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Protocoles et procédures Table des Matières

1. Derni re r vision 9 F vrier 2004 Source initiale n a 1 But Obtenir un chantillon de sol broy pour analyse ult rieure 2 Mat riel e Un mortier et un pilon inerte en diamonite de couleur rose ou en agate environ 50 ml de capacit et environ 10 cm de long La c ramique est a proscrire elle contaminera l chantillon e Un contenant ou un sac appropri pour conserver l chantillon broy e Papier de pes e 3 Manipulations Le mortier et pilon sont nettoy s la brosse et l eau chaude tremp s quelques secondes dans l acide nitrique 10 rinc s abondamment l eau d ionis e DI puis ass ch s avec des mouchoirs ou avec un peu d ac tone si on doit aller rapidement La coupelle contenant l chantillon de sol sec est vid e au complet dans le mortier et le sol est broy en poudre par l action du pilon utiliser des gants en latex non poudr s afin d viter une contamination provenant des mains Le sol broy est alors transf r dans un nouveau contenant On peut si n cessaire on peut d poser l chantillon broy sur un papier de pes e pour faciliter le transfert dans le contenant ou le sac de l chantillon Le mortier et le pilon sont ensuite nettoy s nouveau et on recommence avec l chantillon suivant voir tape 3 1 Page 27 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 5 Ajustement du ta
2. 100 mL 500 mL C1 1000 mg L Donc en ajoutant 500 mL de l talon de cuivre 1000 mg L dans une fiole jaug e 100 mL et en compl tant le volume au trait de jauge avec 100 mL d acide nitrique 20 matrice on obtient 100 mL de standard 5 mg L de cuivre Page 14 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 Traitements d chantillons Page 15 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 1 Digestion acide de sols pour m taux totaux r cup rables total recoverable sur plaque chauffante Par S bastien Sauv Michel Villena et Luc Lavoie Derni re r vision 9 f vrier 2004 Source initiale n a 1 But et application Pr paration des chantillons pour la d termination de la quantit totale des l ments dans les eaux souterraines les eaux de surface l eau potable les eaux r siduelles et l exception de la silice dans les s diments les boues et les d chets solides Dans ce cas le but est de transformer la quasi totalit des l ments traces pr sents dans une matrice solide et de solubiliser dans un acide concentr Comme on cherche obtenir la concentration exacte il est important de bien mesurer le poids sec exact de la matrice utilis e e g m me un sol qui lair pas mal sec pourrait avoir 15 p p d humidit Comme c est un rapport de masse sur le volume d acide il est aus
3. 5 Calculs Pour calculer la concentration de glucose marqu min ralis consomm on utilise les relations suivantes Page 79 de 80 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv a 1uCi 2 2 10 dpm b 33 9 uCi mg D glucose U 14C Pour calculer le pourcentage de min ralisation de min ralisation nb de dpm au temps X 100 min au temps X 1 nb de dpm moyen dans les contr les de d part R f rences e Millette D Baker J Comeau Y Butler B Frind E O Cl ment B et Samson R 1995 Substrate interaction during aerobic biodegradation of creosote related compounds a factorial experiment Environ Sci Technol 29 1744 1952 e Nannipieri P Grego S Ceccanti B 1990 Ecological significance of the biological activity in soil In Soil Biochemistry vol 6 Bollag J M Stotzky G eds Marcel Dekker New York Basel pp 293 355 e Otte M P Gagnon J Comeau Y Matte N Greer C W et Samson R 1994 Activation of an indigenous microbial consortium for bioaugmentation of pentachlorophenol creosote contaminated soil Applied Microbiology and biotechnology 40 926 932 e Samson R Cseh T Hawari J Demeter A Al Bashir et B Leduc 1991 Effect of redox conditions soil contaminant interaction and chemical structure on the biodegradation of polycyclic aromatic hydrocarbons PAH in flooded soil World Environment Acta Press Calgary Pag
4. Page 17 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv d eau DI Le contenu du b cher est ensuite filtr par gravit dans la fiole jaug e de 50 ml ou 100 mL e On veille bien recueillir tout l acide du b cher et sur le verre de montre l aide du flacon laveur Une fois l acide filtr et compl tement refroidit on rince le papier filtre avec le flacon laveur et on compl te le volume de la fiole jaug e au trait N oubliez pas que la densit et le volume changent avec la temp rature e Sila solution est turbide il peut s av rer n cessaire de filtrer la solution avec des membranes 0 45 um plac e sur un support de plastique appropri e On transf re une quantit suffisante d acide dans des contenants de plastiques de type Nalgene bien ferm s et identifi s Les solutions sont suffisamment concentr es en acide qu elles n ont pas besoin d tre conserv es au frigo On ne laisse pas les digestions dans les ballons jaug s on dispose de l acide en surplus et on les lave pour usage ult rieur e L chantillon est maintenant pr t tre soumis une analyse par spectroscopie d absorption atomique ou si les concentrations sont plus basses par spectrom trie d mission atomique par plasma ICP ou une autre m thode de d tection appropri e e Pour une analyse par ICP pipeter 10 mL de l chantillon dans une fiole 50 mL et si l chantillon est trop concentr
5. Protocoles et proc dures 20 octobre 2005 Laboratoire de chimie environnementale S bastien Sauv Table des Mati res 1 Manipulations Generales sie c sce 6 nd cn Nc ne ce 2 1 1 Utilisation de pipettes automatiques 3 1 2 Utilisation des balances analytiques cccceeeeeeeeeeeeeeeeeeeaeaeeaeeeneeees 6 1 3 Utilisation de la centrifUgeUSE 2 ceeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeseeeeaeeeeeaeaeaeaees 8 1 4 Conditionnement de la verrerie pour analyses d l ments traces 9 1 5 Manipulations et limination des sols de provenance trang re import s pour la recherche in a ramener ns 10 1 6 Pr paration des solutions standards 12 2 Traitements d chantillons ss ee item intimes iienents 15 2 1 Digestion acide de sols pour m taux totaux r cup rables total recoverable sur plaque chauffante 16 2 2 Digestion acide eau r gale aqua regia d un sol au four micro ondes CMIIBSTONG Diane soprano ai 20 2 3 Extraction d une solution de sol pour d termination des m taux dissous 25 24 Broyage de sol en poudre 22282 27 2 5 Ajustement du taux d humidit d un sol 28 2 6 Mesures du pAd UMSGlE cos onscreen ceive er nn Entre rnete as 30 2 7 Fractionnement des extraits organiques en composants aliphatiques et AOMAIQUES 25 ss PR mn na SR pu te qe 31 3 Proc dures et quipements analytiques csseccccesecceeseeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeseeneeenenees 33 3 1 D
6. chantillons tr s organiques qui pourraient faire des bouillons et de l cume e Transf rer l chantillon dans un b cher de 100 mL Utiliser un papier de pes e si n cessaire e Ajouter 10 mL d acide nitrique concentr et ensuite couvrir avec un verre de montre e D poser les b chers pr par s sur la plaque chauffante et amener graduellement la temp rature juste sous le point d bullition assez pour voir quelques bulles fines se former dans l acide mais sans avoir de gros bouillons Maintenir juste sous le point d bullition pendant 1 heure e Lors de la digestion quelques bulles peuvent appara tre mais la forte bullition doit tre vit e Si a se produit tenter de tournoyer l g rement les b chers pour vous assurer qu il n y ait pas de r sidus qui collent sur les parois du b cher sans tre dans l acide e Note Pour l ajustement et le contr le de la temp rature de la plaque chauffante un b cher rempli d eau d couvert plac au centre de la plaque chauffante doit tre maintenu une temp rature d environ 85 C au maximum e Laisser refroidir les chantillons sur la plaque avant de les manipuler l acide bouillante est tr s corrosif e Un papier filtre est install sur un entonnoir et on fixe cet entonnoir sur le support entonnoirs avec une fiole jaug e de 50 ml ou 100 mL identifi e en dessous Le papier filtre se plie en 4 et apr s est mouill l g rement l aide du flacon laveur
7. sa place Mettez le module solide off afin de fermer le four Laissez circuler le gaz un moment avant de fermer la bonbonne D branchez le tube du haut de la fiole barbotage Fermez le programme Page 49 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 6 Utilisation de ICP AES IRIS Par Marie Claude Turmel Derni re r vision 2003 Source initiale n a 1 Utilisation L utilisation du ICP par un nouvel utilisateur doit se faire au minimum sous la supervision du responsable du laboratoire ou d un membre de l quipe qui a l exp rience de l appareil Comme il s agit d un appareil en grande demande il est essentiel de respecter certaines r gles de base afin d viter certains inconv nients 1 R server le temps de travail sur le calendrier pr vu cet effet 2 Compl ter le log book pour chaque p riode d utilisation 3 Avertir le responsable du laboratoire de tous bris ou d fectuosit du syst me ou encore des besoins en consommables argon azote tubes 4 Garder l espace de travail propre et libre pour les prochains utilisateurs Avant l utilisation du ICP AES la lecture de ces pages synth ses s av re essentielle Il s agit uniquement d un aide m moire qui permet de suivre les grandes tapes pour obtenir des r sultats de qualit sans probl mes Il est fortement recommand d approfondir les connaissances sur l appareil et le
8. vortex e Ballons jaug s de 100 mL e Incubateur pouvant contr ler la temp rature a 37 C e Le sol tester doit tre bien homog n is 3 R actifs e Carbonate de calcium CaCO3 e _2 3 5 Triph nyltetrazolium chloride TTC e M thanol e Triph nyl formazan TPF e Eau ultrapure UP Les r actifs sont sensibles a la lumi re le contact avec la lumi re doit tre limit 1 Pr parer une solution de 2 3 5 Triphenyl tetrazolium chloride TTC de 0 0896 M 30 g L 3 Dissoudre 3 g de TTC 334 81 g mol dans de l eau UP faire le volume jusqu 100 ml dans un ballon jaug 2 Pr parer une solution m re de Triphenyl formazan TPF de 8 32 x10 M 1 mg L Dissoudre 250 mg de TPF 300 36 g mol dans du m thanol faire le volume avec du m thanol jusqu 250 ml dans un ballon jaug 4 Mode op ratoire e Faire chauffer l incubateur avant de d buter les manipulations pour qu il ait le temps d atteindre la temp rature requise 37 C Pr paration des chantillons 1 Peser 1 g de sol humide Faire s cher a 105 C durant 24 heures Peser le sol sec 2 Incorporer au sol humide du carbonate de calcium CaCO3 selon un ratio 1 100 CaCO sol Pour un chantillon on m lange 0 06 g de CaCO dans 5 94 g quivalent sol sec de sol humide et on l ins re dans une prouvette Pr parer au moins trois r plications L effet de la lumi re sur les r actifs se fait sentir par l apparition
9. 1 But et application Pr paration des talons et des chantillons pour la d termination de la quantit totale de cuivre libre divalent dans une solution de sol 2 Mat riel e Electrode ion s lectif de cuivre e pH m tre ionom tre 3 R actifs On pr pare 5 solutions m res Solution de tampon IDA iminodiacetic acid disodium 0 05 M Solution de KHC23H404 potassium acid phthalate 0 125 M Solution de Cu NO3 2 3H20 5 0 10 M Solution de NaOH a 0 3 M Solution de KNO ou CaClz a 0 5 M 4 Calibration On proc de la calibration de lectrode de cuivre en pr levant 10 mL de chaque solution m re et diluant a 500 mL avec H2O MQ On divise en 10 solutions d environ 50 mL chacune et on acidifie avec diff rentes quantit s quelques gouttes de HNO3 5 et 10 Page 36 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv On laisse quilibrer ces solutions talons overnight On mesure le potentiel E mV de chaque solution ainsi que leur pH Le potentiel est consid r stable quand sa variation est inf rieure 0 3 mV en 3 mn Le temps requis est variable plusieurs heures pour les concentrations les plus faibles Pour une meilleure rapidit et stabilit toujours proc d par autre d croissant de pCu du moins concentr au plus concentr Les pCu de ces dix solutions sont alors d duits si on a utilis CaCl l aide de
10. 24h TPF est la concentration de TPF en pg mL Le volume de solution ajout e au sol est en mL La masse de sol sec est en g 6 R f rences e Alef K 1995 Dehydrogenase activity In Alef K et Nannipieri P eds Methods in applied soil microbiology and biochemistry Academic Press London pp 397 404 e Chander K Brookes PC 1991 Is the dehydrogenase assay invalid as a method to estimate microbial activity in copper contaminated soils Soil Biology and Biochemistry 23 909 915 e Lenhard G 1956 Die Dehydrogenaseaktivitat des Bodens als Mass f r die Mikroorganismentatigkeit im Boden Z Pflanzenernaehr Dueng Bodenkd 73 1 11 e Mattson AM Jensen CO Dutcher RA 1947 Triphenyltetrazolium chloride as a dye for vital tissues Science September 26 294 295 e Tabatabai MA 1994 Soil enzymes In Mickelson SH ed Methods of Soil Analysis Part 2 Microbiological and biochemical properties number 5 Soil Science Society of America Madison pp 775 833 Page 63 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 8 D termination de l activit de l ur ase dans les sols Par Carmen Donisa et S bastien Sauv Derni re r vision 29 juin 2004 Source initiale Alef K 1995 Urease activity In Alef K et Nannipieri P eds Methods in applied soil microbiology and biochemistry Academic Press London pp 316 320 1 Application L
11. C jusqu ce qu ils atteignent une masse constante environ 12 24 heures requises On obtient alors pour chaque chantillon de sol sec une masse finale masse de la coupelle chantillon de terre sec 4 Calculs Le d humidit du sol est alors d termin par la formule suivante masse de terre humide masse de terre s che d humidit x 100 masse de terre s che Page 34 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Exemple Masse de la coupelle 1 324 g Masse de la coupelle sol humide 6 556g Masse de la coupelle sol sec 5 432g 6 556 1 324 5 432 1 324 d humidit See ne x 100 5 432 1 324 5 232 4 108 d humidit x 100 27 36 4 108 Les typiques vont de 1 sols poudreux sec a 30 sols granuleux Page 35 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 2 D termination du cuivre libre par lectrode ion sp cifique Par S bastien Sauv et Julien Rachou Derni re r vision F vrier 2004 Source initiale Sauv S 1999 Chemical speciation solubility and bioavailability of lead copper and cadmium in contaminated soils Ph D Dissertation Department of Soil Crop and Atmospheric Sciences Cornell University Ithaca NY USA 174p
12. Une fen tre appara t indiquant Load boat now then clic OK Introduisez votre standard liquide dans cupule ou la cupule dans le porte chantillon puis cliquez sur ok Cette tape doit se faire le plus vite possible afin de ne pas laisser entrer trop d air e Une fois que vous avez cliqu sur ok le programme pr voit un temps d attente qui permet au signal de base de se stabiliser L ouverture de la porte a fait entrer de l air et par cons quent du CO qui fera augmenter le signal Il faut donc attendre que ce signal soit redescendu son niveau de base C est ici Page 46 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv que l ajustement fait au d but sur le temps maximum d attente de stabilisation du signal de base peut faire une diff rence Un temps court peut r duire le temps d analyse mais si le signal n est pas revenu a son point de base avant de commencer l analyse les r sultats seront fauss s En effet apr s avoir atteint le temps maximum une autre fen tre appara t vous demandant d introduire l chantillon Push boat in now M me si le signal de base n est pas revenu a son niveau de base cette fen tre appara tra Il est fortement conseill de v rifier visuellement sur le graphique que le signal est bien redescendu son niveau de base avant d introduire l chantillon On peut v rifier de plus pr s le signal en diminuant l chelle des minivolts Pour ce fai
