indications réactif protocole performance références - Sigma
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1. 6 M THANOL absolu sans ac tone r f rence N M1775 Microscope Lames Lamelles de protection Geometric Data Hemastainer et accessoires Geometric Data Hematrak et accessoires CONSERVATION ET STABILIT Conserver la solution du colorant de Wright temp rature ambiante 18 26 C Conserver le r cipient bien ferm L tiquette du r actif porte une date de p remption Remplacer la solution du colorant de Wright de la station 3 si plus de 250 lames sont color es chaque jour ou si la coloration des plaquettes sanguines est faible Changer galement la solution de la station 2 si une coloration faible est observ e dans la dur e Changer les solutions de toutes les stations chaque jour Conserver les tampons phosphate et le m thanol temp rature ambiante 18 26 C Conserver la solution de tampon phosphate une temp rature comprise entre 2 et 8 C ALT RATION liminer le colorant de Wright ou le tampon phosphate en cas de d veloppement de turbidit liminer la solution du colorant de Wright en cas de formation d un pr cipit ou d apparition d un art fact d eau dans les globules rouges liminer la solution de tampon phosphate en cas de turbidit ou d observation d une prolif ration bact rienne PR PARATION Les solutions de tampon phosphate se pr parent en diluant le contenu d un flacon de tampon phosphate dans 3 8 litres d eau d ionis e REMARQUE Toute variation du pH de l eau2. et de les faire s cher Les colorer le plus rapidement possible 7 Des lames de contr le positif doivent tre incluses dans chaque essai 8 Les donn es obtenues par cette proc dure permettent uniquement de faciliter le diagnostic et doivent tre r vis es conjointement d autres tests ou informations sur les diagnostics cliniques g 8 amp PROTOCOLE PROC DURE DE COLORATION PAR LOT AVEC LE HEMASTAINER Station R actif Temps il M thanol 15 30 secondes 2 Colorant de Wright M thanol 2 0 minutes 3 Colorant de Wright Tampon phosphate 5 0 minutes 4 Eau d ionis e Tampon phosphate 20 secondes 5 Tampon phosphate 1 0 minute PERFORMANCE Les noyaux pr sentent diverses nuances de violet La coloration cytoplasmique pr sente diverses colorations de bleu rose clair De fins granules rouge tres lilas peuvent tre pr sents dans le cytoplasme de certains types de cellules Le cytoplasme des basophiles montre des granules bleu fonc noir Le cytoplasme des osinophiles pr sente des granules orange Les globules rouges doivent tre de couleur rose orange Si les r sultats observ s sont diff rents des r sultats escompt s contacter le service technique Sigma Aldrich pour obtenir de l aide R F RENCES 1 Hematology Principles and Procedures Sixth Edition Brown AB Lea amp Febiger Philadelphia 1993 p101 Sigma Aldrich Inc garantit la conformit de ses produits avec les inf
3. peut avoir un impact non n gligeable sur les performances de ce r actif utilis avec le Hemastainer Il est recommand de confirmer le pH final du tampon afin de garantir des performances optimales Le r actif utilis dans la station 1 est du m thanol Le r actif utilis dans la station 2 est la solution colorant de Wright m thanol qui se pr pare en m langeant 350 mi de colorant de Wright avec 150 ml de m thanol Le r actif utilis dans la station 3 est la solution colorant de Wright tampon phosphate qui se pr pare en m langeant 100 mI de colorant de Wright avec 400 ml de solution de tampon phosphate Le r actif utilis dans la station 4 est de l eau d ionis e tamponn e qui se pr pare en m langeant 3 8 litres d eau d ionis e avec 200 ml de solution de tampon phosphate Le r actif utilis dans la station 5 est la solution de tampon phosphate PR CAUTIONS Suivre les pr cautions habituelles observ es lors de la manipulation de r actifs de laboratoire liminer les d chets selon les r glements locaux d partementaux r gionaux ou nationaux en vigueur Pour des informations actualis es sur les risques ou la s curit se reporter la fiche technique du produit PROTOCOLE PR L VEMENT DES CHANTILLONS Il est recommand de pr lever et de conserver les chantillons conform ment au document M29 A3 du CLSI Aucune m thode d analyse actuelle ne garantit totalement que les chantillons de sang
