Bouillon de FRASER
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1. Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr2. 115 BK133 2 30 C l abri de la lumi re Les dates de p remption sont mentionn es sur les tiquettes Milieu de base pr par partir de la r f rence BK115 15 jours 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif Milieu complet pr par en tubes partir de la r f r nce BK115 8 jours 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif Milieu de base pr par partir de la r f rence BK133 6 mois 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif Milieu complet pr par en tubes partir de la r f rence BK133 8 jours 2 8 C l abri de la lumi re titre indicatif Suppl ment s lectif pour bouillon de Fraser pour BK133 Solution st rile de citrate ferrique ammoniacal 5 __Stocker entre 2 et 8 C l abri de la lumi re Les dates de p remption sont mentionn es sur les tiquettes Milieu pr t l emploi en tubes Stocker entre 2 et 8 C l abri de la lumi re La date de p remption est mentionn e sur l tiquette 3 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr PRESENTATION Code Milieu pr t l emploi en tubes Coffret de 50 tubes de 10 mL BM01308 Milieu d shydrat FRASER base sans citrate de fer Ill ammoniacal Flacon de 500 g BK115HA
3. BER W H 1988 Rapid detection of Listeria spp in food and environmental samples by esculin hydrolysis Journal of Food Protection 51 762 765 NF EN ISO 11290 1 V 08 028 1 F vrier 1997 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche et le d nombrement de Listeria monocytogenes Partie 1 M thode de recherche XP CEN ISO TS 11133 2 V 08 104 2 Janvier 2004 Microbiologie des aliments Guide pour la pr paration et la production des milieux de culture Partie 2 Guide g n ral pour les essais de performance des milieux de culture NF EN ISO 11290 1 A1 V 08 028 1 A1 F vrier 2005 Microbiologie des aliments M thode horizontale pour la recherche et le d nombrement de Listeria monocytogenes Partie 1 M thode de recherche Amendement 1 Modification des milieux d isolement de la recherche de l h molyse et introduction de donn es de fid lit COMPASS est une marque de SOLABIA S A S Les mentions port es sur l tiquette sont pr dominantes sur les formules ou les instructions d crites dans ce document Les informations et les sp cifications contenues dans cette fiche technique ont t tablies la date du 2009 02 10 Elles sont susceptibles d tre modifi es tout moment sans pr avis Code document BK115 F 2003 04 11 5 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33
4. Bouillon de FRASER DOMAINE D UTILISATION Le bouillon de Fraser est utilis pour l enrichissement s lectif et diff rentiel bouillon d enrichissement secondaire de Listeria monocytogenes dans le lait les produits laitiers et les autres produits alimentaires HISTORIQUE Le milieu tudi par Fraser et al en 1988 repr sente une modification de la formulation de Donnelly et Baigent La composition de base identique celle du bouillon UVM a t modifi e par adjonction de chlorure de lithium comme agent s lectif et de citrate ferrique ammoniacal afin de visualiser les cultures hydrolysant l esculine par l apparition d un noircissement dans le milieu PRINCIPES La seule diff rence de concentration en acide nalidixique et en acriflavine des bouillons de Fraser demi et de Fraser ainsi que les deux tapes d enrichissement permettent une r cup ration tr s satisfaisante de Listeria monocytogenes Le bouillon de Fraser permet d effectuer l tape d enrichissement secondaire La polypeptone l extrait de levure et l extrait de viande apportent les l ments nutritifs n cessaires la croissance des Listeria La forte teneur en chlorure de sodium permet d accro tre la s lectivit du milieu Les phosphates agissent comme substances tampons pour le maintien du pH L esculine est hydrolys e par les Listeria en glucose et en escul tine Ce dernier compos forme un complexe noir en pr sence des ions ferriques