13. dure d arr t de L ICP AES Tout comme l allumage deux proc dures existent Une premi re proc dure consiste teindre la torche la fin d une journ e de travail et une deuxi me consiste teindre le ICP AES Cette proc dure est n cessaire si l on sait que l appareil ne sera pas en fonction pour plusieurs jours une semaine et plus ou si l on doit changer le cylindre d azote Page 53 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 Lorsque les analyses sont compl t es laisser le syst me se rincer dans la station de rin age HNO3 2 pour au moins 15 minutes Cela permet d liminer tous les d p ts qui pourraient pr cipiter et causer des probl mes lors des prochaines analyses Si les matrices sont tr s charg es augmenter sans g ne ce temps de rin age 2 Retourner au symbole de la torche Ignit plasma et s lectionner Shutdown Apr s quelques secondes la torche s teindra 3 Retirer l aiguille de la station de rin age En d vissant la vis il est possible de remonter l aiguille et la fixer un niveau plus lev 4 Lib rer les tubes de leur tension Des tubes qui demeurent sous tension auront une dur e de vie beaucoup moins longue 5 Enlever tous les chantillons ou standards de l chantillonneur 6 Fermer les fen tres ou la trappe d a ration du climatiseur 7 Fermer le cylindre d argon 8 Une fois la torche teinte il faut sa
14. enzyme ur ase catalyse l hydrolyse de l ur e en CO et NH3 par un m canisme de r action bas sur la formation de carbamate comme interm diaire H2N CO NH2 H20 NH3 CO2 Cet enzyme est largement r pandu dans l environnement pr sent dans les cellules des microorganismes des plantes et des animaux L ur ase catalyse l hydrolyse de l hydroxyur e la dihydroxyur e et les semicarbazides L ur ase contient du nickel et son poids mol culaire varie de 151 000 to 480 000 Da Blakeley et Zerner 1984 L ur ase dans les sols est fortement retenu la mati re organique et aux min raux et les valeurs Km correspondantes variant entre 1 3 et 213 mM Lai et Tabatabai 1992 Principe La d termination de l activit de l ur ase est bas e sur la quantification par colorim trie de l ammoniaque produite lors de l incubation de sol en pr sence d une solution d ur e pendant deux heures 37 C La quantification repose sur la r action du salicylate de sodium avec NH3 en pr sence de dichloroisocyanurate de sodium qui forme un complexe vert sous conditions alcalines Le nitriprusside de sodium est utilis comme catalyseur pour augmenter la sensibilit de la m thode par un ordre de grandeur 2 Mat riel e Incubateur ajustable 37 C e Agitateur e Papier filtres Fisherbrand Q8 ou l quivalent e Spectrophotometre analysant 690 nm e Ballons jaug s 100 500 1000 mL Page 64 de 80 Proc dures
15. rieur e L chantillon est maintenant pr t tre soumis une analyse par spectroscopie d absorption atomique ou si les concentrations sont plus basses par spectrom trie d mission atomique par plasma ICP ou une autre m thode de d tection appropri e e Pour une analyse par ICP pipeter 10 mL de l chantillon dans une fiole 50 mL et si l chantillon est trop concentr compl ter au volume avec l eau et agiter la solution finale devrait tre au maximum 5 HNO pour l ICP AES ou bien 2 ou m me 0 2 pour l ICP MS e Pour chaque s rie de 12 chantillons inclure un blanc d acide donc une bombe trait e de fa on identique tous les chantillons mais dans lequel il ny a que l acide et un chantillon de contr le de qualit d une matrice similaire mais pour laquelle vous avez des valeurs de concentrations certifi es e Les digestions acides des sols doivent tre faites en duplicata ou en triplicata selon le niveau de variabilit attendue et la disponibilit de l chantillon Donc pour chaque sol on p se deux ou trois aliquots et on effectue la digestion acide sur chacun de ces aliquots e Pour viter les effets de matrice sur la stabilit des chantillons dilu s les analyses doivent tre faites le plus t t possible apr s la fin de la pr paration des chantillons Les solutions de digestion d acides concentr s devraient cependant se conserver assez longtemps Page 22 de 80 Proc dures exp
16. CO ou la consommation d oxyg ne Nannipieri et al 1990 La respiration des sols est une des premi res m thodes pour quantifier l activit microbienne des sols et elle demeure encore tr s utilis e La respiration basale est d finie comme tant la respiration d termin e sans l ajout de substrats organiques alors que la respiration induite est la respiration mesur e en pr sence de substrats ajout s comme le glucose les acides amin s les feuilles etc Br ve description Pour d terminer la biod gradabilit du glucose dans les sols on ajoute du glucose radioactif dans un microcosme contenant la matrice d int r t et on v rifie s il y a min ralisation de la part des micro organismes pr sents Samson et al 1991 Millette et al 1995 Otte et al 1994 La biod gradation ultime du glucose est appel e la min ralisation et implique que le glucose est compl tement transform en CO Un poids de 20 g de sol est d pos dans une bouteille s rologique de 120 ml La solution de glucose marqu au carbone 14 est utilis e pour obtenir dans les microcosmes une activit totale de 100 000 dpm d sint grations minute Chacun des microcosmes est muni d une trappe CO constitu e de 1 ml de KOH 1 N d pos dans un tube de verre de 5 ml l int rieur de la bouteille Le microcosme est scell et incub sans agitation a 22 C dans la matrice au moment de l chantillonnage Apr s 24 h le KOH contenant le C COz
17. Introduisez la cupule dans le porte chantillon avec le petit trou du bateau vers l aimant Refermez imm diatement la porte et attendez d autres instructions La fen tre Push boat in now appara t apr s environ une minute Cliquez sur ok puis introduisez l chantillon dans le four assurez vous que la ligne de base est bien redescendue son niveau le plus bas Attendez que l analyse se fasse Quand le r sultat appara t dans la fen tre Analysis results sortez la cupule du four et attendez un moment avant de la sortir de l appareil Une fois le premier essai fait pour le premier chantillon vous n avez pas cliquer sur Start de nouveau pour faire le deuxi me essai le programme s en charge Recommencez les tapes pr c dentes pour tous vos essais du m me chantillon e Si vous voulez faire un deuxi me chantillon vous n avez qu changer le nom dans Sample set up Sinon il y aura de la confusion Cliquez ensuite sur Start e Si vous voulez voir les d tails de vos r sultats allez dans Results sample S lectionnez un r sultat et double cliquez dessus afin d obtenir les d tails G Fermer l appareil e Une fois toutes vos analyses termin es sortez le tube de l appareil solide de l analyseur de carbone puis remettez le tube vert de l analyseur de carbone Page 48 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv
18. Perkin Elmer 703 va de 0 077 mg L 5 mg L pour 324 8 nm manuel Perkin Elmer January 1982 Pr paration du standard 5 mg L On verse quelques ml de la solution talon de cuivre dans un b cher 10 ml et on pr l ve la micropipette 500 ul de cet talon dans une fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 100 ml de solution HNO 20 Pr paration du standard 2 5 mg L On pr l ve 50 ml du standard 5 ppm la pipette de 50 ml que l on transf re dans une autre fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 50 ml de solution HNO 20 Il reste donc 50 ml de la solution standard 5 mg L Pr paration du standard 1 mg L On pr l ve 20 ml du standard 5 mg L la pipette de 20 ml et on transf re dans une troisi me fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au Page 12 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv trait de jauge avec environ 80 ml de solution HNO 20 Il reste alors 30 ml de la solution standard 5 mg L Pr paration du standard 0 5 mg L On pr l ve 20 ml du standard 2 5 mg L la pipette de 20 ml et on transf re dans une quatri me fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 80 ml de solution HNO3 20 Il reste alors 80 ml de la solution standard 2 5 mg L Pr paration du standard 0 25 mg L On pr l ve 50 ml du standard 0 5 mg L la pipette de 50 ml
19. compl ter au volume avec l eau et agiter la solution finale devrait tre 2 HNO3 ou m me 0 2 selon le cas e Pour chaque s rie de 8 chantillons inclure un blanc d acide donc un b cher trait de fa on identique tous les chantillons mais dans lequel il n y a que l acide et un chantillon de contr le de qualit d une matrice similaire mais pour laquelle vous avez des valeurs de concentrations certifi es e Les digestions acides des sols doivent tre faites en duplicata ou en triplicata selon le niveau de variabilit attendue et la disponibilit de l chantillon Donc pour chaque sol on p se deux ou trois aliquots et on effectue la digestion acide sur chacun de ces aliquots e Pour viter les effets de matrice sur la stabilit des chantillons dilu s les analyses doivent tre faites le plus t t possible apr s la fin de la pr paration des chantillons Les solutions de digestion d acides concentr s devraient cependant se conserver assez longtemps 6 Calculs Formule g n rale mg L M V mg kg M ou M m tal Page 18 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv mg L valeur lue par AAS ICP AES V volume flacon jaug mL m la masse du sol pes g 7 Exemple 1 0733 g de sol sec sont dig r s avec 10 mL de HNO conc et compl t 50 mL avec de l eau d ionis e et la concentration de cuivre est ensuite m
20. d une couleur jaune fonc e Page 61 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 Ajouter dans l prouvette 1ml de la solution de TTC 3 ainsi que 2 5ml d eau UP pour un test de toxicit de lixiviat remplacer le 2 5 ml d eau avec 10 ml du lixiviat tester M langer le tout avec une tige de verre et sceller l prouvette avec un bouchon Il est important d ajouter des blancs contenant uniquement de l eau UP ainsi qu un contr le ayant une concentration d exactement environ 50 ug ml de TPF 4 Pour un contr le n gatif on utilise un sol pr alablement contamin avec du Ag2SO 4 500 mg kg sol sec On pr pare une certaine quantit l avance Ensuite r p ter les m mes manipulations que pour le point 2 mais avec le sol contamin l argent 5 Pour le contr le positif on utilise le sol trait avec 10 mL d eau d ionis e au lieu du lixiviat et on fait suivre la m me proc dure utilis e pour les chantillons 6 Incuber les prouvettes 37 C pendant 24 heures la noirceur Extraction du TPF 7 Apr s l incubation ajouter 30ml de m thanol et agiter la main avec une tige de verre pendant une minute Il faut bien rincer la tige de verre entre les chantillons 8 Filtrer le tout avec des filtres Fisherbrand Q8 dans des volumes ad quats Il est important de d poser le sol de l prouvette dans le papier filtre Si le sol est encore r
21. dans des ballons jaug s de 100 mL et faire le volume a avec la solution de KCI 4 Mode op ratoire e Faire chauffer l incubateur avant de d buter les manipulations pour qu il ait le temps d atteindre la temp rature requise 37 C Pr paration des chantillons 1 Peser 1 g de sol humide Faire s cher a 105 C durant 24 heures Peser le sol sec Page 65 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 D poser 5 g de sol humide dans un erlenmeyer de 100 mL et ajouter 2 5 mL de solution d ur e Pour les tests de lixiviats ajouter 2 5 ml du lixiviat a tester Fermer les erlenmeyers et incuber 37 C pendant 2 heures sans agitation 3 Apr s l incubation ajouter 50 ml de solution KCI et brasser les erlenmeyers sur un agitateur rotatif pendant 30 min 4 Filtrer ensuite les suspensions sur papier filtre 5 Les filtrats sont ensuite analys s pour doser l ammonium R aliser des blancs selon la m me proc dure sans le sol et en utilisant 2 5 mL d eau d ionis e au lieu du lixiviat Trois r plicats sont minimalement recommand s 6 Pour un contr le n gatif on utilise un sol pr alablement contamin avec du Ag2SO 4 500 mg kg de sol sec On pr pare une certaine quantit l avance 7 Pour le contr le positif on utilise le sol trait avec 2 5 mL d eau d ionis e au lieu du lixiviat en ajoutant la solution d ur e la fin de l inc
22. de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Mettez l interrupteur Boat gas on en position haut afin de faire circuler le gaz L autre interrupteur doit tre en position bas V rifiez que le gaz circule bien en mettant le bout du tube du bas qui se trouve sous le plateau de l appareil solide dans un peu d eau On doit voir des bulles Une fois cela fait enlevez le tube vert lavant de l analyseur de carbone de sa position du c t gauche du U en verre la ou il y a le cuivre Remplacer ce tube par celui sortant du module solide le tube du bas sous le plateau o il y a l aimant qui n avait pas t utilis tout l heure Laissez circuler le gaz au moins une heure avant d allumer le module solide Cela permet de purger l appareil et d obtenir une ligne de base stable C Pr parer une courbe d talonnage Pendant que l appareil se purge vous pouvez pr parer votre courbe de calibration Allez dans Syst me Calibration Standards Une fen tre appara t Dans File cliquez sur New et entrez le nom de votre analyse Entrez ensuite carbone ou azote dans la fen tre qui appara t Sur la premi re ligne c est la concentration z ro Indiquez le nom du produit ex eau MQ Inscrivez la concentration de la solution ex 0 Dans M thode ID mettre Boat sampler ce moment le nombre de pug appara t dans la case ug C N ex 0 Cette quantit
23. du laboratoire vous donnera un coup de main Id alement des tests de performance doivent tre effectu s afin de s assurer que le signal est meilleur ou aussi bon que ce que vous aviez avant le nettoyage Si le signal est moins bon des petits ajustements seront peut tre n cessaire Page 57 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Pour effectuer un test de performance deux options se posent Ou bien on analyse un standard couramment utilis et on compare les lectures obtenues en intensit avant et apr s l entretien du syst me Ou encore on utilise la m thode TJA test qui mesure la sensibilit d une s rie d l ment Cette m thode est d velopp e selon un article de J M Mermet voir cartable pr s de l ordinateur 7 Nouvelle matrice Le d veloppement pour l analyse d un nouveau type de matrice requiert des tapes importantes JAMAIS des analyses l aveugle doivent tre effectu es que la matrice soit complexe ex BaCl2 0 01M pyrophosphate de Na 0 01 M oxalate 0 01M ou simple H20 Voici quelques points de rep res qui vous aideront planifier votre travail Type d chantillon eaux de surface extraits de sol chantillon filtr Sinon il faut s assurer de ne pas bloquer le n buliseur Certains n buliseurs plus grande ouverture existent pour viter un tel probl me Les standards doivent avoir la m me concentration que l extr
