOBRAMYCINE 4 s 10 NET NETILMICINE 4 s AKN AMIKACINE 8 s 11 TSU COTRIMOXAZOLE 2 38 8 152 s 12 FUR NITROFURANTOINE 32 128 s 13 NAL ACIDE NALIDIXIQUE 8 s OFL OFLOXACINE 1 s 14 NOR NORFLOXACINE 1 2 s 15 CIP CIPROFLOXACINE 1 2 s CQ1 Escherichia coli ATCC 25922 La galerie ATB UR a t con ue en suivant les recommandations du comit CA SFM 2003 1 Les modifications de concentrations critiques li es l harmonisation Europ enne recommandations de l EUCAST ne sont pas appliqu es actuellement Elles feront l objet d une impl mentation globale l issue de leur publication compl te 33 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sen
73. des composants d origine animale La ma trise de l origine et ou de l tat sanitaire des animaux ne pouvant garantir de fa on absolue que ces produits ne contiennent aucun agent pathog ne transmissible il est recommand de les manipuler avec les pr cautions d usage relatives aux produits potentiellement infectieux ne pas ing rer ne pas inhaler e Les pr l vements cultures bact riennes et produits ensemenc s doivent tre consid r s comme potentiellement infectieux et doivent tre manipul s de fa on appropri e Les techniques aseptiques et les pr cautions usuelles de manipulation pour le groupe bact rien tudi doivent tre respect es tout au long de la manipulation se r f rer NCCLS M29 A Protection of Laboratory Workers from Instrument Biohazards and Infectious Disease Transmitted by Blood Body Fluids and Tissue Approved Guideline December 1997 Pour informations compl mentaires sur les pr cautions de manipulation se r f rer in Microbiological and Biomedical Laboratories HHS Publication No CDC 93 8395 3rd Edition May 1993 ou la r glementation en vigueur dans le pays d utilisation e En raison du pouvoir pathog ne lev des souches recherch es il est recommand de manipuler dans un environnement adapt Les milieux de culture ne doivent pas tre utilis s comme mat riau ou composant de fabrication Ne pas utiliser les r actifs apr s la date
74. diaire aux Erythromycine lt 05 gt 16 macrolides avec un cycle 14 et 15 atomes aux k tolides S et la pristinamycine et r sistant aux macrolides avec un Roxithromycine I lt 1 gt 16 i cycle 16 atomes et aux lincosamides T lithromycine lt 0 12 gt 8 gt i Acide nalidixique 30 ug lt 21 Ofloxacine lt 0 5 S R La d tection de la sensibilit diminu e aux fluoroquinolones L vofloxacine lt 1 peut tre r alis e en utilisant un disque d acide nalidixique Ciprofloxacine lt 0 5 30 ug Si le diam tre d inhibition est inf rieur 21 mm les Moxifloxacine S lt 0 5 CMI des fluoroquinolones doivent tre d termin es CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR NEISSERIA MENINGITIDIS Tableau XV Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d P nicilline G lt 0 06 gt 0 25 La d tection d une sensibilit diminu e aux p nicillines est effectu e en routine l aide d un disque d oxacilline 5 ug selon les crit res suivants 5 ug 218 mm souche sensible aux p nicillines Amoxicilline lt 0 12 gt 1 s S 5 ug lt 18 mm sensibilit diminu e la p nicilline G et ou amoxicilline confirmer par la d termination des CMI La r sistance haut niveau aux p nicillines par production
75. e 1 Interpr ter un r sultat S PIP PTZ AZL CFZ CFS si une r sistance haut niveau gt 256 mg l disque contact TIC est mise en vidence 2 Un r sultat TIC est en relation avec une c phalosporinase inductible il a pas lieu de changer la cat gorisation de la ticarcilline 3 Interpr ter un r sultat S TIC PTZ CFZ CFS CPO ATM si un ph notype PIP ID CAZ et TIC est mis vidence 4 Un r sultat F et ou ATM F avec une sensibilit conserv e aux autres b lactamines du tableau ci dessus voque une r sistance par efflux Etant donn l absence de donn es sur les cons quences cliniques il n y a pas lieu de changer les cat gorisations 5 Une synergie entre TCC et ATM et ou CAZ et ou FEP et ou CPO permet la d tection de certaines b lactamases spectre tendu BLSE Abr viations G gentamicine T tobramycine Ni n tilmicine A amikacine Is is pamicine 6 Se conformer aux diam tres critiques de chaque mol cule pour l interpr tation si une diminution des diam tres d inhibition lt 20 mm voquant une r sistance non enzymatique est observ e pour l ensemble des aminoglycosides 7 Interpr ter Is l un r sultat A Is et G et T Nt voquant la production d une 6 l 10 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude
76. e NCCLS Poster 1514 45th Annual ICAAC New Orleans September 2005 8 CUENCA ESTRELLA M MOORE C B BARCHIESI F et coll Multicenter evaluation of the reproducibility of the proposed antifungal susceptibility testing method for fermentative yeasts of the Antifungal Susceptibility Testing Subcommittee of the European Committee Antimicrobial Susceptibility Testing AFST EUCAST 2003 Clin Microbiol Infect 9 6 467 9 DURUSSEL C PARRENO D NOUGIER L MONNIN V ZAMBARDI G BILLE J Comparative Study of various Methods NCCLS M27 A2 EUCAST and ATB FUNGUS 2 bioM rieux for the In Vitro Antifungal Susceptibility Testing of Candida sp Poster 1628 PRAHA 2004 14th ECCMID 10 REX J H PFALLER M A WALSH et coll Antifungal Susceptibility Testing Practical Aspects and Current Challenges 2001 Clin Microbiol Reviews 14 4 643 658 11 TORRES RODRIGUEZ J M MORERA LOPEZ Y JIMENEZ CABELLO NOUGIER L BOSSY G ZAMBARDI G ATB FUNGUS 2 for In Vitro Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts Comparative Study with Sensititre Yeast and the Reference M27 A Method Poster 037 ECMM Congress Juin 2004 Wroclaw Poland 38 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications METHODOLOGIE FICHE DE RESUL
77. e Nema C88 stylo applicateur ou le Simplex C76 applicateur automatique Veiller ce que tout le gradient antibiotique soit en contact avec la surface de la g lose Une fois appliqu es ne plus toucher aux bandelettes Etest Mod les d application Des exemples de mod les d application sont disponibles sur le site www biomerieux com Incubation Les boites sont incub es sur le couvercle dans les conditions appropri es pour chaque microorganisme tudi Lecture Lire de l antibiotique au point d intersection de l ellipse d inhibition et de la bandelette Des informations compl mentaires pour la lecture des diff rents aspects de croissance inhibition sont disponibles sur le site www biomerieux com INTERPR TATION D termination de la sensibilit Les concentrations critiques en CMI pour les diff rentes cat gories de sensibilit comme propos es par le CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute Inc aux USA ou par le Comit National de l Antibiogramme peuvent tre utilis es pour interpr ter les valeurs donn es par le Etest Toujours arrondir les demi dilutions de l chelle du Etest la valeur sup rieure correspondante aux doubles dilutions standards avant de cat goriser les souches Une vue d ensemble des crit res d interpr tation du CLSI est indiqu e dans le Tableau 1 BLSE et MBL d tection Un ratio de CMI gt 8 entre les deux r actifs ou la pr sence d une zone fant me ou
