SEKISUI - DVVT Screening - Medica-Tec
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1. O american Clagnosiica inc 500 West Avenue Stamford CT 06902 ual Tel 203 602 7777 Fax 203 602 2221 DVVtes 10 DVVtesf 25 810 825 DVVconfirm 5 DVVconfirm 10 815 815L moce Ed ec re american diagnostica GmbH Kaplaneigasse 35 D 64319 Pfungstadt Germany UTILISATION Le Dbwres d American Diagnostica est un test dRVVT Dilute Russell s Viper Venom Time simplifi propos pour le d pistage ou la mise en vidence des anticorps de type anticoagulant lupique Lupus Anticoagulant LA dans le plasma En association avec le Dwvtest le Dvvconfim d American Diagnostica permet de confirmer la pr sence de ces LA Ces deux tests sont des m thodes un temps et peuvent tre utilis s en technique manuelle semi automatique ou automatique P i L identification du Lupus Anticoagulant LA dans le plasma est un marqueur diagnostique du syndrome des antiphospholipides Antiphospholipid Syndrome APS dont les signes cliniques peuvent tre caract ris s par une thrombose art rielle veineuse des avortements spontan s r currents une thrombop nie et ou des troubles neurologiques Le LA peut galement tre induit par l administration de chlorpromazine de procainamide de thorazine et de certains antibiotiques En 1952 Conley et Hartmann ont d crit pour la premi re fois la pr sence de LA chez des patients souffrant de lupus ryth mateux syst mique SLE II est maintenant g2. El SAF se caracteriza cl nicamente por trombosis arterial o venosa p rdidas fetales espont neas y recurrentes trombocitopenia y o des rdenes neurol gicos AL puede ser inducido a ra z de la administraci n de clorpromacina procainamida toracina y determinados antibi ticos En 1952 Conley y Hartmann describieron por primera vez la presencia de AL en pacientes con Lupus Eritematoso Sist mico LES Posteriormente se ha ido descubriendo que AL se suele determinar m s com nmente en pacientes que no padecen LESS Los anticuerpos de AL se dirigen directa y especificamente contra una variedad de prote nas de uni n fosfolipidica entre las cuales se encuentran la beta 2 glicoprote na B2GPI la protrombina y la anexina V que forman complejos con diferentes fosfol pidos ani nicos p ej cardiolipina osfatidilinositol y fosfatildilserina Los Anticoagulantes L picos son inmunoglobulinas de isotipos IgG IgM y IgA que prolongan uno o varios de los ensayos fosfolipido dependientes de coagulaci n que se realizan in vitro p ej el test de romboplastina parcial con activador APTT el test de tiempo de protrombina diluida dPT el de tiempo de Textarin o el de veneno de v bora Russell diluido dRVVT La Sociedad Internacional para la Trombosis y la Hemostasis Scientific Subcommittee Criteria on Lupus Anticoagulants and Phospholipid dependent Antibodies recomienda para el diagn stico de AL el empleo de un ensayo de screening basado e
3. 1 0 Ul mL Les plasmas ayant un taux d h parine sup rieur a 1 0 Ul mL peuvent donner des temps faussement allong s dans ces tests et ne sont pas utilisables Certaines h parines de faible poids mol culaire HBPM peuvent fausser les r sultats du Dwvest Des tudes ont mis en vidence que la surcharge de plasmas en Fragmin 2 0 Ul mL n influe pas sur les r sultats de l analyse Un plasma surcharg en Lovenox enoxaparine sodique une concentration sup rieure 0 25 Ul mL interf re sur le r sultat 1 Les traitements par la Coumadine ou par les autres anti vitamines K peuvent entra ner un allongement des temps du Dwtest et du DWcorfirm En g n ral le rapport ne sera en dehors de la zone normale qu en pr sence de LA Toutefois quelques faux positifs peuvent tre observ s dans ces traitements Les chantillons doivent tre analys s en utilisant au moins un autre test de coagulation pour le LA car une seule analyse ne peut suffire pour la mise en vidence d anticoagulants lupiques 5 CARACT RISTIQUES ET PERFORMANCES Les tests Dwvtest et Dvvconfirm ont t effectu s dans le cadre d un programme de contr le de qualit par American Diagnostica Inc et par deux autres laboratoires ind pendants Le coefficient de variation CV obtenu sur les plasmas normaux tait inf rieur 4 0 pour le Dvvtestet 5 0 pour le DWconfirm Pour les plasmas anormaux le CV tait inf rieur 6 5 pour le DwWestet 5 0 p
4. for DVVconfirm tics DVVtest og DVVconfirm reagens var tested bade ved brug af normal som anormal plasma som beskrevet nedenfor PLASMA Prove Positiv DIWMtestDA confirm Lupus antikoagulant prove 100 17 17 Noma plasma 2 1 2 96 Hepariniseret plasma 0 0 2 Factor mangel plasma 0 0 8 Factor Mil inhibitor plasma 0 0 2 REFERENCES 1 Harris E N Asherson R A and Hughes G R V Antiphospholipid antibodies autoantibodies with a difference Ann Revs Med 1988 3a 261 271 2 Conley C L and Hartmann R C A hemorrhagic disorder caused by a circulating anticoagulant in patients with disseminated lupus erythematosus J Clin invest 1952 3x 621 622 3 Triplett D A Brandt J T and Maas R L The laboratory heterogeneity of lupus anticoagulants Arch Path Lab Med 1985 109 946 951 810 825CEFSD ADI20070710 10 11 12 Thiagarajan P Shapiro S S and DeMarco L Monoclonal immunoglobulin M lambda coagulation inhibitor with phospholipid specificity Mechanism of a lupus anticoagulant J Clin Invest 1980 es 397 405 Brandt J T Triplett D A Alving B and Scharrer Criteria for the diagnosis of lupus anticoagulants an update on behalf of the Subcommittee on Lupus Anticoagulants Antiphospholipid Antibodies of the ISTH Thromb Haem 1995 74 1597 1603 Exner T Papadopoulos G and Koutts J Use of a simplified dilute Russell viper venom time dRVVT c
5. n ralement admis que le LA est d tect plus fr quemment chez les patients ne souffrant pas de SLE Les autoanticorps LA sont sp cifiquement dirig s contre un groupe de prot ines se liant aux phospholipides et comprenant la B2 glycoprot ine B2GPI la prothrombine et l annexine V qui se complexent a diff rents phospholipides anioniques comme par exemple la cardiolipine l acide phosphatidique et la phosphatidyls rine Les anticoagulants lupiques sont des immunoglobulines d isotypes IgG IgM et IgA qui prolongent in vitro certains des tests de coagulation des phospholipides d pendants comme par exemple le temps de c phaline activ TCA le taux de prothrombine dilu dPT le temps de textarine ou le dRVVT Le sous comit scientifique de standardisation des anticoagulants lupiques et des anticorps phospholipides d pendants de la International Society for Thrombosis and Hemostasis a recommand de diagnostiquer les LA par des tests de coagulation pour le screening et par un test de confirmation utilisant une forte concentration de phospholipids 5 American Diagnostica Inc a mis au point le Dwvestcomme test de premi re intention pour le screening du LA et le Dvvconfirmcomme test compl mentaire utilisant une forte concentration de phospholipides pour la confirmation Le Dwwtestet le Dwvconfinmont une composition permettant de minimiser l effet de h parine afin de cibler au maximum la sensibilit et la sp cificit pour le diagnost
