Home

ETUDE de la PHYTOCHIMIE et de L`ACTIVITE ANTIPALUDIQUE de

1. 0 86 Rouge 0 89 Visible Violette 0 95 Rouge Rouge D coct 0 1 Visible Rouge tre 0 17 0 25 0 34 Gris tre 0 4 Rouge 0 46 Visible 0 54 Brune 0 75 Violette 0 81 Visible 0 86 0 90 Visible D coct puis 0 1 Brune 0 26 Brune Gris tre 57 0 45 Brune Rouge tre 0 55 Visible Gris tre 0 67 Visible Brune 0 75 Brune 0 82 Visible 0 91 Rouge Mac r 0 15 Brune 0 21 Visible 0 26 Rouge 0 32 Rouge 0 77 Brune 0 81 Visible 0 85 Rouge 0 90 Violette Rouge 0 95 Visible Toutes les taches visibles 254 nm sont de couleur gris tre Apr s r v lation avec le r actif de Godin plusieurs taches ont apparu color es en rouge Espace image r serv Figure N 6 CCM des extraits dans le syst me chloroforme m thanol eau 65 35 5 r v l e avec le r actif de Godin 3 extrait thanolique 4 10 extrait thanolique puis 5 extrait m thanolique 6 d coct 7 mac r 8 d coct puis 9 digestion Tableau N 8 Rf et couleurs des taches observ es 254 366 nm et apr s r v lation avec le r actif de Godin syst me de migration ligroin ac tate d thyle Nature des Taches extraits Rf 254 366 Godin Dichlo
2. 2 1 6 PRESENTATION POSOLOGIE TRAORE 1999 WHO 2000 L a quinine se pr sente sous forme Comprim s QUINIMAX P QUINIMAX LAFRAN Ampoules injectables QUINIMAX P QUINOFORME P PALUJET P La posologie La quinine peut tre administr e par voie orale dans un cas de paludisme non compliqu selon l un des sch mas suivants R gions o les parasites sont sensibles la quinine la posologie est de 8mg kg j 3 fois par jour de quinine base pendant 7 jours R gions o les parasites sont sensibles la combinaison sulfamide quinine la posologie est de 8mg kg 3 fois par jour de quinine base plus la sulfadoxine donn e le premier jour de traitement de la quinine R gions marqu es par une sensibilit d croissante du Plasmodium la quinine la posologie est de 8mg kg 3fois par jour de quinine base pendant 7 jours plus un sel de doxycycline 100mg par jour pendant 7 jours mais pas chez les enfants de moins de 8 ans et les femmes enceintes ou de la t tracycline 250 mg 4 fois par jour avec la m me contre indication ou m me de la clindamycine 300mg 4 fois par jour Si le traitement par voie orale n est pas possible la premi re dose de quinine peut tre administr e par voie intraveineuse sous forme de perfusion dans un liquide isotonique 596 de dextrose saline pendant 4 heures Si le traitement par iv n est pas possible la quinine peut tre administr e par voie intramusculaire dans ce cas le m dicament d
3. l tat frais o sec Les feuilles Le d coct est utilis en C te d ivoire au Burkina et en Centrafrique comme antidysent rique contre les maux de ventre au Ghana et comme emm nagogue Kerharo 1950 L corce de tronc selon le m me auteur est utilis e en association avec celle de Symphonia lobuliffera comme ap ritif Les racines seraient utilis es pour soigner la l pre Abbiw 1990 La poudre de feuilles appliqu e localement produirait une rapide cicatrisation des plaies et ulc res Kerharo 1950 En C te d Ivoire et au Mali Alchornea cordifolia est utilis dans le traitement du paludisme Mustofa et coll 2000 4 CHIMIE Les substances les plus anciennement connues sont des alcaloides mol cules instables leur taux varie en fonction de l organe tudi et selon la dur e de conservation de l chantillon ainsi l corce de tige contient entre 0 03 11 d alcaloides totaux les racines environ 0 05 96 et l corce de racines 0 20 96 Paris 1958 Deux mol cules de yohimbine ont t mise en vidence par chromatographie sur papier Leur identification n a pas t r alis e Bennet depuis 1950 avait mentionn la pr sence de tanins un taux de 10 96 dans les feuilles et 11 dans les corces de tiges Les acides gentisique et anthranique ont t identifi s dans les corces par Fereira en 1963 Les feuilles contiennent de la querc tine et du gallate d thyle Pruja 1987 L indol
4. Glucose 0 6875 Galactose 0 65 Mannose 0 7 Acide galacturonique 0 25 F digestion 0 25 0 65 0 68 0 7 F 2 digestion 0 65 Cette m thode de d termination est moins pr cise que la chromatographie en phase gazeuse elle n a pas permis l identification de tous les monosaccharides contenus dans les extraits 67 2 TESTS PHARMACOLOGIQUES 2 1 ACTIVIT ANTIOXYDANTE Tableau N 11 Rf des compos s ayant une activit antioxydante Nature des Extraits Ethanolique Rf des compos s actifs 0 0 22 0 4 0 85 0 95 Syst mes de solvants CHCI CH OH H20 65 35 5 Ethanolique puis 0 0 22 0 71 0 79 0 94 CHCI CH OH H20 65 35 5 M thanolique Digest Mac r D coct D coct puis Ether de p trole Dichlorom thane 0 0 09 0 2 0 94 0 0 11 0 39 0 0 07 0 15 0 94 0 0 09 0 43 0 35 0 39 0 0 15 0 24 0 0 29 0 46 0 67 0 85 0 87 0 0 16 0 047 0 95 CHCI CH OH H20 65 35 5 CHCI CHOH H50 65 35 5 CHCI CHOH H50 65 35 5 CHCI CH3OH H20 65 35 5 CHCI CHOH H50 65 35 5 Ligroin Ac tate d thyle 2 1 Ligroin Ac tate d thyle 2 1 Tous les extraits que nous avons r alis s poss dent des compos s activit antioxydante ces compos s n ont pas t identifi s mais leurs Rf ont t d termin s Ces substances sont surtout solubles dans l ther de p
5. c est dire 5 g de poudre dans 100 ml d eau distill e bouillante infuser pendant 15 mn puis filtrer 1 3 2 1 Les Tanins A 5 ml de ce filtrat ajouter 1 ml de FeCl 1 46 en pr sence de tanins il se d veloppe une coloration bleue noir tre Diff rentiation tanins galliques et cath chiques R action de STIASNY A 30 ml d infus ajouter 15 ml du r actif de Stiasny chauffer le m lange au bain marie pendant 15 mn l apparition de pr cipit s montre la pr sence de tanins cath chiques Pour r v ler les tanins galliques il faut saturer 10 ml de l infus avec l ac tate de sodium pulv ris et ajouter ensuite 1 ml d une solution de FeCl 1 le d veloppement d une teinte bleue noire indique la pr sence de tanins galliques non pr cipit s par le r actif de Stiasny 1 3 2 2 Les Flavonoides A 5 ml de l infus ajouter 5 ml d alcool chlorhydrique 1 ml d alcool iso amylique et quelques copeaux de magn sium l apparition d une coloration E rose orang e indique la pr sence de flavones Bi rose violac e indique celle des flavanones B rouge indique la pr sence de flavanols et flavanonols Cette r action est dite la Cyanidine La m me r action sans copeaux de magn sium mais chauff e au bain marie pendant 15 mn permet de d tecter la pr sence de Leucoanthocyanes en cas d apparition de coloration rouge cerise ou violac e 1 3 3 Recherche de d riv s Anthrac niques 39 1 3 3 1 An
6. decot E Numero tube Figure N 8 Courbe de fractionnement des extraits aqueux des rameaux feuill s de A c Cette courbe permet de d terminer les diff rentes fractions des extraits analys s Ces extraits ont donn chacun 3 fractions facilement identifiables sur la courbe part la digestion qui a donn une quatri me fraction sous forme d un pic Tableau N 9 Num ro des tubes des diff rentes fractions des extraits aqueux Extraits Fractions Num ro des tubes F1 7 22 D coct F2 23 60 F3 61 116 F1 10 35 D coct puis F2 36 54 F3 55 71 F1 6 30 F2 31 53 Digest F3 54 71 F4 72 83 61 1 4 3 La chromatographie en phase gazeuse Elle a permis d identifier plusieurs monosaccharides le glucose le galactose le rhamnose le xylose le mannose l arabinose et les acides galacturonique et glucuronique Teneur en sucre des extraits aqueux Pourcentage D c d c ep diges Extraits Figure N 9 Teneurs en sucre des extraits aqueux des rameaux feuill s de A c Le d coct puis est le plus riche en sucre avec 20 suivit du d coct total qui a 19 la digestion est la plus pauvre avec seulement 12 46 de sucre Pourcentage en sucre des fraction du d coct Pourcentage F1 F2 F3 Fractions Figure N 10 Teneur en sucre des fractions du d coct g 62 Pourcen
7. 250 10 60 Vert fonc Dichlorom thane 1 63 250 0o65 Vertnoir tre M thanol 36 4 250 14 56 Verd tre Ethanol puis 18 74 250 75 Jaun tre Ethanol total 12 01 an 12402 Jaune verd tre Digestion 8 22 156 33 5 26 Brune D coct puis 7 96 156 33 5 09 Brune D coct total 6 19 50 1238 Brune Mac r 13 06 an 2642 Brune Ce tableau nous donne les masses couleurs des extraits obtenus ainsi que les rendements des diff rentes extractions Les extraits sont g n ralement de couleur brune ou verte Se 1 2 SCREENING PHYTOCHIMIQUE Tableau N 5 Diff rents groupes chimiques recherch s dans la poudre de rameaux RECHERCHES Alcaloides Flavonoides Tanins Saponosides H t rosides cardiotoniques RESULTATS Base Pr cipit l ger Sel Pr cipit l ger Solanac es N gatif Pourcentage 0 1 96 G nines rose orang H t rosides Flavones R action avec FeCl R action avec HCI Cat chiques Galliques Mousse Indice de mousse bleu noir pr cipit rouge bleu noir bleu noir N gatif 0 R actif de Kedde rouge violac R actif de Baljet orang R actif de Raymond violet fugace St rols et triterp nes Anthrac niques combin s Anthraceniques libres Diff rentiation quinones H t rosides cyanog n tiques Coumarines Carot noides Compos s r ducteurs Oses et holosides Mucil
8. Diallo B Vanhaelen F R Vanhaelen M 1991 Triacyl benzenes and long chain volatile ketones from Cochlospermum tinctorium rhizomes Phytochimestry vol 30 12 4153 4156 Diallo B Vanhaelen F R Vanhaelen M Fiegel C Joyeux M Roland A Fleurentin J 1992 Further studies on the hepatoprotective effect of Cochlospermum tinctorium rhizomes Journal of Etnopharmacology 36 137 142 Doumbia S L 1994 Etudes des plantes r put es antipaludiques au Mali Th se de pharmacie Facult de M decine de pharmacie et D odontostomatologie Doumbo O 1992 Efficacit et tol rance de la triple association m floquine pyrimethamine sulfadoxine Fansinef dans le traitement des acc s palustres graves 36 Plasmodium falciparum au Mali propos de 100 cas Med Afr Noire 39 6 459 462 Duquenois P Anton R 1968 Contribution l tude chimique des feuilles de Cassia sieberiana D C Planta Medica 16 184 190 Ebi G C 2000 Antimicrobial activities of Alchornea cordifolia Fitoterapia 72 69 12 Feirera M A Nogueira P L Correia A A 1963 Sobre as raizes de Alchornea cordifoli Gracia de orta Vol 11 2 265 274 Fouraste I Bamba D Dempah J Pelissier Y Ake A L 1986 Plantes antifongiques utilis es en medecine traditionelle africaine Revue m dicale de C te d Ivoire 75 Gentilini M Duflo B 1986 Paludisme Med trop Med Sciences Flammarion 81 108 Gaind K N Budhira R
9. des flavonoides la quercetine et la quercetinrhamnoglucoside appel e rutine Le p sistost rol et des acides gras ont t isol s dans les feuilles collect es en Egypte Dans le bois ont t isol s des triterp noides la khayasine 7 diac toxy 7 oxokhivorin 22 L corce de tronc contient habituellement du m thyl angolensate a OAc O ee 9 9 9 AcO o 7 C togedunine Kayasine 2 4 PHARMACOLOGIE Moyse Mignon 1942 d montrait qu 5 ml kg le mac r d corce n a pas de toxicit sur les souris par voie IV et d montrait l absence d activit h molytique Khalid et coll 1986 d montraient que la g dunine tait active sur Plasmodium falciparum avec une concentration inhibitrice C I 5o 0 8 ug ml Le m me auteur d montrait que la querc tine avait une activit relativement lev e sur Plasmodium falciparum avec une concentration inhibitrice C I 50 6 9ug ml Le Grand 1989 d montrait que l extrait de l corce de racine tait actif contre Mycobacterium laprae et que l corce de tronc poss dait une activit contre Mycobacterium phlet et Candida albicans Les coumarines ont des propri t s antipyr tique analg sique s dative et anticonvulsivante Ils sont probablement responsables de l effet anticonvulsivante de l corce de tige Gupta et coll 1980 3 Nauclea latifolia Sm Nom local bambara baro 3 1 CARACTERES BOTANIQUES Kerharo et Adams 1974 Neuwinger 1996 Arbuste sarment
10. marque B CHI 2000 et lyophilis L extrait sec a t ensuite pes pour calculer le rendement de l extraction et conserv dans un flacon 50 g de poudre d coction 1 h extrait aqueux 1009C 35 Figure N 3 Sch ma de la d coction dans l eau 1 2 2 Mac ration dans l eau et l thanol Mat riel un b cher un agitateur magn tique une baguette magn tique un entonnoir un filtre une fiole M thode Nous avons vers 500 ml d thanol 80 sur 50 g de poudre contenue dans un b cher ce m lange a t agit avec un agitateur magn tique pendant 24 h ensuite filtr Cette op ration a t r p t e 3 fois les filtrats ont t concentr s et lyophilis s L extrait sec a t pes nous avons calcul le rendement de l extraction et conserv l extrait dans un flacon bien ferm Pour la mac ration dans l eau nous avons utilis le m me processus avec les m mes quantit s comme pr c demment d crit avec l thanol 50g de poudre mac ration thanol extrait thanolique Figure N 4 Sch ma de la mac ration dans l eau et l thanol 1 2 3 Extraction par puisement par les solvants Mat riel nous avons utilis le m me mat riel que la mac ration 3 M thode 250 g de poudre nous avons ajout 500 ml d ther de p trole m lang laiss mac rer pendant 24 h et filtr concentr au rotavapor et le r sidu a t s ch la temp rature ambiante
11. D Kaul R 1966 Antibiotic activity of Alchornea cordifolia Fitoterapia 72 69 72 Gbeassor M Kossu Y Ameabo K Souza de C Koumaglo K and Denke A 1989 Antimalarial effect of eight african medicinal plants Journal of Etnopharmacology 25 115 118 Gupta M B Nath R 1980 Anti inflammatory and antipyretic activities of p sitosterol Planta medica 39 157 163 Grachot B Ringwald P 1998 Paludisme pernicieux La Revue du praticien 48 273 278 Hamet R Millat 1 1933 Les Mitragyna et leurs alcaloides travaux des laboratoires de mati res m dicales et de gal nique de Paris T XXIV 7 me Partie Hien T T Arnold K 1992 Artemisinin and its derivatives in the treatment of falciparum malaria in Viet Nam Abstract of 13 th international congress for tropical medicine and malaria Thailand Hostettman K 1986 Tout savoir sur le pouvoir des plantes sources de m dicaments FAVRE 145 149 Hotellier F Delaveau P Pousset J L 1979 Alcalo des et glucoalcaloides des feuilles de Nauclea latifoloia Planta med 35 242 246 Hotellier F Delaveau P 1975 Naucl fine et Naucl tine deux nouveaux alcaloides de type indoloquinolizine isol s de Nauclea latifoloia Phytochemistry 14 1407 37 Khalid S A Farouk A Geary T G Jensen J B 1986 Potential antimalarial candidates from african plants J Ethnopharmacology 15 315 338 Kerharo J Adams 1974 La Pharmacop e S n galaise Traditionne
