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Incubation

1. Durham volume au minimum gal au 1 10 me du volume de la cloche en moins de 48 heures Elle indique la pr sence de coliformes 6 FORMULE TYPE pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Fiche technique Bouillon lactos bili au vert brillant Page 2 sur 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr Pour 1 litre de milieu rYPIONE iesiri a RNANA EA SNE 10 0 g Bile de b uf bact riologique 20 0 g La OSO 541 RE 10 0 g VOEDNI a Nenas a r G 13 3 mg pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 2 0 2 7 CONTROLE QUALITE e Milieu d shydrat poudre verd tre fluide et homog ne e Milieu pr par simple concentration solution verte limpide e R ponse culturale de croissance apr s 24 48 h d incubation 30 C ISO TS 11133 2 A1 Microorganismes Croissance Production de gaz Escherichia coli WDCM 00013 excellente score 2 gt 5 mm tube Durham Citrobacter freundii WDCM 00006 excellente score 2 gt 5 mm tube Durham Enterococcus faecalis WDCM 00087 partiellement inhib e n gative score 0 1 Staphylococcus aureus WDCM 00034 inhib e score 0 e R ponse culturale de croissance apr s 48 h d incubation 37 C NF T 90 461 Microorganismes Croi
2. QUA gt Code document BK002 F 2003 01 7 s Date cr ation l 01 2003 ON A Derni re mise jour 28 10 2011 NC 505001 Motif de la r vision Remaniement g n ral Corrections 4 Pr parations Corrections 5 Mode d emploi Corrections 7 r f rence WDCM des souches de contr le Fiche technique Bouillon lactos bili au vert brillant Page 4 sur 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr
3. analyse de l eau D nombrement des coliformes coliformes f caux et Escherichia coli pr sum s Dunod 7 me Ed 793 798 Journal Officiel du 21 Septembre 1968 M thodes officielles de pr l vement et d analyse bact riologiques des glaces et cr mes glac es Arr t du 30 Ao t 1968 NF ISO 4831 V 08 016 Octobre 2006 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche et le d nombrement des coliformes Technique du nombre le plus probable NF ISO 4832 V 08 015 Juillet 2006 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour le d nombrement des coliformes M thode par comptage des colonies NF T 90 413 Octobre 1985 Essais des eaux Recherche et d nombrement des coliformes et des coliformes thermotol rants M thode g n rale par ensemencement en milieu liquide NPP NF T 90 461 A2 Mai 2007 Qualit de l eau Microbiologie Contr le qualit des milieux de culture ISO TS 11133 2 A1 F vrier 2011 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture AMENDEMENT 1 Micro organismes pour essai recommand s pour les milieux de culture les plus usuels 11 AUTRES INFORMATIONS Les mentions port es sur les tiquettes sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis K
4. La teneur en vert brillant est sp cialement d termin e afin d emp cher la croissance des ana robies fermentant le lactose 44 C ce qui vite l obtention de r sultats faussement positifs e Le d veloppement des coliformes se manifeste par l apparition d une turbidit associ e une production de gaz dans la cloche de Durham par suite de la fermentation du lactose 4 PREPARATION e Mettre en solution 40 0 g de milieu d shydrat BK002 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e 2 40 0 g L Agiter lentement jusqu dissolution compl te he R partir en tubes contenant une cloche de Durham XA 15 min 121 C St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes Apr s refroidissement les cloches de Durham ne doivent pas contenir d air e Refroidir le milieu 25 C NOTA Le bouillon double concentration peut tre utilis pour certaines applications sp cifiques Dissoudre 80 g L de milieu d shydrat et st riliser 15 minutes 121 C Fiche technique Bouillon lactos bili au vert brillant Page 1 sur 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr 5 MODE D EMPLOI Analyse des glaces et cr mes glac es e Ensemencer les tubes de bouillon pr par s ou de milieu pr t l emploi BM011 avec 1 mL d inoc