24. et on transf re dans une cinqui me fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 50 ml de solution HNO3 20 Il reste finalement 50 ml de la solution standard 0 5 mg L et 100 ml de la solution standard 0 25 mg L 5 Pr paration des solutions standards de Cd e La teneur des sols tudi s en Cd est entre 0 3 et 1 6 ppm mg kg de sol e Le domaine de lin arit de l analyse du Cd par Absorption Atomique sur l appareil Perkin Elmer 703 va de 0 028 mg L 2 mg L pour 228 8 nm manuel Perkin Elmer January 1982 Pr paration du standard 2 mg L On verse quelques ml de la solution talon de cadmium dans un b cher 10 ml et on pr l ve a la micropipette 200 ul de cet talon de cadmium que l on transf re dans une fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 100 ml de solution HNO3 20 Pr paration du standard 1 mg L On pr l ve 50 ml du standard 2 mg L la pipette de 50 ml que l on transf re dans une autre fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 50 ml de solution HNO 20 Il reste donc 50 ml de la solution standard 2 mg L Pr paration du standard 0 5 mg L On pr l ve 50 ml du standard 1 mg L la pipette de 50 ml et on transf re dans une troisi me fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 50 ml de solution HNO 20 Il reste alors 50 ml de la solution standard 1 mg L Pr par
25. exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv e Erlenmeyers 50 100 mL e Balance 3 d cimales e Papier a peser e Eau d ionis e e Le sol tester doit tre bien homog n is 3 R actifs e Solution d ur e 79 9 mM H2N CO NHz2 dissoudre 2 4 g ur e et faire le volume 500 mL avec de l eau d ionis e pr parer une solution fra che quotidiennement e Chlorure de potassium 2 0 M KCl dissoudre 74 6 g de KCI dans de l eau d ionis e ajouter 10 ml de HCI 1M et faire le volume 1000mL avec de l eau d ionis e e Hydroxyde de sodium 0 3 M NaOH dissoudre 12 0 g de NaOH dans de l eau d ionis e et faire le volume 1000mL avec de l eau d ionis e e Salicylate de sodium 1 06 M dissoudre17 0 g de salicylate de sodium et 120 mg de nitroprusside de sodium dans de l eau d ionis e et faire le volume a 100 mL e Salicylate de sodium NaOH WMelanger des volumes gaux de NaOH de Na salicylate solutions et d eau d ionis e 74 74 74 pr parer une solution fra che quotidiennement e Dichloroisocyanure de sodium 0 1 dissoudre 0 1 g de dichloroisocyanure de sodium dans 100 mL d eau d ionis e pr parer la solution juste avant de l utiliser Standard d ammonium e Solution Dissoudre 3 82 g de NH Cl dans de l eau d ionis e et faire le volume 1000 mL 1000 ug NH4 N mL e Solution Il Pipeter 0 0 1 0 1 5 2 0 2 5 de la solution
26. ici quelques points de rep res ou aide m moire Param tres de base couramment utilis s mais qui peuvent varier selon le type d analyse Rin age de 60 secondes entre chaque chantillon Trois lectures par chantillon ce qui n cessite environ 10 ml ou moins de solution e Vitesse de la pompe a 130 rpm e Flush time ou temps de pr exposition 60 secondes Exposition basse longueur d onde de 30 secondes LWL e Exposition haute longueur d onde de 15 secondes HWL Il faut s lectionner les l ments analyser tableau p riodique les raies d int r t en respectant les interf rences analytiques connues du logiciel ou de l analyste Il est possible d ajouter des raies qui ne figurent pas dans les choix voir cartables Cr er des tables de standards avec les l ments analys s et les concentrations Attention s assurer que les unit s utilis es pour les standards correspondent aux unit s s lectionn es par la m thode Dans le menu Setup Automated output il faut y choisir le format de fichier dans lequel les donn es seront export es Voici un exemple d informations qu on y retrouve et pour lesquelles il faut faire des choix Store Print Virtual Export Unk Yes yes no yes QC no no no no Blk no no no no STD yes yes no yes Reco no no no no no Page 55 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Une fois que les analyses vont bon train i
27. la hotte les deux b chers identifi es EAU DE RIN AGE et EAU REJETEE Remplir le premier avec de l eau distill e utiliser l vier r serv pour la radioactivit Retirer les microcosmes du lieu d entreposage et installer les microcosmes sur un chariot recouvert de papier absorbant pr s de la hotte de travail Num roter tous les bouchons avec le num ro de microcosme vos initiales le num ro d chantillonnage et la date Page 78 de 80 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv 8 Placer les vials scintillation dans le support noir en commen ant par le c t oppos au point rouge sur le support 9 Amener le support contenant les vials de m me que les bouchons dans la hotte 10 Remplir la seringue en plastique de 30 cc avec la solution de KOH 1N et la d poser dans la hotte apr s avoir retir l aiguille 11 Effectuer un blanc en d posant 10 ml du cocktail scintillation l aide du distributeur dans le premier vial de 20 ml et en y ajoutant 2 ml de KOH 1N a l aide de la seringue en plastique 12 Effectuer l chantillonnage du premier microcosme pr lever la solution de KOH en introduisant une aiguille en acier inoxydable de 6 connect e une seringue de 5 ml dans le tube se trouvant l int rieur du microcosme 13 Vider la trappe l aide de la seringue 14 Retirer la seringue en laissant l aiguille dans le microcosme 15 Mettre le
28. le travail effectuer Si la bouteille n est pas ouverte l ouvrir et v rifier les diff rentes pressions sur la bouteille sur le manom tre la sortie de la bouteille 60 psi et sur l appareil XXXX psi En moyenne une bouteille a une dur e de vie de 8 heures NOTE viter que la torche ne s teigne par manque d argon Pour ce qui est de l argon liquide la bouteille durera de 10 12 jours pour une utilisation quotidienne continue L achat d argon liquide n est recommand que pour des p riodes intenses d analyse tant donn les fuites d argon lorsque le syst me est teint 3 V rifier le niveau de liquide dans le contenant de rejet Il ne faut pas oublier que celui ci contient des acides dilu s qui peuvent endommager le plancher et les objets environnants Si le niveau est lev vider le contenu dans l vier l Universit est dot d un bon bassin de dilution pour ce genre de rejet 4 Entrer dans le dossier TJA et ouvrir la fili re Diagnostic afin de v rifier les temp ratures du CID 45 et du FPA 30 Si le CID n a pas une temp rature de 45 v rifier le niveau d azote et la purge de celui ci 5 Effectuer un reset du CID toujours dans le logiciel Thermo Spec HARD RESET faire en d but de journ e et ne jamais faire cette manoeuvre lorsque la torche est allum e Attendre le message qui indique que le reset a t compl t avec succ s avant de poursuivre SOFT RESET faire en d b
29. les sols comme plusieurs processus microbiens mais possiblement encore plus Pour l application cotoxicologique de ce test voir Sauv et al 1999 ainsi que Smolders et al 2003 2 Mat riel e Incubateur 28 C e Erlenmeyers de 125 mL e Tubes de centrifugation e Seringues a filtration Page 68 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv e Filtres 0 45uM en cellulose e Spectrophotometre UV VIS 520nM 3 R actifs et solutions 40 mM de NH sous forme de sulfate d ammonium NH4 2S04 30 mM azoture de sodium NaNs3 2 mM de NH sous forme de NH4 2SO4 2 mM de NH sous forme de NH4 SO et 3 mM de NaN Solution m re 1000 ppm NO N de nitrite de sodium NaNO Solution interm diaire 10 ppm NO N de nitrite de sodium NaNO Courbe de calibration avec 0 0 1 0 2 0 5 et 1 0 ppm NO N R actif colorant 10g L Sulfanilamide R actif colorant 1g L N 1 Naphtyl ethylenediamide dihydrochloride Acide phosphorique a 85 4 Manipulations Information pr liminaire Les chantillons doivent tre effectu s en quadruple La s quence des chantillons doit inclure un contr le un contr le et les chantillons d sir s Le contr le est un chantillon de sol non contamin qui suit le m me traitement que les autres chantillons Le contr le utilise l azoture d ammonium un biocide tape pr liminaire D contaminer to
30. mois au r frig rateur dans un contenant en verre ambr Calibration Prendre 1 2 5 et 10 mL de la solution interm diaire de NaNO et diluer avec de l eau d ionis e dans des ballons jaug s de 100 mL Mettre 1 mL de chacune des solutions dans des tubes en verre ajouter 4 mL d eau d ionis e et 0 2mL du r actif colorant Vous avez maintenant une dilution d un facteur 5 Effectuer un blanc avec 5 mL d eau et 0 2 mL du r actif colorant Refaire les m langes avec le r actif colorant 2 fois pour obtenir chaque point de calibration en triple Attendre 15 minutes avant de prendre les lectures d absorbance chantillons Selon la quantit de NO7 pr sente dans les chantillons les dilutions seront diff rentes Par exemple pour le sol valbo 2 4 mL de chacun des filtrats ont t m lang s avec 1 mL d eau et 0 2 mL du r actif colorant Ensuite mesurer l absorbance d un standard avant de d buter la mesure des chantillons puis mesurer l absorbance du m me standard tous les 8 chantillons et la fin de l analyse 5 Calculs Faire une courbe de calibration de l absorbance en fonction des concentrations standards de NO7 d terminer l quation de la droite et a partir des lectures d absorbances des inconnus trouver la concentration de NO2 Attention aux facteurs de dilution 6 Exemple Courbe de calibration NaNO NaNO NaNO N NO7 g L mol L mg L mg L Solution m re de NaNO 5 352 7 757E 02 1086 356
31. re tentative choue on peut changer uniquement pour l allumage la puissance d allumage 1350 ou 1550 W et le auxiliary flow 1 au lieu de 0 5 Une fois l allumage compl t il faut revenir aux conditions initiales voir ci haut en utilisant l option change settings 9 Ajuster la tension appliqu e sur les tubes de la pompe Il est important de bien ajuster cette tension afin d avoir une bonne n bulisation et une meilleure sensibilit des lectures possibles Arr ter la pompe en utilisant l option change settings Enlever la tension sur les tubes Relever l aiguille de la station de rin age afin de laisser une bulle d air monter dans le capillaire Remettre la tension sur le tube de sorte que la bulle soit immobilis e et ajouter deux crans cette tension Ajuster tous les tubes cette m me tension 10 Laisser au minimum le syst me se r chauffer 30 minutes avant d y effectuer une optimisation S assurer que la temp rature de 90 C est respect e chiffre vert pr s de la chambre de n bulisation NOTE Il est important que cette temp rature y demeure le plus constant possible et le plus pr s possible de 90 C Une variation de quelques dixi mes de degr s influencera directement les lectures Durant la p riode hivernale il est possible d ouvrir une fen tre ou la fen tre d a ration du climatiseur Pour l t l utilisation d un climatiseur peut r duire la surchauffe de la pi ce et de l appareil 3 Proc
32. refroidie a temp rature ambiante l acide l int rieur est toujours chaud et sous pression il faut d visser le segment tr s lentement et en gardant le c t le plus large tourn vers soi en cas de projections d acide e Un papier filtre est install sur un entonnoir et on fixe cet entonnoir sur le support entonnoirs avec une fiole jaug e de 50 ml ou 100 mL identifi e en dessous Le papier filtre se plie en 4 et il est ensuite mouill l g rement l aide du flacon laveur d eau DI Le contenu du b cher est ensuite filtr par gravit dans la fiole jaug e de 50 ml ou 100 mL e On veille bien recueillir tout l acide du b cher et sur le verre de montre l aide du flacon laveur Une fois l acide filtr et compl tement refroidit on rince le papier filtre avec le flacon laveur et on compl te le volume de la fiole jaug e au trait N oubliez pas que la densit et le volume changent avec la temp rature e Sila solution est turbide il peut s av rer n cessaire de filtrer la solution avec des membranes 0 45 um plac e sur un support de plastique appropri e On transf re une quantit suffisante d acide dans des contenants de plastiques de type Nalgene bien ferm s et identifi s Les solutions sont suffisamment concentr es en acide qu elles n ont pas besoin d tre conserv es au frigo On ne laisse pas les digestions dans les ballons jaug s on dispose de l acide en surplus et on les lave pour usage ult
33. repr sente le nombre de carbone total escompt dans le volume de solution standards ajout l appareil fait toujours les calculs partir d un volume de 40uL Pour ajouter une ligne a votre courbe de calibration vous n avez qu appuyer sur la fl che par en bas sur le clavier Entrez encore le nom ex standard 25ug Entrez la concentration de la solution exemple 600ppm M thode ID mettez toujours Boat sampler ce moment le nombre de microgramme total de carbone du deuxi me talon appara t Cette quantit tient toujours compte du fait qu une quantit de 40uL est ajout e cette valeur est inscrite dans le programme on ne peut la changer Si vous ne voulez pas pr parer de solution standards vous pouvez indiquer une fausse concentration de mani re avoir le masse de carbone d sir e ex si vous voulez 25ug de carbone vous n avez qu indiquer une concentration de 625ppm x 40uL 25ug de carbone alors qu en v rit vous ajouterez 25uL de la solution de 1000ppm NOUBLIEZ PAS QUE L APPAREIL MESURE DES QUANTIT ES TOTALES ET NON DES CONCENTRATIONS Une fois les donn es de votre courbe de calibration entr es cliquez sur Ok Imm diatement Syst me Calibration Set active appara t Cliquez sur set active et TOC curve m me si ce n est pas votre type de courbe pour une raison inconnue il semble que ce soit la seule fa on d enregistrer la courbe Une fen tre appara t Le mode ex TC mode Activ
34. termination de la teneur en eau d un chantillon solide 34 3 2 D termination du cuivre libre par lectrode ion sp cifique 36 3 3 D termination des Cu et Cd totaux dans les chantillons de sols contamin s via l absorption atomique AAS 38 3 4 Pr paration de gels diffusifs et gels de r sine DGT 40 3 5 Utilisation de l appareil TOC pour les chantillons solides Carbone total d ns AE CEST SE ERP Re 43 3 6 Utilisation de ICP AES IRIS ee teen interet 50 3 7 D termination de l activit de la d shydrog nase dans les sols 60 3 8 D termination de l activit de l ur ase dans les sols 64 3 9 Mesure du potentiel de nitrification dans les sols 68 3 10 La respiration induite sente M sine tn ne an fe Gestes Er 74 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 Manipulations G n rales Page 2 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 1 Utilisation de pipettes automatiques Par Carmen Donisa et S bastien Sauv Derni re r vision 9 f vrier 2004 Source initiale n a 1 But et application Utiliser les pipettes automatiques avec pr cision et sans les endommager Permet de mesurer et d livrer des volumes de 10 uL 10 mL Ne pas utilise
