File - Cours L3 Bichat 2012-2013
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1. G notype 4 KEENE O AUTRES TECHNIQUES DE BIOLOGIE MOLECULAIRE S quen age du g nome viral D tection des mutations de r sistance aux antiviraux VIH VHB VHC CMV HSV ARN viraux A n N Extraction des m entnfugation Sang total pr lev sur EDTA GE Plasma R actions de s quence sur les brins sens et antisens ct migration BA ARN viral CTOTTIGGCAACGACCCCTCGTACRATACAGATA SS SSP A CTETTIGGCAACGACOCCTCGTACAATACAGAT REAU ADNc CTCTPTOGCAACOACCCCTCGTACANTACA TR E SE 27 S dir AD are TS SFs P AIT IP LS IINE TE i Reverse Transcription Positions de mutations connues N Position de mutation mais absentes ici connue et pr sente AGCAGATGAT GTA EM 1 Ar V quence de rETErence quence en d nm 3 L A D D V AGCAGATGAT GTAJ quence antisens Alignement des quenc s ns et antisens et comparaison avec la s quence de r f rence HAIVIAAA l j AUTRES TECHNIQUES DE BIOLOGIE MOLECULAIRE Analyses phylog n tiques valuation de la proximit de diff rentes s quences liens pid miologiques orang outan AF193863 gorille ASSET je AF22 F chimpanz TE 34 Es 92 X75657 Hs X97848 D 235718 X02495 M57663 235717 GBV A SM 70047 AT 1122 100 PNF2161 GBV Ctro GBV B Hepacivirus HCV 2a HCV 3a HCV 4a HCV 5a HCV 1a HCV 6a BVDV Pestivirus TBEV Flavivirus Diagnostic rapide par d tection du g nome vira2. Tests Rapides Orientation Diagnostique TROD e Ne n cessitent pas d quipements de laboratoire e 10 20 min e Lecture visuelle e Sensibilit l g rement inf rieure aux nouvelles techniques ELISA s roconversion e Aide au diagnostic d urgence et en situation de d tresse mat rielle Accidents d exposition au sang ou sexuels e France en association obligatoire avec le test ELISA M Aa CR m DE A RM D A FR LE identifier le test INSTI Recueilir la premi re goutte de Piquer le doigt propre du patent et ormer une grosse goutte de sang suspendue sang avec pipette verticale sans presser la poire de n pipette Presser ia pore de k pipette pour vider le sang dars le flacon 1 Relermer amp fhoon et Vider le contenu du flacon 1 l homog n kser par 2 inversions dans amp cupules et attendre que l liigud ait travers a membrane 2 se te tt 2 et ee Coetr te Dates duyn riss ent tp yu taras Lattes Wyo N gatif Deux points Positif IRL EE Re MA ATARI A7 o Former une nouvelle goutte de sang suspendues et la R p ter l op ration jusqu ce que le sang at atteint le trait noir de recueillir en Aappeochan n pipette la pipette horizontalement de k goutte qu A A OT F p tes op ration avec es flacons Lire le r sultat du test 283 Coertr te 1 Lit LA RESULTATS EN MOINS DE 60 S
3. diagnostic direct avant la mise en route d un traitement antiviral leur site d pend des sympt mes cliniques et du mode de transmission des virus suspect s En cas de diagnostic indirect penser au d lai d apparition des Ac par rapport au contage fen tre s rologique r aliser un second pr l vement distance Pr l vement T d il se Bin tube sec tube contenant un anticoagulant EDTA Tube ou milieu de transport en fonction de la nature du pr l vement technique mettre en uvre Jamais de tube h parin pour la biologie mol culaire inhibiteur de la Taq Polym rase enzyme d amplification de la PCR Biologie Mol culaire charges virales PCR s quen age S rologies virales Technique envisag e D lai pour arriver au laboratoire Pr l vement Demande de mise en culture Ecouvillon En pr sence OBLIGATOIRE de milieu de transport pour d charger l inoculum viral Importance de la pr sence de CELLULES dans le pr l vement virus parasite intracellulaire strict Pr l vements pr cieux Milieu de transport milieu de culture milieu nutritif permettant au virus de rester infectieux pendant le d lai pr l vement gt laboratoire Pr l vements respiratoires milieu de transport arriv e le plus rapidement possible au laboratoire ou conservation 4 C pendant 48h maximum LCR tube sec st ri