12. activit antimicrobiale sur Staphylococcus aureus Bacillus subtilis Echerichia coli et Klebsiella pneumoniae Barry et coll 2002 ont d termin l activit antifongique de A chornea cordifolia sur Microsporon canis et Trichophyton mentagrophytes 35 CHAPITRE 1 METHODOLOGIE 1 ETUDES PHYTOCHIMIQUES 1 1 MATERIEL VEGETAL L tude a t r alis e sur les rameaux feuill s de Alchornea cordifolia r colt s Kati le 8 F vrier 2002 Le nom local de la plante portant confusion les chantillons ont t identifi s par Mr N golo Diarra botaniste Un sp cimen de l chantillon a t d pos l herbier du D partement de M decine Traditionnelle DMT Les rameaux feuill s ont t s ch s l ombre sur une claie et pulv ris s en poudre fine l aide d un moulin de type Retsch SM 2000 1 2 EXTACTIONS Nous avons r alis une d coction une mac ration dans l eau et dans l thanol une extraction par puisement successif avec solvants organiques ther de p trole dichlorom thane m thanol thanol 80 suivie d une digestion et d une d coction 1 2 1 D coction 3k Mat riel un ballon un bain marie une fiole un entonnoir un filtre M thode Sur une prise d essai de 50 g de poudre pes e dans un ballon d coction nous avons ajout 500 ml d eau distill e plac le ballon dans le bain marie r gl 100 C apr s 1 h le d coct est filtr concentr au rotavapor
13. d p t a t vapor sec l aide d un courant d air s choir Migration La plaque a t introduite dans la cuve de migration contenant la phase mobile constitu e par un ou plusieurs solvants ligroine ac tate d thyle 2 1 chloroforme m thanol eau 65 35 5 L coulement de la phase mobile provoque une migration et la s paration des compos s Le d veloppement ascendant a t arr t lorsque le front du solvant a atteint 8 cm 3 R v lation Les plaques ont t s ch es la temp rature ambiante et les taches d tect es par observation sous la lampe ultraviolette U V r gl e 254 et 366 nm et par les r actions color es par pulv risation de r actifs g n raux o sp cifiques de certains compos s Nous avons utilis le r actif de GODIN Rapport frontal Rf En CC M la grandeur fondamentale est le rapport de la distance parcourue par la substance Dx sur celle parcourue par le front du solvant Ds Dx Rf Ds Rf est toujours compris entre 0 et 1 La C C M est un moyen simple pour d terminer la puret d un compos si celui ci n a subi aucune d gradation il ne doit y avoir qu une seule t che la r v lation L identit d une substance inconnue peut tre orient e en comparant son Rf avec celui d un t moin authentique 1 6 2 Chromatographie sur colonne Biogel P6 La chromatographie sur colonne est une m thode de fractionnement des extrai
14. de nombreuses tiges dress es qui partent de la base Les feuilles elliptiques atteignent 7 cm de long sur 4 cm de large les fleurs sont petites et blanch tres les fruits sont de petites capsules double coques entour es de bract es les nombreuses graines sont petites ovales et plates La plante pousse spontan ment dans les savanes mar cageuses et les galeries foresti res elle est exclusivement africaine 4 2 USAGES EN MEDECINE TRADITIONNELLE Kerharo et Adams 1974 Au Mali le d coct de feuilles est utilis pour ses propri t s f brifuge et stimulante dans les maladies infectieuses il est utilis contre l ict re la syphilis les arthrites En Guin e le d coct d corce de tronc est utilis comme diur tique et f brifuge 23 Au S n gal les corces sont utilis es contre les maux de ventre la dysenterie la bilharziose La poudre d corce est utilis e comme cicatrisant des grandes plaies Les racines tr s am res sont utilis es en d coct contre la paludisme 4 3 CHIMIE La plante contient de nombreux alcaloides qui appartiennent 2 types de structures indoliques et oxindoliques ce sont la mitranermine la pt ropodine l uncarine F Ces mol cules ont t isol es dans les feuilles et l corce de tronc Hamet 1933 Bishay 1988 Des saponosides l acide quinovique 3 D glucoside et l acide 3 amp L glucoside et des sapog nines l acide quinovique et l acide oxoquinovique ont t i
15. injection d art sunate les concentrations ont fortement diminu dans la majorit des tissus l exception du cerveau et des graisses ceci serait d au caract re lipophile de la dihydroart misine le m tabolite principal de l art sunate La fixation aux prot ines plasmatiques est de 76 le pic est atteint au bout de 6 heures environ la demi vie d limination est de 4 heures avec une concentration efficace qui se maintient pendant 50 heures Le m tabolisme est h patique et faiblement r nale l limination se fait dans l urine et les selles 6 PRESENTATIONS Les pr sentations les plus souvent disponibles sont les suivantes Par voie orale 16 Art misinine comprim s 250 mg Art misinine capsules 250 mg Art m ther capsules 40 mg Art sunate comprim s 50 mg Dihydroart misinine comprim s 60 mg Par voie I M Art m ther solution huileuse 80 mg ampoule de 1 ml Art sunate 60 mg par ampoule de 1 ml Par voie I V La formulation d art sunate utilis e est identique celle destin e l administration intramusculaire Par voie rectale Art misinine suppositoire de 100 mg 7 ASSOCIATIONS La diff rence d activit entre les antipaludiques permet des associations strat giques Elles peuvent avoir un effet additif ou plus souvent synergique en agissan
16. lioration de la maladie par sa disparition ceci pourrait expliquer l utilisation traditionnelle de la plante dans le traitement du paludisme Les travaux de Gupta confirment non seulement cette utilisation mais aussi l activit de Alchornea cordifolia sur les sympt mes du paludisme en plus de son activit sur le germe La richesse en oses dans le screening phytochimique est confirm e par la chromatographie en phase gazeuse qui a montr une diversit des extraits aqueux en sucre ces oses ont un pouvoir r gulateur du transit intestinal Moyse 1965 Nous avons identifi plusieurs monosaccharides dans les extraits aqueux le galactose le glucose le mannose le xylose le rhamnose l arabinose et les acides galacturonique et glucuronique apr s chromatographie sur colonne biogel P6 et chromatographie en phase gazeuse Le d coct qui est la forme principale d utilisation traditionnelle est riche en sucre 19 Z dont 80 de glucose m me si ce extrait a donn une concentration inhibitrice CIso gt 5 ug ml sur Plasmodium falciparum l apport en glucose pourrait tre utilis dans le traitement du paludisme Nous avons remarqu que toutes nos premi res fractions sont plus riches en sucre que les derni res ceci est en accord avec le principe de la m thode chromatographique sur colonne utilis e qui est bas e sur la masse mol culaire les substances les plus lourdes sont les premi res tre recueillies donc elles constituent
17. provenance h patique p n trent dans les h maties et s y transforment en trophozoites qui se divisent en schizontes sanguins puis en rosaces maturit les rosaces font clater la cellule pour lib rer les m rozoites qui vont amorcer une nouvelle schizogonie C est l clatement quasi simultan des corps en rosace qui provoque l acc s de fi vre Cette phase dure 48 heures pour l esp ce falciparum Apr s plusieurs cycles schizogoniques certains trophozoites vont se diff rencier l int rieur des h maties et donner des formes sexu es les seules aptes contaminer l anoph le 4 2 CHEZ L ANOPHELE FEMELLE L anophelle absorbe les gam tocytes m les et femelles lors de son repas sanguin ceux ci se transforment en gam tes ils donnent apr s f condation un ookin te puis un oocyste L oocyste maturit lib re les sporozoites qui vont gagner les glandes salivaires de l anoph le femelle qui devient ainsi infestante et pourra lors de son prochain repas sanguin inoculer les sporozoites l homme Le cycle chez l anoph le dure entre 10 et 40 jours selon l esp ce plasmodiale ANOPH LE Cycle humain asexu t ou p5 chizogonique HOMME Vg VISC RES SS l i i I H i S u i 81 S sporozoite T trophozoite Gt gam te Hy hypnozoite Sc schizonte Ok ookin te H h patocyte CR corps en rosace Oc oocyste CB corps bleu Gy gam tocyte GS glandes salivaires M m
18. rozoite Figure N 1 Cycle volutif des plasmodies Gentilini et Duflo 1986 5 MANIFESTATIONS CLINIQUES Danis 1986 Gentilini 1986 Les manifestations cliniques du paludisme sont diverses dans leurs expressions et leur gravit s 5 1 LES ACCES SIMPLES Ils sont communs toutes les esp ces plasmodiales avec cependant quelques diff rences li es au parasite ces acc s comprennent la primo invasion et les acc s intermittents La primo invasion cliniquement caract ris e par la fi vre un malaise g n ral des c phal es des douleurs abdominales Correctement trait e elle gu rit vite Les acc s intermittents ou acc s palustres fi vre p riodique caract ris s par des frissons la chaleur les sueurs ces signes sont souvent pr c d s de c phal es et de naus es L volution de l acc s est rapidement favorable sous traitement 5 2 LE PALUDISME VISC RAL VOLUTIF Le tableau clinique associe une an mie une asth nie une anorexie une hyperthermie Chez l adulte on peut noter un amaigrissement rapide 5 3 L ACCES PERNICIEUX OU NEURO PALUDISME Syndrome de d but brutal ou progressif il se manifeste par une fi vre qui d passe 41 dans certains cas des troubles neurologiques avec notamment un coma des convulsions Ce tableau peut voluer spontan ment vers la mort 5 4 LA FIEVRE BILIEUSE HEMOGLOBINURIQUE Elle atteint surtout les sujets neufs ses principaux signes sont l ict re
19. sodium anhydre 200 g Jode 38 10 g Eau distill e 600 ml Agiter pendant 30 mn 1 3 R actif de DPPH 1 1 diphenyl 2 picril hydrazyle 2 mg par ml de m thanol 1 4 R actif de FEHLING Solution A CuSOA 35g Eau distill e 500 ml H2S04 5ml Laisser refroidir et completer un litre avec l eau distill e Solution B Sel de Seignette 150g Eau distill e 500 ml Refroidir et ajouter 300 ml de lessive non carbonat et completer un litre avec l eau distill e NB m langer les deux solutions volume gale au moment de l emploi 1 5 R actif de GODIN Solution A Vanilline lg Ethanol 95 1000 ml Solution B Acide perchlorique 3 ml Eau distill e 100 ml M langer les deux solutions au moment de l emploi ensuite pulv riser les plaques avec une solution de H5SO 10 40 1 6 R act
20. 9H280 s Nom chimique dihydro art misinine 10a h misuccinate CH3 CH3 OCO CH2 CH COONa 15 2 3 2 OBTENTION La synth se de l art sunate se fait partir de l art misinine La r duction du groupement lactone entraine l obtention de la dihydroart misinine avec un rendement de 88 90 96 En pr sence de pyridine de chloroforme et d anhydride succinique on obtient l h misuccinate de dihydroart misinine 3 PROPRIETES PHARMACOLOGIQUES DES COMPOSES Torok 1992 L art misinine et ses d riv s sont de puissants schizonticides notamment avec les souches de Plasmodium falciparum chimior sistances 4 MECANISME D ACTION Browing 1989 Bougnoux 1993 Des tudes r alis es en microscopie lectronique montrent que la cible principale de l art misinine et de ses d riv s est la structure membranaire du Plasmodium Au point de vue biochimique leur m canisme d action in vitro semble tre l inhibition de la synth se prot ique 5 PHARMACOCINETIQUE Hien 1992 Plat 1995 Boulos 1994 L art misinine et ses d riv s sont rapidement hydrolys s in vitro en dihydroart misinine ce m tabolite actif s limine plus lentement que la mol cule m re Dix minutes apr s l administration par voie orale la concentration en art sunate est plus lev e dans l intestin que dans les tissus des concentrations lev es sont retrouv es dans le cerveau le foie et les reins par contre une heure apr s l
21. IDIMAK sad ae ee abc bein ile ete E ORE ele PAESI PNE C 2 4 Les Amimo EE 2 5 Les Amino D ARMES id has tun Ee A 2 5 Les Amino 4 quinolelnes eege ee eege eg CHAPITRE 3 L ARTEMISININE ET SES DERIVES 1 Historique P EANES PA COMPOSES PP PPS EENES 2 1 Art misinine MR EEN eleng da be de eege DE NAMEN EE 3 Propretes pliarmacologlqu s E dk M canisme d Action ovest ctae eru NEE dE ENEE Sa Un UU o Lu I 14 14 14 14 16 16 2 PRATMACOCMOUQUE PT 16 6 icc c Wo ENSE 16 y ura A 17 8 Sch ma th rapeutique du PANNE reete rer ee ERR eisin 17 9 Co t du traitement d un acc s palustre simple 12415 e eter rr semis 18 CHAPITRE 4 RAPPELS SUR QUELQUES PLANTES MEDICINALES UTILISEES CONTRE LE PALUDISME AU MALI l GochlospermUur zBONOFIWIL iius exe gue xe irar eE a Faune sux add eniuda aw bb arde 20 2 khaya E 22 3s Na cl a latifolia E 23 4 Mitragyna INermiS onno ee EEE EE EOR e b San ES 25 5 Le Malarial M 27 CHAPITRE 5 Alchornea cordifolia Schmach Euphorbiaceae n 31 2 UD M oi ne 32 3 Usages en medecme traditionnelle og gesteet sege d ien uge 32 4 CHIMIE MP L S 32 5 Pharmacologie P 33 TRAVAUX PERSONNE
22. L op ration a t r p t e 3 fois Sur le marc nous avons vers 500 ml de dichlorom thane et proc d de la m me mani re qu avec l ther de p trole Apr s nous avons vers successivement sur le marc le m thanol et l thanol 80 selon le m me processus la diff rence que les extraits thanolique et m thanolique ont t filtr s et lyophilis s apr s concentration 36 Apr s cette tape le marc a t s ch la temp rature ambiante ensuite pes pour effectuer la digestion et la d coction pendant 3 h chacune avec 1500ml d eau distill e et selon le m me proc d que la premi re d coction 250 g de poudre Ether de p trole Extrait ether de p trole Marc DCM Extrait DCM Marc MeOH Extrait MeOH Marc Ethanol Extrait EtOH R sidu puis s ch H 0 100 C D coct Marc H O 50 C Digest R sidu Figure N 5 Sch ma de l extraction par puisement successif par les solvants 3 N 1 3 ETUDES PHYTOCHIMIQUES Les recherches ont port sur la recherche dans la poudre de rameaux feuill s des principaux groupes chimiques nous avons effectu des r actions en tubes 1 3 1 Recherche des alcaloides Elle a t effectu e par des r actions de pr cipitation avec les r actifs g n raux des alcaloides Valser Mayer et Dragendorff Un extrait sulfurique a t pr par partir de 10 g de poudre et de 500 ml de H580 10 Apr s une mac ration de 24 h la t
23. LS CHAPITRE 1 METHODOLOGIE 1 Etudes e PP 35 I D ET 23 ICM erc 3520 M 35 1 3 Et des Eer UE 38 1 4 D termination de la teneur en Eege ess 43 1 5 D termination de la teneur en CeHOBeS ioo aseo apa o EY EO WIRE eu a ee da e Kad 44 1 6 M thodes chromatographiques J secceso edipi pUERER PrbRR Pe ERU BEDS Ap URB R E be TERUE 46 1 7 M thodes E 49 2 KEE 50 2 1 Activit antioxydante ee eddi EE SEENEN 50 2 2 Activit antiplasmodiale 1 2 teet trt Ese Ru PERRA E eriak eiiie CHAPITRE 2 RESULTATS 1 Etudes plytochimilques 88 550 Ne bem m xe bx REN cag de IBS ecce EL in es I 2 Etudes ee de nn san 1 3 Teneur en eau et Cendtes ise eoeeeee cox rere pe armed pe nee Em RR nea UE Methodes ehromatoprapbilQgues ce pudeat o a dax S etx Pa ba tatu ba Ede ho eRes 1 5 Hydrolys acide m 2 Tests DOM ID QUES en 2 1 Activit antox yate 22080 annees nee AERE ben dedans 2 2 Activit a tplasmodiale E COMMENTAIRES ET DiISCUSSION PIG T RT E die ste ce te REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES ANNEXES RESUME 53 33 54 55 67 68 68 70 71 74 51 11 INTRODUCTION Le paludisme reste l une des maladies parasitaires les plus fr quentes et les plus graves au monde Selon l OMS 240 millions de sujets sont atteints et plus de 2 millions en meurent chaque ann e dans le monde C est une affection d autan