35. une brosse l eau chaude et au savon On rince abondamment l eau distill e On utilise ensuite la m me m thode que pour la digestion m mes acides m mes volumes m mes temp ratures et m mes temps Mais sans chantillons il faut utiliser la puissance du four au maximum On rince ensuite au moins fois fois avec de l eau d ionis e Page 24 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 3 Extraction d une solution de sol pour d termination des m taux dissous Par S bastien Sauv Derni re r vision 28 avril 2003 Source initiale Sauv S 2002 Speciation of metals in soils IN Bioavailability of Metals in Terrestrial Ecosystems Importance of Partitioning for Bioavailability to Invertebrates Microbes and Plants H E Allen ED Society for Environmental Toxicology and Chemistry Pensacola FL USA pp 7 58 1 But Obtenir une solution repr sentative d un pseudo quilibre entre la phase solide et la phase liquide d un chantillon de sol 2 Mat riel e Tubes de centrifugeuses de 50 ml capacit maximale 40 ml e Support de tubes de centrifugeuse e Centrifugeuse mod le e Support de filtre membrane de 2 5 cm e Membrane cellulosique de 0 45 um e Seringues e Agitateur rotateur 3 Manipulations Sachant connaissant le humidit on prend l quivalent de 10 g de sol sec pour environ 20 mL de KNO 0 01 M mis dans un
36. 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 6 Mesures du pH d un sol Par S bastien Sauv Derni re r vision 28 avril 2003 Source initiale Hendershot et al 2 1 But Page 30 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 7 Fractionnement des extraits organiques en composants aliphatiques et aromatiques Par Pedro Segura et Mireille Gaudreault Derni re r vision 8 avril 2004 Source initiale Rhodes The Total Petroleum Hydrocarbon Criteria Working Group TPHCWG Analytical Method Characterization of C6 to C35 Petroleum Hydrocarbons in Environmental Samples dans Risk Based Methodologies for Evaluating Petroleum Hydrocarbon Impacts at Oil and Natural Gas E amp P Sites s l s d http api ep api org filelibrary tphcwg pdf 8 Avril 2004 379K 1 But S parer les hydrocarbures aliphatiques des aromatiques dans un extrait organique 2 Mat riel e Micro colonne de 1cm de diam tre avec fritt et robinet en t flon e Gel de silice 200 425 Mesh e NaSO pr alablement laiss dans tuve e Ballons jaug de 10mL 3 Manipulations 1 Peser environ 2g de gel de silice et le m langer avec 10ml d ac tone dichlorom thane 1 1 AC DCM Transvider le tout dans la micro colonne Laisser le robinet ouvert et pousser avec de l air Rendre la si
37. 89 0 866 0 714 0 708 0 620 0 0145 0 115 0 00189 0 0107 0 689 x X X X 0 689 Correction dilution NO 1 mg L 0 216 0 179 0 177 0 155 0 004 0 029 0 000 0 003 lt x X XxX XK NO7 mol L 1 50E 05 4 70E 06 3 88E 06 3 85E 06 3 37E 06 7 88E 08 6 27E 07 1 03E 08 5 82E 08 1 50E 05 x X XxX x 1 50E 05 NO NO NO mol Kg umol Kg pmol Kg d 8 96E 06 7 47E 06 7 38E 06 6 42E 06 1 54E 07 1 21E 06 1 97E 08 1 12E 07 x X K XxX OO OO M CO x XxX XxX XxX XxX X 54 45 44 39 45 6 1 ANLON X KK x x x noter que la correction pour la dilution est effectu e en fonction de la courbe de calibration pour laquelle les standards ont une absorbance dilu e 5x 7 R f rences Sauv S Dumestre McBride M Gillett J Berthelin J and Hendershot W 1999 Nitrification potential in field collected soils contaminated with Pb and Cu Applied Soil Ecology 12 29 39 APHA AWWA WEF 4500 NO2 Nitrogen Nitrite dans Standard Methods For The Examination of Water and Wastewater 20th ed APHA Washington DC 1998 4 112 a 4 114 Smolders E McGrath SP Lombi E Karman CK Bernhard R Cools D Van den Brande K Van Os B Walrave N 2003 Comparison of zinc toxicity for soil microbial processes between laboratory contaminated and polluted field soils Environ Toxicol Chem 22 2592 2598 Prosser JI 1986 Nitrification The Society for Gene
38. 9 Solution interm diaire de NaNO 0 0535 7 76E 04 10 9 35 7 Calibration avec 0 1 2 5 et 10 ml de la solution interm diaire Page 70 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv NO2 NO7 PACE Absorbance Standard mg L umol L Dilution 520 nm 0 Blanc 0 1 0 357 7 76 5X 0 041 0 047 0 040 moyenne 0 043 2 0 714 15 5 5X 0 098 0 094 0 107 moyenne 0 100 3 1 78 38 8 5X 0 264 0 282 0 288 moyenne 0 278 4 3 57 77 6 5X 0 556 0 556 0 544 moyenne 0 552 0 600 0 500 4 y 0 1586x 0 0113 8 0 4007 R 0 9996 0 300 O amp 0 200 lt 0 100 0 000 i 0 00 1 00 2 00 3 00 4 00 Concentration NO mg L Page 71 de 80 Mesure des chantillons chantillon STD 2 1 2 3 4 Moyenne Ecart type 5 6 7 8 Moyenne Ecart type STD 2 9 10 11 12 Moyenne Ecart type STD 2 Description Contr le avec NH4 Contr le avec NH4 Contr le avec NH4 Contr le avec NH4 Contr le avec NH4 NaN3 Contr le avec NH4 NaN3 Contr le avec NH4 NaN3 Contr le avec NH4 NaN3 Echantillon x Echantillon x Echantillon x Echantillon x Dilution 5x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 5x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 1 25 x 5x Abs 520 nm 0 098 0 126 0 102 0 101 0 087 0 009 0 007 0 011 0 013 0 098 X X X X 0 098 NO mg L 0 6
39. Source initiale n a 1 But D terminer la quantit de carbone totale dans un sol par combustion Les chantillons sont mis dans un four haute temp rature le carbone organique et inorganique est transform en CO ce dernier est ensuite d tect par un d tecteur infra rouge 2 Mat riel e Analyseur de carbone Tekmar Dohrmann Apollo 9000 ainsi que le module chantillon solide Rosemount Model 183 Dohrmann TOC Boat Sampler e Balance analytique e Seringue de 100uL e Solution standard de carbone 1000ppm e Acide phosphorique 3 Manipulations Mass d chantillon 2 100mg Les sols doivent absolument tre broy s Masse en carbone 0 160ug A Ouvrir le programme e Ouvrez d abord le programme TOC talk Le nom d utilisateur est Administrator la premi re lettre doit tre en majuscule Le mot de passe est folio1 tout en minuscule e Dans Syst me cliquez sur Instrument Dans la fen tre qui appara t dans la case Systeme mettez l appareil en mode Ready Dans la case Pr f rence mettez Without autosampler Sample Introduction Le temps maximum d int gration est le temps maximum que le programme peut attendre Page 43 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv avant que le signal retourne la ligne de base apr s un pic Si ce temps est atteint le programme fera l int gration automatiquement m me si le signal n
40. a paroi interne du tube r cepteur Presser doucement le bouton poussoir jusqu la premi re but e positive C Attendre 1 seconde Presser compl tement le bouton poussoir affin d expulser la derni re fraction de liquide D Tout en maintenant le bouton poussoir compl tement press retirer la pipette tout en glissant le c ne le long de la paroi du tube r cepteur Rel cher compl tement le bouton poussoir E Pour les solutions mod r ment denses et visqueuses il est possible d effectuer une compensation en augmentant la valeur du volume par rapport la valeur d sir e en se calibrant l aide d une balance analytique Pour les solutions moins denses et visqueuses que l eau il est possible d effectuer une compensation en diminuant la valeur du volume par rapport la valeur d sir e Lors de la distribution de liquides denses ou visqueux avant d expulser la derni re fraction de liquide attendre une seconde suppl mentaire la premi re but e positive Page 4 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Page 5 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 2 Utilisation des balances analytiques Par Carmen Donisa Derni re r vision 24 avril 2003 Source initiale n a 1 Mat riel e Balance d analyse lectronique Sartorius A 200 S 2 Pr paration Avant de comm
41. actant utilis pour les chantillons Si ces derniers sont dilu s il faudra pr voir diluer la matrice des standards Utilisation de contr le externe dans la mesure du possible Cela permet de valider la calibration et de voir si l ensemble des l ments analys s ne pr sente d interf rence analytique ou chimique Utilisation de contr le interne dans le cas o les contr les externes n existent pas Il s agit d ajouter aux standards et aux chantillons en concentration uniforme un l ment quasi inexistant des chantillons et de voir si l intensit de celui ci demeure constante entre les standards conditions pures et matrice simple et les chantillons matrice complexe Utilisation d chantillons enrichis Cette tape permet d valuer si les l ments mesur s ne sont pas interf r s par la matrice Il s agit d ajouter un chantillon une concentration quivalente 20 de la concentration connue Par la suite un calcul de recouvrement signalera si la matrice interf re avec l l ment mesur Page 58 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Mesure de la limite de d tection Les LD obtenues pour des eaux de surface acidifi es seront beaucoup plus basses que pour des extraits de sol effectu s avec un sel Ainsi pour chaque type de matrice un calcul de LD doit tre effectu Il existe plusieurs fa ons d obtenir cette mesure Normalement on peu
42. ation du standard 0 1 mg L On pr l ve 20 ml du standard 0 5 mg L la pipette de 20 ml et on transf re dans une quatri me fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 80 ml de solution HNO3 20 Il reste alors 80 ml de la solution standard 0 5 mg L Pr paration du standard 0 05 mg L On pr l ve 50 ml de la solution standard 0 1 mg L la pipette de 50 ml et on transf re dans une cinqui me fiole jaug e 100 ml identifi e On compl te au trait de jauge avec environ 50 ml de solution HNO3 20 II reste finalement 50 ml de la solution standard 0 1 mg L et 100 ml de la solution standard 0 05 mg L Page 13 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Les solutions sont ensuite transf r es dans des bouteilles de plastique de type Nalgene 6 Exemple de calcul pr paration du standard 5 mg L de Cu De la solution talon stock de 1000 mg L on veut obtenir une solution 5 mg L de 100 mL Le facteur de dilution de sera de 1000 mg L 5 mg L 200 De C1 V1 C2 V2 ona 1000 mg L V1 5 mg L 100 mL ou C1 1000 mg L concentration de I talon de cuivre V1 le volume d talon Cu pr lever pour obtenir 100 mL de solution 5 mg L C2 5 mg L la concentration de la solution standard que l on vise a obtenir V2 100 mL le volume de la solution standard que l on vise a obtenir On d termine V1 C2 5 mg L V1 V2
43. au solvant propre Effectuer des contr les environ un chaque 6 microcosmes en injectant 10 ul de la solution radioactive de travail dans un vial a scintillation contenant 10 ml de cocktail Sceller le microcosme avec la valve mininert contenant un septum produit radioactif volatil ou bien avec un septum recouvert de t flon et son anneau m tallique a l aide du resserreur de bouchon et passer au microcosme suivant Entreposer les microcosmes 22 C la noirceur si n cessaire cabinet gris d entreposage des microcosmes radioactifs Placer tous les vials contenant les contr les dans le support vials et ajouter une languette identifi e PROTOCOLE 1 sur le c t du support marqu d un point rouge Faire compter dans le compteur scintillation liquide en pla ant le support point rouge vers la droite chantillonnage des microcosmes L chantillonnage des microcosmes s effectue de fa on p riodique pouvant aller d un chantillonnage aux heures un chantillonnage hebdomadaire d pendamment du polluant en question de m me que de la matrice 1 Pr parer une solution de KOH 1N 56 11 g l d eau distill e 2 Porter en tout temps sarrau et deux paires de gants lunettes 3 4 Installer un papier absorbant dans la hotte utilis e pour les manipulations R server la hotte radioactive pour la p riode de travail radioactives hotte A et fixer le papier l aide de ruban gomm Installer dans
44. contenu de la seringue dans un vial scintillation Moucher la derni re goutte sur le c t du vial 16 Rincer la trappe avec 1 ml de KOH frais en utilisant toujours l aiguille ins r e et additionner ce volume au m me vial 17 Ajouter 1 ml de KOH frais dans la trappe et enlever la seringue ce KOH sera pr lev au prochain chantillonnage 18 Laisser quilibrer les pressions int rieures et ext rieures avec l aiguille puis reconnecter la seringue l aiguille et d poser celles ci dans le b cher contenant l eau de rin age 19 Ajouter 10 ml de cocktail scintillation au vial scintillation et mettre le bouchon 20 Agiter bien le vial a scintillation contenant le CJCO 21 Recommencer les tapes 12 a 21 pour tous les autres microcosmes en prenant soin de rincer la seringue de 5 ml l eau distill e trois fois entre chaque microcosme et a la toute fin 22 Placer tous les vials dans le support a vials et ajouter une languette identifi e PROTOCOLE 1 sur le c t du support marqu d un point rouge 23 Faire compter dans le compteur scintillation liquide en pla ant le support point rouge vers la droite 24 Bien indiquer les chantillons sur la feuille d inventaire du compteur en notant aussi le num ro de fichier 25 Entreposer nouveau les microcosmes la temp rature voulue la noirceur si n cessaire cabinet gris d entreposage des microcosmes radioactifs jusqu au prochain chantillonnage
45. d eau est transf r dans l erlenmeyer 500 mL Dans le cylindre gradu de 75 mL on mesure environ 75 mL de HNO concentr et on transf re lentement cet acide dans lerlenmeyer On agite l erlenmeyer pour homog n iser le m lange Attention il y aura production d un exotherme lors de l addition de l acide Toujours ajouter le volume d acide dans l eau ET NON LE VOLUME D EAU DANS L ACIDE Page 39 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 4 Pr paration de gels diffusifs et gels de r sine DGT Par Julien Rachou et Luc Lavoie Derni re r vision 2003 Source initiale Communication personnelle Richard Goulet Laboratoire d Andr Tessier INRS ETE Qu bec 1 But et application Pr paration d un gel de Fye 15 T 5 C et gel avec r sine 2 Mat riel e Montage plaques en plexiglass e Micropipettes 100uL et 1 mL e 2 Entonnoirs col large e Spatule en plastique st rile low metal e Verre de montre e 2 cylindres gradu s 50 mL et 100 mL e 2 fioles jaug es 100 mL e 2 b chers 10 mL et 100 mL e Erlenmeyer a vide 100 mL e Bac en plastique e Barreau aimant e Plaque agitatrice 3 R actifs e Persulfate d ammonium e Acrylamide e Bis acrylamide e TEMED e Eau d ionis e e R sine Chelex 100 Na form 100 200 mesh Page 40 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique en
46. d extraction acide de sols Une flamme ac tyl ne air atomise la matrice et les analytes ici les m taux ces m taux absorberont la radiation d une lampe a cathode creuse une longueur d onde caract ristique pour cet analyte L absorbance de la radiation permet via l tablissement d une courbe d talonnage de mesurer la quantit totale d analyte en solution en mol L et donc d en calculer la concentration dans les sols en mg kg de sol 2 Mat riel e Spectrophotome re d absorption atomique e 10 fioles jaug es de 100 ml e 4 pipettes 20 ml e 4 pipettes 50 ml e 1 pipette 1 ml e 2 b chers 10 ml e Flacon laveur d eau DI e Pipettes 200 ul et 500 ul avec embouts jetables e Cylindre gradu 500 mL e Cylindre gradu 100 mL e Erlenmeyer 500 mL 3 R actifs e Solution talon de cuivre 1000 ppm dans HNO 5 e Solution talon de cadmium 1000 ppm dans HNO 5 e Acide nitrique concentr de grade Trace M tal 75 mL pour chaque talon de m taux pr parer Page 38 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv On pr pare environ 5 solutions standards de chaque l ment doser par exemple Cu et Cd La verrerie est conditionn e l acide nitrique 10 voir m thode Pr paration de la solution HNO3 20 pr parer pour chaque talon de m tal Dans le cylindre gradu 500 mL on mesure environ 300 mL d eau d ionis e Ce volume