6. stico para asegurar su estabilidad Cuando vaya a utilizar un reactivo congelado proceda a su descongelaci n a 37 C durante 10 minutos como m nimo y agitelo bien antes de usar PROCEDIMENTO Procediniento manual p ej m todo de tubo inclinado o m todo seniautomstizado empleando el ST4 0 el fibr metro BBL Solicite la descripci n detallada de los procedimientos 0 M todo autorraltizacio El Dest y el DW confirm pueden ser realizados con la mayor a de los analizadores autom ticos Sea cual fuere el instrumento seleccionado se emplear el mismo volumen de reactivo que de muestra de plasma por ejemplo 100 uL de reactivo Dvvtest o de reactivo DVvconfirmmy 100 uL de plasma Tanto el reactivo como la muestra de plasma se deben incubar a 37 C durante 2 minutos como m nimo antes de realizar el ensayo Mezcle bien el reactivo reconstituido antes de agregarlo al plasma Los resultados del Dvvtest y el DVVconfirmson indicados en unidades de tiempo segundos Latrol REF 816N puede ser utilizado como plasma de control normal para los ensayos Dvvtest y DWWconfinm V ase Interpretaci n e informe de los resultados Coloque varillas magn ticas para agitaci n en el dep sito de reactivos y de ser posible a ada los reactivos empleando tubos flexibles aparte Despu s de utilizar los reactivos realice un enjuagado y o lavado del aparato especialmente si no dispone de tubos flexibles aparte para el suministro de los reactivos antes de v
7. best positif n indique pas n cessairement qu il y ait des LA ou bien que le plasma puisse contenir une d ficience du facteur II V ou X Si le DvWtest est positif il y a lieu de confirmer la pr sence de LA en retestant avec DWconfinnafin d obtenir un rapport entre Dwtest et DWconfimn voir ci dessous Le test Dwvconfimdoit tre effectu le m me jour que le Dvvtest et sur la m me population de patients II faut effectuer des tudes mixtes afin de d terminer la pr sence d une d ficience de facteur Interpr tation du DWVconfinm Tout chantillon positif en Dvvtest doit tre v rifi en Dwvconfim Les r sultats obtenus avec le DVWconfirmpeuvent tre analys s soit en calculant le Rapport DvvtesyDvvconfirmou le Rapport Normalis 1 Le Rapport DwrtesyDwvconfinmest exprim par le rapport du temps de coagulation du Dvvtest en secondes sur celui du DWconfirm en secondes Rapport DwvtesyDWWconfim Temps du Dwvtest s Temps du Dvvcorfim s Le Rapport DwtestD Wconfimdoit tre d termin pour les plasmas normaux de r f rence Un rapport exc dant de 2 E T la valeur normale tablie par le laboratoire confirme la pr sence d un LA positif Si le Rapport DvwresyDwvconfimest dans la zone normale de r f rence tablie par le laboratoire rapport moyen 2 E T le test est alors n gatif 2 Le Rapport Normalis se calcule de la fa on suivante Dwvtest chant Dvvtest moy norm de r f Rapport Normalis A Dwconf
8. el reactivo del Dvwrestaumenta la sensibilidad y la especificidad para AL DWconfirmes un ensayo de coagulaci n formulado con Veneno de V bora Russell y una alta concentraci n de fosfol pidos para utilizar junto con el Dvvtest con el objetivo de confirmar la presencia de AL en el plasma En un plasma que contenga AL el tiempo de coagulaci n con Dwonfirm deber a resultar significativamente inferior que al emplear Dwv st La presencia de AL en las muestras de plasma queda confirmada cuando el ratio entre el tiempo de coagulaci n del Dvv sty el iempo de coagulaci n del Dwvcorfirmes superior al rango normal del laboratorio media del RATIO Dwres Dwconfim 2 desviaciones est ndar REACTIVOS Los reactivos del Dvvtest y del Dvwconfimse suministran liofilizados y consisten en mezclas patentadas de Veneno de V bora Russell calcio y fosfol pidos asi como aditivos y conservantes inertes Conserv ndolos entre 2 y 8 C el contenido de los viales sin abrir se mantiene estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta Los reactivos del Dwvest se suministran en dos tama os diferentes de viales a REF 810 incluye 10 viales que contienen cada uno la cantidad de reactivo necesaria para realizar 20 ensayos con la mayor a de los m todos automatizados b REF 825 incluye 10 viales que contienen cada uno la cantidad de reactivo necesaria para realizar 50 ensayos con la mayor a de os m todos automatizados Los reactivos de
9. er udf rt ved de mest automatiserede metoder PROVETAGNING og TILBEREDNING Blodpr ver kan tages med en spr jte eller silikoniserede vakuum r r Bland 9 dele blod med en del af 3 2 eller 3 8 trinatriumcitrat dihydrat Hvis patientens hematokrit er hajere end 55 ber citratmeengden formindskes proportionelt for at undg indvirkning p resultatet Efter blandingen centrifugeres pr ven ved 5 000 x g i 10 minutter Det er meget vigtigt at al plasma der testes med denne reagens er platelet poor dvs at det har f rre end 10 trombocyter uL Dette g lder specielt hvis plasmaen skal nedfryses idet kan testresultaterne forv rres hvilket kunne maskere LA til stedeveerelsen Dette kan opnas ved centrifugering se ovenfor eller ved at filtrere plasmaen gennem et 0 22 micron filter Det samlede plasma kan da siden opbevares ved 2 8 C men b r afpraves testes indenfor 4 timer Alternativt kan plasmaen nedfryses til 70 C og 10 opbevares i et halvt ar Nedfrosset plasma skal hurtigt t s op til 37 C for brug og afpr ves omg ende eller b r ikke opbevares l ngere end 2 timer ved 2 8 C i opt et stand far afpr vning MATERIALE SOM BEH VES FOR ANALYSEARBE DET LAtrol LA normal REF 816N respektive unormal kontrolplasma REF816N eller lignende Pipetter til volumen mellem 100 HL og 5 0mi rent deioniseret eller destilleret vand REAGENSENS OPL SNING OG STABILITET Bem rk DVVconfirm lyoph har et pudderagtigt udseende dog kan D
10. puede ser congelado r pidamente y mantenido a 70 C durante un m ximo de seis meses El plasma congelado debe ser descongelado r pidamente a 37 C antes de su utilizaci n debiendo ser testado inmediatamente o pudiendo ser almacenado como maximo dos horas entre 2 y 8 C 8 MATERIALES NECESARIOS QUE NO SE SUMINISTRAN Plasmas de control para LAtrol AL Normal REF 816N y Anormal REF 816A o plasmas de control equivalentes Pipetas para dispensar vol menes de 100 uL a 5 0 mL Agua purificada desionizada o destilada PREPARACI N Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS NOTA El liofilizado de Dwvconfimtiene la apariencia de polvo el liofilizado del Dvvtest puede tener una apariencia cristalina Reconstituya cada vial de reactivos con agua desionizada siguiendo las instrucciones de la etiqueta REF aio s as as Volumen HO 2 0 mL 5 0 mL 1 0 mL 2 0 mL Despu s de afiadir el agua mezcle bien el reactivo y mant ngalo a temperatura ambiente durante 15 minutos como minimo para asegurar la disoluci n completa Una vez reconstituidos el reactivo se mantendr estable durante 24 horas 7d as Imes 4 entre 20 y 25 C entre 2 y 8 C 20 C El reactivo reconstituido puede ser recuperado del analizador si no ha sido superado el tiempo de estabilidad de 24 horas a temperatura ambiente El reactivo reconstituido puede ser congelado en tubos de almacenamiento de pl
