test de souches bactériennes antagonistes de monilioses
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1. tre consid r e comme aussi efficace que le traitement chimique de r f rence ESSAI 2 Diam tre en mm 60 50 404 amp T moin J2 107 30 4 N J2 10 8 7 7 7 J11 107 J11 10 8 E prodione 20 VAR J 4 5 D veloppement du Monilia sp face aux antagoniste a b c groupes homog nes form s par un test de Newman Keuls pour 0 05 Taille des l sions en mm et efficacit Date d observation J 4 5 J 7 J 14 T moin non trait 3 A 25 4 A 59 3 A J2 107 0 3 B 90 1 3 6 BC 89 2 35 B 41 1 J2 10 0 B 100 3 6 BC 92 5 33 1 B 47 6 J11 107 0 B 100 11 1 B 73 5 53 9 A 9 1 J11 10 0 B 100 5 4 BC 77 6 32 2 B 45 7 Iprodione 0 B 100 0 8 C 100 2 8 C 95 4 Ecart type r siduel 2 6 9 55 19 1 A B C groupes form s par un test de Newman Keuls pour a 0 05 CONCLUSIONS A partir de 11 5 jours la souche J11 n a plus aucun effet significatif si elle est appliqu e une concentration de 10 UFC ml Il faut exposer les conidies de Monilia laxa dix fois plus de bact ries de cette souche d s le d but de l exp rience pour obtenir une efficacit semblable celle de la souche J2 Pourtant l effet de la concentration initiale en bact ries J2 n affecte pas ou tr s peu l efficacit 3 5 Il semble donc qu il y ait un seuil atteindre au niveau de la concentration du traitement pour que les bact ries entr2. 5 10 conidies ml Ajuster 10 conidies ml en diluant 50 fois soit 100u1 dans 5ml d eau physiologique st rile J2 et J11 Sous la hotte repiquer les deux souches dans une bo te de milieu TSA 24 48 h avant la mise en suspension Pr lever des bact ries gr ce une anse st rile les mettre en suspensions dans 4 5 ml d eau physiologique Homog n iser au vortex Mesure de densit optique D 0O 580 nm D termination de la concentration c de la solution gr ce aux r sultats obtenus par spectrophotom trie en 2003 Souches D O Concentration bact riennes mesur e Equanon UFC ml J2 0 675 c D 0 4 76 10 J2 14 1 10 J11 0 033 c D 0 4 69 10 J11 7 107 Ajustement 10 et 10 UFC ml par dilution Concentrations finales observ es J2 1 4 10 et 1 4 10 UFC ml J11 7 10 et 1 4 10 UFC ml Inoculation des pommes lots de 10 fruits par modalit Faire un trou sur chaque joue l aide du perceur calibr en inox Introduire les 15ul du traitement correspondant voir tableau ci dessous 1 heure plus tard introduire au m me endroit 1 Sul de la solution de Monilia sp Modalit s test es Trois essais successifs sont pr sent s les modalit s sont les m mes dans les deux premiers essais Quantit de solution en ul pour chaque modalit et chaque blessure Eau J2 J11 Iprodione Monilia sp MODALITES physiol
3. J11 et quelque soit la concentration utilis e les l sions sont l g rement plus importantes que sur le t moin Cependant J11 ne s est pas d velopp correctement apr s le repiquage effectu la veille de la pr paration de la suspension il est donc probable que les cellules bact riennes de cette souche n taient pas viables au moment du traitement Le pathog ne s est d velopp sans interaction entre les deux populations et aucun antagonisme n a t possible Taille des l sions diam tre en mm et efficacit s Date d observation J 5 J 7 J 13 J 21 T moin non trait 4 75 NS 13 78 A 42 53 A 55 68 A J2 107 5 08 NS 6 8 12 83 A 6 9 30 43 A 28 5 42 68 A 23 3 J2 10 0 85 NS 82 1 3 25 B 76 4 11 38 B 73 3 16 75 B 69 9 J11 10 6 13 NS 28 9 17 55 A 27 4 40 18 A 5 5 55 10 A 1 J11 108 5 10 NS 7 4 17 20 A 24 9 48 73 A 14 6 56 75 A 1 8 Iprodione 0 NS 100 0 B 100 0 B 100 0 B 100 Ecart type r siduel 8 7 13 3 28 2 27 8 A B groupes form s par un test de Newman Keuls pour a 0 05 NS test non significatif x efficacit par rapport au t moin CONCLUSIONS A partir de J 5 les r sultats du traitement avec J2 10 UFC ml ne sont pas significativement diff rents de ceux obtenus gr ce l iprodione A la concentration de 10 UFC ml on obtient une efficacit moyenne de 73 3 J2 peut ici
