Bond™ Ready-to-Use Primary Antibody Ki67 (K2)
Contents
1. Bond rou Bond Ki67 K2 Bond Polymer Refine Detection H Ki67 rou Ki67 K2 HE H Bond2. Ki67 K2 Tris 0 35 ProClin 950 7 mL K2 Avocoy vo Avacuv uaop vo Ki67 Ki67 S 62 IgG1 Mlpwreivng 10 mg mL AVTIOWHATOS pe 1 mg L ELISA Apaiwon
3. 3 Leica Biosystems Bond Bond Bond 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers
4. in vitro rou ProClin 950 0 35 2 methyl 4 isothiazolin 3 one kai va rou Tov Leica Biosystems Leica Biosystems www LeicaBiosystems com PA0230 Page 16 O
5. 2
6. Ki67 K2 Bond rou Bond Bond Bond 2 8 C Ki67 K2 2 8 C
7. 1 1 1 1 44 Ki67 K2 Ki67 K2 Leica Biosystems Bond Polymer Refine Detection Bond Oi
8. 1 1 1 1 1 2 2 2 TOU 1 1 2 2 1 2 O K2 1 2 2 2 2 2 1 1 2 3 Kapkivwpata 1 2 1 1 1 1 2 2 rou 2 2 1 1 rou 1 1 1 1 2 2 1 1 1 1 1 1
9. Kontroller at pakken er ubeskadiget for brug www LeicaBiosystems com PA0230 Page 1 Bond Ready To Use Primary Antibody Ki67 K2 Catalog No PA0230 Intended Use This reagent is for in vitro diagnostic use Ki67 K2 monoclonal antibody is intended to be used for the qualitative identification by light microscopy of human Ki67 nuclear antigen in formalin fixed paraffin embedded tissue by immunohistochemical staining using an automated Bond system The clinical interpretation of any staining or its absence should be complemented by morphological studies and proper controls and should be evaluated within the context of the patient s clinical history and other diagnostic tests by a qualified pathologist Summary and Explanation Immunohistochemical techniques can be used to demonstrate the presence of antigens in tissue and cells see Using Bond Reagents in your Bond user documentation Ki67 K2 primary antibody is a ready to use product that has been specifically optimized for use with Bond Polymer Refine Detection The demonstration of human Ki67 nuclear antigen is achieved by first allowing the binding of Ki67 K2 to the section and then visualizing this binding using the reagents provided in the detection system The use of these products in combination with an automated Bond system reduces the possibility of human error and inherent variability resulting from individual reagent dilution manual pi
10. Ki67 K2 Bond ro Bond Polymer Refine Detection To Ki67 K2 ro IHC Protocol F To Bond Epitope Retrieval Solution 2 20 K2 TOU 95 O K2 2 2 1 1 2 2
11. Subclase IgG1 Concentraci n total de prote na Aprox 10 mg mL Concentraci n de anticuerpos Mayor o igual que 1 mg L segun lo determinado por ELISA Diluci n y mezcla El anticuerpo primario Ki67 K2 se presenta en diluci n ptima para su uso en un sistema Bond No es necesaria la reconstituci n mezcla diluci n o titulaci n de este reactivo Material necesario pero no suministrado Consulte en el apartado Uso de reactivos Bond de la documentaci n de usuario de Bond la lista completa del material necesario para el tratamiento de las muestras y la tinci n inmunohistoqu mica cuando se utiliza el sistema Bond Conservaci n y estabilidad Debe conservarse a 2 8 C No se debe utilizar despu s de la fecha de caducidad que aparece en la etiqueta del recipiente Los signos que indican contaminaci n y o inestabilidad de Ki67 K2 son turbidez de la soluci n aparici n de olor y presencia de precipitado Volver a guardar a 2 8 C inmediatamente despu s de su uso Si las condiciones de conservaci n son diferentes de las especificadas el usuario debe realizar las comprobaciones necesarias Precauciones Este producto es para uso diagn stico in vitro La concentraci n de ProClin 950 es de 0 35 Contiene el principio activo 2 metil 4 isotiazolin 3 ona que puede producir irritaci n en la piel ojos mucosas y tracto respiratorio superior Lleve siempre guantes desechables cuando manipule los reactivos
12. Non stata osservata alcuna colorazione nei carcinomi papillari 2 2 e follicolari 2 2 della tiroide nell adenocarcinoma del polmone 1 1 nel carcinoide atipico del timo 1 1 nel papilloma del plesso coroideo del cervello 1 1 nel seminoma del testicolo 2 2 nel carcinoma a cellule chiare 1 1 nel cistoadenocarcinoma mucinoso 1 1 nel tumore germinale maligno 1 1 e nel cistoadenocarcinoma sieroso dell ovaio 1 1 e nel carcinoma metastatico del fegato 1 1 Numero totale di casi colorati 44 Si raccomanda l uso del Ki67 K2 per la valutazione della proliferazione cellulare nei tessuti normali e in quelli neoplastici Limitazioni specifiche del prodotto Il Ki67 K2 stato ottimizzato da Leica Biosystems per l uso con il Bond Polymer Refine Detection e con i reagenti ausiliari Bond Gli utenti che modificano le procedure raccomandate devono assumersi la responsabilit dell interpretazione dei risultati relativi ai pazienti in tali circostanze tempi del protocollo possono variare in base alle variazioni nella fissazione del tessuto e nell efficienza del potenziamento dell antigene e devono essere definiti in modo empirico Nell ottimizzazione delle condizioni di riconoscimento e dei tempi del protocollo si devono impiegare dei controlli negativi del reagente Soluzione problemi Per le azioni di rimedio consultare il riferimento bibliografico n 3 Per riferire una colorazione inusuale rivolgersi al distrib
13. Para obtener una copia de la Hoja de datos de seguridad de los materiales p ngase en contacto con el distribuidor local o con la oficina regional de Leica Biosystems o visite el sitio Web de Leica Biosystems www LeicaBiosystems com PA0230 Page 10 Las muestras antes y despu s de ser fijadas y cualquier material en contacto con ellas deben ser tratados como sustancias capaces de transmitir infecciones y deben ser eliminadas con las precauciones correspondientes No pipetee nunca los reactivos con la boca y evite el contacto de la piel y las mucosas con reactivos o muestras Si los reactivos o las muestras entran en contacto con zonas sensibles lavelas enseguida con abundante agua Consulte a un m dico Consulte la normativa federal nacional o local referente a la eliminaci n de sustancias potencialmente t xicas Minimice la contaminaci n microbiana de los reactivos ya que puede producir un aumento de las tinciones inespecificas Los tiempos de exposici n e incubaci n y las temperaturas diferentes de las especificadas pueden dar resultados err neos Cualquier cambio que se produzca deber ser validado por el usuario Instrucciones de uso El anticuerpo primario Ki67 K2 se ha desarrollado para su uso en un sistema automatizado Bond en combinaci n con Bond Polymer Refine Detection El protocolo de tinci n recomendado para el anticuerpo primario Ki67 K2 es IHC Protocol F Se recomienda la exposici n de ep topos i
14. 1996 ProClin 950 uma marca comercial de Supelco parte da Sigma Aldrich Corporation Data de Emissao 16 de setembro de 2009 PA0230 Page 13 Bond Prim r antikropp F rdig att Anv ndas Ki67 K2 Katalognr PA0230 Anvandningsomrade Reagenset ar avsett f r in vitro diagnostik Den monoklonala antikroppen Ki67 K2 ar avsedd att anvandas f r kvalitativ bestamning i ljusmikroskopi av human Ki67 nukle rantigen i formalinfixerad paraffininb ddad v vnad genom immunhistokemisk f rgning i det automatiska systemet Bond Den kliniska tolkningen av varje infargning eller utebliven infargning maste alltid kompletteras med morfologiska studier och lampliga kontroller Utvarderingen b r g ras av kvalificerad patolog och inkludera patientens anamnes och vriga diagnostiktester F rklaring och sammanfattning Med immunhistokemiska metoder kan man pavisa f rekomsten av antigener i vavnad och celler se Anv nda Bond reagens i anvandardokumentationen fran Bond Den prim ra antikroppen Ki67 K2 ar en bruksfardig produkt som speciellt optimerats for anv ndning med Bond Polymer Refine Detection P visande av human Ki67 nukle rantigen uppn s genom att man f rst later Ki67 K2 binda till snittet och darefter visualiserar denna bindning med hj lp av de reagens som ingar i detektionssystemet Anvandning av dessa produkter tillsammans med det automatiska Bond systemet reducerar risken f r m nskliga misstag och f r den inherenta
