Procédures d`utilisation des salles de culture _ NC1
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1. comit d thique MTA etc s il s agit de manipulations avec du mat riel qui doit tre approuv Conna tre le niveau de confinement du mat riel que vous devez utiliser se rapporter aux documents l gaux ex loi C11 loi sur les agents pathog nes humains et les toxines pour la classification Le conseiller sant s curit secteur biorisque pourra vous aider Il doit galement tre contact si vous devez travailler avec du mat riel de niveau NC2 et NC3 qui ne doivent en aucun cas tre manipul dans les salles de culture de niveau NC1 standard l utilisation de radio isotopes dans ce laboratoire doit tre approuv e par le comit de bios curit et par le service de la radioprotection du CHUM Maryse Lainesse ou Lysanne Normandeau Vous devez respecter les exigences d crites dans le manuel de radioprotection du CHUM comme par exemple sur les formations exig es la gestion des d chets les proc dures en cas de d versement et la v rification de l absence de contamination en effectuant des frottis Circuler lentement Ajuster la hauteur de votre si ge lorsque vous vous installez Votre visage doit se refl ter au milieu du panneau d observation La vitre ne doit pas tre relev e au del d une certaine hauteur une alarme devrait alors se faire entendre Porter un sarrau et des gants en tout temps dans le laboratoire Les gants doivent tre retir s avant de quitter la salle de culture vous devez alors vo2. cellulaire la fois afin de r duire le risque de contamination crois e viter de laisser trop longtemps les flacons de milieux ou de cellules ouverts sous la hotte D sinfecter les surfaces de travail avec de l thanol 70 entre 2 sessions de travail ou lorsque vous avez termin vos manipulations Aspirer quelques volumes d thanol 70 dans le tuyau d aspiration connect au vide du laboratoire la fin de votre session de travail Lorsque plein vider l erlenmeyer branch sur le vide le rincer puis y verser du d sinfectant environ 1 10 du volume du contenant Attention de respecter la limite de remplissage est fortement recommand de placer un filtre en amont du port du vide Examiner r guli rement vos cultures afin de d tecter rapidement toute trace de contamination bact riennes moisissures En cas de contaminations prenez les mesures qui s imposent voir la section d contamination des incubateurs V rifier r guli rement la pr sence de mycoplasmes dans vos cultures et sur r ception d une nouvelle lign e Les nouvelles lign es doivent tre mises en quarantaine Ne pas les placer avec les autres D contaminer l thanol 70 tout le mat riel que vous introduisez dans l ESB pour viter d y faire entrer des contaminants Reposer le bouchon sur la bouteille de milieu que vous utilisez le plus rapidement possible pour minimiser les risques de contamination Placer le bouchon l enver
3. d chets solides avec du ruban adh sif ne pas faire de n ud l int rieur de la hotte et le d poser dans le bac r serv aux d chets biom dicaux Utiliser de l thanol 70 ou tout autre d sinfectant prouv efficace pour d contaminer toutes les surfaces internes de l enceinte incluant les parties distales et lat rales Ne pas teindre la hotte laisser la ventilation en continu teindre la lumi re fluorescente Rebrancher votre pipetteur automatique pour le recharger Certaines enceintes doivent fonctionner en tout temps en cas de doute v rifier aupr s de la personne responsable du laboratoire Enlever et accrocher votre sarreau sur les crochets pr vus cet effet dans la salle de culture si vous pr voyez vous en servir nouveau Enlever vos gants et laver vos mains avant de tourner la poign e de la porte Bien refermer la porte en sortant Utilisation et entretien des lampes UV gt Le manuel de s curit biologique en laboratoire 3i me dition publi par l Organisation Mondiale de la Sant stipule II n est pas n cessaire d quiper les ESB de lampes ultraviolets Cette technique de d contamination doit tre consid r e comme secondaire car son efficacit reste limit e Elle ne peut en aucun cas se substituer une d contamination manuelle avec un d sinfectant chimique La personne responsable de l entretien du laboratoire doit d poussi rer au moins chaque semaine le tube