24. MINISTERE DE L EDUCATION REPUBLIQUE DU MALI NATIONALE Un peuple Un but Une foi sj ke le zl ze oe ke sb ste zie ee deste ck ee ee sle ste sk ee be sl zl ek ke beste ke kk UNIVERSITE DE BAMAKO KK K K K K K K K see K K K K eoe se FACULTE DE MEDECINE DE PHARMACIE ET D ODONTOSTOMATOLOGIE KK K K K K K K K K K K K K K K K 2K K K ANNEE UNIVERSITAIRE 2001 2002 Msn ETUDE de la PHYTOCHIMIE et de L ACTIVITE ANTIPALUDIQUE de Alchornea cordifolia Schmach EUPHORBIACEAE THESE Pr sent e et soutenue publiquement le 3 4 devant la Facult de M decine de Pharmacie et d Odonto Stomatologie FMPOS PAR Mlle TOGOLA Adiaratou Pour obtenir le grade de Docteur en Pharmacie Dipl me D Etat JURY PRESIDENT Pr OUSMANE DOUMBIA MEMBRE Dr ABABACAR MAIGA CO DIRECTEUR Dr DRISSA DIALLO DIRECTEUR Dr ELIMANE MARIKO Je d die ce travail A ALLAH le tout puissant le cl ment le mis ricorde DIEU pour m avoir donn la chance la volont et le courage n cessaire pour mener ce travail bout je souhaite qu il me montre d autres jours meilleurs mon p re pour m avoir soutenu moralement et mat riellement jusqu ce jour P re ce travail est le tien il est le fruit de tes efforts Je prie le tout puissant qu il t accorde longue vie pour que tu puisses voir la concr tisation de tes espoirs ma m re voici l aboutissement de tes nombreuses nuits de pri res de ta sagesse et de ta g n r
25. TION BOTANIQUE Kerharo et Adams 1974 Arbre de 4 5 m de long souvent moins parfois l g rement grimpant branches nombreuses partant d une base dress es vas es et un peu retombantes Les feuilles sont glabres pubescence toil e alternes largement ovales largies et cord es la base acumin es au sommet bords parfois entiers mais le plus souvent dent s Elles atteignent 15 cm de long sur 10 12 cm de large avec un long p tiole de 7 8 cm de long le limbe est trinerv avec 2 glandes visqueuses la base sur la face inf rieure Les fleurs femelles sont verd tres tr s petites et en grappes pendantes sur les branches o le tronc les fleurs m les sont en panicule axillaire de 20 cm de long Les fruits sont capsulaires deux loges subsph riques de 1 cm de diam tre ils sont couverts de fins poils toil s l g rement aplatis avec deux tr s longs styles persistants de 6 7 cm de long Ee 2 HABITAT Kerharo et Adams 1974 Il est tr s commun en Casamance sur les sols frais les lisi res pr s des marais Il existe dans les galeries soudaniennes les vall es des affluents de la Gambie et dans la vall e du S n gal au Mali cette plante peut se trouver au pr s des marais au sud et au centre du pays 3 USAGES EN MEDECINE TRADITIONNELLE Alchornea cordifolia est largement utilis en Afrique seul ou en association avec d autres plantes Tous les organes sont utilis s essentiellement
26. UES 1 4 1 CCM Apr s la r v lation la lumi re ultraviolette nous avons calcul les Rf des t ches observ es ss Tableau N 7 Rf et couleurs des diff rentes taches observ es l UV 254 366 nm et apr s r v lation avec le r actif de Godin syst me de migration chloroforme m thanol eau Nature des Taches observ es Extraits Rf 254 nm 366 nm Godin Extrait 0 07 Visible thanolique 0 09 Rouge 0 2 Gris tre 0 26 Visible 0 35 Visible Gris tre 0 47 Visible Jaun tre 0 55 Jaun tre 0 62 Visible Jaun tre 0 68 Visible 0 75 Violette 0 81 Violette 0 87 Visible Brune Gris tre 0 91 Violette 0 95 Rouge 0 98 Rouge Extrait 0 06 Visible thanolique 0 09 Rouge orang puis 0 17 Rouge 0 24 Rouge 0 27 Visible 0 30 Rouge 0 34 Gris tre 0 47 Visible 0 51 Jaun tre 0 59 Jaune 0 62 Visible 0 67 Rouge 56 0 69 Visible 0 72 0 74 Violette 0 80 Visible Brune 0 86 Brune 0 89 Visible Violette 0 9 Rouge 0 97 Rouge Extrait M thanolique 0 1 Visible Rouge tre 0 19 Rouge 0 22 Visible 0 27 Visible 0 34 Gris tre 0 6 Visible 0 66 Brune 0 74 Violette 0 79 Gris tre
27. W Che C T Conzalez A Pezzuto J M Douglas A K Farnswort N R 1988 Further chemical constituants of Mitragyna inermis stem bark Fitoterapia LIX 5 397 398 Bougnous M E Ancelle T 1993 Place de l art mether parmi les d riv s du Quinghaosu Cahier sant 3 4 309 Boulos M Santini M O Segurado A A C Carvalho N B Amato N V 1994 R le de l art misinine et de ses d riv s dans le traitement du paludisme Rapport O M 1067 35 45 Bryskier A Labro M T 1988 Paludisme et m dicament Arnette 10 Bouvier P Doumbo O Breslow N Robert C F Mauris A Piquect M Kouriba B Demb l H Delly V Rougemont A 1997 Seasonality malaria and impact of prophylaxis in west african village I effect of anemia in pregnacy Am J Trop Med Hyg 56 379 383 Browing P M Bisby R M 1989 Quinghaosu does not affect the major thermotropic phase transition in model membrane of dipalmitoyl phosphatidylcholine Molecular and Biochemical Parasitology 32 57 60 Crete P 1965 Precis de botanique Syst matique des Angiospermes tome 2 r vision de la 2 me dition Danis M Brucker G Diallo A M pele P Traore B Gentilini M 1968 Les nouveaux antipaludiques Med Afr Noire 33 811 824 Diallo B Vanhaelen N 1988 Large scale purification of apocarotenoids from Cochlospermum tinctorium by countercurrent chromatography Journal of Liquid chromatograph 11 1 227 231
28. a t cit e parmi les 5 plantes les plus utilis es dans ce domaine lors d une enqu te ethnobotanique en C te d Ivoire Mustofa 2000 L objectif principal de notre travail tait de d tudier la phytochimie et l activit antipaludique de l esp ce malienne de A chornea cordifolia Pour ce faire nous avons d abord fait un rappel sur les deux d riv s les plus c l bres des plantes m dicinales en mati re de traitement du paludisme savoir la quinine l art misinine et leurs mol cules de synth se nous avons fait un rappel aussi sur les plantes m dicinales utilis es contre le paludisme au Mali tout en insistant sur celles qui ont une activit confirm e comme Cochlospermum tinctorium Khaya senegalensis Nauclea latifolia Mitragyna inermis et une association de plantes activit antipaludique le malarial Apr s ces rappels nous avons d velopp la phytochimie de Alchornea cordifolia et r alis des tests pharmacologiques Nous avons trouv un pourcentage d eau gale 6 en moyenne dans la poudre ceci montre que l chantillon sur lequel nous avons travaill se pr tait une bonne conservation 6 de la poudre sont des substances r siduelles que l on peut obtenir apr s une incin ration Plusieurs de nos r sultats trouvent leur confirmation dans la litt rature savoir dans la phythochimie nous avons trouv une forte pr sence de tanins dans les rameaux feuill s ce r sultat est semblable cel
29. a Primaquine 10 2 4 2 PROPRIETES PHARMACOLOGIQUES La Primaquine tait tr s active contre les gam tocytes de toutes les esp ces de Plasmodium et contre les formes exo rythrocytaires latentes La d couverte en la primaquine d un m dicament capable d assurer une prophylaxie causale de d truire les gam tocytes de m me que les formes sanguines de gu rir radicalement une infection d clar e et d tre fabriqu e un prix relativement bas et sans difficult a fait naitre l espoir que l on avait trouv l antipaludique id al Cependant le fait que leur action n est efficace qu des doses dangereusement lev es interdit d employer les amino 8 quinoleines pour le traitement des atteintes aigu s Aujourd hui les Amino 8 quinoleines constituent une classe largement substitu e par d autres plus r centes et plus efficaces 2 5 LES AMINO 9 ACRIDINES OMS 1984 Une autre classe d antipaludique les amino 9 acridines dont la mol cule de r f rence est la MEPACRINE fut d couverte en 1932 par Kikuth et ses collaborateurs CH3 C2H5 NH CH CHz CHz CH N C2H5 Z Us OCHs SV CI N La M pacrine Nom chimique Chloro 3 di thyl amino 4 m thyl 1 butylamino 9 m thoxy 7 acridine La d couverte des inconv nients suivants la coloration de la peau et des conjonctives en jaune les troubles mentaux observ s la r sistance des souches de Plasmodium ont fait que si cette classe a t d
30. ages Anthocyanes R ation de Lieberman C H t rosides O H t rosides vert N gatif N gatif N gatif N gatif N gatif vert N gatif rouge brique rouge flocons N gatif Leuco anthocyanes rouge c rise Stup fiants t trahydrocannabinols N gatif 54 Les compos s les plus abondants dans les rameux feuill s de Alchornea cordifolia sont essentiellement les tanins les h t rosides cardiotoniques les compos s r ducteurs oses et holosides les mucilages et les leuco anthocyanes Quant aux alcaloides ils sont pr sents mais leur taux est faible Le test de recherche de tetrahydrocannabinols mol cules stup fiantes s est av r n gatif les d riv s antrac niques les saponosides et les h t rosides cyanog n tiques ont donn des r actions n gatives par les techniques de caract risations que nous avons utilis s 1 3 TENEURS EN EAU ET CENDRES Tableau N 6 Teneur en eau et les pourcentages en cendres des rameaux feuill s RECHERCHES RESUITATS substances extractibles par l eau Pourcentage d Eau m thode volum trique Chlorhydriques HCI 10 sulfuriques H2SO4 Pourcentage de cendres La poudre contient en moyenne 6 d eau pr s de 23 de ses substances sont solubles dans l eau et 6 de ses cendres sont insolubles dans l acide chlorhydrique 1 4 METHODES CHROMATOGRAPHIQ
31. chlorhydrique Acide sulfurique Ammoniaque Azote Carbonate de sodium Centim tre Chromatographie sur Couche Mince Chromatographie en Phase Gazeuse Chloroforme Concentration inhibitrice 50 Gaz carbonique Degr Celsius D nomination Commune Internationale Dichlorom thane D partement de M decine Traditionnelle Dim thyl sulfoxyde 1 1 Diph nyl 2 Picril Hydrazine Eau Gramme Hydroxyde de potassium Heure Institut National de Recherche en Sant Publique Indice de mousse Intramusculaire Intraveineuse Jour Kilogramme May Grunwal Giemsa M tre Microlitre Microgramme Milligramme 42 ml ng nm OMS O pH qsp Rf SbCl FeCl3 TMS UV Millilitre Minute Molarit Nanogramme Nanom tre Organisation Mondiale de la Sant Oxyg ne Potentiel hydrog ne Pour cent Quantit suffisante pour Rappor frontal Trichlorure d antimoine Trichlorure de fer Trim thyl silane Unit Ultraviolet Volume 43 LOCALISATION ET RESUME DE LA THESE LOCALISATION Nom TOGOLA Pr nom Adiaratou Titre ETUDE de la PHYTOCHIMIE et de L ACTIVIT ANTIPALUDIQUE de Alchornea cordifolia Schmach EUPHORBIACEAE Ann e universitaire 2001 2002 Ville de soutenance BAMAKO Pays d origine MALI Lieu d tude D partement de M decine Traditionnelle Lieu de d p t Biblioth que de la Facult de M decine de Pharmacie et d OdontoStomatologie Secteur d int r t Pharmacognosie RESUME Cet
32. ctifs apparaissent sous forme de taches jaunes sur un fond pourpre 2 2 ACTIVITE ANTIPLASMODIALE Test sur Plasmodium falciparum in vitro Ce test a t effectu en collaboration avec l institut des maladies tropicales de B le en Suisse Esp ce standard Plasmodium falciparum souche Ku r sistante la chloroquine et la pyrim thamine M dicament t moin Chloroquine Sigma C6628 Conditions standards Milieu de culture RPMI 1640 avec Hypoxanthine Hepes 5 94 g l NaHCO 2 1 g l N omycine 100 U ml Albumax 5 g l Plaques Costar 96 Incubation Chambre humide contenant 4 CO 3 O2 93 96 N2 Pr parations des extraits Les extraits ont t dissous dans le dim thyl sulfoxyde DMSO 10mg ml pour la dissolution le m lange a t chauff ou plac dans un bain marie ultrason si n cessaire Les m langes ont t incub s 4 C pendant 2 semaines et apr s 20 C Pour le test des dilutions r centes sont pr par es chaque fois Proc dure du test Pr parer un milieu fluide avec le stock de culture pr parer une solution de cellules parasit es ayant un taux d h matocrite gal 2 5 et une parasit mie de 0 3 verser 100 ul du milieu de culture dans chaque trou de la plaque verser 100 ul du milieu contenant la substance tester une concentration 4 fois sup rieure dans les trous de la ligne B SI pr lever 100 ul des trous de la ligne B apr s m
33. de mousse I est calcul e par la formule suivante 1000 f N N est le num ro du tube o la hauteur de mousse est gale 1 cm 1 3 8 Recherche de Stup fiants les T trahydrocannabinols A 0 5 g de la poudre ajouter 5 ml d ther de p trole et agiter pendant 15 mn filtrer dans une capsule et vaporer le filtrat sec au bain marie Au r sidu ajouter 3 4 gouttes de KOH 5 96 dans l alcool une coloration violette indique la pr sence de t trahydrocannabinols 1 3 9 Autres recherches La solution analyser est un d coct aqueux 10 96 obtenu au bout de 15 mn 1 3 9 1 Compos s r ducteurs Au r sidu d vaporation de 5 ml de la solution analyser ajouter 1 ml du r actif de Fehling l obtention d un pr cipit rouge brique indique la pr sence de compos s r ducteurs 1 3 9 2 Oses et Holosides Evaporer sec 5 ml de la solution analyser reprendre le r sidu avec 2 3 gouttes de H2SO0 concentr attendre 5 mn et ajouter 3 gouttes d alcool satur avec le thymol l apparition d une coloration rouge indique la pr sence d oses et holosides 1 3 9 3 Mucilage A 1 ml de la solution analyser ajouter 5 ml d alcool absolu l apparition de pr cipit s floconneux montre la pr sence de mucilage 42 1 4 DETERMINATION DE LA TENEUR EN EAU Pour la d termination de la teneur en eau deux m thodes ont t utilis es 1 4 1 M thode gravim trique ou pond rale 3 Pr
34. des identifi s pour celle de la digestion l arabinose est le plus abondant cette fraction est la seule contenir de l acide glucuronique et le mannose Composition en monosaccharides des polysaccharides du d coct puis Ara 0 11 Rham Glu 55 13 Figure N 16 Composition en sucre du d coct puis 65 Composition en monosaccharides des polysaccharides de la digestion Ara Rham 0 7 e Glu 44 A gal 12 Man 3 A glu Gal 2 21 Figure N 17 Composition en sucre de la digestion Composition en monosaccharides des polysaccharides du d coct Ara 0 6 a 9 296 A gal 80 Figure N 18 Composition en sucre du d coct total Les extraits aqueux bruts sont majoritairement constitu s de glucose il repr sente lui seul 80 des monosaccharides contenus dans le d coct 55 de ceux du d coct puis et 44 des sucres de la digestion Comme dans sa premi re fraction la digestion est la seule contenir de l acide glucuronique Le d coct pr sente la plus faible diversit avec 5 monosaccharides 66 1 5 HYDROLYSE ACIDE La d termination des sucres contenus dans les diff rentes fractions a abouti au conclusions suivantes Tableau N 10 Comparaisons des Rf des fractions et ceux des sucres t moins COMPOSES Rf Xylose 0 725 Fucose 0 7125 Acide glucuronique 0 15 Arabinose 0 6875 Rhamnose 0 8375