15. New York 1996 ProClin 950 is a trademark of Supelco a part of Sigma Aldrich Corporation Date Of Issue 16 September 2009 PA0230 Page 3 Anticorps Primaire Pr t L Emploi Bond Ki67 K2 R f rence PA0230 Utilisation pr vue Ce r actif est destin au diagnostic in vitro L anticorps monoclonal Ki67 K2 est con u pour l identification qualitative en microscopie optique de l antig ne nucl aire Ki67 humain sur tissu fix au formol et inclus en paraffine par marquage immunohistochimique automatis Bond L interpr tation clinique de tout marquage ou de son absence doit tre compl t e par des tudes morphologiques utilisant des contr les appropri s et valu e dans le contexte des ant c dents cliniques du patient et des autres tests diagnostiques par un pathologiste qualifi R sum et explications Les techniques immunohistochimiques peuvent tre utilis es pour la mise en vidence d antig nes sur tissus ou cellules voir Utilisation des r actifs Bond dans votre manuel d utilisation Bond L anticorps primaire Ki67 K2 est pr t l emploi et a t sp cialement optimis pour Bond Polymer Refine Detection La mise en vidence de l antig ne nucl aire Ki67 humain s obtient en laissant tout d abord Ki67 K2 s hybrider sur la coupe puis en visualisant le complexe au moyen des r actifs fournis avec le syst me de d tection L utilisation de ces produits en association avec un automate Bond
16. Opbevares ved 2 8 C Ma ikke anvendes efter udlobsdatoen der er angivet p etiketten p beholderen Tegn som indikerer at Ki67 K2 er kontamineret og eller ustabilt turbiditet af oplosningen lugtudvikling og forekomst af preecipitat Seettes tilbage til opbevaring ved 2 8 C umiddelbart efter brug Opbevaringsbetingelser der adskiller sig fra de oven for specificerede skal verificeres af brugeren Forholdsregler Dette produkt er beregnet til brug i in vitro diagnostik Koncentrationen af ProClin 950 er 0 35 Det indeholder den aktive ingrediens 2 methyl 4 isothiazolin 3 one og kan give anledning til irritation af hud jne slimhinder og vre luftveje Der skal anvendes engangshandsker ved h ndtering af reagenserne En kopi af sikkerhedsdatabladet Material Safety Data Sheet MSDS kan fas ved henvendelse til den lokale distribut r eller til Leica Biosystems regionale kontor Det kan tillige hentes p Leica Biosystems hjemmeside www LeicaBiosystems com Pr parater bade far og efter fiksering samt alle materialer eksponeret for pr parater skal h ndteres som vaerende i stand til at overfore infektion og skal bortskaffes med passende forholdsregler Afpipett r ikke reagenser med munden og undg at reagenser og pr parater kommer i kontakt med hud og slimhinder Hvis reagenser eller pr parater kommer i kontakt med f lsomme omr der skal disse omr der vaskes med rigelige m ngder vand S g l ge
17. PA0230 Page 18 Bortskaffelse af potentielt toksiske komponenter skal ske i overensstemmelse med g ldende statslig eller lokal lovgivning Mikrobiel kontaminering af reagenser skal minimeres for at undg get uspecifik farvning Genfinding inkubationstider eller temperaturer som afviger fra de specificerede kan give fejlagtige resultater Enhver ndring heraf skal valideres af brugeren Brugsanvisning Ki67 K2 primaert antistof er udviklet til brug p et automatisk Bond system sammen med Bond Polymer Refine Detection Den anbefalede farvningsprotokol for Ki67 K2 prim rt antistof er IHC Protocol F Varmeinduceret epitopgenfinding anbefales ved hj lp af Bond Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minutter Forventede resultater Normale v v Klon K2 farvede basalceller i larynx hud cervix colon og gsophagus Der sas ogsa farvning i thymus uterus tonsil og hypofyse Lipocytter og infiltrative celler blev detekteret i en r kke andre veev Antal farvede cases i alt 95 Tumorveev Klon K2 detekterede prolifererende cellekerner i pladecellecarcinomer fra gsophagus 2 2 larynx 1 1 tunge 2 2 lunge 1 1 cervix 1 1 og hud 1 2 samt adenocarcinomer fra ventriklen 2 2 pancreas 1 1 colon 2 2 og rectum 1 2 Klon K2 udviste ogsa kernefarvning i carcinomer fra mamma 1 2 lunge 2 2 nyre 2 2 pancreas 1 1 og lever 2 3 metastatiske carcinomer i lymfeknude 1 2 pladecellemetaplasi i cervix 1 1 sam
18. nocarcinomes de l estomac 2 2 du pancr as 1 1 du c lon 2 2 et du rectum 1 2 Le clone K2 a galement produit un marquage nucl aire dans les carcinomes des seins 1 2 des poumons 2 2 des reins 2 2 du pancr as 1 1 et du foie 2 3 les carcinomes m tastatiques des ganglions lymphatiques 1 2 les m taplasies en pith lioma du col de l ut rus 1 1 et les astrocytomes anaplasiques du cerveau 1 1 Aucun marquage n a t observ dans les carcinomes papillaires 2 2 et folliculaires de la thyroide 2 2 l ad nocarcinome des poumons 1 1 la tumeur carcinoide atypique du thymus 1 1 le papillome du plexus choroide du cerveau 1 1 les s minomes des testicules 2 2 le carcinome cellules claires 1 1 le cystad nocarcinome colloide 1 1 la tumeur cellules germinales malignes 1 1 et le cystad nocarcinome s reux des ovaires 1 1 ainsi que le carcinome m tastatique du foie 1 1 Nombre total de cas marqu s 44 Ki67 K2 est recommand pour valuer la prolif ration cellulaire dans les tissus sains et les tissus n oplasiques Limites sp cifiques du produit Ki67 K2 a t optimis par Leica Biosystems pour une utilisation avec Bond Polymer Refine Detection et les r actifs auxiliaires Bond Les utilisateurs qui s cartent des proc dures recommand es prennent la responsabilit de l interpr tation des r sultats des patients dans ces conditions Les dur es du protocole peuvent varier
19. ra antikroppen Ki67 K2 har utvecklats for anvandning p det automatiserade Bond systemet i kombination med Bond Polymer Refine Detection Rekommenderat fargningsprotokoll f r primar antikropp Ki67 K2 ar IHC Protocol F Varmeinducerad epitopatervinning rekommenderas med anvandande av Bond Epitope Retrieval Solution 2 i 20 minuter Forvantade resultat Normala vavnader Klon K2 fargade basala celler av struphuvud hud livmoderhals tjocktarm och matstrupe F rgning observerades ocks i tymus livmoder tonsill och hypofys Lipocyter och infiltrerande celler i ett antal andra vavnader detekterades Totalt antal fall fargade 95 Tum rv vnader Klon K2 detekterade prolifererande cellkarnor av skivepitelcarcinom i matstrupe 2 2 struphuvud 1 1 tunga 2 2 lunga 1 1 livmoderhals 1 1 och hud 1 2 och adenocarcinom av mage 2 2 pankreas 1 1 tjocktarm 2 2 och rektum 1 2 Klon K2 uppvisade ven nuklear fargning av carcinom i br st 1 2 lunga 2 2 njure 2 2 pankreas 1 1 och lever 2 3 metastasiska carcinom i lymfknuta 1 2 skvam s metaplasi i livmoderhals 1 1 och anaplastiskt astrocytom i hjarna 1 1 Ingen f rgning observerades i papillara 2 2 och follikulara carcinom i sk ldk rtel 2 2 adenocarcinom i lunga 1 1 atypisk carcinoid av tymus 1 1 plexus chorioideus papillom i hjarna 1 1 seminom i testikel 2 2 klarcellscarcinom 1 1 musin st cystadenocarcinom 1 1 malign germinalcellstum r 1