47. e on le transf re dans un bain d eau milliQ grand bac en plastique y met une pinc e de r sine Chelex 100 Na form 100 200 mesh L eau est renouvel e entre 5 10 fois avec au moins 15 minutes entre chaque changement de mani re abaisser le pH de 10 5 7 lci on y fait sortir le TEMED du gel par dialyse En pratique il peut tre difficile d abaisser le pH en bas de 8 Le gel obtenu sans r sine est pr t pour la DGT 8 Pr paration de 75 mL de gel avec r sine Chelex 100 Na form 100 200 mesh Les tapes sont pour la plupart les m mes que pour la pr paration du gel sans r sine Montage du moule On nettoie reconditionne le montage et installe les plaques de plexiglass parall lement entre elles s par es par le tube en caoutchouc et fix es solidement en bas et des c t s gauche et droit par les clips en plastique D gazage de la solution stock On verse dans un erlenmeyer vide 100 mL 45 mL de solution stock de monom res et 29 25 mL d eau d ionis e avec un cylindre gradu Cette solution est d gaz e sous vide via une trompe eau pendant 25 minutes afin d en enlever l oxyg ne Etape identique 8 2 Amorce de la polym risation ajout de la r sine et moulage On ajoute cette solution dans l erlenmeyer 0 400 mL de la solution d initiateur APS 10 via la micropipette 1 mL On verse quelques gouttes de TEMED tetram thyldiamino thyl sous la hotte et on en ajoute 150 uL via la micropipe
48. e 80 de 80
49. e AC DCM sur la colonne en 4 portions de 2mL Compl ter le volume du ballon avec l hexane jusqu au trait de jauge Cette portion est la fraction des aromatiques 6 Pour r utiliser la colonne il faut la nettoyer en utilisant 10mL AC DCM 10mL de DCM et 10 mL d hexanes La colonne pourra tre ainsi utilis e un maximum de quatre fois Apr s avoir fractionn quatre chantillons changer la colonne Page 32 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 Proc dures et quipements analytiques Page 33 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 1 D termination de la teneur en eau d un chantillon solide Par Luc Lavoie Derni re r vision 28 avril 2003 Source initiale n a 1 But D terminer le d humidit d un sol ou d une autre matrice solide 2 Mat riel e Spatule de plastique e Contenant d aluminium e Etuve 3 Manipulations A l aide d une spatule en plastique bien propre on pr l ve et p se exactement environ 5 0000 6 0000 grammes de terre dans une coupelle d aluminium identifi e et tar e Donc on note la masse de la coupelle d aluminium seule et la masse de la coupelle l chantillon de terre humide On r p te cette op ration pour chaque chantillon de sol que l on d sire analyser Ces chantillons de sols sont ensuite s ch s l tuve a 75
50. e calibration curve range 5 s lectionnez le nom de votre courbe Tous les autres range doivent tre d fault Cliquer sur ok Imm diatement apr s cliquez sur Syst me Calibration set active et choisissez le v ritable type de courbe que Page 45 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv vous voulez utiliser La m me fen tre que pr c demment appara t Le mode ex TC mode Active calibration curve A range 5 s lectionnez encore le nom de votre courbe Tous les autres ranges doivent tre d fault Cliquer sur ok e Cliquez ensuite sur Run Trois fen tres apparaissent Strip Chart Analysis results et Sample analysis Dans Sample analysis cliquez sur Sample setup Dans la fen tre qui appara t entrez le nom du standard ex eau MQ 25ug etc Sample type mettez le type de standard TOC standard TC standard etc que vous aviez d j choisi Une fen tre appara t Choose range Choisissez 5 puis ok Une autre fen tre appara t Select calibrator Choisissez la ligne qui correspond au standard que vous voulez faire ex pour le z ro cliquez sur la premi re ligne qui se met alors en bleu Cliquer sur Exit Vous revenez la fen tre Without autosampler analysis Number of reapeats indique le nombre d essais que vous d sirez faire pour cet talon Il est fortement conseill d
51. e faire au moins trois r plicats m thode ID s lectionnez Boat sampler Calibration curve le nom de votre courbe devrait tre inscrit Le mode est r gi par l appareil vous n avez rien y faire Cliquez finalement sur Save Use D Se pr parer faire la courbe de calibration e Apr s environ 45 minutes de purge vous pouvez mettre le module solide en marche Vous n avez qu pousser le bouton noir l avant de l appareil La temp rature du four est g n ralement r gl e a 800 C Lorsque la temp rature est stable un t moin lumineux vert a l avant de l appareil appara t e Lorsque le signal de base est constant en ayant pes sur Run le d tecteur se met imm diatement en marche et vous pouvez alors voir le signal dans la fen tre Strip Chart et que la lumi re verte est allum e introduisez le bateau dans le four en d pla ant l aimant rouge IL FAUT Y ALLER DOUCEMENT ET LENTEMENT LA TIGE EST TR S FRAGILE II est normal que l aimant n aille pas jusqu au bout Vous devriez normalement voir le signal dans la fen tre Strip chart augmenter Laissez le bateau dans le four jusqu ce que le signal revienne la ligne de base Cette tape vise liminer le carbone qu il pourrait y avoir sur le bateau Vous pouvez sortir le bateau du four et le r introduire quelques fois jusqu ce que le signal de base ne varie plus E Faire une courbe de calibration e Pesez sur Start
52. e r f rence 12 il ny a pas de num ro 1 veiller ne pas intervertir ces l ments entre eux 4 Manipulations Dans un flacon de Teflon TFM peser exactement environ 0 3000 g de sol sec broy voir m thode Faites attention d utiliser l ensemble de bombes de Teflon d di aux digestions acide et non l ensemble pour extraction avec solvants organiques l aide d une prouvette de verre gradu e ajouter lentement 9 0 mL d HNO concentr Trace metal grade puis 3 0 mL d HCI concentr Trace metal grade Placer un agitateur magn tique Milestone sp cial acide Refermer le flacon remonter l ensemble des pi ces dans le segment monobloc puis le serrer l aide de la cl dynamometrique Placer le tout dans le four micro ondes 5 Programmation du four NB La puissance utilis e d pend du nombre d chantillon au dela de 4 chantillons il est pr f rable de laisser la puissance du four micro ondes a 1000 W tape Temps Puissance Temp rature 1 5 min 1000 W 220 C 2 10 min 1000 W 220 C e L acide chaud est maintenant sous haute pression 6 Pr cautions e Pour des raisons de s curit il faut d abord refroidir chacun des segments jusqu ce qu on soit capable de les manipuler main nue Page 21 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv e Une fois la paroi ext rieure du cylindre
53. encer peser on doit s assurer de la PROPRET de la balance Pour a on doit enlever le plateau et tout les autres pi ces et en utilisant la brosse nettoyer la chambre de la balance Il est important de s assurer que la balance est parfait quilibre et que la bulle dans le coin droite soit l int rieur du cercle noir Pour mettre la balance en fonction on doit appuyer la touche ON OFF De plus vous pouvez effectuer la mise sous tension par la touche de tare T Avant d effectuer une pes e on doit tarer la balance si on utilise un r cipient ou si l affichage n indique pas 0 0000 g ou bien une autre unit de poids correspondante 3 Calibration de la balance Il est possible de faire une calibration interne et externe de la balance Calibration interne D charger la balance et tarer Lorsque 0 0000 g appara t l affichage appuyer sur la touche CAL A l affichage du poids appara t la lettre C A l affichage de CE tarez et appuyez a la nouveau sur la touche CAL Au bout de quelques secondes il apparait CC l affichage puis 0 0000 g Un bip sonore vous indique la fin de la proc dure de calibration Calibration externe Calibration possible seulement avec un poids de calibration pr cis Page 6 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Avec cette balance vous pouvez peser en grammes mais aussi dans d autres unit s de poids internationa
54. est chantillonn et d pos dans un vial pour le comptage de la radioactivit dans un compteur a scintillation La min ralisation du glucose Page 74 de 80 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv radiomarqu est ainsi mesur e par la production de f C CO gt qui a r agi avec la solution de KOH selon la r action chimique suivante CO aq 2 KOH lt gt KoCO3 H2O La radioactivit enregistr e repr sente donc le CO qui a t min ralis par les micro organismes Par ailleurs afin de tenir compte des pertes abiotiques des compos s radioactifs des t moins empoisonn s contenant 0 02 p p d azoture de sodium doivent tre pr par s 14C glucose Micro organismes 14 C CO H 0 Figure 1 Principe de min ralisation en microcosme Page 75 de 80 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv 2 Mat riel Appareils e Compteur a scintillation Wallac 1409 avec unit de disquette 3 5 et imprimante Epson LX300 Fisher Scientific e Cocktail a scintillation OptiPhase Hisafe 3 Fisher Scientific e Support pour vials a scintillation Fisher Scientific e Balance analytique pr cision de 0 002 g Verrerie e Bouteilles s rologiques 120 ml Fisher Scientific e Valves mininert avec septums pour les compos s volatils Supelco ou e Septums tanches avec anneaux m talliques Fisher Scien
55. est pas revenu la ligne de base Cela fausse in vitablement les donn es La valeur par d faut est de 4 min Il est conseill d augmenter un peu cette valeur Le temps maximum pour la stabilisation de la ligne de base est fix 60 sec par d faut Le reste ne n cessite pas d ajustement pour ce type d exp rience Cliquez sur OK B Pr parer l appareil e La fiole de barbotage en position centrale l avant du module chantillon solide doit tre remplie d eau millipore la moiti de la distance entre le fond de la fiole et le bouchon horizontal gris On doit aussi y ajouter deux ou trois gouttes d acide phosphorique H3PO jusqu pH 2 e Assurez vous que tout le syst me de tubulure est bien clos Sous le plateau de o glisse l aimant il y a deux tubes un en haut et un en bas V rifiez que le tube du haut entre bien dans le tube en verre droite Celui du bas sera ult rieurement reli l analyseur de carbone Le tube sortant du four gauche du module doit se rendre l orifice du haut de la fiole barbotage l avant de l appareil Un petit tube doit relier le trou restant de la fiole barbotage a lorifice du haut de la fiole condensation cette derni re se trouve a gauche sous l interrupteur Boat gas on Le tube sortant de cette fiole condensation doit entrer dans le module solide Il reste g n ralement un petit tube qui sort de l avant de l appareil Ce n est pas n cessaire qu il soi
56. esur e absorption atomique ou autre La concentration de la solution en mg L ppm doit tre corrig e pour le blanc digestion de l acide seul Par exemple une concentration en solution dans l chantillon de 0 3685 mg L et une concentration dans le blanc de 0 0021 mg L va donc donner 0 3664 mg L de cuivre dans l acide de la digestion de l chantillon Or on veut trouver la concentration en Cu dans le sol en mg kg de sol sec On trouve la quantit de cuivre dans la solution 50 0 mL est de 0 3664 50 0 ml est quivalent 0 3664 0 0500 ou encore 0 0183 mg de cuivre dans l chantillon 0 0183 mg de Cu 1 0733g de sol sec Comme on avait au d part 1 0733g de sol sec on a donc En assumant une digestion compl te on a alors une concentration de 0 0183 mg de Cu 1000 g 1 0733g de sol sec 1kg 17 05 mg Cu kg sol sec Page 19 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 2 Digestion acide eau r gale aqua regia d un sol au four a micro ondes Milestone Par S bastien Sauv Derni re r vision 31 Mai 2004 Source initiale Digestion Application Report 03 001 du Manuel Milestone 1 But et application Le but de cette exp rience est d effectuer une digestion acide d un sol ou une autre matrice haute temp rature et pression A pr f rer la plaque chauffante si on tient a analyser les l ments vo
57. is aspirer les solutions standard directement de la bouteille Vous pouvez contaminer toute la bouteille Page 3 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Vous devez mettre une petite quantit de solution dans un b cher et apr s utiliser la pipette Pour assurer l tanch it appuyer fermement le c ne sur embout en effectuant un mouvement de rotation Peser le bouton poussoir jusqu la premi re but e positive A En maintenant la pipette verticale plonger l extr mit du c ne dans l chantillon a pr lever Rel cher lentement et r guli rement le bouton poussoir pour aspirer le liquide dans le c ne B Attendre 1 seconde et retirer le c ne du liquide Essuyer ventuellement les gouttelettes de liquide qui pourraient adh rer sur la paroi ext rieure du c ne avec un papier non tiss par exemple un mouchoir de laboratoire Kimwipe Prendre soin de ne pas toucher l orifice du c ne Pour vous assurer que vous ne touchez pas les c nes il est mieux de les garder dans un sac de plastique de type Ziploc Il est important de faire un pr rin age de la pipette avec la solution mesurer lorsque les solutions ont une densit diff rente de celle de l eau telles que les solvants organiques et qui peuvent adh rer sur la paroi interne du c ne 4 Distribution des solutions Placer l extr mit du c ne de fa on former un angle de 10 40 contre l
58. l quation 1 pCu 0 587 pH 0 0799 pH 0 00263 pH 2 85 1 ou de l quation 2 si on a utilis KNOs pCu 4 8413 pH 2 00631 pH 0 47175 pH 0 050602 pH 0 00198 pH 0 22205 2 Connaissant alors les pCu des dix solutions talons et leurs potentiels E mV et on peut d terminer les param tres a et b de l quation de la droite pCu aE mV b 3 ou E les potentiels des solutions mesur es mV a la pente mV 7 b ordonn e l origine Les potentiels des solutions inconnues sont alors mesur s et les pCu sont d duits de l quation 3 Des triplicatas doivent tre effectu s Si possible toujours proc der par ordre d croissant de pCu Entre chaque mesure l lectrode doit tre abondamment rinc e et essuy l g rement avec des mouchoirs de laboratoire Kimwipes En fin de journ e l lectrode est polie avec un bout de feuille d oxyde d aluminium 3 pm pendant 30 s puis successivement tremp dans H2SO 0 025M et NaszEDTA 0 1 M pendant 5 mn Page 37 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 3 D termination des Cu et Cd totaux dans les chantillons de sols contamin s via l absorption atomique AAS Par Luc Lavoie Derni re r vision 24 avril 2003 Source initiale n a 1 But et application On vise mesurer les m taux totaux dans des solutions
59. l est possible d enlever la fonction d impression afin de r duire la quantit de papier utilis e La cr ation de fichier texte va permettre de r cup rer les donn es la fin des analyses Il faut changer le nom du fichier chaque jour d analyse Pour ce faire utiliser les initiales de l analyste ainsi que la date d analyse Il est important de travailler en mode append et non overwrite Le mode overwrite enregistre uniquement la derni re analyse effectu e alors que le mode append enregistre l ensemble des analyses de la journ e Exemple Filename MC030316 txt Dans le fichier nomm MC0300316 txt on y retrouvera uniquement les moyennes des r plica Il existe un fichier du m me nom mais pr c d d un 0 0MC030316 txt qui lui contient chacune des lectures Cela permet de v rifier s il n y a pas eu des variations entre les lectures Il faut aussi s lectionner certaines informations comme include rep et surtout include imagedata Cette derni re option permet de voir les r sultats graphiques des analyses int gration des pics Ne pas oublier de s lectionner la fonction autoprint std report Cela nous permet de v rifier si la standardisation s est bien effectu e avant de poursuivre les analyses de la journ e On retrouvera les pentes les lectures en concentration et le graphique de la calibration L ensemble des quations de r gression et les R s y retrouveront galement 5 Analyse en
