Hoefer SE600/SE660
Contents
1. Schaegger H and Von Jagow G Tricine sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis for the separation of proteins in the range from 1 to 100 kDa Anal Biochem 166 368 379 1987 Weber K and Osborn M The reliability of molecular weight determinators by dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis J Biol Chem 224 4406 4412 1969 Electrophor se bidimensionnelle Adams L D and Gallagher S R Two Dimensional Gel Electrophoresis Using the O Farrell System Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A et al eds OSC pp 10 4 1 10 4 13 1992 Anderson N G Anderson N L and Tollaksen S L Proteins of human urine I Concentration and analysis by two dimensional electrophoresis Clin Chem Jul 25 7 1199 2210 1979 Anderson Leigh and Anderson Norman G High resolution two dimensional electrophoresis of human plasma proteins Proc Natl Acad Sci USA 74 5421 5425 1977 Anderson L Two Dimensional Electrophoresis Operation of the ISO DALT System Second Edition Large Scale Biology Press 1991 Bravo R Schafer R Willecke K MacDonald Bravo H Fey S J and Celis J E More than one third of the discernible mouse polypeptides are not expressed in a Chinese hamster mouse embryo fibroblast hybrid that retains all mouse chromosomes Proc Natl Acad Sci USA Apr 79 7 2281 2285 1982 Hurkman W J and Tanaka C K Solubilization of Pla2. et de polym risation incompl te Pour augmenter ou diminuer le taux de migration d ajuster I Tension ou de courant de 25 50 Degas I empilement gel solution et viter de pi ger des bulles d air sous les dents du peigne Interface irr guli re entre l empilement et en cours d ex cution gels Superposez le gel avec de l eau en cours d ex cution butanol satur avant polym risation commence pour viter la formation d une surface du gel in gale La pr paration des chantillons Dialyser ou dessaler l chantillon e p29 probleme cause possible remede chantillon color recueille Pres du front Gel de concentration Les mol cules sont pas suffisamment limit par la taille des de tampon pores de gel de r solution augmenter le T D gradation Les prot ines peuvent tre d grad es par des prot ases endog nes utiliser des inhibiteurs de prot ase au cours de la premiere tape d isolement Pr s du sommet Gel de concentration La taille des pores de gel est trop petit diminuer la T de du gel lorsque la r solution ou l empilage de gel le front de la m moire tampon Pr cipitation La prot ine a pr cipit Chauffer l chantillon a une a atteint le fond temp rature inf rieure 70 C ou moins pendant 1 2 min A la fois haut et Gel de concentration La plage de poids mol culaire de l chantillon n cessite un en bas du gel gradient de concentration d acrylamide po
3. et la quantit d chantillon pr vu dans chaque bande Dans un syst me tampon continu l echantillon de prot ine doit tre relativement concentr parce qu aucun gel d empilement est utilis Dans un syst me tampon discontinu la zone dans laquelle chaque esp ce mol culaire migre est aiguis e par le gel d empilement de sorte de P chantillon n a pas besoin d tre aussi concentr s o Pr parer le puits Retirer le peigne en secouant d licatement un c t a c t et puis en le soulevant vers le haut pour viter d endommager les parois du puits Rincer soigneusement chaque puits avec de l eau distill e pour enlever l acrylamide non polym ris e et puis les goutter en inversant le sandwich de gel ou roulette Remplir chaque puits avec du tampon d lectrophorese Wen Y Remarque Une fois les chantillons sont dans les puits prendre soin de ne pas branler les sandwichs de sorte que les chantillons ne sont pas renvers es ou m lang Pr parer l chantillon Augmenter la densit chantillon de liquide avec 10 de glyc rol ou de saccharose Ajouter un colorant de suivi telles que le rouge de ph nol bleu de bromoph nol ou pyronine Y Pour les gels de prot ines de la SDD utilisez un tampon de traitement 2X pour d naturer les deux chantillons liquides et secs dans un tube a essai Pour des solutions de prot ines liquides ajouter un volume gal de tampon 2X Pour
4. sandwiches de doubler le nombre de gels qui peuvent tre exprim es et ex cuter Monter un club sandwich de la m me mani re comme un sandwich ordinaire sauf avant de placer la plaque de verre haut mettre la plaque de division et un second jeu d entretoises sur la pile Placez l encoche de sorte qu il sera au sommet des gels ll est essentiel que les entretoises et les plaques sont parfaitement align s afin de cr er un joint d tanch it Pour 24 cm de long des plaques de position de la pince 8 cm le long du c t a la partie inf rieure du sandwich le plus loign de l encoche Q Retirer le sandwich et inspecter le fond pour s assurer que les bords sont align s chasse afin d assurer une tanch it totale R gler si n cessaire Facultatif Appliquez une fine couche de gel compos Seal seulement sur les surfaces de coin inf rieures cr es par les entretoises et les plaques si vos sandwichs continuent fuir apr s plusieurs tentatives d alignement Ween y Remarque Lorsque vous tournez Placer le joint stratifi dans le berceau de coul e voir figure 5 avec le c t mousse vers le bas Placez le dispositif de serrage dans le berceau de coul e la vis du c t tourn vers l ext rieur Pour 24 cm plaques placer le sandwich de telle sorte que l attache est plus en haut les cames il est plus facile de Ins rez une came dans le trou de chaque c t du garder le lanceur quil
5. 2 7 SE511 28 1 0 28 1 50 2 7 SE511 28 1 5 Peigne profondeur de 15 mm tous les autres de 25 mm Preparative peignes Ces peignes sont de 25 mm de profondeur r glable a 10 ou 15 mm nombre de puits paisseur largeur mm prep ref mm prep ref quantit code 1 1 0 75 121 6 SE511 R 75 1 1 1 00 121 6 SE511 R 1 0 1 1 1 50 121 6 SE511 R 1 5 1 2 0 75 113 6 SE511 DR 75 1 2 1 00 113 6 SE511 DR 1 0 1 2 1 50 113 6 SE511 DR 1 5 Cr pez r glable SE511 BKA N cessaire pour convertir n importe quel peigne 25 mm de profondeur a 10 ou 15 mm de profondeur e p39 Entretoises paisseur mm longueur cm largeur cm quantite code nombre 1 00 16 1 2 SE6118 2 1 0 1 50 16 1 2 SE6118 2 1 5 0 75 16 2 2 SE6119 2 75 1 00 16 2 2 SE6119 2 1 0 1 50 16 2 2 SE6119 2 1 5 0 75 24 2 2 SE6619 2 75 1 00 24 2 2 SE6619 2 1 0 1 50 24 2 2 SE6619 2 1 5 Produits associ s Hoefer SE100 Plate Mate lavage et l unit de stockage 1 SE100 QuickFit connecteurs femelle 3 8 2 QF3 8 QuickFit connecteurs m le 3 8 QFX3 8 e p40 Hoefer Inc 84 October Hill Road Holliston MA 01746 Sans frais 1 800 227 4750 T l phone 1 508 893 8999 Fax 1 508 893 0176 E mail support hoeferinc com Web www hoeferinc com Hoefer est une marque d pos e de Hoefer Inc Coomassie est une marque de ICI plc 2012 Hoefer Inc Tous droits r serv s Imprim dans le USA Hoefer
6. couvrir la plupart des sandwich de gel pour permettre la dissipation de la chaleur mais doit permettre au moins 2 cm de d gagement en dessous de la chambre tampon sup rieure sup rieure WM I au niveau chambre tampon H de niveau inf rieur chambre tampon Oooo 01 9 Monter l ensemble tampon chambre sup rieure dans la chambre inferieure du tampon Utilisez une main ferme pour viter de perturber les chantillons Saisir assemblage dans le support de coul e par la chambre tampon sup rieur et l abaissez dans la chambre inferieure Inspecter l installation et v rifier les niveaux de m moire tampon Chambre tampon sup rieur UBC L lectrode le long de la nervure chambre sup rieure doit tre immerg e a environ 1 cm Ce niveau requiert de 450 a 600 ml de tampon juste assez pour couvrir les c tes de la chambre sup rieure mais pas assez lev e pour communiquer avec la fiche banane Ne remplissez pas au dessus de UBC de remplissage MAX en ligne Chambre de Basse tampon LBC Le niveau inf rieur de tampon d pend des conditions de roulage et le systeme tampon tel que d crit dans la Figure 9 Placez le couvercle de s curit sur l appareil Branchez les fils a code couleur dans les prises d un bloc d alimentation approuv Branchez le cordon rouge dans la prise rouge de sorti
7. de tampon remplir ne d passe pas le sommet des nervures en plastique Echangeur de chaleur D changeur de chaleur doit tre install pour chaque utilisation car il abrite l lectrode inf rieure anode qui s tend le long de la partie inf rieure du cadre Lorsqu il est connect un bain circulateur P changeur de chaleur r gule la temp rature du tampon dans la chambre inf rieure Du liquide de refroidissement passe a travers les tubes de verre qui sont garantis avec des ceillets en caoutchouc de silicone Les ports d changeurs de chaleur des connecteurs sont de 13 mm od L changeur de chaleur est class avec un maximum de 0 8 atmosph res au dessus ambiante 12 psig Connectez uniquement a des sources de refroidissement avec la pression r gul e Ne pas se connecter au robinet d eau Couvercle de s curit La fiche banane sur P changeur de chaleur se connecte au fil rouge et la fiche de la chambre tampon sup rieure se connecte dans le fil noir Le 4 mm envelopp code couleur prise de prospects en code couleur prises dans Palimentation Engager broches de verrouillage avant de baisser les connexions d lectrodes sur des fiches bananes Toujours installer le couvercle de s curit avant utilisation Les plaques de verre Toutes les plaques sont 18 cm de large mais chaque modele peut accueillir une longueur de plaque sp cifique Le SE600 prend 16 cm des plaques et le SE660 prend 24 cm de
