ETUDE DE CINETIQUE ENZYMATIQUE PAR OXYMETRIE
Contents
1. Pas d adaptateur Etalonnage de la sonde oxym trique R glage Etape n 1 Tournez le bouton de pente au masiman 2 Taux d osyg ne mesur Positionner le bouton z ro rep r par le symbole ia du capteur oxym tre en milieu de course R gler le bouton pente rep r par le symbole ia de fa on obtenir 20 7 ou 20 8 l cran Cliquer sur le bouton Fermer Page 68 sur 83 Lancement de l acquisition Cliquer sur l onglet Echanges respiratoires Cocher la case IR si vous souhaitez faire appara tre l Intensit Respiratoire sans oublier de renseigner les cases Masse et Intervalle Cliquer sur le bouton d marrer Echan atoires IR IR moy GF 3 Mesures Donn es renseigner a 50 S Temps _ O0 00 mins 4 Masse 5 ke 02 esp 0 z I 20 ES Ventl 0 00 a niervale 2 amp D EAU a Donn es fournies 02 insp 20 9 CO 2 inep 0 00 Calculs IR moy 0 00 khikg OR oon Mesure du m tabolisme Echanges respiratoires Mat riel Suivre les instructions l cran Page 69 sur 83 2 Exemple de r sultat Ea i 012 1 021 0 4 0 2 0 1 t min s 0 48 1 00 1 12 1 24 o o d o 0 12 0 24 0 3 L i t imin 5 REMARQUES est important de v rifier que le taux d O2 soit de 20 7 ou 20 8 dans l enceinte avant de d marrer la mesure voir talonnage de la sonde Le logiciel fai2. Basculer l interrupteur du capteur oxym tre sur la position eau Remarque sur le logiciel l ic ne Oxym tre air va dispara tre de laxe des ordonn es cette fonctionnalit est pr vue pour viter les changements de calibre non voulus la s lection du calibre de la sonde tant d terminante pour la mesure de l O dissout dans l eau Replacer l ic ne Oxym tre Eau sur l axe des ordonn es 1 Oxym tre Eau C2 2 CO2m tre Eau Directe Directe 7 Directe 3 Directe COT Temps A Manuelle Basculer l interrupteur du capteur COm tre sur la position eau Replacer l ic ne CO m tre Eau sur laxe des ordonn es 1 Oxym tre Eau C2 2 CO2m tre Eau 5 Directe 5 Directe 7 Directe s Directe 9 Temps p 1 Oxym tre Eau Manuele Page 9 sur 83 Param trer la dur e d acquisition sur 10 min en cliquant sur l ic ne Temps sur l axe des abscisses m m e J 1 Oxym tre Eau 5 Directe Directe 7 Directe s Directe 1 Kf Manuele Temps 301 Nombre de points Acquisition continue L Te 2 00s NB on peut prolonger ventuellement l acquisition en cours de manipulation en se pla ant sur l axe des abscisses le curseur change d aspect double fl che il suffit alors de d placer la souris vers la gauche Page 10 sur 83 2 2 R alisat
3. 3 Directe FO Temps A Manuelle 1 Oxym tre Air i De m me positionner l ic ne Temps sur l axe des abscisses 1 Oxym tre Air a 5 Directe Directe 7 Directe Directe FO Temps F Manuelle Temps Page 30 sur 83 j Etalonnage de la sonde Cliquer sur l ic ne oxym tre sur l axe des ordonn es Cliquer ensuite sur l onglet mesure zi TS J i Oxym tre Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe s Directe FO Temps Manuelle 1 Oxym tre Air Grandeur Mesure Affichage Mettre la sonde dans l air Positionner le bouton z ro rep r par le symbole ia du capteur oxym tre en milieu de course R gler le bouton pente rep r par le symbole a de fa on obtenir 20 9 sur l onglet mesure brel Page 31 sur 83 k Param trage de la mesure Basculer l interrupteur du capteur oxym tre sur la position eau Remarque sur le logiciel l ic ne Oxym tre air va dispara tre de laxe des ordonn es cette fonctionnalit est pr vue pour viter les changements de calibre non voulus la s lection du calibre de la sonde tant d terminante pour la mesure de l O dissout dans l eau Replacer l ic ne Oxym tre Eau sur l axe des ordonn es ee a f 1 Oxym tre Eau D Directe 5 Directe 7 Directe Directe 9 Temps venuele Page 32 s
4. pour viter une interface d air b Positionner les 3 sondes sur le couvercle du bior acteur Positionner de pr f rence la sonde thanol au centre car elle est moins sensible l agitation NB Les sondes ne doivent pas toucher le fond de la cuve du bior acteur c Fermer les trous non utilis s gr ce aux bouchons pr vus cet effet d Brancher le bior acteur et lancer l agitation Acquisition ancer la mesure en cliquant sur le feu vert Page 23 sur 83 Lancement de l acquisition Mom de la manipulation anipulation 1 Apr s 4 5 minutes on peut proc der une injection de glucose via l orifice pr vu cet effet sur le bior acteur N B La quantit de glucose injecter d pend de la qualit et de la quantit de levure pr sente dans l enceinte Apr s une premi re injection de 1ml si le changement de pente n est pas significatif il ne faut pas h siter ajouter davantage de glucose Mettre un rep re sur l axe des temps en appuyant sur la barre d espace afin de marquer l injection on met en vidence l apparition d thanol apr s la disparition du dioxyg ne Pour afficher les courbes sur deux graphiques diff rents afin de pouvoir adapter les chelles il suffit de cliquer sur l ic ne affichage s lectionner la courbe thanol par exemple puis faire un clic droit cliquer ensuite sur Afficher en bas LC Manipulation 1 cozi en mg
5. courbe param trique et s lectionner Pente Donn es D but Fin Mesure sur le graphe Valeur du param tre Nouvelle courbe abscisse ordonn e D riv e Courbe param trique Portion Lissage Calculs pour les SVT Tracer Page 56 sur 83 Comme pr cis pr c demment le choix des valeurs des cases D but et Fin se fait directement sur le graphique l aide de l outil intervalle il suffit d aller sur le graphique pour voir appara tre une ligne verticale bleue correspondant au d but de l intervalle s lectionn Une fois le d but valid en faisant un clic gauche sur la souris vous pouvez s lectionner la fin de l intervalle en faisant de nouveau un clic gauche On s lectionne un intervalle qui convient l ensemble des courbes Cin tique enzymatique variation de O2 en fonction de substrat 0 001M in 1M Fe Lu bi in Faa t min s o 3 2 00 2 30 2 00 2 30 UT Les valeurs correspondantes aux diff rentes pentes apparaissent automatiquement dans le tableau v Donn es D but 4 13 Fin 15 14 Mesure sur le graphe Valeur du param tre 0 039500 0 502500 0 159553 0 272500 Pour chaque valeur dans le tableau on peut retirer le signe de la colonne Mesure sur le graphe si on souhaite obtenir des vitesses positives Page 57 sur 83 Dans la colonne Valeur du param tre il faut taper au clavier la valeur de la c
6. gl0 00 0 30 100 1 30 2 00 2 30 LE g 5 00 5 30 amp T0 6 20 Page 53 sur 83 positionner la premi re droite verticale au niveau de l injection puis faire un clic gauche Positionner la seconde droite verticale la fin de la courbe 1113 z Cin tique enzymatique variation de 02 en fonction de substrat 10 ca 9 0 001M ii ii 400 4 30 5 00 5 40 Fin de la Injection de la GOD courbe Les valeurs correspondantes cet intervalle apparaissent automatiquement dans les cases Intervalle Cocher les cases D caler la portion l origine et remplacer puis Tracer Page 54 sur 83 Portion de taux_O2 t en O2mg L Manipulation 1 Intervalle Valeurs correspondantes i l intervalle choisi Portion Mom Manipulation 1_P D caler la portion l origine Remplacer h D riv e Courbe param trique Lissage Calculs pour les SYT On obtient alors sur le graphique un d calage l origine de la courbe rouge 02mg Cin tique enzymatique variation de 02 en fonction de substrat taux 07 to C in t min s g 0 00 0 3 2 i e 23 THE 2 2 5 00 5 30 G 00 G 30 Page 55 sur 83 On proc de de la m me fa on avec les autres courbes pour obtenir le graphe suivant C 2mal Cin tique enzymatique variation de 02 en fonction de substrat taux 2 t f min s Retourner sur l onglet
7. liquide provoquera des d bordements sans cons quence lors de la mise en place du couvercle du bior acteur Eviter l injection trop brutale du ferricyanure de potassium qui risquerait de provoquer un art fact au niveau du trac de la courbe d O Cet art fact peut galement s observer si bulles d air dans le cath ter plac l extr mit de la seringue de 1 ml n ont pas t vacu es Page 37 sur 83 3 Un peu d histoire Vers 1900 l tat des connaissances sur la photosynth se pouvait tre repr sent par l quation suivante nn NE CO Ee CM AG 115 kcal 20 O2 ET r action endergonique qui ne peut tre r alis e que par l apport d nergie lumineuse capt e par la chlorophylle D s 1905 un chercheur britannique en physiologie v g tale F F Blackman interpr tait la forme des courbes de saturation lumineuse plateau de la courbe de l IP en fonction de l clairement au del de 10 000 Lux en mettant l hypoth se que la photosynth se est un m canisme deux tapes comportant une r action photochimique ou r action claire et une r action non photochimique ou r action sombre La r action sombre est enzymatique et plus lente que la r action claire ceci a pour cons quence qu aux intensit s lumineuses lev es la vitesse de la photosynth se d pend enti rement de la vitesse de la r action sombre La r action claire est peu ou pas sensible la temp rature contrairement la r a