20. 1 Plexuspapillomen des Gehirns 1 1 Seminomen der Hoden 2 2 Klarzellkarzinomen 1 1 muzin sen Zystadenokarzinomen 1 1 malignen Keimzelltumoren 1 1 ser sen Zystadenokarzinomen des Ovars 1 1 und metastatischen Karzinomen der Leber 1 1 wurde keine F rbung festgestellt Gesamtanzahl der gef rbten F lle 44 Ki67 K2 wird f r die Beurteilung der Zellproliferation in normalen und neoplastischen Geweben empfohlen Produktspezifische Einschr nkungen Ki67 K2 wurde von Leica Biosystems zur Verwendung mit dem Bond Polymer Refine Detection und Bond Zusatzreagenzien optimiert Anwender die andere als die empfohlenen Testverfahren verwenden m ssen unter diesen Umst nden die Verantwortung f r die Auswertung der Patientenergebnisse bernehmen Die Verfahrenszeiten k nnen aufgrund von Unterschieden in der Gewebefixierung und der Wirksamkeit der Antigenverst rkung variieren und m ssen empirisch bestimmt werden Bei der Optimierung der Retrieval Bedingungen und Verfahrenszeiten sollten negative Reagenzkontrollen eingesetzt werden Fehlersuche Ma nahmen zur Abhilfe beim Auftreten von Fehlern finden Sie in Referenz 3 Falls Sie ungew hnliche F rbeergebnisse beobachten wenden Sie sich an Ihre rtliche Vertriebsfirma oder an die Regionalniederlassung von Leica Biosystems Weitere Informationen Weitere Informationen zur Immunf rbung mit Bond Reagenzien finden Sie in den Abschnitten Grundlegende Vorgehensweise Erforderli
21. February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 ProClin 950 es una marca registrada de Supelco parte de Sigma Aldrich Corporation Fecha de publicaci n 16 de septiembre de 2009 PA0230 Page 11 Anticorpo Prim rio Pronto a Usar Bond Ki67 K2 N de Catalogo PA0230 Utilizagao Prevista Este reagente destina se a utiliza o diagn stica in vitro O anticorpo monoclonal Ki67 K2 destina se a ser usado para a identifica o qualitativa por microscopia ptica do antig nio nuclear Ki67 humano em tecidos fixos com formalina e embebidos em parafina por colorag o imunohistoquimica utilizando um sistema Bond automatizado A interpreta o cl nica de qualquer colora o ou da sua aus ncia deve ser complementada por estudos morfol gicos utilizando controlos adequados e deve ser avaliada no contexto da hist ria cl nica do doente e de outros testes complementares de diagn stico por um an tomo patologista qualificado Resumo e Explicac o As t cnicas de imunohistoqu mica podem ser utilizadas para demonstrar a presenca de antig nios em tecidos e c lulas ver Utilizar os Reagentes Bond na documentac
22. Tempi temperature di incubazione riconoscimento diversi da quelli specificati possono fornire risultati erronei Ogni eventuale modifica deve essere validata dall utente Istruzioni per l uso L anticorpo primario Ki67 K2 stato sviluppato per essere utilizzato con un sistema automatizzato Bond in associazione con il Bond Polymer Refine Detection Il protocollo di colorazione consigliato per l anticorpo primario Ki67 K2 l IHC Protocol F Per il riconoscimento termoindotto dell epitopo si consiglia l uso della Bond Epitope Retrieval Solution 2 per 20 minuti Risultati attesi Tessuti normali Il clone K2 ha colorato le cellule basali di laringe cute cervice colon ed esofago Una colorazione stata osservata anche nel timo nell utero nella tonsilla e nell ipofisi Sono stati individuati anche linfociti e cellule infiltranti in una serie di altri tessuti Numero totale di casi colorati 95 Il clone K2 ha individuato nuclei cellulari di carcinomi a cellule squamose di esofago 2 2 laringe 1 1 lingua 2 2 polmone 1 1 cervice 1 1 e cute 1 2 e di adenocarcinomi di stomaco 2 2 pancreas 1 1 colon 2 2 e retto 1 2 Inoltre il clone K2 ha mostrato anche una colorazione nucleare nei carcinomi di mammella 1 2 polmone 2 2 rene 2 2 pancreas 1 1 e fegato 2 3 nei carcinomi metastatici nei linfonodi 1 2 nella metaplasia squamosa nella cervice 1 1 e nell astrocitoma anaplastico del cervello 1 1
23. de Supelco membre du groupe Sigma Aldrich Corporation Date de publication 16 septembre 2009 PA0230 Page 5 Anticorpo Primario Pronto All uso Bond Ki67 K2 N catalogo PA0230 Uso previsto Reagente per uso diagnostico in vitro L uso dell anticorpo monoclonale Ki67 K2 previsto per l identificazione qualitativa con microscopio ottico dell antigene nucleare umano Ki67 in tessuto fissato in formalina incluso in paraffina con colorazione immunoistochimica utilizzando un sistema automatizzato Bond L interpretazione clinica di un eventuale colorazione o della sua assenza deve avvalersi di studi morfologici e di opportuni controlli ed essere effettuata da patologi qualificati nel contesto dell anamnesi clinica del paziente e di altri test diagnostici Sommario e spiegazione Grazie alle tecniche di immunoistochimica possibile dimostrare la presenza di antigeni nel tessuto e nelle cellule vedere Uso dei reagenti Bond nella documentazione per l utente Bond L anticorpo primario Ki67 K2 un prodotto pronto per l uso che stato ottimizzato in modo specifico per l impiego con il Bond Polymer Refine Detection La dimostrazione dell antigene nucleare umano Ki67 Si ottiene in primo luogo consentendo il legame del Ki67 K2 con la sezione e quindi visualizzando il legame stesso per mezzo dei reagenti forniti nel sistema di rilevazione L impiego di questi prodotti insieme a un sistema automatizzato Bond riduce la po
24. manipulados como capazes de transmitir infec o e eliminados tomando as precau es adequadas Nunca pipete reagentes com a boca e evite o contacto entre a pele e membranas mucosas com reagentes ou amostras Se reagentes ou amostras entrarem em contacto com areas sensiveis lave com uma quantidade abundante de agua Consulte um m dico Consulte os regulamentos federais estatais e locais relativamente elimina o de quaisquer componentes potencialmente t xicos Minimize a contamina o microbiana dos reagentes ou poder ocorrer um aumento da coloragao inespecifica A utilizac o de tempos e temperaturas de recupera o e incuba o diferentes dos especificados pode produzir resultados err neos Qualquer altera o deste tipo deve ser validada pelo utilizador Instru es de Utilizagao O anticorpo prim rio Ki67 K2 foi desenvolvido para utiliza o num sistema Bond automatizado em combina o com Bond Polymer Refine Detection O protocolo de coloragao indicado para o anticorpo prim rio Ki67 K2 o IHC Protocol F Recomenda se a recupera o de ep topos induzida por calor utilizando a Bond Epitope Retrieval Solution 2 durante 20 minutos Resultados Esperados Tecidos normais O clone K2 corou c lulas basais da laringe pele colo do Utero c lon e es fago Tamb m foi observada colora o no timo utero am gdala e pituit ria Foram detectados lip citos e c lulas infiltrativas numa ampla variedade de outros te
25. r duit l ventualit d une erreur humaine et la variabilit intrins que r sultant de la dilution du pipetage manuel et de l application titre individuel des r actifs R actifs fournis Ki67 K2 est un anticorps monoclonal anti humain de souris produit par surnageant de culture de tissu et conditionn dans du tampon salin Tris contenant une prot ine de transport et 0 35 de ProClin 950 conservateur Volume total 7 ml Clone K2 Immunog ne Fragment de prot ine Ki67 recombinante proche de l extr mit C terminale Sp cificit Antig ne nucl aire Ki67 humain exprim par toutes les cellules en prolif ration lors de la phase G1 tardive et des phases S M et G2 du cycle cellulaire Sous classe IgG1 Concentration totale en prot ine Environ 10 mg ml Concentration en anticorps Sup rieure ou gale 1 mg l d termin e par ELISA Dilution et m lange L anticorps primaire Ki67 K2 est dilution optimale pour utilisation dans l automate Bond Reconstitution m lange dilution ou titration de ce r actif non n cessaire Mat riel n cessaire mais non fourni Voir Utilisation des r actifs Bond dans votre manuel d utilisation pour obtenir la liste compl te du mat riel n cessaire au traitement des chantillons et au marquage immunohistochimique avec le syst me Bond Conservation et stabilit Conserver une temp rature comprise entre 2 8 C Ne pas utiliser apr s la date de p rem