5. Solution st rile de citrate ferrique ammoniacal 5 Coffret de 10 flacons de 90 mL BS05908 Sachet de 7 tubes de 10 mL BS06208 Milieu d shydrat de FRASER base II sans citrate de fer IIl ammoniacal ni acide nalidixique ni acriflavine Flacon de 500 g BK133HA F t de 5 kg BK133GC Suppl ment s lectif pour bouillon de FRASER pour BK133 Coffret de 10 flacons qsp 500 mL BS03108 SUPPORT PHOTO R f rence produit BK115HA BS05908 ou BS06208 BK133HA GC BS03108 BS05908 ou BS06208 ou BM01308 Utilisation Enrichissement s lectif et diff rentiel de Listeria monocytogenes dans les aliments Ss pane Echantillon positif T moin control pr somptif Listeria monocytogenes Bouillon de FRASER R f BM01308 Incubation 24 heures 37 C Caract ristiques Le noircissement des tubes droite indique de fa on pr somptive la pr sence de Listeria monocytogenes r duction de l esculine cependant une confirmation reste toujours obligatoire 4 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr REFERENCES BIBLIOGRAPHIQUES DONNELLY C W and BAIGENT G J 1986 Method for flow cytometric detection of Listeria monocytogenes in milk Applied and Environmental Microbiology 52 689 695 FRASER J A and SPER
6. endant 24 et 48 heures 37 C NOTA Dans le cas o le bouillon de Fraser base ll BK133 est utilis ajouter st rilement 0 1 mL de suppl ment s lectif reconstitu BS031 chaque tube de milieu de base LECTURE INTERPRETATION Le noircissement des cultures indique la pr somption de pr sence pour les Listeria Certaines souches de microorganismes hydrolysant l esculine ent rocoques peuvent entra ner le noircissement du milieu A partir de toutes les cultures positives avec ou sans noircissement effectuer un isolement au moyen d une anse boucl e sur un ou des milieu x s lectif s g lose Oxford BK110 BS003 ou BM019 g lose PALCAM BK145 BS004 BS049 ou BM020 COMPASS Listeria Agar BM123 ou BM124 Rep rer les colonies suspectes et les soumettre aux tests biochimiques d identification NOTA Une dur e minimale de 24 heures est n cessaire pour permettre la visualisation de la coloration noire FORMULE TYPE du milieu complet pouvant tre ajust e de fa on obtenir des performances optimales Pour 1 litre de milieu POlypept n e ee tem dim den 10 00 g Extrait autolytique de levure 5 00 g Extrait de viande aaeeeeeeeeeeeeeeeee enerne renner nern nn rn nnn nnne nnan n nanan nennen 5 00 g Chlorure de SOIN du nt 20 00 g Phosphate disodique anhydre 9 60 g Ph
7. osphate monopotassique 1 35 g SCUIINE sine ini e a E A E E E A E EERE 1 00 g Chlorure de lithium 3 00 g Acide nalidixique eeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeeikeertttesesrtrerrnnsnssrrennnnnnnnnt 20 mg Acriflavine chlorhydrate 25 mg Citrate de fer Ill ammoniacal 0 50 g pH du milieu pr t l emploi 25 C 7 2 0 2 2 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr CONTR LE QUALITE Milieux d shydrat s poudre jaun tre fluide et homog ne Milieux pr par s complets solution ambre jaune reflet bleut R ponse culturale typique apr s 48 heures d incubation 37 C puis subculture sur g lose Oxford Microorganismes Croissance sur g lose Oxford CIP 59 53 ATCCS 29212 ATCC 25922 Listeria monocytogenes Enterococcus faecalis Escherichia coli gt 10 colonies caract ristiques CIP 78 31 ATCC 29212 ATCC 8739 Listeria monocytogenes Enterococcus faecalis Escherichia coli gt 10 colonies caract ristiques ATCC 29212 ATCC 25922 Enterococcus faecalis Escherichia coli inhib e inhib e STOCKAGE CONSERVATION Milieux de base d shydrat s BK
8. qui apport s extemporan ment par le citrate de fer favorisent galement la croissance des Listeria Le chlorure de lithium inhibe la plupart des ent rocoques susceptibles d hydrolyser l esculine L acide nalidixique bloque la r plication de l ADN des germes sensibles cet agent antibact rien _ L acriflavine supprime la croissance de la microflore secondaire Gram positif PREPARATION Mettre en solution 55 0 g de milieu de base d shydrat BK115 ou de milieu de base d shydrat du bouillon de Fraser base ll BK133 dans 1 litre d eau distill e ou d min ralis e Agjiter lentement jusqu dissolution compl te R partir en tubes raison de 10 mL par tube __ St riliser l autoclave 121 C pendant 15 minutes 1 5 Biokar Diagnostics Rue des Quarante Mines ZAC de Ther Allonne B P 10245 F60002 Beauvais Cedex France T l 33 0 3 44 14 33 33 Fax 33 0 3 44 14 33 34 www biokar diagnostics fr MODE D EMPLOI Refroidir jusqu 25 C Dans chaque tube de bouillon Fraser de base BK115 ajouter aseptiquement 0 1 mL d une solution st rile de citrate ferrique ammoniacal 5 BS059 ou BS062 Dans les tubes ainsi pr par s ou les tubes de bouillon pr t l emploi BM013 transf rer 0 1 mL de culture obtenue pr alablement sur un bouillon d enrichissement primaire bouillon de Fraser demi Homog n iser parfaitement __Incuber p
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