11. varier d un laboratoire l autre et chaque site doit tablir sa propre zone de r f rence pour la m thode et l instrument utilis Arbre d cisionnel pour la recherche du LA SUSPICION DE LA n gatif Test de m lange des plasmas q positif LA Non Confirm 4 PENE _ gt LA Confirm Rapport DwvtesyDWWconfinmou Rapport Dwvtest Dvvconfinmou Rapport Normalis n gatif Rapport Normalis positif LIMITES DE LA M THODE Ne pas utiliser des chantillons h molys s lip miques ou ict riques sur des instruments d tection optique Une m thode manuelle ou semi automatique est alors conseill e Ne pas effectuer les tests Dvvtestou DWconfimnsur les chantillons de plasma h molys s Les temps de coagulation du Dvvtestet du DWconfimpeuvent tre allong s chez les patients avec d ficits en facteurs Il V ou X Le rapport ne restera cependant anormal qu en pr sence de LA En pr sence d inhibiteurs des facteurs II V et X la mise en vidence de LA ne pourra tre r alis e chez les patients avec suspicion du fait de l allongement des temps de coagulation des tests Dvvtestet DVWconfirm d la pr sence d inhibiteurs Si le Dwrestet le DWconfimnsont r alis s sur des plasmas titre lev en facteur VIII gt 200 ces r actifs peuvent ne pas mettre en vidence la pr sence de LA et donner un r sultat faussement n gatif 2 Le Dwv st et le DW confirmcontiennent des agents neutralisant l h parine jusqu
12. 2 8 C et avant ouverture les r actifs sont stables jusqu la date de p remption indiqu e sur le flacon Les r actifs Dvvtest sont propos s en 2 conditionnements La r f rence 810 contient 10 flacons chaque flacon contenant les r actifs n cessaires pour 10 tests par m thode manuelle ou pour 20 tests par la plupart des m thodes automatiques La r f rence 825 contient 10 flacons chaque flacon contenant les r actifs n cessaires pour 25 tests par m thode manuelle ou pour 50 tests par la plupart des m thodes automatiques Les r actifs Dvvconfirmsont propos s en 2 conditionnements La r f rence 815 contient 10 flacons chaque flacon contenant les r actifs n cessaires pour 5 tests par m thode manuelle ou pour 10 tests par la plupart des m thodes automatiques La r f rence 815L contient 10 flacons chaque flacon contenant les r actifs n cessaires pour 10 tests par m thode manuelle ou pour 20 tests par la plupart des m thodes automatiques RECUEIL ET PREPARATION DES ECHANTILLONS M langer neuf volumes de sang et un volume de la forme dihydrat e de citrate trisodique a 3 2 ou 3 8 109 ou 129 mM Si le taux d h matocrite du patient est sup rieur 55 les r sultats des tests Dvvtest et DVWconfirmpeuvent tre erron s et il est alors n cessaire d effectuer un r ajustement du sang un anticoagulant de ratio 8 Apr s m lange avec l anticoagulant centrifuger le sang pendant 10 mn a au moins 5000g Le plasma normal et
13. Los resultados de Dwvconfinmpueden ser reportados como RATIO DwresyDwvconfinmo como RATIO NORMALIZADO 1 El RATIO DwresyDwvconfimee calcula dividiendo el tiempo determinado con el Dvvtest en segundos entre el tiempo determinado con el DVWconfinn en segundos RATIO DwtesyDWvconfinm DWtest seg Dwvconfim seg 810 825CEFSDOADI20070710 El RATIO DwresyDwvconfimdebe ser determinado para plasmas normales de referencia Si el RATIO DwwresyDwvconfim del plasma del paciente es superior a 2 desviaciones est ndar por encima de la referencia normal establecida en el laboratorio para el RATIO DWestDWconfimn queda confirmado que el test de AL es positivo Si el ratio del DwvesyDwvconfinmse sit a en el rango normal para el ratio el test es negativo para AL y hay presencia de otras anomal as 2 El RATIO NORMALIZADO se calcula del siguiente modo Dwtest muestra Dwvest media del rango normal RATIO NORMALIZADO Dwvconfinm muestra Dwwconfim media del rango normal Ejemplo Muestra DWrtest 58 9 segundos Muestra Dvvconfimi 32 2 segundos Media del Dwrest 35 8 segundos Media del Dwcorfinmi 32 8 segundos 4 58 9 35 8 1 64 RATIO Normalizado 1 67 32 2 32 8 0 98 Interpretaci n de resultados del RATIO NORMALIZADO RATIO Nomelizado Status AL gt 2 0 Alta presencia de AL de 1 5a 2 0 Presencia moderada de AL de 1 2a 1 5 Ligera presencia de AL Los resultados del ensayo se pueden expresar como p
14. Russell viper venom time dRVVT confirms heterogeneity among Lupus Anticoagulants Blood Coag Fibrinol 1990 x 259 266 7 Thiagarajan P Pengo V and Shapiro S S The use of the dilute Russell viper venom time for the diagnosis of lupus anticoagulants Blood 1986 ex 869 874 8 Collection transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Second Edition NCCLS Document H21 A2 December 1991 Vol 11 No 23 Brandt J T Q amp A CAP Today August 1992 Page 61 10 Disponible chez American Diagnostica GmbH Kaplaneigasse 35 D 64319 Pfungstadt Allemagne ou votre distributeur local 11 Passey R B Walking the straight and narrow on quality control mLo 1993 2 39 43 12 Documentation interne American Diagnostica Inc Stamford Connecticut 06902 USO PROPUESTO El Dvvest es un ensayo simplificado de Veneno de V bora Russell diluido ARVVT cuyo objetivo es detectar Anticoagulante L pico AL en el plasma del paciente El ensayo DWvconfimse utiliza para confirmar la presencia de AL en plasmas que han resultado positivos en el ensayo Dvvtest Tanto el Dvvtest como el DWWconfimconstituyen ensayos de coagulaci n de un paso que pueden ser realizados mediante m todo manual semiautomatizado o totalmente automatizado RESUMEN La identificaci n del Anticoagulante L pico AL en el plasma constituye un paso decisivo en el diagn stico del S ndrome Antifosfolipido SAF