4. duction de la dur e de la fen tre s rologique S RODIAGNOSTIC INDICATIONS e D termination du statut immunitaire d un individu vis vis d un virus e D pistage avant vaccination bilan de greffe tudes pid miologiques e Examen d un seul s rum e R sultat qualitatif Exemples VIH VHC VHB Ag HBs HTLV CMV EBV Evaluation de l immunit r siduelle apr s une infection ou une vaccination e Examen d un seul s rum e R sultat quantitatif e Exemple VHB Ac anti HBs S RODIAGNOSTIC INDICATIONS e Diagnostic d une infection aigue en cours ou r cente v Examen de deux s rums successifs 15 21 jours d intervalle S roconversion apparition d Ac El vation significative du titre des anticorps x 4 v Examen d un seul chantillon Recherche d IgM Index d avidit des anticorps IgG capacit d un Ac se fixer l Ag permet de dater l infection Avidit faible gt infection lt 3 mois Avidit forte gt infection gt 3 mois S RODIAGNOSTIC INTERPRETATIONS e Absence d IgG gt Pr l vement tres pr coce gt Faire un deuxi me pr l vement gt Patient immunod prim gt Pratiquer une recherche directe ex PCR VHC PCR CMV e R sultat quantitatif titre isol gt Ne permet pas de dater une infection e R sultats s quentiels gt Ne comparer que les r sultats obtenus dans un m me laboratoire au cours de la
5. on w D Te Ligne de base Phase d initiation 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Ct cycle seuil Nombre de cycles PCR PCR QUALITATIVE e D tection gt Pr sence ou non du g nome viral Etude en phase plateau 12 3 456 La r v lation de l ADN sur le Migration gel d agarose est r alis e par lectrophor tique le bromure d thidium BET PCR des amplicons sur thermocycleur gel d agarose BET intercalant de l ADN gt risque mutag ne et canc rig ne PCR QUANTITATIVE PCR EN TEMPS REEL 2 amorces et une sonde marqu e sp cifiques de la s quence Reporter mission de Holland PNAS 1997 fluorescence x Co Quencher capteur de amorce sens la fluorescence ae j Polym risation E EEE OO amorce anti sens D placement z de la sonde Clivage de la 7 sonde EE 3 Polym risation termin e 5 e a PCR QUANTITATIVE e Quantification du g nome viral gt Charge virale gt Nombre de copies de virus mL e Etude en phase exponentielle de la PCR Courbe standard Ld gmg GRR ENS ER RS a a a a D lt e Cycle seull I N a a i i 2 3 4 Guanhte de demarrage d enregistrement Rendement 97 0 Pente 3 396 La courbe standard permet de d terminer la quantit pour un cycle seuil donn Amplification cmr mi3 04 01 1 courbe 1 pr l vement 10 1 FEES i PR T Ligne s uil eean l l 10 2 l l g 5
6. ECONDES imm diatement Cartes dyb Hes ei tp Var e s Laws d u Lans dy ce migo sw ect 1 haitte VE 29 A Bichat disponible aux Urgences CDAG Gyn cologie Obst trique RESUME EXEMPLES Diagnostic rapide par recherche directe Microscopie lectronique Calicivirus Virus de Norwalk HSV Immunofluorescence Influenza Paramyxovirus HSV VZV CMV Ad novirus VRS Antig nes viraux ELISA ou agglutination VIH Ag p24 VHB Ag HBs Ad novirus selles Biologie mol culaire PCR A vis e diagnostique VHC papillomavirus LCR HSV VZV CMV JC vis e th rapeutique Quantification virale VIH VHC VHB CMV Virus non cultivables ou de culture difficile S rodiagnostic M thode de choix pour Virus d Epstein Barr Virus de la rub ole Virus des h patites A B C D et E HTLV
7. INTI Y Influenza B InfB Legionella pneumophila L Parainfluenza Type 1 Pl 1 Parainfluenza Type 2 PIY 2 Parainfluenza Type 3 PIW 3 Parainfluenza Type 4 PIW 4 Respiratory Syncytial Virus A RSA Respiratory Syncytial Virus B RSVE Rhinovirus Enterovirus RhY EV R sultats Care RTE Tr PCR suivie d une lecture sur un s quenceur Les pics correspondent une taille d amplicons PCR QUALITATIVE TECHNOLOGIE CLE EN MAIN Int gration des tapes d extraction amplification nested PCR et analyse en un seul et m me instrument g g o S PNOVIrUS PuIrus Enterovirus R sultats en 1 heure iza A H1 Le panel de d tection propos vous o d identifier simultan ment plus de AN st Parainfuenza Virus3 Parainfuenza Vrus4 Respiratory Synoytal Vins Operator Eahiation 4 PCR AUTRES TECHNIQUES DE BIOLOGIE MOLECULAIRE gt Hybridation inverse avec sondes sp cifiques gt S quen age du g nome viral gt Analyses phylog n tiques AUTRES TECHNIQUES DE BIOLOGIE MOLECULAIRE Hybridation avec sondes sp cifiques D tection l aide d oligonucl otides sp cifiques d un g notype donn incubation avec l amplicon gt Identification des g notypes VHC et Papillomavirus Multiple HPV infection 73 82 H PV G notype 2 G notype 1b CET G notype 3 CRE LENET i G notype 1a S p High risk HPV types IE T
