JP 5241518 B2 2013.7.17 10 20 (57)【特許請求の範囲】 【請求項1】 抗
Contents
1.2.
3.
4. ul 2 1 HHHHHHHHHHHHHHHHH
5. 0 HMGB 1 TUNELH 1400000000 a O TU
6. 1 47nM 137nM HH 68M pH7 2 2040 4 CH ul 000000000000000 ID 0 050 0 O O 200 Tween20H O00 0000000000
7. 0 RPM 1640 0 0 0 0 IHHHHHHHH 5H D n D 0 0 0 IHS HHHHHHHH D 0 960 0000000 0000 10 0000 10 100uLHHHHHHHHHHH5HH UD 37 C 000 0 0 100u LO HATHHHHH 0 01nM 1 6u MJ 0 04u MIHHHHHHHHH 00000000 00000 0 IHHHH3HHHHH HAT 0 0000 HA 20 3000000000 den 10 IHHHHHH 10 14
8. 2 HMcB 2000HMc20000000000000000000 30 HM 3p J D 6IFNG OelIlUuuuuunuunuunuunu 17 HMG 17 00 10 YU HE Y
9. HHHHHHHHHHSD5SHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH Anti bodi es A Laboratory Manual Ed Harl ow and David Lane Cold Spring Harbor Laboratory 1988 I UuuuDnnngngnogon B oO
10. 0 ut naked HH 0 0000000000000000 0 Moo 10 A
11. 5194 Trowbri doe J Exp Med 1978 148 313 23 R210 Gal fre et al Nature 1979 277 131 30 00000000000 u HMWB EI SA HMG HHHHHH D E ut
12. i i 200000000 i 20000000 HMB 1 HMGB 20 0 HMGB 1 1 u HMGB 1 HMGB 20 0 1 4 HMR 1 0 IB 10 0 U LU i i HHHHHHHHHHH 1 0 6 HMGB 10 HMGB 2 00
13. 000000000000000000000HMB8 100000000 HMGB 2 00000000000000000000000000000000 HMGB 1H HMGB 1H HMGB 2H HMGB 1 HHHHHHHH 3HHHHHHHHHHHHHHHHHHH6HHHHHHHHHHMGB 1 HH 1H 3 lugmiggugggugguuguuudztcscdcdrt see 8aagagagaaggaadgaggadgsecgauyudrtrctct oou 37 C 20 0 0 200000000000000000
14. Lei SP et al J Bacteriol 1987 169 4379 83 ut O MO 96 30394 40 SV40
15. M 20 0 HMGB 1 0 0 0 0 HMGB 1H HMGB 2H HHHHHHHHHHH H 10 00000000 HMB20000000000000000000 0 0 ti 086 20 gO HMB 1000000000 D HMG 1 0000000 HMG 2 0 0 00000000000 2 H HB 2
16. 0 0 HMGB 1 100u g nLHHHHH HHHHH0 9HH UD Iu HHHHHHHHH BALB cC IHHH 00000 002 HHHH100ugnHHHHHHH DU IHHH 0 0 IHHHHHHHHHHHH2 nn 00000 Eusa 8 0 0 EISA DUUUUIUuuuuuunund b IHHHH g 0 800u on HHHHH5 10 D 3 JUDDUD IHHHHHHHHHHHHHHH96HHH HHHHHH 0 100p LO O 0O O O 37 CH 20000000000 HMGB 1 0 05H 0000 200 Tween20 0 0 5 59nM IHHHHHHH1 47nMMHHHHHHHHH 2 68nMJHHHHHHHHHHHHpH7 2HHHHHHHHH HH HHHHHHHHHHHHHHpH7 2HH 10 37 CH 2H HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 20 00000000000 0 100 O00000 0 0 1000 10
17. say ELI SA Ll D Yanada et al 2003 Qin Chem9 1535 7 00000 HMS 1 HMGB 1 0 2003 96099 HMGB 1 HMGB 10 IPFH hypersensiti vi ty pneunonitis HP bl onchoal vel ar I avage f id BALF HMGB 1 HHHHHHHHHHHHHHHIPFH n uu
18. Lys Pro Asp Ala 180 HD 1 00000000000 H Ala Lys Lys Gy Val Val Lys Aa Gu wel GB 1 Lys Pro Asp Ala Ala Lys Lys Gy Val Val Lys Ala Gu Lysi 0 O00000000000HMB8 200000000tLys Ser Gu Ala Gy Lys Lys Gy Pro Gy Arg Pro Thr dyHHHHHHH 2HHH9HHHHHHHHHHHHHHH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 1 Cys Lys Pro Asp Ala Ala Lys Lys Gy Val Val Lys Ala 10 0 000000000000000 30 Gu Appl i ed Bi osystens 0 O0 O 430A 00000 Model 430A