35. e le st rol et les glycosides terp niques ont t isol s dans les racines dans la graine on a isol l acide alchornoique l alchorneine et l alchonidine Ajali 2000 33 Deux compos s nouveaux la querc tine 3 4 disulfat et la querc tine 7 4 disulfat ont t isol s dans une autre esp ce Alchornea laxiflora Ces compos s sont des d riv s sulfat s de la querc tine isol s par les m thodes spectroscopiques Ogundupe 2001 OH L 050 0H HOSO O Ke Md NEL OH OH O Quercetine 7 4 disulfat OH HG NN HA PH 8 qx 5 CH3 HO Acide Alchorneine Gentisique Nw N N H H3CO O OH Yohimbine 5 PHARMACOLOGIE OSO OH i 7 080 0H zc LA OH O Quercetine 3 4 disulfat CH HO e KL d OH ege N OH N OH O Querc tine Indole Tona et coll 1994 ont d montr que les feuilles de Alchornea cordifolia pr sentaient un pouvoir antimicrobien moyen vis vis de Echerichia coli Citrobacta diversus et une faible activit vis vis de Salmonella enteritidis Shigella flexneri et Staphilococcus aureus 34 Fouraste et coll 1986 isol rent partir des feuilles une substance qui pr sente un pouvoir antidermatophyte Agbe et coll 1987 ont d montr l activit trypanocidale d extrait de la plante des doses de 200 ug ml contre Trypanosoma congolense et Trypanosoma brucet Ebi 2000 d montrait que les corces de tiges de Alchornea cordifolia poss daient une
36. e l adulte et de l enfant Rapport 38p Torok M E White N J Krishna S 1992 Intra rectal art mether is efficacious in Plasmodium berghei infection in rats Abstract of 13 th international congress for tropical medecine and malaria Thailand 1992 Tour H Balansard G Pauli A M Scoh A M 1996 Pharmacological investigation of alkaloids from leaves of Mitragyna inermis Rubiaceae Journal of Ethnopharmacology 54 59 62 Touze J E Henos P Foucarde L 1998 Acc s palustre simple La Revue du praticien 48 269 272 Traor F 1999 Evaluation de l activit antimalarique de Glinus oppositofolius Nauclea latifolia Mitragyna inermis trois plantes utilis es en M decine traditionnelle au Mali Th se de Doctorat Universit de la M diterran e Marseille II pp 199 Udoh V Francis 1995 Effects of leaf and root extracts of Nauclea latifolia on prurinergic neurotransmission in the rat bladder Phytotherapy Research 9 239 243 VerykokidovV E Becker H 1983 Flavonoides ans Spilantes oleraceae Jacq Archiv Der Pharmazie 316 815 816 39 ANNEXES COMPOSITION DES R ACTIFS 1 1 R actif de BALJET Acide picrique lg Ethanol 50 qsp 100ml 1 2 R actif de DRAGENDORFF Nitrate de bismuth pulv ris 20 80 g Iodure de
37. eau contenu dans la prise d essai est calcul par la formule suivante V Vi V Le pourcentage d eau est calcul comme suit V V Pourcentage d eau 100 PE P E Masse de la prise d essai 1 4 3 Substances extractibles par l eau Pour d terminer le pourcentage de substances solubles dans l eau nous avons effectu une d coction pendant 15 mn de 1 g de poudre dans 20 ml d eau distill e le filtrat recueilli dans une capsule tar e masse M a t vapor sec l tuve et la capsule pes e de nouveau masse M Le pourcentage P de substances extractibles par l eau est d termin par la formule suivante P 100 M M 1 5 DETERMINATION DE LA TENEUR EN CENDRES 1 5 1 Cendres totales Principe la d termination des cendres est une m thode utilis e pour mesurer la quantit de substances r siduelles non volatiles contenues dans la drogue lorsqu un chantillon est br l Mode op ratoire nous avons pes une prise d essai de la drogue M dans un creuset pr alablement tar M Apr s incin ration au four entre 600 et 800 C pendant 5 6 h et refroidissement dans un dessiccateur nous avons d termin la masse du creuset contenant la prise d essai M 44 La masse de cendres totales M Ct contenues dans le creuset est d termin e par la formule suivante MCt ZM M La masse de la prise d essai PEZM M Le pourcentage de cendres totales MCt PCt 100 Nous a
38. ejet atteignant 30 60 cm de hauteur Les feuilles mesurent jusqu 8 cm de largeur et ont des lobes effil s et dent s Les p tioles atteignent 5 cm de long et sont gr les Les fleurs couleur jaune or assez grandes apparaissent au ras du sol d s les premi res pluies elles ont de nombreuses tamines Les fruits capsulaires ovo des contiennent des graines noires entour es de longs poils Esp ce soudano sah lienne cette plante est retrouv e depuis le S n gal jusqu en Ouganda 1 2 USAGES EN MEDECINE TRADITIONNELLE Doumbia 1994 Le d coct de racines est prescrit pour le traitement des acc s f briles de la diarrh e des dysm norrh es et des affections uro g nitales L infus de feuilles et de racines est utilis e contre le paludisme en bain et le d coct de racines en boisson Les racines en association avec celles de Terminalia macroptera sont utilis es en d coction pour le traitement de la jaunisse 20 1 3 COMPOSITION CHIMIQUE Diallo et coll 1988 Diallo et coll 1991 Les constituants chimiques d extrait aqueux des racines de la plante ont t tablis Les compos s retrouv s sont les acides gallique et ellagique des flavono des 7 3 dim thyl dihydroquerc tine 5 4 dim thyl quercetine des appocarot noides cochloxanthine dihydrocochloxanthine des acetog nines cochlospermine cochlospermatine cochlospermatinine type O o R4 C C R ES OH HO O R C O HO Coch
39. emp rature ambiante le mac r a t filtr sur papier filtre et lav l eau distill e de mani re obtenir 500 ml Le proc d a consist prendre 1 ml de ce filtrat dans 2 tubes essai et ajouter 5 gouttes du r actif de Mayer dans le premier tube et 5 gouttes du r actif de Dragendorff dans le second tube l apparition de pr cipit s indique la pr sence d alcaloides 3 Alcaloides des solanac es mydriatiques Au r sidu de la deuxi me capsule ajouter 1 ml d acide nitrique fumant et vaporer sec au bain marie bouillant apr s refroidissement ajouter 10 ml d ac tone pur et quelques gouttes d une solution de KOH 5 dans l thanol L apparition d une coloration violette indique la pr sence des alcaloides de solanac es mydriatiques 3 Dosage des alcaloides La solution analyser est obtenue en agissant 25 ml de H5SO 10 et 5 ml d eau distill e sur 3 g de poudre Au filtrat ajouter du NH4OH 1 2 jusqu pH 8 9 extraire avec 50 ml de chloroforme soutirer sur du sulfate de sodium anhydre et filtrer la phase chloroformique dans une capsule tar e de masse M vaporer l extrait sec et peser la capsule de nouveau masse M La masse d alcaloides M A est d termin e par la formule suivante MAzZzM M Le pourcentage d alcalo des P A 38 PE P E Masse de la prise d essai 1 3 2 Recherche des substances polyph noliques La solution analyser est un infus aqueux 5
40. en agissant au niveau de la d gradation de l h moglobine par ce dernier 12 2 6 4 PHARMACOCINETIQUE OMS 1984 Les amino 4 quinoleines sont rapidement et presque totalement absorb s par la muqueuse gastro intestinale Ils se concentrent dans les organes riches en m lanine dans les lysozymes et les cellules du parenchyme h patique La concentration plasmatique efficace est de l ordre de 30 ug de base par litre de sang atteinte entre 2 3 heures apr s administration par voie orale et en 15 mn par voie intramusculaire Le m dicament est excr t pour 10 environ dans les selles et pour 56 96 dans l urine 2 6 5 EFFETS SECONDAIRES TOXICITE Aux doses th rapeutiques les effets secondaires sont minimes on a signal des c phal es et du prurit qui disparaissent apr s l arr t du traitement La toxicit des amino 4 quinoleines a t observ e la suite de l administration de fortes doses le dommage oculaire peut prendre la forme d une neuror tinite probablement li l affinit de ces compos s pour les tissus contenant la m lanine 13 CHAPITRE 3 L ARTEMISININE ET SES DERIVES 1 HISTORIQUE Meshnick 1991 Rhone 1993 La prise en charge th rapeutique du paludisme se heurte actuellement au probl me de la r sistance du Plasmodium vis vis des antipaludiques une nouvelle classe chimique d antimalariques d origine v g tale a t d couverte gr ce l isolement par des chimistes chin
41. en fait vos qualit s humaines connues de tous font de vous un mod le suivre nous n oublierons jamais les sacrifices que vous avez consenti pour la r alisation de ce travail Soyez assur cher ma tre de notre profonde gratitude de nos sinc res remerciements et de notre estime pour toujours A NOTRE MAITRE ET DIRECTEUR DE THESE Dr Elimane MARIKO Ma tre de conf rence en Pharmacologie chef de D E R des sciences pharmaceutiques et charg de l enseignement de la Pharmacologie la Facult de M decine de Pharmacie et d OdontoStomatologie Directeur adjoint des services sanitaires de l arm e Nous sommes honor s de vous avoir pour directeur de th se cette faveur que vous avez bien voulu nous accorder nous a permi de mieux appr cier vos qualit s humaines et professionnelles veuillez trouver ici l expression de notre grande reconnaissance SOMMAIRE INTRODUCTION EE MOTIVATION EE OR CR cn ee nee AEE E E ed tn TRAVAUX ANTERIEURS CHAPITRE 1 RAPPELS SUR LE PALUDISME l D MON eaei 2 R partition G ographig e sae ioca obra eric pra utu inda de er pr Ka SER FER UE EN d dS 3 Agent Pathog ne oreet eto texere ane ol nee nain nan 4 or si MR 5 Manifestations CIIqUBS E 6 Diagnostic DIJOlOBIQUE Ls ueste boo o io re ERU pa UE Cal ERO en oem tte Ks CHAPITRE 2 QUININE ET DERIVES MU Sie gp cC 2 P TUI HO 2 BUD CENT T E UIS 2 2 QU
42. er jour et 1 6 mg kg j du 2 au 7 jour L art mether Paluther sa posologie est de 160 mg le premier jour suivis de 80 mg j pendant 4 jours L art sunate Arsumax est utilis chez l adulte par voie orale la dose de 40 mg j pendant 5 7 jours une solution injectable existe mais sa pr paration doit tre extemporan e cause de son instabilit 9 CO T DU TRAITEMENT D UN ACCES PALUSTRE SIMPLE SELON LE SHEMA DECRIT DESSUS Tableau N 1 Co t du traitement M dicaments Quantit Prix Co t du suffisante unitaire F traitement F Chloroquine Nivaquine 100 mg 25 comprim s 12 5 312 5 Quinine comprim s 300 mg 35 comprim s 40 1400 Quinine injectable Paluject 600mg 12 ampoules 420 5040 Art misinine Cotexin 4155 4155 Art mether Paluther 80 mg 13240 13240 Art sunate Arsumax 4310 4310 Sulfadoxine 1260 e Malarial 600 enn 18 CHAPITRE 4 RAPPEL SUR QUELQUES PLANTES MEDICINALES UTILISEES CONTRE LE PALUDISME AU MALI Au Mali beaucoup de plantes sont utilis es contre le paludisme en g n ral certaines ayant une activit antiplasmodiale r elle sont utilis es tout autant que d autres agissant sur les sympt mes du paludisme Dans nos milieux traditionnels toutes ces plantes sont dites antipaludiques Tableau N 2 Quelques plantes utilis es contre le paludisme au Mali TRAORE 1999 Doumbia 1994 Familles Noms latin
43. es l ensemble masse M La poudre a t ensuite humect e avec H2SO0 concentr et laiss e au contact de la chaleur d une tuve pendant 24 h le creuset a t port calcination dans un four pendant 6 h et pes ensuite apr s refroidissement masse M7 La masse de cendres sulfuriques M Cs est calcul e comme suit MCs M M La masse de la prise d essai PEZM M Le pourcentage de cendres sulfuriques PC s MCs PCs 100 PE 1 6 METHODES CHROMATOGRAPHIQUES 1 6 1 Chromatographie sur couche mince CCM La C C M est une m thode de s paration physico chimique faisant intervenir une phase stationnaire ou adsorbant et une phase mobile ou luant Mat riel une plaque en silice G F 254 qui sert de support une cuve de migration un s choir lectrique des micro pipettes une pince une lampe U V 3k Solvants ac tate d thyle m thanol chloroforme ligroine eau 3 D p t des solutions tudier Les extraits tudi s ont t dissous raison de 10 mg dans 1 ml de solvant appropri ac tate d thyle pour les extraits dichlorom thane ther de p trole le m thanol pour les autres extraits organiques et le m lange eau m thanol pour les extraits aqueux 46 Les solutions ont t d pos e sous forme de point distant de 1 cm les uns des autres et de 1 5 cm des deux bords de la plaque le d p t se faisait en faible quantit 10 ul l aide de micropipettes Chaque
44. es difficult s d acc s aux soins de sant primaires cette probl matique en plus des comportements socioculturels et l chec des th rapeutiques antipaludiques font que pour beaucoup de populations le premier recours en mati re de traitement du paludisme est l utilisation des plantes m dicinales Parmi ces plantes figure celle qui fait l objet de notre tude Alchornea cordifolia qui est utilis e au Mali ainsi que dans la sous r gions seule ou en association avec d autres plantes comme antipaludique antidiarrh ique antifongique antibact rien cicatrisant des plaies et bien d autres utilisations MOTIVATIONS Notre travail s inscrit dans une perspective de valorisation et de d veloppement de la recherche sur les plantes m dicinales afin de pouvoir am liorer l tat de sant des populations ceci reste une volont des autorit s sanitaires de nos pays l OMS depuis 1978 s est aussi engager oeuvrer dans ce domaine Il a t motiv par a volont de promouvoir les plantes m dicinales la n cessit de d velopper et de faciliter l acc s aux m dicaments traditionnels am lior s moindre co t compte tenu du co t lev des m dicaments conventionnels nt r t que suscite l tude des mol cules naturelles a activit antipaludique l image de la d couverte de la quinine et de l art misinine le constat que peu de r sistance sont observ es avec les mol cules naturelles par rapport aux mol c
45. eux pouvant atteindre 9 m de haut avec un tronc de 30 cm de diam tre les branches sont flexibles lianescentes entrem l es dress es puis retombantes L corce est fibreuse Les feuilles grandes et elliptiques atteignent sur les rejets plus de 20 cm de long sur 15 cm de large Le fruit est une baie charnue de 3 5 cm de diam tre La plante est largement r pandue sur les sols humides en Afrique de l ouest 23 3 2 USAGE EN MEDECINE TRADITIONELLE Les feuilles le d coct est utilis contre la jaunisse en C te d Ivoire contre la diarrh e et la dysenterie au Liberia et comme vermifuge en Gambie Kerharo et Adams 1974 Adjanohoun et coll 1985 Les corces de tronc le d coct est utilis contre les affections f briles au Mali les maladies de la peau en Centrafrique le mac r est utilis pour traiter l inflammation au Nigeria Akub et coll 1982 Les racines le mac r est utilis pour traiter le paludisme au Mali et la jaunisse au Togo Perera et coll 1991 il est utilis comme vermifuge au S n gal la poudre de racine traite les plaies 3 3 CHIMIE Hottellier 1975 Hottellier 1979 Les principaux constituants sont des alcaloides retrouv s dans diff rents organes de la plante parmi ces alcaloides figurent 3 glucoalcaloides la cadambine la 3 o dihydrocadambine la strictosamide tous pr sents dans les feuilles en plus de l angustoline la naucl fine la d carbom thoxynaucl chine la