26. responsabilidade pela interpretac o dos resultados dos doentes nestas circunst ncias Os tempos de protocolo podem variar devido a varia es na fixa o tecidular e na efic cia da valoriza o com antig nios devendo ser determinados de forma empirica Devem ser utilizados controlos de reagente negativos quando se optimizam as condi es de recupera o e os tempos do protocolo Resolugao de Problemas Consulte a refer ncia 3 para ac es de resolu o Entre em contacto com o seu distribuidor local ou com a sucursal regional da Leica Biosystems para notificar qualquer colorag o pouco habitual Informag es Adicionais Poder encontrar informag es adicionais sobre imunocolorag o com reagentes Bond nas sec es de Princ pios do Procedimento Material Necess rio Preparag o da Amostra Controlo de Qualidade Verificag o do Ensaio Interpretac o da Colorag o Significado dos S mbolos nos R tulos e Limitag es Gerais em Utilizar os Reagentes Bond na documentag o do utilizador Bond Bibliografia 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York
27. spridning som orsakas av individuell reagensutsp dning manuell pipettering och manuell reagenstills ttning Ingaende reagens Ki67 K2 ar en anti human monoklonal antikropp fran mus producerad som supernatant fran cellkultur Den levereras i trisbuffrad koksaltl sning med b rarprotein L sningen inneh ller 0 35 ProClin 950 som konserveringsmedel Total volym 7 ml Klon K2 Immunogen Rekombinant Ki67 proteinfragment nara C anden Specificitet Human Ki67 nukle rantigen uttrycktes i alla prolifererande celler under sena G1 S M och G2 faser av cellcykeln Undergrupp IgG1 Total proteinkoncentration Omkring 10 mg ml Antikroppskoncentration St rre n eller lika med 1 mg l enligt bestamning med ELISA Sp dning och blandning Den prim ra antikroppen Ki67 K2 ar optimalt utspadd f r anvandning pa ett Bond system Denna reagens beh ver varken rekonstitueras blandas spadas eller titreras N dv ndig materiel som ej medf ljer I Anv nda Bond reagens i Bond anv ndardokumentationen finns en fullst ndig lista med den materiel du beh ver f r att behandla ett prov och f r immunhistokemisk fargning med ett Bond system F rvaring och stabilitet Forvaras vid 2 8 C Anvand inte efter det utgangsdatum som anges pa flaskans etikett Tecken som indikerar kontaminering och eller instabilitet hos Ki67 K2 r grumling i l sningen luktutveckling och f rekomst av fallning Stall tillbaka i 2 8
28. 1 och ser st cystadenocarcinom i ggstock 1 1 och metastasiskt carcinom i lever 1 1 Totalt antal fall fargade 44 Ki67 K2 rekommenderas f r bed mning av cellproliferering i normala och neoplastiska vavnader Specifika begransningar for produkten Ki67 K2 har optimerats vid Leica Biosystems f r anvandning med Bond Polymer Refine Detection och Bond hj lpreagenser Anvandare som inte f ljer rekommenderade testprotokoll m ste ta pa sig ansvaret f r att korrekt tolka patientresultat under dessa f rh llanden Som f ljd av variationer i vavnadsfixering och effektivitet hos antigensf rst rkningen kan protokollets tider variera och de maste fastst llas empiriskt Negativa reagenskontroller b r anvandas nar man optimerar tervinningsbetingelser och protokolltider Fels kning Se referens 3 f r f rslag till atgarder Kontakta en lokal distribut r eller Leica Biosystems regionkontor f r att rapportera onormal inf rgning Mer information Mer information om immunf rgning med Bond reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden N dv ndig materiel F rbereda provet Kvalitetskontroll Verifiering av assayer Tolka inf rgningsresultat Symbolf rklaring for etiketter och Allmanna begransningar i Anv nda Bond reagens i Bonds anv ndardokumentation Litteraturf rteckning 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for C
29. C omedelbart efter bruk Andra f rvaringsbetingelser n de ovan angivna m ste verifieras av anv ndaren S kerhetsf reskrifter Produkten ar avsedd f r in vitro diagnostik 9 Halten ProClin 950 ar 0 35 Den aktiva ingrediensen 2 metyl 4 isotiazolin 3 on kan orsaka irritationer i hud 6gon slemhinnor och de vre luftvagarna Anvand engangshandskar nar du hanterar reagens Du kan fa tag pa ett s kerhetsdatablad genom att kontakta en lokal distribut r eller Leica Biosystems regionkontor eller bes ka Leica Biosystems webbplats www LeicaBiosystems com Prover bade f re och efter fixering samt all materiel som exponeras f r dem b r behandlas och avfallshanteras som potentiellt smittb rande material Munpipettera aldrig reagens och undvik att hud eller slemhinnor kommer i kontakt med reagens eller prover Om reagens eller prover skulle komma i kontakt med kansliga omraden tvatta dig med stora mangder vatten Kontakta lakare PA0230 Page 14 Angaende avfallshantering av potentiellt toxiska material hanvisar vi till gallande europeiska nationella och lokala bestammelser och f rordningar Minimera mikrobiologisk kontamination av reagens Om detta inte g rs kan det leda till en kad icke specifik inf rgning Om andra tider eller temperaturer anvands f r inkubation vid retrieval tervinning kan resultaten bli otillf rlitliga Varje s dan f r ndring m ste valideras av anvandaren Bruksanvisning Den prim
30. ches Material Probenvorbereitung Qualit tskontrolle Assay Verifizierung Deutung der F rbung Schl ssel der Symbole auf den Etiketten und Allgemeine Einschr nkungen in Das Arbeiten mit Bond Reagenzien in Ihrem Bond Benutzerhandbuch Bibliografie 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 ProClin 950 ist eine Marke von Supelco einem Unternehmen der Sigma Aldrich Corporation Ausgabedatum 16 September 2009 PA0230 Page 9 Anticuerpo Primario Listo Para Usar Bond Ki67 K2 N de catalogo PA0230 Indicaciones de uso Este reactivo es para uso diagn stico in vitro El anticuerpo monoclonal Ki67 K2 est destinado a utilizarse en la identificaci n cualitativa por microscopia ptica del ant geno nuclear Ki67 humano en tejidos fijados en formalina e incluidos en parafina mediante tinci n inmunohistoqu mica con el sistema automatizado Bond La interpretaci n cl nica de cualquier tinci n o de la ausencia de sta debe complementarse con estudios morfol gicos y controles adecuados y debe evaluarla un pat logo cualifica
31. cidos N mero total de casos corados 95 Tecidos tumorais O clone K2 detectou n cleos celulares proliferativos de carcinomas de c lulas escamosas do es fago 2 2 laringe 1 1 l ngua 2 2 pulm o 1 1 colo do tero 1 1 e pele 1 2 e adenocarcinomas do est mago 2 2 p ncreas 1 1 c lon 2 2 e recto 1 2 O clone K2 tamb m demonstrou colora o nuclear em carcinomas da mama 1 2 pulm o 2 2 rim 2 2 pancreas 1 1 e figado 2 3 carcinomas metast ticos dos g nglios linf ticos 1 2 metaplasia escamosa do colo do tero 1 1 e astrocitoma anapl sico do c rebro 1 1 Nao foi observada qualquer colora o em carcinomas papilares 2 2 e foliculares da tir ide 2 2 adenocarcinoma do pulm o 1 1 carcin ide at pico do timo 1 1 papiloma de plexo coroideu do c rebro 1 1 seminomas testiculares 2 2 carcinoma de c lulas claras 1 1 cistadenocarcinoma mucinoso 1 1 tumor de c lulas germinativas maligno 1 1 e cistadenocarcinoma seroso do ov rio 1 1 e carcinoma metast tico do f gado 1 1 N mero total de casos corados 44 A utilizac o de Ki67 K2 est recomendada na avalia o da prolifera o celular em tecidos normais e neopl sicos Limitag es Espec ficas do Produto Ki67 K2 foi optimizado na Leica Microystems para utilizac o com Bond Polymer Refine Detection e reagentes auxiliares Bond Os utilizadores que se desviem dos procedimentos de teste recomendados devem assumir a