15. VVtest lyoph forekomme krystallint Oplas reagenset i det volumen destilleret vand som er angivet pa etiketten Blandes ordentligt og lad det sta i mindst 15 min ved stuetemperatur s opl sningen bliver fuldst ndig Opl s reagenset i det volumen destilleret vand som er angivet p etiketten Blandes ordentligt og lad det st i mindst 15 min ved stuetemperatur s opl sningen bliver fuldst ndig Volume HO 2 0 mL 5 0 mL 1 0 mL 2 0 mL REF 810 a5 85 aL Reagenset er stabilt i 24 timer ved 20 25 C 7 dage ved 2 8 C 1 m ned ved 20 C Rekonstitueret reagens kan blive genvundet fra instrument reagens reservoir forudsat at 24 timers stuetemperaturs stabilitet ikke er overskredet Rekonstitueret reagens kan nedfryses i plastik opbevarings r r for at sikre stabilitet Nedfrosset reagens b r st i mindst 10 minutter ved 37 C derefter vortexes inden brug 2 hours 7 days 1month 4 20 to 25 C 2 to 8 C 20 C METODEUDF RELSE Manuel vejenetode eller halvautorretisk metode ned ST4 eller BBL Fibrometer Beskrivelser findes om nsket Autonratiske metoder DVVtest og DVVconfirm kan udf res p de fleste automatiske koagulationstidsbestemmelses maskiner Apparaterne stilles ind p at levere lige dele volumen f eks 100 uL pr ve og reagens Bade pr ve og reagens skal inkuberes ved 37 C i mindst 2 minutter inden testen startes Bland det rekonstituerede
16. actif et le laisser stabiliser temp rature ambiante pendant au moins 15 minutes afin de permettre une totale dissolution Une fois reconstitu le r actif est stable pendant amp heures 7jous 1nois 4 de 20 a 25 C de 2 8 C 20 C Les r actifs reconstitu s peuvent tre laiss s en place dans l instrument de mesure jusqu 24H temp rature ambiante condition que la temp rature n exc de pas les valeurs indiqu es Le r actif reconstitu peut tre congel et stock en tubes plastiques pour assurer sa stabilit Les plasmas et les r actifs conserv s 2 8 C doivent tre plac s au bain marie 37 C 10 mn au moins avant utilisation MODE OP RATOIRE M thode manuelle au bainsrerie ou semi automstiqe en utilisant le STA ou le fibrom tre BBL Proc dures disponibles sur demande 10 y Le Dw st et le Dvvconfinm peuvent tre utilis s sur divers automates Le programme s lectionn sur l instrument devra permettre de distribuer un m me volume d chantillon tester et de r actif ex 100 uL de Dvvtestou Dvvconfirmet 100 uL d chantillon Le plasma et le r actif doivent tre pr incub s 37 C pendant au moins 2 minutes avant d effectuer le test Bien homog n iser le r actif avant de l ajouter au l instrument Le temps de coagulation du Dvvtest de ce pool de plasmas normaux servira pour l interpr tation des r sultats de l chantillon doser Comme pour les m t
17. agulation inhibitor with phospholipid specificity Mechanism of a lupus anticoagulant J Clin Invest 1980 amp 397 405 5 Brandt J T Triplett D A Alving B and Scharrer Criteria for the diagnosis of lupus anticoagulants an update on behalf of the Subcommittee on Lupus Anticoagulants Antiphospholipid Antibodies of the ISTH Thromb Haem1995 746 1597 1603 6 Exner T Papadopoulos G and Koutts J Use of a simplified dilute Russell viper venom time dRVVT confirms heterogeneity among Lupus Anticoagulants Blood Coag Fibrinol 1990 x 259 266 7 Thiagarajan P Pengo V and Shapiro S S The use of the dilute Russell viper venom time for the diagnosis of lupus anticoagulants Blood 1986 ex 869 874 8 Collection transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Second Edition NCCLS Document H21 A2 December 1991 Vol 11 No 23 9 Brandt J T Q amp A CAP Today August 1992 Page 61 10 Disponible en American Diagnostica GmbH Kaplaneigasse 35 D 64319 Pfungstadt Alemania o su distribuidor local 11 Passey R B Walking the straight and narrow on quality control mLo 1993 2 39 43 12 Datos registrados a disposici n de American Diagnostica Inc Stamford Connecticut 06902 EEUU 9 810 825CEFSDOADI20070710 Matodebeskrivelse til dagligt brug NNVENDELSESOMRADE Dwest er et forenklet dilute Russell s Viper Venom Time dRVVT test til bestem
18. cumento NCCLS H21 A2 8 Los donantes fueron adultos mujeres y hombres con valores normales de PT y APTT Estos resultados s lo se deben considerar como ejemplo Los resultados variar n seg n el laboratorio por ello cada laboratorio debe determinar sus propios rangos de referencia normales para todos los instrumentos y m todos empleados SOSPECHA DE AL Diagrama de confimmaci n de AL negativo Pruebas de mezclas para averigua positivo presencia de inhibidores AL Sin confirmar p AL Confirmado RATIO Dw st Dvvconfinmo RATIO Dest Dv confirmo RATIO NORMALIZADO negativo RATIO NORMALIZADO positivo MJESTRA DE PLASMA DWtest DWconfirmpositivo Pl rres con test de AL positivo 100 17 17 Pl rres nomales 2 1 2 96 Plasmes heperinizados 0 0 2 Pl nes con deficiencia de factores 0 0 8 Plasmas con inhibidor del factor Vill 0 0 2 REFERENCES 1 Harris E N Asherson R A and Hughes G R V Antiphospholipid antibodies autoantibodies with a difference Ann Revs Med 1988 3a 261 271 2 Conley C L and Hartmann R C A hemorrhagic disorder caused by a circulating anticoagulant in patients with disseminated lupus erythematosus J Clin Invest 1952 3x 621 622 3 Triplett D A Brandt J T and Maas R L The laboratory heterogeneity of lupus anticoagulants Arch Path Lab Med 1985 1081 946 951 4 Thiagarajan P Shapiro S S and DeMarco L Monoclonal immunoglobulin M lambda co
19. dades mL los resultados del ensayo s se ven interferidos 2 La Coumadina y otros antagonistas de la vitamina K pueden prolongar los tiempos de Dwvtest y DWconfim El resultado del RATIO Dw syDvvconfinm sin embargo se mantendr fuera del rango normal si hay presencia de Anticoagulantes L picos Las muestras deben ser testadas empleando por lo menos otro test diferente de AL basado en la coagulaci n dado que mediante ning n nico ensayo de AL se consigue una identificaci n absoluta de la presencia de Anticoagulantes L picos el plasma CARACTER STICAS DE LAS PRESTACIONES Los ensayos Dwvtest y Dvvcorfinm han sido sometidos a un programa de control de calidad realizado por American Diagnostica Inc y dos laboratorios independientes El coeficiente de variaci n global CV para plasmas normales fue inferior a 4 0 para el Dwteste inferior a 5 0 para el Dwvconfim Para plasmas anormales el CV global fue inferior a 6 5 para el Dwteste inferior a 5 0 para el Dwconfinmm 2 Especificidad Los reactivos de Dvvtesty DVWconfirmhan sido testados utilizando plasmas normales y anormales tal y como se describe a continuaci n INSTRUMENTO MLA 1000C sra ACL 300 Tiempo DMtest seg 28 45 29 51 28 47 Tiempo DWWconfirm seg 30 40 21 46 28 40 RATIO DWtest DWconfirm 0 77 1 21 0 95 1 47 0 83 1 35 n 21 25 20 Los rangos de referencia han sido obtenidos por American Diagnostica Inc de acuerdo al Do