78. ecteur v rifier la concordance entre l intitul imprim sur la galerie et l intitul de la galerie propos par le logiciel Pour les antibiotiques test s deux concentrations Aspect des cupules R sultats La souche C C est clair clair S Sensible trouble clair l Interm diaire trouble trouble R R sistante Pour les antibiotiques test s une seule concentration Aspect de la R sultat La souche est cupule clair S Sensible trouble R R sistante NOTES L absence de croissance dans une ou deux cupule s t moin invalide l antibiogramme qui doit tre recommenc Un r sultat c C est un non sens N r p ter le test avec une nouvelle galerie En lecture visuelle une croissance limit e la p riph rie de la cupule doit tre lue n gative Une galerie dont les cupules sont partiellement dess ch es suite lincubation peut induire de faux r sultats L antibiogramme doit tre recommenc Trim thoprime Sulfam thoxazole TSU Consid rer comme n gatif toute croissance inf rieure au t moin de croissance Le test Ceftazidime 1 CA1 permet au syt me Expert ATB d am liorer la sensibilit de d tection des m canismes de r sistance aux lactamines notamment des lactamases spectre largi Le r sultat de ce test ne doit pas tre rendu au clinicien 26 Lyc e des m tiers du tertiaire de l
79. ectronique ATB en vitant la formation de bulles Inoculer la galerie en distribuant 135 ul d ATB F2 Medium par cupule avec la Pipette Electronique ATB environ 3x10 levures ml ou 4x10 levures cupule Inoculation AUTOMATIQUE Se reporter au manuel d utilisation de l inoculateur Mettre un couvercle sur la galerie Placer la galerie dans une bo te herm tique ou en jarre type GENbox contenant du papier absorbant humide 36 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales diff rentes publications Incuber pendant 24 heures 2 heures pour les Candida et 48 heures 6 heures pour les Cryptococcus neoformans 35 C 2 C en a robiose LECTURE ET INTERPRETATION V rifier la pr sence d une croissance suffisante dans les cupules t moins Pour les Candida en cas de croissance insuffisante rendant la lecture de la galerie difficile ou impossible apr s 24 heures d incubation r incuber 24 heures suppl mentaires dans les m mes conditions 1 D termination de la AMB FCA ITR VRC Rechercher et quantifier dans chaque une croissance par lecture visuelle ou automatique par l automate ATB ou mini se reporter aux manuels d utilisation Avant de proc der la lecture visuelle il est recommand de poser
80. ent la l gislation locale en vigueur LIMITES DU TEST Un temps d attente entre les diverses tapes de la manipulation de la pr paration de l inoculum l incubation de la galerie peut affecter les r sultats Seules des cultures pures contenant un seul type de microorganisme doivent tre utilis es Des cultures mixtes ou contamin es peuvent affecter les r sultats L esp ce Candida haemulonii ne doit pas tre test e avec la galerie ATB FUNGUS 3 du fait d une croissance variable entra nant une interpr tation al atoire des CMI aux antifongiques Les esp ces C albicans C dubliniensis et C tropicalis peuvent pr senter un ph nom ne de croissance r siduelle trailing growth entra nant une surestimation des des antifongiques azol s Fluconazole Itraconazole Voriconazole plus particuli rement en cas de lecture automatis e de la galerie ATB FUNGUS 3 En cons quence il est recommand de v rifier visuellement 37 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications les CMI des antifongiques azol s pour ces esp ces notamment dans le cas d une r sistance apparente au Voriconazole du fait de la r sistance tr s peu fr quente cet antifongique Il est recommand d interpr ter Interm diaire l les
81. ent avec les doigts ou comme indiqu sous la rubrique application de la bandelette Ne pas toucher la bandelette sur la surface contenant l antibiotique c est dire la face oppos e l chelle de lecture es PRECAUTIONS ET AVERTISSEMENTS Etest est destin un usage diagnostic in vitro seulement Bien que Etest soit une proc dure tr s simple un personnel entra n aux techniques d tude de la sensibilit des antimicrobiens est recommand PROCEDURE Mat riels fournis 100 ou 30 bandelettes Etest 1 notice d emploi Mat riels n cessaires mais non fournis e Milieux g los s ad quats pour l tude de la sensibilit aux antimicrobiens e Milieux liquides pour la pr paration de l inoculum st riles couvillons tubes essai pipettes et ciseaux clamps et de conservation avec dessicateur Pinces applicateur manuel de Etest Biotools Etalons standard de turbidit McFarland 0 5 1 et 2 Incubateur jarre ana robie ou chambre ana robie ou incubateur CO2 Souches de contr le de qualit e Manuel Technique Etest www biomerieux com pour le t l chargement METHODE Des informations compl mentaires pour les diff rentes utilisations sont fournies sur le site www biomerieux com Milieu g los S lectionner un milieu et des suppl ments appropri s pour l esp ce bact rienne tudi e S assurer que le milieu r ponde aux crit res de qualit et que l paisseur de la
82. erobacter cloacae Enterobacter aerogenes Citrobacter freundii Serratia marcescens Morganella morganii Providencia rettgeri Providencia stuartii et Hafnia alvei S aux amino p nicillines et ou aux c phalosporines de premi re g n ration et ou l association amoxicilline acide clavulanique et ampicilline sulbactam Proteus vulgaris et Proteus penneri S aux amino p nicillines et ou aux c phalosporines de premi re g n ration 2 Interpr ter un r sultat S aux carboxy et ou aux ur ido p nicillines chez Proteus mirabilis R aux amino p nicillines 3 Interpr ter un r sultat S aux ur ido p nicillines chez toute ent robact rie ou R aux carboxy p nicillines 4 Interpr ter un r sultat S toutes les c phalosporines sauf c f pime et cefpirome si la souche est cat goris e ou R c fotaxime et ou ceftriaxone et ou ceftazidime et ou aztr onam en l absence de synergie entre ces mol cules et l acide clavulanique en pratique disque d amoxicilline acide clavulanique AMC Ce ph notype est vocateur d une c phalosporinase chromosomique hyperproduite ent robact rie du groupe III et col ou d une c phalosporinase plasmidique toutes esp ces d ent robact ries La r alisation d un antibiogramme standard sur g lose Mueller Hinton additionn e de 250 mg L de cloxacilline inhibiteur de c phalosporinases permet de v rifier que la r sistance observ e est bien li e ce type de m ca
83. ert de t moin de croissance Les 15 suivantes contiennent des antibiotiques une seule ou deux concentrations c et C La bact rie tester est mise en suspension puis transf r e dans le milieu de culture et inocul e dans la galerie Apr s incubation la lecture de la croissance se fait soit visuellement soit avec l automate ou mini API Le r sultat obtenu permet de cat goriser la souche Sensible Interm diaire ou R sistante PRESENTATION COMPOSITION DE LA GALERIE La composition de la galerie ATB UR est mentionn e dans le tableau Contr le de Qualit de cette notice REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS R actifs et API Suspension Medium ou API NaCl 0 85 Medium fonction de la galerie d identification utilis e ATB Medium McFarland Standard ou DENSIMAT ou Densitom tre ATB Mat riel PRECAUTIONS D UTILISATION Les performances pr sent es sont obtenues avec la m thodologie indiqu e dans cette notice Toute d viation de m thodologie peut alt rer les r sultats L interpr tation et la validation des r sultats de l antibiogramme doivent tre faites en tenant compte du contexte clinique de l origine du pr l vement de l identification de la souche ventuellement des r sultats de tests compl mentaires et de recommandations locales en vigueur L interpr tation et la validation sont facilit es par le syst me Expert ATB