8. et placez l appareil sur un agitateur magn tique Remplir la chambre basse avec un maximum de 4 litres de tampon e Abaisser l changeur de chaleur dans la chambre inf rieure mise en place des ports dans les encoches de la jante L changeur de chaleur doit tre en place pour toutes les courses parce que lectrode inf rieure est int gr dans l changeur de chaleur Si aucun systeme de refroidissement est n cessaire passez a l tape 3 En option Connectez l changeur de chaleur a un circulateur thermostatique Colliers coulissants quatre au total sur chaque extr mit de deux longueurs de 10 a 12 mm id Tube de vinyle ou de silicone Fixer une extr mit de chaque longueur de tuyau a un port changeur de chaleur Fixer les extr mit s libres de chaque longueur de tuyau a des ports de bain de circulateur l un a l entr e et autre a la prise S curiser les connexions avec les colliers de serrage Utilisez le tableau Figure 8 page 20 pour estimer un point de d part pour le r glage de la temp rature circulateur du bain Ajustez au besoin pour des variables telles que la temp rature ambiante des changements dans la puissance de sortie et l efficacit bain Si le contr le pr cis de la temp rature est critique mesurer la temp rature et ajuster si n cessaire En option pr refroidissement la m moire tampon e p19 Fig 8 Reglage de la temperature approximative circulateur du b
9. feuilles de papier cir les Spacer Mate gabarit d alignement et les bouchons de remplissage Ordre des peignes et des entretoises s par ment e p37 produit quantite code Pinces et cames Pinces et Cam Kit quatre pinces 16 cm et 8 cames noirs 1 SE6003UK Vis de rechange pour les pinces 12 SE6003U 2 Cames noirs pour les pinces avec des trous de came SE6005L Pinces assembl es 16 cm SE6003U Pinces assembl es 8 cm SE6403U Les plaques de verre 18 x 16 cm Les plaques de verre SE6102 Les plaques de verre fluorescence a faible SE6102LF Plaque de verre diviseur de club sandwich entaill SE6102D 18 x 24 cm Les plaques de verre 2 SE6602 Plaque de verre diviseur de club sandwich entaill SE6602D choisissez l entretoise joint d tanch it SE6009 A N Q LA e p38 appropri e et longueur de la plaque de votre appareil pince universelle SE6003U lanceur de base SE6015 came Peignes nombre paisseur largeur de puits mm mm quantit code 10 0 75 8 3 SE511 10 75 10 1 00 8 3 SE511 10 1 0 10 1 50 8 3 SE511 10 1 5 12 0 75 7 6 SE511 12 75 12 1 00 7 6 SE511 12 1 0 12 1 50 7 6 SE511 12 1 5 15 0 75 5 7 SE511 15 75 15 1 00 5 7 SE511 15 1 0 15 1 50 5 7 SE511 15 1 5 20 0 75 4 1 SE511 20 75 20 1 00 4 1 SE511 20 1 0 20 1 50 4 1 SE511 20 1 5 28 0 75 2 7 SE511 28 75 28 1 00
10. in un modo specificato da Hoefer Inc la protezione fornito dall apparecchiatura potrebbe essere indebolita Questo strumento disegnato per l uso di laboratorio interno solo Solo gli accessori e le parti hanno approvato o hanno fornito da Hoefer Inc potrebbe essere usato per operare per mantenere e per revisionare questo prodotto usa Solo un alimentatore che CE ha marcato o la sicurezza certificato da un nazionalmente riconosciuto testando il laboratorio Il coperchio di sicurezza deve essere nel luogo prima di collegare i piombi di alimentatore a un alimentatore Spegne tutto i controlli di alimentatore e disinserisce i piombi di potere prima di togliere il coperchio di sicurezza Circola solo l acqua o 50 50 glicole di acqua etilene attraverso lo scambiatore di calore se cos equipaggiato Non collegare lo scambiatore di calore a un rubinetto di acqua o qualunque fonte di refrigerante dove la pressione di acqua sregolata Non introduce mai l antigelo o qualunque solvente organico in qualunque parte dello strumento solventi organici causeranno il danno irreparabile all unit Non opera con le temperature di tampone al di sopra del massimo ha specificato le descrizioni tecniche Il surriscaldamento causer il danno irreparabile all unit Viktig Informasjon Norwegian Hvis dette utstyret blir brukt i en m te ikke spesifisert ved Hoefer Inc beskyttelsen som ha blitt git av utstyret kan bli svek
11. s cher les chantillons de prot ines ajouter des volumes gaux de tampon d chantillon 2X et de haute puret de l eau pour atteindre la concentration souhait e Chauffer le tube dans l eau bouillante pendant 90 secondes puis laisser refroidir a temp rature ambiante Echantillons trait s peuvent tre stock s a 40 a 80 C pour les courses futures Proteines membranaires de chaleur a 60 C pendant 20 minutes Conserver l chantillon utilise a 4 C Sous tend le chantillon dans les puits a l aide d une microseringue pointe fine ou d un gel de chargement pointe de pipette Tableau 2 Le volume d chantillon pour les tailles standard de peigne volume de I chantillon ul par une profondeur de 1 mm nombre paisseur de peigne mm de puits 0 75 1 0 1 5 10 6 2 8 3 12 4 12 5 8 Tal 11 5 15 4 3 5 7 8 6 20 3 1 4 1 6 2 28 2 1 2 7 4 1 1 1 ref prep 4 90 6 121 9 183 1 2 ref prep 4 85 6 112 9 171 e p17 Fig 7 Fixation des sandwichs de gel la chambre tampon sup rieur Si les fuites d assemblage le prendre un vier et partiellement lib rer les cames pour permettre tampon s couler hors de la chambre haute D monter v rifier l alignement de tous les composants en sandwich et ajuster si n cessaire A Retirer cames a partir des trous de came inf rieurs Placez la chambre sup rieure sur les sandwiches et ins rez ensuite les cames dans les tro
12. tampons Polym risation en gel incompl te Permettre un gel pour polym riser compl tement La pr paration des chantillons Conserver l chantillon sur la glace avant qu il ne soit d natur Dialyser ou dessaler l chantillon chantillons de chaleur dans le tampon d chantillon SDS pour pas plus de 1 2 min 100 C pour am liorer la dissociation des sous unit s Conservez le sur la glace apres le chauffage Ajustez le volume d chantillon ou de la concentration Ajouter plus de mercapto thanol ou le dithiothr itol v rifier traitement de l chantillon Ajouter inhibiteurs de la prot ase tels que PMSF si n cessaire pour pr venir la d gradation prot olytique de l chantillon Augmenter le glyc rol ou le saccharose pour augmenter la densit de l chantillon Conserver les chantillons congeler en portions aliquotes pour viter r p t e cong lation d cong lation Conserver 40 a 80 C e p31 Bibliographie General Gallagher S R and Smith J A Electrophoretic separation of proteins In Current Protocols in Molecular Biology Ausubel F A eds OSC 10 2 1 10 2 21 1991 Hames B D and Rickwood D Gel Electrophoresis of Proteins A Practical Approach Second edition City IRL Press 1990 Sambrook J and Russell D W Molecular Cloning A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Cold Spring Harbor NY 2001 Sasse J and Galla
13. une solution dilu e d un d tergent de laboratoire et bien rincer d abord avec de l eau puis avec de l eau distill e D ballage et Inventaire D ballez tous les paquets soigneusement et de comparer le contenu avec la liste de colisage en s assurant que tous les articles sont arriv s Si une pi ce est manquante contactez votre bureau de vente local Inspecter tous les composants pour les dommages qui ont eu lieu alors que l appareil tait en transit Si une partie quelconque semble tre endommag contactez imm diatement le transporteur Soyez s r de garder tous les mat riaux d emballage pour dommages et int r ts ou d utiliser si elle s av re n cessaire de retourner l appareil Chambre de Basse tampon La chambre inf rieure du tampon est transparent ce qui permet un suivi visuel des processus de l lectrophor se La chambre est chimiquement r sistant aux communes tampons lectrophor tiques mais pas des solvants organiques ou d acides forts ou alcalins Les temp ratures sup rieures 45 C peut provoquer la chambre de se d former Chambre tampon sup rieure La chambre tampon sup rieure est chimiquement r sistant tampons d lectrophor se communs mais pas des solvants organiques ou des acides forts ou alcalins D lectrode sup rieure cathode s tend le long de la nervure centrale et se termine la fiche banane La chambre sup rieure n cessite 0 5 0 8 litres
14. 0 vand ethylene glykol gennem varmeveksleren i s fald udrustet Forbind ikke varmeveksleren til en vandhane eller nogen kolemiddelkilde hvor vandtrykket er unregulated Introducerer Aldrig antifreeze eller noget organisk oplosningsmiddel ind i nogen del af instrumentet Organiske opl sningsmidler vil for rsage uboelig skade til enheden O pii Driver ikke med stadpudetemperaturer over maksimummet specificerede tekniske specifications Overheding vil forarsage uboelig skade til enheden Belangrijke Informatie Dutch Indien deze uitrusting in een manier wordt gebruikt die niet door Hoefer Inc is gespecificeerd de bescherming die door de uitrusting is verzorgd kan worden geschaad Dit instrument is voor binnenlaboratoriumgebruik enkel ontworpen Enkel onderdelen en delen keurden goed of leverden door Hoefer Inc kan voor het bedienen worden gebruikt handhavend en onderhouden van dit product gebruik Enkel een netvoeding die CE is markeerde of veiligheid die door een is gecertificeerd die nationaal is herkend testene laboratorium Het veiligneidsdeksel moet in plaats voor het verbinden van de netvoeding leidt tot een netvoeding zijn Doe alle netvoedingscontroles Uit en koppel los de machtleiding voor het verwijderen van het veiligheidsdeksel Circuleer enkel water of 50 50 water ethyleenglycol door de hitte exchanger zo ja uitrust Verbind de hitte exchanger naar een waterkraan of koelmiddelbron niet waar d