8. PA R l go DIDEROT L3 UE9 Agents Infectieux 4 F vrier 2013 D marches diagnostiques des infections virales R DE ASSISTANCE PUBLIQUE Q d a Dr Charlotte CHARPENTIER MCU PH A8 Laboratoire de Virologie CHU Bichat Claude Bernard y Pi Universit Paris 7 D marches diagnostiques des infections virales LT DIAGNOSTIC DIRECT DIAGNOSTIC INDIRECT Mise en vidence du virus ou D tection des marqueurs d un de ses composants immunologiques sp cifiques ADN ARN antig ne produits par l organisme en r ponse l infection virale D tection d anticorps Signe d un contact avec le virus DIAGNOSTIC DIRECT Visualisation du D tection Isolement du D tection du virus dans le d antig nes virus sur g nome viral pr l vement viraux cultures cellulaires DIAGNOSTIC INDIRECT S rologies S rodiagnostic Pr l vement Etape pr analytique La qualit des r sultats d pend essentiellement de la qualit du pr l vement Echantillons cliniques doivent tre appropri s l examen demand pr lev s un moment adapt la chronologie de l infection conserv s dans des conditions favorables en attendant et durant leur acheminement au laboratoire En cas de pathologie aigu les pr l vements doivent tre r alis s le plus t t possible apr s le d but de l infection au moment des sympt mes cliniques pour le
9. Test C atex Tes j Positive gt Seule indication en virologie clinique Antig nes rotavirus et ad novirus dans les selles Diagnostic rapide par d tection d antigenes viraux Pr l vements respiratoires VRS Influenzavirus et B Parainfluenzavirus Ad novirus Selles Rotavirus Adenovirus Peau HSV VZV Sang CMV Diagnostic rapide par d tection d antigenes viraux e Avantages gt R sultats disponibles rapidement de 10 min 2 h e Inconv nients gt Faible sensibilit par rapport la culture jusqu 20 et par rapport la biologie mol culaire jusqu 50 gt Sp cificit d pendante de la qualit des anticorps gt N cessit de pr l vements de bonne qualit gt Technique manuelle avec une lecture longue et subjective surtout pour immunofluorescence n cessitant un technicien exp riment Diagnostic des antigenes libres gt Antig ne produit en exc s et excr t dans le s rum gt R action immuno enzymatique ELISA Support solide plaque tube bille Anticorps de capture monoclonal ou polyclonal Anticorps de r v lation coupl s au syst me r v lateur Quantification possible gt Exemples D tection de l antig n mie HBs VHB D tection de l antig n mie p24 VIH gt Toute positivit doit toujours tre suivie d une neutralisation pour s assurer de la sp cificit de l Ag d tect incubation avec des Ac anti p24 ou Ac
10. a l 10 3 ns e i 0 2 46810 14 1820 24 25830 34 4840 44 4850 Cycle Cycle seuil Ct Threshold Cycle Calculation Threshold Use Threshold Mult Stddev _ o0 Orit Threshold Baseline Bet a e rs Update Calculations Ct Std Dev 36 88 0001 PCR QUALITATIVE APPLICATIONS EN VIROLOGIE MEDICALE e Recherche de virus dans le LCR HSV VZV Ent rovirus e Recherche de virus dans les pr l vements respiratoires LBA aspirations naso pharyng es CMV Infuenzavirus e Recherche de virus dans les pr l vements de biopsie cutan o muqueuses e Recherche de l ADN proviral du VIH Diagnostic de l infection VIH chez les nouveaux n s PCR QUANTITATIVE APPLICATIONS EN VIROLOGIE MEDICALE Charges virales CMV EBV suivi post greffe patients immunod prim s e Charges virales VIH VHB VHC suivi efficacit traitement PCR QUALITATIVE MULTIPLEX Multiplex Recherche de plusieurs g nomes viraux dans la m me r action de PCR plusieurs couples d amorces dans le m lange r actionnel Dans le m me test 16 virus ARN 2 virus ADN 4 bact ries Selon le mat riel utilis r sultats en moins de 6 heures RespiFinder SMART 22 Targets Adenovirus dv Bocavirus Bov Bordetella pertussis B pertussis Chlamydophila pneumoniae C pneumoniae Coronavirus 229E Cor 229E Coronavirus HKU1 Cor HKU1 Influenza A InfA influenza 4 H1N1v Inf H