4. SIGMA ALDRICH COLORANT DE WRIGHT Pour le Geometric Data Hemastainer et le Hematrak Protocole N WSGD 128 INDICATIONS La solution du colorant de Wright est destin e tre utilis e pour la coloration des frottis sanguins ou de moelle osseuse Les solutions sont destin es un usage diagnostique in vitro Le colorant de Wright r f rence N WSGD 128 est un colorant de Romanowsky modifi utilis pour colorer de mani re diff rentielle les divers l ments cellulaires composant le sang Lorsque les frottis sanguins sont trait s comme d crit ci dessous le noyau et le cytoplasme des globules blancs prennent une coloration bleue ou rose caract ristique Les colorants purifi s dans les formulations ACCUSTAIN du colorant de Wright liminent toute coloration non syst matique et donnent des r ponses chromog nes reproductibles d un lot l autre Le colorant de Wright r f rence N WSGD 128 est utilis avec des automates de coloration par lot comme le Hemastainer fourni par Geometric Data R ACTIF COLORANT DE WRIGHT r f rence N WSGD128 4L Colorant de Wright 0 14 p et stabilisants dans du m thanol MAT RIELS SP CIFIQUES REQUIS MAIS NON FOURNIS TAMPON PHOSPHATE r f rence N P3288 Un m lange de phosphate de sodium et de phosphate de potassium 0 0083 mol l pH 7 2 TAMPON PHOSPHATE r f rence N P8165 Un m lange de phosphate de sodium et de phosphate de potassium 0 034 mol l pH 6
5. ormations contenues dans la pr sente notice et dans les autres notices Sigma Aldrich L utilisateur doit s assurer que le s produit s est sont adapt s l utilisation qu il souhaite en faire D autres conditions g n rales peuvent s appliquer Voir au verso de la facture ou du bordereau de commande les conditions g n rales de vente et autres informations Protocole N WSGD 128 R vision pr c dente 2010 06 R vision 2013 02 AR MED a division of Quintiles Ltd EC REP Runnymede Malthouse Off Hummer Road Egham Surrey TW20 9BD United Kingdom SIGMA ALDRICH INC 3050 Spruce Street St Louis MO 63103 tats Unis 1 314 771 5765 Service technique en PCV au 1 314 771 5750 ou adresser un email clintech sial com Pour commander en PCV au 1 314 771 5750 www sigma aldrich com SIGMA ALDRICH INTERNATIONAL GmbH Wassergasse 7 900 St Gallen Switzerland 41 71 242 8000
6. ou de tissus ne transmettent pas d agents infectieux Par cons quent tous les chantillons de sang ou de tissus doivent tre consid r s comme potentiellement infectieux On peut utiliser des frottis de sang total frais ou des frottis frais pr par s partir de sang anticoagul avec de l EDTA Si l chantillon color doit tre valu avec le syst me Hematrak un long frottis mince bord frang droit est n cessaire L appareil de pr paration de frottis automatique colonne Miniprep de Geometric Data fournit un chantillon ad quat Avant de pr parer les frottis bien m langer le sang temp rature ambiante 18 26 C 1 FR REMARQUES 1 En cas d utilisation du Geometric Data Hematrak consulter le manuel d utilisation du fabricant 2 Utiliser un tampon phosphate de pH 6 6 si les lames doivent tre lues avec le Geometric Data Hematrak Si les lames doivent tre lues avec un microscope optique normal utiliser un tampon phosphate de pH 7 2 Couvrir la station 1 et la station 2 lorsque celles ci ne sont pas utilis es Pour obtenir une bonne performance ne pas couvrir la station 3 Sigma Aldrich a obtenu des r sultats satisfaisants avec ce programme de coloration Les temps de coloration peuvent tre ajust s en fonction des pr f rences de chacun et des conditions environnementales 6 Si les lames ne peuvent pas tre color es imm diatement il est possible de les fixer dans du m thanol pendant 1 minute
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