15. 600 2 SE660 2 2 ol e o o o o o o ol o o o ol lo o o O o o o o o o o o o lo ke 16 cm 24 cm SE600 SE660 Fig 4 Assembl amp e Club sandwich Pinces laterales pourra accueillir deux entretoises jusqu a 1 5 mm d paisseur des plaques de verre sur les c t s ext rieurs du sandwich plaque entretoises centrale crant e Remarque Ne pas utiliser de graisse de silicone ou de la vaseline pour sceller le sandwich Ces substances sont difficiles a enlever et finalement provoquer des artefacts e p10 Fixez le sandwich avec des pinces Faites glisser une pince a un moment le long des c t s sandwich Serrer une vis sur chaque pince mettre le sandwich a la verticale sur une surface plane et desserrer la vis pour aligner la pile Prenez grand soin dans l alignement pour assurer une tanch it Serrer toutes les vis Retirez le Spacer Mate Sandwiches longues exigent deux ensembles de serrage de chaque c t Lors de l assemblage 24 cm sandwichs aligner chaque extr mit s par ment C est d aligner une extr mit les doigts serrer les vis tourner le sandwich 180 et d aligner l autre extr mit Dans chaque cas permettre la pince coulisser vers le bas et aligner parfaitement avec la partie sup rieure ou inf rieure de bord des plaques de verre Club sandwich A 16 ou 24 cm de long plaque crant e diviseur centre 4 commander s par ment deux paires
16. Appliquer la solution proximit de l entretoise sur un c t du sandwich et lui permettre de s couler travers la surface nu Permettre au gel pour polym riser pendant un minimum de 1 h Pr paration de gel d empilement Verser le gel d empilement tout le sandwich est encore dans la machine de coul e du gel Empilement gel de r solution est optimale quand on le verse juste avant I lectrophorese Q Retirez le cache en rin ant le haut du gel plusieurs reprises avec de l eau distill e Inversez le lanceur de sorts goutter Pour assurer un contact continu entre la r solution et d empilage des gels enlever le liquide r siduel en tapant un coin avec un laboratoire essuyer 5 Calculer le volume de gel d empilement monom re solution Pr parer la solution de monom re d empilage gel il d sa rer et ajouter de catalyseur et initiateur Verser le gel d empilement sur le gel de r solution avec une pipette Pasteur jetable ou a un niveau d environ 2 mm a partir de la partie sup rieure de la plaque o Mettre en place un peigne avec un l ger angle dans le sandwich en prenant soin de ne pas emprisonner de l air sous les dents Pr voir un minimum de 1h pour le gel a polym riser e p13 Fig 6 Verser un gel de gradient Un embout de pipette peut tre utilise a la place d une canule si la solution de gel est delivr amp une vitesse qui maintient un courant
17. Du de l utilisateur Francais Hoefer SE600 SE660 Dual Standard Unit refroidie lectrophorese sur gel Hoefer m SE600 IM French Rev C0 06 12 r Table des matieres Information Importante A ji Dechets d equipements lectriques et lectroniques DEEE uunnnseennneeneneeennnnn vii Unit Fonction gel d lectrophorese et description 1 SP CITICALIONS HH een 2 D ballage et Inventaire oooocccoccccocccnnocncnonnnncnnnnos 4 Mode emplol uscar sa 8 Pr parer le sandwich de gel 8 Des gels d acrvlamide 12 Des gels de eradient 14 Pr paration de l chantillon et de chargement 16 D assemblage final 18 S paration de l chantillON ooooccooccnncccnncccnns 23 Entretien et maintenance A 26 Net 27 Bibliograp TE 32 Informations de commande 35 O pi Information Importante Francais Si cet quipement est utilis dans une mani re pas sp cifi par Hoefer Inc la protection fourni par l quipement pourrait tre diminu e Cet instrument est con u pour l usage de laboratoire int rieur seulement Seulement les accessoires et les parties ont approuv ou ont fourni par Hoefer Inc pourrait tre utilis pour fonctionner maintenir et entretenir ce produit utilise Seulement une alimentation qui est CET a marqu ou la s curit certifi par un nationalement reconnu essayant le laboratoire Le couvercle de s curit doit tre sa place avant co
18. E marcou ou seguranca registrada por um nacionalmente reconhecido testando laborat rio A tampa de seguranca deve estar em lugar antes de ligar o estoque de poder leva a um estoque de poder Desliga todos controlos de estoque de poder e desconecta os chumbos de poder antes de retirar a tampa de seguranca Circulam s gua ou 50 50 glicol de gua ethylene pelo exchanger de calor se for assim equiparam N o ligue o exchanger de calor a uma torneira de gua nem qualquer fonte de refrigerante onde a press o de gua n o regulado Nunca introduz anticongelante nem qualquer org nico solvente em qualquer parte do instrumento Org nico solvente causar agress o irrepar vel unidade N o opera com temperaturas de buffer acima do m ximo especificou especificac es t cnicas Superaquecer causar agress o irrepar vel a unidade pv Informaci n Importante Spanish Si este equipo es utilizado en una manera no especificado por Hoefer Inc la protecci n proporcionado por el equipo puede ser da ada Este instrumento es dise ado para el uso interior del laboratorio s lo S lo accesorios y partes aprobaron o suministraron por Hoefer Inc puede ser utilizado para operar para mantener y para atender a este producto S lo utiliza una alimentaci n que es CE marc o la seguridad certificada por un nacionalmente reconocido probando el laboratorio La tapa de la seguridad debe estar en el lug
19. ain R glez la temp rature du bain circulateur la mise inf rieure a la temp rature de fonctionnement d sir par le montant indiqu sur le graphique Ceci devrait tre v rifi a trois points e p20 0 1 gt S 2 a 2 v T Ss 3 O E E s 4 v gt EN E 5 2 6 7 0 10 20 30 40 50 60 r glage d alimentation W Exemple Ex cuter les parametres 200 V 0 05 A 50 mA 1 Calculer W si votre alimentation ne pas afficher directement le pouvoir W VxA 10 W 200 V x 0 05 A 2 Interpoler le nombre de degr s soustraire de la temp rature de fonctionnement d sir 10 W croise le graphique a environ 1 C Si la temp rature d sir e est 23 C r glez le bain pour 23 1 22 C Si la temp rature d sir e est 4 C r glez le bain 4 1 3 C Fig 9 Tampon niveaux de chambre Volumes approximatifs n cessaires SE600 4 5 liters SE660 7 0 liters e Basse tension fonctionne e Les syst mes utilisant le m me tampon dans les deux cavit s sup rieures et inf rieures Niveaux sup rieur et inf rieur de tampon de chambre sont gaux Volumes approximatifs n cessaires SE600 4 0 liters SE660 6 0 liters e haute tension fonctionne e La focalisation iso lectrique e Syst mes utilisant des tampons diff rents dans les chambres sup rieures et inf rieures Le niveau de tampon devrait
20. ar antes de conectar la alimentaci n lleva a una alimentaci n Apaga todos controles de alimentaci n y desconecta los plomos del poder antes de quitar la tapa de la seguridad Circula s lo agua o 50 50 glicol de agua etileno por el intercambiador de calor si se es el caso equiparon No conecte el intercambiador de calor a un toque de la agua ni cualquier fuente del l quido refrigerante donde la presi n del agua est libre Nunca introduce anticongelante ni alg n solvente org nico en cualquier parte del instrumento Los solventes org nicos causar n da o irreparable a la unidad No opera con temperaturas de b fer encima del m ximo especific especificaciones t cnicas Recalentar causar da o irreparable a la unidad Viktig Information Swedish om denna utrustning anv nds i ett s tt som inte har specificeras av Hoefer Inc skyddet tillhandah ll vid utrustningen kan skadas Detta instrument formges f r inomhuslaboratorium anv ndning bara Bara medhj lpare och delar godk nde eller levererade vid Hoefer Inc kan anv ndas f r fungera underh lla och servicing denna produkt anv nder bara en kraft tillg ng som ar CE markerade eller s kerhet intygade vid en nationellt erk nd testande laboratorium S kerheten locket m ste vara p platsen f re koppla kraften tillg ngen blyen till en kraft tillg ng V nder sig alla kraft tillg ng kontroller av och kopplar bort kraften bly
21. cal specifications Overheating will cause irreparable damage to the unit T rke Tietoa Finnish Jos tata varusteita k ytet n tavassa ei m ritetty Hoefer Inc suojelu ehkaisty varusteille saattaa olla avuton Tama v line suunnitellaan sis laboratoriok yt lle vain Vain lis varusteet ja osat hyv ksyiv t tai toimitti Hoefer Inc oheen voi k ytt k ytt miselle valvoalle ja servicing t m tuote Vain k ytt k ytt j nnitett joka on CE merkitsi tai turvallisuus joka on todistanut aidoksi ohi joka on kansallisesti tunnustettnut testaaminen laboratoriota Turvallisuuskansi t ytyy olla paikallaan k ytt j nnitteeseen Kiert kaikki k ytt j nnitevalvonnat ja irrottaa valtalyijyt ennen poistaminen turvallisuuskantta Kiert vain vesi tai 50 50 vesi ethylene glycol siin tapauksessa varustetun l mm nvaihtimen l pi l yhdist l mm nvaihdinta vesinapautukseen eik j hdytysnestel hteeseen e piii miss vesipaine on unregulated Pakkasneste eik orgaaninen liuotin v lineen osassa ei esitele Koskaan Orgaaniset liuottimet aiheuttavat korvaamattoman vahingon yksikk n Ei k yt puskuria yll olevia l mp tiloja enint n m ritetyill teknisill t smennyksill Ylikuumeneminen aiheuttaa korvaamattoman vahingon yksikk n Wichtige Informationen German Wenn diese Ausr stung gewisserma en nicht angegeben durch Hoefer Inc verw
22. chaleur excessive Faire circuler du liquide de refroidissement externe Diminuez le r glage courant ou tension Pr refroidissement du tampon Ex cutez le gel dans la chambre froide probl me Stries prot ines verticalement Anormalement lent ou rapide run Les bandes sont biais es ou d form es cause possible Les particules pr sentes dans l chantillon rem de Centrifuger ou filtrer l chantillon avant le chargement pour liminer les particules Surcharge Chargez moins de l chantillon D gradation Courant de fuite autour de gel Ajouter l inhibiteur de prot ase tels que PMSF V rifier les fuites toutes les plaques et les entretoises doivent tre align es et exempt de graisse et les fissures Si elle est utilis e le barrage tampon doit tre s curis Echantillon ou la pr paration des r actifs Si le pH n cessaire d une solution est d pass e ne pas reculer titrer Jeter et de pr parer un tampon frais V rifiez recettes les concentrations de gel et de la dilution du tampon Par exemple ne pas utiliser de Tris HCI au lieu de Tris pour r servoir tampon Laemmli Diminuer la concentration en sel d chantillons Qualit r actif liminer des solutions d acrylamide plus g s et utiliser seul stock de la plus haute qualit Utilisez uniquement Pur e fra chement d sionis e R glages de tension ou de courant Pr paration de gel