4. liquides doivent tre d pos s dans des contenants que vous avez install s l int rieur de l enceinte et ce jusqu la fin de votre p riode de travail Les d chets solides doivent tre plac s un sac Lorsque vous avez termin refermer le sac avec du ruban adh sif et le d poser dans un bac pour d chets biom dicaux Les d chets liquides peuvent tre aspir s par le syst me de vide qui les r cup re dans un erlenmeyer dans lequel a t mis un d sinfectant On peut galement les verser dans un b cher qui contient galement un certain volume de d sinfectant Pour ce dernier il est recommand d utiliser un entonnoir afin de minimiser les claboussures Ne jeter le liquide dans le lavabo qu apr s vous tre assur que le temps de contact avec le d sinfectant a t suffisant c est dire au moins 30 minutes Lavez puis remplissez du nouveau avec du d sinfectant Il est strictement interdit d utiliser un bec Bunsen dans une ESB La pr sence d une flamme nue cr e de la turbulence perturbe la configuration de l coulement de l air et pourrait endommager le filtre HEPA sans compter le risque d incendie en pr sence de substances inflammables tel que l thanol votre travail termin Fermer ou recouvrir tout votre mat riel D sinfecter toutes les surfaces potentiellement contamin es avec du papier imbib d thanol 70 Vous pouvez maintenant le sortir de l enceinte Refermer le sac de
5. CRCHUM CENTRE DE RECHERCHE novembre 2013 Proc dures d utilisation des salles de culture _ NC1 1 Fonctionnement Les salles de culture au CRCHUM ont t r parties entre les chercheurs pour en faciliter le fonctionnement mais ne sont pas exclusive une quipe 2 R servation Il est important de r server en ligne GRR l utilisation de l enceinte de s curit biologique ESB que vous pr voyez utiliser avant chaque p riode de travail La r servation d une ESB permet la gestion si deux personnes d sirent utiliser une ESB au m me moment Celle qui aura r serv aura la priorit 3 Acc s Les utilisateurs doivent avoir pris connaissance de ce document et re u une formation sur les proc dures d utilisation des salles de culture par le Conseiller sant et s curit secteur biorisque du CRCHUM avant d y travailler inclus dans la formation sur la bios curit g n rale normalement suivie par tout le personnel de laboratoire Le conseiller en sant et s curit secteur biorisque doit conna tre galement l emplacement du mat riel et des produits risque et doit s assurer que les manipulations pr vues correspondent bien au niveau de confinement 1 Il vous informera galement des autres formations qui vous seront n cessaires telles que sur la radioprotection ou le SIMDUT 4 Bios curit et Formation Le conseiller sant et s curit secteur biorisque du CRCHUM est la personne ressource c
6. UV froid avec un linge imbib d thanol 70 L efficacit des UV pourrait tre affect e par l accumulation de poussi re sur sa surface Ne jamais toucher la lampe UV directement avec vos doigts Toujours porter des gants Les huiles naturelles des mains peuvent laisser une empreinte et cr er un espace vide sur la surface du tube L exposition aux rayonnements UV peut gravement endommager la corn e de vos yeux mais galement provoquer des br lures cutan es Ne vous exposez pas inutilement teignez la lumi re ultraviolette d s que vous entrez dans le laboratoire Maintenance et certification gt Les ESB sont certifi es annuellement par la compagnie Certifiltre Elle est prise en charge par la direction du centre de recherche Une certification doit galement tre effectu e apr s r paration ou d placement Si vous prouvez des probl mes avec une ESB contacter imm diatement le superviseur du laboratoire qui placera un appel de service Ne pas l utiliser Si l alarme de l enceinte se d clenche par exemple en cas d arr t des moteurs stopper imm diatement vos manipulations D contaminer puis retirer votre mat riel qui se trouvait l int rieur sans oublier de d contaminer l int rieur de l ESB Nettoyage et d contamination des surfaces de travail gt Apr s chaque p riode de travail l utilisateur doit d contaminer toutes les surfaces ainsi que les quipements qui ont servi au cours des manipu