19. 0 0 0000000 0 000000000 EE D HMGB 10 HMGB 2 Dn HMGB 1 0 000000000000 0 Ke E E ass FEE EFE E HMB 1 HHHHHHHHHHHHHHHHHH 0 HMGB 1 0 0 0 0 0 n 0 T P Hopp et al Proc Natl Acad Sci USA 1981 78 3824 8500000 l Parker et al Biochemistry 1986 25 5425 32 0 0 10 0 D n HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HMS 1 HM 2 IHHHHHHHHHHHHHHMGBH1HHHHHHH 0 0 0 HMGB 1 HMGB 2HHHHHHHHHHHHH H HM 1 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH1I HHHH D HMGB 1 HMGB 2 Dn IHHHHHHHHHHHMGB 1HHHHHHHHHH HMGB 10 1670 000000000000000 180 20 Ll 0 B Lys Pro Asp Ala Ala Lys Lys Gy Val Val Ly s Aa Gu Lys9g00000 10 00000000000
20. IHHHHHH6HHHHH1HHHHHHHHHHHH EL SA IU HMS 10 1u 9 nHHHHHHHHHHHHHHHHHHH96 000 IDOO0003100000310ouLOOODOD037 cO 20 1000 IHHHHHHHHHHH0 05HHHHH 20 Tween20 0 00000000 5 59M D0 000000000 1 474M 0000000 137nM 2 68nM 00000000 00 0 pH 2 DO 10 BSAI 1 I HH HHHHHHHHHHHHHH pH7 2 10 0 300u LO CH 20 000000000000000 00000000000000 100p O 900u LO D 1000H O 100000 O O D 100000 100u LH D 37 CH 20 0 0 JUD n IHHHHHHHHHHHH 10 BSA HH O IM 3 2 100u LO 0 0 37 C 20 I00000000000000 Ll Up Data O O 0O 30 BSAO O D 5
21. i igi HMGB 1 HHHHHHHHH Io 00000000000000000000 Ki mJ Y et al AmJ Physiol Lung Cell Mol Physi ol 2005 288 L958 65 HMGB 1 0 O 200 g 1g 200p g 5 Uloa Let al Proc Natl Acad Sci USA 2 002 99 12351 6 0000000000000 EP 40ng ko 0 000000000 30 0 1300000000000 l E E A H HHHHHHHHHHHHHHHH10HHHHHHHHHHHHH u ID00000000 80 C00 3 BAL BALH Kuwano Ket al Chest 2000 118 451 8 BALO 150nH HH
22. Fa HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 0 Fab o PDM ort ho phenyl enedi ei mde Fab Fab F ab 000000000000 Keler T et al 1997 C ancer Res 57 4008 140 0 0 0O O Fab TNB H 0 0 0O Fa 000 SH O O Brennan Met al 1985 10 Sci ence 229 81 30 0 0 O0 O Foso Jung Ii Ii i UD DDD 0 Fo sl Ju i Fos
23. 0UUUU00000000000000000000000000 0 0 0 0 HMGB 1 1ng nt HMGB 2 Ingon D 1 1 d DDD DDD D D D 1 1 15 SDS D D 0000 pH8 8J 0 D D 20mN 1800000000000000000000000000 IB In i 9cmx 9cnf O0 48nM LU 07 WI VD SDS O 200 O VU V eonmw 2000000000 i ul 10 BSA 5 59nM 0 31 JP 5241518 B2 2013 7 17
24. HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 1 HMGB 1 0000 10 DI il u 1 OUGual Interstitial Pneumonia UI P Desguanati ve Interstitial Pneunonia D P O 3 Non Specific Interstitial Pneunonia NSIP 4 Acute I n itial Pneumonia AIP
25. o o o o o Ki ei m Es A E C CC C C C EJ E ETA r gt EE E Ts E II SSES f EE o og m 4j El ci O 5 LLl T E 3 la ul nm 5 L3 OM I El 8 D S l 3 Er m es S o i El EI E T s a 6 n S T ES DEL To ED w O uka ANAN OD Ej Se El El EP I ELITR ux m rd E 5 z g a 8 Y n Er Er SS o A Sa S I o GC a r3 i J i E N N Se lt 3 A oi Ca E i r3 la Ee E TOOL Ue um Sin mn i EEA T oono i m n 8 9 ca E zo EXC ESSE S ge SS c CN DI El NE r3