23. continu sur la surface du verre Remarque les gels de gradient vers dans la SE615 ou SE675 Caster Gel multiples sont introduits par le bas Remarque Lorsque coul e d un gel exponentielle gradient la position d un piston ou bouchon d tanch it au dessus du liquide dans la chambre de m lange pour maintenir le volume constant e p14 Des gels de gradient Les deux gels A gradient lin aire et exponentielle peut tre vers dans la coul e double gel Nous recommandons d utiliser un Maker Hoefer SG D grad S rie Des gels de gradient sont vers s a partir du haut de la roulette avec une canule si vous utilisez la condition double gel en poudre ou du fond si vous utilisez une roulette Hoefer Gel multiples voir les instructions accompagnant le lanceur de sorts Un gel d empilement est ensuite vers sur le gel de gradient Oo O oo o Eeer Sech ees Se Verser un gel gradient lin aire o Assembler en sandwich es dans les roulettes a double gel comme d crit a la page 9 e Mettre en place le chemin d ecoulement monomere solution Ex cuter une longueur de tube en vinyle transparent a travers une pompe p ristaltique Attacher une extr mit de la tubulure a l orifice de sortie de gradient machine et I autre extr mit a une canule 20 cm Le diam tre ext rieur de la canule doit tre inf rieure l paisseur d espacement Placer la canule d
24. de utilis avec les syst mes tampons continues ou discontinues et des gels de gradient Voir page 32 pour la bibliographie Pr parer le sandwich de gel Les plaques de verre les entretoises et les jeux de colliers sont dimensionn s de sorte que le sandwich assembl peut tre facilement align s pour cr er le sceau doivent en premier lieu de jeter le gel puis de l ex cuter Pour de meilleurs r sultats prendre des pr cautions suppl mentaires pour aligner tous les composants lors du montage des sandwichs Le tableau 1 r sume les options de gel de coul e SE600 Les deux gels pr fabriqu s et coul s auto gels peuvent tre utilis s Pour l auto cast gels multiples kits peuvent tre command s s par ment le SE615 Kit multiples Caster Gel peut contenir jusqu 10 sandwichs et le kit SE675 Gel Caster peut contenir jusqu quatre sandwiches Voir le manuel qui l accompagne gel en poudre utilisateur pour des instructions compl tes SE660 Les gels de 24 cm requis pour l SE660 doit tre auto cast Le Gel Caster double inclus est titulaire de deux sandwichs de gel bords en sandwich a la fois haut et du bas doit tre a galit avec les cr tes de guidage de serrage barre de pression Fig 2 Assemblage en sandwich Inspecter les plaques de verre pour les pseudos Utilisez uniquement des plaques unchipped pour viter les fuites Astuce Utilisez le berceau de cou
25. e waterdruk niet geregulariseerd is Stel Nooit antivriesmiddel of organische oplosmiddelen in deel van het instrument voor Organische oplosmiddelen zullen onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Bedien niet met buffertemperaturen boven het maximum specificeerde technische specificaties Oververhittend zal onherstelbare schade aan de eenheid veroorzaken Important Information English If this equipment is used in a manner not specified by Hoefer Inc the protection provided by the equipment may be impaired This instrument is designed for indoor laboratory use only Only accessories and parts approved or supplied by Hoefer Inc may be used for operating maintaining and servicing this product Only use a power supply that is CE marked or safety certified by a nationally recognized testing laboratory The safety lid must be in place before connecting the power supply leads to a power supply Turn all power supply controls off and disconnect the power leads before removing the safety lid Circulate only water or 50 50 water ethylene glycol through the heat exchanger if so equipped Do not connect the heat exchanger to a water tap or any coolant source where the water pressure is unregulated Never introduce antifreeze or any organic solvent into any part of the instrument Organic solvents will cause irreparable damage to the unit Do not operate with buffer temperatures above the maximum specified techni
26. e et le cordon noir dans la prise de sortie noir Dans la plupart des syst mes du plomb rouge qui est reli l lectrode de fond est l anode et le noir connect s a l lectrode sup rieure est la cathode e p21 e p22 LAssembl e note Important e Fonctionne IEF Le niveau de tampon dans la chambre inferieure du tampon ne doit jamais atteindre la chambre tampon sup rieure maintenir au moins 2 cm de d gagement e Ne pas remplir la chambre sup rieure ou inf rieure au dessus des niveaux recommand s illustr s dans la figure 8 liminer le tampon en contact avec les postes d amp lectrodes e Verser lentement et tampon l cart des fentes dans la chambre tampon sup rieure pour viter de perturber les chantillons e Utiliser de l eau seule ou 50 50 eau thyl ne glycol comme liquide de refroidissement Ne jamais utiliser un antigel commercial ou tout m lange base d alcool ou des dommages irr parables l changeur de chaleur entra nera e Ne pas connecter l changeur de chaleur a un robinet d eau ou toute autre source o la pression de l eau n est pas r glement e Remarque Toutes les unites de la serie SE600 utilise 18 cm de large plaques L paisseur du gel determine la section transversale et l exigence actuelle pour constants pistes actuelles La longueur de la plaque d termine le temps d ex cution Table 3 Laemmli buffer system starting point guideline
27. e sorte qu il repose au fond du sandwich mi chemin entre les entretoises En option Ajuster la solution d acrylamide plus lev s en pourcentage a 15 p v de saccharose ou de 25 v v de glyc rol pour am liorer la superposition Pr parer la solution de monomere Calculez le volume de solution de monomere n cessaire Divisez le volume total de moiti et de pr parer ce volume a la fois des solutions de haut et de bas pourcentage d acrylamide Verser la lumi re solution dans la chambre du r servoir la chambre la plus loign e de la sortie Ouvrir le robinet entre les chambres assez longtemps pour d placer l air puis fermez Verser le lourd solution dans la chambre de m lange et placer une barre d agitation dans cette chambre Placer la machine sur gradient d un agitateur magn tique et de commencer une agitation un taux qui se m langent bien mais n introduit pas de bulles dans la solution 5 M langer le gradient et pomper la solution dans le sandwich Tandis que la solution est sous agitation commencer le pompage de la chambre de m lange et ouvrir le robinet la chambre de r servoir Augmenter la canule que le liquide p n tre dans le sandwich en gardant la pointe la surface du gel Pr parer des gels plus que n cessaire Superposer chaque gel avec une mince couche d eau butanol satur d eau ou un tampon de gel dilu pour emp cher l exp
28. e taux de migration du colorant de suivi L ex cution est termin e lorsque le colorant suivi atteigne le fond du gel Surveiller le niveau du tampon et si n cessaire reconstituer comme n cessaire pour maintenir l electrode sup rieure immerg e Un petit volume de tampon peut fuir devant une plaque entaill e ou joint ou un tampon peut passer a travers le gel Remarque Utilisez uniquement des outils flexibles en plastique pour viter les clats indiscrets des plaques de verre Apr s l lectrophor se Une fois que le colorant de suivi atteint le fond du gel couper l alimentation lectrique d branchez les fils et retirez le couvercle de s curit l utilisation du levier doigt entre le couvercle et le haut de l changeur de chaleur Soulevez vers le haut pour viter de plier les fiches bananes e Si du liquide de refroidissement circule arr ter l coulement et de d brancher les raccords ou tubes Sortez l ensemble tampon chambre sup rieure Verser le tampon dans un vier Installez l ensemble dans la coul e de gel double puis rel chez les sandwichs en tournant et en supprimant les cames D vissez les colliers des sandwiches et enlever Doucement desserrer puis retirez le deux entretoises Utilisez le Wonder Wedge Hoefer gel de s paration outil plaque pour s parer les plaques 5 Soulevez d licatement la plaque de verre avec le gel ci joint Manipuler le gel avec soin p
29. en unsortierten Hausm ll entsorgt werden d rfen sondern separat behandelt werden m ssen Bitte nehmen Sie Kontakt mit einem autorisierten Beauftragten des Herstellers auf um Informationen hinsichtlich der Entsorgung Ihres Ger tes zu erhalten Questo simbolo indica che i rifiuti derivanti da apparecchiature elettriche ed elettroniche non devono essere smaltiti come rifiuti municipali indifferenziati e devono invece essere raccolti separatamente Per informazioni relative alle modalita di smantellamento delle apparecchiature fuori uso contattare un rappresentante autorizzato del fabbricante Este s mbolo indica que el equipo el ctrico y electr nico no debe tirarse con los desechos dom sticos y debe tratarse por separado Contacte con el representante local del fabricante para obtener m s informaci n sobre la forma de desechar el equipo Denna symbol anger att elektriska och elektroniska utrustningar inte f r avyttras som osorterat hush llsavfall och m ste samlas in separat Var god kontakta en auktoriserad tillverkarrepresentant f r information ang ende avyttring av utrustningen e pvii Unite Fonction gel d lectrophorese et description Les Hoefer SE600 s rie verticales dalle unit s d lectrophor se sur gel sont destin s la prot ine et l lectrophor se d acide nucl ique dans des couramment utilis et non d naturant des conditions de d naturation Jusqu a 28 chantillons peuvent tre compar s a