46. f avec une Clio 4 19 ug ml Le screening phytochimique a conclu en une richesse de rameaux feuill s de Alchornea cordifolia en substances ayant de grandes valeurs th rapeutiques l efficacit de ces substances n est obtenue que lorsque leur taux atteint une certaine proportion dans une pr paration usage traditionnelle ceci passe par une bonne m thode de cueillette et de conservation de ces organes Il serait souhaitable de poursuivre l tude de cette plante surtout dans le domaine toxicologique afin de mettre la disposition de nos populations une plante active avec des posologies pr cises Le d veloppement des m dicaments traditionnels am lior s serait un moyen moins cher et efficace pour faire face au probl me du paludisme et am liorer l tat de sant de la population 39 Quant au r le de l anoph le vecteur il peut tre limit par les moyens classiques de lutte savoir l utilisation des moustiquaires des insecticides et la destruction des g tes larvaires 40 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES Abbiw D K 1990 Useful plants of Ghana Royal botanique garden Kew edition 126 247 Adjanohoun E J Ake Assi L Floret J J Koumar M Ahyi A M R Raynal J 1985 Contribution aux tudes ethnobotaniques et floristiques du Mali ACCT 4 me dition Agbe S A O Oguntimein B 1987 Anti Trypanocidal activity of Alchornea cordifolia Phytotherapy research 1 151 153 Ajali U 2000 An
47. fois enti res La drogue est constitu e par les capitules elles contiennent Des amides tel que le spilantol Gerber 1903 Des flavono des tels que querc tine 3 glucoside quercetine 3 rhamnoglucoside apig nine 7 n onesp roside Very 1983 Des saponosides les sucres D glucose L rhamnose les genines B amyrines Kris 1975 5 4 PHARMACOLOGIE 28 L activit antipaludique du malarial a t valu e sur la prolif ration de Plasmodium falciparum lign e FCC32 chloroquinosensible les activit s du d coct du malarial Clso 0 6 mg ml et de Cassia Clso 0 66 mg ml taient similaires les deux autres d coct s Lippia et Spilantes ont t plus actifs Spilantes Clso 0 18 mg ml seul a t 3 fois plus actif que le malarial Doumbia 1994 Lippia avait une CIso 0 3 mg ml 5 5 ESSAIS CLINIQUES Le malarial a fait l objet d un essai clinique avec les objectifs suivants Comparer l efficacit du malarial celle de la chloroquine phosphate V rifier l existence ou non d effets secondaires li s la prise orale du malarial la posologie pr conis e par PIN R S P Ce travail a t r alis sur un chantillon de 53 patients d ge comprise entre 5 45 ans Les sujets retenus pr sentaient une goutte paisse et frottis positifs avec une parasit mie sup rieure o gale 5000 parasites mm une temp rature sup rieure ou gale 38 36 Malades taient trait s au ma
48. if de GUIGNARD pr paration du papier picrosod Acide picrique lg Carbonate de Sodium 10 g Eau distill e 100ml 1 7 R actif de KEEDE Acide dinitro 3 5 benzoique lg Ethanol 95 qSp 100ml 1 8 R actif de RAYMOND MARTHOUD 1 3 M dinitrobenz ne lg Ethanol 96 qSp 100ml 1 9 R v lateur de R sorcine R sorcine 100mg Ethanol 50 ml Acide phosphorique 50 ml 1 10 R actif de VALSER MAYER Iodure de potassium 25 g Chlorure mercurique 6 T1 g Eau distill e 250ml 41 HCI H5SO NH4OH N NaHCO cm CCM CPG CHCI5 Clio CO C DCI DCM DMT DMSO DPPH HO KOH INRSP im iv kg MGG ul Hg mg LEXIQUE DES ABREVIATIONS Acide
49. illeuse les feuilles sont glabres principalement paripenn es group es vers l extr mit des branches avec 3 7 paires de folioles oppos es o suboppos es La distribution est du S n gal en Ouganda et l Est du Soudan actuel 2 2 USAGES EN MEDECINE TRADITIONNELLE Newinger 1996 Khaya senegalensis joue un r le important en Afrique Occidentale dans la m decine humaine et v t rinaire Il est excessivement utilis comme tonifiant contre la fi vre et le paludisme Un adage s n galais dit l corce de cailc drat est am re mais elle gu rit elle est dite Quinquinona du S n gal Au Soudan actuel les tradipraticiens traitent la malaria avec l extrait de l corce de tronc en Gambie la fi vre est trait e avec le mac r d corce de tronc au Togo la d coction de l corce du caic drat et du fruit de Xylopia eathiopica est utilis e en boisson contre les coliques et l an mie au Mali la d coction d corce de tige est utilis e en bain pour traiter l h morroide 2 3 CHIMIE La plante est caract ris e par un grand nombre de triterp noides appel s m liacines ou limocines A part ces substances d autres constituants ont t isol s st rols coumarines flavonoides et des acides gras Paris 1939 a confirm la pr sence de caic drine et d montrait que l corce de Khaya est riche en tanins et saponines Dans les feuilles Mesbal er al 1984 isol rent des triterp nes amp et B amyriques
50. incipe il consiste d terminer la masse de la perte en eau d une prise d essai apr s un s jour de 24 h l tuve 3 Mode op ratoire dans 5 creusets tar s de masses respectives Mi M Ms nous avons mis une certaine quantit de poudre et repes les creusets les masses totales Mi M avant de les mettre l tuve 100 C pendant 24 h Apr s ce temps nous les avons pes s de nouveau M M 5 La masse d eau Me contenue dans la poudre de chaque creuset est donn e par la formule suivante Me M MI La masse de la prise d essai PEZM M Le Pourcentage d eau contenue dans la poudre Pourcentage d eau 100 PE Nous avons fait une moyenne avec les pourcentages d eau des 5 creusets r alis s dans les m mes conditions 1 4 2 M thode az otropique Principe il consiste entra ner l eau contenue dans une prise d essai de la drogue par distillation avec un solvant non miscible Mode op ratoire dans un ballon en verre sec nous avons introduit 100 ml de xyl ne et 1 ml d eau laiss distiller pendant 1 h sous un r frig rant muni d un tube conique gradu dans lequel l eau condens e est r cup r e Apr s 30 mn de refroidissement nous avons lu le volume d eau V et ajouter 5 g de poudre au contenu du ballon Le 43 m lange a t distill pendant 1 h Apr s refroidissement pendant 30 mn nous avons lu le nouveau volume d eau V5 Le volume d
51. ition de coloration rouge indique la pr sence de C h t rosides 1 3 4 Recherche des Coumarines Carot noides St rols et Triterp nes La solution analyser pour ces compos s est un filtrat ther thylique obtenu par mac ration pendant 24 h de 1 g de poudre dans 20 ml d ther 1 3 4 1 Coumarines Evaporer sec 5 ml du filtrat ajouter 2 ml d eau chaude partager la solution entre 2 tubes essai Au contenu de l un des tubes ajouter 0 5 ml de NH4OH 25 46 et proc der 40 l observation sous U V 366 nm une fluorescence intense indique la pr sence de coumarines 1 3 4 2 Carot noides Evaporer sec 5 ml de la solution analyser ajouter au r sidu 2 3 gouttes d une solution satur e de SbCl dans CHCH l apparition d une coloration bleue indique la pr sence de carot noides 1 3 4 3 St rols et triterp nes Evaporer sec 10 ml de la solution analyser dissoudre le r sidu dans 1 ml d anhydride ac tique puis 1 ml de chloroforme et r partir la solution entre 2 tubes essai l aide d une pipette ajouter 1 ml de Hab concentr au fond du tube sans agiter la formation d un anneau rouge brun tre la zone de contact des deux liquides et une coloration violette de la couche surnageant r v lent la pr sence de st rols et triterp nes C est la r action de Liebermann Buchard 1 3 5 Recherche des h t rosides cyanog n tiques Introduire le papier picrosod fraiche
52. l a une Clan 180 ug ml D autres plantes qui sont largement utilis es ont une concentration d inhibition de 50 largement sup rieur aussi 5 ug ml comme Mitragyna inermis qui a une Clso 250 ug ml pour les extraits aqueux des pr parations traditionnelles 38 CONCLUSION Actuellement la lutte antipaludique repr sente l un des d fis de la sant publique l exp rience a montr que les campagnes ne permettaient pas d liminer ou de maitriser le paludisme OMS 1991 Dans le cas du paludisme chloroquino r sistant il est souligner que malgr les succ s certains remport s dans la chimioth rapie le probl me demeure d actualit en effet l espoir fond sur certains nouveaux antipalud ens s estompe de plus en plus cause des nombreux checs enregistr s dans certaines zones en Thailande et au Cambodge le taux de r sistance la m floquine atteint 50 OMS 1993 Le d veloppement de la recherche sur les plantes m dicinales reste un espoir pour faire face au probl me d ordre th rapeutique que pose le paludisme Au cours de cette tude nous avons apport notre contribution pour une meilleure connaissance sur une des plantes activit antipaludique Alchornea cordifolia Nous avons d termin l activit antipaludique des extraits thanolique dichlorom thane ther de p trole m thanolique aqueux froid et chaud 50 et 100 l extrait thanolique a t le plus acti
53. l extrait analys 1 6 3 Chromatographie en phase gazeuse Cette chromatographie a t r alis avec la collaboration de l universit d OSLO Elle est utilis e pour l identification et la d termination quantitative des monosaccharides contenus dans les extraits La phase mobile est gazeuse les mol cules analyser sont transform es l tat gazeux Principe Les monosaccharides sont identifi s par comparaison de leur temps de r tention avec des temps de r tention du standard Les masse des monosaccharides sont obtenues partir des aires relatives Le standard utilis a t le mannitol Mat riel un chromatographe de type GS 8000 S ries une seringue de Sul des flacons de 4 ml un enregistreur 3k Proc dure 48 Les chantillons m thanolys s ont t dissous dans 100 ul de TMS et laiss reposer 20 mn 1 ul de cette solution a t inject dans le chromatographe programm comme suit Gaz porteur h lium Pression 80 bars D tecteur flamme donn par un m lange de hydrog ne air Temp rature elle allait de 140 170 250 300 avec une augmentation de 1 mn entre 140 et 170 Temps d arr t 35 mn temps au bout duquel les sucres sont d tect s A la fin du processus les diff rents monosaccharides sont identifi s sur les chromatogrammes en fonction de leur temps de r tention 1 7 METHODES CHIMIQUES 1 7 1 Hydrolyse acide Mat riel tuve type Memer
54. la fi vre les lombalgies et une chute tensionnelle Elle est d clench e par une infection r currente ou par une prise de quinine 6 DIAGNOSTIC BIOLOGIQUE Gentilini et Duflo 1986 La mise en vidence de l h matozoaire dans le sang est seule capable d apporter une certitude dans le diagnostic La recherche se fait sur une goutte paisse et un frottis color s au MAY GR NWAL GIEMSA MGG CHAPITRE 2 QUININE ET DERIVES 1 HISTORIQUE Hostettman 1986 L histoire rapporte que des mineurs indiens du P rou consommaient une infusion chaude d corce de quinquina pour supprimer leurs tremblements lorsqu ils taient expos s au froid et l humidit c est en observant ceci qu au d but du 17 si cle les missionnaires j suites eurent l id e d utiliser la poudre d corce de cette plante pour traiter les fi vres Par analogie de sympt mes l infusion d corce de quinquina a t utilis e pour traiter les tats de tremblement associ s aux crises de la malaria les effets furent spectaculaires Rapidement la poudre des j suites fut connue dans toute l Europe la sp cificit de son action sur le paludisme conduisait sa reconnaissance officielle alors m me que l identit de l esp ce productrice demeurait inconnue En 1742 C LINNE cr a le genre Cinchona en hommage la princesse de CINCHON qui avait t gu rie par la poudre de l corce de la plante Au 18 me si cle l usage de l c
55. lange et les transf rer dans les trous de la ligne C et ainsi de suite jusqu la ligne H une s rie de dilution facteur 1 2 est ainsi obtenue Les concentrations du compos tester vont de 5 ug ml 78 ng ml ajouter 100 ul de la solution de cellules parasit es au contenu de chaque trou de la plaque except s les trous A9 A12 qui re oivent une solution de cellules non infect es Tous les trous ont un taux d h matocrite gal 1 2596 et une parasit mie de 0 1596 au d but de l incubation La chloroquine a t utilis e comme standard une concentration maximale de 200 ng ml Soumettre la plaque l incubation pendant 48 heures apr s ajouter 100 ul d hypoxantine dans chaque trou et incuber de nouveau pendant 24 heures centrifuger et r cup rer les h maties sur un filtre o elles sont lav es et observ es au microscope afin de d terminer la parasit mie l inhibition est d termin e par une m thode graphique et la concentration inhibitrice 50 est calcul e 52 CHAPITRE 2 RESULTATS 1 ETUDES PHYTOCHIMIQUES 1 1 EXTRACTIONS La masse des rameaux frais tait de 7 Kg apr s s chage et pulv risation la masse de la poudre obtenue tait de 2 250 Kg TABLEAU N 4 Masses et couleurs des extraits rendements des extractions Natures des Masses des Masses des Rendements Couleurs des extraits extraits g prises d essai des extraits g extractions Ether de p trole 1 5
56. larial et 17 la chloroquine Les r sultats obtenus ont montr qu partir du 5 me jour de traitement il y a une n gativit de la parasit mie chez les patients sous chloroquine contrairement au malarial o la baisse de la parasit mie est beaucoup moins prononc e Il r sulte de l tude que le malarial est moins efficace que la chloroquine m me s il semble avoir une discr te action schizonticide qui reste confirmer Doumbia 1994 5 6 PRESENTATION ET POSOLOGIE Pr sentation paquet de 11 sachets de 10 g chacun Posologie adulte 2 sachets j pendant 4 jours et 1 sachet j pendant 3 jours Enfant 1 2 sachet 2 fois j pendant 4 jours et 1 2 sachet j pendant 3jours Mode d emploi d coction d un sachet de 10 g d une tranche de citron dans un 1 2 1 d eau pendant 10 mn filtrer et boire le d coct ti de et sucr 29 30 CHAPITRE 5 Alchornea cordifolia SCHMACH THONN MUELL ARG EUPHORBIACEAE Synonymes Alchornea cordata Benth Schousboea cordifolia Schum Et Thonn Noms locaux bambara k gira kounaninkala dunf k konossasa moridaba 21 1 BOTANIQUE 1 1 POSITION DANS LA SYSTEMATIQUE Crete 1965 Tableau N 3 La syst matique de Alchornea cordifolia EUCARYOTES SPERMAPHYTES ANGIOSPERMES THALAMIFLORES MERISTEMEMES DICOTYLEDONES DIALYPETALES EUPHORBIALES Famille EUPHORBIACEAE Sous famille CROTONO DES Genre Alchornea cordifolia 1 2 DESCRIP
57. les premi res fractions Dans notre cas ces substances sont des Polysaccharides 36 Traditionnellement A chornea cordifolia est utilis dans le traitement des plaies ceci pourrait s expliquer par la composition en monosaccharides de ses polysaccharides Nous avons trouv 2996 d arabinose 8 de rhamnose 22 de galactose dans la premi re fraction du d coct et 3296 d acide galacturonique dans la premi re fraction de la digestion ces sucres sont les principaux monosaccharides des galactanes rhamnogalactanes et rhamnogalacturonanes connus pour leur activit cicatrisante des plaies Tous nos extraits ont montr une activit antioxydante selon le test au DPPH les extraits organiques ont montr un nombre plus lev de substances actives l extrait ther de p trole a donn des taches franchement positives ces compos s sont donc apolaires Ces substances actives au DPPH pourraient tre les tanins car ils sont connus pour leur activit antioxydantes Les tudes sur ces compos s doivent n anmoins se poursuivre Nous n avons pas pu faire de liaison entre l activit antioxydante et l activit antipaludique cependant l extrait thanolique total qui est le plus actif sur Plasmodium a montr 5 taches de substances antioxydantes Ces t ches ont des Rf diff rents de ceux des taches du d coct qui ne s est pas montr actif la concentration maximale utilis e pour notre test antiplasmodiale Les r sultats de la Chroma