7. cs jaunes biorisque Ramasser le coupant tranchant avec une pince et le d poser dans un contenant rigide en plastique r sistant aux perforations Si n cessaire recommencez Proc der au nettoyage final de la surface de travail avec l thanol 70 Laisser fonctionner la hotte encore 10 minutes Enlever les quipements de protection individuelle jeter les gants et changer de sarrau Se laver les mains avec du savon la fin de l op ration D versement dans la centrifugeuse VNYNNNN NY gt viter de respirer les a rosols Aviser vos coll gues qui se trouvent dans la pi ce et qui devront sortir Signaler le d versement au responsable de laboratoire Laisser fonctionner les ESB qui aideront filtrer les a rosols en suspension Maintenir la porte du local ferm e En portant des quipements de protection gants lunettes masque de type N95 sarrau ouvrir le couvercle de la centrifugeuse retirer tous les tubes bris s les godets le rotor Placer le tout sous l enceinte de s curit biologique D contaminer tous les chantillons qui n ont pas t endommag s avec du Virox concentr Laisser agir 10 minutes puis les rincer l eau distill e D contaminer le rotor et les godets dans un autoclave v rifier aupr s du manufacturier si compatible avec cette m thode de d contamination ou les tremper dans un bain de Virox concentr pendant 10 minutes Recouvrir les surfaces contamin es avec du pap
8. flaque et laisser en contact au moins 10 minutes Ne pas utiliser de vaporisateur afin de minimiser la formation d a rosols Ramasser et jeter le tout dans un contenant pour d chets biom dicaux doubl e de deux sacs jaunes biorisque Ramasser le coupant tranchant avec une pince et le d poser dans un contenant rigide en plastique r sistant aux perforations Si n cessaire recommencez Faire un nettoyage final l alcool Enlever les quipements de protection individuelle jeter les gants avec les d chets biom dicaux d sinfecter la pince avec du Virox dilu 1 16 et changer de sarrau Se laver les mains avec du savon la fin de l op ration Note Si vous n tes pas en mesure de contr ler la situation ou vous vous sentez incapable de proc der la d contamination des lieux appeler la personne ressource du laboratoire et composer le 5555 D versement l int rieur d une ESB v Laisser fonctionner la hotte biologique Porter l quipement de protection individuelle gants lunettes de protection et sarrau Recouvrir les surfaces contamin es avec du papier absorbant verser lentement du Virox concentr par un mouvement circulaire de la p riph rie vers le centre de la flaque et laisser en contact au moins 10 minutes Ne pas utiliser de vaporisateur afin de minimiser la formation d a rosols 10 A4 YYYV Y Ramasser et jeter le tout dans un contenant pour d chets biom dicaux doubl e de deux sa
9. fonctionner la les ESB elles aideront filtrer les particules en suspension du local Identifier la surface contamin e de fa on mesurer l ampleur du d versement Porter des v tements de protection neufs sarrau gants lunettes de protection et masque de type N 95 si n cessaire N B Pour pouvoir porter un masque N95 vous devez avoir subi un essai d ajustement contacter votre agent de bios curit gt Note Proc der au nettoyage du d versement Nous vous recommandons de consulter pr alablement les fiches signal tiques des produits ou d sinfectants que vous pr voyez utiliser puisque ce sont des produits chimiques En cas de d versement d un produit dangereux sur vos v tements ou sur la peau retirer imm diatement vos v tements et lavez vous l eau et au savon Si la zone de contact avec la peau est consid rable il pourrait tre recommand de prendre une douche d urgence Chaque utilisateur devrait toujours avoir des v tements de rechange proximit de l endroit o il manipule des produits biorisque Des uniformes hauts et pantalons seront disponibles dans les trousses de d versement Placer les v tements souill s dans un sac Ne jamais apporter de v tements contamin s chez vous pour les laver gt gt Recouvrir les surfaces contamin es avec du papier absorbant puis verser lentement du Virox concentr par un mouvement circulaire de la p riph rie vers le centre de la
10. ier absorbant verser lentement du Virox concentr par un mouvement circulaire de la p riph rie vers le centre et laisser en contact au moins 10 minutes Ne pas utiliser de vaporisateur pour viter la formation d a rosols Ramasser et jeter le tout dans un contenant pour d chets biom dicaux doubl e de deux sacs jaunes biorisque Ramasser le coupant tranchant avec une pince et le d poser dans un contenant rigide en plastique r sistant aux perforations Si n cessaire recommencez Essuyer la cuve de la centrifugeuse deux reprises avec du Virox concentr et rincer l eau bien s cher Enlever les v tements de protection individuelle jeter les gants avec les d chets biom dicaux et changer de sarrau Se laver les mains avec du savon la fin de l op ration La proc dure d urgence s appliquera conform ment au Plan d urgence du CHUM 11 Annexe Rappel des r gles de base en culture cellulaire v v VNNVY Y VVYNNN NV Fermer rapidement les bouchons au moment de sortir vos flacons de culture de l incubateur Nettoyer avec de l thanol 70 les bo tes de p tris et les bouteilles de culture avant de les placer sous l ESB Si vous renversez du milieu ou des cellules dans l ESB ponger et d sinfectez imm diatement avec le d sinfectant appropri S assurer que le bac de r cup ration en avant de l enceinte a t d contamin la suite d un d versement Manipuler une lign e