30. en f re flytta s kerheten locket Cirkulerar bara vatten eller 50 50 vatten ethylene glycol genom v rmen exchanger i s utrustad fall Inte kopplar v rmen exchanger till en vatten kran eller n got kylmedel k lla d r vattnet trycket r unregulated Inf r aldrig kylv tska eller n got organiska l sningsmedel in i n gon del av instrumentet Organiskt l sningsmedel ska orsaka irreparable skada till enheten Anv nd inte med buffert temperaturer ver det h gsta angivna tekniska specifikationerna verhettning skulle orsaka irreparabla skador p enheten e pvi Frangais English German Italian Spanish Swedish A A La 1 A La D chets d quipements lectriques et lectroniques DEEE Ce symbole indique que les d chets relatifs l quipement lectrique et lectronique ne doivent pas tre jet s comme les ordures m nag res non tri es et doivent tre collect s s par ment Contactez un repr sentant agr du fabricant pour obtenir des informations sur la mise au rebut de votre quipement This symbol indicates that the waste of electrical and electronic equipment must not be disposed as unsorted municipal waste and must be collected separately Please contact an authorized representative of the manufacturer for information concerning the decommissioning of your equipment Dieses Symbol kennzeichnet elektrische und elektronische Ger te die nicht mit dem gew hnlich
31. endet wird kann der durch die Ausr stung zur Verf gung gestellte Schutz verschlechtert werden Dieses Instrument wird f r den Innenlaborgebrauch nur daf r entworfen Nur Zus tze und Teile genehmigten oder lieferten durch Hoefer Inc kann f r das Funktionieren das Aufrechterhalten und die Wartung dieses Produktes verwendet werden Verwenden Sie nur eine Energieversorgung die CE gekennzeichnet oder durch ein national anerkanntes Probelaboratorium bescheinigte Sicherheit ist Der Sicherheitsdeckel muss im Platz vor dem Anschlie en der Energieversorgung sein f hrt zu einer Energieversorgung Alle Energieversorgungssteuerungen abdrehen und die Macht trennen f hrt vor dem Entfernen des Sicherheitsdeckels Nur Wasser oder 50 50 Glykol des Wassers Athylens durch den Warmeaustauscher wenn so ausgestattet in Umlauf setzen Verbinden Sie den W rmeaustauscher mit einem Wasserklaps oder jeder K hlmittel Quelle nicht wo der Wasserdruck ungeregelt wird F hren Sie nie Frostschutzmittel oder jedes organische L sungsmittel in jeden Teil des Instrumentes ein Organische L sungsmittel werden nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Mit Puffertemperaturen ber angegebenen technischen Spezifizierungen des Maximums nicht funktionieren Die berhitzung wird nicht wiedergutzumachenden Schaden der Einheit verursachen Informazioni Importanti Italian Se quest apparecchiatura usata
32. ent l eau distill e et du robinet Les plaques de verre peuvent galement tre trait es avec mais pas stock s dans des solutions de nettoyage acides Remplacement d un tube de verre changeur de chaleur o Retirer le tube de torsion et par simultan ment glisser vers le bas autant que possible jusqu a ce que l extr mit sup rieure est libre de l ceillet sup rieur Guidez soigneusement le tube de sorte qu il efface l assembl e puis soulevez le tube de la partie inf rieure oeillet e Graisser l gerement l ext rieur des deux extr mit s du tube avec de la graisse de silicone nouvelle Tordre et coulisseau d une extr mit du tube dans la partie inf rieure oeillet Faites ensuite glisser l autre extr mit dans l ceillet haut poussant doucement avec une l g re torsion jusqu ce qu il s arr te V rifiez que le joint n est pas coince Depannage probleme Fuites sandwich de gel pendant Fincantation Exemple de puits endommag ou irregulier cause possible Composants sales ou endommag es remede Plaques entretoises et le joint doit tre parfaitement propre Lavez si n cessaire Remplacer assiettes br ch es surtout si elle est br ch e pres des entretoises V rifiez le joint en poudre pour des coupures ou des fissures et remplacer si n cessaire Mis align s pi ces V rifiez l alignement de plaque et I entretoise r aligner si n ce
33. gel a double coul amp e support avec socle de nivellement et le niveau le barrage tampon gabarit d alignement Spacer Mate et Wedge Wonder s paration plaque porte outil D ordre 2 peignes et 2 series de 16 cm entretoises s par ment SE600 SE600 double unit refroidie verticale complete Comprend unit de base plus deux de 15 et les peignes et les 2 entretoises de 1 5 mm d paisseur pour 18 x 24 cm gels SE600 15 1 5 SE660 double unite refroidie verticale de base Comprend 3 jeux de plaques de verre quatre de 16 cm et quatre ensembles de serrage de 8 cm 6 cames gel a double coul amp e support avec socle de nivellement et le niveau le barrage tampon gabarit d alignement Spacer Mate et Wedge Wonder s paration plaque porte outil D ordre 2 peignes et 2 jeux de 24 cm entretoises s par ment SE660 SE660 double unit refroidie verticale compl te Comprend unit de base plus deux de 15 et les peignes et les 2 entretoises de 1 5 mm d paisseur Les pi ces de rechange Gel Wonder Wedge plaque outil de s paration SE660 15 1 5 SE1514 Fente joints en caoutchouc de silicone pour la chambre tampon sup rieur SE6008B Lamines joints en caoutchouc de silicone pour la coul amp e support SE6009 Barrage tampon SE6032 Chambre tampon sup rieure pour SE600 SE660 SE6054 Couvercle avec haute tension entraine pour les SE600 SE660 SE6056 Haute tension de consigne c
34. gher S R Staining proteins in gels Current Protocols in Molecular Biology Ausubel E A et al eds OSC 10 6 1 10 6 8 1991 SDS Polyacrylamide Gel Electrophoresis and Isoelectric Focusing Handbook 80 6013 88 Hoefer Inc 2001 Les systemes de gel non d naturante Reisfeld R A et al Acidic buffer system for resolution of cationic proteins Nature 195 281 1962 McLellan T Electrophoresis buffers for polyacrylamide gels at various pH values Anal Biochem 126 94 1982 Hedrick J L and Smith A J Size and charge isomer separation and estimation of molecular weights of proteins by discontinuous gel electrophoresis Arch Biochem Biophys 126 155 1968 La d naturation des systemes de gel Laemmli U K Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T Nature 227 680 685 1970 Matsudaira P T and Burgess D R SDS microslab linear gradient polyacrylamide gel electrophoresis Anal Biochem 87 386 396 1978 Schreier M H Erni B and Staehelin T Initiation of mammalian protein synthesis I Purification and characterization of seven initiation factors J Mol Biol Nov 116 4 727 753 1977 e p32 Shapiro A L and Maizel J V Jr Molecular weight estimation of polypeptides by SDS polyacrylamide gel electrophoresis further data concerning resolving power and general considerations Anal Biochem Jun 29 3 505 514 1969
35. gration et le chauffage par effet Joule et la distorsion r sultant de bande Tableau 2 numere les lignes directrices partir de point et les ajustements pour l paisseur du gel le nombre de gels et taux de migration Courant Courant agit sur l ensemble de la section transversale de tous les gels parce que les gels sont connect s en parall le dans le circuit lectrique Ainsi le r glage actuel pour un gel de doit tre multipli par le nombre de gels de la m me section transversale d ex cution simultan ment Pour un gel 1 5 mm d paisseur nous vous proposons une mise de d part de courant de 25 mA Deux de 1 5 mm gels 50 mA Remarque Le refroidissement peut tre n cessaire pour contr ler le chauffage par effet Joule Tension La tension de d marrage pour un gel de 1 5 mm dalle connect e a une alimentation de puissance r gl a 25 mA est g n ralement de 80 a 90 V en utilisant la SE600 avec un systeme de tampon de Laemmli discontinue pour gels SDS La tension finale est typiquement 250 a 400 Y en fonction de la longueur du gel Voir le tableau 3 e p23 Attention Apres de surveillance initiale ne laissez pas l appareil sans surveillance pendant plus de 1 h avant de v rifier l tat d avancement des bandes et le niveau de tampon e p24 Temps Un ex cution est termin e lorsque le colorant suivi atteigne le fond du gel Dans un de 16 cm de gel SE600 de 1 5 mm d paisseur Laemml
36. i gel de SDS ex cutez a 25 mA gel sans refroidissement il faut habituellement de 5 heures Plus longs gels besoin de temps proportionnellement plus s parations dans 24 cm gels SE660 n cessitent 8 heures Param tres d lectrophorese pour ADN acrylamide des gels Gels d ADN sont g n ralement g r s a un r glage de tension constante et depuis des systemes tampons sont continues les deux lectures de courant et tension reste constante tout au long de la course Conditions de course sont exprim s en unit s de V cm Publi conditions de fonctionnement varient consid rablement mais les tensions dans la gamme de 1 3 V cm sont communs pour les courses de nuit Dans le SE600 nous nous sommes heurt s a des gels jusqu a 12 5 V cm Refroidissement est n cessaire a ce niveau de tension Enregistrez chaque course Gardez une trace de ce parametre le num ro courant ou de tension et de l paisseur de gels syst me de m moire tampon et les lectures initiale et finale courant ou de tension pour chaque course de sorte que les r sultats puissent tre compar s Des r sultats incoh rents pour le m me syst me et les param tres indiquent des probl mes potentiels tels que les fuites de courant des concentrations de tampon incorrectes les concentrations lev es de sel ou de la qualit chimique incompatible Contr ler la progression du groupe apres 5 min puis de nouveau apres 1 h en gardant un ceil sur l