8. rincer l eau distill e et laisser le syst me se stabiliser pendant quelques minutes dans l air la valeur affich e doit alors tre constante 4 Positionner le bouton pente situ droite du CO2m tre au maximum et r gler le bouton z ro situ gauche pour obtenir 0 00 dans Pair Calibre Grandeur Mesure Affichage Etalonnage VOTRE SONDE CO2 EST PRETE A L EMPLOI Page 78 sur 83 1 Mise en service de la sonde C02 Corps de la sonde D Electrode de verre T te de sonde Membrane Remplir la t te de sonde avec l lectrolyte pour sonde CO2 de telle sorte que l lectrolyte d borde lorsque la t te de sonde est viss e sur le corps de la sonde ce qui vitera la pr sence de bulles d air NE PAS CONFONDRE LES FLACONS D ELECTROLYTE ET D ACIDE CITRIQUE Page 79 sur 83 Remarque La pr sence d une grosse bulle peut tre d tect e en observant la valeur renvoy e par la sonde positionn e successivement t te en haut puis t te en bas la valeur fluctue si il y a une bulle Dans ce cas l d visser la t te de sonde compl ter avec de l lectrolyte puis revisser lentement 2 Polarisation de la sonde La polarisation de la sonde CO2 permet d obtenir une valeur du taux de CO2 qui soit stabilis e Pour
9. s lection du calibre de la sonde tant d terminante pour la mesure de l O dissout dans l eau Replacer l ic ne Oxym tre Eau sur l axe des ordonn es Oxym tre Eau CO 2me tre Eau Ethanol Directe Directe 7 Directe 3 Directe 1 Oxym tre Eau EN Yremps De m me basculer les interrupteurs des capteurs CO m tre et Ethanol sur la position eau et repositionner sur l axe des ordonn es Oxym tre Eau 2 CO2m tre Eau 3 Ethanal Directe Directe 7 Directe Directe 3 Ethanol EN remps Page 21 sur 83 Param trer la dur e d acquisition sur 10 min en cliquant sur l ic ne Temps sur l axe des abscisses ca f 1 Oxym tre Eau C2 2 CO2m tre Eau C2 3 Ethanol Directe 6 Directe 1 7 Directe ai ds 8 Directe Temps FO Temps A Manuelle Fonction du temps Synchronisation Dur e d acquisition 301 Nombre de points Acquisition continue Te 00 NB on peut prolonger ventuellement l acquisition en cours de manipulation en se pla ant sur l axe des abscisses le curseur change d aspect double fl che il suffit alors de d placer la souris vers la gauche Page 22 sur 83 5 R alisation de l exp rience a Remplir la cuve du bior acteur au 3 4 avec la solution de levure de fa on ce que cela d borde une fois le couvercle positionn
10. e cela vous permettra de conserver la t te de sonde dans les meilleurs conditions de conservation en conservant la membrane en milieu humide Conserver les sondes de pr f rence verticalement sec en prot geant le corps de la sonde tr s fragile avec un morceau de tuyau coup ou le capuchon fournit Page 75 sur 83 gt Une fois par an L lectrode de la sonde tant en argent des t ches noires d oxydation peuvent appara tre Pour y rem dier nettoyer en frottant l g rement l lectrode d argent l ammoniaque 0 1 M l aide d un chiffon doux puis rincer l eau distill e Electrode oxyd e Nettoyage l ammoniaque 0 1 M Electrode apr s nettoyage ATTENTION Ne pas plonger directement l lectrode dans l ammoniaque Eviter le contact avec l extr mit en verre de l lectrode Page 76 sur 83 6 TRUCS ET ASTUCES L lectrolyte pour sonde O2 est une solution de phosphate de sodium Na3PO4 50 g L Hors de la sonde on peut le conserver plusieurs ann es dans les conditions normales de temp rature et d humidit Avant son utilisation v rifier n anmoins qu il soit bien totalement translucide et qu il ne pr sente pas avec de reflets jaun tres lectrolyte p rim La sonde O2 est livr e avec des capuchons tr s utiles durant le transport en protection m canique Il est fortement d conseill de les utiliser quand la sonde est en service avec la t te d
11. faisant attention de ne pas transpercer la membrane Ce halot va se d coller facilement mais ne restera peut tre pas sur le coton tige Dans ce cas utilisez une pissette d eau distill e pour vacuer ce halot Page 82 sur 83 6 TRUCS ET ASTUCES L lectrolyte pour sonde CO2 est une solution d thyl ne glycol Hors de la sonde on peut le conserver plusieurs ann es dans les conditions normales de temp rature et d humidit Avant son utilisation v rifier n anmoins qu il soit bien totalement translucide et qu il ne pr sente pas avec de reflets jaun tres lectrolyte p rim La sonde CO2 est livr e avec des capuchons tr s utiles durant le transport pour prot ger les membranes des t tes de sonde Il est fortement d conseill de les utiliser par la suite conserver les sondes directement dans un b cher avec un fond d eau distill e car les surpressions et d pressions cr es chaque fois qu on ins re ou qu on retire la sonde fragilisent la membrane de la t te de sonde NE PAS UTILISER POUR STOCKER LES SONDES Si la valeur affich e est 0 12 avec le symbole DEB pour d bordement qui clignote proc der de la fa on suivante Grandeur Mesure Affichage e Mettre les boutons pente et z ro du CO2m tre au minimum D visser la t te de sonde et rincer l lectrode de verre l eau distill e jusqu ne plus observer le symbole DEB o Nettoyer l
12. oz e Points k Liaisons Epaisseur k Couleur Afficher en bas Suppression Propri t s Stopper la mesure en cliquant sur la croix rouge S cQuisition en cours Page 24 sur 83 6 Exemple de r sultats obtenus Le m tabolisme cellulaire des levures 02 02 mg 8 5 mg Rupture de pente injection de glucose mi PJ D sk en en 20 D 50 t min s 4 00 AUO 8 00 _ __ 10 00 12 00 14 00 16 00 0 60 0 55 0 50 Ethanol g L 0 45 0 40 0 35 0 30 0 25 0 20 0 15 0 10 t min s 0 05 2 00 400 6 00 8 00 10 00 12 00 14 00 16 00 NB Le palier observ sur le taux de CO2 correspond au d passement de la plage de mesure de la sonde CO2 dans un liquide ce d passement n endommage en rien la sonde Page 25 sur 83 LA REACTION DE HILL Niveau lyc e sup rieur Classe Terminale S Fiche professeur 1 Objectifs et principes Lors de la photosynth se il y a d gagement d O2 issu de l eau et le CO2 est r duit Cette r duction se d roule dans le chloroplaste et n cessite de l nergie L nergie lumineuse capt e par les pigments chlorophylliens est convertie en nergie chimique et il y a acquisition d un pouvoir r ducteur par les cellules La pr sence d un accepteur d lectrons oxyd qui serait r duit par les lectrons provenant de l eau en pr sence de lumi re peut tre envisag e Cette exp rience r action de Hill a pour but de v rifier
13. s leur pr paration dans des flacons 5 ml flacon pour le tampon double concentration et 100 ml flacon pour le tampon simple concentration R partir la solution oxydante dans des flacons bruns 10 ml flacon En d but de s ance s assurer que la centrifugeuse tourne avec toutes les gaines remplies ceci permet 5 postes de travail de disposer rapidement d au moins deux tubes avec culot de chloroplastes La r alisation de cette exp rience depuis l extraction des chloroplastes par les l ves est possible avec la dur e des s ances de TP de 2 heures en TS sp cialit SVT Par ailleurs la r alisation de la suspension de chloroplastes concr tise la r alisation de la technique de s paration par centrifugation souvent voqu e en biologie cellulaire au cours d une s ance o diverses capacit s de manipulation sont mises en uvre Cette s ance peut prendre sa place apr s la d couverte de l organisation et du r le des chloroplastes et la pr sentation des exp riences de Ruben et Kamen Avec l observation des chloroplastes cette exp rience permet de bien tablir la relation entre Structure et fonction phase claire au niveau des thylako des et phase sombre au niveau du stroma du chloroplaste 2 7 Probl mes ventuels Si la production d O en pr sence de lumi re et de ferricyanure est insuffisante utiliser plusieurs culots de chloroplastes Le volume de la cuve est de 10 ml et dans ce cas le volume total de
14. sur la position electrophy Connecter le cordon ECG EMG sur le capteur Electrophy Coller 3 lectrodes adh sives et relier le cordon ECG EMG comme indiqu sur le sch ma ci dessous Remarque Les lectrodes adh sives ont une dur e de vie qui est indiqu e sur le paquet ou une date de fabrication dans le cas de la date de fabrication les lectrodes sont valables 2 ans S agissant de mat riel m dical des lectrodes ayant pass cette date de quelques mois restent valables Il faut n anmoins veiller ne pas utiliser d lectrodes trop anciennes Dans tous les cas on veillera bien v rifier la pr sence de gel sur ces lectrodes avant de les coller sur la peau Remarque 2 je conseille de mettre la masse sur la mall ole c ble avec partie violette Ce qui vite les inversions avec les autres c bles rouge et jaune Page 60 sur 83 Brancher le martore lex sur le c t de l interface PRIMO Lancer l Atelier Scientifique pour les SVT Atelier Scientifique pour les SVT G n raliste pour les ae parametirer Fes A nieriace EX A de realser des acq et traitements vid d ulhser un taDiIeu O a d V rifier que l interface s lectionn e en bas gauche est bien la console PRIMO ou choix automatique Double cliquer sur l ic ne correspondante au module G n raliste pour les SVT Page 61 sur 83 2 Param trage de l acquisition Positionner le capteur Elec