11. anti HBs puis dosage pour v rifier la n gativation en raison du complexe Ag Ac form DIAGNOSTIC DIRECT Isolement du virus sur cultures cellulaires ISOLEMENT VIRAL R plication virale au sein de cellules vivantes 3 modeles existants Animal entier cobaye souris souriceau nouveau n n est plus utilis en pratique sans sd 4 E SE uf embryonn Influenzavirus gt fabrication du vaccin antigrippal Cultures cellulaires Support de choix pour la a y multiplication virale SE ISOLEMENT VIRAL EN CULTURE CELLULAIRE METHODE DE REFERENCE EN VIROLOGIE INTERETS gt Diagnostiquer l infection virale gt Apporter la preuve du caractere infectieux des particules virales pr sentes dans le pr l vement Isolement et conservation de la souche gt Etudier la r sistance du virus aux antiviraux gt R aliser des enqu tes pid miologiques DIFFERENTS TYPES DE CELLULES UTILISES POUR LA CULTURE CELLULAIRE Diplo des dur e de vie limit e Pas de passage possible ou nombre de passages limit Inhibition de contact nombre pair de chromosomes Cellules de primo explantation Rein de singe Susceptibles de nombreux virus Ch res Cellules embryonnaires Fibroblaste humain embryonnaire MRC5 e Continues immortelles Cellules transform es Lign es cellulaires HeLa cellules cancer col ut rus HPV Vero cellules pith liales rein de sin
12. bilit faible N cessite d au moins 106 particules virales gt N a plus d indications en pratique courante DIAGNOSTIC DIRECT D tection d antig nes viraux D tection des antig nes dans le pr l vement e D tection d antigenes intracellulaires gt R action d immunofluorescence gt Immuno enzymatique immunoperoxydase gt Immunodiffusion savonnette bandelette gt Agglutination latex e D tection d antigenes libres gt Immuno enzymatique gt R action d immunofluorescence Fig 3 HS mtected epithelial cell trom skin lezion LFA Antig n mie pp65 CMV D tection des antig nes dans le pr l vement e D tection d antig nes intracellulaires gt R action d immunoperoxydase Antig n mie pp65 CMV Longtemps utilis e sur des cultures cellulaires gt d tection d Ag pr coces gt rendu rapide en 48 heures D tection des antig nes dans le pr l vement e D tection d antig nes intracellulaires gt R action d immunodiffusion technique immuno chromatographie savonnette EI P T 3 VRS Influenzavirus FE gt 2 Positif N gatif Diluant 6 gouttes Bande g 10 Srm secondes ADP E Sarek M langer de R sultat par Vortex 15 minutes L_ F D tection des antigenes dans le pr l vement e D tection d antig nes intracellulaires gt R action d agglutination latex R3 Neg Control D R2 Latex
13. ctro photom tre R v lation a sn Substrat de enzyme Incolore Color Deuxi me Ac marqu par une Enzyme Y S rum du patient A A Antig ne viral A I Support mms Puits d une microplaque ou bille Trait de virologie m dicale Huraux Agut Nicolas Peigue Lafeuille DIAGNOSTIC INDIRECT S RODIAGNOSTIC e Nature de l antige ne de capture des anticorps gt Virus entier purifi historique 1 g n ration gt Prot ines virales natives ou recombinantes 2 me g n ration gt Peptides de synth se 3 me g n ration D tection des anticorps gt Totaux IgG IgM gt IgG ou IgM e Expression des r sultats gt Qualitatif positif n gatif douteux gt Quantitatif titre Test ELISA D pistage VIH ij ample Diiue yoan i 250 mi Pping va _ Simos Ss MicroGeneSY s PO m Mens iea CT um p AR AaS Vo PM 4 a lt TET LM 7 l Le amp D dal 4 L S 4 i P i Les puits color s correspondent un signal positif pr sence d Ac D PISTAGE COMBIN Ac Ag gt ELISA 4e g n ration VIH VHC ji amp Ag p24 de l chantillon mm Anti VIH de l chantillon substrat lecture en rein 450 nm b beptides gp4 1 HIV1 eb36 HIV2 gb41 HIVT groupe 0 PT mad anticorps monoclonaux anti p24 Diagnostic de l infection 15 17 jours apr s le contage gt R