60. latils eg Se Hg ou encore si on cherche a solubiliser une portion des silicates ou qu on a affaire une matrice ou un analyte r calcitrant eg Pt ou encore que les masses a analyser sont petites et que les blancs doivent tres excessivement propres 2 Mat riels et r actifs e HNO concentr Trace metal grade e HCI concentr Trace metal grade e Sola tudier e Ballons jaug s e Four a micro ondes Milestone e Rotor a 12 monoblocs pour digestion e Agitateur magn tique de Teflon e Bombe de digestion de Teflon e Flacon laveur d eau distill e e Entonnoirs filtration de plastique de 7 2 cm e Support a entonnoirs en bois e Filtres de papier Whatman No 41 ou Fisher 5 e Fioles jaug es 50 mL 100 mL ou 200 mL e Membranes 0 45 um e Support membranes Page 20 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 Pr cautions e Pour des raisons de s curit il est imp ratif de veiller n utiliser que du mat riel Milestone pour acide e Toutes les manipulations avant et apr s la digestion doivent tre effectu es sous la hotte e La sonde du thermom tre est tr s fragile et tr s dispendieuse de 1000 Il faut prendre beaucoup de pr cautions en la manipulant pour cela on ne l installe qu en dernier et on l enl ve en premier d s que la digestion est termin e e Chaque l ment de monobloc est num rot de 0 temp rature d
61. les Pour a vous devez utiliser le programme d exploitation de la balance voir le manuel d utilisation Page 7 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 3 Utilisation de la centrifugeuse Par S bastien Sauv Derni re r vision 24 avril 2003 Source initiale n a 1 But S parer une phase solide et une phase liquide 2 Mat riel e Tubes de centrifugeuses de 50 ml capacit maximale 40 ml e Centrifugeuse Sorvall RC 2B 3 Pr cautions Veuillez a toujours bien quilibrer le nombre de tubes et leurs poids dans la centrifugeuse pour viter les accidents et les bris d appareils Donc si vous avez un nombre d chantillons impair utilisez un tube identique rempli de suffisamment d eau pour quilibrer le poids de chaque cot 4 Manipulations Augmenter la vitesse graduellement jusqu a 11 500 rpm 10 000g Pour les extraits de sols une centrifugation de 15 min devrait suffire pour les sols ou les m diums tr s organiques une p riode plus longue pourrait s av rer n cessaire Page 8 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 4 Conditionnement de la verrerie pour analyses d l ments traces Par Luc Lavoie Derni re r vision 24 avril 2003 Source initiale n a 1 But Nettoyer la verrerie pour s assurer qu il n y ait pas de c
62. lice plus compacte en frappant l g rement la colonne petits coups r p t s Ajouter des portions de 5ml de DCM si n cessaire pour nettoyer les parois de la colonne qui pourraient avoir de la silice coll e Evacuer le solvant jusqu ce que son niveau atteigne la surface de la silice qui doit toujours tre humect e 2 Ajouter 0 5cm de NazSOz sur le dessus de la silice Rincer la colonne avec 10mL de DCM puis 10mL de hexanes Laisser couler le solvant jusqu la surface de la silice La colonne est pr te pour fractionner l chantillon 3 N vacuez pas les solvants trop vite Si non la colonne contiendra des impuret s 4 Ajouter 1mL de l extrait sur la colonne L introduire dans la silice en poussant avec de l air un flux constant de 1 goutte par second Recueillir le solvant qui sort de la colonne avec un ballon jaug de 10mL Ajouter 1mL d hexanes et Page 31 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv pousser avec de l air Recueillez Proc dez de la m me fa on en ajoutant des portions de 2mL jusqu un volume total de 7mL d hexanes Compl ter le volume du ballon avec l hexane jusqu au trait de jauge Cette portion est la fraction des aliphatiques 5 Changez de ballon Proc dez de la m me fa on qu en 3 3 mais en utilisant un m lange ac tone dichlorom thane 1 1 AC DCM comme luant Le volume de solvant utilis doit totaliser 8mL Appliquez l
63. logiciel qui le contr le en lisant les cartables fournis par la compagnie Ces informations ne sont malheureusement pas compl tes mais elles peuvent aider la compr hension du logiciel qui lui n est pas toujours simple d utilisation 2 Proc dure d allumage de l ICP AES Selon que l appareil est d j allum ou non des tapes importantes sont suivre pour viter certains probl mes Si le ICP est teint il faut suivre la proc dure coll e devant l appareil sans quoi des dommages permanents de la cam ra peuvent survenir Une fois cette proc dure compl t e suivre les tapes suivantes pour l allumage de la torche V rifier le temps de purge requis pour l azote certaines informations re ues indiquent qu il faut une purge d au moins 6 heures Page 50 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Dans le cas o l appareil est d j allum suivre les tapes suivantes 1 V rifier que le niveau d azote est suffisant pour travailler En temps normal une bouteille d azote a une dur e de vie d environ deux semaines L azote sert au refroidissement de certains l ments du ICP son contr le est donc crucial NOTE Pour les analyses d anions dans les basses longueurs d onde lt 220 nm une purge plus fort d bit est n cessaire Se r f rer la proc dure d analyse des anions pour plus de d tails 2 V rifier que le niveau d argon est suffisant pour
64. me de solution m re requis pour effectuer la solution de travail Il est courant d utiliser une injection instantan e de 10 uL de solution radioactive contenant 100 000 dpm par microcosme Le 10 uL est issu d un choix personnel bas sur la facilit de manipulation et la reproductibilit de l injection Une quantit entre 5 et 100 uL peut quand m me tre utilis e Pr paration de la solution radioactive de travail Tous les produits radiomarqu s sont entrepos s dans la bo te en plexiglas dans le r frig rateur 4 C R server la hotte radioactive pour la p riode de travail Installer un papier absorbant dans la hotte utilis e pour les manipulations radioactives hotte A et fixer le papier l aide de ruban gomm Aller chercher le produit radioactif 4 C et d poser la bo te qui le contient sur le papier absorbant dans la hotte baisser la vitre de la hotte Pr parer un vial en verre de 20 ml avec le solvant propre avec lequel on veut diluer un certain volume de la solution m re Pr voir un second vial dans lequel sera d pos le solvant d chet solvant utilis pour le rin age des seringues D poser la quantit de solvant pr alablement calcul e dans un vial ambr en verre de 1 8 ml l aide d une seringue en verre Gastight pr alablement rinc e trois fois au solvant propre et mettre le bouchon en t flon Prendre la quantit n cessaire de produit radioactif l aide d une seringue en
65. ment tre chang s en m me temps afin d viter des fluctuations de d bit Il faut aussi respecter les couleurs pr sentes jaune jaune et rouge rouge Ces codes couleurs correspondent des d bits bien pr cis et si les couleurs sont chang es il faudra changer les codes couleurs s lectionn es dans les m thodes NOTE La sortie de la chambre de n bulisation doit avoir un d bit plus rapide que l entr e afin d viter toute accumulation de liquide dans la chambre de n bulisation 8 Fermer la fen tre Diagnostic et ouvrir Spec CID S lectionner la m thode utiliser Si la m thode n existe pas encore passer la section pour y d velopper votre m thode Ne pas allumer la torche si votre m thode n est pas encore d velopp e Allumer la torche en s lectionnant le symbole de la torche du logiciel Ignit Plasma V rifier les param tres y figurant Ignit power 1150 W Auxiliary flow 0 5 Nebulizer flow 25 Pump 110 ou 130 rpm Page 52 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Purge time 90 sec Id alement la vitesse de la pompe doit tre 130 rpm pour l allumage et les analyses afin d obtenir une meilleure sensibilit des lectures Pour des raisons obscures la vitesse revient souvent 110 rpm m me pour des m thodes o la vitesse s lectionn e est de 130 rpm Il se peut que plusieurs tentatives d allumage soient n cessaires Si la premi
66. mode automatique Il existe des m thodes qui nous permettent de travailler en mode manuel ou automatique Le mode automatique est souvent favoris afin d acc l rer le travail Voici un r sum des tapes suivre 1 D velopper une m thode analytique voir section pr c dente 2 Faire la liste des chantillons en y incluant les informations sur les chantillons dans le sample file Sauvegarder le fichier par date On peut imprimer cette table de sorte qu on peut suivre la s quence d analyse et y noter les changements de position des chantillons Une fois que les analyses sont d marr es il est impossible de changer l information sur les chantillons Page 56 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 Se rendre dans le menu et y retrouver automated analysis et de l s lectionner le protocole d analyse Normalement le protocole STD SAMP est utilis Ce protocole effectue une calibration en d but de journ e et poursuit avec les chantillons 4 S lectionner le sample file cr e l tape deux ci haut V rifier que le nombre d chantillon apparaissant correspond bien au nombre d chantillon enregistr 5 Pour les standards le fichier standard s lectionn dans la m thode sera celui utilis V rifier si l information du fichier correspond bel et bien avec les standards utiliser 6 Lorsque tout semble pr t standards et chantillons e
67. n tre Sample analysis Si au lieu de Start vous avez Stop ne vous inqui ter pas attendez un peu que l appareil finisse ses mesures Donc en cliquant sur Start vous reprendrez vos trois essais sans pour autant effacer ceux que vous aviez d j e Une fois le premier standard termin cliquez sur Sample setup dans la fen tre Sample analysis Si l appareil n a pas fini ses mesures attendez un peu que le bouton Start r apparaisse Dans la fen tre qui appara t changez le nom de l chantillon ex 25ug votre deuxi me standard Res lectionnez Sample type range 5 ainsi que la deuxi me ligne du tableau de votre courbe de calibration ex 25ug puis cliquez sur Exit Appuyez sur Start afin de faire votre deuxi me standard e Recommencez les tapes pr c dentes jusqu a ce que votre courbe d talonnage soit termin e e Une fois que tous les chantillons de la courbe d talonnage ont t pass s et que les r sultats vous satisfont restez dans la fen tre Calibration curve Si vous lavez d j ferm e vous pouvez y acc der en allant dans Page 47 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Results Calibration ce moment vous pouvez maximiser votre courbe en s lectionnant les points de la courbe que vous voulez garder Dans la colonne Use cliquez sur les points que vous voulez conser
68. n bonne position s lectionner la fonction Run et de la faire une derni re v rification en s lectionnant Set Up Cela nous permet de voir si les standards sont au m me nombre et s ils sont bien positionn s dans l chantillonneur support en forme de L avec les tubes de 30 ml de Nalgene et de m me pour les chantillons support avec petit tube de 12 ml S assurer qu il s agit bien du bon format de support NOTE Si les analyses sont nombreuses plus de 10 chantillons il est recommand de faire une calibration en d but de journ e poursuivre les analyses avec les chantillons en incluant les standards avec les chantillons tous les 10 chantillons Si une d rive de plus de 10 survient au cours de l analyse il sera possible la fin de la journ e de recalibrer et refaire les calculs avec les nouveaux param tres pour les chantillons Pour ce faire ce r f rer au cartable qui nous indiqueront les diff rentes tapes suivre pour les recalculs 6 Entretien de l instrument Un minimum d entretien est requis pour conserver des conditions optimales d analyse Le responsable du laboratoire ou le log book pourra nous indiquer les derniers entretiens effectu s et les d tails de celui ci Normalement suite des analyses effectu es sur des chantillons ayant une matrice charg e un nettoyage de la torche sera n cessaire Ne vous lancer pas dans cette man uvre si vous n avez pas l exp rience requis Le responsable
69. oil Biol Biochem 24 225 228 Page 67 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 9 Mesure du potentiel de nitrification dans les sols Par Sophie Chaperon Date 26 mai 2004 Source initiale Sauv S et al Nitrification potential in field collected soils contaminated with Pb or Cu Applied Soil Ecology 1999 12 29 39 1 But La nitrification est un processus microbien dans lequel NH est converti en NO en deux tapes 1 NH 502 NH2OH H Catalyseur Enzyme Ammonia Monooxyg nase Bact ries NH20H O2 gt NO 2 H H20 Nitrosomas europae Catalyseur Enzyme Hydroxylamine oxidor ductase 2 NO H2 0 NO3 2H Bact ries Nitrobacter Catalyseur Enzyme nitrite oxidor ductase La sp cificit des bact ries invoqu es fait en sorte que le potentiel de nitrification est un indicateur sensible la contamination m tallique d un sol Par contre bien que dans la majorit des cas la nitrification soit effectu e par des bact ries d autres microorganismes h t rotrophes sont aussi capables d effectuer la nitrification Pour quantifier le processus de nitrification un essai microbien simple a t d velopp dans lequel des mesures de nitrites sont effectu es par colorim trie Par contre il est tr s important de bien r aliser que les mesures de nitrification sont tr s sensibles aux variations de pH et de mati re organique dans
70. ompte des chantillons que nous avons et de ce que nous en faisons 3 Proc dures Un permis d importation distinct est requis pour chaque chercheur et ou provenance l arriv e au laboratoire assurez vous avec S bastien Sauv au D 646 t l phone 343 6749 que les chantillons sont enregistr s dans le registre cet effet L inscription au registre doit inclure l origine les caract ristiques le responsable du projet et un num ro d identification appropri Inclure une copie du permis d importation dans le registre Les sols trangers seront conserv s dans l armoire barr e 5 face qu D 644 soit dans des sacs de plastiques r sistant ou dans des contenants de plastique L ensemble des sols d une provenance quelconque seront conserv s dans une bo te sp cialement identifi e Sols trangers Manipulation particuli re ainsi que le nom de la personne responsable du projet et son local Les sols apr s leur utilisation ainsi que les solutions expos es aux sols doivent tre r cup r s dispos s dans un contenant a moins de 2 5 cm d paisseur et mis l tuve Page 10 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 121 C minimum Les r sidus doivent tre conserv s cette chaleur pour au moins 12 heures Les r sidus solides seront tiquet s r sidus chimiques et doivent tre confi s au service de gestion des d chets de l Unive