37. ibr e si vous mettez a la fois vers le centre de la roulette Fig 5 Caster composants et la configuration bac de coul e avec la cr te extr mit la plus courte vers le haut Sceller le sandwich sur gel contre le joint de coul amp e en tournant les deux cames en ce que n cessaire en g n ral 90 a 150 jusqu a 180 L action de came appuie sur les plaques vers le bas dans le joint et pour sceller le fond du sandwich Le sceau est termin e une fois que le bord du verre apparait plus sombre et presque transparente contre le joint Ne pas tourner la came del de ce point plaque de verre entretoise trou de came joint d tanch it c t mousse vers le bas serrer trou de came DY berceaux de coul e 2 trou de came pieds de nivellement i came niveau 4 installer cr te finissent ab trou de came epll e p12 Des gels d acrylamide 0 Pr parer la solution de monom re et versez le gel Pr parer la quantit requise de solution de monomere D sa rer et ajouter l initiateur et un catalyseur juste avant la coul e du gel Introduire a la pipette la solution dans un coin du sandwich en prenant soin de ne pas introduire de bulles d air Voir ci dessous pour le niveau de la solution appropri e en fonction de l application Pas de gel d empilement syst me continu Remplir solution juste en dessous de la partie sup rieure d
38. joint en place En outre une petite quantit de Seal gel peut tre appliqu a chaque extr mit du joint avant d installer pour aider a tenir le joint contre la chambre de tampon sup rieur Relachez les sandwiches de la roulette en supprimant toutes les cames bas si pr sent Abaisser la chambre tampon sup rieure sur les sandwichs de gel dans le stand de coul e Installez le cames cr te vers le bas dans les trous de m moire tampon de came de chambre Fixer le sandwich en place par tourner simultan ment une came dans le sens horaire et l autre dans le sens antihoraire sur 180 Remarque Ne forcez pas les cames Si vous rencontrez une r sistance inhabituelle d monter et inspecter pince et l alignement de verre le long du haut du sandwich Alignez et r installez le Remarque Si l option de refroidissement est utilis fr quemment il est commode d attacher connecteurs Quickfit a la tubulure Les vannes de ces raccords de pr venir tout d bordement de liquide de refroidissement 4 Utiliser une pipette pour remplir soigneusement chaque fente au dessus des puits d chantillon avec le tampon pour minimiser perturber les chantillons Ensuite versez 100 ml de tampon dans la chambre de diriger le flux de tampon vers la paroi lat rale V rifiez qu aucune fuite tampons autour de la garniture Chambre de Basse tampon Placez une barre magn tique de spin dans la chambre inf rieure du tampon LBC
39. ket Dette instrumentet er utformet for innend rs laboratoriumbruk bare Bare tilbeh r og deler godkjente eller forsynte ved Hoefer Inc kan bli brukt for drive vedlikeholde og betjene dette produktet bruker Bare en kraftforsyning som er CE merket eller sikkerhet som ha blitt sertifisert av et som O piv nasjonalt ha blitt anerkjent prover laboratorium Sikkerheten lokket m veere p plass for forbinding kraftforsyningene blyene til en kraftforsyning Vender all kraftforsyningsstyring av og frakopler kreftene blyene for fjerning sikkerheten lokket Sirkulerer bare vann eller 50 50 vann ethylene glykol gjennom oppvarmingen veksleren i s fall utstyrer Ikke forbind oppvarmingen veksleren til en vanntapp eller noe kjalemiddelkilde hvor vannet trykket er unregulated Introduserer Aldri antifreeze eller noe organisk losemiddel inn i noe del av instrumentet Organiske losemiddler vil for rsake irreparabel skade p enheten Driver med buffertemperaturer over maksimum ikke spesifiserte teknisk spesifikasjoner overoppheting vil for rsake irreparabel skade p enheten Wazne Informacje Polish Je eli ten sprz t jest wykorzystywany w spos b nie okre lone przez Hoefer Inc do ochrony przewidzianej przez urz dzenie mo e zosta obni ony Instrument ten jest przeznaczony do u ytku w laboratoriach kryty tylko Tylko akcesori w i cz ci zatwierdzone lub dostarczone przez Hoefer Inc mog by wyko
40. l e pour maintenir le sandwich lors de l alignement Retirez le joint lamin des le berceau et au lieu de mettre le sandwich a la verticale sur une surface plane elle a mis dans le berceau de coul e Tableau 1 les options de coulage de gel mod le nombre taille de la gels disponibles de gels plaque de gel et roulettes SE600 1 4 18x 16cm Double Caster Gel Caster Kit Gel Multiple Kit de roulettes Gel Gels disponibles dans le commerce SE660 1 4 18x 24cm Caster Gel double Deux plaques accessoires diviseur crant es sont tenus de ex cuter 2 gels suppl mentaires Lance jusqu 4 gels Lance jusqu 10 gels Construire le sandwich de gel et ins rez la dans en poudre Pr parer le lanceur et les pinces Placez le niveau bulle dans le centre de lanceur de sorts et d ajuster les pieds de nivellement Desserrer toutes les vis de serrage et de faire de la place pour le sandwich en faisant glisser les plaques de pression sur les vis e Construire des sandwichs de gel Pour chaque sandwich choisir deux d une propret irr prochable les plaques de verre et deux entretoises unchipped Lay une plaque sur une surface plane fixer le gabarit d alignement Spacer Mate sur la plaque c t large en haut de la plaque placer une entretoise long de chaque bord et de jeter les deuxieme plaque de verre sur le dessus Fig 3 Nombre requis de pinces taille 8cm 16 cm SE
41. mpon dans la chambre sup rieure Entretoises D terminer l paisseur des entretoises du gel et sont disponibles dans trois paisseurs 0 75 1 0 et 1 5 mm et deux largeurs 1 et 2 cm Peut tre command s par ment Gabarit d alignement Spacer Mate Ce modele aligne entretoises lors de l assemblage en sandwich Combs Combs sont disponibles dans des tailles qui forment 10 12 15 20 ou 28 puits Pr parative peignes inclure un ou deux puits de r f rence en plus d un bien pr parative La plupart des peignes sont disponibles dans les trois paisseurs 0 75 1 0 et 1 5 mm Peut tre command s par ment Tous les rayons pr parative et le 10 12 15 et 20 ainsi puits forme peignes qui sont 25 mm de profondeur Les 28 et peigne puits formes qui ne sont que 15 mm de profondeur afin que les puits ne s effondre pas lorsque le peigne est retir Le volume de l chantillon d tenu par chaque puits d pend de P paisseur du gel la profondeur du puits et le nombre de puits par peigne Tableau 2 volumes listes des chantillons de chaque bien pour tous les peignes Wonder Wedge outil de s paration de plaque de gel de Cet outil est utilis pour d monter sandwichs de gel et de v rifier entretoise et un peigne paisseurs Mode d emploi Gel des procedures de moulage et de P lectrophor se suivre Assembl e des deux mod les est identique Comprend des instructions pour des gels de polyacrylami
42. nnecter l alimentation mene une alimentation Tourner tous contr les d alimentation de et d brancher les avances de pouvoir avant enlever le couvercle de s curit Circuler seulement de l eau ou 50 50 glycol d eau thyl ne par l exchanger de chaleur si si quip Ne pas connecter l exchanger de chaleur un robinet d eau ou la source d agent de refroidissement o la pression d eau est non r gul e Ne Jamais introduire d antigel ou du dissolvant organique dans n importe quelle partie de l instrument Les dissolvants organiques causeront des dommages irr parables l unit Ne pas fonctionner avec les temp ratures de tampon au dessus du maximum a sp cifi des sp cifications techniques La surchauffe causera des dommages irr parables a l unit Dulezit Informace Czech Pokud by toto za zen je pou ito zp sobem kter nen podle Hoefer Inc ochrana poskytovan na z klad za zen m e b t naru ena Tento n stroj je ur en pro vnit n pou it v laborato i pouze Pouze p slu enstv a sti schv len nebo poskytnut ch Hoefer Inc mohou b t pou ity pro provoz dr bu a dr b tohoto v robku zdroj nap jen pou vaj jen e je opat en ozna en m CE osv d ena nebo bezpe nost vnitrost tn uznan mi zku ebn mi laborato Bezpe nosti lid musi b t zavedena p ed p ipojen m nap jec zdroj nap jen vede k Turn ve ke
43. nt Membrane Proteins for Analysis by Two Dimensional Gel Electrophoresis Plant Physiology 81 802 806 1986 Mets L J and Bogorad L Two dimensional polyacrylamide gel electrophoresis an improved method for ribosomal proteins Anal Biochem Jan 57 1 200 210 1974 e p33 e p34 O Farrell P H High resolution two dimensional electrophoresis of proteins J Biol Chem May 25 250 10 4007 4021 1975 Bjellqvist B et al Isoelectric focusing in immobilized pH gradients principle methodology and some applications J Biochem Biophys Methods 6 317 339 1982 G rg A et al The current state of two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients Electrophoresis 9 531 546 1988 G rg A Two dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients current state Biochem Soc Trans 21 130 132 1993 Bjellqvist B et al Micropreparative two dimensional electrophoresis allowing the separation of samples containing milligram amounts of proteins Electrophoresis 14 1375 1378 1993 Blomberg A et al Interlaboratory reproducibility of yeast protein patterns analyzed by immobilized pH gradient two dimensional gel electrophoresis Electrophoresis 16 1935 1945 1995 Informations de commande produit quantite code pour 18 x 16 cm gels SE600 double unite refroidie verticale de base Comprend 3 jeux de plaques de verre quatre ensembles de serrage 16 cm 6 cames