84. est constitu de disques de papier impr gn s de c phalosporine chromog ne qui lib re un compos rouge lors de son hydrolyse par une f lactamase 3 4 PRESENTATION ET COMPOSITION REF 55 622 Cartouche de 50 disques impr gn s de nitroc fine 6 mm en tube plastique avec dessicant MATERIEL NECESSAIRE MAIS NON FOURNI Lames porte objets MATERIEL COMPLEMENTAIRE PRECAUTIONS D UTILISATION Pour informations compl mentaires sur les pr cautions de manipulation se r f rer Biosafety inMicrobiological and Biomedical Laboratories HHS Publication No CDC 93 8395 3rd Edition May 1993 ou la r glementation en vigueur dans le pays d utilisation Ne pas utiliser les r actifs apr s la date de p remption Ne pas utiliser des disques pr sentant un aspect d fectueux humidit coloration Les performances pr sent es ont t obtenues avec la m thodologie indiqu e dans cette notice Toute d viation de m thodologie peut modifier les r sultats L interpr tation des r sultats du test doit tre faite en tenant compte de l esp ce bact rienne consid r e du contexte pid miologique et ventuellement des r sultats d autres tests CONDITIONS DE STOCKAGE Les disques se conservent entre 2 C 8 C dans leur cartouche jusqu la date de p remption Apr s ouverture la cartouche de disques se conserve 2 mois 2 8 C dans son tube plastique ECHANTILLONS Le test est r alis
85. g lose soit de 4 0 0 5 mm 22 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications Pr paration de l inoculum Emulsionner dans un bouillon adapt un nombre ad quat de colonies bien isol es partir d une culture pure d une nuit Les microorganismes croissance difficile doivent tre mulsionn s en bouillon et utilis s dans les 15 minutes Comparer la turbidit par rapport au standard McFarland appropri Ensemencement Plonger un couvillon st rile dans la suspension et retirer l exc s de liquide en appuyant l couvillon contre la paroi interne du tube Ecouvillonner doucement toute la surface de la g lose dans trois directions Le Retro C80 ensemenceur rotatif peut galement tre utilis pour ensemencer la surface de la g lose Pour les tests antifongiques ensemencer deux fois la bo te en plongeant l couvillon dans la suspension entre les deux fois Laisser absorber compl tement l humidit en exc s et s assurer que la surface de la g lose est compl tement s che avant le d p t des bandelettes Etest Application des bandelettes Appliquer les bandelettes Etest la surface de la g lose en s assurant que l chelle de soit positionn e correctement vers soi Utiliser une paire de pince un applicateur manuel l
86. gles 4 et 5 Ceftriaxone 30 ug lt 1 gt 2 gt 26 lt 23 Ceftazidime 30 ug gt 8 gt 26 lt 19 C f pime 30 ug gt 8 gt 24 lt 17 Cefpirome 30 ug lt gt 8 gt 24 lt 17 C fixime 10 ug lt 1 gt 2 gt 25 lt 22 Interpr tation valable uniquement pour les souches isol es des urines Kanamycine 30 UI lt gt 16 gt 17 lt 15 erer valable pour n omycine framyc tine Tobramycine 10 ug lt 2 gt 4 gt 18 lt 16 r gles 6 9 et 11 Amikacine 30 ug lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Cf r gles 6 7 Is pamicine 30 ug lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Cf r gles 6 7 Gentamicine 15 lt 2 gt 4 gt 18 lt 16 Cf r gles 6 8 et 11 N tilmicine 30 ug lt 2 gt 4 gt 21 lt 19 Cf r gles 6 10 et 11 Chloramph nicol 30 ug lt 8 gt 8 gt 23 lt 23 Interpr tation valable pour thiamph nicol T tracycline 30 UI gt 8 gt 19 lt 17 Fe valable pour les autres t tracyclines sauf la Minocycline 30 UI lt gt 8 gt 19 lt 17 En cas d utilisation th rapeutique il y a lieu de d terminer la Tig cycline gt 2 221 lt 19 CMI pour les diam tres o ES 20 D Les diam tres ont pour but de v rifier la r sistance naturelle de certaines esp ces mais ne permettent pas de d tecter Colistine 50 ug lt 2 gt 2 gt 15 lt 15 toutes les r sistances acquises ce qui impose de d terminer la en cas d utilisation th rapeutique Interpr tation valable pour poly
87. icilline G est crois e avec toutes les autres p lactamines mais des niveaux variables Imip n me lt 2 fonction des antibiotiques permettant l utilisation des mol cules les plus actives Les souches cat goris es Ertap n me lt 0 5 z a comme interm diaires ou r sistantes de bas niveau doivent tre consid r es comme r sistantes en cas de M rop n me _ lt 2 _ _ m ningite mais sensibles fortes doses en cas d infections respiratoires Dorip n me gt 1 Streptomycine 500 ug lt 250 gt 500 gt 14 lt 12 S pneumoniae pr sente une r sistance naturelle de bas Kanamycine 1000 lt 250 gt 500 gt 14 lt 10 niveau BNR tous les aminoglycosides qui n emp che pas d obtenir un effet synergique bact ricide entre un aminoglycoside et une p nicilline ou un glycopeptide L acquisition d une r sistance de haut niveau HNR aux aminoglycosides d tect e gr ce des disques fortement charg s en streptomycine S 500 ug 1000 et gentamicine G 500 ug abolit cet effet synergique bact ricide Interpr tation des r sultats SP KPNR et GP gt D lt c synergie possible Gentamicine S00Oug lt 250 gt 500 217 lt 11 avec les p nicillines ou les glycopeptides en cas de sensibilit ces derniers antibiotiques SM lt d gt C streptomycine ne peut tre utilis e Vtc lt d CMI gt kanamycine
88. iellement dess ch es suite l incubation peut induire de faux r sultats L antibiogramme doit tre recommenc e Trim thoprime Sulfam thoxazole TSU Consid rer comme n gatif toute croissance inf rieure au t moin de croissance e test Ceftazidime 1 CA1 permet au syt me Expert ATB d am liorer la sensibilit de d tection des m canismes de r sistance aux B lactamines notamment des B lactamases spectre largi Le r sultat de ce test ne doit pas tre rendu au clinicien CONTROLE DE QUALITE Pour v rifier la standardisation de la m thode suivie des contr les de qualit avec la souche test indiqu e pour cette galerie doivent tre r alis s voir tableau Contr le de Qualit en fin de notice 32 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications LIMITES DU TEST Un temps d attente entre les diverses tapes de la manipulation de la pr paration de l inoculum l incubation de la galerie peut affecter les r sultats RESULTATS ATTENDUS Les profils de r sistance des tests antibiotiques variant en fonction de la zone g ographique les r sultats attendus sont donc directement d pendants de l cologie microbienne locale esp ces m canismes de r sistance PERFORMANCES Les performa
89. ility Testing of the European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases Method for the Determination of Minimum Inhibitory Concentration by Broth Dilution of Fermentative Yeasts 2002 EUCAST Discussion document E Dis 7 1 ESCMID 2 Reference Method for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts NCCLS M27 A2 August 2002 3 CLSI Summary Minutes Subcommittee on Antifungal Susceptibility Tests Tampa Florida 8 January 2005 4 ALLER Al MARTIN MAZUELOS E GUTIERREZ M J et coll Comparison of the Etest and microdilution method for antifungal susceptibility testing of Cryptococcus neoformans to four antifungal agents 2000 J Antimicrob Chemother 46 997 1000 5 ALLER AL MARTIN MAZUELOS E LOZANO F et coll Correlation of Fluconazole MICs with Clinical Outcome in Cryptococcal Infection 2000 Antimicrob Agents Chemother 44 6 1544 1548 6 CUENCA ESTRELLA M LEE YANG W CIBLAK M A coll Comparative Evaluation of NCCLS M27 A and EUCAST Broth Microdilution Procedures for Antifungal Susceptibility Testing of Candida Species 2002 Antimicrob Agents Chemother 46 11 3644 3647 7 CUENCA ESTRELLA M MELLADO E GOMEZ LOPEZ et coll valuation of the Commercial Method ATB FUNGUS 2 for the Detection in Vitro of Antifungal Resistance and its Correlation with the Reference Method of the European Committee on Antibiotic Susceptibility Testing EUCAST and the Micromethod of th