32. do junto con el historial cl nico del paciente y de otras pruebas diagn sticas Resumen y explicaci n Pueden utilizarse t cnicas inmunohistoqu micas para demostrar la presencia de ant genos en tejidos y c lulas consulte Uso de reactivos Bond en la documentaci n del usuario de Bond El anticuerpo primario Ki67 K2 es un producto listo para usar que se ha optimizado espec ficamente para su uso con Bond Polymer Refine Detection La demostraci n del ant geno nuclear Ki67 humano se consigue en primer lugar permitiendo la uni n de Ki67 K2 al corte y a continuaci n visualizando esta uni n mediante los reactivos que se proporcionan en el sistema de detecci n El uso de estos productos en combinaci n con el sistema automatizado Bond reduce la posibilidad de errores humanos y la variabilidad inherente resultante de la diluci n de cada reactivo el pipeteo manual y la aplicaci n del reactivo Reactivos suministrados Ki67 K2 es un anticuerpo monoclonal antihumano de rat n que se produce como sobrenadante en cultivos de tejido y se suministra en soluci n salina tamponada de Tris con prote na portadora que contiene el 0 3596 de ProClin 950 como conservante Volumen total 7 mL Clon K2 Inmun geno Fragmento de prote na Ki67 recombinante cercano al extremo terminal C Especificidad Ant geno nuclear Ki67 humano expresado en todas las c lulas proliferativas durante las fases G1 tard a S M y G2 del ciclo celular
33. ed for in vitro diagnostic use The concentration of ProClin 950 is 0 35 It contains the active ingredient 2 methyl 4 isothiazolin 3 one and may cause irritation to the skin eyes mucous membranes and upper respiratory tract Wear disposable gloves when handling reagents To obtain a copy of the Material Safety Data Sheet contact your local distributor or regional office of Leica Biosystems or alternatively visit the Leica Biosystems Web site www LeicaBiosystems com Specimens before and after fixation and all materials exposed to them should be handled as if capable of transmitting infection and disposed of with proper precautions Never pipette reagents by mouth and avoid contacting the skin and mucous membranes with reagents or specimens If reagents or specimens come in contact with sensitive areas wash with copious amounts of water Seek medical advice PA0230 Page 2 Consult Federal State or local regulations for disposal of any potentially toxic components Minimize microbial contamination of reagents or an increase in non specific staining may occur Retrieval incubation times or temperatures other than those specified may give erroneous results Any such change must be validated by the user Instructions for Use Ki67 K2 primary antibody was developed for use on an automated Bond system in combination with Bond Polymer Refine Detection The recommended staining protocol for Ki67 K2 primary antibody is IHC Protocol F Hea
34. en raison des variations de fixation des tissus et de l efficacit de la facilitation de l antig ne et doivent tre d termin es empiriquement Des contr les r actif n gatifs doivent tre test s lors de l optimisation des conditions de d masquage et des dur es du protocole Identification des probl mes Voir la r f rence 3 pour connaitre les mesures correctrices Prenez contact avec votre distributeur local ou avec le bureau r gional de Leica Biosystems pour signaler tout marquage inattendu Informations compl mentaires Des informations compl mentaires sur l i mnunomarquage avec les r actifs Bond les principes de la m thode le mat riel n cessaire la pr paration des chantillons le contr le qualit les v rifications d analyse l interpr tation du marquage les l gendes et symboles sur les tiquettes et les limites g n rales peuvent tre obtenues dans Utilisation des r actifs Bond dans votre manuel d utilisation Bond Bibliographie 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 ProClin 950 est une marque de commerce
35. eraci n celular en tejidos normales y neopl sicos Limitaciones espec ficas del producto Ki67 K2 se ha optimizado en Leica Biosystems para su uso con Bond Polymer Refine Detection y reactivos auxiliares Bond Los usuarios que se aparten de los procedimientos de an lisis recomendados deben asumir la responsabilidad de interpretar los resultados del paciente tomando en cuenta estas circunstancias Los tiempos del protocolo pueden diferir debido a las variaciones en la fijaci n de los tejidos y en la eficacia de la preservaci n del ant geno y deben determinarse emp ricamente Se debe utilizar controles negativos con reactivos a la hora de optimizar las condiciones de detecci n y los tiempos de protocolo Resoluci n de problemas Consulte la referencia 3 para ver las acciones correctoras P ngase en contacto con su distribuidor local o la oficina regional de Leica Biosystems para informar de cualquier tinci n an mala M s informaci n Para obtener m s informaci n sobre inmunotinciones con reactivos Bond consulte los apartados Principio del procedimiento Material necesario Preparaci n de las muestras Control de calidad Verificaci n del an lisis Interpretaci n de la tinci n Clave de s mbolos en las etiquetas y Limitaciones generales de la secci n Utilizaci n de Reactivos Bond de la documentaci n de usuario suministrada por Bond Bibliograf a 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163
36. eua BIOSYSTEMS Bond Ready to Use Primary Antibody Ki67 K2 Catalog No PA0230 Leica Biosystems Newcastle Ltd Balliol Business Park West pes Benton Lane Newcastle Upon Tyne NE12 8EW United Kingdom C FR IT DE ES PT SV EL DA 2 44 191 215 4242 Instructions for Use Please read before using this product Mode d emploi A lire avant d utiliser ce produit Istruzioni per l uso Si prega di leggere prima di usare il prodotto Gebrauchsanweisung Bitte vor der Verwendung dieses Produkts lesen Instrucciones de uso Por favor leer antes de utilizar este producto Instru es de Utiliza o Leia estas instru es antes de utilizar este produto Bruksanvisning Var god las innan ni anv nder produkten Brugsanvisning Laes venligst for produktet tages i brug Check the integrity of the packaging before use V rifier que le conditionnement est en bon tat avant l emploi Prima dell uso controllare l integrit della confezione Vor dem Gebrauch die Verpackung auf Unversehrtheit berpr fen Comprobar la integridad del envase antes de usarlo Verifique a integridade da embalagem antes de utilizar o produto Kontrollera att paketet ar obrutet innan anvandning
37. from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 To ProClin 950 Supelco Sigma Aldrich Corporation 16 2009 PA0230 Page 17 Bond Brugsklart Primaert Antistof Ki67 K2 Katalognummer PA0230 Tilsigtet anvendelse Dette reagens er beregnet til brug ved in vitro diagnostik Ki67 K2 monoklonalt antistof er beregnet til brug ved kvalitativ identifikation med lysmikroskopi af humant Ki67 kerneantigen i formalinfikserede paraffinindstobte v v ved hj lp af immunhistokemisk farvning med et automatisk Bond system Den kliniske fortolkning af enhver farvning eller frav r af samme skal ledsages af morfologiske unders gelser og egnede kontroller samt evalueres af en uddannet patolog som ser fortolkningen i kontekst med patientens anamnese samt andre diagnostiske pr ver Resum og forklaring Immunhistokemiske teknikker kan anvendes til at p vise tilstedev relsen af antigener i v v og celler se Anvendelse af Bond reagenser i Bond brugervejledningen Det prim re antistof Ki67 K2 er et brugsklart produkt som er optimeret specielt til brug med Bond Polymer Refine Detection P visningen af humant Ki67 kerneantigen op
38. ittel enth lt Gesamtvolumen 7 ml Klon K2 Immunogen Rekombinantes Ki67 Proteinfragment in der Nahe des C terminalen Endes Spezifitat Humanes nukleares Antigen Ki67 das in allen proliferierenden Zellen in der spaten G1 S M und G2 Phase des Zellzyklus exprimiert wird Subklasse IgG1 Gesamtproteinkonzentration Ca 10 mg ml Antik rperkonzentration Gr er als oder gleich 1 mg l bestimmt mit ELISA Verd nnung und Mischung Der Prim rantik rper Ki67 K2 ist optimal f r den Gebrauch mit einem Bond System verd nnt Rekonstitution Mischen Verd nnen oder Titrieren dieses Reagenzes ist nicht erforderlich Erforderliche aber nicht mitgelieferte Materialien Eine vollst ndige Liste der Materialien die f r die Probenbehandlung und die immunhistochemische F rbung mit dem Bond System ben tigt werden befindet sich im Abschnitt Das Arbeiten mit Bond Reagenzien in Ihrem Bond Benutzerhandbuch Lagerung und Stabilitat Bei 2 8 C lagern Nach dem Ablauf des auf dem Beh lteretikett angegebenen Verfallsdatums nicht mehr verwenden Zeichen die auf eine Kontamination und oder Instabilit t von Ki67 K2 hinweisen sind eine Tr bung der L sung Geruchsentwicklung und das Vorhandensein von Pr zipitat Unmittelbar nach Gebrauch wieder bei 2 8 C aufbewahren Andere als die oben angegebenen Lagerungsbedingungen m ssen vom Anwender selbst getestet werden Vorsichtsma nahmen Dieses Produkt ist fiir die n vit