71. ontaminants 2 Mat riel e Contenant de plastique e Acide nitrique qualit r actifs ACS PAS N CESSAIRE d utiliser la qualit trace trop dispendieux inutilement 3 Proc dure Dans un contenant en plastique de 15 a 20 litres on pr pare 10 litres d une solution d acide nitrique 10 par dilution de 1 5 litres d acide nitrique concentr 70 dans 8 5 litres d eau d ionis e DI La verrerie a conditionner est plong e dans cette solution pendant au moins 2 heures et id alement pour la nuit puis rinc e abondamment l eau d ionis e La verrerie est alors s ch e l air au besoin Page 9 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 5 Manipulations et limination des sols de provenance trang re import s pour la recherche Par S bastien Sauv Derni re r vision Mai 2002 Source initiale Entente avec l Agence canadienne d inspection des aliments du Canada 1 But Assurer la protection de l environnement canadien contre les pathog nes trangers potentiellement pr sents dans les sols import s 2 Contexte Les sols import s repr sentent un risque de propagation de pathog nes parasites et ou d autres agents biologiques Pour rem dier a cette situation les sols et les solutions expos s aux sols doivent tre trait s avant leur limination et un protocole strict doit tre suivi pour pouvoir rendre c
72. ouge signe qu il reste du TPF ajouter coup de 10ml du m thanol dans l entonnoir jusqu ce que la couleur rouge disparaisse du papier filtre Analyse du contenu en TPF 9 Pr parer trois standards de 5 10 et 15 ug de TPF mI l aide de la solution m re de 1000 ug ml Bien m langer ces solutions 10 Mesurer l absorbance sur un spectrophotom tre a une longueur d onde de 485nm des standards mesur s au d but au milieu et la fin de l exp rience et des solutions filtr es Cet appareil permettra de mesurer l intensit de la couleur rouge des chantillons Il est important de brasser les chantillons avant d analyser sur le spectrophotom tre 11 Faire une courbe de calibration gr ce aux mesures d absorbances des standards La valeur lue sur le spectrophotom tre pour un chantillon sera ins r e sur la courbe de calibration afin de d duire la concentration de TPF Page 62 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 12 Pour conna tre l activit de la d shydrog nase on doit convertir la concentration en solution de TPF ug ml vers une activit dans le sol en ug de TPF g de sol sec formule 2 5 Conversion de la concentration liquide de TPF en activit de d shydrog nase TPF Volume de solution Activit de d shydrog nase masse de sol sec ou L activit en d shydrog nase est en ug de TPF g de sol sec
73. r pour les acides concentr s pour les acides veuillez plut t utiliser soit les pipettes de verre standard soit les pipettes fix es aux bouteilles qui sont r sistantes aux produits corrosifs 2 Mat riel e Pipettes de grosseurs vari es e Embouts de pipettes assortis 3 Aspiration des solutions Fixer le volume a mesurer l afficheur est constitu de 3 chiffres la lecture se fait de haut en bas Monter le c ne appropri sur l embout port c ne Ne jamais manipuler un liquide avec une pipette sans l avoir au pr alable quip e d un c ne Faire tr s attention de ne pas aspirer de liquide l int rieur de la pipette si c est le cas la rincer imm diatement avec de l eau distill e et dans la mesure du possible la rincer et l ass cher l int rieur Si vous tes incapable de bien utiliser les pipettes automatiques utilisez les pipettes de verres avec des poires En cas de n gligence de votre part vous pourriez tre responsable de lachat d une nouvelle pipette de remplacement 300 500 Chaque fois que vous utilisez une pipette vous devez v rifier sa calibration aspirez le volume d eau MQ mesurer fix sur l afficheur et pesez le avec une balance pour v rifier si le volume est correct Il faut bien savoir que le volume indiqu sur les contr les de pipettes correspond rarement au volume exact livr il est par contre critique que ce volume soit r p table d une mesure l autre Ne jama
74. ral Microbiology Oxford Washington DC USA Beelen P van Doelman P 1997 Significance and Application of Microbial Toxicity Tests in Assessing Ecotoxicological Risks of Contaminants in Soil and Sediment Chemosphere 34 455 499 Shen Q R Ran W Cao Z H 2003 Mechanisms of nitrite accumulation occurring in soil nitrification Chemosphere 50 747 753 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv 3 10 La respiration induite Par Carmen Donisa Dernier r vision 29 juin 2004 Source initiale Test de min ralisation en microcosmes protocole standard d op ration A10 Ecole Polytechnique Universit de Montr al 1 But Les cellules vivantes ont besoin d un apport constant en nergie qui pour la microflore h t rotrophique provient de la transformation des mati res organiques comme la cellulose les prot ines les nucl otides et les compos s humifi s Les r actions qui se passent dans les cellules vivantes sont des r actions d oxydor duction bas es sur le transfert des lectrons d un donneur un accepteur Lors de la respiration soit l oxydation de la mati re organique par les microorganismes a robiques les groupes fonctionnels oxyg n s sont les groupements finaux accepteurs des lectrons Les produits finaux de ce processus sont le CO2 et H20 L activit m tabolique des microorganismes du sol peut tre quantifi e en mesurant la production du
75. re cliquez deux fois sur la r gle sur laxe lui m me des minivolts et diminuez l chelle Donc une fois la fen tre Push boat in now apparu et le signal de base stable cliquez sur ok puis d placez l chantillon dans le four ALLEZ Y DOUCEMENT La combustion est pr sentement en cours et vous n avez plus qu attendre e Une fois que l analyse d un chantillon est termin e le r sultat appara t dans la fen tre Analysis results ce moment vous pouvez retirer la cupule du four en glissant doucement l aimant e De fa on automatique le programme vous demande de remettre un l chantillon dans la cupule Load boat now then clic OK Vous devez attendre que le porte chantillon soit refroidi avant de remettre un deuxi me chantillon R p tez les tapes pr c dentes afin de compl ter vos essais Une fois le nombre d essai compl t le programme compile les r sultats et indique la moyenne dans la fen tre Analysis results Lorsque la moyenne est apparue dans la fen tre Analysis results deux autres fen tres apparaissent Calibration Curve avec votre courbe de calibration et une autre fen tre affichant les r sultats Cliquez sur Exit pour fermer ces deux fen tres vous n en avez pas besoin pour le moment Si vous n tes pas satisfait des r sultats que vous avez obtenus par ce que la d viation standard est trop grande par exemple cliquez sur Start de nouveau dans la fe
76. rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 7 Calculs Formule g n rale mg L M V mg kg M ou M m tal mg L valeur lue par AAS ICP AES V volume flacon jaug mL m la masse du sol pes g 8 Exemple 1 0733 g de sol sec sont dig r s avec 10 mL de HNO conc et compl t 50 mL avec de l eau d ionis e et la concentration de cuivre est ensuite mesur e absorption atomique ou autre La concentration de la solution en mg L ppm doit tre corrig e pour le blanc digestion de l acide seul Par exemple une concentration en solution dans l chantillon de 0 3685 mg L et une concentration dans le blanc de 0 0021 mg L va donc donner 0 3664 mg L de cuivre dans l acide de la digestion de l chantillon Or on veut trouver la concentration en Cu dans le sol en mg kg de sol sec On trouve la quantit de cuivre dans la solution 50 0 mL est de 0 36647 50 0 ml est quivalent 0 3664 0 0500 ou encore 0 0183 mg de cuivre dans l chantillon 0 0183 mg de Cu Comme on avait au d part 1 0733g de sol sec on a donc 1 0733g de sol sec En assumant une digestion compl te on a alors une concentration de 0 0183 mg de Cu 1000 g 1 0733g de sol sec 1kg 17 05 mg Cu kg sol sec Page 23 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 9 Lavage On lave d abord les flacons l aide d
77. rsit de Montr al a s Suzanne Deguire local G 535 t l phone 343 6111 poste 4000 qui s occupera de les faire acheminer vers un site d enfouissement appropri Une preuve de prise en charge des r sidus de sols doit tre envoy au responsable de l Agence canadienne d inspection des aliments voir ci dessous Pour des questions contacter S bastien Sauve local D 646 Pour obtenir un permis Louis Alix Andr Agence canadienne d inspection des aliments Importation protection des v g taux 7101 Jean Talon est Suite 600 Anjou QC H1M 3N7 Tel 514 493 6674 poste 232 Fax 514 493 6154 Page 11 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 1 6 Pr paration des solutions standards Par Luc Lavoie Derni re r vision 24 avril 2002 Source initiale n a 1 But 2 Contexte Les instruments d analyse ex AAS ICP AES etc ne donnent pas les r sultats directement en unit s de concentration des m taux analys s Pour obtenir ces concentrations il est n cessaire de construire les courbes d talonnage qui donnent la relation entre les indications des appareils et la concentration du m tal analys 3 Proc dures 4 Pr paration des solutions standards de Cu e La teneur des sols tudi s en Cu est entre 20 et 200 ppm mg kg de sol e Le domaine de lin arit de l analyse du Cu par Absorption Atomique sur l appareil
78. s et se d grade facilement l ext rieur de l organisme Tabatabai 1994 De ce fait il s agit d un indicateur pertinent pour l tude de l activit des microorganismes actifs dans les sols Alef 1995 Tabatabai 1994 La mesure de l activit en d shydrog nase se fait par l analyse de colorim trie du TPF Cette substance provient de la r duction du TTC par les microorganismes gr ce la d shydrog nase En effet le TTC substance chimique artificielle poss de un potentiel redox lev 0 08V De ce fait le TTC agit comme un accepteur d lectron et se transforme en TPF Il est important de noter que cette technique n est pas fonctionnelle en pr sence de grandes concentrations de cuivre puisque celui ci interf re avec le TPF et r duit la lecture d absorbance Chander et Brookes 1991 Cette m thode fut d velopp e par Lenhard 1956 qui est inspir e de Mattson et al 1947 mais le protocole actualis de Tabatabai 1994 sera plut t utilis 2 Mat riel e Eprouvettes de verre 16 mm par 150 mm ou quivalent en plastique volume de 50 ml e Spectrophotometre analysant 485 nm e Bouchons pour sceller les prouvettes r sistant au m thanol Page 60 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv e Filtres Fisherbrand Q8 ou l quivalent e Balance 3 d cimales e Papier peser e papier d aluminium si n cessaire e M langeur de type
79. si critique de r cup rer totalement l acide utilis sans perte par vapeur ou autre 2 Pr cautions L usage des gants sarrau et lunettes de protection est obligatoire 3 Mat riels 1 plaque chauffante e Papier aluminium e 1 cylindre gradu 10 ml e Pipettes e B chers 100 mL e Verres de montre de 9 cm e Spatules de plastique e Flacon laveur d eau distill e e Entonnoirs filtration de plastique de 7 2 cm e Support a entonnoirs en bois e Filtres de papier Whatman No 41 ou Fisher 5 Page 16 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv e Fioles jaug es 50 mL 100 mL ou 200 mL e Membranes 0 45 um e Support a membranes 4 R actifs e Acide nitrique concentr qualit Fisher Trace metal grade ou sup rieur e Eau d ionis e DI e chantillon s de sol s pr alablement s ch s et broy s 5 Manipulations e Tout le mat riel doit tre propre et pr alablement lav au savon de laboratoire tremp dans l acide nitrique dilu 1 nuit et rinc abondamment l eau d ionis e e M langer l chantillon pr alablement s ch dans une tuve 70 C pour l homog n iser e Peser exactement environ 0 5000 g de 0 3 1 0 g par chantillon on utilise moins d chantillon quand c est tr s contamin et inversement quand on est proches des limites de d tection Il est aussi pr f rable de diminuer la masse utilis e pour les
80. t branch quelque part e L AIDE DE PINCETTE NE TOUCHEZ JAMAIS LA CUPULE AVEC VOS DOIGTS sortez la cupule de platine de la bo te introduction d chantillons SOYEZ D LICATS CAR LES COMPOSANTES DE L APPAREIL SONT TR S FRAGILES Prenez l habitude de laisser la porte ouverte le moins longtemps possible Il est conseill de mettre un peu de laine de silice Silice wool dans le fond du bateau cupule Cela permet une meilleure a ration des chantillons et ainsi une meilleure combustion Cette laine se trouve dans un petit sachet dans une bo te en carton dans un tiroir dans le meuble sous l analyseur de carbone Ne confondez pas avec Pyrex wool Suite cela remettez le bateau dans son socle et refermez la porte e Le tube en verre horizontal du module a solide est muni d un petit trou vertical a c t de la bo te d introduction des chantillons Ce trou doit tre bouch par un petit bouchon en caoutchouc orange La porte de la bo te d introduction des chantillons doit tre bien ferm e Assurez vous qu il y a un peu de graisse High Vacuum Silicone sur le tour du clapet de la bo te d introduction d chantillon La graisse se trouve dans une bo te en carton dans un tiroir dans le meuble sous l analyseur de carbone e Ouvrir l arriv e de gaz sur le tube l arri re du module pour chantillons solides e Ouvrir la bombonne de gaz qui alimente le module solide NE MODIFIEZ PAS LE DEBIT Page 44
81. t exposer le plus faible standard de 3 10 fois plus on l expose de fois meilleure sera la LD mais elle sera moins r aliste et multipli l cart type de ces lectures par 3 et ainsi obtenir la LD On peut ensuite v rifier cette information en comparant avec des chantillons s approchant de cette limite Si l allure du pic et son int gration sont raisonnables on peut conserver cette LD si non on peut reprendre ce test avec un standard plus lev Page 59 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 7 D termination de l activit de la d shydrog nase dans les sols Par Benoit Cloutier Hurteau Derni re r vision 29 juin 2004 Source initiale Tabatabai MA 1994 Soil enzymes In Mickelson SH ed Methods of Soil Analysis Part 2 Microbiological and biochemical properties number 5 Soil Science Society of America Madison pp 775 833 1 Application L enzyme d shydrog nase est une enzyme pr sente chez tous les organismes vivants Elle permet d oxyder les compos s organiques par le processus de d shydrog nation XH2 A gt X AH XH2 est le compos organique exprim dans cet exemple comme un donneur d hydrog ne tandis que A est une mol cule acceptant cet hydrog ne Cette r action chimique est produite chez les organismes vivants par l enzyme d shydrog nase Cette enzyme se retrouve l int rieur des organismes vivant
82. tific e Tubes en verre de 5 ml diam tre 10 ou 12 mm Fisher Scientific e Vials a scintillation en verre de 20 ml avec bouchons Fisher Scientific e Papier absorbant e Resserreur de bouchon crimper e Seringues en verre Gastight de 1 10 50 100 250 et 1000 ul e Seringues en plastique de 30 ml et 5 ml e Aiguille en acier inoxydable de 6 e Vial ambr de 1 8 ml avec bouchon contenant un septum 3 R actifs e Glucose radioactif U 1C Sigma e KOH Anachemia e Azoture de sodium NaN3 Anachemia 4 Manipulations Pr paration de la solution radioactive Avant m me de d buter le test de min ralisation en microcosmes il faut pr parer la solution radioactive qui servira de substrat aux micro organismes Etapes pr liminaires e Pr voir le nombre d chantillons de l exp rience et le nombre de fois que l on v rifiera la solution radioactive avec des contr les avant l exp rience et Page 76 de 80 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv pendant l ajout dans les microcosmes afin de v rifier la stabilit de la solution et la reproductibilit des manipulations environ tous les 6 microcosmes Effectuer une estimation de la quantit de dpm requise pour l exp rience En g n ral une injection spontan e de 100 000 dpm microcosme est choisie ex pour 10 microcosmes il faut une solution m re ayant au moins 1 000 000 de dpm Calculer le volu