90. ions CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR STREPTOCOCCUS SPP S PNEUMONIAE EXCEPTE Tableau XIII Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d La sensibilit des streptocoques la p nicilline G est P nicilline G lt 0 25 gt 2 valu e avec un disque d oxacilline 5 ug 5 selon les crit res suivants diam tre OXA 5 gt 21 mm souche sensible p nicilline G Cette interpr tation est pr dictive de l activit des autres Ampicilline lt 0 5 gt 2 B lactamines incluant les streptocoques dans leur spectre diam tre OXA 5 lt 21 mm souche l ou R p nicilline G Devant toute souche de sensibilit diminu e OXA 5 lt 21 Amoxicilline lt 0 5 gt 2 2 mm il y a lieu de d terminer la CMI de l ampicilline de l amoxicilline ou du c fotaxime 7 En cas de r sistance il convient de v rifier l identification de C fotaxime lt 05 505 la souche et sa r sistance aux p nicillines Les Streptocoques A B C et G streptocoques b ta h molytiques l exception de rares autres streptocoques lt 0 5 gt 16 souches streptocoque sont sensibles la p nicilline G Les streptocoques pr sentent une r sistance naturelle de bas niveau BNR tous les aminoglycosides qui n emp
91. ites de Il est inutile de les tester en routine 5 Les staphylocoques r sistants la m ticiline sont souvent r sistants de multiples familles d antibiotiques cependant certaines souches ont une r sistance isol e l oxacilline 12 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR STAPHYLOCOCCUS SPP Tableau X Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque R ccs S D R d Streptomycine 10 UI lt 8 gt 16 gt 15 lt 13 Kanamycine 30 UI lt 8 gt 16 gt 17 lt 15 Interpr tation valable pour framyc tine paromomycine amikacine et is pamicine Gentamicine 15 pg 10 lt 1 gt 1 gt 20 lt 20 Interpr tation valable pour n tilmicine Les souches UI r sistantes la gentamicine sont r sistantes l ensemble des aminoglycosides sauf streptomycine Tobramycine 10 Hg lt 1 gt 1 gt 20 lt 20 Erythromycine 150 lt 1 gt 2 gt 22 lt 19 Interpr tation valable pour azithromycine clarithromycine dirithromycine et roxithromycine Spiramycine 100 ug lt 1 gt 4 gt 24 lt 19 Interpr tation
92. l proportion critique PRESENTATION REF 41 740 Milieux pr ts l emploi Coffret de 26 tubes pente 2 tubes t moin non impr gn s pH 7 1 20 tubes impr gn s d antibiotiques pH 7 1 2 tubes de chaque antibiotique 2 concentrations LNH Isoniazide 0 2 et 1 ug ml ETHAMBUTOL 2 et 3 ug ml STREPTOMYCINE 4 et 10 ug ml PAS Acide para amino 4 salicylique 0 5 et 1 ug ml RIFAMYCINE 2 tubes t moin non impr gn s pH 5 5 2 tubes impr gn s d antibiotiques pH 5 5 PYRAZINAMIDE 200 ug ml 1 notice L activit du pyrazinamide ne se manifestant qu un pH acide les milieux destin s l tude de cet antibiotique sont ajust s pH 5 5 COMPOSITION Milieu de base Lowenstein Jensen Formule th orique en 9 1 d eau purifi e Ce milieu peut tre ajust et ou suppl ment en fonction des crit res de performances impos s 20 et 40 pg ml F cule de pomme de terre 30 Glyc rol 7 4 ml uf entier 620 ml Phosphate monopotassique 2 5 Sulfate de magn sium 0 24 Citrate de magn sium 0 6 L asparagine 3 6 Vert Malachite 0 4 Antibiotique tubes impr gn s Se reporter au paragraphe pr sentation MATERIEL NECESSAIRE MAIS NON FOURNI Etuve bact riologique Portoirs adapt s Tubes capsul s avec billes de verre PRECAUTIONS D UTILISATION Pour diagnostic in vitro uniquement Pour usage professionnel uniquement Ce coffret contient
93. l bis Limites acceptables des mg L des b ta lactamines chez Streptococcus pneumoniae 104485 r sultats de 15 observatoires r gionaux Antibiotiques P nicilline G 0 125 0 5 mg L Amoxicilline 0 03 0 125 mg L C fotaxime 0 03 0 25 mg L ANTIBIOTIQUES A ETUDIER PAR ESPECE OU GROUPE BACTERIEN Selon les recommandations 2010 du CA SFM Chaque mol cule ou son quivalent est repr sentative d une classe d antibiotiques Deux listes distinctes pr jugeant pas de la technique utilis e sont pr sent es e Liste standard Cette liste comprend les antibiotiques n cessaires l orientation th rapeutique en fonction des indications cliniques et de la pr valence de la r sistance acquise e Liste compl mentaire Cette liste comprend les antibiotiques plus sp cifiquement utilis s vis vis des souches multir sistantes la surveillance pid miologique de la r sistance ou l aide l interpr tation des r sultats de l antibiogramme Il n est pas utile de tester en routine d autres mol cules que celles mentionn es dans les listes standard et compl mentaire par esp ce ou groupe bact rien mais le choix des antibiotiques de la liste standard peut tre adapt par chaque laboratoire en fonction des sch mas th rapeutiques de premi re intention retenus par le Comit du M dicament ou des donn es pid miologiques locales Le tableau VI la page suivante permet d
94. la surface de la g lose en les appliquant d licatement la pince st rile Remarque Pour Nesseria meningitidis et Neisseria gonorrhoeae d poser les disques une distance de 60 mm de centre centre pour viter le chevauchement des zones d inhibition 5 Bact ries Lecture apr s Enterobacteriaceae P aeruginosa Acinetobacter spp S maltophilia B cepacia Staphylococcus spp Enterococcus spp H influenzae Streptococcus spp Streptococcus pneumoniae Incubation en a robiose 18 24 h 37 C Incubation en atmosph re contenant Neisseria gonorrhoeae N 5 CO 18 24 h 37 C meningitidis Pour N gonorrhoeae 36 40 h si croissance insuffisante 18 24 h 37 C en microa robiose Campylobacter spp ou ana robiose selon les souches Ana robies 48 h 37 C en ana robiose La correspondance entre chelle de Mac Farland et UFC mL est diff rente en fonction des groupes bact riens 2 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications RESISTANCES NATURELLES AUX ANTIBIOTIQUES DES PRINCIPALES ESPECES BACTERIENNES D INTERET MEDICAL Selon les recommandations 2010 du CA SFM La r sistance naturelle est caract ristique d une esp ce bact rienne Elle d limite le spectre nat
95. la d formation d une des deux ellipses indique la pr sence d une BLSE ou d une MBL CONTR LE DE QUALIT Tester les souches de contr le de qualit appropri es selon les recommandations du CLSI aux USA ou selon les recommandations de votre Comit National de l Antibiogramme CA SFM Une vue d ensemble des crit res d interpr tation du CLSI est indiqu e dans le Tableau 1 N h sitez pas r clamer des donn es compl mentaires de contr le de qualit sur le site www biomerieux com CARACT RISTIQUES DE PERFORMANCES Les performances sont d crites dans le Tableau 1 et d autres informations sont disponibles sur le site www biomerieux com OBSERVATION IMPORTANTE Comme toutes les donn es sur l tude la sensibilit aux antimicrobiens les r sultats du Etest ne sont que des valeurs vitro donnant seulement une indication de la sensibilit potentielle de l organisme in vivo L utilisation des r sultats afin de guider la th rapie doit tre faite sur la seule et enti re responsabilit du clinicien BIBLIOGRAPHIE GARANTIE ET LIMITE DE RESPONSABILITE TABLEAU 1 CONTROLE DE QUALITE PERFORMANCE ET CRITERES D INTERPRETATION DU E TEST EENEG 8 Crit res d interpr tation CLIS 2009 Contr le de qualit o 3 8 So SSES 5 9 E 20o 5 5 9 SES a E P Taxon R f rence ge S s Ss PY SE 0 0