39. linical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 ProClin 950 ar ett varum rke f r Supelco som ing r i Sigma Aldrich Corporation Utgivningsdatum 16 september 2009 PA0230 Page 15 Bond Ki67 K2 PA0230 in vitro To Ki67 K2 Ki67 Bond H
40. n s ved f rst at lade Ki67 K2 binde sig til pr paratet og derefter visualisere denne binding ved hj lp af de reagenser der leveres med detektionssystemet Brugen af disse produkter sammen med et automatisk Bond system reducerer risikoen for menneskelige fejl og variabilitet som f lge af individuel reagensfortynding manuel pipettering og reagensp f rsel Leverede reagenser Ki67 K2 er et murint antihumant monoklonalt antistof produceret som en v vskultursupernatant og leveres i en Tris bufferjusteret saltvandsopl sning med b rerprotein indeholder 0 35 ProClin 950 som konserveringsmiddel Volumen i alt 7 mL Klon K2 Immunogen Rekombinant Ki67 proteinfragment t t pa C terminalen Specificitet Humant Ki67 kerneantigen udtrykt i alle prolifererende celler under sen G1 S M og G2 fase i cellecyklussen Underklasse IgG1 Samlet proteinkoncentration Ca 10 mg mL Antistofkoncentration Storre end eller lig med 1 mg L som bestemt med ELISA Fortynding og blanding Ki67 K2 prim rt antistof er optimalt fortyndet til brug p et Bond system Rekonstitution blanding fortynding eller titrering af dette reagens er ikke pakreevet Nodvendige materialer der ikke medf lger Der henvises til Anvendelse af Bond reagenser i Bond brugervejledningen for en komplet liste over materialer der er nodvendige til preeparatbehandling og immunhistokemisk farvning ved hjzelp af Bond systemet Opbevaring og stabilitet
41. n vom Anwender selbst getestet werden Gebrauchsanleitung Der Prim rantik rper Ki67 K2 wurde f r die Verwendung mit einem automatischen Bond System in Verbindung mit dem Bond Polymer Refine Detection entwickelt Das empfohlene Farbeverfahren f r den Prim rantik rper Ki67 K2 ist das IHC Protocol F Das hitzeinduzierte Epitop Retrieval wird unter Verwendung der Bond Epitope Retrieval Solution 2 f r 20 Minuten empfohlen Erwartete Ergebnisse Normale Gewebe Klon K2 farbte Basalzellen des Kehlkopfes der Haut Cervix des Kolons und der Speiser hre Dariber hinaus wurde in Thymus Uterus Mandeln und Hypophyse eine Farbung beobachtet Bei einer Reihe anderer Gewebe wurden Lipozyten und infiltrierende Zellen nachgewiesen Gesamtanzahl der gef rbten F lle 95 Tumorgewebe Klon K2 erkannte proliferierende Zellkerne von Plattenepithelkarzinomen der Speiser hre 2 2 des Kehlkopfes 1 1 der Zunge 2 2 Lunge 1 1 Cervix 1 1 und Haut 1 2 sowie Adenokarzinome des Magens 2 2 Pankreas 1 1 Kolons 2 2 und Rektums 1 2 Klon K2 zeigte au erdem eine nukleare F rbung bei Karzinomen der Mamma 1 2 Lunge 2 2 Niere 2 2 des Pankreas 1 1 und der Leber 2 3 metastatischen Karzinomen der Lymphknoten 1 2 squam sen Metaplasien der Cervix 1 1 und anaplastischen Astrozytomen des Gehirns 1 1 Bei papill ren 2 2 und follikul ren 2 2 Schilddr senkarzinomen Lungenadenokarzinomen 1 1 atypischen Thymuskarzinoiden 1
42. ndamment a l eau Consultez un m decin Renseignez vous sur les r glements f d raux nationaux et locaux pour l limination des compos s potentiellement toxiques Eviter une contamination microbienne des r actifs qui peut entrainer un marquage non sp cifique Des dur es ou des temp ratures de d masquage ou d incubation autres que celles sp cifi es peuvent entra ner des r sultats erron s Tout changement doit tre valid par l utilisateur Mode d emploi L anticorps primaire Ki67 K2 a t con u pour tre utilis sur l automate Bond conjointement avec Bond Polymer Refine Detection Le protocole de marquage recommand pour l anticorps primaire Ki67 K2 est IHC Protocol F Un d masquage d pitope par la chaleur est recommand avec Bond Epitope Retrieval Solution 2 durant 20 minutes R sultats attendus Tissus sains Le clone K2 a marqu les cellules basales du larynx de la peau du col de l ut rus du c lon et de l oesophage Un marquage a galement t observ dans le thymus l ut rus les amygdales et l hypophyse Les lipocytes et les cellules d infiltration d un ventail d autres tissus ont t d tect s Nombre total de cas marqu s 95 Tissus tumoraux Le clone K2 a d tect le noyau des cellules en prolif ration des pith liomas spinocellulaires de l oesophage 2 2 du larynx 1 1 de la langue 2 2 des poumons 1 1 du col de l ut rus 1 1 et de la peau 1 2 ainsi que les ad
43. nducida por calor usando Bond Epitope Retrieval Solution 2 durante 20 minutos Resultados esperados Tejidos normales El clon K2 ti c lulas basales de laringe piel c rvix colon y es fago Tambi n se observ tinci n en timo Utero am gdala y pituitaria Se detectaron lipocitos y c lulas infiltrantes en otros diversos tejidos N mero total de casos tefiidos 95 Tejidos tumorales El clon K2 detect nucleos de c lulas proliferativas de carcinomas de c lulas escamosas de es fago 2 2 laringe 1 1 lengua 2 2 pulm n 1 1 c rvix 1 1 y piel 1 2 y adenocarcinomas de est mago 2 2 p ncreas 1 1 colon 2 2 y recto 1 2 El clon K2 tambi n mostr tinci n nuclear en carcinomas de mama 1 2 pulm n 2 2 rifi n 2 2 p ncreas 1 1 e h gado 2 3 carcinomas metast sicos de nodo linf tico 1 2 metaplasia escamosa en c rvix 1 1 y astrocitoma anapl sico de enc falo 1 1 No se observ tinci n en carcinomas papilares 2 2 y foliculares de tiroides 2 2 adenocarcinoma de pulm n 1 1 carcinoide at pico de timo 1 1 papiloma de plexo coroideo de enc falo 1 1 seminomas de test culos 2 2 carcinoma de c lulas claras 1 1 cistadenocarcinoma mucoso 1 1 tumor maligno de c lulas germinales 1 1 cistadenocarcinoma seroso de ovario 1 1 y carcinoma metast sico de h gado 1 1 Numero total de casos tefiidos 44 Se recomienda el uso de Ki67 K2 para la evaluaci n de la prolif
44. o do utilizador Bond O anticorpo prim rio Ki67 K2 consiste num produto pronto usar que foi especificamente optimizado para utiliza o com Bond Polymer Refine Detection A demonstra o do antig nio nuclear Ki67 humano obtida por primeiro permitindo a liga o de Ki67 K2 a sec o e visualizando a posteriormente utilizando os reagentes fornecidos no sistema de detec o A utiliza o destes produtos em combina o com um sistema Bond automatizado reduz a possibilidade de erro humano e da variabilidade inerente resultante da diluig o do reagente individual pipetagem manual e aplicac o de reagente Reagentes Fornecidos Ki67 K2 um anticorpo monoclonal anti humano de ratinho produzido como sobrenadante de cultura tecidular e fornecida em solu o salina com tamp o Tris com prote na transportadora contendo 0 35 de ProClin 950 como conservante Volume total 7 mL Clone K2 Imunog nio Fragmento de prote na Ki67 recombinante pr ximo da parte C terminal Especificidade Antig nio nuclear Ki67 humano expresso em todas as c lulas proliferantes durante o final da fase G1 fases S M e G2 do ciclo celular Subclasse IgG1 Concentra o de Proteinas Totais Aproximadamente 10 mg mL Concentra o de Anticorpos Maior ou igual a 1 mg L conforme determinado por ELISA Dilui o e Mistura O anticorpo primario Ki67 K2 apresenta se com uma dilui o ideal para utilizag o num sistema Bond Nao nece