15. vid o q uunser un taDIeulI Scientifique de disposer de l ensemble ges outlis de tra tement de l atelier scientifique SVT ae realiser un compie rengu E Primc Page 4 sur 83 V rifier que l interface s lectionn e en bas gauche est bien la console PRIMO ou choix automatique Double cliquer sur l ic ne correspondante au module G n raliste pour les SVT Dans la fen tre qui s ouvre vous pouvez faire appara tre le nom des capteurs connect s votre interface en positionnant la souris droite des capteurs jusqu l apparition d une double fl che Faire un clic gauche et d placer la souris vers la droite en maintenant ce clic m rim e 1 Oxym tre Air lt 2 CO2m tre Air 5 Directe 5 Directe 7 Directe 3 Directe O Temps A Manuelle Placer le capteur oxym tre air sur l axe des ordonn es en cliquant sur l ic ne Oxym tre Air puis en d pla ant la souris en maintenant ce clic Les 6 points d accroche sur laxe des ordonn es tant quivalents vous pouvez donc placer le capteur oxym tre sur celui de votre choix Oxym tre Air CO2m tre Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe 3 Directe COT 1 Oxym tre Air venuele Page 5 sur 83 De m me positionner le capteur CO m tre sur l axe des ordonn es o 1 Oxym tre Air ca 2 CO2m tre Air 5 Directe 6 Directe 7 Direct
16. 43000 9 4 Stroma l obscurit NADPH ATP 97000 TABLEAU Fixation du gaz carbonique l obscurit et la lumi re dans les chloroplastes par le stroma matrice jaun tre et par les granas membranes vertes contenant de la chlorophylle Ces exp riences ont tr s clairement montr que tous les transporteurs et enzymes n cessaires la formation des compos s r duits NADPH et d ATP au cours des transports des lectrons sous l action de la lumi re sont li s aux membranes du chloroplaste Les enzymes responsables de la fixation proprement dite du CO sont quant elles situ es dans le stroma amorphe et jaun tre Page 40 sur 83 ETUDE DE CINETIQUE ENZYMATIQUE PAR OXYMETRIE 1 Objectif Montrer la sp cificit de substrat et d action d un enzyme et faire l tude des facteurs influen ant la r action enzymatique Substrat temp rature pH 2 Oxydation du glucose par la glucose oxydase GOD La glucose oxydase est une enzyme catalysant l oxydation a robie du D glucose Cette oxydation consomme de l oxyg ne et produit du gluconolactone qui se transforme spontan ment en acide gluconique et du peroxyde d hydrog ne D glucose O H20 Acide D gluconique H20 C H 20O6 O HO C H 20 gt H0 On va donc mesurer la disparition de l oxyg ne en fonction du temps vitesse d une r action enzymatique Calcul de la vitesse de la r action enzymatique elle correspond la
17. H et trois mol cules d ATP Le r le des pyridines nucl otides et de l ATP dans la respiration cellulaire tait d j tabli l poque En 1951 trois laboratoires mirent en vidence la r duction photosynth tique de NADP en NADPH par des chloroplastes isol s avec production simultan e d O En 1954 Arnon Allen et Whatley ont r alis une photosynth se sans cellule c est dire l assimilation de CO et la production d O par des chloroplastes d pinard isol s En 1958 Arnon et ses collaborateurs d montr rent en s parant physiquement les deux phases que la phase claire de la r action globale de fixation et de r duction du CO en glucides se produit dans les lamelles granaires ou disques thylako des du chloroplaste alors que la phase sombre se d roule dans le stroma Ils ont clair des chloroplastes en l absence de CO et laiss se former de grandes quantit s de NADPH et d ATP avec production concomitante d oxyg ne Ils ont ensuite cass les chloroplastes et s par le stroma des lamelles qu ils ont jet es A l obscurit le stroma a t aliment en CO radioactif et les enzymes pr sentes ont effectu l assimilation du CO aboutissant aux m mes glucides que les chloroplastes entiers et les feuilles vertes intactes Page 39 sur 83 14 CO fix coups par minute 1 Stroma l obscurit 4000 2 Stroma l obscurit grana la a 96000 lumi re 3 Stroma l obscurit ATP
18. JEULIN PROTOCOLES EXAO LOGICIEL ATELIER SCIENTIFIQUE POUR LES SVT CONSOLE ESAO PRIMO PAGE 3 LA PHOTOSYNTHESE module g n raliste PAGE 14 MISE EN EVIDENCE DU METABOLISME CELLULAIRE DES LEVURES module g n raliste PAGE 26 LA REACTION DE HILL module g n raliste PAGE 41 ETUDE DE CINETIQUE ENZYMATIQUE PAR OXYMETRIE LA GLUCOSE OXYDASE module g n raliste PAGE 60 ETUDE DU REFLEXE MYOTATIQUE module g n raliste PAGE 66 ETUDE DU METABOLISME HUMAIN module d di PAGE 71 LA SONDE 02 MODE D EMPLOI PAGE 77 LA SONDE CO2 MODE D EMPLOI Page 2 sur 83 LA PHOTOSYNTHESE Niveau lyc e sup rieur Classe Terminale S Fiche professeur 1 Objectifs et principes Mise en vidence des changes gazeux chez la plante en pr sence et en absence de lumi re Montrer que les v g taux chlorophylliens utilisent l nergie lumineuse ainsi que le CO pour transformer la mati re min rale en mati re organique CO H 0 TE CH 0 O2 avec CH 0 glucides L intensit photosynth tique est mise en vidence par la mesure de la concentration en O et en CO du milieu ici la cuve du bior acteur qui donnera par calcul la consommation production de ces gaz au cours des phases sombres et phases claires de l exp rimentation On alternera phase sombre respiration et phase claire photosynth se en ouvrant ou fermant les volets du bior acteur Cette exp rimentation se fait dans l
19. allure CO2 On pose la sonde sur la table 1 3 On comment souffler 0 8 1 4 Si la courbe obtenue pr sente un aspect diff rent proc der de la fa on suivante Nettoyer l lectrode de verre l thanol 95 l aide d un chiffon doux et laisser s vaporer Remettre de l lectrolyte neuf dans la t te de sonde puis revisser lentement Changer la t te de sonde si la nouvelle courbe obtenue n est toujours pas correcte Page 81 sur 83 5 Entretien et conservation gt Durant toute l ann e Il faut TOUJOURS conserver la sonde CO2 avec l lectrolyte l int rieur de la t te de sonde Il est recommand de la positionner verticalement dans un b cher sec gt Une fois par an D visser la t te de sonde Vider l lectrolyte de la t te de sonde Rincer la t te de sonde l eau distill e Nettoyer en frottant l g rement l lectrode en verre l thanol 95 l aide d un chiffon doux pr alablement imbib et laisser s vaporer Remplir la t te de sonde avec de l lectrolyte Revisser la t te de sonde sur le corps de la sonde Conserver les sondes verticalement dans un b cher Au niveau de la t te de sonde Il se peut que vous observiez par transparence un halot graisseux l int rieur de la t te de sonde Pour d coller ce halot utilisez un coton tige imbib d thanol 95 en tournant le coton tige mais en
20. ant r duits photochimiquement Cependant les chloroplastes ne parvenaient pas r duire le CO qui est l accepteur d lectrons naturel de la photosynth se Ce ph nom ne connu maintenant sous le nom de r action de Hill consiste en un transfert d lectrons sous l action de la lumi re de l eau vers des oxydants non physiologiques r actifs de Hill contre le gradient de potentiel chimique L int r t de la r action de Hill est de d montrer que la production d oxyg ne par la photosynth se se fait s par ment de la r duction du gaz carbonique En 1941 Ruben et Kamen en Californie prouv rent que l oxyg ne produit au cours de la photosynth se provenait de la d composition de l eau Ils ont plac des cellules photosynth tiques dans de l eau enrichie en oxyg ne O isotope de l oxyg ne L oxyg ne d gag avait la m me composition isotopique que l oxyg ne de l eau et cette composition n tait pas celle de l oxyg ne du gaz carbonique utilis CO 2HO OCHO HO Kamen et Ruben ont galement d couvert le carbone 14 C isotope radioactif du carbone qui a servi Bassham Benson et Calvin en Californie pour suivre le cheminement du carbone dans la photosynth se Calvin et ses collaborateurs ont montr que la r duction du gaz carbonique en glucides tait le fait de r actions enzymatiques sombres et que pour r duire une mol cule de CO il fallait deux mol cules de pyridine nucl otide r duit NADPH2 R
21. arre d espace afin de marquer le changement de condition de lumi re Laisser se d rouler l exp rience environ 5 min la lumi re puis refermer les volets laisser se d rouler l exp rience environ 5 min l obscurit puis ouvrir nouveau les volets Multiplier les alternances lumi re obscurit Pour afficher les courbes sur deux graphiques diff rents afin de pouvoir modifier les chelles il D suffit de cliquer sur l ic ne affichage s lectionner la courbe CO et puis faire un clic droit cliquer ensuite sur Afficher en bas E D Manipulation 1 E i O2 t Points Liaisons k Epaisseur d Couleur Suppression Propri t s Page 12 sur 83 Stopper la mesure en cliquant sur la croix rouge CSS NH Acquisition en cours 2 3 Exemple de r sultats attendus Ateher Scientifique Photosynth se 02 C02 lab 1 fey Fichier Edition Acquistion Insertion Affichage Outils Compte Rendu Fen tre 7 Ea aa S E a CNET ME TE S D Pana ha T as E 18 io a da 14 Ts 12 IE ol r Ci S 25 T 6 20 wu 1 5 4 4 0 z 0 5 0 12 0 24 0 36 41 TE Ci aE ai i pi bad T 5 4 3 2 4 0 12 0 24 0 36 0 48 WBE Graphique Afficheur Aide t h min t himin 1 00 1 12 1 24 rdonn es Page 13 sur 83 MISE EN EVIDENCE DU METABOLISME CELLULAIRE DES LEVURES CO 1 Objectif Montrer que les levures respirent et montrer que le