5. S FICHE TECHNIQUE BOUILLON LACTOSE BILIE AU VERT BRILLANT BLBVB 1 DOMAINE D UTILISATION Le bouillon lactos bili au vert brillant est utilis pour la confirmation des coliformes et des coliformes thermotol rants dans les produits alimentaires les eaux d alimentation et les eaux r siduaires Il est aussi utilis comme milieu de d nombrement des coliformes dans les glaces et cr mes glac es 2 HISTORIQUE Les recherche et mise au point d un milieu de culture inhibant les microorganismes autres que les coliformes ont depuis longtemps int ress les bact riologistes D s 1926 Dunham et Schoenlein ont tudi les proportions de bile et de vert brillant susceptibles de donner de bons r sultats Dans ses travaux Jordan a montr la sup riorit de ce milieu comparativement au bouillon lactos pour la d tection des coliformes dans l eau Pour le contr le de la pasteurisation du lait MacCrady et Langevin ont utilis avec satisfaction le bouillon lactos la bile et au vert brillant pour la d tection des coliformes Mackenzie a v rifi que la teneur en vert brillant est suffisante pour inhiber effectivement la culture d ana robies fermentant le lactose et en particulier Clostridium perfringens 3 PRINCIPES e La pr sence simultan e de bile de b uf et de vert brillant provoque l inhibition de la presque totalit des microorganismes Gram positif et des bact ries Gram n gatif autres que les coliformes e
6. ssance Production de gaz Escherichia coli WDCM 00179 Bonne gt 5 mm tube Durham Enterococcus faecalis WDCM 00176 inhib e n gative 8 STOCKAGE CONSERVATION Milieu d shydrat 2 30 C e La date de p remption est mentionn e sur l tiquette Milieu pr par titre indicatif e 3 mois 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif Milieu pr t l emploi en tubes avec cloches de Durham e Stocker entre 2 et 8 C labri de la lumi re e Les dates de p remption sont mentionn es sur les tiquettes 9 PRESENTATION Milieu pr t l emploi simple concentration en tubes avec cloches de Durham e Coffret de 50 tubes de 10 mL BM01108 Milieu d shydrat e Flacon de 500 g BK002HA Fiche technique Bouillon lactos bili au vert brillant Page 3 sur 4 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr 10 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES DUNHAM H G and SCHOENLEIN H W 1926 Stain Technology 1 129 JORDAN 1927 Journal of American Water Works Association 18 337 McCRADY and LANGEVIN 1932 Journal of Dairy Science 15 321 MACKENZIE E F W TAYLOR W E and GILBERT W E 1948 Recent experiments in the rapid identification of Bacterium coli type Journal of General Microbiology 2 197 204 Rodier J 1984 L
7. ulum et de ses dilutions d cimales amp inoculum 1 mL successives e _Incuber pendant 48 heures 30 C XA 48 h 30 C Recherche et le d nombrement des coliformes NPP ISO 4831 e Repiquer une anse des bouillons Laurylsulfate Tryptose simple et double concentration dans les tubes de bouillon pr par s ou de inoculum 1 anse milieu pr t l emploi BM0O11 e Incuber pendant 24 2 heures 30 C ou 37 suivant les accords XA Incubation e Si la production de gaz n est pas observ e ce stade poursuivre 30 C ou 37 C l incubation jusqu 48 2 heures D nombrement des coliformes M thode par comptage des colonies ISO 4832 e Repiquer 5 colonies obtenues sur g lose VRBL dans les tubes de XZA Repiquage bouillon pr par s ou de milieu pr t l emploi BM011 5 colonies e Incuber pendant 24 2 heures 30 C ou 37 suivant les accords XA Incubation 30 C ou 37 C Recherche et d nombrement des coliformes et coliformes thermotol rants NPP NF T 90 413 e Repiquer une anse du bouillon pr somptif dans les tubes de bouillon ainsi pr par s ou de milieu pr t l emploi BM011 XA Inoculum 1 anse e Incuber 37 C 1 C pendant 48 heures pour les coliformes XZA Incubation 44 0 5 C pendant 48 heures pour les coliformes thermotol rants 37 C ou 44 C 5 LECTURES La fermentation du lactose se traduit par l apparition de gaz dans les cloches de

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