96. lline 75 ug lt 8 16 gt 24 lt 22 GE Ser pour un traitement intraveineux Cf Ticarcilline ac clavulanique 75 10ug lt 8 2 gt 16 2 224 lt 22 Pip racilline 75 ug lt 8 gt 16 gt 20 lt 16 ans See pour un traitement intraveineux Cf Pip racilline tazobactam 75 10 lt 8 4 gt 16 4 gt 21 lt 17 M cillinam 10 ue lt 8 gt 8 gt 24 lt 22 Hea S valable uniquement pour les souches isol es es urines Imip n me 10 ug lt 2 gt 8 gt 24 lt 17 M rop n me 10 ug lt 2 gt 8 gt 22 lt 15 SR D terminer 1 MI en r sistan r diffusion Ertap n me 10 Hg lt 0 5 gt 1 2 28 lt 26 sa ss sensibilit GE Dorip n me 10 ug lt 1 gt 4 gt 24 lt 19 Aztr onam 30 ug lt gt 8 gt 27 lt 21 Cf r gles 4 et 5 Interpr tation valable pour les c phalosporines injectables de 1 re g n ration c fapirine c fazoline 2 Interpr tation galement valable pour les c ph mes orales 30 hg lt 8 gt 32 gt 18 lt 12 c fradine c faclor cefatrizine loracarbef mais uniquement pour les souches isol es des urines C furoxime 30 ug lt 8 gt 8 gt 22 lt 22 C famandole 30 ug lt 8 gt 32 gt 22 lt 15 C foxitine 30 ug lt 8 gt 32 gt 22 lt 15 C fot tan 30 ug lt 4 gt 32 gt 23 lt 17 Latamoxef 30 ug lt 4 gt 32 gt 23 lt 17 Noncommercialis en France C fotaxime 30 ug lt 1 gt 2 gt 26 lt 23 Pourles 6 c phalosporines de ce groupe cf r
97. mL Les combinaisons S sont possibles HNR HNR HNR K K G eS K Chloramph nicol 30 ug gt 16 lt 19 Interpr tation valable pour thiamph nicol T tracycline Tig cycline 30 UI 15 Hg gt 8 gt 0 5 lt 17 gt 22 Interpr tation valable pour les autres t tracyclines sauf la minocycline et la tig cycline Erythromycine Lincomycine Clindamycine 15 UI 15 Hg 20 gt 4 gt 8 gt 2 lt 17 lt 17 lt 15 Interpr tation valable pour azithromycine clarithromycine dirithromycine et roxithromycine R sistance naturelle de E faecalis R sistance naturelle de E faecalis Pristinamycine Quinupristine dalfopristine 15 Hg 15 Hg gt 2 gt 4 lt 19 lt 16 Spectre limit E faecium Spectre limit E faecium L vofloxacine Moxifloxacine 5 ug 5 ug gt 4 gt 2 Lin zolide 30 ug gt 4 lt 24 Teicoplanine Vancomycine 30 ug 30 ug gt 8 gt 8 Du fait d une expression parfois faible ou tardive de la r sistance aux glycopeptides des ent rocoques il est recommand de d terminer les CMI de la vancomycine et de la teicoplanine par la m thode de dilution en g lose ou par toute technique ayant d montr pour ces antibiotiques son quivalence avec la technique de r f rence en cas d chec th rapeutique lorsque par la m thode de diffusion en g lose apr
98. minant la CMI aux glycopeptides Vancomycine et Teicoplanine RESULTATS ATTENDUS Les profils de r sistance des tests antibiotiques variant en fonction de la zone g ographique les r sultats attendus sont donc directement d pendants de l cologie microbienne locale esp ces m canismes de r sistance PERFORMANCES Les performances de la galerie ATB STAPH ont t d termin es en utilisant trois souchiers comprenant les esp ces bact riennes suivantes S aureus S epidermidis S haemolyticus S hominis S intermedius S saprophyticus S simulans S xylosus Le premier souchier permis d tablir le taux de concordance des cat gorisations pour chaque antibiotique Les cat gorisations de r f rence ont t d termin es partir des r sultats de CMI obtenues avec la m thode de dilution en g lose et compar es celles tablies par la galerie ATB STAPH I y a concordance lorsque les cat gorisations cliniques des deux m thodes sont identiques Le second souchier provenant du Centre National de R f rence des Antibiotiques Institut Pasteur Paris France a permis de v rifier l expression des m canismes de r sistance Un m canisme de r sistance est exprim lorsque les r sultats de cat gorisation des antibiotiques marqueurs sont compatibles avec le profil attendu Enfin un r sultat est dit reproductible si les 3 r sultats de cat gorisation d termin s de mani re ind pendante sont identiques
99. myxine B Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications Tableau VII suite Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d Sulfamides 200 ug lt 64 gt 256 gt 17 lt 12 iea valable uniquement pour les souches isol es Trim thoprime 5 ug lt 2 JA gt 20 lt 16 valable uniquement pour les souches isol es Trim thoprime sulfam thoxa 1 25 Interpr tation valable pour les autres associations lt gt zole 23 75 296 s OU 26 lt S trim thoprime sulfamide Nitrofuranas 300 ug lt 64 gt 64 gt 15 lt 15 H valable uniquement pour les souches isol es Acide oxolinique 10 ug lt 2 gt 4 gt 20 lt 17 Flum qui Z 8 21 II est justifi de fournir une r ponse globale pour l ensemble 30 54 gt 225 lt du groupe des quinolones classiques parfois appel es de Acide nalidixique 30 ug lt 8 gt 16 gt 20 lt 15 premi re g n ration en n tudiant qu un seul repr sentant Acide pip midique 20 ug lt gt 16 gt 19 lt 14 de ce SE dd valable uniquement Dour les Acide piromidique 25 ug lt 16 gt 32 gt 20 lt 16 souches isol es des urines Ciprofloxacine 5 ug lt
100. nces de la galerie ATB UR ont t d termin es en utilisant deux souchiers comprenant les genres bact riens suivants Escherichia Cedecea Enterobacter Hafnia Klebsiella Citrobacter Proteus Morganella Providencia Serratia Yersinia Le premier souchier a permis d tablir le taux de concordance des cat gorisations pour chaque antibiotique Les cat gorisations de r f rence ont t d termin es partir des r sultats de CMI obtenues avec la m thode de dilution en g lose et compar es celles tablies par la galerie ATB UR Il y a concordance lorsque les cat gorisations cliniques des deux m thodes sont identiques Le second souchier provenant du Centre National de R f rence des Antibiotiques Institut Pasteur Paris France a permis de v rifier l expression des m canismes de r sistance Un m canisme de r sistance est exprim lorsque les r sultats de cat gorisation des antibiotiques marqueurs sont compatibles avec le profil attendu Enfin un r sultat est dit reproductible si les 3 r sultats de cat gorisation d termin s de mani re ind pendante sont identiques Taux de concordance Le taux de concordance de la galerie ATB UR obtenu partir de 100 souches est de 91 Les taux d erreurs majeures et d erreurs tr s majeures obtenus avec la galerie ATB UR sont respectivement de 2 5 et 0 7 Expression des m canismes de r sistance Ind pendamment du syst me expert l tude portant sur 45 souches a permis
101. nfrontation des r sultats obtenus in vitro et des r sultats obtenus in vivo essais cliniques la variabilit statistique des m thodes utilis es pour mesurer les et les diam tres des zones d inhibition Ainsi sont d finies deux concentrations critiques la concentration critique basse c ou cci et la concentration critique haute C ou auxquelles correspondent des diam tres critiques D et d respectivement PROCEDURE ET CRITERES DE CATEGORISATION DES SOUCHES Aux regards des concentrations et des diam tres critiques sont consid r es comme e sensibles S les souches pour lesquelles de l antibiotique test est inf rieure ou gale la concentration critique basse cci ce qui quivaut un diam tre sup rieur ou gal au diam tre critique D Tableau 1 e r sistantes R les souches vis vis desquelles la de l antibiotique test est sup rieure la concentration critique haute ccs correspondant un diam tre inf rieur au diam tre critique d Tab 1 e de sensibilit interm diaire 1 les souches vis vis desquelles la CMI de l antibiotique test et du diam tre correspondant sont compris entre les deux concentrations critiques et les deux diam tres critiques Tableau 1 Tableau 1 Crit res de cat gorisation selon les valeurs critiques Cat gorie CMI mg L Diam tre mm s CMI lt c gt D R CMI gt G lt d c lt CMI lt