20. eholdende h je v rdier af Factor VIII gt 200 kan reagenset ikke identificere LA tilstedeveerelsen og kan derfor give et falskt negativ LA DVVtest og DVVconfirm indeholder stoffer som kan neutralisere standard ufraktioneret heparin op til og inkluderer 1 0 U ml Plasma indeholdende heparin niveauer h jere end 1 0 U ml kan give forh jede resultater med disse tests Visse lav molekyl r v gt hepariner LMWH kan influere DVVtesten Unders gelser har vist at plasma tilsat med 2 0 units ml Fragmin dalteparin sodium indspr jtning ikke blandede sig med pr ve resultater Plasma der er tilsat Lovenox enoxaparin sodium indspr jtning med koncentrationer h jere end 0 25 U ml blander sig dog med prove resultater Coumadin eller andre Vitamin K antigonister kan forl nge DVVtest og DVVconfirm tider DVVtest DVVconfirm KVOTE resultat vil dog stadig veere udenfor normalomradet hvis LA er til stede Det anbefales at anvende mindst n anden koagulationsbaseret LA test idet n enkelt LA prove ik afgjort kan identificere tilstedev relsen af Lupus Antikoagulans i hvert enkelt pr ve plasma FORVENTEDE RESULTATER Preecision DVVtest og DVVconfirm prover er udf rt med kvalitetskontrol fra American Diagnostica Inc Og to uafh ngige laboratorier Den samlede koefficient af afart CV for normalplasma var mindre end 4 0 for DVVtest og 5 0 for DVVconfirm For anormalt plasma var det samlede CV mindre end 6 5 for DVVtest og mindre end 5 0
21. firm som har en middelveerdi 2SD Mindst 20 plasma fra et repr sentativt omr de kan alder af raske bloddonorer bar indg Det er vigtigt at normalveerdi plasma behandles p same r de som pr ve plasma kommer til at blive behandlet Hvis frosne prover er testet separate skal normalveerdierne v re fastsat kun for frosne pr ver Det kan ikke anbefales at blande pr verne dvs at analysere begge prover som friske eller nedfrosne i vilk rlig r kkef lge Et nyt reference omr de skal tages frem ved enhver forandring f eks en bytning af reagens Lot ndringer pa apparat og minimum n gang om ret hvad der kommer f rst Opna daglige data over flere dage for at bestemme en dag dag variation 810 825CEFSD ADI20070710 FORTOLKNING amp RAPPORTERING Se resultateme LA Decision Flow Chart DWTest Resultat Hvis koagulationspraven ligger indenfor referenceomradet middelveerdi 2SD s er proven LA negativ men hvis DVVTest tiden for praveplasmaet er st rre end middelv rdien p de 2SD sa er pr ven LA positiv Benreekming En positiv DVVTest indikerer enten at LA er til stede eller at plasmaet kan indeholde en Factor Il V eller X mangel Nar DVVtesten er positiv b r LA tilstedev relsen blive bekr ftet Reteste ved at bruge DVVconfirm for at opn en DVVtest DVVconfirm kvote DVVConfirm pr ven skal udf res pa samme patient pr ve samme dag som DVVtesten er blevet udf rt Blandede studier skal udf res for at bestemme tilstedev relse
22. hodes manuelles et semi automatiques d j d crites un chantillon de pool de plasmas normaux ou de LAtrol REF 816N devra tre test dans chaque s rie de dosages Utiliser les circuits de r actifs sp cifiques propres chaque appareil et mettre un barreau magn tique dans le r servoir r actifs quand cela est possible Effectuer compl tement la proc dure de lavage et ou de rin age apr s avoir utilis ces r actifs en particulier sur les automates ne poss dant pas de circuits r actifs sp cifiques avant de r aliser d autres tests de coagulation ou chromog niques Consulter le mode d emploi du fabriquant de l instrument pour les instructions compl tes concernant ces proc dures Remarque Tout chantillon s av rant positif en Dvvtestdoit tre test une deuxi me fois en utilisant le Dwvconfinm CONTR LE DE QUALIT Les plasmas de contr le LA normaux et anormaux doivent tre test s pour chaque s ries d analyses chaque changement de personnel ou d quipe de travail et tous les 40 chantillons 1 Les plasmas de contr le doivent tre pauvres en plaquettes et contenir moins de 104 plaquettes uL Les plasmas de contr le anormal et normal REF 816A et 816N du LAtrol pour le LA peuvent tre utilis s comme contr le de qualit Les valeurs obtenues pour ces plasmas doivent tre situ es dans la zone de valeurs de contr le tablie par le laboratoire DETERMINATION DE LA ZONE NORMALE DE REFERENCE Chaque labo
23. ic du LA PRINCIPE Le venin de vip re Russell active directement le facteur X en facteur Xa en pr sence de phospholipides et de calcium ce qui g n re de la thrombine et entraine la formation d un caillot visible dans le plasma Cette activation directe permet de contourner les facteurs de la phase contact et intrins ques de la cascade de la coagulation et est insensible aux d ficits en facteurs VIII IX XI et XII ou de leurs inhibiteurs respectifs En pr sence d une suspicion de LA le Dwv st peut tre r alis m me si le TCA est normal car la concentration et le type de phospholipides du r actif permettent d augmenter la sensibilit et la sp cificit du test au LAS Le DWconfimconfirme la pr sence de LA gr ce l utilisation des m mes r actifs que le Dvvtest mais avec une concentration plus lev e de phospholipides Cela permet de corriger l allongement du temps de coagulation induit par la presence de LA En pr sence de LA le temps de coagulation du Dvvconfirmest plus court que celui du Dvvtest Le test est consid r comme positif pour la pr sence de LA quand le rapport wveest DVVoonfirmest gt la zone de r f rence tablie par le laboratoire moyenne 2 E T R ACTIFS Les r actifs Dmvest et DVvconfimse pr sentent sous forme lyophilis e et contiennent un m lange original de venin de vip re Russell de calcium et de phospholipides stabilis par des adjuvants inertes et des conservateurs Conserv s a
24. inm chant Dwvconfim moy norm de r f A titre d exemple uniquement Dwtest Patient 58 9 secondes DWconfirmPatient 32 2 secondes Dest Moyen 35 8 secondes DWconfirmMoyen 32 8 secondes 58 9 35 8 1 64 Rapport Normalis 1 67 32 2 32 8 0 98 Interpr tation des r sultats en fonction du RAPPORT NORMALISE Rapport Norrrelis Situation du LA gt 2 0 Forte pr sence de LA 1 5 2 0 Pr sence mod r e de LA 12a15 Faible pr sence de LA Les r sultats des tests peuvent tre rapport s comme tant soit positifs n gatifs en LA ou bien exprim s par le Rapport DWest DWconfirm ou le Rapport Normalise Dans l ventualit d une expression des r sultats par le Rapport il doit galement tre fait mention des valeurs de la zone de r f rence 810 825CEFSDOADI20070710 VALEURS ATTENDUES Valeurs norrreales de r f rence 2 E T INSTRUMENT MLA 1000C sra ACL 300 Temps DWtest sec 28 45 29 51 28 47 Temps DWWconfirm sec 30 40 21 46 28 40 RAPPORT DWWtest D A confirm 0 77 1 21 0 95 1 47 0 83 1 35 n 21 25 20 Les zones de r f rence ont t d finies par American Diagnostica Inc en conformit avec les instructions NCCLS H21 A2 8 Les donneurs taient des hommes et des femmes de 20 65 ans ayant des valeurs normales du TP et du TCA Ces r sultats ne sont mentionn s qu titre indicatif Les r sultats peuvent