45. o instabilit del Ki67 K2 sono torbidita della soluzione formazione di odori e presenza di un precipitato Riportare a 2 8 C immediatamente dopo l uso L utente deve verificare eventuali condizioni di conservazione diverse da quelle specificate Precauzioni Il prodotto destinato all uso diagnostico in vitro La concentrazione del ProClin 950 0 35 Esso contiene il principio attivo 2 metil 4 isotiazolin 3 one e pu causare irritazione alla cute agli occhi alle mucose e alle alte vie respiratorie Per la manipolazione dei reagenti usare guanti monouso Una copia della Scheda di sicurezza pu essere richiesta al distributore locale o all ufficio di zona di Leica Biosystems o in alternativa visitando il sito di Leica Biosystems www LeicaBiosystems com PA0230 Page 6 campioni prima e dopo la fissazione e tutti i materiali esposti ad essi devono essere manipolati come potenziali vettori di infezione e smaltiti con le opportune precauzioni Non pipettare mai i reagenti con la bocca ed evitare il contatto dei reagenti e dei campioni con la cute e le mucose Se un reagente o un campione viene a contatto con zone sensibili lavare abbondantemente con acqua Consultare un medico Consultare la normativa nazionale regionale locale per lo smaltimento dei componenti potenzialmente tossici Ridurre al minimo la contaminazione microbica dei reagenti per non incrementare il rischio di una colorazione non specifica
46. petting and reagent application Reagents Provided Ki67 K2 is a mouse anti human monoclonal antibody produced as a tissue culture supernatant and supplied in Tris buffered saline with carrier protein containing 0 35 ProClin 950 as a preservative Total volume 7 mL Clone K2 Immunogen Recombinant Ki67 protein fragment close to the C terminus Specificity Human Ki67 nuclear antigen expressed in all proliferating cells during late G1 S M and G2 phases of the cell cycle Subclass IgG1 Total Protein Concentration Approx 10 mg mL Antibody Concentration Greater than or equal to 1 mg L as determined by ELISA Dilution and Mixing Ki67 K2 primary antibody is optimally diluted for use on a Bond system Reconstitution mixing dilution or titration of this reagent is not required Materials Required But Not Provided Refer to Using Bond Reagents in your Bond user documentation for a complete list of materials required for specimen treatment and immunohistochemical staining using a Bond system Storage and Stability Store at 2 8 C Do not use after the expiration date indicated on the container label The signs indicating contamination and or instability of Ki67 K2 are turbidity of the solution odor development and presence of precipitate Return to 2 8 C immediately after use Storage conditions other than those specified above must be verified by the user Precautions This product is intend
47. ption indiqu e sur l tiquette du r cipient Les signes indicateurs d une contamination et ou d une instabilit de Ki67 K2 sont les suivants une turbidit de la solution la formation d odeurs et la pr sence d un pr cipit Remettre 2 8 C imm diatement apr s usage Des conditions de stockage diff rentes de celles ci dessus doivent tre contr l es par l utilisateur Pr cautions Ce produit est congu pour le diagnostic in vitro La concentration de ProClin 950 est de 0 35 Contient du 2 m thyl 4 isothiazoline 3 one ingr dient actif et peut entrainer une irritation de la peau des yeux des muqueuses et des voies a riennes sup rieures Porter des gants jetables lors de la manipulation des r actifs Pour obtenir un exemplaire de la fiche technique des substances dangereuses Material Safety Data Sheet contactez votre distributeur local ou le bureau r gional de Leica Biosystems ou consultez le site Web de Leica Biosystems www LeicaBiosystems com PA0230 Page 4 Les chantillons avant et apr s fixation et tous les mat riels ayant t en contact avec eux doivent tre manipul s comme s ils taient risque infectieux et limin s avec les pr cautions ad quates Ne jamais pipeter les r actifs la bouche et viter le contact de la peau et des muqueuses avec les r actifs ou les chantillons Si des r actifs ou des chantillons entrent en contact avec des zones sensibles rincer abo
48. rgesehen Die klinische Auswertung der An oder Abwesenheit einer F rbung sollte durch morphologische Untersuchungen und geeignete Kontrollen erg nzt werden und sollte im Zusammenhang mit der Krankengeschichte eines Patienten und anderen diagnostischen Tests von einem qualifizierten Pathologen vorgenommen werden Zusammenfassung und Erlauterung Immunhistochemische Methoden k nnen dazu verwendet werden die Anwesenheit von Antigenen in Geweben und Zellen zu demonstrieren sehen Sie dazu Das Arbeiten mit Bond Reagenzien in Ihrem Bond Benutzerhandbuch Der Prim rantik rper Ki67 K2 ist ein gebrauchsfertiges Produkt das speziell f r den Gebrauch mit dem Bond Polymer Refine Detection optimiert wurde Der Nachweis des humanen nuklearen Antigens Ki67 erfolgt durch die Bindung von Ki67 K2 an das Pr parat und die anschlieRende Sichtbarmachung dieser Bindung mit den Reagenzien die im Detektionssystem bereitgestellt werden Die Verwendung dieser Produkte zusammen mit einem automatischen Bond System reduziert die Wahrscheinlichkeit menschlicher Fehler und die nat rlichen Schwankungen die beim individuellen Verd nnen von Reagenzien dem manuellen Pipettieren und dem Auftragen der Reagenzien entstehen Mitgelieferte Reagenzien Ki67 K2 ist ein monoklonaler Maus anti Human Antik rper der aus Zellkultur berstand hergestellt wurde in Tris gepufferter Salzl sung mit einem Tr gerprotein geliefert wird und 0 35 ProClin 950 als Konservierungsm
49. ro Diagnostik bestimmt Die Konzentration von ProClin 950 betr gt 0 35 Es enth lt 2 Methyl 4 isothiazolin 3 on als aktiven Bestandteil und kann Reizungen der Haut Augen Schleimh ute und oberen Atemwege verursachen Tragen Sie beim Umgang mit Reagenzien Einweghandschuhe PA0230 Page 8 Ein Exemplar des Sicherheitsdatenblattes erhalten Sie von Ihrer rtlichen Vertriebsfirma von der Regionalniederlassung von Leica Biosystems oder Uber die Webseite von Leica Biosystems unter www LeicaBiosystems com Behandeln Sie Pr parate vor und nach der Fixierung sowie samtliche damit in Ber hrung kommenden Materialien so als ob diese Infektionen bertragen k nnten und entsorgen Sie sie unter Beachtung der entsprechenden Vorsichtsma nahmen Pipettieren Sie Reagenzien niemals mit dem Mund und vermeiden Sie den Kontakt von Haut und Schleimh uten mit Reagenzien oder Pr paraten Falls Reagenzien oder Pr parate mit empfindlichen Bereichen in Kontakt gekommen sind sp len Sie diese mit reichlich Wasser Holen Sie anschlieRend arztlichen Rat ein Beachten Sie bei der Entsorgung potentiell toxischer Bestandteile die beh rdlichen und rtlichen Vorschriften Mikrobielle Kontaminationen sollten minimiert werden da es sonst zu einer Zunahme unspezifischer Farbungen kommen kann Die Verwendung anderer als den angegebenen Retrievals Inkubationszeiten oder Temperaturen kann zu fehlerhaften Ergebnissen f hren Diesbez gliche Anderungen m sse
50. ssaria reconstitui o mistura dilui o ou titula o deste reagente Materiais Necessarios Mas Nao Fornecidos Consultar Usar os reagentes Bond na sua documenta o do utilizador Bond para uma lista completa de materiais necessarios para tratamento de amostras e colora o imunohistoquimica usando um sistema Bond Armazenamento e Estabilidade Conservar entre 2 8 C Nao utilize ap s o fim do prazo de validade referido no r tulo do recipiente Os sinais que indicam contaminag o e ou instabilidade de Ki67 K2 58 turva o da solug o desenvolvimento de odor e presenca de precipitado Coloque entre 2 8 C imediatamente depois de utilizar Condig es de armazenamento diferentes das acima especificadas devem ser confirmadas pelo utilizador 1 Precauc es Este produto destina se a utiliza o diagn stica in vitro A concentra o de ProClin 950 de 0 35 Cont m o ingrediente activo 2 metil 4 isotiazolina 3 a e pode provocar irrita o da pele olhos membranas mucosas e vias a reas superiores Use luvas descartaveis quando manipular os reagentes Para obter uma c pia da Ficha de Dados de Seguran a do Material entre em contacto com o seu distribuidor local ou sucursal regional da Leica Biosystems ou em alternativa visite o site da Leica Biosystems na internet www LeicaBiosystems com PA0230 Page 12 As amostras antes e depois da fixa o e todo material que a elas seja exposto devem ser