58. lle Plantes medicinales et toxiques Edition Vigot 402 404 Kerharo J Bouquet A 1950 Plantes m dicinales et toxiques de la C te d Ivoire Haute Volta Edition Vigot 67 Krisnaswamy N R Prasanna S Seshadry T R Vedantham T N C 1975 p Amyrin ester and sitosterol glucoside from Spilantes acmella Phytochemestry 14 1666 1667 Le Grand A 1989 Les phytoth rapies anti infectueuses de la for t savane seneal III un r sum des substances phytochimiques et l activit antimicrobienne de 43 esp ces J ethnopharmacology 52 315 338 Mesbal M K Abdel El Hafiz M A El Shanawany M A 1984 Pharmacognosy study of Khaya senegalensis in Egypt Botanical and chemical study of the leaf Bull Pharm Sci 7 207 223 Meshnick R M 1991 Artemisinine Quinghaosu the role of intracellular hemin in its mechanism of antimalarial action Molecular and Biochemical Parasitology 49 180 190 Millat L 1946 La Mitrinermine base v g tale hypotensive est elle identique la ryncophylline Annales pharmaceutiques francaises 4 1 23 29 Mouchet J Carnevale P 1991 R partition et classification cologique du paludisme Med Trop Ellipsse Aupelf Moyse H Paris P P 1965 Pharmacognosie g n rale collection de pr cis de mati re m dicale Edition Masson Tome 1 412 PP Mustofa Alexis V Francoise B Yves P Kon Bamba D Malli M 2000 Antiplasmodial activity of plan
59. lospermine type 1 R R R3 C11H23 Acide gallique type 2 Ri CisHer Ro R3 C11Hos type 3 Ri R2 CisHo7 Rae C11H23 type 4 R R2 R3 Cales type 5 Ri Ro CisHo7 R3 C15H31 1 4 PHARMACOLOGIE Diallo ef coll 1991 Diallo et coll 1992 Benoit et coll 1995 Cochlospermum tinctorium poss de une activit anticanc reuse sur les tumeurs de la peau attribu e aux triterp nes pr sents dans la plante La Cochloxantine et la dihydrocochloxantine ont des propri t s antifongiques et antibact riennes ils inhibent la croissance de Candida albicans de Aspregillus et de Echerichia coli L activit h patoprotectrice des extraits aqueux hydro thanolique et thanolique a t test e l activit observ e est probablement li e aux compos s ph noliques les carrot noides et les triterp nes L activit antipaludique de l extrait aqueux de racines a t test e in vitro sur deux souches de Plasmodium falciparum une souche chloroquino r sistante FC B de Colombie et une souche chloroquino sensible FC32 de Tanzanie La concentration 21 inhibitrice a t d termin e par deux m thodes la microm thode isotopique et la m thode visuelle la C Iso tait de l ordre de 1 2 ug ml 2 Khaya senegalensis Desr Nom local bambara djala 2 1 CARACTERES BOTANIQUES Kerharo et Adams 1974 Grand arbre de 25 30 m f t g n ralement court et trapu pouvant d passer 2 m de diam tre L corce est gris tre fonc e ca
60. mat riel et financier travers le projet CNRST NUFU plantes m dicinales A l institut des maladies tropicales de B les en Suisse pour leur collaboration dans r alisation du test antipaludique de nos extraits DIRECTEUR Dr ELIMANE MARIKO A NOS MAITRES ETJUGES A NOTRE MAITRE ET PRESIDENT DU JURY Professeur Ousmane DOUMBIA Maitre de conf rence agr g en Pharmacie chimique charg de l enseignement de la chimie th rapeutique la Facult de M decine de Pharmacie et d OdontoStomatologie Directeur du laboratoire national de la sant C est un grand honneur pour nous de vous avoir comme pr sident du jury nous vous prions de croire en notre profonde gratitude et notre reconnaissance A NOTRE MAITRE ET JUGE Dr Aboubacar Maiga Maitre assistant en Toxicologie charg de l enseignement de la toxicologie la Facult de M decine de Pharmacie et d OdontoStomatologie Nous sommes honor s de vous compter parmi nos juges veuillez bien trouver ici le t moignage de notre reconnaissance et de notre profond respect A NOTRE MAITRE ET CODIRECTEUR DE THESE Dr Drissa DIALLO Ma tre assistant en Pharmacognosie charg de l enseignement de la Pharmacognosie la Facult de M decine de Pharmacie et d OdontoStomatologie chef du D partement de M decine traditionnelle de l INRSP Vous avez dirig avec toute la rigueur scientifique la r alisation de ce travail votre amour pour le travail bi
61. ment pr par dans un tube essai sans toucher les parois ni tremper dans la solution contenant un m lange de 1 g de poudre 5 ml d eau distill e et 5 ml de tolu ne La pr sence d h t rosides cyanog n tiques est indiqu e par la coloration rouge plus ou moins rapide du papier picrosod 1 3 6 Recherche des h t rosides cardiotoniques Ajouter 1 g de poudre 10 ml d alcool 60 et 5 ml d une solution d ac tate neutre de plomb chauffer au bain marie pendant 10 mn et filtrer Extraire ce filtrat avec 10 ml de chloroforme partager la phase organique entre 3 tubes essai vaporer le contenu de chaque tube sec Reprendre les r sidus avec 0 5 ml d isopropanol et ajouter 1 ml des r actifs de KEDDE BALJET et RAYMOND respectivement dans les 3 tubes le r sultat suivant indique la pr sence de card nolides e tube avec r actif de KEDDE coloration rouge violac e e tube avec r actif de BALJET coloration orang e e tube avec r actif de RAYMOND coloration violette fugace 41 1 3 7 Recherche de saponosides Indice de mousse La solution analyser est obtenue par une d coction 1 pendant 15 mn Dans 10 tubes essai introduire respectivement 1 2 jusqu 10 ml de la solution analyser ajuster le contenue de chaque tube 10 ml avec l eau distill e Agiter chaque tube 2 fois par seconde pendant 15 secondes laisser les tubes au repos 15 mn et mesurer les hauteurs de mousse L indice
62. naucl tine la naufoline le naucl dinal et l pi 19 naucl dinal CX e CO N N N Y i o H DS E H HaCOOC Se E O OGluc Cadambine Naucl foline Angustine R CH CH Angustoline R HC OH Me Naucl fine R H Naucl tine R COMe OH OGluc N MeOOC Ww L0 O OGluc DS 24 3a dihydrocadambine Strictosamide Naulafine 3 4 PHARMACOLOGIE Au Nig ria Udon et coll 1995 ont mis en vidence des propri t s hypotensives de l extrait m thanolique des feuilles Asuzu et coll 1996 ont mis en vidence l activit antihelminthique du d coct sur les souches infestantes de Trichostrongylus Les activit s antiplasmodiales du d coct des corces de tronc et des racines ont t valu es sur Plasmodium falciparum les Cla taient comprises entre 1 4 ug ml pour les corces de tronc et 0 9 3 8 ug ml pour les corces de racines Bennoit ef coll 1998 Au Togo Gbeassor et coll 1981 ont mis en vidence l activit inhibitrice du d coct des racines sur la maturation des trophozoites de Plasmodium falciparum en schizontes au bout de 24 heures La Cl tait de 22 ug ml Traor 1999 a d montr que les alcaloides totaux ont une activit sur Plasmodium falciparum in vitro avec une Cl 5 ug ml mais ces alcaloides sont cytotoxiques la m me concentration 4 Mitragyna inermis Will Nom local bambara djun 4 1 CARACTERES BOTANIQUES Kerharo et Adams 1974 Arbre de 8 10 m de haut avec
63. ne d infection chez l homme Plasmodium falciparum agent de la fi vre tierce maligne c est l esp ce pr dominante en Afrique noire Plasmodium vivax surtout retrouv en Am rique latine et en Asie il est l agent de la fi vre tierce b nigne Plasmodium malariae agent de la fi vre quarte Plasmodium ovale galement agent de la fi vre tierce b nigne Les esp ces falciparum et vivax sont les plus r pandues 4 CYCLE VOLUTIF DES PLASMODIES Gentilini 1986 Bryskier 1988 Ce cycle comprend 2 parties Une phase de multiplication asexu e ou phase schisogonique qui a lieu chez l homme Une phase de reproduction sexu e ou phase sporogonique qui a lieu chez l anoph le 4 1 CHEZ L HOMME L volution se fait en 2 tapes une premi re tape pr rythrocytaire ou tissulaire une deuxi me tape rythrocytaire ou sanguine 4 1 1 LA PHASE PRE ERYTHROCYTAIRE Lors d un repas sanguin l anoph le femelle injecte l homme des l ments fusiformes appel s sporozoites Ces l ments envahissent les h patocytes o ils se transforment en trophozoites ces derniers vont ensuite se multiplier pour former des schizontes h patocytaires qui maturit vont clater et lib rer des milliers de m rozoites dans la circulation g n rale La dur e de ce cycle cliniquement latent varie selon les esp ces Pour l homme elle va de 6 10 jours 4 1 2 LA PHASE ERYTHROCYTAIRE Les m rozoites de
64. ois en 1970 de l ARTEMISININE appel QUINGHAOSU Ses propri t s antimalariques ont t d crites pour la premi re fois en 341 apr s Jesus Christ en Chine Artemisia annua Ja seule esp ce productrice d art misinine est connue depuis des si cles pour ses vertus antipyr tiques 2 COMPOSES 2 1 L ARTEMISININE 2 1 1 FORMULE CHIMIQUE ET NOMENCLATURE Meshnick 1991 D nomination commune internationale D C I Art misinine Nom commun Quinghaosu Formule brute C13H2 05 Formule d velopp CH3 H3C o oQ 9 CH3 2 1 2 OBTENTION L extraction partir des feuilles et des fleurs de Artemisia annua L pr sente le meilleur rendement 2 2 L ARTEMETHER 14 2 2 1 FORMULE CHIMIQUE ET NOMENCLATURE D nomination commune internationale Art mether Formule brute C16H2605 Formule d velopp Nom chimique 3 6 9 trim thyl 10 m thoxy 3 12 poxyd cahydro 12 pyrano 2 benzodiox pine CH3 H3C O o9 CH3 OCH 2 2 2 OBTENTION L art mether est un d riv s mi synth tique pr par partir de l art misinine en deux tapes d abord une r duction de l oxyg ne fix sur le carbone en position 12 ensuite une est rification du groupement OH form La r action abouti la formation de deux isom res a et p 2 3 L ARTESUNATE 2 3 1 FORMULE CHIMIQUE ET NOMENCLATURE Plat 1995 D nomination chimique internationale Art sunate Formule mol culaire C1
65. oit tre dilu la concentration de 60mg ml 2 1 7 EFFETS SECONDAIRES WHO 2000 La quinine peut entrainer des effets plus ou moins g nants vertiges troubles de la vision d mangeaisons ruption g n ralis e hypoglyc mie diminution des plaquettes 2 2 LE QUINIMAX WHO 2000 Le quinimax est une association de 4 alcaloides de Cinchona la quinine la quinidine la cinchonine la cinchonidine Des tudes limit es d montrent qu il n existe pas une diff rence significative entre l efficacit th rapeutique du quinimax et celle de la quinine et que ces deux compos s ont des comportements similaires l int rieur de l organisme 2 3 LA QUINIDINE WHO 2000 La quinidine est un diaster oisom re de la quinine avec des propri t s antimalariques similaires elle n est pas recommand e pour le traitement de routine du paludisme simple mais plut t pour celui du paludisme compliqu et par voie parent rale Ses doses sont apparent es celles de la quinine 2 4 LES AMINO 8 QUINOLEINES OMS 1984 Synth tis s vers les ann es 1920 par Schulemann et ses collaborateurs ces mol cules dont le chef de groupe est la PRIMAQUINE ensuite la Rhodoquine Pentaquine Pamaquine et le Quinocide ont marqu une tape dans la recherche des antipaludiques 2 4 1 STRUCTURE Nom chimique Amino 4 m thyl 1 butylamino 8 m thoxy 6 quinoleine CH us L N NH CH CHz CHz CHo NH CH3 L
66. orce de quinquina se g n ralisa dans le monde entier En 1820 deux chimistes fran ais PIERRE et JOSEPH isol rent la quinine principal alcalo de de l corce de quinquina La quinine tait la substance la plus active contre les sympt mes de la malaria En 1945 WOODWARD et DOERING r alis rent la synth se totale de la quinine 2 COMPOSES 2 1 LA QUININE O M S 1984 L corce de quinquina contient un m lange d une dizaine d alcaloides d sign sous le nom de quinoidine Quinquina officinalis une des esp ces de Quinquina contient au minimum 6 5 d alcaloides parmi lesquels 4 sont importants la quinine 30 60 dans l esp ce officinalis la quinidine la cinchonine la cinchonidine les 2 premiers sont les plus actifs contre les parasites du paludisme humain 2 1 1L STRUCTURE DE LA QUININE O M S 1984 Formule brute C H24 N2 O2 Nom chimique Vinyl 1 quinuclidyl 2 m thoxy 6 quinolyl 4 carbinol Formule d velopp e H cCHe HCO N Quinine Toute modification de la structure chimique de la quinine modifie l action pharmacologique du compos 2 1 2 OBTENTION Autrefois extrait de l corce de quinquina Quinquina ledgeriana esp ce cultiv e pour la production la quinine est aujourd hui obtenue par synth se 2 1 3 PROPRI T S PHARMA COLOGIQUES OMS 1984 La quinine antipaludique naturel exerce une action schizonticide sanguine rapide sur les diff rentes esp ces
67. osit m re de tous les enfants du monde si tes bonnes uvres ont t jet au fond de l oc an si les poissons ne te le reconnaissent pas le tout Puissant te le reconnaitra ch re m re ce travail est le tien A mes s urs DJELIKA et FATOUMA TOGOLA vous m avez balay le chemin de la vie et clair mon chemin aujourd hui encore bien que distantes les unes des autres le sentiment fraternel encore plus fort continue m clairer merci de la main fraternelle mes fr res Seydou Ousmane et Yacouba TOGOLA le chemin est dur et encore long il faudrait du courage beaucoup de courage et de la chance Que Dieu vous garde et vous montre le droit chemin A mes parents Mr et Mme Bazan TOGOLA il existe encore des parents qui puissent aimer d autres enfants que les siens ce sentiment fort me lie vous merci du soutien moral durant toutes ces longues ann es A mes fr res et s ur Moussa Souleymane et Fanta TOGOLA merci du fond du c ur du soutien fraternel plus que moral que vous m avez accord A ma scur et amie Rokia Togola tu es la seule qui puisse me comprendre me conseiller et me soutenir dans une complicit qui est la notre Dieu fasse que notre amiti soit ternelle dans ce bas monde et au del mon oncle et tente Mr et Mme Mall sans vous ce travail n allait atteindre sa fin merci pour ce soutien Innocents voici une uvre J adresse mes Remerciements les plus sinc res Au
68. personnel du D partement de M decine Traditionnelle particuli rement A Dr Drissa DIALLO chef du d partement pour m avoir accept dans le laboratoire et m avoir suivit avec attention durant tout le temps qu dur ce travail A Dr Maiga et Dr Sanogo pour l attention qu ils ont port sur la r alisation de ce travail A Fagnan Sanogo Famolo Diarra et Mme Tapa Fan techniciens au sein du laboratoire pour la bonne atmosph re de travail qu ils m ont accord Au Directeur du Programme National de Lutte contre le Paludisme Dr Massambou SACKO Au Directeur du laboratoire national de sant Pr Ousmane DOUMBIA Au D partement d Epid miologie et des Affections Parasitaires DEAP particuli rement au Pr Ogobara DOUMBO et Mme KAMISSOKO Fanta TRAORE Pour leurs apports dans la documentation de ce travail A mes camarades Tolo Igor Fan Sidib Makan Richard Itiann Hamsatou Ramata pour la bonne entente et leur soutien constant au cours de la r alisation de ce travail mes camarades et amies Bintou Tenin et Mariam pour 5 ans de dur labeur le chemin f t long mais pas interminable bonne chance vous tous mes camarades de la premi re promotion de la Facult de Pharmacie A tous ceux que je n ai pas nomm et qui de pr t ou de loin ont contribu l laboration de ce travail Que tous en soient vivement remerci s MENTION SPECIALE A l universit d Oslo Norv ge pour son soutien