102. nisme restauration de la sensibilit aux mol cules pr cit es en l absence de tout autre m canisme de r sistance aux b lactamines et de d tecter une ventuelle b lactamase spectre largi associ e qui aurait t masqu e par une hyperproduction de c phalosporinase voir remarque 5a 8 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications 5 Interpr ter un r sultat S toutes les c phalosporines sauf les c phamycines c foxitine et c fot tan et l aztr onam en pr sence d une synergie significative entre au moins l une des c phalosporines de 3 me g n ration C3G ou l aztr onam et AMC Ce ph notype est vocateur d une b lactamase spectre largi BLSE a Cette synergie significative typiquement en bouchon de champagne est habituellement visible sur l antibiogramme standard o les disques sont distants de 30 mm centre centre Toutefois chez les souches r sistantes haut niveau aux b lactamines souches cumulant plusieurs m canismes de r sistance dont l hyperproduction de c phalosporinase la d tection d une BLSE est facilit e par la recherche d une synergie entre des disques de c f pime ou cefpirome et d AMC que l on peut rapprocher et ou la r alisation d un antibiogramme standard comprenan
103. ns Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d P nicilline G lt 0 06 gt 2 Amoicilli La d tection de pneumocoques de sensibilit diminu e la mpicilline lt 0 5 gt 2 per n j D p nicilline G est r alis e avec un disque d oxacilline 5 ug 5 selon les crit res suivants Amoxicilline lt 0 5 ZR i i diam tre OXA 5 gt 26 mm souche sensible la p nicilline gt e G et aux autres f lactamines C furoxime lt 0 5 71 i i diam tre OXA 5 lt 26 mm souche de sensibilit D diminu e C furoxime ax til lt 0 25 gt 0 5 Ce test ne peut pas appr cier le niveau de r sistance la p nicilline G ou aux autres L utilisation C furoxime prox til lt 0 25 gt 0 5 s z d autres disques de p lactamines ne permet pas de d terminer le niveau de r sistance ces p lactamines C fotaxime lt 0 5 gt 2 cons quence notamment en cas d infection s v re d chec clinique ou devant toute souche de sensibilit Ceftriaxone lt 0 5 gt 2 diminu e OXA 5 lt 26 mm il y a lieu de d terminer la d au moins une des p lactamines dont les propri t s C f pime lt 1 gt 2 pharmacodynamiques sont compatibles avec une efficacit th rapeutique amoxicilline c fotaxime ceftriaxone Cefpirome gt lt 1 gt 2 o La r sistance acquise la p n
104. ocolat PolyViteX La r sistance de faible niveau aux aminop nicillines est crois e avec toutes les b talactamines plus marqu e avec les c phalosporines de Ertap n me lt 0 5 premi re g n ration le c furoxime et les carbap n mes L activit des c phalosporines de troisi me g n ration n est que faiblement alt r e En cas d infection s v re ou lors d chec th rapeutique il y a lieu de d terminer la de Dorip n me _ lt 1 ER gt 23 lt 23 l amoxicilline et ou d une b talactamine dont les propri t s pharmacologiques sont compatibles avec une efficacit th rapeutique C fotaxime lt 0 12 gt S Sont utilisables en l absence de crit res d interpr tation car il n existe pas actuellement d chec clinique d un Ceftriaxone lt 0 12 2 S m canisme de r sistance T tracycline 30 UI lt 1 gt 2 gt 23 lt 20 Interpr tation valable pour les autres t tracyclines Trim thoprime sulfam thoxa 1 25 lt 0 5 gt 1 19 gt 24 Ne peut tre test sur g lose chocolat Utiliser le milieu zole 23 75 ug 9 5 Chloramph nicol 30 ug lt 1 gt 2 2 30 lt 26 Rifampicine 30 ug lt 0 5 gt 0 5 2 24 lt 24 Kanamycine 30 UI lt 8 gt 16 gt 18 lt 15 S Interpr tation valable pour amikacine tobramycine et Gentamicine 15 ug lt gt 4 gt 16 lt 14 E e H Azithromycine lt 0 12 gt 4 Clarithromycine z lt 1 gt 32 z H influenzae appara t g n ralement interm
105. oducts une proc dure pour les nouveaux antibiotiques et d autre part en tentant d harmoniser les concentrations critiques nationales des antibiotiques existants sur de nouveaux arguments solides notamment des points de vue pharmacocin tique et pharmacodynamique ainsi que clinique 1 Lyc e des lt du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications METHODOLOGIE DE REALISATION DE L ANTIBIOGRAMME PAR DIFFUSION EN MILIEU GELOSE Selon les recommandations 2010 du CA SFM Pr parer une suspension inoculum Isolement 18 24 h milieu non s lectif Remarque La suspension inoculum peut galement tre pr par e partir d une culture en bouillon Mueller Hinton obtenue apr s incubation 37 C au bain marie agit pendant 3 5h et dont la densit est ajust e au standard McFarland 0 5 1 A partir d une culture pure 18 24 heures sur milieu non s lectif adapt aux exigences de la souche pr parer une suspension inoculum en eau physiologique ou bouillon Mueller Hinton quivalente au standard Mc Farland 0 5 10 UFC 1 Suspension au standard 1 McF 10 UFC en bouillon Brucella ou Schaedler pour les ana robies 1 McF 10 UFC cm pour N gonorrhoeae et 0 5 McF
106. on compl te M THODOLOGIE FICHE DE R SULTAT ATB STAPH 14 329 Origine c c R I S OO PEN O 0 25 OXA 2 2McF KN O 8 API Suspension Medium TOB O 4 GEN 4 8 200 pl O 1 TEL 0 5 LIN 2 FOS 32 ATB Medi ATB Na Medium 2 PRI qa gt QDA O 0 5 2 TIET 4 32 135 ul RFA 0 5 16 ATB STAPH O O LNZ 2 4 4 FUC O 2 16 18 00 24 00 36 C 2 C 1 4 O 4 16 L TE O O 4 16 TSU O 2 38 FUR 32 ATB STAPH L Note 31 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications ATB UR ANTIBIOGRAMME POUR LES ENTEROBACTERIES D ORIGINE URINAIRE H INTRODUCTION ET OBJET DU TEST bioM rieux r f 14 339 2008 02 La galerie ATB UR permet de d terminer la sensibilit des ent robact ries d origine urinaire aux antibiotiques en milieu semi solide dans des conditions tr s proches des techniques de r f rence de dilution en g lose ou de micro dilution selon les recommandations du CASFM ou CLSI NCCLS PRINCIPE La galerie ATB UR comporte 16 paires de cupules La premi re paire sans antibiotique s
107. osporines E g n ration nitroimidazoles ornidazole MOBILUNCUS nitroimidazoles VEILLONELLA macrolides bas niveau glycopeptides 1 La r sistance naturelle peut s exprimer faiblement et se traduire par des proches de la valeur critique basse Cette r sistance naturelle doit aussi tre prise en compte pour la lecture interpr tative 4 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 104485 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONTROLE DE QUALITE INTERNE Un contr le de qualit interne doit tre organis pour s assurer de la validit des r sultats obtenus Les souches de r f rence recommand es sont les suivantes Escherichia coli CIP 7624 ATCC 25922 Pseudomonas aeruginosa CIP 76110 ATCC 27853 Staphylococcus aureus CIP 7625 ATCC 25923 Providencia stuartii CIP 107808 Streptococcus CIP Note CLSI est une marque utilis e d pos e et ou enregistr e appartenant Clinical and Laboratory Standards Institute Inc ATCC est une marque utilis e d pos e et ou enregistr e appartenant American Type Culture Collection Tableau Il Limites acceptables des diam tres d inhibition mm obtenus par diffusion en g lose moyennes 1 cart type cal