83. tte 200 uL dans l erlenmeyer On ajoute 2 grammes de r sine Chelex 100 Na form 100 200 mesh pour 10 mL de gel soit 15 g de r sine pour 75 mL de r sine On agite quelques secondes la main sans faire de bulles et on coule la solution gel en formation entre les plaques du montage Faire attention d ventuelles fuites entre les plaques Cette fois le durcissement du gel prendra entre 30 minutes 2 heures Le montage est plac presque l horizontal apr s quelques minutes afin d viter de perturber l homog n it de la distribution de la r sine due la gravit D moulage du gel et dialyse Une fois le gel solidifi le montage est d mont pour en d gager le gel A l aide d une spatule en plastique on le transf re dans un bain d eau d ionis e grand bac en plastique y met une pinc e de r sine Chelex 100 Na form 100 200 mesh L eau est renouvel e entre 5 10 fois avec au moins 15 minutes entre chaque changement de mani re abaisser le pH de 10 5 7 lci on y fait sortir le TEMED du gel par dialyse En pratique il peut tre difficile d abaisser le pH en bas de 8 Le gel obtenu avec r sine est pr t pour la DGT Page 42 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 3 5 Utilisation de l appareil TOC pour les chantillons solides Carbone total dans les sols Par Rapha l Lambert Derni re r vision 14 ao t 2003
84. tube de centrifugation Exemple avec 20 d humidit pour un sol donn il faudra prendre approximativement 10 g sec 100 20 10g 0 80 12 grammes Ce 12 g 10 g 10 mL de sol 2 mL d eau sera m lang avec 18 mL de KNO 0 01 M Pour les sols et m dium organiques gt 20 30 C on utilisera un ratio solide liquide de 1 10 au lieu de 1 2 donc 2 g de solides pour 20 mL de solution Page 25 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Les tubes de centrifugation sont dispos s horizontalement sur un agitateur m canique On fait l agitation pendant au moins 12 h overnight Les tubes sont ensuite centrifug s a 11000 RPM 10000 g pendant 15 min 30 min si l chantillon est organique Les surnageants sont transf r s dans des b chers on jette les d p ts solides d cant s Les pH des surnageants sont mesur s au pH m tre Les surnageants sont transf r s dans une seringue de 30 mL en plastique Une membrane filtre 0 45 um est fix e sur le support appropri et utilis e pour filtrer le surnageant Le filtrat peut ensuite tre utilis pour le pH la d termination du pCu pour l analyse par polarographie pour la conductivit ou pour les m taux totaux dissous Page 26 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 2 4 Broyage de sol en poudre Par Luc Lavoie et S bastien Sauv
85. u plus 1 jour 7 Pr paration de 75 mL de gel 15 T 5 C gel sans r sine Montage du moule On installe les plaques de plexiglass parall lement entre elles s par es par le tube en caoutchouc et fix es solidement en bas et des c t s gauche et droit par les clips en plastique D gazage de la solution stock On verse dans un erlenmeyer vide 100 mL 45 mL de solution stock de monom res et 29 25 mL d eau milliQ avec un cylindre gradu Cette solution est d gaz e sous vide via une trompe a eau pendant 25 minutes afin d en enlever l oxyg ne Amorce de la polym risation et moulage On ajoute cette solution dans l erlenmeyer 0 525 mL de la solution d initiateur APS 10 via la micropipette 1 mL On verse quelques gouttes de TEMED tetram thyldiamino thyl sous la hotte et on en ajoute 150 uL via la micropipette 200 uL dans l erlenmeyer On agite quelques secondes a la main sans faire de bulles et on coule la solution gel en formation entre les plaques du montage A faire en moins de 5 minutes Faire attention d ventuelles fuites entre les plaques D s que l on constate un paississement du gel le montage est laiss presque l horizontal pendant 40 minutes Page 41 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv D moulage du gel et dialyse Apr s 40 minutes le montage est d mont pour en d gager le gel A l aide d une spatule en plastiqu
86. ubation et imm diatement avant l ajout de KCI Dosage de l ammonium Pipeter 1 mL de filtrat dans un erlenmeyer de 50 mL et ajouter 9 ml d eau d ionis e 5 mL de solution de salicylate de sodium NaOH solution et 2 ml de dichloroisocyanure de sodium et laisser reposer la temp rature de la pi ce pour 30 min avant de mesurer la densit optique 690 nm Calibration Pipeter 1 mL de solution d ammonium dans les tubes de verre diluer avec 9 mL d eau d ionis e et d terminer ensuite les concentrations d ammonium 0 0 1 0 1 5 2 0 2 5 ug NH4 N mL 5 Calcul activit de l ur ase Corriger les donn es pour les blancs et calculer Activit de l ur ase ug NH N mL v 10 m M sec O l activit de l ur ase est en ug NH4 N mL la concentration d azote ammoniacal est multipli e a V le volume total de solution 10 est le facteur de dilution m est le poids de sol humide utilis pour l essai et Msec est la masse s che de 1 g de sol humide Page 66 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 6 R f rences e Alef K 1995 Ureas activity In Alef K et Nannipieri P eds Methods in applied soil microbiology and biochemistry Academic Press London 316 320 e Blakeley RL Zerner B 1984 Jack bean urease the first nickel enzyme J Mol Catal 23 263 292 e Lai CM Tabatabai MA 1992 Kinetic parameters of immobilised urease S
87. ut de journ e ou lorsque des probl mes de communication entre l ordinateur et l appareil surviennent en cours d analyse Cela peut aider r tablir la communication Attendre le message qui indique que le reset a t compl t avec succ s avant de poursuivre Page 51 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv 6 Repositionner l aiguille dans la station de rin age en respectant la marque noire sur l aiguille Pour ce faire d visser la vis qui retient l aiguille sur le bras de l chantillonneur Il est important que l aiguille soit dans le liquide lors de l allumage car celui ci ne fonctionnera pas S assurer que la bouteille de la station de rin age contient suffisamment d acide nitrique 2 Trace Metal Grade NOTE Normalement l aiguille ne doit jamais demeurer dans le liquide de la station de rin age lorsque le ICP n est pas en op ration Si l aiguille y demeure longtemps le liquide va monter dans la chambre de n bulisation par capillarit et il faudra bien ass cher le tout avant le prochain allumage de la torche 7 Mettre les tubes de la pompe p ristaltique sous tension S assurer qu ils ne soient pas trop us s d p ts noirs tubes trop souples qu ils soient bien tendus sur les rouleaux et chacun dans sa position La tension appliqu e sur les tubes peut varier dans le temps L tape 9 explique comment ajuster cette tension Tous les tubes doivent id ale
88. ute la vaisselle dans du HCI 10 et non dans du HNO3 Nitrification Dans des erlenmeyers de 125 mL peser 10 g de sol humide quivalent de sol sec Ajouter 10 mL d eau d ionis e pour tous les contr les et chantillons puis placer l incubateur 28 C avec une agitation rotative de 110 rpm pour 16h Ensuite pour 4 chantillons ajouter 10 mL de la solution 4 fait partir des solutions 1 et 2 ceci constitue le contr le Pour tous les autres chantillons incluant le contr le ajouter 10 mL de la solution 3 fait partir de la solution 1 Le rapport final sol solution doit tre environ 1 2 Toutefois si les sols contiennent beaucoup de mati res organiques une quantit plus importante de solution sera n cessaire Incuber les sols pendant 4h 28 C avec une agitation rotative de 110 rpm Transf rer les chantillons dans des tubes de centrifugation centrifuger 10 000g pendant 15 min et filtrer les chantillons avec les seringues et les filtres de 0 45uM en cellulose dans des fioles jetables Mesure des nitrites par colorim trie Pr paration du r actif colorant Dans un ballon jaug de 100 mL peser 1 g de sulfanilamide et dissoudre dans environ 50 mL d eau et 10 mL H3POQ4 Ajouter 0 1 g de Page 69 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv N 1 Naphtyl ethylenediamide dihydrochloride et compl ter au trait de jauge Cette solution est stable un
89. ux d humidit d un sol Par S bastien Sauv Derni re r vision 28 avril 2003 Source initiale n a 1 But Obtenir un chantillon de sol un taux d humidit pr d termin 2 Proc dures D terminer la teneur en eau initiale du sol Calculer la masse quivalente en sol sec de l chantillon Calculer la masse d eau totale requise dans l chantillon selon la masse s che quivalente Soustraire la masse d eau d j pr sente de la masse d eau ajouter Ajouter l eau n cessaire l chantillon Le taux d humidit d un sol expos lair varie en fonction de l humidit relative et va se dess cher ou s humidifier au gr des variations ambiantes 3 Calculs Prenons 130 g d un chantillon de sol avec une teneur initiale en eau de 12 12 g H20 pour 100 g de sol sec voir m thode La quantit de sol sec est la diff rence du poids total moins la teneur en eau L alg bre est un peu amusante c est probablement plus simple de faire les calculs par essais erreurs dans un chiffrier Excel Cet chantillon contiendrait donc 13 9 g d eau et 116 1 g de sol sec Et NON pas 130 0 12 15 6 g d H2O parce que 15 6 g d eau sur 130 15 6 g 13 6 Page 28 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Exemple humidit 11 9724376 13 9 116 1 Masse sol humide 130 g Masse H 0 139 g Masse sol sec 116 1 g Page 29 de
90. ver puis cliquez sur Recalc Dans la fen tre comportant le graphique un chiffre appara t ex r sqr 94765 Plus ce chiffre est lev plus votre courbe est lin aire Faites donc quelques essais avec quelques combinaisons de point de mani re ce que ce chiffre soit le plus lev possible chaque nouvelle combinaison vous devez cliquer sur Recalc Quand la valeur vous convient cliquez sur Save as new version puis Exit Vous tes maintenant pr ts commencer vos analyses F Faire les analyses e Cliquez sur Sample setup dans la fen tre Sample analysis puis Sample type cliquez sur Sample Faites Save use e Allez peser votre chantillon Pour ce faire sortez la cupule de platine de l appareil l aide des pincettes D posez la dans une petite assiette d aluminium avec un verre de montre dessus N oubliez pas de refermer la porte de l appareil Rendez vous la balance et pesez votre chantillon Essayez de disposer l chantillon le plus uniform ment possible dans la cupule e Pour faire l analyse cliquez sur Start afin de valider vos nouveaux param tres Le programme vous demande d entrer la masse ou le volume de votre chantillon Faites le en utilisant la lettre u pour le signe u Ne mettez pas d espace entre le chiffre et les unit s de mesure Le programme demande de mettre l chantillon dans le bateau Load boat now then clic OK
91. verre se trouvant dans la hotte A rinc e trois fois au solvant propre et d poser dans le m me vial ambr de 1 8 ml Boucher le vial de 1 8 ml avec un bouchon couverture de t flon et bien agiter V rifier le nombre de dpm uL de cette solution de travail en injectant 1 uL quantit minimale dans un vial scintillation contenant 10 mL de cocktail scintillation puis en mesurant au compteur l aide du protocole EASY COUNT 00 pour une lecture de 1 min par vial Identifier la bouteille en indiquant combien de dpm uL qu elle contient et indiquer la quantit de produit radioactif utilis e dans la feuille d inventaire 4 3 Pr paration des microcosmes Peser 20 g de sol ou 20 mL d eau selon le cas dans des bouteilles s rologiques bien identifi es 120 ml Effectuer l ajout de glucose marqu Page 77 de 80 Proc dures exp rimentales 20 10 2005 Laboratoire de chimie environnementale Sauv Ajouter l azoture de sodium NaN3 0 2 p p soit 0 04 g dans les microcosmes t moins a la toute fin Ceux ci constitueront les temoins abiotiques Placer le tube de verre de 5 ml contenant 1 ml de KOH 1N l int rieur du microcosme Installer les microcosmes sur un chariot recouvert de papier absorbant pr s de la hotte de travail Injecter la quantit de solution radioactive de travail requise g n ralement 10 uL dans le microsome l aide d une seringue en verre Gastight pr alablement rinc e trois fois
92. vironnementale Sauv 4 Mode op ratoire Le mat riel est conditionn l acide nitrique 10 voir proc dure 5 Solution stock de monom res acrylamide bis acrylamide On sort du frigo les bouteilles de bis acrylamide et d acrylamide laisse revenir la temp rature ambiante et on p se exactement environ 2 0000g de bis acrylamide sur un verre de montre Le bis acrylamide est transf r dans une fiole jaug e de 100 mL l aide d un entonnoir On dissout au maximum en ajoutant de l eau milliQ environ 60 mL Il est n cessaire d agiter sur une plaque agitatrice avec un barreau aimant e 30 minutes sinon cela peut prendre quelques heures On compl te au trait de jauge avec de l eau milliQ On obtient une solution de bis acrylamide 2 w v Dans un b cher de 100 mL on p se exactement environ 23 8000 g d acrylamide on les transf re dans une fiole jaug e 100 mL avec un entonnoir et on ajoute au cylindre gradu 63 mL de solution homog ne de bis acrylamide 2 On agite la main pour dissoudre dissolution facile On compl te au trait avec de l eau milliQ On obtient une solution stock 25 1 T et 5 C C est la solution de monom res 6 Solution d APS 10 w v initiateur On p se dans un b cher 10 mL exactement environ 0 1000g de persulfate d ammonium puis on dissout le tout dans 1 mL d eau milliQ partir de la micropipette 1000 uL dissolution facile Cette solution doit tre vieille d a
93. voir si le ICP doit demeurer allum ou non Si le ICP doit demeurer ouvert il faut figurer la quantit d azote n cessaire pour la p riode d inactivit Si l azote n est pas suffisant il faut pr voir un changement de bouteille Cette proc dure est indiqu sur le devant de l appareil et peut prendre jusqu une heure temps d installation et de purge ad quate Cette m me proc dure est aussi bonne pour le cas o l on voudrait teindre le ICP AES pour une longue p riode 4 Optimisation de l appareil mapping doit tre compl t e Comment d velopper une m thode Il est possible d utiliser une m thode existante Avant de proc der de la sorte s assurer aupr s des personnes concern es si cela est possible L id al est de concevoir sa propre m thode car les donn es y seront conserv es pendant un certain temps et si des re calibrations sont n cessaires apr s examen des r sultats en tout temps il sera possible d y retourner et d y refaire les calculs Page 54 de 80 Proc dures exp rimentales Laboratoire de chimie analytique environnementale Sauv Selon le niveau de compr hension du logiciel et le support technique deux fa ons de b tir des m thodes se posent o bien on passe travers les diff rents menus du logiciel et on tente de cr er sa propre m thode o bien on se base sur les informations contenues dans les cartables sur la proc dure suivre pour monter sa m thode Voici

Protocoles et procédures Table des Matières

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