69. plasmodiales et par cons quent un m dicament propre assurer la gu rison clinique Son administration prolong e permet souvent la gu rison radicale du paludisme falciparum mais rarement de l infection vivax La quinine a galement une certaine efficacit contre les gam tocytes immatures de Plasmodium falciparum 2 1 4 M CANISME D ACTION OMS 1984 Le m canisme d action pourrait tre expliqu par l effet base faible due au noyau oxyquinoleique et par la pr sence d un transporteur facilitant le passage de la mol cule vers la vacuole digestive 2 1 5 PHARMACOCIN TIQUE WHO 2000 Par voie orale la quinine apr s absorption passe dans l estomac sans subir de modification elle est absorb e au niveau de l intestin sup rieur et passe dans la circulation sanguine l tat de base La concentration plasmatique atteint son sommet entre 1 3 heures Par voie intraveineuse i v ou intramusculaire i m la liaison aux prot ines est de 70 la distribution se fait entre les liquides du corps les plus riches en prot ines elle traverse la barri re placentaire et se base dans le liquide c r brospinale le volume de distribution est plus lev chez le sujet saint faible chez les enfants que chez les adultes La quinine est intens ment m tabolis e dans le foie sa demi vie d limination est de10 12 heures chez une personne malade elle est excr t e dans l urine principalement en m tabolites hydroxyl s
70. rique du sud dou e d un grand pouvoir d expansion est devenue de ce fait pantropicale On la trouve partout au Mali l exception des r gions d sertiques du nord Doumbia 1994 La drogue est constitu e par les feuilles elles contiennent Des d riv s anthrac niques le physcion l oxidentalol 1 et 2 le singuenol 1 germichrysone m thyl germitorosone Des anthraquinones chrysophanol modine questine Des flavonoides kampherol apigenine vitexine 7 O glucosyl vitexine Anton 1968 Des mati res azot s acides aminobutyriques Duquenois 1968 Des huiles essentielles Gaind 1966 Rs O OH ER Ro O Physcion R OMe R Me R3 OH 27 Chrysophanol R H R Me R OH Emodine R 2OH R2 Me R3 OH Questin R1 OH R2 Me R3 OMe OH OH O ce us OH MeO XI R2 O OH d Singuenol R R Me Occidentalol 1 R Me Bach Occidentalol 2 R R H 5 2 Lippia chevalieri MOLD Nom local bambanra n ganiba Herbe aromatique ligneuse dress e ramifi e aux inflorescences Les feuilles sont verticill es par 3 ou 4 Les fleurs sont petites et blanches La drogue est constitu e par les feuilles 5 3 Spilantes oleracea Jacq Nom local bambanra farimani Plante annuelle rameuse touffue tal e la base car s enracinant au niveau des noeuds inf rieurs puis ascendante atteignant 50 cm de haut Les tiges et les branches sont cylindriques les feuilles oppos es sont triangulaires dent es o quelque
71. rom thane 0 05 Violac e Rouge 0 08 Jaun tre 58 0 15 Bleue verd tre Orang e Bleue 0 24 Verd tre Bleue 0 30 Verd tre Bleue 0 34 Gris tre Rouge Gris tre 0 39 Verd tre Rouge Gris tre 0 46 Verd tre Rouge Jaune 0 56 Violac e Rouge Jaune 0 66 Bleue Rouge 0 75 Gris tre Violette 0 79 Rouge 0 86 Bleue 0 90 Rouge 0 95 Gris tre Bleue 0 97 Jaune Rouge Ether de p trole 0 05 Gris tre Orang e 0 1 Gris tre Bleue 0 15 Gris tre Bleue Gris tre 0 2 Gris tre 0 22 Verte Jaun tre 0 31 Bleue 0 36 Rouge 0 41 Rouge 0 55 Verte Rouge Rouge 0 66 Verte Rouge 0 72 Verte Bleue Violette 0 84 Bleue Rouge 0 87 Bleue 0 91 Bleue Bleue 0 95 Gris tre Bleue 0 97 Gris tre Rouge Rouge A 254 nm les taches pr sentent diverses couleurs que l on peut diff rentier l il nu 39 La majorit des taches pr sentent une fluorescence bleue 366 nm cette caract ristique est celle des tanins polyph noliques Espace image r serv Figure N 7 CCM des extraits ther de p trole et dichlorom thane dans le syst me de solvant ligroine ac tate d thyle r v l e avec le r actif de Godin 60 1 4 2 Chromatographie sur colonne Biogel P6 Courbes de fractionnement de Ac par Biogel P6 diges decot
72. s Aizoaceae Glinus oppositifolius L Asteraceae Vernonia colorata Will Caesalpiniaceae Cassia sieberiana D C Cochlospermaceae Cochlospermum tinctorium A Anogeissus leiocarpus D C Combretaceae Combretum glutinosum Perrex Guiera senegalensis J F Euphorbiaceae Alchornea cordifolia Schumach Chrosophora senegalensis Lam Noms bambara Parties ind utilis es Balassa Partie EN a rienne Feuilles Ecorce racine Feuilles Feuilles Feuilles Feuilles Feuilles Dabada Feuilles Hypericaceae Psorospermum guineense Hochr Meliaceae Khaya senegalensis Desr Trichilia roka Forst Karidjakouma Feuilles Djala Ecorce tronc Soulafinzan Ecorce tronc Acacia senegal L Willd Donkari Ecorce tronc 19 Mimosaceae Entada africana Guill Perr Ecorce tronc Parkia biglobosa Jacq Ecorce tronc Moraceae Ficus thonnigii Blume Feuilles Poaceae Oxytenanthera abyssinica Munro B Feuilles Gardenia ternifolia Schum Feuilles Rubiaceae Mitragyna inermis Willd Feuilles Nauclea latifolia Sm Ecorce tronc Rutaceae Fagara zanthoxylo des Lam W Feuilles Verbenaceae Lippia chevalieri Moldenke Feuilles Parmi les plantes cit es dans ce tableau quelques unes poss dent une activit antipaludique confirm e ce sont 1 Cochlospermum tinctorium A RICH Nom local bambara n tiribara 1 1 CARACTERES BOTANIQUES Doumbia 1994 Cette plante commun ment appel e le teinturier africain a un r
73. s ce temps le m lange a t vapor sec sous un courant d air chaud et d azote et le r sidu lav avec 1 ml de m thanol 2 fois Ce r sidu additionn de 100 ul de solution trim thyl silane TMS est utilis pour la CPG 2 TESTS PHARMACOLOGIQUES 2 1 ACTIVIT ANTI OXYDANTE On d finit comme radical libre n importe quelle mol cule ind pendante contenant un ou plusieurs lectrons non appari s Bien que le terme de radical libre ait souvent t assimil une esp ce r active ou un oxydant il est important de signaler que tous les radicaux libres ne sont pas forcement des oxydants de m me tous les oxydants ne sont pas des radicaux libres On d signe par antioxydant toute substance qui lorsqu elle est pr sente en faible concentration compar e celle du substrat oxydable retarde ou pr vient de mani re significative l oxydation de ce substrat Les antioxydants d origine naturelle semblent contribuer de mani re significative la pr vention de certaines maladies telles que les cancers et les maladies cardiovasculaires Test de r duction du DPPH 50 Ce test a t r alis au sein du laboratoire Le test a t effectu sur un chromatogramme des extraits de la plante les extraits sont d pos s sur une plaque et d velopp s dans les syst mes appropri s Apr s la migration et le s chage les plaques sont r v l es avec une solution de DPPH 2 mg ml de m thanol les compos s a
74. sol s Bishay et coll 1988 R R R N N g L N N O N O R R S x OCH H H4COOC H3COOC Hcooc w OOH Alcaloides oxindoliques Alcaloides oxindoliques Alcaloides indoliques pentacycliques t tracycliques t tracycliques R N N CH3 O H4COOC X Alcaloides indoliques pentacycliques 4 4 PHARMACOLOGIE Perrot 1939 et Millat 1945 ont mis en vidence l activit f brifuge et hypotensive de la rynchophiline En 1972 Macko a d montr que la mitragynine avait des propri t s antitussives Tour et coll 1996 ont montr que les alcaloides isol s des feuilles et en particulier la speciophylline avait une activit chol r tique chez la souris 26 Traor 1999 a d montr que les alcaloides totaux de Mytragina inermis taient responsables d une activit sur Plasmodium falciparum avec une Cl allant de 4 6 ug ml 5 LE MALARIAL Le malarial m dicament traditionnel am lior est une mixture de parties de 3 plantes 62 96 de feuilles de Cassia occidentalis L Caesalpiniaceae 3296 de feuilles de Lippia chevalieri Moldenke Verbenaceae 6 de capitules de Spilantes oleracea Jacq Asteraceae 5 1 Cassia occidentalis L Nom local bambara balambalan kasago Herbe o sous arbrisseau dress e annuelle o vivace atteignant 1 m de haut environ les feuilles sont compos es les fleurs sont jaunes les gousses troites contiennent 10 20 graines Esp ce originaire de l Am
75. t balance analytique tubes essai pipette ampoule d canter prouvette gradu e b cher ballon rotavapor Proc dure 5 mg de chaque fraction ont t dissous dans 10 ml de HCl 2N et plac s dans un four r gl 100 C pendant 3 h apr s refroidissement nous avons extrait 3 fois la solution avec 5 ml de chloroforme vapor sec les phases aqueuses et r cup r le r sidu avec quelques gouttes du m lange m thanol eau 1 1 Une CCM a t r alis e sur cette solution et celles des sucres t moins l arabinose le rhamnose le xylose le mannose le galactose le glucose les acides glucuronique et galacturonique dissous raison de 1 mg dans 1 ml du m lange m thanol eau La migration a t effectu e dans le syst me isopropanol eau 85 15 la plaque a t r v l e avec une solution de naphtor sorcinol et chauff e l aide d un courant d air s choir Les taches ont apparu color es sur un fond jaune les sucres contenus dans les fractions ont t identifi s par comparaison de leurs Rf avec ceux des t moins 1 7 2 M thanolyse La composition en sucres des fractions peut tre d termin e aussi par chromatographie en phase gazeuse d un d riv trim thyl sililat obtenu par m thanolyse 49 A 2 mg de chaque fraction nous avons ajout 1 ml de m thanol chlorhydrique 4 M et 200 ul du m lange mannitol m thanol 1000 ug ul incub le m lange 80 pendant 24 h Apr
76. t r t de la sant publique ma profession avec conscience et de respecter non seulement la l gislation en vigueur mais aussi les r gles de l honneur de la probit et du d sint ressement De ne jamais oublier ma responsabilit et mes devoirs envers le malade et sa dignit humaine En aucun cas je ne consentirai utiliser mes connaissances et mon tat pour corrompre les maurs et favoriser des actes criminels Que les hommes m accordent leur estime si je suis fid le mes promesses Que je soit couvert d opprobres et m pris de mes confr res si j y manque 46
77. t de fa on s quentielle diff rents stades du cycle parasitaire Ces associations ont l avantage d augmenter l efficacit des m dicaments ou de retarder l apparition de la r sistance l un ou aux deux m dicaments Exemples d associations SAVARINE association entre chloroquine et proguanil utilis dans le traitement pr ventif COARTEM association entre l art mether et lum fantrine est utilis dans le traitement curatif 8 SCH MAS THERAPEUTHIQUES DU PALUDISME PAR LA QUININE L ARTEMISININE ET LEURS DERIVES Chaque cas de paludisme est un cas particulier en zone d end mie les diff rents sch mas th rapeutiques tiennent compte des facteurs cliniques et pid miologiques Traitement de l acc s simple Touze et coll 1998 La chloroquine Nivaquine P Aralen R sorchin existe sous forme comprim dos s 100 et 300 mg le sch ma est de 500 mg j pendant 5 jours 17 La quinine comprim la posologie est de 25 mg kg j administr des intervalles de 8 heures et ceci pendant 7 10 jours La quinine injectable n est recommand e qu en cas d intol rance digestive des formes orales Traitement de l acc s pernicieux Grachot et coll 1998 La quinine par voie I V la posologie de 25 mg kg j pendant 6 jours Les d riv s du Qinghaosu recommand s pour traiter les souches r sistantes la quinine L art misinine Cotexin est utilis la dose de 3 2mg kg j en i m le premi
78. t extract used in west african traditional medicine J of Etno Pharm 73 145 151 Newinger H D 1996 African ethnobotany poisons and drugs chimestry pharmacology toxicology edition chapman 608 612 Ogundipe O O Moody J O Hougton P 2001 Occurrence of flavonol sulfates in Alchornea laxiflora Pharmaceutical Biology Vol 2 6 421 423 OMS 1984 La chimioth rapie du paludisme 39 74 OMS 1991 Le paludisme sant du monde Sept Oct 6 OMS 1993 Vaccination exig es et conseils d hygi ne voyages internationaux 38 OMS 2000 The use of antimalarial drugs report of an informal consultation H O Geneva 13 17 novembre 2000 Paris R Mignon H 1939 Sur quelques M liaceae r put s f brifuges Bull Soc Pharmacol 46 104 108 Perera P Kumbi E Sandberg F 1991 Pharmacological screening some plants of Cameroun Fitoterapia LXII 139 143 Perrot E 1939 Drogues m dicinales et toxiques de l AOF Travaux des laboratoires de Mati res M dicales et de gal niques de Paris XXX l re partie Plat M Ythier P Denes I 1995 R sum dossier Arsumax Comprim s 50 mg Sanofi Wintrop AMO 46p Pruja S 1987 Contribution l tude phytochimique de Alchornea cordifolia m moire de DEA INP Toulouse Rhone P Robert D 1993 Etude comparative de l efficacit et de la tol rance de l art mether en im et de la quinine en iv dans le traitement du paludisme s v re Plasmodium falciparum d
79. t plus actuelle qu elle repr sente en zone tropicale et subtropicale la maladie parasitaire la plus s v re avec pr s de 2 milliards de personnes expos es annuellement Bryskier 1988 Au Mali le paludisme constitue la premi re cause de consultation et d hospitalisation dans les centres de protection maternelle et infantile et dans les services de p diatrie Bouvier et coll 1997 La mortalit et la morbidit li es au paludisme sont respectivement 14 et 15 chez les sujets risque constitu s par les enfants de moins de dix ans et les femmes enceintes Doumbo et coll 1992 La chloroquine recommand e comme m dicament de premi re intention dans le traitement de l acc s palustre simple pr sente depuis quelques ann es des cas de r sistances de Plasmodium falciparum Doumbo et coll 1992 En effet des probl mes d ordre th rapeutique se posent aujourd hui notamment avec l apparition des souches de Plasmodium r sistantes aux antipaludiques de synth se Les plantes m dicinales constituent l une des voies d investigation alternative int ressante l image de la d couverte de la quinine de l art misinine et de leurs d riv s issus de plantes utilis es en m decine traditionnelle Peu de cas de r sistance sont observ s avec les mol cules naturelles contrairement aux m dicaments antipaludiques de synth se 12 Au Mali ainsi que dans les autres pays en voie de d veloppement la pauvret accentue l