14. extraction gt ADN Pr levements Sang total plasma s rum leucocytes autres urines LCR expectorations couvillonnages ponctions sperme biopsies cultures Conditions de pr l vement tube sec gt s rum rare tube EDTA ou ACD gt plasma fr quent sang total urines LCR LBA plasma s minal riches en inhibiteurs de PCR pr sence de contr le interne pour v rifier absence de ces inhibiteurs h parine inhibiteur de la Taq polym rase m me si les techniques actuelles d extraction y sont moins sensibles D tection des acides nucl iques EXTRACTION gt Lyse de la cellule et d naturation des complexes nucl o prot iques d tergent gt S paration des prot ines solvant gt Pr cipitation des acides nucl iques alcool Extraction Extraction automatis e manuelle Ph nol chloroforme gt m duse d ADN D tection des acides nucl iques par AMPLIFICATION DE LA CIBLE Polymerase Chain Reaction PCR 1 D naturation 95 C Augmentation exponentielle du mat riel d ADN chaque cycle d amplification Y ame Lirtianisante 2 Hybridation des amorces Autour de 50 C temp rature 2 cycle 1 cycle 2 cycle 3 cycle 4 EEEE E AMPLIFICATION PAR PCR Courbes de PCR Phase plateau J Phase exponentielle Ligne seuil on D x D S on D O a er au By D W D U lt sm
15. ge Hep2 cellules issues carcinome pharyng humain LLC MK2 cellules pith liales rein de singe MDCK cellules pith liales rein de chien Peu on reuses Spectre de susceptibilit virale limit pour chaque lign e cellulaire DIFFERENTS TYPES DE CELLULES Sensibilit variable des types cellulaires aux diff rents virus gt N cessit de disposer de plusieurs types de cellules gt Au minimum fibroblastes embryonnaires humains plus une ou deux lign es continues Choix du type de cellules inoculer d pendant du virus recherch ISOLEMENT VIRAL CLASSIQUE EN CULTURE CELLULAIRE Effet cytopathogene ECP observation l tat frais au microscope Ensemble des modifications induites dans la cellule infect e v Nature des cellules modifi es et d lai d apparition v Arrondissement des cellules augmentation de volume formation de syncytia v Evolution de la progression des foyers Culture cellulaire effet cytopathogene HSV Cultu re cell ulai ire effet cyto pathoge gene V RS eey AT ISOLEMENT VIRAL CLASSIQUE EN CULTURE CELLULAIRE Effet cytopathogene ECP l observation l tat frais au microscope e Confirmation v Par immunofluorescence ex HSV 1 HSV 2 CMV v Par h madsorption virus de la rub ole v Par neutralisation avec anticorps sp cifiques picornavirus e Conservation des souches tudes ult rieures possibles sensibi
16. l Biologie Mol culaire e Avantages gt Rapidit gt Sensibilit gt Applicable l analyse de l ensemble des virus e Inconv nients gt Impact de la variabilit g n tique gt non hybridation avec les virus ARN gt Pas d information sur le caract re infectieux des virus d tect s virus entier d fectif gt Pr sence possible d inhibiteurs gt Risque de contamination s paration des zones pr et post PCR DIAGNOSTIC INDIRECT S rologies S rodiagnostic DIAGNOSTIC INDIRECT S RODIAGNOSTIC gt Mise en vidence des anticorps sp cifiques synthetises par l h te en reponse a l infection virale e Nature du pr l vement gt S rum gt Autres plasma LCR humeur aqueuse liquide articulaire e Qualit gt D cantation du sang dans un d lai de 24 heures gt V rification de l aspect lipides bilirubine e S rotheque gt Conservation 1 an 20 C s roth que l gale gt 3 ans pour le diagnostic ant natal PROFIL S ROLOGIQUE TYPIQUE APRES UNE INFECTION VIRALE AIGU Titre Ac R ponse Il R ponse I IgG IgM IgM Seuil de d tection R activation R infection Fen tre s rologique Au cours de la r activation ou de la r infection les IgM peuvent tre absentes ou pr sentes de tr s faibles titres et de fa on transitoire R action Immuno Enzymatique ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay Lecture Spe