25. l DW confirmse suministran en dos tama os diferentes de viales a REF 815 incluye 10 viales que contienen cada uno la cantidad de reactivo necesaria para realizar 10 ensayos con la mayor a de los m todos automatizados b REF 815L incluye 10 viales que contienen cada uno la cantidad de reactivo necesaria para realizar 20 ensayos con la mayor a de los m todos automatizados OBTENCI N Y PREPARACI N DE MUESTRAS Las muestras de sangre se pueden extraer empleando jeringas o tubos siliconados de vacio Mezcle nueve partes de sangre con una parte de dihidrato del citrato tris dico 3 2 6 3 8 109mM 6 129 mM Si el valor hematocrito del paciente es superior al 55 los resultados del Dvvtest y del Dvvconfimpueden resultar imprecisos pudiendo ser necesario ajustar la proporci n entre la sangre y el anticoagulante Tras efectuar la mezcla centrifugue las muestras a un m nimo de 5 000 x g durante 10 minutos para eliminar los trombocitos El plasma pobre en trombocitos puede obtenerse tambi n mediante filtrado de plasma utilizando un filtro de 0 22 micrones Es indispensable que se empleen plasmas pobres en trombocitos lt 104 trombocitos uL especialmente si van a ser congelados antes de ser analizados de lo contrario podr an obtenerse resultados inferiores que podr an ocultar la presencia de AL 5 Manteniendo el plasma obtenido entre 2 y 8 C puede ser analizado en el intervalo de las 4 horas siguientes Como alternativa el plasma
26. les plasmas de contr le utilis s dans ces tests doivent tre 1 810 825CEFSD ADI20070710 imp rativement pauvres en plaquettes lt 104 plaquettes pL plus particuli rement avant cong lation car une forte quantit de plaquettes r siduelles pourrait masquer la pr sence de LAS L limination des plaquettes peut tre r alis e soit par double centrifugation soit par filtration du plasma sur filtre de 0 22 um Les chantillons ainsi pr par s peuvent tre conserv s 2 8 C et doivent tre test s dans les 4 heures Les plasmas peuvent galement tre congel s rapidement 70 C et sont alors stables pendant 6 mois Les plasmas congel s doivent tre rapidement d congel s a 37 C avant utilisation et tre test s imm diatement ou dans les 2 heures suivantes s ils sont conserv s 2 8 C MATERIEL NECESSAIRE ET NON FOURNI LAtrol Plasma de contr le anormal et normal R f rences 816A ou 816N 8 Pipettes d livrant des volumes de 100 uL 5 0 mL Eau distill e ou d min ralis e PREPARATION DES REACTIFS ET STABILITE REMARQUE Le lyophilisat de Dwvconfima un aspect poudreux par contre le lyophilisat de Dvvtest peut avoir un aspect cristallin Reconstituer chaque flacon de r actif avec de l eau distill e ou d min ralis e conform ment aux instructions figurant sur l tiquette REF amp 10 as 85 aL Volume HO 2 0 mL 5 0 mL 1 0 mL 2 0 mL Bien m langer le r
27. materiale grundigt inden det s ttes til apparaturet Resultatet angives i sekunder koagulationstid Som kontrol anbefales LAtrol REF 816N normal som ber bruges ved udf rsel af DVVtest og DWconfirm Se fortolkningen ad resultaterne for determinationen af LA negativitet og LA positivitet Anvend helst en speciel slange for at mindske kontaminations risiko for denne reagens Glem ikke magnetomrore i reagensreservoirerne Udf r a rensning og eller en vaskning procedure efter brug af reagensen specielt for de instrumenter som ikke har speciel reagens slange for udf rsel andre koagulations eller kromogene pr ver Konsulter de respektive leverandgrers instrument manual for fuldsteendige maskinelle instrukser OBS Alle pr ver der er testet positive med DVVtest skal testes med DVVconfirm som har et overskud af fosfolipid for at man med nogen sikkerhed skal kunne diagnosticere LA KVALITETSKONTROL Bade normal og unormal LA kontrolplasma skal indg i hver analyse serie med et skift af personale eller skiftehold og for hver 40 prove Al kontrol plasma skal indeholde f rre end 10 trombocyter uL LAtrol LA Normal og Unormal kontrol plasma REF 816N og REF 816 A kan bruges som kvalitetskontrol V rdier bade for normal og unormal skal ligge indenfor de intervaller som laboratoriet selv har bestemt inden patient plasma analyseres REFERENCEOMRADE FOR NORMAL PLASMA Hvert laboratorium skal bestemme deres eget referenceomr de for DVVtest og DVVcon
28. melse af Lupus Antikoagulans LA i patient plasma Dwvconfimf anvendes til at bekr fte at LA forefindes i det plasma der er testet positivt i DVVTest Begge metoder er 1 trins koagulationstests som kan udf res manuelt eller med halv respektive helautomastiske metoder SAMVENFATNING Identifikationen af Lupus Antikoagulans LA i plasma er et diagnostisk stempel af det Antifosfolipide Syndrom APS som er klinisk karakteriseret ved arteriel venos trombose recidiv spontan tab af foster spontan abort trombocytopeni og eller neurologiske forstyrrelser LA kan ogsa induceres som et resultat af brugen af klorpromazin procainamid torazin og visse antibiotika 1952 beskrev Conley amp Hartmann som de forste tilstedeveerelsen af LA i patienter med Systemisk Lupus Erthymatosis SLE Det er nu anerkendt at LA findes oftere i patienter som ikke har SLE LA auto antistoffer er specifikt rettet mod en afart af fosforlipid bindende proteiner der inkluderer B2 glycoprotein B2GPI protrombin og annexin V som er komplekst bundet til forskellige anioniske fosfolipider f eks kardiolipiner fosfatidylinotisol og fosfatidylserin Lupus Antikoagulans er immunoglobuliner af IgG IgM of IgA isotyper som forl nger et eller flere af de in vitro fosfolipid afh ngige koagulations test f eks aktiveret delvis tromboplastin tid APTT opl st prothrombin tid APT Textarin tid eller dRVVT Det Internationale Forening for Trombose og Hemostase Det Videnskabelige U
29. n af en faktor mangel DWconfinmResuitat Hvis pr ven er testet positiv for DVV test s skal DVVConfirm testen udf res Resultaterne fra DVVconfirm kan rapporteres ved at bruge DVVTest DVVconfirm kvote eller normaliseret kvote 1 Kvoten DVVtest DVVconfirm sec ben vnes KVOT DVVtest DVVconfirm beregnes ved at dividere DVVtest tid sek med DVVconfirm tid sek som f lger DVVtest DVVconfirm Kvote DVVtest sek DVVConfirm sek DWest DWconfirm KVOTE skal v re bestemt for normal reference plasma En resulterende kvote af test plasma der er st rre end 2 standard afvigelser over laboratoriets normale reference niveau Dvv syDvvcorfinmKVOTE bekr fter en positiv LA test Hvis Dvv syDvvcorfirmkvote resultatet er indenfor normal reference middelv rdi s er pr ven LA negativ eller at andre afvigelser er tilstede 2 Normalkvoten beregnes som f lger Dvvist prave Dwvtest normal reference v rdi NORMALKVOTE Dwconfinm prave Dwvcorfinm normal reference v rdi Example Only Patient Dtest 58 9 seconds Patient DUVconfimri 32 2 seconds Mean Dwtest 35 8 seconds Mean DWeonfirm 32 8 seconds 58 9 35 8 1 64 NORMALKVOTE 1 67 32 2 32 8 0 98 Fortolkning af normaliseret kvote resultater NORMALKVOTE LA Status gt 20 Steerkt Positiv 15 20 Moderat Positive 1 2 1 5 Svagt Positive Testresultaterne kan rapporteres som enten v rende positiv eller negativ for LA eller ved atra