80. tage en sucre des fractions du d coct puis 504 401 S 2518 t 304 8 ol 20 o amp vol 0 F1 F2 F3 Fractions Figure N 11 Teneur en sucre des fractions du d coct puis Pourcentage en sucre des fractions de la digestion Pourcentage F1 F2 F3 F4 Fractions Figure N 12 Teneur en sucre des fractions de la digestion Les premi res fractions sont riches en sucres que les derni res La premi re fraction du d coct est la plus riche de tous les extraits et fractions que nous avons analyser avec pr s de 62 de sucres 63 Teneur en sucre de la premi re fraction du d coct Gal 22 29 Glu 30 A gal 4 Xyl 896 7 Figure N 13 Composition en monosaccharides de la premi re fraction du d coct Teneur en sucre de la premi re fraction du d coct puis Gal Ara 16 22 Rham 6 Xyl 3 43 10 Figure N 14 Composition en monosaccharides de la premi re fraction du d coct puis 64 Teneur en monosaccharides de la premiere fraction de la digestion A Glu Glu 2 Ara 14 21 Rham 5 Gal 18 Xyl Man 2496 296 A Gal 1496 Figure N 15 Composition en sucre de la premi re fraction de la digestion Nous remarquons que dans les premi res fractions issues des deux d coctions le glucose est le plus abondant des monosacchari
81. te tude a consist la d termination de l activit antipaludique d une plante utilis e en m decine traditionnelle dans le traitement du paludisme Alchornea cordifolia de la famille des Euphorbiaceae Le travail a t r alis sur la poudre de rameaux feuill s r colt s Kati Les groupes chimiques ont t d termin s par des r actions de caract risations une CCM a t effectu e sur les extraits obtenus les monosaccharides des extraits aqueux ont t identifi s par la chromatographie sur colonne et la chromatographie en phase gazeuse ce sont le glucose le galactose le mannose l arabinose le xylose le rhamnose les acides galacturonoque et glucuronique L activit antioxydante des extraits a t d termin e par la m thode de r duction du DPPH les extraits aqueux ont t les plus riches en substances activit antioxydante 44 L activit antiplasmodiale a t d termin e par la m thode de dilution sur plaque l extrait thanolique a t le plus actif avec une concentration inhibitrice ICso 4 19ug ml Mots cl s Alchornea cordifolia paludisme monosaccharides antioxydants 45 SERMENT DE GALIEN Je jure en pr sence des Maitres de la facult des conseillers de l ordre des pharmaciens et de mes condisciples D honorer ceux qui m ont instruit dans les pr ceptes de mon art et de leur t moigner ma reconnaissance en restant fid le leur enseignement D exercer dans l in
82. thrac niques libres A 1 g de poudre ajouter 10 ml de chloroforme chauffer au bain marie pendant 3 mn et filtrer 1 ml de ce filtrat ajouter 1 ml d ammoniaque et observer la coloration rouge indiquant la pr sence d anthrac niques libres c est la r action de Borntragger 3 1 3 2 Anthrac niques combin s Les O H t rosides Sur la poudre pr c demment puis e par le chloroforme ajouter 10 ml d eau distill e et 1 ml de HCl chauffer au bain marie pendant 15 mn puis filtrer Prendre 5 ml de ce filtrat extraire avec 5 ml de chloroforme A la phase organique ajouter 1 ml de NH4OH dilu L apparition d une coloration rouge indique la pr sence d anthraquinones sous la forme O h t rosides A la suite de cette r action nous avons recherch Les O H t rosides g nines r duites A 5 ml du filtrat pr c dent ajouter 3 4 gouttes de FeCl 10 chauffer au bain marie pendant 5 mn extraire ensuite avec 5 ml de chloroforme A la phase organique ajouter 1 ml de NH4OH dilu L apparition d une coloration rouge plus intense qu au d part indique la pr sence des anthranols o anthrones Les C H t rosides La solution analyser est la phase aqueuse obtenue avec la solution analyser des O h t rosides laquelle il faut ajouter 10 ml d eau et 1 ml de FeCls Apr s chauffage au bain marie pendant 30 mn extraire avec 5 ml de chloroforme soutirer la phase organique et ajouter 1 ml de NH4OH dilu e L appar
83. tibacterial activity of alchornea cordifolia stem bark Fitoterapia 71 436 438 Akub P L Mittal G C 1982 Clinical evaluation of traditional herbal practice in Nigeria J Etnopharmacol 6 355 359 Anton R Duquenois P 1968 L emploi des Cassia dans les pays tropicaux et subtropicaux examin d apr s quelques uns des constituants chimiques de ces plantes Plante Med phytoter 2 255 268 Asuzu I U Njoku C K 1996 The anthelmintic effect of Alstonia boonei bark and Nauclea latifolia leaves aqueous extracts on Trichostrongylus infective larvae Fitoterapia LXV II 3 220 222 Barry M S Oulal K Camara N Vuetinck A J Vanden Bergue D Bald A M 2002 Evaluation de l activit antifongique de plantes usage populaire en Guin e Poster lors du syposium international sur la chimie et la pharmacologie des plantes utilis es en m decine traditionelle en Afrique 6 8 Mars Bamako Mali Bennet H 1950 Alchornea cordifolia leaves and bark from Nigeria Colonial plant annual Products 1 132 134 Benoit V Valentin A Cournac V Pelissier Y Mallie M Bastide J 1998 fu vitro antiplasmodial activity of stem and root extract of Nauclea latifolia Sm Rubiaceae Journal of ethnopharmacol 61 173 178 Benoit V Valentin A Marion C Mallie M Bastide J 1995 Antimalarial activity in vitro of Cochlospermum tinctorium tubercule extracts Trans Roy Soc Trop Med hyg 89 217 218 35 Bishay D
84. tographie en phase gazeuse et de la r duction du DPPH nous sembles nouveaux puisque dans la litt rature nous n avons trouv aucune mention de ces r sultats Nos r sultats du test sur Plasmodium falciparum sont conformes ceux de Mustofa qui d montrait que l extrait thanolique des feuilles de Alchornea cordifolia esp ce Ivoirienne avait une Clso 4 56 ug ml sur l esp ce Fc B1 de Colombie chloroquino r sistante de P falciparum La diff rence qui est l une des motivations de notre recherche est que cette esp ce ivoirienne est un arbre de 10 15 m tandis que celle malienne est un arbuste de 4 5 m de haut Nous pouvons de ce fait affirmer que le port de cette plante n a pas d influence sur son activit antipaludique Le m me auteur trouvait une Clso 2 47 ug ml du m me extrait sur la souche Nigerian sensible la chloroquine de P falciparum 37 Ces tudes permettent de souligner une ventuelle solubilit de la substance active non encore identifi dans l thanol Le d coct qui est la forme principale d utilisation traditionnelle ne s est pas montr actif la dose que nous avons test 5 ug ml n anmoins il a montr une diversit et une grande richesse en sucre il a une Clio gt 5 ug ml rappellons qu il en est de m me pour le malarial largement utilis dans le traitement du paludisme qui a une Clio 600ug ml le Spilanthes olerecae qui est la plante la plus active du malaria
85. trole qui pr sente 6 taches de compos s activit antioxydante Les extraits organiques en sont plus riches que les extraits aqueux ceci se traduit par un nombre de taches plus lev sur le chromatogramme Espace image r serv Figure N 17 Plaque r v l e au DPPH apr s migration dans le syst me chloroforme m thanol eau Espace image r serv Figure N 18 Plaque r v l e au DPPH apr s migration dans le syst me Ligroine ac tate d thyle 68 LI ther de p trole pr sente une substance nettement active Rf 0 87 2 2 ACTIVITE ANTIPLASMODIALE Tableau N 12 R sultats du test sur Plasmodium falciparum des diff rents extraits Nature de l extrait Valeur de la CIso ug ml Extrait thanolique 4 19 25 25 Extrait m thanolique 25 Extrait avec le dichlorom thane 25 25 Extrait aqueux mac r Extrait thanolique puis Chloroquine 0 053 L extrait thanolique a donn une ClIso 4 19 ug ml face au standard qui a une Clio 0 053 ug ml Ce r sultat montre une activit r elle de Alchornea cordifolia sur la souche KI de Plasmodium falciparum Tous les autres extraits ont une concentration inhibitrice sup rieure 5 ug ml qui tait la concentration maximale utilis e pour le test 69 COMMENTAIRES ET DISCUSSIONS Dans la litt rature Alchornea cordifolia est cit comme une plante largement utilis e contre le paludisme elle
86. ts en vue de d terminer leur composition Son principe repose sur la s paration selon la masse mol culaire les substances de masse lev e sont les premi res tre recueillies 47 Mat riel une colonne en Biogel P6 une pompe d aspiration de type Pharmacia Biotech Pump P 1 un collecteur de tube pharmacia Biotech Redifrac des tubes essais un filtre en microfibres de verre type Watman circulaires de diam tre 110 mm un filtre millipore type Millex AA de diam tre 0 8 um et un spectrophotom tre type NOVASPEC 2 BIOTECH Solvants eau distill e d gaz e ph nol 4 l acide sulfurique 3 Pr paration de la solution chromatographier Nous avons dissout 5 g d extrait dans 100 ml d eau distill e d gaz e filtr sous vide la solution obtenue a t introduite dans la colonne l aide de la pompe Elution Le solvant d lution eau distill e d gaz e a t administr la colonne galement par la pompe le d bit tait r gl 1 ml mn L luat a t recueilli dans des tubes dispos s sur un collecteur r gl son tour 15 mn tubes 3 D termination de la densit optique Sur 200 ul du contenu de chaque tube nous avons ajout 2 ml de H5SO et 1 ml de ph nol apr s 20 mn de repos nous avons d termin la densit optique au spectrophotom tre 487 nm La courbe densit optique num ro de tube a t trac e elle permet de d terminer les diff rentes fractions de
87. ui de Bennet qui mentionne ces mol cules un taux de 10 7o dans les feuilles La pr sence de tanins conf rent la plante des propri t s astringente antiseptique antioxydante et antidiarrh ique les tanins provoquent une sorte de tonnage sur la peau et une action vasoconstrictrice sur les petits vaisseaux sanguins Moyse 1965 Les alcaloides sont pr sents un taux gal 0 1 dans les rameaux feuill s ceci est confirm par les travaux de Paris 1958 qui a trouv un taux de 0 2 dans les corces de tige L cart pourrait s expliquer par la diff rence de l organe tudier Ces substances 35 ont un pouvoir antimicrobien et antiparasitaire mais des doses lev es rappelons que se sont les alcaloides qui sont responsables de l activit antipaludique des d riv s du Quinquina quinine et d riv s Les H t rosides cardiotoniques font partir des substances les plus abondantes identifi es dans la plante ils lui conf rent une propri t tonifiante du c ur La pr sence de compos s terp niques dans la phytochimie est confirm e par la chromatographie sur couche mince qui a montr des taches violettes Rf 2 0 81 dans le d coct ces caract ristiques sont celles des st rols et triterp nes Leur pr sence conf re une propri t antipyr tique la plante comme cela a t d montr par Gupta en 1980 La fi vre tant l un des signes cliniques du paludisme les tradipraticiens valuent l am
88. ules de synth se OBJECTIFS Objectif g n ral Etudier la composition chimique et l activit antipaludique de Alchornea cordifolia Objectifs sp cifiques 13 Identifier les groupes chimiques pr sents dans les feuilles de Alchornea cordifolia D terminer la composition en monosaccharides des polysaccharides des extraits aqueux de Alchornea cordifolia D terminer les activit s antiplasmodiales des extraits aqueux dichlorom thanique thanolique m thanolique et de l extrait avec l ther de p trole des feuilles de Alchornea cordifolia 14 CHAPITRE 1 RAPPEL SUR LE PALUDISME 1 DEFINITION Le paludisme ou malaria est une affection parasitaire due l action pathog ne d un protozoaire h matozoaire du genre Plasmodium La transmission l homme se fait par la piq re d un moustique l anoph le femelle 2 REPARTITION G OGRAPHIQUE BRYSKIER 1988 MOUCHET 1991 Actuellement le paludisme s vit de fa on end mique dans plusieurs pays il est pr sent notamment sur le continent Africain en Am rique du sud et centrale en Asie et en Oc anie on le retrouve galement dans les les de Saint Dominique et en Turquie 3 AGENT PATHOG NE Bryskier 1988 Il s agit d un protozoaire qui a t d couvert en 1880 Constantine et pr sent l acad mie des sciences en 1881 par LAVERAN sous le nom de Oscillaria malaria Il appartient au genre Plasmodium dont 4 esp ces sont l origi
89. une utilit incontestable pendant les ann es 40 poque o l on ne disposait pas de la quinine elle est aujourd hui compl tement remplac e par d autres compos s 2 6 LES AMINO 4 QUINOLE NES OMS 1984 11 La pr sence du noyau quinoleine dans la structure de la quinine et de la chaine alcoyle de la m pacrine ainsi que les propri t s th rapeutiques connues des amino 8 quinoleines ont t la base de nouvelles tudes sur les antipaludiques La CHLOROQUINE R sorchin se r v la la plus efficace et la moins toxique d un groupe de m dicaments les amino 4 quinol ines 2 6 1 STRUCTURE Nom chimique Chloro 7 di thylamino 4 m thyl 1 butylamino 4 quinoleine CH3 C2H5 NH CH CHz CHz CH N C2H5 BN QA SONT CHLOROQUINE Tous les m dicaments cliniquement utiles de cette s rie ont le substituant chlore en position 7 ce qui semble tre en rapport avec leur action sp cifique contre le Plasmodium 2 6 2 PROPRIETES PHARMACOLOGIQUES La chloroquine et autres amino 4 quinoleines sont tr s actives contre les formes sanguines asexu es des 4 esp ces de Plasmodium sauf dans les r gions o existent des souches pharmacor sistantes 2 6 3 MECANISME D ACTION TRAORE 1999 La chloroquine se concentre dans le parasite gr ce l existence d un gradient de pH et de transporteurs membranaires sp cifiques Elle se concentre dans la vacuole du parasite et inhibe sa croissance
90. vons r alis 5 essais de la m me mani re afin de d terminer un pourcentage moyen 1 5 2 Cendres insolubles dans l acide chlorhydrique Principe Ces cendres sont le r sidu obtenu en faisant bouillir les cendres totales dans de l acide chlorhydrique 10 leur d termination permet de mesurer la quantit de mati res siliceuses sp cialement de la terre siliceuse contenue dans la drogue Mode op ratoire sur les cendres totales nous avons vers 20 ml de HCI et laiss bouillir 15 mn au bain marie Apr s refroidissement nous avons recueilli et lav la mati re non soluble sur un papier filtre sans cendre le filtre a t transf r dans un creuset sec d j tar masse M l ensemble est pes masse M incin r et repes masse M Le pourcentage de cendre insoluble dans l acide chlorhydrique P C i est d termin par la formule suivante M Ci PCi 100 PE La masse de cendre insoluble dans l acide chlorhydrique Mci MCizM M La masse de la prise d essai P E M M 45 1 5 3 Cendres sulfuriques Principe Ces cendres sont les substances r siduelles non volatilis es recueillies lorsque l chantillon de drogue est br l avec de l acide sulfurique concentr Ces cendres d terminent la quantit de substances inorganiques contenues dans la drogue Mode op ratoire dans un creuset en quartz sec tar masse M nous avons introduit une prise d essai de la poudre et p

ETUDE de la PHYTOCHIMIE et de L`ACTIVITE ANTIPALUDIQUE de

Contents

Download Pdf Manuals

Related Search

Related Contents