17. le arriv e dans les 24h conservation 40 PA Pr l vement FEUILLE DE DEMANDE Nom pr nom date de naissance du patient Date et heure du pr l vement NORME 15015189 Nature et site du pr l vement gt Accr ditation Nom du prescripteur Nom du pr leveur RENSEIGNEMENTS CLINIQUES sur le motif de la demande et chronologie pr cise des v nements gt ESSENTIELS pour le choix de la technique et pour l interpr tation des r sultats une feuille de demande mal renseign e peut affecter le rendu des r sultats N cessit de ensemble de ces informations pour traiter correctement l analyse v Non conformit gt refus et examen non r alis v Non informatif DIAGNOSTIC DIRECT Visualisation du virus dans le pr l vement Visualisation de la particule virale en microscopie lectronique e Coloration n gative gt Simple et rapide grossissement x 50 000 60 000 gt Diagnostic de famille de virus morphologie gt Permettait Y Diagnostic des gastro ent rites Rotavirus Ad novirus Norwalk like Astrovirus Calicivirus v Diagnostic partir de liquide v siculaire HSV VZV v Diagnostic partir de grattage cutan Orf molluscum contagiosum Ad novirus Rotavirus e Inconv nients gt N cessit d un microscopiste entra n gt Equipement co teux maintenance lourde pas i pr sent dans tous les laboratoires de virologie gt Sensi
18. lit aux antiviraux pid miologie Probl mes associ es la culture cellulaire Souvent longue jusqu 4 semaines Souvent faible sensibilit qui d pend en grande partie de la qualit du pr l vement quantit d inoculum viral mais aussi du milieu de culture utilis Sensible la contamination bact rienne Sensible diverses substances toxiques pr sentes dans le pr l vement De nombreux virus ne sont pas cultivables exemples VHB Parvovirus Papillomavirus Virus faciles isoler en culture cellulaire Herpes simplex Cytom galovirus Ad novirus Virus Coxsackie B Echovirus Influenza Parainfluenza Rhiniovirus Virus des oreillons Virus respiratoire syncytial Virus de la varicelle et du zona Virus moins fr quemment isol s Virus de la rougeole Virus de la rub ole Virus Coxsackie A CAS PARTICULIER DU VIH Culture sur lymphocytes de donneurs s ron gatifs REGLES DE SECURITE POUR LA CULTURE DE VIRUS Laboratoire de haute s curit microbiologique L3 micro organisme de classe 3 ayant un pouvoir pathog ne important chez l homme mais pr sentant un risque mineur pour la collectivit et contre lesquels une prophylaxie ou des traitements efficaces sont connus DIAGNOSTIC DIRECT D tection du g nome viral D TECTION QUANTIFICATION DES ACIDES NUCL IQUES e G nomes viraux ADN ARN tape de reverse transcription suppl mentaire apr s
19. m me manipulation e D tection d IgM gt Possibilit de faux n gatifs R ponse inconstante de courte dur e ou retard e gt Possibilit de faux positifs v Manque de sp cificit des pr parations antig niques v Pr sence de facteur rhumato de v R actions antig niques crois es v Activations polyclonales non sp cifiques S RODIAGNOSTIC INTERPRETATIONS e Crit res pour le diagnostic de primo infection e Augmentation par un facteur de 4 ou plus du titre des IgG ou des anticorps totaux entre un s rum aigu et un s rum convalescent e Pr sence d IgM e S roconversion e Crit res pour le diagnostic de r infection e Augmentation par un facteur de 4 ou plus du titre des IgG ou des anticorps totaux entre un s rum aigu et un s rum convalescent e Absence ou faible titre d IgM Int r t de confronter les r sultats de la s rologie avec ceux du diagnostic direct AUTRES TECHNIQUES DU SERODIAGNOSTIC Western Blot de confirmation Infection par le VIH Imm luno err 1PI einte I Fi H i OL Tu este en blot gp 1 p gp 120 Lecture _ a l il nu p55 i gp41 lt An amp p31 Te Color p24 5 m Er e __ Bandelette 1 Contr le positif e __ Bandelette 2 Contr le AAA n gatif e S rum A Negatif e S rum B Indetermin H de f Sa cellulose ou de nylon e S rum C Positif AUTRES TECHNIQUES DU SERODIAGNOSTIC
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