Taq`Ozyme Purple Mix
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1. Des femmes et des hommes au service de vos recherches Mix avec suppl ment MgCl 200 r actions R F RENCE OZYA003 200 LE KOAT VOLUME Taq Ozyme Purple Mix 5 x 1 ml MgCl 25 mM 1 ml STOCKAGE 20 C ou 4 C DUR E DE VIE r ception un an 20 C ou 3 mois 4 C QE DESCRIPTIF Taq Ozyme Purple Mix est un m lange 2X pr t l emploi Il facilite l utilisation et diminue les er reurs de pipettage Le d p t des produits de PCR sur gel est direct Deux colorants inertes un rouge et un bleu sont ajout s au m lange permettant un contr le visuel de la distribution et le suivi de la mi gration en gel Ces colorants n interf rent pas avec les applications en aval Une solution de MgCl 25 mM est fournie s par ment permettant les optimi sations 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr Www ozyme fr AA Na OZYME Hi Migration des colorants Gel 0 5 1 5 en agarose Marqueur Bleu 4 10 Kb Marqueur Rouge 1 2 Kb D FINITION DE L UNIT Une unit est d finie comme la quantit d enzyme qui incorpore 10 nmoles de dNTPs dans un frag ment d ADN en 30 min 74 C PROTOCOLE STANDARD Ce protocole est adapt pour une r action de 50 ul partir de matrices purifi es Les amorces ont pr f rentiellement une temp rature de fusion Tm proche de 60 C C est un point de d part pour les optimisa tions voir Optimisations dans le Manuel d Utilisa t2. ion en ligne Apr s d cong lation compl te de chaque r actif bien homog n iser l aide d un vortex puis centrifuger bri vement tous les r actifs avant leur utilisation 1 Les r actifs sont m lang s dans un micro tube st rile dans l ordre suivant 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr Www ozyme fr Conc finale 0 5 ui 0 2 uM 0 5 yl 0 2 uM Plasmide 10 ng Matrice d ADN ADNg 200 ng NT ADNc non dilu lt Sul Eau st rile redistill e q s p 50 pl DT q s p quantit suffisante pour R actif Volume Taq Ozyme Purple Mix Amorce sens ex 20 uM Amorce anti sens ex 20 uM 8 aliquot d un m lange r actionnel de transcription inverse 2 Le m lange r actionnel est vortex doucement puis centrifug bri vement pour rassembler l chan tillon au fond du tube Le ENA OZYME Ka 3 Programmation du thermocycleur 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr Etape Temp rature D naturation Temps Cycles 2 min 30 sec 30 sec Elongation Extension finale Stockage option variable ou Tm 5 C sur le Tm le plus bas des deux amorces si le Tm des amorces est diff rent de 60 C 8 1 min Kb pour les amplicons gt 1 Kb Des femmes et des hommes au service de vos recherches TABLEAU D OPTIMISATION DE MgCl OPTIONNELLE L optimisation de la concentration en MgCl peut tre n cessaire pour certaines amo
3. mail commande ozyme fr T l 33 0 1 34 60 15 16 Fax 33 0 1 34 60 92 12 NUMERO DE FICHE TECHNIQUE OZYA003 200 0713 PRODUIT A USAGE DE RECHERCHE UNIQUEMENT 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr wWww ozyme fr
4. rces Le volume de MgCl 25 mM ajouter est indiqu ci dessous Concentration finale en Volume de MgCl 25 mM MgCl ajouter dans 50 ll PR CAUTIONS Conserver le m lange r actionnel sur la glace jusqu au d marrage des cycles de PCR Eviter les cong lations d cong lations r p t es Taq Ozyme Purple Mix n est pas adapt pour des amplicons de plus 3 kb 4 kb en plasmide ou conte nant plus de 60 de GC Si besoin voir la section Produits associ s COMPOSANTS 5 x 1 ml Taq Ozyme Purple Mix 2X 1 mi MgCl 25 mM 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr Www ozyme fr COMPOSITION 1X KCI 10 mM Tris HCI 20 mM pH 9 0 NH4 S0 16 mM Triton X 100 0 1 MgCl 1 5 mM dNTPs 200 uM ADN polym rase Taq 2 5 unit s dans 25 pl de Mix traces de colorants rouge et bleu stabili sateurs d enzymes et amplificateurs de PCR SOLUTION DE MgCl 25 mM MANUEL D UTILISATION www ozyme fr proto taqpurple Okno 33 0 1 34 60 24 24 info ozyme fr www ozyme fr PRODUITS ASSOCI S Taq Ozyme OZYA001 1000 Taq Ozyme HS OZYAO02 250 EmeraldAmp MAX PCR Master Mix PCR gt 5 Kb s quences GC riches TAKRR320A ExactLadder DNA PreMix 100 bp Plus OZYC001 100 ExactLadder DNA PreMix 2 log OZYC002 100 dNTP PreMix 4 x 10 mM OZYDO01 500 POUR COMMANDER Www ozyme fr OZYME Parc d Activit s du Pas du lac 10 Avenue Amp re 78 180 Montigny Le Bretonneux France E
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