22. auss e car les muscles ne seraient pas d contract s Page 65 sur 83 ETUDE DU METABOLISME HUMAIN Niveau lyc e Fiche professeur 1 Protocole exp rimental Brancher le capteur Ventilation sur l interface PRIMO Faire le montage ci dessous Lancer l Atelier Scientifique pour les SVT A Ideo Atelier Scientifique pour les SVT CERI mL Erdu e Les changes gazeux respiratoires chez l homme Cette activit a pour but de mettre en vidence les changes gazeux respiratoires chez l homme lors de la respiration De plus elle permet une approche du m tabolisme associ ainsi que les facteurs ayant une influence sur celui ci A Page 66 sur 83 Double cliquer sur lic ne correspondante au module Les changes gazeux respiratoires chez l homme Cliquer sur suite Etude des changes gazeux respiratoires chez l homme Choix des modules F Valeurs Num riques Echanges w z respiratoires Mesure du m tabolisme On peut soit travailler avec une sonde O soit avec une sonde CO ou les deux en m me temps Dans le cas pr sent on ne va utiliser qu une sonde O3 Mat riel Oxym tre Ventilation CO2 m tre Pas d adaptateur Page 67 sur 83 Etalonnage de la sonde O2 Mettre la sonde dans l air Cliquer sur le bouton r glage puis sur le bouton suite Mat riel C aum tr Ventilation C0 2 m tre
23. btenir 20 9 sur l onglet mesure Page 18 sur 83 Etalonnage de la sonde CO Cliquer sur l ic ne CO m tre sur l axe des ordonn es Cliquer ensuite sur l onglet mesure E AT 1 Oxym tre Air Ca 2 CO2m tre Air LD Ethanol Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe s Directe 2 CO2m tre Air CO rers Grandeur Mesure Affichage Manuelle Mettre la sonde CO dans l air Positionner le bouton pente rep r par le symbole du capteur CO m tre au maximum R gler le bouton z ro rep r par le symbole ia de fa on obtenir 0 00 sur l onglet mesure Page 19 sur 83 Etalonnade de la sonde thanol Cliquer sur l ic ne Ethanol sur l axe des ordonn es Cliquer ensuite sur l onglet mesure Gii 1 Oxym tre Air La 2 CO2m tre Air C2 3 Ethanol Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe Directe 3 Ethanol Air COT Grandeur Mesure Affichage Positionner le bouton pente rep r par le symbole ia du capteur Ethanol de fa on obtenir 0 sur l onglet mesure en laissant la sonde dans l air Page 20 sur 83 4 Param trage de la mesure Basculer l interrupteur du capteur oxym tre sur la position eau Remarque sur le logiciel l ic ne Oxym tre air va dispara tre de laxe des ordonn es cette fonctionnalit est pr vue pour viter les changements de calibre non voulus la
24. ce de l exp rimentation Brancher la sonde O sur le capteur oxym tre Connecter le capteur oxym tre sur l une des 4 entr es de l interface PRIMO V rifier que l interrupteur sur le capteur oxym tre est sur la position air Brancher la sonde CO sur le capteur CO m tre Connecter le capteur CO m tre sur l une des entr es de l interface PRIMO V rifier que l interrupteur sur le capteur COm tre est sur la position air Brancher la sonde thanol sur le capteur Ethanol Connecter le capteur Ethanol l une des entr es de l interface PRIMO V rifier que l interrupteur sur le capteur Ethanol est sur la position air Page 15 sur 83 Lancer l Atelier Scientifique pour les SVT AN 14 g li t V rifier que l interface s lectionn e en bas gauche est bien la console PRIMO ou choix automatique Double cliquer sur l ic ne correspondante au module G n raliste pour les SVT Dans la fen tre qui s ouvre vous pouvez faire appara tre le nom des capteurs connect s votre interface en positionnant la souris droite des capteurs jusqu l apparition d une double fl che Faire un clic gauche et d placer la souris vers la droite en maintenant ce clic FN TS i 1 Oxym tre Air lt 2 CO2m tre Air C2 3 Ethanol Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe 3 Directe rO Temps Page 16 sur 83 Placer le capteur oxym tre air sur l axe de
25. chro et l acquisition d marra d s qu on tapera avec le martoreflex sur le talon d Achille dans le cas du r flexe achill en g Attente de synchro Page 64 sur 83 3 R sultat obtenu Atelier Scientifique refmyo 1 E l 1 x E Fichier Edition Acquisition Insertion Affichage Outils Compte Rendu Fen tre l x D SAB8RB kml PRIE 86 1K2a lt S 10 E a LU Fe 70 60 50 40 30 20 10 tims D N 40 50 80 100 120 Q Y Ei 10 20 30 labscisse 0 gt 0 15 ls Tension ordonne 0 1159 gt 0 03066 V AATA Graphique Tableau Compte Rendu Afficheur Aide Ordonn es bscisse t 4 Probl mes possibles TRUCS ET ASTUCES e Les lectrodes se d collent d graisser la peau l alcool avant de coller les lectrodes ou utiliser des lectrodes permanentes e V rifier la date limite d utilisation des lectrodes adh sives e Sile trac appara t trop tass augmenter le gain l aide du potentiom tre de l adaptateur Electrophy e La ligne de base du trac n est pas horizontale le trac est perturb par l activit d autres muscles e Si vous poss dez une ancienne version du capteur lectrophy avec pile il est primordial que la pile soit suffisamment neuve ou charg e 80 minimum tension sup 8 4 V IMPORTANT veiller ce que les l ves ne soient pas en d s quilibre sur des tabourets trop hauts la mesure serait f
26. ction sombre cette sensibilit la temp rature est caract ristique des r actions enzymatiques Il faut bien comprendre que la r action dite sombre peut se produire aussi bien la lumi re qu l obscurit Avant 1930 nombre de chercheurs pensaient que la r action fondamentale de la photosynth se tait un fractionnement du gaz carbonique en carbone et oxyg ne sous l action de la lumi re et que le carbone tait ensuite r duit par l eau en glucides au cours d une autre s rie de r actions Deux d couvertes importantes modifient cette id e vers 1930 La premi re d couverte mit en vidence que certaines bact ries assimilaient le gaz carbonique et synth tisaient des glucides sans utiliser d nergie lumineuse par chimiosynth se En effectuant une tude comparative des photosynth ses v g tale et bact rienne le microbiologiste hollandais C B Van Niel montra que certaines bact ries pouvaient assimiler le gaz carbonique la lumi re sans produire d oxyg ne et qu en l absence d un substrat donneur d hydrog ne la photosynth se de ces bact ries tait stopp e Selon Van Niel la photosynth se pouvait tre repr sent e par l quation g n rale suivante o H2 A est le substrat oxydable lumi re CO F HA CH20 H2O 2A D AS Van Niel sugg ra que la photosynth se des plantes et algues vertes constituait un cas particulier o HA tait H2O et o 2A tait O Dans la photosynth se v g tal
27. d pinard refroidies dans le broyeur fines herbes ou dans un mortier avec un peu de sable dans un peu de tampon simple concentration ajouter et m langer le reste des 100 ml de milieu tampon simple concentration pH 6 5 Filtrer sur un tampon de gaze pour liminer les gros d bris dans un erlenmeyer NB vous pouvez galement utiliser une centrifugeuse r partir le filtrat dans les tubes de centrifugation et centrifuger pendant 5 min 1500 g Conserver les tubes contenant les suspensions de chloroplastes dans le bac de polystyr ne contenant de la glace pil e Les en sortir au moins 15 min avant l exp rimentation de mani re d bloquer les r actions enzymatiques V rification V rifier que les chloroplastes ne sont pas compl tement d truits et que la chlorophylle n est pas en solution ce qui entra nerait une fluorescence de la suspension Observer au microscope la pr sence de chloroplastes et l absence de cellules enti res La dur e de vie des chloroplastes tant tr s limit e dans le temps pr parer la suspension de chloroplastes juste avant l emploi 2 3 Montage a Brancher la sonde O sur le capteur oxym tre b Connecter le capteur oxym tre sur lune des 4 entr es de l interface PRIMO c V rifier que l interrupteur sur le capteur oxym tre est sur la position air Solution de chloroplastes A Solution de ferricyanure de potassium Page 28 sur 83 d Lancer l Atelier Scientifique pou
28. dans l enceinte par l un des emplacements situ s dans le couvercle du bior acteur Eviter d utiliser l emplacement central sous lequel se trouve l agitateur NB La sonde O2 ne doit pas toucher le fond de la cuve du bior acteur Brancher le bior acteur lancer l agitation et fermer les volets pour laisser la pr paration l obscurit Page 34 sur 83 Lancer la mesure en cliquant sur le feu vert puis en cliquant sur le bouton Lancer Lancement de l acquisition Nom de la manipulation Laisser se d rouler l exp rience pendant environ 1 min l obscurit Allumer la lampe la placer une dizaine de cm du bior acteur puis ouvrir les volets Laisser se d rouler l exp rience environ 1 min la lumi re Au temps 3 min injecter l aide d une seringue de 1 mi munie d un cath ter 0 5 mi de ferricyanure de potassium dans la cuve du bior acteur NB un petit orifice est pr vu cet effet dans le couvercle du bior acteur ce qui vite d ouvrir le couvercle Mettre un rep re sur l axe des temps en appuyant sur la barre d espace puis laisser se d rouler l exp rience pendant 2 min puis refermer les volets Laisser se d rouler l exp rience environ 2 min l obscurit puis ouvrir les volets Laisser se d rouler l exp rience la lumi re pendant 2 min Au temps 8 min injecter une nouvelle dose de ferricyanure de potassium Terminer la lumi re Stopper la mesure e