108. partir d une souche tester MODE OPERATOIRE 1 Laisser le tube contenant la cartouche de disques revenir temp rature ambiante 2 Humidifier un disque avec de l eau d min ralis e st rile 3 Pr lever quelques colonies isol es de la souche tester et les taler la surface du disque LECTURE ET INTERPRETATION Observer l apparition d une coloration rouge traduisant une r action positive Une r action est consid r e comme n gative si aucune coloration n est apparue au bout d une heure bioM rieux r f 55622 2002 09 CONTROLE DE QUALITE Protocole L activit des disques peut tre v rifi e avec les souches suivantes Staphylococcus aureus ATCC 29213 Enterococcus faecalis ATCC 29212 R sultats attendus Souche R sultat Staphylococcus aureus ATCC 28213 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Remarque II est de la responsabilit de l utilisateur de prendre en compte la nature de l application et la l gislation locale en vigueur pour la mise en uvre du contr le de qualit fr quence nombre de souches LIMITES DU TEST L efficacit du r actif C finase n a pas t d montr e pour des germes autres que Neisseria gonorrhoeae Haemophilus influenzae Branhamella catarrhalis staphylocoques ent rocoques et certains germes ana robies D autres m canismes de r sistance aux p nicillines sans production de B lactamases imperm abilit
109. pneumoniae Streptococcus spp Haemophilus influenzae Campylobacter dilution 1 10 de la suspension inoculum 0 5 10 UFC cm 1 cm dans 9 ou bien encore 20 gouttes de pipette Pasteur dans 9 Neisseria meningitidis Ana robies Pas de dilution de la suspension inoculum 0 5 ou 1 McF 1 Suspension inoculum faite en bouillon Brucella ou Schaedler 2 Suspension inoculum faite en bouillon Brucella ou eau physiologique 3 Suspension inoculum faite en tampon phosphate M 15 pH 7 2 3 Avec un couvillon essor ensemencer toute la surface du milieu Bact ries en stries serr es successivement 3 orientations d cal es de 60 Milieu Enterobacteriaceae P aeruginosa Acinetobacter S maltophilia B cepacia Staphylococcus Enterococcus G lose Mueller Hinton 4 mm d paisseur N meningitidis Streptococcus pneumoniae Streptococcus Campylobacter G lose Mueller Hinton sang 4 5 sang de mouton ou 5 de sang h molys de cheval avec le cotrimo xazole 5 5 de sang de mouton ou de cheval Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoeae G lose Chocolat PolyVitex ou milieu HTM pour H influenzae Ana robies G lose Willkins Chalgren 5 sang ou Brucella vit K1 1 mg L 5 sang 4 D poser les disques maximum 6 pour une boite de 90 mm
110. pour laquelle un r sultat R sistant est obtenu Des croissances faibles et h t rog nes peuvent parfois tre observ es pour le test Kanamycine Il n est pas n cessaire de modifier la cat gorisation fournie par l automate CONTROLE DE QUALITE Pour v rifier la standardisation de la m thode suivie des contr les de qualit avec la souche test indiqu e pour cette galerie doivent tre r alis s voir tableau Contr le de Qualit en fin de notice II est de la responsabilit de l utilisateur de s assurer que le contr le de qualit est mis en oeuvre conform ment la l gislation locale en vigueur CLSI est une marque utilis e d pos e et ou enregistr e appartenant Clinical and Laboratory Standards Institute Inc ATCC est une marque utilis e d pos e et ou enregistr e appartenant American Type Culture Collection LIMITES DU TEST Un temps d attente entre les diverses tapes de la manipulation de la pr paration de l inoculum l incubation de la galerie peut affecter les r sultats Seules des cultures pures contenant un seul type de microorganisme doivent tre utilis es Des cultures mixtes ou contamin es peuvent affecter les r sultats Pour l esp ce S aureus une croissance en p riph rie de cupule peut tre observ e pour le test Teicoplanine g n rant parfois une non sensibilit excessive En cas de r sultat Interm diaire ou R sistant il est recommand de v rifier ce r sultat en d ter
111. pr sentant par pays europ en et se r unit une fois par et d autre part d un Steering Committee compos de deux repr sentants du General Committee et surtout d un repr sentant de chacun des six comit s nationaux reconnus comme actifs en raison de leur anciennet de la fr quence de leurs r unions et de leur notori t attest e par des publications r guli res France CA SFM Comit de l Antibiogramme de Soci t Fran aise de Microbiologie Allemagne DIN Deutsches Intitut f r Normung Pays Bas CRG Commissie Richtlijnen Gevoeligheidsbepalingen Norv ge NWGA Norwegian Working Group on Antibiotics Su de SRGA Swedish Reference Group for Antibiotics Royaume Uni BSAC British Society for Antimicrobial Chemotherapy Le Steering Committee se r unit quatre fois par an Les objectifs de l EUCAST ont t d finis de la fa on suivante standardiser les m thodologies s accorder sur l expression des concentrations critiques celle qui toujours pr valu en France a t retenue soit S lt x mg L et R gt y mg L tablir des lt cut off values gt s parant pour chaque couple esp ce antibiotique la population des souches sauvages de celles porteuses d un ou plusieurs m canismes de r sistance acquise e tablir des concentrations critiques pour la cat gorisation clinique d une part en r digeant en accord avec l EMEA European Agency for the Evaluation of Medicinal Pr
112. rpr tation est valable pour la pip racilline Pip racilline 75 ug lt 8 gt 16 2 20 lt 18 Interpr tation pour les ana robies Gram positif p lt 16 gt 16 2 18 lt 18 Interpr tation pour les ana robies Gram n gatif Pip racilline tazobactam 7510 lt 8 4 gt 16 4 gt 21 lt 19 sont oides fragilis interpretation est valable Imip n me 10 ug lt 2 gt 8 2 24 lt 17 Cf r gle 4 Ertap n me 10 ug lt 1 gt 1 2 26 lt 26 M rop n me lt 2 lt 8 2 22 lt 15 Dorip n me lt 1 gt 1 C foxitine gt 32 C fot tan gt 32 C fotaxime 30 ug lt 4 gt 32 gt 21 lt 15 Cf r gle 5 R gles de lecture interpr tative tablaeu XIX Remarque selon les antibiotiques la corr lation entre CMI et diam tres est parfois difficile tablir et diff re selon les esp ces en particulier pour les esp ces croissance lente En cas doute sur les r sultats obtenus par diffusion en milieu g los il y a lieu de d terminer les CMI par une m thode de r f rence ou toute m thode ayant montr pour les antibiotiques concern s son quivalence avec la m thode de r f rence 1 Chez Fusobacterium la production de B lactamase d tect e par une m thode chromog nique d s l isolement conf re la r sistance la p nicilline G et aux amino carboxy et ur ido p nicillines L activit est restaur e lors de l association avec un inhibiteur de B lactamase 2
113. sibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications METHODOLOGIE FICHE DE RESULTAT ATB UR REF 14 339 Origine 2 38 8 152 32 128 OOO O OOO O UR c 0 5 McF Oo 4 r 281 API Suspension Medium API NaCl 0 85 2192 Lee 10 ul pu u E LACH ATB Medium O SU C j ot o gt Bac oo 4z SS E OOCOOOOCOOOOOOOOO OO OOO 34 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales de diff rentes publications CEFINASE CEF F DETECTION RAPIDE DES BETA LACTAMASES INTRODUCTION ET OBJET DU TEST Ce r actif permet de d tecter la pr sence de B lactamase chez les bact ries staphylocoques ent rocoques Haemophilus influenzae Neisseria gonorrhoeae Branhamella catarrhalis et germes 1 3 6 PRINCIPE Certaines bact ries ont la propri t de produire des enzymes capables d inactiver les antibiotiques de la famille des B lactamines p nicillines et c phalosporines La production de ces enzymes est tr s souvent le signe d une r sistance aux f lactamines Le r actif C finaseTM