30. n la coagulaci n junto con un ensayo de confirmaci n que contenga una alta concentraci n de fosfol pidos American Diagnostica Inc ha desarrollado el Dvvtestcomo ensayo primario de screening para detectar AL y DW confinmcomo ensayo complementario de alto contenido en fosfol pidos para confirmar su diagn stico Tanto Dvvtest como DWconfirmhan sido especialmente formulados para reducir el efecto de la heparina a fin de maximizar la sensibilidad y la especificidad para diagnosticar AL 5 810 825CEFSDOADI20070710 PRINCIPIO DEL TEST El reactivo Dvvtest contiene Veneno de V bora Russell que activa directamente el factor X convirti ndolo en factor Xa en presencia de fosfol pidos y de calcio El factor Xa convierte la protrombina en trombina la cual convierte el fibrin geno en fibrina originado la formaci n de co gulos en el plasma Esta activaci n directa del factor X es independiente de los factores extrinsecos e intr nsecos en la cascada de coagulaci n por lo tanto no se ve afectada por ninguna deficiencia de los factores VIII IX XI y XII o de sus respectivos inhibidores El Dvvtest se considerar positivo cuando se determine una prolongaci n significativa del tiempo de coagulaci n fosfolipido dependiente gt 2 desviaciones est ndar por encima de la media normal del laboratorio Si existe sospecha de AL se recomienda realizar el Dvvtest en muestras con APTT normal puesto que la diluci n y el tipo de fosfol pidos que contiene
31. ndern vns Kriterie for Lupus Antikoagulans og Fosfolipid afheengige antistoffer har anbefalet at LA b r diagnosticeres ved at anvende koagulationsbaserede screening tests og en bekr ftende test som indeholder en h j fosfolipid koncentration American Diagnostica Inc har udviklet DVVTest som et prim rt screening diagnostisk test for LA og DVVconfirm som et ledsagende h j fosfolipid indholdende test til at bekr fte LA diagnosen DVVTest og DVVconfirm er specielt blandet til at reducere heparin effekten for at maksimere sensitiviteten og specificiteten af LA diagnosticering TESTPRINCIP DWTest reagens indeholder Russell s Viper Venom som direkte aktiverer Factor X til Factor Xa i n rv r af fosfolipider og calcium Factor Xa kl ver protrombin til trombin som konverterer fibrinogen til fibrin som s leder hen pa en m lbar koagulatinsformation i plasma Denne direkte aktivering af Factor Xa forgrener Contact og Intrinsic baner i koagulationskaskader og ekskluderer derved indblanding af fejl fra Factor VIII IX XI og XII eller deres respektive inhibitorer En positiv DVVTest er indikeret ved en m rkbar forl ngelse af det fosfolipid afh ngige koagulationstid gt 2 standard afvigelser over laboratoriets normal reference Hvis patienten er mist nkt for at have LA kan DVVtesten ogs benyttes pa pr ver med en normal APTT fordi opl sningen og typen af fosfolipider der er indeholdt i DVVtest reagensen for ger testens LA sensitivitet og specifici
32. ngeladas Tanto para determinar los rangos de referencia como para realizar los tests de rutina se deber an utilizar o bien nicamente plasmas frescos o bien s lo plasmas previamente congelados Cuando se cambie el lote de reactivos o el analizador y si esto no procede una vez al a o como m nimo se debe establecer un nuevo rango normal de referencia Obtenga los datos a lo largo de varios d as para determinar tambi n la variaci n entre diversas series de ensayos variaci n inter ensayo INTERPRETACI N E INFORIVE DE LOS RESULTADOS V ase el diagrama de confirmaci n de AL Resultados del DWtest Si el plasma del paciente arroja un resultado situado dentro del rango normal establecido por el laboratorio para el Dvvtest media 2 desviaciones est ndar el test para AL es negativo Si el resultado del Dvvtestes superior al rango normal el test es positivo para AL NOTA Un Dwwestpositivo indica o bien la presencia de AL o bien alguna deficiencia de factor II V o X Si el Dweestresulta positivo la presencia de AL debe ser confirmada realizando nuevamente el ensayo con el DWconfirmpara obtener un RATIO DwteestDWWconfimm v ase abajo El ensayo DWvcorfimdebe ser realizado con la misma muestra de paciente y el mismo dia que el Dvvtest Las posibles deficiencias de factores se determinar n mediante pruebas de mezclas Resultados del DVWconfinm Si una muestra ha resultado ser positiva con el Dvvtest proceda a realizar el ensayo DWconfirm
33. olverlo a utilizar para otro ensayo de coagulaci n o ensayo cromog nico Para los ajustes precisos del aparato v ase el Manual de instrucciones que suministra su fabricante Nota Toda muestra que resulte positiva al realizar el ensayo DVVtest debe ser nuevamente testado utilizando Dwvconfinm CONTROL DE CALIDAD Para cada serie de ensayos se debe realizar un control normal y un control anormal tambi n se llevar n a cabo en el caso de cambio de personal o de turno as como cada 40 muestras Los plasmas de control deben ser pobres en trombocitos lt 104 trombocitos uL Los plasmas de control LAtrol AL Normal y Anormal REF 816N y 816A pueden ser utilizados para controles de calidad Antes de analizar las muestras de los pacientes los plasmas de control de AL normal y anormal deben haber arrojado resultados comprendidos dentro de los rangos de control establecidos en el laboratorio 8 RANGO NORMAL DE REFERENCIA Cada laboratorio debe establecer su propio rango normal para el Dwvtest y el DWWconfim media 2 desviaciones est ndar Para ello se utilizar n un m nimo de 20 plasmas de donantes sanos aproximadamente el mismo n mero de hombres y mujeres adultos v ase VALORES PREVISTOS 8 Al establecer el rango normal de referencia maneje las muestras de plasma normal exactamente igual que las muestras por analizar Si nicamente se analizan muestras congeladas los rangos normales se establecer n exclusivamente con muestras normales co
34. onfirms heterogeneity among Lupus Anticoagulants Blood Coag Fibrinol 1990 x 259 266 Thiagarajan P Pengo V and Shapiro S S The use of the dilute Russell viper venom time for the diagnosis of lupus anticoagulants Blood 1986 ex 869 874 Collection transport and processing of blood specimens for coagulation testing and performance of coagulation assays Second Edition NCCLS Document H21 A2 December 1991 Vol 11 No 23 Brandt J T Q amp A CAP Today August 1992 Page 61 Available from American Diagnostica GmbH Kaplaneigasse 35 D 64319 Pfungstadt Germany or your local Distributor Passey R B Walking the straight and narrow on quality control mo 1993 2 39 43 Data on file American Diagnostica Inc Stamford Connecticut 06902 810 825CEFSDOADI20070710