29. e s Directe FO Temps 2 CO2m tre Air K Menele Positionner l ic ne Temps sur l axe des abscisses Cxym tre Air ca 2 CO2m tre Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe Directe Temps eue Page 6 sur 83 Etalonnage de la sonde Cliquer sur l ic ne oxym tre sur l axe des ordonn es Cliquer ensuite sur l onglet mesure 1 Oxym tre Air ga 2 CO2m tre Air 5 Directe 5 Directe 7 Directe s Directe Ores 1 Oxym tre Air Manuelle Grandeur Mesure Affichage Mettre la sonde dans l air Positionner le bouton z ro rep r par le symbole ia du capteur oxym tre en milieu de course R gler le bouton pente rep r par le symbole de fa on obtenir 20 9 sur l onglet mesure Page 7 sur 83 Etalonnage de la sonde CO Cliquer sur l ic ne CO m tre sur l axe des ordonn es Cliquer ensuite sur l onglet mesure Ke J i Oxym tre Air ca 2 CO2m tre Air Directe 6 Directe 7 Directe s Directe FO Temps Fo 2 CO2m tre Air v Manuelle Grandeur mesure Affichage Mettre la sonde CO dans l air Positionner le bouton pente rep r par le symbole du capteur CO m tre au maximum R gler le bouton z ro rep r par le symbole ia de fa on obtenir 0 00 sur l onglet mesure Page 8 sur 83 Param trage de la mesure
30. e l op ration fondamentale serait le fractionnement de l eau en un oxydant OH et un r ducteur H Le r ducteur H servirait alors la r duction du CO pour aboutir aux constituants de la cellule cependant que l oxydant OH serait limin par une r action o il y aurait lib ration d oxyg ne et formation d eau H20 Selon Van Niel l quation globale de la photosynth se des plantes vertes est donc lumi re CO gt 4H0 gt NCkO 810 O D A Page 38 sur 83 Cette quation est la somme de trois tapes distinctes suivantes DE PE LD RE o mo gt koa fiomenisvens O ECO A gt OOOO GL HOH La s quence des r actions montre clairement que l oxyg ne produit vient de l eau et non du gaz carbonique En 1937 la seconde observation importante fut r alis e par R Hill de l universit de Cambridge Il s para les particules photosynth tiques de feuilles vertes chloroplastes des particules respiratoires mitochondries par centrifugation diff rentielle d un homog nat de tissus de feuilles Une fois clair s seuls les chloroplastes de Hill ne produisirent pas d oxyg ne peut tre parce qu ils avaient t endommag s par la s paration par contre lorsque des accepteurs d lectrons oxydants comme le ferrioxalate de potassium ou le ferricyanure de potassium furent ajout s la suspension il y eut production d O raison d une mol cule pour quatre quivalents d oxyd
31. e sonde Conserver les sondes directement dans un b cher avec un fond d eau distill e car les surpressions et d pressions cr es chaque fois qu on ins re ou qu on retire la sonde fragilisent la membrane de la t te de sonde NE PAS UTILISER POUR STOCKER QUANT IL Y A PRESENCE DE LA T TE DE SONDES Ce Capuchon est utiliser lors des p riodes ou la sonde ne sert pas en protection m canique du corps de la sonde partie en argent et verre La t te de sonde doit tre chang e une fois par an en moyenne dans des conditions normales d utilisation Il est important de ne pas laisser connecter en permanence la sonde et l adaptateur l interface ExAO si celle ci est aliment e par une alimentation externe observation d un d p t noir dans la t te de sonde et diminution de la dur e de vie de la sonde Page 77 sur 83 ANNEXE 2 SONDE CO2 Mode d emploi Pour d marrer rapidement 1 Mettre en place l ensemble du mat riel sonde C02 Adaptateur CO2m tre Interface 2 Remplir la t te de sonde avec l lectrolyte pour sonde ExAO et lancer votre logiciel d acquisition lectrolyte pou Eon 2 CO2 de telle sorte que l lectrolyte d borde lorsque la t te de sonde est viss e sur le corps de la sonde Cette manipulation aura 2 effets Etre sure qu il n y a pas de bulle d aire V rifier l tanch it de la membrane et l absence de fuite Visser la t te de sonde
32. eau Mode op ratoire Dur e de pr paration 20 min Dur e de r alisation en classe 30 min 2 Mode op ratoire 2 1 Protocole exp rimental a Pr paration du mat riel biologique On utilisera de pr f rence de la Cabomba vigoureuse que l on aura pris soin de placer quelques jours avant dans un aquarium sous un clairage important On peut galement utiliser du C ratophylle ou encore des Elod es attention la vari t sauvage pr lev e en milieu naturel en hiver sera en tat de vie ralentie et ne permettra pas une mise en vidence nette de la photosynth se Un morceau de plante environ deux feuilles sera n cessaire pour chaque poste exp rimental 2 feuilles Page 3 sur 83 b Montage exp rimental Brancher la sonde O sur le capteur oxym tre Connecter le capteur oxym tre sur l une des 4 entr es de l interface PRIMO V rifier que l interrupteur sur le capteur oxym tre est sur la position air Brancher la sonde CO sur le capteur CO m tre Connecter le capteur CO m tre sur l une des entr es de l interface PRIMO V rifier que l interrupteur sur le capteur CO m tre est sur la position air Lancer l Atelier Scientifique pour les SVT Atelier Scientifique pour les SVT e co S l A D D er gt G n raliste pour les SVT Ce mode g n raliste permet de parametrer librement l acquisition avec une interface EX AO de r aliser des acquisitions et traitements
33. ges oullis de tra ement de l atelier scientifique SVT ae r aliser un compie rengu aE Primo e V rifier que l interface s lectionn e en bas gauche est bien la console PRIMO ou choix automatique f Double cliquer sur l ic ne correspondante au module G n raliste pour les SVT Page 42 sur 83 g Dans la fen tre qui s ouvre vous pouvez faire appara tre le nom des capteurs connect s votre interface en positionnant la souris droite des capteurs jusqu l apparition d une double fl che Faire un clic gauche et d placer la souris vers la droite en maintenant ce clic E 2 5 Directe 6 Directe 7 Directe Directe COT venue 1 Oxym tre Air h Placer le capteur Oxym tre Air sur l axe des ordonn es en cliquant sur l ic ne Oxym tre Air puis en d pla ant la souris en maintenant ce clic Les 6 points d accroche sur laxe des ordonn es tant quivalents vous pouvez donc placer le capteur oxym tre sur celui de votre choix Oxym tre Air 5 Directe 5 Directe 7 Directe 3 Directe rares p Manuelle 1 Oxym tre Air i De m me positionner l ic ne Temps sur l axe des abscisses 1 Oxym tre Air 5 Directe Directe 7 Directe 3 Directe Temps Page 43 sur 83 j Etalonnage de la sonde Cliquer sur l ic ne oxym tre sur l axe des ordonn es Cl
34. i re l obscurit 2 6 Exemple de r sultats attendus 7 a Taux de 02 c02 02mg taux_O t min s Page 36 sur 83 Explication et interpr tation de ces r sultats L augmentation de la concentration en dioxyg ne dans les phases d clairement et de pr sence d accepteur d lectrons correspond l activit photosynth tique phase claire Une diminution de la concentration en dioxyg ne dans les phases d obscurit ou d absence d accepteurs d lectrons correspond l activit respiratoire En r alit l activit photosynth tique plus importante masque l activit respiratoire Les mitochondries pr sentes dans le culot assurent en permanence l activit respiratoire Astuces Maintenir au froid le bol du broyeur la cuve du bior acteur les tampons ainsi que les feuilles de v g tal jusqu au moment de la r alisation de l exp rience l est possible d utiliser d autres tissus v g taux que l pinard pour r aliser l extraction des chloroplastes tels le poireau le cresson l ortie l oseille sauvage Rumex L injection de ferricyanure peut tre augment e mais des injections trop importantes gt 2 ml semblent bloquer parfois tout le fonctionnement Les 500 mi de tampon double concentration r alis s au d part permettent de disposer de solutions tampons simple et double concentration pour une s ance de TP avec 9 postes de travail R pariir les solutions tampons d
35. ion de l exp rience a Remplir la cuve du bior acteur au 2 3 avec de l eau temp rature ambiante attention ne pas utiliser d eau distill e les plantes ont besoin de min raux Prendre de l eau de l aquarium dans lequel les plantes sont maintenues ou de l eau du robinet qu on aura laiss temp rature ambiante b Couper des fragments de Cabomba en petits morceaux de 2 3 mm et les d poser dans la cuve du bior acteur c Placer les sondes par les emplacements situ s dans le couvercle du bior acteur en vitant l emplacement central sous lequel se trouve l agitateur NB La sonde O2 et CO2 ne doivent pas toucher le fond de la cuve du bior acteur d Fermer les trous non utilis s gr ce aux bouchons pr vus cet effet e Fermer les volets du bior acteur f Brancher le bior acteur et lancer l agitation NB On peut ajouter un thermom tre et un luxm tre afin de v rifier que la temp rature est bien rest e constante La mesure de la lumi re permet de rep rer les p riodes d clairement ou d obscurit Electrode Elettrodo Page 11 sur 83 Acquisition ancer la mesure en cliquant sur le feu vert Lancement de l acquisition Nom de la manipulation Apr s 3 4 minutes l obscurit Allumer la lampe la placer une dizaine de cm du bior acteur et la diriger vers la fen tre du bior acteur puis ouvrir les volets Mettre un rep re sur l axe des temps en appuyant sur la b