44. ordon de s curit SE6056 HV Chambre de Basse tampon pour SE600 SE6150 Echangeur de chaleur pour SE600 SE660 pa j j ji m l SE6160 e p35 produit quantite code Chambre de Basse tampon pour SE660 1 SE6650 Des ceillets pour changeur de chaleur assemblage lectrode inf rieure 4 SE6060 6 Fiche banane de l or avec 2 rondelles 1 SE6067 Tube en verre avec 2 oeillets 1 SE6160 5 pour changeur de chaleur assemblage lectrode inf rieure Niveau a bulle 1 SER11 Gel Seal 1 4 oz tube 1 SE6070 Couvercle de s curit avec des cables SE6056 Chambre tampon sup rieure SE6054 Echangeur de chaleur SE6160 Modele R organiser SE600 SE6150 SE660 SE6650 p36 produit quantite code Gel roulettes Pour 1 ou 2 gels Dual Gel Caster base 2 gels 18 cm de large 1 SE6015 Comprend 2 joints vierges pour 1 ou 2 gels Celui fourni avec chaque unit SE600 Pour un maximum de 4 gels Kit de roulettes Gel 4 gels 18 x 16 cm 1 SE675 Comprend 8 plaques de verre 3 conomiseur d espace plaques 5 feuilles de remplissage 100 feuilles de papier cir les Spacer Mate gabarit d alignement et les bouchons de remplissage Ordre des peignes et des entretoises s par ment Pour un maximum de 10 gels Multiple Kit de roulettes Gel 10 gels 18 x 16 cm 1 SE615 Comprend 20 plaques de verre conomiseur d espace plaque 5 feuilles de remplissage 100
45. osition du gel l oxyg ne Lentement offrir la solution de superposition d une seringue en verre munie d une aiguille de calibre 22 Appliquer la solution a proximite de l entretoise sur un c t du sandwich et lui permettre de s couler a travers la surface nu Autoriser les gels a polym riser pour un minimum de 1 h Apres polym risation verser la superposition et rincer la surface du gel a plusieurs reprises avec de l eau distill e p15 E C Remarque Avec Coomassie Blue il est possible de d tecter une pg de prot ine dans une seule bande Avec les taches d argent les plus sensibles il est possible de d tecter aussi peu que 10 ng de la prot ine e p16 Pr parer la solution de monomere d empilage gel versez le gel d empilement et d introduire un peigne avec un l ger angle dans le sandwich en prenant soin de ne pas emprisonner de l air sous les dents Pr voir un minimum de 1 h pour le gel polym riser Pr paration de l chantillon et de chargement V chantillon peut tre charg soit alors que le sandwich est dans le lanceur de sorts ou apr s la chambre tampon sup rieure est fix e Lors du chargement d chantillons tout en utilisant des plaques intercalaires les chantillons doivent tre charg es sans la chambre tampon sup rieure en place La quantit d chantillon charg d pend de Pepaisseur du gel la sensibilit de la m thode de d tection utilis e
46. our viter de l endommager Retourner la plaque et la position du gel bas au dessus du bac de coloration Soulever un coin du gel de la vitre et lui permettre de d poser dans le bac ou si le gel est assez pais pour g rer le soulever et le placer dans le bac Pour viter les claboussures ajouter la coloration ou la solution de fixation sur le plateau apr s le gel est transf r Nettoyez l unit tel que d crit dans la section suivante e p25 e Ne pas autoclaver ou chauffer une partie ci dessus 45 C e Ne pas utiliser de solvants organiques des abrasifs des solutions de nettoyage puissants ou d acides ou de bases fortes pour nettoyer les chambres e Ne pas faire tremper le joint lamine Remarque Si l ancien tube est fendu ou cass prot ger votre main avec des gants pais un morceau de tissu ou des serviettes en papier avant de retirer le tube e p26 Entretien et maintenance Nettoyage Imm diatement apres chaque utilisation rincez les chambres tampons sup rieure et inf rieure avec de l eau puis rincer abondamment Peau distill e Manipuler la chambre tampon sup rieure avec soin pour viter d endommager la fiche banane Nettoyer les joints avec un d tergent doux et rincer Peau distill e Laisser s cher a Pair Nettoyez les plaques de verre et les entretoises avec une solution dilu e d un nettoyant de laboratoire tels que RBS 35 puis rincer abondamm
47. r nap jen kontroly vypnuto a odpojit p ed odb rem energie vede bezpe nostn v ko Rozeslat pouze voda nebo 50 50 voda ethylenglykolu prost ednictv m v m n k tepla je li to vybavena Nemaj p ipojen v m n k tepla s vodn mi set epn nebo jak koli chladic kapaliny zdroje kde tlak vody je neregulo Nikdy zav st prost edek proti zamrznut nebo jak koli organick rozpou t dla do jak koli sti z tohoto n stroje Rozpustidl m zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Nejsou provozov na s pufru teplot ch nad maxim ln stanovenou technick mi specifikacemi P eh t zp sob nenapraviteln po kozen jednotka Vigtig Information Danish Hvis dette udstyr bruges i en made ikke specificeret ved Hoefer Inc den beskyttelse som er blevet forsynet af udstyret kan m ske sv kkes Dette instrument er designet for indend rs laboratoriumbrug bare Bare tilbeh r og del godkendede eller forsynede ved Hoefer Inc kan m ske bruges for drive funktionsfejl og betjening dette produkt bruger Bare en str mforsyning der er CE markerede eller sikkerhed som er blevet attesteret af en som nationalt er blevet anerkendt pr ve laboratorium Sikkerhedl get m v re p plads f r forbinding str mforsyningsblyet til en str mforsyning Drejer alle str mforsyningskontroller af og afbryder kraftblyet f r fjerning sikkerhedl get Cirkulerer bare vand eller 50 5
48. rzystane do eksploatacji utrzymania i obs ugi tego produktu korzysta jedynie zasilacza e jest nosz ce oznakowanie CE lub bezpiecze stwa uwierzytelnione przez uznane na poziomie krajowym laboratorium badawcze Bezpiecze stwo lid musi by w miejsce przed pod czeniem zasilania prowadzi do zasilania Za wszystkie r d a zasilania urz dzenia steruj ce off i od czy moc prowadzi przed odbiorem bezpiecze stwa lid Kr tylko wody lub wody 50 50 ethylene glycol wymiennik ciep a poprzez je li tak wyposa one Nie nale y po czy wymiennik ciep a woda z kranu lub jakimkolwiek ch odziwo r d a je eli ci nienie wody jest nieuregulowanych Nigdy nie wprowadza rozpuszczalnika organicznego przeciw zamarzaniu lub jakichkolwiek na dowoln cz dokumentu Rozpuszczalniki organiczne spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Nie dzia aj w buforze temperatury powy ej maksymalnego okre lone specyfikacje techniczne Przegrzania spowoduje nieodwracalne szkody dla jednostki Informac es Importantes Portuguese Se este equipamento usado numa maneira n o especificada por Hoefer Inc que a protecc o fornecida pelo equipamento pode ser comprometida Este instrumento projectado para uso de interior de laborat rio s S acess rios e partes aprovaram ou forneceu por Hoefer Inc pode ser usada para operar manter e servicing este produto S usa um estoque de poder que C
49. s paisseur du gel 1 5 mm Courant par gel 25 mA courant constant A partir de tension 80 90 V Tension finale 220 250 V Les gels plus ou moins pais n cessitent proportionnellement plus ou moins de courant Par exemple un gel de 0 75 mm qui est la moiti de l paisseur d un gel de 1 5 mm exige que la moiti autant de courant ou 12 5 mA tLe courant doit tre multipli par le nombre de gels Par exemple si deux clubs sandwichs sont install s les quatre gels besoin de quatre fois plus de courant Le courant peut tre augment pour acc l rer le parcours si le refroidissement actif est utilis et il peut tre diminu pour plus lentes pistes la nuit A 25 mA par gel S paration de l chantillon Parametres d lectrophorese pour des gels de polyacrylamide discontinus Les gels peuvent tre ex cut chaque constants courants ou constants r glages de tension Un mode courant constant est traditionnellement utilis avec un syst me tampon discontinu de sorte que le taux de migration lectrophor tique reste inchang pendant toute la course Dans ces conditions de tension augmente mesure que le produit terme Une valeur inf rieure actuelle est recommand pour une meilleure r solution Le niveau optimal de courant doit tre d termin de mani re empirique les principaux facteurs qui doivent tre quilibr s comprennent la concentration du gel et de la vitesse de mi
50. s L x H x P SE600 32x29x 14 cm SE660 32 x 37 x 14 cm Certifications des produits EN 61010 1 UL 61010A 1 CSA C22 2 1010 1 certifi CE Cette d claration de conformit n est valable que pour l instrument lorsqu il est e utilis s dans des endroits de laboratoire e utilis comme d livr de Hoefer Inc sauf pour des modifications d crites dans le manuel de l utilisateur et e connect d autres le label CE des instruments ou des produits recommand s ou approuv s par Hoefer Inc Fig 1 Les principales composantes de la s rie SE600 voir Fig 5 pour les composants a roulettes Inclus mais non affich e Gel compos Seal 1 4 oz e l alignement mod le Spacer Mate e Verre plaques 6 e Wedge Wonder s paration plaque porte outil e barrage tampon Unit complete comprend egalement entretoises 4 et les peignes 2 Necessaire mais non inclus e Agitateur magn tique e Unit d alimentation avec une cote minimale de 300 V 100 mA constante A ou V En option Circulateur bain Remarque La section de commande r pertorie tous les accessoires et pieces de rechange code couleur fils 2 couvercle de s curit chambre tampon sup rieure a lectrode sup rieure changeur de chaleur avec I lectrode inferieure chambre L de tampon inferieure Remarque Avant d utiliser la premiere fois d monter l appareil et laver avec