51. ssibilit di un errore umano e la relativa variabilit che deriva dalla diluizione individuale del reagente e dal pipettamento e dall applicazione del reagente eseguiti manualmente Reagenti forniti Il Ki67 K2 un anticorpo monoclonale murino anti umano prodotto come surnatante di coltura tissutale e fornito in soluzione salina tamponata Tris con proteina carrier contenente 0 3596 di ProClin 950 come conservante Volume totale 7 ml Clone K2 Immunogeno Frammento della proteina Ki67 ricombinante vicino al tratto C terminale Specificita Antigene nucleare umano Ki67 espresso in tutte le cellule proliferanti durante le fasi G1 tardiva S M e G2 del ciclo cellulare Sottoclasse IgG1 Concentrazione proteica totale Circa 10 mg ml Concentrazione dell anticorpo Uguale o superiore a 1 mg l determinata mediante ELISA Diluizione e miscelazione La diluizione dell anticorpo primario Ki67 K2 stata ottimizzata per l uso con un sistema Bond Non necessario ricostituire miscelare diluire o titolare il reagente Materiale necessario non fornito Per un elenco completo dei materiali necessari per il trattamento del campione e la colorazione immunoistochimica con un sistema Bond consultare Uso dei reagenti Bond nella documentazione per l utente Bond Conservazione e stabilit Conservare a 2 8 C Non utilizzare dopo la data di scadenza indicata sull etichetta del contenitore segni di contaminazione e
52. ssige principper N dvendige materialer Praeparatklargering Kvalitetskontrol Analyseverifikation Fortolkning af farvning N gle til symboler pa etiketter og Generelle begr nsninger Bibliografi 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 ProClin 950 er et varem rke tilh rende Supelco en del af Sigma Aldrich Corporation Udgivelsesdato 16 September 2009 PA0230 Page 19 PA0230 Page 20 PA0230 Page 21 PA0230 Page 22 Leica Biosystems Newcastle Ltd Balliol Business Park West Benton Lane Newcastle Upon Tyne NE12 8EW United Kingdom 44 191 215 4242 16 September 2009 Leica Biosystems Newcastle Ltd 95 7947 Rev B PA0230
53. t anaplastisk astrocytom fra hjerne 1 1 Der sas ingen farvning i papillifeere 2 2 og follikulaere thyreoideacarcinomer 2 2 adenocarcinom fra lunge 1 1 atypisk carcinoid fra thymus 1 1 plexus choroideuspapillom fra hjerne 1 1 testikelseminomer 2 2 clearcellecarcinom 1 1 mucingst cystadenocarcinom 1 1 malign kimcelletumor 1 1 og serost cystadenocarcinom fra ovarie 1 1 samt metastatisk levercarcinom 1 1 Antal farvede cases i alt 44 Ki67 K2 anbefales til vurdering af celleproliferation i normale og neoplastiske v v Produktspecifikke begr nsninger Ki67 K2 er optimeret hos Leica Biosystems til brug med Bond Polymer Refine Detection og Bond hjzelpereagenser Brugere som afviger fra de anbefalede testprocedurer ma under disse forhold selv tage ansvaret for fortolkningen af patientresultater Protokoltiderne kan variere pa grund af variationer i veevsfiksering og effektiviteten i antigenfremh vning og skal bestemmes empirisk Der skal anvendes negative reagenskontroller under optimering af genfindingsbetingelser og protokoltider Fejlfinding Der henvises til reference 3 for afhjzelpende foranstaltninger Kontakt venligst den lokale distributor eller Leica Biosystems regionale kontor for at rapportere us dvanlig farvning Yderligere oplysninger Yderligere oplysninger om immunfarvning med Bond reagenser kan findes i Anvendelse af Bond reagenser i Bond brugervejledningen under overskrifterne Proceduremee
54. t induced epitope retrieval is recommended using Bond Epitope Retrieval Solution 2 for 20 minutes Results Expected Normal Tissues Clone K2 stained basal cells of larynx skin cervix colon and esophagus Staining was also seen in thymus uterus tonsil and pituitary Lipocytes and infiltrating cells in a range of other tissues were detected Total number of cases stained 95 Tumor Tissues Clone K2 detected proliferating cell nuclei of squamous cell carcinomas of the esophagus 2 2 larynx 1 1 tongue 2 2 lung 1 1 cervix 1 1 and skin 1 2 and adenocarcinomas of the stomach 2 2 pancreas 1 1 colon 2 2 and rectum 1 2 Clone K2 also demonstrated nuclear staining in carcinomas of the breast 1 2 lung 2 2 kidney 2 2 pancreas 1 1 and liver 2 3 metastatic carcinomas in lymph node 1 2 squamous metaplasia in cervix 1 1 and anaplastic astrocytoma of brain 1 1 No staining was seen in papillary 2 2 and follicular carcinomas of thyroid 2 2 adenocarcinoma of lung 1 1 atypical carcinoid of thymus 1 1 choroid plexus papilloma of brain 1 1 seminomas of testis 2 2 clear cell carcinoma 1 1 mucinous cystadenocarcinoma 1 1 malignant germ cell tumor 1 1 and serous cystadenocarcinoma of ovary 1 1 and metastatic carcinoma of liver 1 1 Total number of cases stained 44 Ki67 K2 is recommended for the assessment of cell proliferation in normal and neoplastic tissues Product Specific Limita
55. tions Ki67 K2 has been optimized at Leica Biosystems for use with Bond Polymer Refine Detection and Bond ancillary reagents Users who deviate from recommended test procedures must accept responsibility for interpretation of patient results under these circumstances The protocol times may vary due to variation in tissue fixation and the effectiveness of antigen enhancement and must be determined empirically Negative reagent controls should be used when optimizing retrieval conditions and protocol times Troubleshooting Refer to reference 3 for remedial action Contact your local distributor or the regional office of Leica Biosystems to report unusual staining Further Information Further information on immunostaining with Bond reagents under the headings Principle of the Procedure Materials Required Specimen Preparation Quality Control Assay Verification Interpretation of Staining Key to Symbols on Labels and General Limitations can be found in Using Bond Reagents in your Bond user documentation Bibliography 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P 3 Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone
56. utore locale o all ufficio di zona di Leica Biosystems Ulteriori informazioni Ulteriori informazioni sull immunocolorazione con i reagenti Bond si trovano in Uso dei reagenti Bond nella documentazione per l utente Bond ai titoli Principio della procedura Materiali necessari Preparazione del campione Controllo di qualit Verifica del saggio Interpretazione della colorazione Leggenda dei simboli e delle etichette e Limitazioni generali Bibliografia 1 Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 Final Rule 57 FR 7163 February 28 1992 2 Villanova PA National Committee for Clinical Laboratory Standards NCCLS Protection of laboratory workers from infectious diseases transmitted by blood and tissue proposed guideline 1991 7 9 Order code M29 P EA Bancroft JD and Stevens A Theory and Practice of Histological Techniques 4th Edition Churchill Livingstone New York 1996 ProClin 950 un marchio di fabbrica di Supelco societ del gruppo Sigma Aldrich Data di pubblicazione 16 settembre 2009 PA0230 Page 7 Gebrauchsfertiger Bond Prim rantik rper Ki67 K2 Bestellnr PA0230 Verwendungszweck Dieses Reagenz ist f r die In vitro Diagnostik bestimmt Der monoklonale Antik rper Ki67 K2 ist f r den qualitativen lichtmikroskopischen Nachweis des humanen nuklearen Antigens Ki67 in formalinfixiertem in Paraffin eingebettetem Gewebe durch immunhistochemische F rbung mit einem automatischen Bond System vo
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