36. iquer ensuite sur l onglet mesure ce i 1 Oxym tre Air 5 Directe 6 Directe 7 Directe s Directe FO Temps Manuelle 1 Oxym tre Air Grandeur Mesure Affichage Mettre la sonde dans l air Positionner le bouton z ro rep r par le symbole ia du capteur oxym tre en milieu de course R gler le bouton pente rep r par le symbole a de fa on obtenir 20 9 sur l onglet mesure Page 44 sur 83 k Param trage de la mesure Basculer l interrupteur du capteur oxym tre sur la position eau Remarque sur le logiciel l ic ne Oxym tre air va dispara tre de laxe des ordonn es cette fonctionnalit est pr vue pour viter les changements de calibre non voulus la s lection du calibre de la sonde tant d terminante pour la mesure de l O dissout dans l eau Replacer l ic ne Oxym tre Eau sur l axe des ordonn es TT 1 Oxym tre Eau 5 Directe 5 Directe 7 Directe 3 Directe Temps venue Page 45 sur 83 Param trer la dur e d acquisition sur 5 min en cliquant sur l ic ne Temps sur l axe des abscisses Ca d 1 Oxym tre Eau 5 Directe 6 Directe Directe Directe Temps Dur e d acquisition 201 2 Acquisition continue C Te 1 00s Nombre de points NB on peut prolonger ventuellement l acquisition en cours de manipulation en se pla an
37. l existence de cette phase photochimique ou phase claire de la photosynth se Dans les chloroplastes l accepteur d lectrons physiologique est le NADP Lors du broyage destin extraire les chloroplastes ces derniers sont l s s et le NADP diffuse dans le milieu et dispara t La cha ne r actionnelle est donc bloqu e L adjonction d un accepteur d lectrons ici le ferricyanure de potassium r tablit la cha ne r actionnelle et donc le d gagement d O2 lors de l ilumination Cette exp rience r alis e pour la premi re fois par Hill d montre la r alit des processus d oxydo r duction li s la conversion de l nergie lumineuse en nergie chimique La mesure de l volution du taux de O production de O activit photosynth tique dans une suspension de chloroplastes se fait en pr sence ou en absence d un accepteur d lectrons le ferricyanure de potassium Fe gt Fe et en alternant des phases d clairement et d obscurit Page 26 sur 83 2 Mode op ratoire Dur e de pr paration de la s ance 2 h pour la mise en place du mat riel des postes de travail la pr paration des solutions chimiques le r glage des sondes les tests Dur e de r alisation en classe TP l ve 1 h 30 pour la r alisation et O h 30 pour l exploitation des r sultats AAAAAAAAAAAAAAA A A Important Tout le mat riel doit tre refroidi r frig rateur au moins 2 heures avant l extraction le bol du mor
38. lectrode de verre l thanol 95 l aide d un chiffon doux et laisser s vaporer Nettoyer la t te de sonde avec un coton tige imbib d thanol 95 e Remettre de l lectrolyte neuf dans la t te de sonde puis revisser tr s lentement e Changer la t te de sonde si DEB appara t toujours La t te de sonde doit tre chang e une fois par an en moyenne dans des conditions normales d utilisation Page 83 sur 83
39. n cliquant sur la croix rouge DR _ Acquisition en cours Page 35 sur 83 2 5 Variations du protocole Les tubes de centrifugation contenant les chloroplastes qui ont s diment peuvent tre fournis d j pr ts aux l ves dans ce cas la manipulation d bute Pour r cup rer les chloroplastes Les p riodes de mesures la lumi re et l obscurit peuvent tre allong es si les variations attendues ne sont pas constat es I est possible de terminer la mesure l obscurit Il est pr f rable d afficher en d but de manipulation une dur e de mesure sup rieure 10 min Attention cependant ne pas faire durer trop longtemps la mesure la lumi re en pr sence de ferricyanure de potassium car le d gagement d O2 peut saturer le milieu et provoquer le blocage de la sonde La r action de Hill peut tre r alis e dans l ancien bior acteur Dans ce cas le volume de l enceinte est r gler 2 5 ml Le volume d eau mis dans l enceinte au d part est de 1 5 ml et la pression osmotique initiale est r tablie en ajoutant 1 5 ml de tampon double concentration Une injection de 0 2 mli de ferricyanure de potassium suffit pour observer un d gagement d O2 Au d part une l g re baisse du taux d O l obscurit est g n ralement observ e et elle se poursuit la lumi re La remont e du taux d O un peu apr s l injection du ferricyanure de potassium s interrompt lorsqu on passe de la lum
40. oncentration en substrat correspondante Notez le point de couleur qui appara t c t de la case s lectionn e permettant de retrouver sur le graphe la courbe associ e Pente np Donn es D but Fin 15 14 Mesure sur le graphe Valeur du param tre Concentration du substrat associ e Le Rep re correspondant la couleur de la courbe Suppression du signe Dans la partie Nouvelle courbe entrez les param tres qui seront repr sent s en abscisse et en ordonn e ainsi que leurs unit s Cliquer sur Tracer Nouvelle courbe absosse ordonn e grandeur Concentration Y commentaire Tracer f Page 58 sur 83 4 2 R sultat obtenu Cin tique enzymatique variation de 02 en fonction de substrat 0 001M t min s T E F 0 15 Concentration roll La vitesse initiale Vi de la r action enzymatique est d autant plus lev e que la concentration en substrat est forte Peu peu Vi tend vers une vitesse maximale pour une concentration en substrat optimale La courbe Vi f Substrat montre l existence d une relation de proportionnalit entre la vitesse de la r action bio catalys e et les faibles concentrations en substrat Page 59 sur 83 ETUDE DU REFLEXE MYOTATIQUE Niveau lyc e 1ere S Physiologie Fiche professeur 1 Protocole exp rimental Brancher le capteur Electrophy sur l interface PRIMO basculer si n cessaire l interrupteur
41. polariser votre sonde CO2 il suffit de connecter l ensemble de votre mat riel sonde CO2 CO2m tre interface ExAO et de laisser le syst me se stabiliser quelques minutes dans l air la valeur du taux de CO2 observ e doit alors tre constante Remarque Lors de 2 s ances de TP successives il est inutile de polariser de nouveau la sonde 3 Etalonnage de la sonde CO2 Pourquoi talonner une sonde CO2 L talonnage de la sonde permet d obtenir une valeur absolue du taux de CO2 Il n est par cons quent pas n cessaire d talonner une sonde CO2 de fa on rigoureuse utilisation du m lange acide citrique et hydrog nocarbonate de sodium lorsqu on cherche mettre en vidence des variations du taux de CO2 ce qui est le cas pour les TP suivants e La photosynth se e La r action de HILL e Etude de cin tique enzymatique par oxym trie e Etude du m tabolisme humain e Physiologie de l effort e Etude de la respiration des levures Page 80 sur 83 e Comment talonner la sonde CO2 Positionner la sonde CO2 dans l air R gler le bouton pente rep r par le symbole M du CO2m tre au maximum Ajuster le bouton z ro rep r par le symbole D dd pour obtenir 0 00 Calibre Grandeur Mesure Affichage Etalonnage 4 Test de la sonde Param trer une acquisition sur 3 minutes Tenir la sonde entre les mains et souffler dessus Vous devez obtenir une courbe qui pr sente ce type d
42. r les SVT Atelier Scientifique pour les SVT e co ji s x f G n raliste pour les SVT Ce mode g n raliste permet de param trer librement l acquisition avec une interface EX A O de r aliser des acquisitions et traitements vid o d utiliser un tableul scientifique de disposer de l ensemble des outils de traitement de l atelier scientifique SVT de r aliser un compte rendu E Primo e peu 2 f vun e V rifier que l interface s lectionn e en bas gauche est bien la console PRIMO ou choix automatique f Double cliquer sur l ic ne correspondante au module G n raliste pour les SVT g Dans la fen tre qui s ouvre vous pouvez faire appara tre le nom des capteurs connect s votre interface en positionnant la souris droite des capteurs jusqu l apparition d une double fl che Faire un clic gauche et d placer la souris vers la droite en maintenant ce clic f 1 Oxym tre Air 5 Directe w g 6 Directe 7 Directe 3 Directe COT Manuelle Page 29 sur 83 h Placer le capteur Oxym tre Air sur laxe des ordonn es en cliquant sur l ic ne Oxym tre Air puis en d pla ant la souris en maintenant ce clic Les 6 points d accroche sur l axe des ordonn es tant quivalents vous pouvez donc placer le capteur oxym tre sur celui de votre choix Oxym tre Air Directe 5 Directe 7 Directe