11. lations Ne jamais quitter le laboratoire sans avoir d contamin toutes les surfaces de travail et avoir d pos les sacs de d chets biom dicaux dans le contenant appropri D contamination des d chets liquide Tous les d chets doivent tre d contamin s o Liquides addition de 1 10 volume de Virox concentr Laisser agir 30 minutes puis jeter imm diatement dans l vier sous l eau courante o Solides aucune quantit importante de liquide ne doit se retrouver dans les sacs destin s aux d chets solides Ne jamais d contaminer dans l autoclave du mat riel qui contient de l eau de javel ou des substances cytotoxiques car des vapeurs tr s toxiques seraient lib r es dans la pi ce Radioactifs liquides et solides Jeter les d chets radioactifs selon les proc dures nonc es dans le manuel de radioprotection du CHUM Les utilisateurs ont la responsabilit d liminer ces d chets apr s chaque p riode de travail Nous vous rappelons qu il est strictement interdit d autoclaver des d chets radioactifs gt D contamination de la verrerie La verrerie doit tre rinc e l eau puis l thanol si n cessaire avant d tre d pos e dans le bac destin cet effet C est le personnel de la laverie qui est responsable de la transporter la laverie centrale du CRCHUM pour tre lav e gt Les sarraus sales doivent tre apport s la distributrice sarrau de pr f rence dans un sac ou retourn s l enver
12. n des salles de culture pour les chercheurs du CRCHUM Le CRCHUM assume les co ts d alimentation en CO pour les incubateurs ainsi que la maintenance et l entretien des syst mes de production d eau ultra pure et d osmose invers e Chaque quipe est responsable de commander son propre mat riel L institution assume les frais normaux de nettoyage de base plancher lavabo etc mais les quipes ont la responsabilit de maintenir la salle de culture propre et en ordre PROC DURES EN CAS DE D VERSEMENT ACCIDENTEL L utilisateur est le premier intervenant lorsque survient un d versement N oubliez pas que des trousses pr tes l emploi pour d versements chimiques ou biologiques sont votre disposition sur chaque tage D versement de produits biorisque sur le sol ou un comptoir gt viter de respirer les a rosols gt Informer les autres travailleurs qui se trouvent dans la pi ce qu un d versement vient de se produire Ils devront quitter le laboratoire gt Garder la porte de la salle de culture ferm e le temps de permettre aux a rosols de retomber Attendre au moins 30 minutes avant de r int grer le local et de proc der la d contamination v Attention si vos v tements de protection ont t contamin s lors du d versement les retirer avant de sortir Signaler le d versement au responsable du laboratoire et au Conseiller sant et s curit secteur biorisque s il y a lieu Laisser
13. ncipe physique de laminarit de l air filtr sur le plan de travail Notez que le fait de travailler deux dans une ESB peut grandement augmenter le risque de contamination puisque cela ne respecte pas la norme NSF49 utilis e pour certifier ces appareils Vous devez en tre conscient N introduisez dans l ESB que le mat riel essentiel pour votre session de travail Retirer tout le mat riel inutile de la surface de travail N y laisser pas trainer des petits morceaux de papier car ils risqueraient d tre aspir s par la ventilation La r paration de l enceinte sera alors factur e votre laboratoire Proc dure avant l utilisation d une ESB gt v Assurez vous que l alarme est en position de marche ON Elle vous avertira en cas de probl me avec l enceinte V rifier que les bouches d entr e et d vacuation de l air ne sont pas obstru es V rifier que l coulement d air se fait bien vers l int rieur en tenant un papier mouchoir type Kimwipes au milieu de la bordure du panneau d observation le papier doit tre aspir vers l int rieur Si ESB ne fonctionne pas ne l utilisez pas et poser une affiche hors d usage Un appel de service devra tre plac Dirigez vous vers une autre enceinte D contaminez toutes les surfaces int rieures de l enceinte avec un d sinfectant prouv efficace N utilisez pas d eau de javel car corrosif sur des surfaces m talliques N utilisez pas de Vaporisa