51. s plaques Trois ensembles de plaques de verre sont inclus avec chaque unit Plaques de separation entaill es a commander s par ment sandwichs paire de gel deux pour former un club sandwich de sorte que jusqu a quatre gels peuvent tre ex cut s 4 un moment donn Pinces Deux 16 cm pinces sont utilis es pour s curiser n importe quel sandwich longueur Une paire suppl mentaire de 8 cm de pinces sont n cessaire pour garantir 24 cm sandwichs Le bar de pression de serrage ajust avec des vis r partit la pression Coul e support Le stand de coul e d tient sandwichs de gel assembl s en position verticale pour coulage de gels Pieds r glables niveau du lanceur Un joint stratifi en bas de chacun des joints berceau de coul e du fond du sandwich quand il est serr dans le support Cames Cames sont utilis s deux fois premierement pour fixer le sandwich assembl sur le support de coul e et d autre part pour fixer le sandwich a la chambre tampon sup rieure Joints en caoutchouc Il ya deux ensembles de deux joints Les joints solides stratifi es s inserent dans le fond de la piece coul e debout et former le joint pour le coulage du gel Les joints fendus plac s sous la chambre de tampon sup rieur et de former P tanch it entre les chambres sup rieure et inf rieure Les ar tes du joint sup rieur aligner la fente joint pour maintenir un canal ouvert entre la surface du gel et le ta
52. ssaire Plus serrage Les bulles d air Tourner la came que dans la mesure n cessaire pour cr er un joint en g n ral 90 a 150 mais jusqu a 180 Sur chaque entretoise appliquez une fine couche de compos amp Seal Gel au fond coin ext rieur seulement Ne pas utiliser de la graisse silicone Retirer les bulles d air avant d ins rer les peignes Coulisser peigne dans la solution un angle Si peigne doit tre enlev e ajouter la solution de plusieurs monom re avant de r ins rer le peigne Polym risation incompl te ou retard e Autoriser des gels d acrylamide d finir pour un minimum de 1 h Debris dans les puits Rincer gel non polym ris avec un tampon d chantillon Retrait peigne Retirer le peigne un l ger angle et tres lentement pour eviter d endommager le gel Gels d agarose Abaisser le peigne ne d passe pas 1 cm dans le gel e p27 probl me Polym risation en gel incompl te Sup rieures fuites chambre tampon Alimentation d tecte un courant de fuite Courbes avant de teinture jusqu sourires sur les bords e p28 cause possible Produits chimiques rem de Utilisez uniquement les stocks de ces derni res des r actifs de tr s haute qualit Si le persulfate d ammonium sec ne cr pitent lorsqu il est ajout l eau remplacez le par p te fra che Augmenter TEMED ou la concentration APS ou les deux pH Solutions a
53. u bord de plaque sup rieure Si des bulles sont emprisonn es les retirer avec une pipette ou une seringue Mettre en place un peigne avec un l ger angle dans chaque sandwich en prenant soin de ne pas emprisonner des bulles d air sous les dents Club sandwich Pipeter la solution dans les deux sandwichs le remplissage de chaque au m me niveau en dessous du bord crant Empilement de gel Remplir solution 3 4 cm en dessous du haut de la plaque de verre Cette hauteur permet 1 cm de gel d empilement ci dessous les puits Verser le gel et appliquer une superposition voir tape 2 Apres le gel est fix de pr parer le gel d empilement comme d crit ci dessous lectrophor se 2 D syst me de la prot ine discontinue Remplir solution de monom re environ 1 cm en dessous du haut de la plaque de verre pour permettre 4 5 mm pour la bande ou de gel IPG tube et un joint d agarose Un gel de concentration il faudra un espace suppl mentaire Sceller la bande IPG ou de gel tube en place avec de l agarose dissous dans la gestion de m moire tampon Prenez soin d viter le pi geage des bulles d air entre les gels de premi re et de deuxi me dimension Wen Y Superposer chaque gel avec une mince couche d eau butanol satur d eau ou un tampon de gel dilu pour emp cher l exposition du gel l oxyg ne Lentement offrir la solution de superposition d une seringue en verre munie d une aiguille de calibre 22
54. u niveau d un gel seule plaque Les applications incluent les s parations de prot ines de fractionnement des acides nucl iques et la s paration deuxi me dimension de l lectrophor se 2 D Premi re dimension de s paration de 2 D lectrophorese des prot ines doit tre effectu sur immobilis es Gels gradient de pH Les bandes centr es sont facilement transf r es vers le gel deuxi me dimension de la dalle pour une s paration granulom trique Toutes les plaques de gel de 18 cm de large Tableau 1 a la page 9 listes les deux modeles et la longueur gel correspondant plaque 16 ou 24 cm Jusqu quatre gels peuvent tre ex cut s un moment donn si les sandwichs sont jumel s en club sandwich L changeur de chaleur permet de contr ler la temp rature du tampon dans la chambre inf rieure Specifications Taille de la plaque de gel SE600 18x 16 cm L x H SE660 18 x 24 cm Gel taille SE600 14 ou 16 x 16 cm 16 cm avec 1 cm de large entretoises 14 cm avec 2 cm de large entretoises Gel taille SE660 14 ou 16 x 24 cm 16 cm avec 1 cm de large entretoises 14 cm avec 2 cm de large entretoises Max puissance 50 W Max tension 1000 V Max amp rage de 500 mA Max temp rature de 45 C Ecologique les conditions de fonctionnement Utilisation l int rieur 4 40 C Humidit 80 Altitude jusqu 2000 m Cat gorie d installation Il Le degr de pollution Il Dimension
55. ur r gler la gamme de tailles de prot ines Suivi de colorant Pauvre empilage Versez un plus grand gel de stacking Pour de meilleurs ne aff ter dans une r sultats permettent une hauteur d empilage gel de 2 5 fois zone de concentra la hauteur de l chantillon dans le puits tion dans le gel d empilement Qualit r actif liminer des solutions d acrylamide obsol tes et utiliser uniquement le grade le plus lev d acrylamide La pr paration des Lors de la pr paration des chantillons vitez d utiliser des chantillons solutions avec des concentrations lev es de sel e p30 probleme cause possible Resolution bande Conditions de pauvre fonctionnement remede Commencer l lectrophor se d s que l chantillon est charg d emp cher esp ces de faible poids mol culaire a partir de diffusion Effectuer la s paration en basse tension ou de courant pour r duire le chauffage par effet Joule Qualit r actif Utilisez uniquement les r actifs la plus haute qualit Pauvre empilage Utilisez des gels seulement qui ont t r cemment pr par s Ajouter un gel d empilement ou augmenter la taille du gel d empilement Pr parer la surface r solvant gel en commengant par le ringant avec empilage gel monomere avant de verser le gel d empilement pour assurer la continuit entre les gels V rifier les valeurs de pH des r solution et gel d empilement des solutions Ne reculez pas titrage
56. us sup rieurs cames cr te extr mit la plus courte pointant vers le bas B La position finale de came non repr sent doit tre verticale de facon que l ensemble s ins re dans la chambre inf rieure du tampon 4 wav e p18 D assemblage final Chambre tampon sup rieure o Rincer les deux chambres tampons avec de l eau et de l eau distill e avant chaque utilisation Remarque Avant d utiliser la premiere fois d monter l appareil et laver avec une solution dilu e d un d tergent de laboratoire et bien rincer d abord avec de l eau puis avec de l eau distill e Nettoyer l cart tout gel adh rant l ext rieur des sandwichs gel e Si vous utilisez un seul gel Bloquer la deuxieme fente sup rieure chambre tampon en installant le barrage tampon acrylique fourni avec l appareil Monter pinces sur le barrage en prenant soin d aligner les extr mit s et les bords de serrage de barrage Installez le dummy gel vis vers l ext rieur dans le second berceau dans la coul e de gel double Fixez le sandwich de gel a la chambre tampon sup rieur Tournez la chambre tampon sup rieure l envers et placer un joint fendu en deux cavit s porte sandwich Tant la fente dans le joint et la fente dans le creux doit s aligner Les deux joints a fente doit tre utilis e m me si vous utilisez un seul sandwich de gel Rainures le long de chaque fente aider a maintenir le
57. vec des valeurs de pH extr mes en particulier acide ne peut pas polym riser Oxyg ne Eliminer l oxyg ne de l environnement de gel Degas l solution de monom re de 5 a 10 min avant le coulage et superposer la surface du gel avec de l eau satur e en n butanol Temp rature R glez la temp rature de la solution de gel pour un minimum Mis align s pieces de 20 C en particulier pour les faibles gels T V rifiez que les plaques de verre les entretoises et les colliers sont align s et s integrent parfaitement dans le joint de chambre sup rieure V rifiez que les deux joints d tanch it sont centr es et que les ar tes de positionnement s adapter l int rieur des rainures Composants sales ou endommag es Chemin lectrique la terre en dehors terre Repartition de la chaleur V rifier que le joint n est pas endommag ou coinc Remplacer si n cessaire V rifier que la chambre tampon sup rieur n est pas d form d une exposition ant rieure une chaleur excessive Ajouter de la graisse de silicone pour sceller plus ceillets d changeurs de chaleur V rifiez s il ya des fuites ou des fissures dans l changeur de chaleur Remplacer oeillets us s Remplir la chambre inf rieure du tampon au niveau appropri pour les sur les bords de la course Voir figure 8 page 20 Utilisez agitateur magn tique et un barreau d agitation pour garder un tampon bien m lang Une
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