43. s levures produisent de l thanol en milieu ana robie On place une solution de levure dans un faible volume herm tique avec des sondes dioxyg ne dioxyde de carbone et thanol Rappel e La levure est un micro organisme champignon unicellulaire de forme variable capable d utiliser diverses mol cules organiques en particuliers des glucides pour en tirer de l nergie par respiration ou fermentation gr ce un quipement enzymatique sp cifique e La RESPIRATION est la d gradation compl te du glucose CeH nOs 6h 6C 0 oHG 2860 ET e La FERMENTATION alcoolique est la d gradation incompl te du glucose avec production d thanol et de dioxyde de carbone en absence de dioxyg ne Caf nis Ca SO 20 2 Protocole v Pr paration des levures Diluer environ 10 g de levures fra ches dans 1 litre d eau Placer le r cipient sur un agitateur magn tique avec un bulleur au minimum 48H les levures doivent tre affam es mais bien vivantes Il est important d utiliser un agitateur magn tique pour garder un milieu homog ne en levure et viter ainsi un pr l vement en surface qui contiendrait finalement peu de levure NB avec des levures lyophilis es 72 sachet par litre Attention si la concentration de levure est trop importante cela risque d obturer la membrane de la sonde O2 v Pr paration du glucose Pr parer une solution de glucose 50g L Page 14 sur 83 3 Mise en pla
44. s ordonn es en cliquant sur l ic ne Oxym tre Air puis en d pla ant la souris en maintenant ce clic Les 6 points d accroche sur l axe des ordonn es tant quivalents vous pouvez donc placer le capteur oxym tre sur celui de votre choix er 1 Oxvym tre Air lt 2 CO2m tre Air ga 3 Ethanol Air Directe 6 Directe 7 Directe s Directe 1 Oxym tre Air rem De m me positionner les capteurs CO m tre et Ethanol sur l axe des ordonn es G J 1 Oxym tre Air lt 2 CO2m tre Air ga 3 Ethanol Air Directe 5 Directe 7 Directe 3 Directe 3 Ethanol Air FO Temps Positionner l ic ne Temps sur l axe des abscisses a 1 1 Oxym tre Air C2 2 CO2m tre Air lt 3 Ethanol Air 5 Directe 5 Directe 7 Directe 3 Directe Temps COren Page 17 sur 83 Etalonnage de la sonde O Cliquer sur l ic ne oxym tre sur l axe des ordonn es Cliquer ensuite sur l onglet mesure TS Y 1 Oxym tre Air La 2 CO2m tre Air C2 3 Ethanol Air Directe 6 Directe 7 Directe 2 Directe 1 Oxym tre Air EOT Grandeur Mesure Affichage E es Mettre la sonde dans l air Positionner le bouton z ro rep r par le symbole ia du capteur oxym tre en milieu de course R gler le bouton pente rep r par le symbole a de fa on o
45. s temps de la r action une fois l injection de la GOD substrat qui correspond la concentration en substrat Cliquer sur l ic ne traitement des donn es IN 4 amp _ S lectionner l onglet courbe param trique wt Donn es Valeur e Mesure sur le graphe Valeur du param tre Nouvelle courbe abscisse ordonn e Tracer D rin e Courbe param trique Portion Lissage Calculs pour les SWT S lectionner l aide de l ascenseur pente comme mode de d termination pour pouvoir mesurer directement les pentes vitesses initiales des diff rentes courbes acquises Page 50 sur 83 D but Fin 44 5 Mesure sur le graphe Valeur du param tre Nouvelle courbe abscisse ordonn e Tracer Le choix des valeurs des cases D but et Fin se fait directement sur le graphique l aide de l outil intervalle il suffit d aller sur le graphique pour voir appara tre une ligne verticale bleue correspondant au d but de l intervalle s lectionn Une fois le d but valid en faisant un clic gauche sur la souris vous pouvez s lectionner la fin de l intervalle en faisant de nouveau un clic gauche N B le calcul de la pente se faisant simultan ment pour l ensemble des courbes il est indispensable que l intervalle s lectionn corresponde des d croissances strictes des diff rentes courbes 10 z Cin tique me variation de O2 en fonction de substra
46. ser de nouveau la sonde 3 Etalonnage de la sonde O2 e Pourquoi talonner une sonde O2 L talonnage de la sonde permet d obtenir une valeur absolue du taux d O2 Il n est par cons quent pas n cessaire d talonner une sonde O2 de fa on rigoureuse utilisation de la solution z ro lorsqu on cherche mettre en vidence des variations du taux d O2 ce qui est le cas pour les TP suivants e La photosynth se e La r action de HILL e Etude de cin tique enzymatique par oxym trie e Etude du m tabolisme humain e Physiologie de l effort L utilisation de l talonnage avec la solution z ro n est pr conis que quelque fois par an une Remarque Pour l tude de la respiration des levures il peut s av rer judicieux d talonner la sonde O2 avec la solution z ro pour viter d obtenir une valeur l g rement n gative du taux d 02 une fois tout oxyg ne consomm par les levures e Comment talonner la sonde O2 Positionner la sonde O2 dans l air R gler le bouton z ro rep r par le symbole D de l oxym tre en milieu de course Ajuster le bouton pente rep r par le symbole Da pour obtenir 20 9 Calibre Grandeur Mesure Affichage Etalonnage Page 73 sur 83 4 Test de la sonde Param trer une acquisition sur 1 ou 2 minute Poser la sonde sur le bord de la paillasse ou sur une potence pour viter toutes interf rences li e aux mouvements du c ble Avoir
47. t ae CE L intervalle s lectionn n est pas adapt car la courbe bleue 0 1M n est pas 20 strictement d croissante sur cet intervalle t min s 500 5 20 6 00 Page 51 sur 83 Cin tique enzymatique variation de O2 en fonction de substrat pre EE gta Ca ET O2 02mg Fi L intervalle s lectionn n est pas adapt car les courbes rose 0 5M et jaune 1M ne sont pas strictement d croissantes sur cet intervalle Pour faciliter le traitement on va donc au pr alable faire correspondre le temps correspondant l injection du glucose au temps t 0 et cela pour chaque courbe S lectionner l onglet Portion puis le nom de la premi re courbe 0 001M Portion de taux_O2 t en O2mg L Manipulation 1 Intervalle de 129 8 387 3 en 5 Portion Nom Manipulation 1_F _ D caler la portion l origine _ Remplacer Tracer Portion Lissage Calculs pour les SYT D riv e Courbe param trique Page 52 sur 83 Le choix de l intervalle se fait directement sur le graphique s lectionner l outil intervalle en faisant un clic droit sur la courbe 111 ju a n n j z Cin tique enzymatique variation de O2 en fonction de substrat 10 er o a pam 8 i A Normal 2 Pointeur Droite 4 Zoom Tangente bomme gt Fr quence Annotation 1 t min s nea a Repr sentation i i pea
48. t la soustraction 20 9 taux mesurer dans l enceinte il est donc important de ne pas r gler 20 9 car la mesure n est pas forc ment stable et peut basculer 21 ce ui entrainera un graphique invers n gatif D o l int r t de r gler 20 7 ou 20 8 pour pallier ce probl me ventuel est indispensable de bien a rer l enceinte de respiration humaine entre 2 exp riences pour tre de nouveau 20 7 ou 20 8 Bien v rifier le branchement du clapet anti retour voir photo du montage Bien fixer la turbine dans le capteur respiro l aide du manchon en plastique fourni voir photo du montage ANNEXE 1 SONDE O2 Mode d emploi Pour d marrer rapidement 1 Mettre en place l ensemble du mat riel sonde 02 Adaptateur Oxym tre Interface ExAO et lancer votre logiciel d acquisition 2 Remplir la t te de sonde avec l lectrolyte pour sonde O2 de telle sorte que l lectrolyte d borde lorsque la t te de sonde est viss e sur le corps de la sonde Cette manipulation aura 2 effets Etre sure qu il n y a pas de bulle d aire V rifier l tanch it de la membrane et l absence de fuite 3 Visser la t te de sonde rincer Peau distill e et laisser le syst me se stabiliser pendant quelques minutes dans l air la valeur affich e doit alors tre constante 4 Positionner le bouton z ro situ gauche de l oxym tre en milieu de course e
49. t r gler le bouton pente situ droite pour obtenir 20 9 dans Pair Calibre Grandeur Mesure Affichage Etalonnage VOTRE SONDE O2 EST PRETE A L EMPLOI Page 71 sur 83 1 Mise en service de la sonde 02 Corps de la sonde T te de sonde No Membrane Remplir la t te de sonde avec l lectrolyte pour sonde O2 de telle sorte que l lectrolyte d borde lorsque la t te de sonde est viss e sur le corps de la sonde ce qui vitera la pr sence de bulles d air et permettra de v rifier l tanch it de la membrane Remarque La pr sence d une grosse bulle peut tre d tect e en observant la valeur renvoy e par la sonde positionn e successivement t te en haut puis t te en bas la valeur fluctue si il y a une bulle Dans ce cas l d visser la t te de sonde compl ter avec de l lectrolyte puis revisser lentement Page 72 sur 83 2 Polarisation de la sonde La polarisation de la sonde O2 permet d obtenir une valeur du taux d O2 qui soit stabilis e Pour polariser votre sonde O2 il suffit de connecter l ensemble de votre mat riel sonde O2 oxym tre interface ExAO et de laisser le syst me se stabiliser quelques minutes dans l air la valeur du taux d O2 observ e doit alors tre constante Remarque Lors de 2 s ances de TP successives il est inutile de polari