14. ns environnementales propres cet quipement temp rature de CO2 On y trouvera aussi une application sp cifique s il y a lieu gt Ouvrir la porte ext rieure puis la porte int rieure gt D poser ou retirer les contenants de culture avec lesquels vous devez travailler gt Refermer les deux portes Entretien des incubateurs gt Toutes les semaines remplir le bac d eau l int rieur de chaque incubateur V rifier les surfaces des tablettes pour toute trace de contamination Une odeur de moisissure indique aussi une contamination Proc der alors la d contamination section suivante gt Toutes les deux semaines nettoyer le bassin d eau et le remplir d eau fra che Nettoyer les tablettes et les parois accessibles gt Au besoin nettoyer fond l incubateur puis indiquer sur un ruban gomm de couleur coll sur la porte votre nom et la date de nettoyage gt V rifier la concentration de CO de l incubateur D contamination des incubateurs gt Bains Sortir de l incubateur contamin tous les r cipients de culture et les transf rer dans un autre incubateur alors d sign en quarantaine i e jusqu ce que les cultures puissent tre transf r es dans des r cipients st riles et propres que les r cipients souill s soient jet s et que cet incubateur soit son tour d contamin Sortir les tablettes les parois de chaque c t interne de l incubateur et la partie prot geant le ve
15. ntilateur au plafond de l incubateur Apporter l vier Laver fond toutes les surfaces internes atteignables de l incubateur y compris le ventilateur et les deux portes avec un papier absorbant bien imbib de Virox 5 rincer avec de l eau distill e puis avec de l thanol 70 La vitesse de r apparition des contaminants d pend de ce nettoyage l vier bien brosser toutes les surfaces des tablettes et parois avec du Virox 5 rincer avec de l eau distill e Ass cher avec des papiers absorbants Autoclaver les parties retir es de l incubateur tablettes parois 30 minutes st rilisation et 30 minutes s chage Laisser bien refroidir Porter des gants propres Replacer dans l incubateur ses parties amovibles en prenant soin de placer les tablettes avec les bords repli s vers le haut Indiquer sur un ruban gomm de couleur coll sur la porte votre nom et la date de d contamination Les bains doivent tre lav s r guli rement au d sinfectant ex Virox dilu rinc s et remplis de nouveau avec de l eau contenant un agent algicide ex Bathclear de fa on r guli re par les utilisateurs Terminer le nettoyage en apposant un ruban identifiant la date et les initiales R frig rateurs cong lateurs gt gt P riodiquement v rifier la propret l ordre et le fonctionnement du frigidaire cong lateur et en faire l entretien Les produits contenants qui ne sont pas identifi s dont vous n avez plus be
16. ontacter pour tous les besoins de formations et de bios curit R gles de base sur Salle et propret des lieux La contamination crois e est un probl me majeur en culture cellulaire La propret des lieux dans une salle de culture est donc la base des bonnes pratiques Veillez conserver la pi ce propre en ordre et circuler lentement lorsqu un utilisateur manipule dans une ESB pour ne pas d ranger le flux d air de l enceinte Ceci est d autant plus vrai que chaque salle de culture du CRCHUM est susceptible d tre utilis es par plusieurs utilisateurs Tous les utilisateurs des salles de culture au CRCHUM devront recevoir une ou des formations par le conseiller sant s curit secteur biorisque adapt s aux besoins avant de d buter leurs manipulations Bref rappel v v Le pipetage par la bouche est strictement interdit r gle g n rale en laboratoire Les cheveux longs doivent tre attach s r gle g n rale en laboratoire Les plaies ouvertes coupures et gratignures doivent tre recouvertes d un pansement imperm able r gle g n rale en laboratoire Une affiche l entr e vous indiquera le niveau de confinement et les conditions d entr e du laboratoire Il est strictement interdit de manger de boire et d y introduire des effets personnels lecteur MP3 cellulaires qui ne sont pas n cessaires au travail dans une salle de culture Avoir re u les autorisations n cessaires