114. t ventuellement des disques de C3G AMC voir remarque 5d sur g lose Mueller Hinton additionn e de 250 mg L de cloxacilline Chez certaines esp ces intrins quement tr s sensibles aux b lactamines P mirabilis P vulgaris P penneri P stuartii et P les BLSE s expriment bas niveau Leur d tection est facilit e par la recherche d une synergie entre les ou l aztr onam et AMC avec des disques plac s une distance de 40 45 mm ou comme indiqu dans la remarque 5b b La pr sence d une BLSE peut tre confirm e en quantifiant la synergie soit par un antibiogramme comportant des disques de c fotaxime ceftazidime et c f pime simples et combin s l acide clavulanique soit par la mesure de la CMI de ces mol cules test es seules ou associ es l acide clavulanique Une synergie significative est d finie comme l augmentation de 5 mm du diam tre de la zone d inhibition ou la diminution d au moins dilutions de en pr sence d acide clavulanique Cette synergie significative t moigne de la pr sence de BLSE et permet de distinguer ces enzymes de certaines p nicillinases plasmidiques OXA 1 30 SHV 1 Une synergie non significative exclut a priori la pr sence d une BLSE et la lecture interpr tative associ e ce m canisme c Chez K oxytoca un test de synergie positif image en entonnoir avec l aztr onam et ou la ceftriaxone mais n gatif avec la ceftazidime voque une hyperproduc
115. t 4 76 gt 4 76 lt 13 Autres esp ces lt 2 38 gt 4 76 gt lt 13 11 Lyc e des m tiers du tertiaire de la sant et du social Louise Michel Grenoble Etude de la sensibilit aux antimicrobiens 2010 2011 Documentation technique extraite des notices techniques commerciales et de diff rentes publications CONCENTRATIONS DIAMETRES CRITIQUES ET REGLES DE LECTURE INTERPRETATIVE POUR STAPHYLOCOCCUS SPP Tableau X Charge Concentrations Diam tres Antibiotiques du critiques mg L critiques mm Remarques disque S cci R ccs S D R d V rifier l absence de production de p nicillinase par une technique chromog nique Les souches productrices de 21 6 ug 10 lt p nicillinase sont r sistantes la p nicilline G CMI gt 0 12 P enlcilline G soie gt 012 mg L la ph noxym thyl p nicilline et aux autres p nicillines hydrolysables amino carboxy et ur ido p nicillines Oxacilline ie lt 2 52 gt 20 lt 20 Pour S aureus voir la remarque lt cas particulier gt Ci dessous sur les conditions techniques de r alisation Pour les staphylocoques coagulase n gative L expression d une PLP2a apr s induction par une b ta lactamine ou la pr sence d un g ne mech doit tre recherch e pour les souches cat goris es interm diaires lt 025 52 par les de l oxacilline Des souches appartenant aux non suppl ment en chlorure de
116. t moins Calculer le rapport entre ces deux valeurs e En d duire pour chaque antibiotique la proportion de bacilles r sistants pour la souche bact rienne Une souche est dite r sistante lorsque cette proportion atteint ou d passe un seuil appel proportion critique figurant dans le tableau suivant antibiotique concentration ug ml proportion critique Mycobaterium Croissance Croissance tuberculosis H37 Rv forte faible nulle Mycobacterium Croissance Croissance kansasi ATCC 12478 forte forte Remarque Il est de la responsabilit de l utilisateur de prendre en compte la nature de l application et la l gislation locale en vigueur pour la mise en uvre du contr le de qualit fr quence nombre de souches temp rature d incubation LIMITES DU TEST Certaines souches croissance lente peuvent n cessiter des dilutions plus faibles que celles qui sont indiqu es Les tubes peuvent pr senter des d p ts lipidiques la surface de la g lose ne devant pas tre confondus avec une contamination PERFORMANCES Les performances ont t valu es 37 sur 4 souches de mycobact ries souches sensibles et r sistantes R sultats Sur les tubes avec antibiotiques les 2 souches sensibles ont pr sent une croissance faible nulle apr s 4 semaines les 2 souches r sistantes ont pr sent une croissance abondante apr s 4 semaines Sur les tubes t
117. tion de la b lactamase naturelle chromosomique Interpr ter 1 les seuls r sultats S associ s une synergie d Chez P vulgaris et P penneri un test de synergie positif voque une hyperproduction de la b lactamase naturelle chromosomique et beaucoup plus rarement la pr sence d une BLSE surtout s il ny a pas de r sistance acquise aux autres familles d antibiotiques Abr viations gentamicine G tobramycine T n tilmicine Nt amikacine A is pamicine 15 6 Se conformer aux diam tres critiques de chaque mol cule pour l interpr tation si une diminution des diam tres d inhibition lt 20 mm est observ e pour l ensemble des aminosides elle voque une perm abilit diminu e 7 Interpr ter A Is un r sultat GS et et 15 voquant la production d une AAC 6 cf galement note 5 8 Interpr ter un r sultat G si une diminution du diam tre d inhibition 16 19 mm de la seule gentamicine voquant la production d une AAC 3 I est observ e 9 Interpr ter un r sultat T si une diminution du diam tre d inhibition 16 19 mm de la tobramycine est observ e avec un r sultat GT Ceci voque la production d une ANT 2 10 Interpr ter Nt r sultat si une diminution du diam tre d inhibition 19 22 mm de la n tilmicine est observ e avec un r sultat G TR Ceci voque la production d une AAC 3 II ou d une AAC 3 IV 11 Chez Providencia spp
118. ubes revenir temp rature ambiante Pr paration de l inoculum M thode directe Cette m thode ne doit tre effectu e que lorsque l examen direct du produit pathologique met en vidence un nombre suffisant de bacilles acido alcoolo r sistants sup rieur 1 bacille par champ 1 Reprendre le culot de centrifugation obtenu apr s traitement du pr l vement fluidification d contamination par ml d eau st rile 2 R aliser des dilutions 10 2 10 4 en eau distill e st rile 8 Ensemencer 0 2 ml de chaque dilution selon le tableau suivant SEH Tubes avec Tubes t moins antibiotiques Pur X 107 X X 107 X M thode indirecte 1 Pr lever plusieurs colonies et les transf rer dans un tube viss st rile contenant 8 12 billes de verre 2 Agiter pendant 30 secondes pour favoriser la dispersion des mycobact ries 3 Ajouter 0 5 ml d eau distill e st rile 4 Agiter pendant 10 secondes 5 Ajouter 5 ml d eau distill e st rile 6 Homog n iser la suspension 7 Ajuster l opacit de la suspension celle d un talon BCG 1 mg ml chelle 2 Mac Farland 8 R aliser des dilutions 10 3 10 5 et 10 6 en eau distill e st rile 9 Ensemencer 0 2 ml de chaque dilution selon le tableau suivant Antibiotique Concentration Proportion q ug mL critique 0 2 1 Izionaside INH 1 0 1 2 1
119. urel de l antibiotique et constitue une aide l identification La r sistance naturelle se traduit habituellement par des sup rieures la valeur critique basse de concentration c de l antibiotique concern Si ce n est pas le cas par pr caution interpr ter en fonction de la r sistance naturelle de l esp ce BACILLES A GRAM NEGATIF NON EXIGEANTS P nicilline G oxacilline macrolides k tolides lincosamides streptogramines acide fusidique glycopeptides oxazolidinones ENTEROBACTERIES Tableau IV R sistance naturelle chez les ent robact ries HO Fox ma TET coL FT Klebsiella spp R R C koseri R R C freundii R R R R R E cloacae R R R R R E aerogenes R R R R R S marcescens R R R R R R P mirabilis R R R P vulgaris R R R R R R R M morganii R R R R R R R R P stuartii R R R R R R R Y enterocolitica R R R R R R R R r sistance naturelle AM aminop nicillines AMC amoxicilline acide clavulanique TIC ticarcilline PIP pip racilline C1G c phalosporines de 1 g n ration FOX c foxitine c fot tan MA c famandole c furoxime GM gentamicine t tracyclines y compris la tig cycline COL colistine polymyxine B FT nitrofuranes BACILLES A GRAM NEGATIF NON FERMENTAIRES PSEUDOMONAS AERUGINOSA

Etude de la sensibilité aux antimicrobiens

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