50. t sur l axe des abscisses le curseur change d aspect double fl che il suffit alors de d placer la souris vers la gauche 3 1 3 R alisation de l exp rience Remplir la cuve du bior acteur avec la solution de glucose 0 001 M de fa on faire d border la cuve une fois le couvercle positionn e Brancher le bior acteur et lancer l agitation Placer la sonde 02 dans l enceinte par l un des emplacements situ s dans le couvercle du bior acteur Eviter d utiliser l emplacement central sous lequel se trouve l agitateur NB La sonde O2 ne doit pas toucher le fond de la cuve du bior acteur Page 46 sur 83 Lancer la mesure en cliquant sur le feu vert puis en cliquant sur le bouton Lancer Lancement de l acquisition Nom de la manipulation MEA Au temps 1 min injecter laide d une seringue de 1 mI munie d un cath ter 0 1 mi de GOD dans la cuve du bior acteur NB un petit orifice est pr vu cet effet dans le couvercle du bior acteur ce qui vite d ouvrir le couvercle Mettre un rep re sur l axe des temps en appuyant sur la barre d espace Page 47 sur 83 Stopper la mesure en cliquant sur la croix rouge DR a l j re e Acquisition en cours N B une fois l exp rience termin e enlever le couvercle de l enceinte et rincer tr s soigneusement l eau distill e la sonde lagitateur le couvercle et la cuve Il faut en effet enlever toute trace de GOD U
51. tier la cuve du bior acteur les tampons ainsi que les feuilles de v g tal puis remis au froid jusqu au moment de la r alisation de l exp rience de mani re ralentir la d gradation de la chlorophylle apr s extraction AAAAAAAAAAAAAA AA A 2 1 Pr paration des solutions chimiques A pr parer par le personnel de laboratoire avant la s ance et maintenir au froid jusqu l utilisation Solution d extraction des chloroplastes concentration finale simple concentration Tampon phosphate pH 6 5 saccharose pour la pression osmotique compos comme suit Hydrog nophosphate disodique 4 4 NaHPO 12H20 a 0 2 mol l soit 71 6 g l Dihydrog nophosphate de 0 1 mol l fsoit 13 6 g Saccharose 0 5moll soit 171 g l Mettre ces trois produits dans une fiole de 1 L Dissoudre dans de l eau distill e Compl ter la fiole jusqu au trait de jauge Il est utile de pr parer une solution double concentration et de pr parer la solution simple concentration en diluant celle ci de moiti Solution oxydante La solution doit tre pr par e juste avant son utilisation et plac e dans un flacon en verre marron craint la lumi re Ferricyanure de potassium P K3 Fe CN 6 0 2 moll lsoit 3 29 g 50 ml Page 27 sur 83 2 2 Pr paration de la suspension de chloroplastes A Pr parer la suspension de chloroplastes juste avant d effectuer les mesures Broyer 80 g de feuilles
52. tiliser le m me protocole que pr c demment pour les diff rentes concentrations de glucose tester Manipuler dans le sens croissant des concentrations Pour chaque exp rience choisir la superposition de la courbe aux pr c dentes S lectionner une manipulation Remplacer les donn es d j Manipulation 1 F ACQUISES dans Nouvelle manipulation Manipulation 2 2 3 2 R sultats obtenus Cin tique enzymatique variation de 02 en fonction de substrat Le k O2 02mg i _L Q 01M t Imin s 2 20 5 00 5 30 Page 48 sur 83 On prendra soin d annoter les diff rentes courbes en cliquant sur l ic ne Annotation d une courbe INSEE A Information Pour cr er un titre une annotation ou un commentaire remplissez le champ correspondant avec le texte souhait Ajouter un titre Titre Cin tique Enzymatique variation de O2 en fonctior w Afficher arl a pe 1 Annoter une courbe Courbe annoter Ajouter un commentaire Commentaire Page 49 sur 83 4 Exploitation des r sultats 4 1 Construction de la courbe vi f substrat Cette courbe peut tre obtenue en utilisant aussi bien les courbes de d croissance de la concentration en substrat ou les courbes d apparition du produit Nous allons pouvoir construire la courbe vi f Substrat avec Vi vitesse initiale d P dt qui correspond la pente de la droite dans les premier
53. trophy sur l axe des ordonn es et le temps sur l axe des abscisses C2 1 Electrophy 5 Directe 6 Directe 7 Directe s Directe Temps Pour r gler le capteur Electrophy positionner le bouton R en milieu de course Si le signal mesur appara t trop petit une fois l acquisition effectu e on augmentera le gain en jouant sur ce bouton Si par contre le signal mesur est satur on diminuera le gain Page 62 sur 83 Param trer la dur e d acquisition sur 100 ms en cliquant sur l ic ne Temps sur l axe des abscisses CPEELELECCECCEECEECCELCEEECEECLEECES CPECEELCEECCE CEE EEE EEE A Manuelle Temps Fonction du temps Synchronisation Dur e d acquisition F Nombre de points 301 w 1 Acquisition continue Te 333 315 Cliquer sur l onglet synchronisation et param trer comme ci dessous C2 1 Electrophy 5 Directe 5 Directe dei sh 7 Directe 3 Directe OTs KP Manuele Temps Synchronisation Fonction du temps Synchronisation Croissant C D croissant e Le r glage de la synchronisation va permettre de d marrer l acquisition automatiquement d s qu on aura tap avec le martoref lex Page 63 sur 83 Lancer la mesure en cliquant sur le feu vert puis en cliquant sur le bouton Lancer Lancement de l acquisition Nom de la manipulation Le logiciel se met alors en attente de syn
54. un sac plastique non trou dans lequel on pourra souffler Vous devez obtenir une courbe qui pr sente ce type d allure EEES e Retour 20 9 Emprisonnement de la sonde dans le sachet plastique dans lequel on aura souffl au pr alable Retirer le sachet Si la courbe obtenue pr sente un aspect diff rent proc der de la fa on suivante Nettoyer l lectrode d argent l ammoniaque 0 1 M l aide d un chiffon doux puis rincer l eau distill e Remettre de l lectrolyte neuf dans la t te de sonde puis revisser lentement Changer la t te de sonde si la nouvelle courbe obtenue n est toujours pas correcte Page 74 sur 83 5 Entretien et conservation gt Vous avez besoin de votre sonde O2 pour une s rie de TP Vous pouvez conserver les sondes 02 avec l lectrolyte l int rieur de la t te de sonde en position verticale dans un b cher par exemple ou tube essai avec de l eau distill e IMPORTANT veillez toutefois changer l lectrolyte toutes les semaines si votre s rie de TP s tale dans le temps Cela vous permettra de v rifier l tat d oxydation de la partie en argent de la sonde ainsi que l tat de la membrane de la t te de sonde gt Votre s rie de TP ou vous avez besoin de la sonde O2 est termin e D visser la t te de sonde Vider l lectrolyte et stocker les t tes de sonde dans un pot avec de l eau distill
55. ur 83 Param trer la dur e d acquisition sur 10 min en cliquant sur l ic ne Temps sur l axe des abscisses ee Ca J 1 Oxym tre Eau 5 Directe 5 Directe 7 Directe 3 Directe 1 venuele Temps 301 Nombre de points Acquisition continue Te 2 0k NB on peut prolonger ventuellement l acquisition en cours de manipulation en se pla ant sur l axe des abscisses le curseur change d aspect double fl che il suffit alors de d placer la souris vers la gauche Page 33 sur 83 2 4 R alisation de l exp rience Pour r cup rer les chloroplastes au fond des tubes de centrifugation jeter l essentiel du Surnageant en conserver un peu au fond du tube pour remettre en suspension les chloroplastes du culot l aide d une pointe de pipette effil e Faire tomber le contenu du tube de centrifugation ou de la d cantation dans la cuve du bior acteur qui contient 5 ml d eau distill e ainsi qu un turbulent pour l agitation Le choc osmotique fait clater les chloroplastes et l accepteur d lectron biologique pr sent se trouve ainsi tr s dilu ce qui quivaut sa disparition Ajouter 5 ml de tampon double concentration pour r tablir la pression osmotique de d part Fermer le bior acteur qui doit tre rempli compl tement de liquide Faire attention de ne pas laisser de bulles d air l int rieur de l enceinte Placer la sonde 02
56. vitesse de disparition d un des substrats ici l O2 Dans ce TP on mesurera l influence de la concentration en substrat glucose sur la vitesse dO2 de la r action enzymatique pour une concentration en enzyme constante V AT cette valeur correspond la pente de la courbe tudi e 3 Protocole exp rimental 3 1 Mise en vidence de l influence de la concentration en substrat sur la vitesse de r action enzymatique 3 1 1 Pr paration des solutions e Pr parer des solutions de glucose de concentrations diff rentes ex 0 001 0 1 0 5 et 1M e Pr parer une solution d enzyme une pointe de scalpel dans 10 ml d eau il n est pas possible de donner une concentration exacte car la GOD n est pas pure il n y a pas proportionnalit entre la masse de GOD et le nombre d unit s d enzyme La couleur finale de la solution ressemble celle du blanc d uf cru 3 1 2 Param trage de l acquisition a Brancher la sonde O sur le capteur oxym tre b Connecter le capteur oxym tre sur l une des 4 entr es de l interface PRIMO c V rifier que l interrupteur sur le capteur oxym tre est sur la position air Page 41 sur 83 d Lancer l Atelier Scientifique pour les SVT Atelier Scientifique pour les SVT Ce mode g n raliste permet de parametirer librement l acquisition avec une interface Ex A O qe realiser des acquisitions et traitements vid o q utiliser un taDleul scientifique de disposer de l ensemble
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