17. s Rappel pour l utilisation et l entretien des instruments en salle de culture Il est primordial que les quipements utilis s en salle de culture hottes incubateurs centrifugeuses r frig rateurs microscopes bain marie etc soient nettoy s et entretenus r guli rement Centrifugeuses v Toujours lire le manuel d utilisation avant de vous en servir pour la premi re fois gt Respecter les recommandations des manufacturiers gt Assurez vous que vos tubes sont bien quilibr s et bien install s dans le rotor avant de d marrer votre centrifugation Incubateurs gt Les incubateurs doivent tre nettoy s r guli rement par les utilisateurs chaque 3 mois ou plus ex si vous observez des signes tels que des cercles blancs car le taux d humidit et la temp rature favorisent le d veloppement de contaminants Suivre les indications du manufacturier gt Il faut maintenir un bon taux d humidit 95 dans un incubateur et vous assurer que le niveau d eau dans la cuve est suffisant Y ajouter de l eau distill e ou RO Cette humidit contribue limiter l vaporation des milieux de culture gt En cas d anomalie ou panne la personne responsable de l quipement doit s assurer d apporter les correctifs et d aviser les utilisateurs Proc dure d utilisation des incubateurs Les incubateurs servent la croissance de lign es cellulaires Sur la porte de chaque incubateur apparaissent les conditio
18. s sur la paillasse derri re la bouteille Ne pas manipuler directement au dessus d un flacon de cellules ouvert ou d une bouteille de milieu ouverte Ne pas installer trop de mat riel sous la hotte pour ne pas g ner le flux d air Si vous avez vous d placer en arri re d une enceinte d j occup e faite le lentement Il est conseill d utiliser vos propres bouteilles de milieu plut t que de les partager Ne pas conserver les milieux de culture trop longtemps dans les r frig rateurs la dur e de conservation d un milieu contenant de la glutamine et du s rum ne devrait pas exc der 6 semaines La salle de culture est r serv e uniquement pour faire de la culture cellulaire Ne jamais y manipuler d animaux Ne jamais y faire de la culture bact rienne Garder la pi ce propre et en ordre limiter vos d placements Garder la porte ferm e en tout temps Apr s avoir termin vos manipulations ranger nettoyer et d sinfecter votre poste de travail et sous l ESB de mani re ce que l utilisateur suivant puisse travailler dans de bonnes conditions 12
19. soin ou qui sont p rim s doivent tre limin s Mat riel individuel et stockage gt v Chaque laboratoire doit utiliser son propre mat riel consommables embouts tubes plaques pipettes s rologique et ses propres instruments pipetteur automatique etc Les micropipettes et les pipetteurs automatiques doivent tre nettoy s apr s usage Identifier votre mat riel avec le nom de votre laboratoire Jeter ce qui n est plus utilis Ne gardez que ce qui est strictement n cessaire votre travail viter d entreposer particuli rement des bo tes de carton des instruments qui ne sont pas utilis s ou de d poser trop de mat riel sur les comptoirs qui sont source de poussi re et donc de contamination Notez que le CRCHUM assume les frais du CO canalisation centrale n cessaire au fonctionnement des incubateurs D poser les d chets La proc dure pour disposer ad quatement des d chets biom dicaux que vous produisez est normalement expliqu e lors de la formation sur la bios curit g n rale que tout nouvel employ de la recherche fondamentale doit suivre gt Une fois votre bac ou votre bo te rempli vous devez bien le refermer avant de le transporter dans la chambre froide d sign e de votre tage Elles sont normalement situ es pr s du monte charge soit R0O8 126 R0O9 126 R10 126 R11 126 R12 308 Vos d chets sont alors ramass s par le service d hygi ne et salubrit pour tre d con
20. tamin s A4 gt Les bacs pleins sont automatiquement chang s contre des bacs vides avec sacs et laiss s dans cette m me chambre froide gt Les bo tes en carton utilis es pour l limination du mat riel cytotoxique doivent quant elles tre command es au centre de distribution Un endroit sera d sign pour aller vous procurer les autocollants y apposer Entretien du local v toutes les semaines ou plus selon le besoin l vier et les comptoirs doivent tre nettoy s gt Un linge humide doit tre pass sur les tag res appareils ex portes frigo poign es etc gt Le plancher doit tre lav avec une solution d sinfectante appropri e toutes les semaines ou plus en cas de besoin PLAN D URGENCE Accidents impliquant des blessures corporelles piq re coupure gratignure gt Faire saigner sans pincer le pourtour de la plaie gt Laver abondamment la plaie l eau et au savon ou avec un savon antiseptique Proviodine ou Hibitane gt Ne pas utiliser de brosse pour ne pas augmenter le traumatisme N utiliser ni eau de javel ni alcool comme antiseptique gt Aviser le responsable du laboratoire et remplir un rapport d accident gt S il y a lieu aviser l agent de s curit biologique Des mesures correctives suite une enqu te devront tre prises pour viter qu un autre accident du genre ne se reproduise Panne lectrique Prenez note que les quipemen