35. ositivos negativos para el Anticoagulante L pico o bien mediante indicaci n del RATIO DvvtesyDvv confirmo el RATIO NORMALIZADO Si se expresan los resultados en ratios tambi n debe indicarse el valor correspondiente al rango de referencia VALORES PREVISTOS Rangos normales de referencia 2 desviaciones est ndar 2 LIMITACIONES DEL PROCEDIMENTO No analice muestras hemolizadas lip micas o ict ricas Las muestras con sospecha de deficiencia de factores II V o X deben ser analizadas realizando pruebas de mezclas Las muestras con sospecha de contener inhibidores de los factores II V o X pueden arrojar falsos resultados positivos Si el Dest se realiza con plasmas que contengan altas concentraciones de factor VIII gt 200 el reactivo puede no llegar a identificar la presencia de AL arrojando un falso negativo 2 Dwtest y DWconfimn contienen agentes que neutralizan hasta 1 0 U mL de heparina Los plasmas que contienen una concentraci n de heparina superior a 1 0 U mL pueden arrojar resultados elevados si son analizados con estos tests Algunas heparinas de bajo peso molecular LMWH pueden interferir con el Dvvtest Ciertos estudios han mostrado que al adici n de 2 0 unidades mL de Fragmin inyecci n de dalteparina s dica al plasma no interfiere en los resultados del ensayo En plasmas a los que se les ha a adido Lovenox inyecci n de enoxaparina s dica en concentraciones superiores a las 0 25 uni
36. our le DWwconfim 4 Sp cificit Les r actifs du Dvvtestet du Dvvconfirmont t test s sur des plasmas normaux et anormaux ECHANTILLON DE PLASMA 2 DMtest DIWconfirmpositifs Plasma avec Lupus anticoagulant 100 17 17 Plasmas noma 2 1 2 96 Pl nes h parin s 0 0 2 Plasmes D ficients en facteurs 0 0 8 Plasma avec inhibiteur du facteur Vill 0 0 2 REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES 1 Harris E N Asherson R A and Hughes G R V Antiphospholipid antibodies autoantibodies with a difference Ann Revs Med 1988 3 261 271 2 Conley C L and Hartmann R C A hemorrhagic disorder caused by a circulating anticoagulant in patients with disseminated lupus erythematosus J Clin Invest 1952 3x 621 622 3 Triplett D A Brandt J T and Maas R L The laboratory heterogeneity of lupus anticoagulants Arch Path Lab Med 1985 109 946 951 4 Thiagarajan P Shapiro S S and DeMarco L Monoclonal immunoglobulin M lambda coagulation inhibitor with phospholipid specificity Mechanism of a lupus anticoagulant J Clin Invest 1980 amp 397 405 5 Brandt J T Triplett D A Alving B and Scharrer Criteria for the diagnosis of lupus anticoagulants an update on behalf of the Subcommittee on Lupus Anticoagulants Antiphospholipid Antibodies of the ISTH Throntp Haem 1995 74 1597 1603 6 Exner T Papadopoulos G and Koutts J Use of a simplified dilute
37. pportere DVVtest DVVconfirm kvote eller normaliseret kvote Ved rapportering af kvote resultater skal v rdien for referenceomr det ogs rapporteres FORVENTEDE V RDIER Nomi Reference Onr de 2SD INSTRUMENT MLA 1000C sra ACL 300 Dest sek 28 45 29 51 28 47 DWWconfirm sek 30 40 21 46 28 40 DMestDM amp onfirmkvote 0 77 1 21 0 95 1 47 0 83 1 35 n 21 25 20 Reference omrader var generet af AMDI i overensstemmelse med NCCLS Dokument H21 A2 Donorer der har deltaget har bade v ret m nd og kvinder i forskellige aldre og have normale PT og APPT v rdier Disse resultater er kun vejledende Resultater vil altid variere fra et laboratorium til et andet og ethvert test omrade ma selv bestemme deres normal reference omrade for alle instrumenter og metoder der anvendes LA Decision How Chart Misteenkt LA Negativ LS pe Latte spore Blander studier for inhibitorer Positiv LA ubekr ftet AA A gt LA bekr ftet DVVtest DVVconfirm kvote DVVtest DVVconfirm kvote Eller Normaliseret kvote Negativ Eller Normaliseret kvote Positiv ME TODEBEGR ENSNINGER Undga at teste heemolyserede lipemiske eller icteriske plasmer Prover der er misteenkt for mangler af Factor Il V eller X bor testes ved brug af blandede studier Pr ver der er mist nkt for indhold af Factor 11 V eller X inhibitorer kan give falske positive resultater Hvis DVVtest er anvendt pa plasma ind
38. ratoire doit tablir sa propre zone de r f rence valeur moyenne 2 E T pour les tests Dvvtest et DWconfirm Un minimum de 20 donneurs sains hommes et femmes repr sentatifs de l ge adulte doit tre utilis pour d finir cette zone voir VALEURS ATTENDUES 3 Les plasmas normaux doivent tre valu s dans les m mes conditions que les plasmas tester frais ou congel s Si uniquement des plasmas congel s sont utilis s la zone de r f rence doit tre tablie partir de plasmas congel s Il est d conseill de tester des populations mixtes de plasmas provenant la fois d chantillons frais et congel s pour d terminer les zones de r f rence ou r aliser des tests de routine II est conseill d tablir une nouvelle zone de r f rence normale au minimum une fois par an chaque changement de lot de r actif ou d instruments Afin de d terminer les variations journali res analyser les donn es recueillies sur plusieurs jours INTERPR TATION ET RENDU DES R SULTATS Voir arbre d cisionnel pour la recherche du LA Interpr tation du DWtest Dans la mesure o la dur e du Dvvtest de l chantillon des plasma est l int rieur de la plage de r f rence normale tablie par le laboratoire moyenne 2 S D le test est r put n gatif au LA Si la dur e du Dwv st de l chantillon de plasma est sup rieure 2 S D au dessus de la moyenne de la plage normale de r f rence le test est positifau LA REMARQUE Un
39. tet DVVconfirm er det h je fosfolipid der indeholder koagulations analyse der er brugt i Konjunktion med DVVtest til at bekr fte tilstedeveerelsen af LA i plasma DVVconfirm er blandet med Russell s Viper Venom og en hgj koncentration af fosfolipider Koagulationstiden for plasma der indeholder LA burde veere meerkbart kortere med DVVconfirm ved sammenligning med DWtest Tilstedev relsen af LA i plasmapraver er bekr ftet nar forholdet mellem DVVtest koagulationstid og DVVconfirm koagulationstid er starre end malomrade for laboratoriets normale reference DVVTest DVVconfirm RATIO normalforhold 2 S D REAGENSER DVVtest og DVVconfirm reagenserne er frysetorrede og foreligger som optimerede blandinger af Russell s Viper Venom kalcium og fosfolipid samt visse inerte og holdbarhedssagende tils tnings stoffer Uabnede flasker som opbevares ved 2 8 C er holdbare til udlabsdatoen som er markeret p etiketten DWtest er pakket i 2 st rrelser REF 810 indeholder 10 vials et enkelt vial indeholder reagens for 20 pr ver som udf rt ved de mest automatiserede metoder REF825 indeholder 10 vials hver enkelt vial indeholder reagens nok til 50 prover som er udf rt ved de mest automatiserede metoder DVVconfirm er pakket i 2 st rrelser REF 815 indeholder 10 vials et enkelt vial indeholder reagens til 10 prover som udf rt ved de mest automatiserede metoder REF815L indeholder 10 vials hver enkelt vial indeholder reagens nok til 20 pr ver som
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