4. ARBORICULTURE 2006 fiche 3 02 02 04 AB A06PACA 09 UTILISATION DE SOUCHES BACTERIENNES ANTAGONISTES DE MONILIA SP Test de diff rentes concentrations et de deux proc dures blessure et trempage Fran ois Warlop GRAB Christelle Dijoud Stagiaire Depuis 2001 un travail a t entrepris pour isoler et tester des agents microbiens capables de limiter le d veloppement des monilioses en conservation test s par inoculation artificielle Le travail r alis cette ann e poursuit les essais des ann es pr c dentes en am liorant le protocole utilis puisque plusieurs doses sont test es et deux modes d application utilis s afin d approcher les conditions pratiques d utilisation Fruit pommes Golden Delicious amp Gala Pathog ne Monilia sp Antagonistes bact riens J2 et J11 Trois essais successifs sont pr sent s dans ce compte rendu 1 METHODE Pr paration des suspensions Monilia sp En conditions st riles hotte flux laminaire r cup rer les conidies pr sentes sur les p ches inocul es 4 5 jours plus t t l aide d un pinceau les mettre en suspension dans un tube de 4 5 ml d eau physiologique 90 mg de NaCl dans 10 ml d eau distill e avec 0 05 de tween 80 Homog n iser Compter avec une cellule de Malassez voir mode d emploi h matim tre sous microscope objectif X20 avec un fort contraste Ph1 et peu de lumi re gt 198 conidies dans 40 rectangles
5. e en concurrence avec le Monilia sp Ce seuil serait diff rent pour chaque souche 10 UFC ml pour J2 et 10 UFC ml pour J11 ESSAI 3 Voici les r sultats des d veloppements de l sions obtenus apr s trempage des fruits dans les solutions d antagonistes Diam tre en mm 100 904 80 4 704 60 4 50 40 a 30 224 10 nb b b 0 y J 5 m T moin N J2 J11 E prodione a w o D veloppement du Monilia sp face aux antagonistes appliqu s par trempage a b c groupes homog nes form s par un test de Newman Keuls pour a 0 05 Taille des l sions en mm et efficacit Date d observation J 5 J 7 J 13 T moin non trait 5 1 31 A 91 3 A J2 10 0 B 100 9 1 B 65 9 37 7 B 58 8 J11 10 1 5 B 70 6 23 8 A 6 6 94 A 2 9 Iprodione 0 B 100 0 C 100 0 Cc 100 Ecart type r siduel 4 1 11 7 25 0 A B C groupes form s par un test de Newman Keuls avec a 0 05 x efficacit par rapport au t moin CONCLUSIONS Les premiers sympt mes apparaissent 4 jours apr s l inoculation Au bout de 12 jours les pommes de la modalit t moin sont enti rement pourries Les fruits trait s avec J11 pourrissent autant que le t moin Aucun d veloppement de Monilia sp n a eu lieu en pr sence d Iprodione et il est tr s inhib par J2 qui pr sente des efficacit s int ressantes pouvant aller encore jusqu 66 Le
6. ogique 10 10 107 10 Rovral 10 1 t moin positif 15 15 2 15 15 3 15 15 4 15 15 5 15 15 6 t moin n gatif 15 15 Iprodione r f rence chimique Dans le 3 essai l application des agents antagonistes est r alis e par trempage des fruits pour se rapprocher des conditions d utilisation pratique La concentration en antagonistes est alors de 107 UFC ml Observations Mesure du diam tre des l sions deux fois par jour l aide du pied coulisse pendant 14 20 jours selon l volution des l sions 2 RESULTATS ESSAI 1 La temp rature moyenne durant l exp rience est de 20 C un maximum de 21 3 et un minimum de 18 3 ont respectivement t relev s le 10 10 06 et le 23 10 06 Diam tre en mm 60 50 T moin En J2 10 7 405 J2 10 8 30 aJ11108 m lprodione 20 B 104 x C D veloppement du Monilia laxa face aux antagonistes bact rien a b groupes homog nes form s par un test de Newman Keuls pour Q 0 05 ns test non significatif Les premi res mesures de diam tre peuvent tre r alis es 4 5 jours apr s l inoculation en dehors des pommes trait es l Iprodione qui ne pr sentent aucun d veloppement du Monilia sp Le diam tre moyen est inf rieur 17 mm pour J2 108 UFC ml et 43mm pour J2 10 UFC ml alors qu il est d environ 55 mm pour les autres modalit s J2 semble donc relativement efficace Avec
7. trempage semble donc pr senter un int r t jusqu ici inf rieur l application par inoculation Son d veloppement devra toutefois tre optimis pour pouvoir envisager de travailler avec ce genre d antagonistes ANNEE DE MISE EN PLACE 2000 ANNEE DE FIN D ACTION 2010 ACTION nouvelle O encours en projet O Renseignements compl mentaires aupr s de C Gomez G Libourel S J Ondet L Romet et F Warlop GRAB Agroparc BP 1222 84911 Avignon cedex 9 tel 04 90 84 01 70 fax 04 90 84 00 37 mail warlop grab tiscali fr Mots cl s du th saurus Ctifl Agriculture Biologique maladies de conservation p ches post r colte huiles essentielles Date de cr ation de cette fiche janvier 2007
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