21. teur car les a rosols produits pourraient endommager les filtres HEPA Rassembler et placer l int rieur de l enceinte tout le mat riel qui sera n cessaire votre travail et pr alablement d contamin avec de l thanol 70 N obstruez pas les grilles d a ration La surface de travail peut tre recouverte d un papier absorbant doubl de plastique S parer les articles propres des articles contamin s comme indiqu sur le sch ma ci dessous en cr ant 3 zones distinctes Une fois install attendez une minute avant de commencer travailler pour permettre au flux d air de se stabiliser LL 7 HA Grille d adm sion et d vacuation d air NE PASOBSTRUER 7 VA Zone oour d ooserle mat riel Proc dure de travail dans l ESB Une fois VNNVY NV v A4 A4 Porter les quipements de protection personnelle exig s sarrau et gants Travailler le plus possible au centre de l enceinte en gardant une distance d au moins 6 pouces par rapport au panneau frontal Lorsque le risque de formation d a rosols est lev travailler vers le fond de l enceinte viter tout mouvement brusque et inutile des mains et des bras sous la hotte Ces mouvements perturbent le flux laminaire Glisser les bras perpendiculairement au panneau pour entrer ou sortir de l enceinte Laisser le flux d air se stabiliser quelques secondes avant de reprendre le travail Tous les d chets qu ils soient solides ou
22. ts critiques du laboratoire sont branch s sur des circuits d urgence prises rouges En cas de panne une g n ratrice se met en marche pour les alimenter Cela inclus entre autres la lumi re la ventilation les ESB les incubateurs et les cong lateurs Si les circuits d urgence ne se sont pas enclench s refermez tous vos contenants et quitter le laboratoire apr s avoir retir vos quipements de protection personnelle Avisez imm diatement le responsable Feu Alarme g n rale Si l alarme g n rale est d clench e gt Ne paniquez pas gt Sortez de la salle selon les proc dures normales gt Quittez le centre de recherche par les escaliers de secours Feu local Si le feu se d clare dans la salle de culture et que vous ne pensez pas tre capable de le maitriser extincteur gt Ne paniquez surtout pas gt Contacter la s curit au poste 5555 gt Quittez imm diatement la pi ce Rappelez vous que la s curit du personnel est prioritaire NC2 et NC3 Aucun organisme appartenant au groupe de risques 2 ou 3 ne doit tre manipul dans les salles de culture standard Votre agent de bios curit pourra vous renseigner sur le groupe de risque auquel appartient le mat riel que vous pr voyez manipuler Sachez que pour tre autoris manipuler dans un laboratoire de niveau de confinement 2 ou 3 vous devez suivre des formations sp cifiques et adapt es Frais Il n y a aucun frais pour l utilisatio
23. us laver les mains Le sarrau port dans la salle de culture est avec poignets lastiques et bouton pression Vous devez laisser votre sarrau l int rieur de la salle seulement pour un NC2 c est une obligation Les salles de culture sont munies de crochets pour y laisser votre sarrau Jeter vos gants lorsque le travail en culture est termin ou si vous avez manipul du mat riel contamin s Il est normalement recommand de retirer ses gants aseptiquement l int rieur de l enceinte avant de retirer ses mains puis d en enfiler une nouvelle paire Ne pas vaporiser vos gants avec de l alcool a peut les rendre plus poreux et r duire leur efficacit Avant de commencer travailler nettoyer la surface de travail de l enceinte de s curit biologique ESB avec de l thanol 70 Ne pas utiliser de vaporisateur pour ne pas endommager les filtres HEPA utiliser une pissette REMARQUE Pour la d sinfection utiliser un d sinfectant dont l efficacit est reconnue pour le mat riel manipul Votre conseiller sant s curit secteur biorisque pourra vous aider le s lectionner Enceinte de S curit Biologique ESB L utilisation d une enceinte de s curit biologique ESB est un moyen efficace de pr venir la contamination de votre mat riel mais galement de prot ger l utilisateur et l environnement condition qu elle soit utilis e ad quatement gt gt Respecter le pri
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