26. 4 HMSB 10 100p gm II Ii II I Ii D Il C 0 90 HHHHHHHHH 0 5nH 97mHHHHHHHHHHHHHH 1 100 0 l 2 HHHHHHHHHHHHHHHHH HHHHHHHHHHH2HHHHHHHHH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH EL
27. 22 C 1 8gHHHHHHHHHH 100000000000000000022c0000007000gU 15
28. D HMGB 1 Ll Ll Ll O 0 BALF BALF 140 0 i i i HMGB 1 0 utu 14 BALF 11 0 5 H 14 n n n nnnnn n 10 0 12c HIMGB 1 HIMGB 1 BALF HMB 1 12a b 14 14 12d BALF EP BALF 14 13 20 i 0 0 HMcB 10 U0000000000 ul a igggggagagdggadconuagggguugudttl W 38 DS Pharma Bi onedi cal Osaka Japan W 380 0 0 0 0 0 0 75 cnTH FALCON Franklin Lakes N 1096 FBS MEM 3 C 5 HMGB 100 30 ng muunuunuunununD 24 VW 38H WW 38
29. 30000 00 0 2090 5 10nL TBS PBSHHHH HH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 2 10nQ 0 290 CNBr HHHHHHHHHHHH 2 000000 HHHHHHH Ll Ll 00000000000000000000000000 7ND0000 zi
30. 2HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 9cm 9mh 00 0000000000000000 00000000 I000000003mM00000 03570 WV SD 20H WVOHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 5 552401 1g 1 470M 0000000000 1377M 000000002 pH7 2 O 20m0 4 C0100000000000 0 05 20 Tween20 IlHHHHHHHHHHHHH3HHHHH o N 80u g0 20m0 1 8SAJ UI HHHHHHHHHHH2 HHHHHHHHHHHH 204 10
31. Hg 0 In vitro In vivo JU JU In vitror 000000 a CHO CO5 Bb HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH sf9 sf21 a b Hu 5 invitroHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH DMEM MEM RPM 16400 In viv OH In vivo ut B DNA HH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH ll 8 L Maeda S et al Nature 1 985 315 592 4 ut pMON530H
32. SCFM DNAJHHHHHHHHHHHHHHHHH 1 1 PNAU 0 0 DNAD O uu PCRHHHHHH 2 l i il DNAHHHHHHHHHH L SCFVUI DNA HHHHHHHHHHHHHHHHH II SCFM 6 iloq hybrid hybri doma quadrona D Il I u I U UJ Mistein C et a 1983 Nature 305 537 400 I I i I RG 96 n i Ii BE C 8 B HI 4HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HHHHHHHHH HHCHBHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 15 JP 5241518 B2 2013 7 17
33. 34 JP 5241518 B2 2013 7 17
34. Ll D IPF HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HHHHHIPFHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHIPFHHHHHHH IlHHHHHHHHH5O0HHHHHH IHHHHHHHHHHHHH 3H 4 HHHHHHIPFHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH IHHHHHHHHHHHHHHHHHHHIPFHHHHHHHHHH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH D 1 D00000000000000000000000 H 10 20 30 40 50 5 JP 5241518 B2 2013 7 17 Enzyne Li nked mmunoSor bent
35. 3 0 Fv DOHMB 1000000000000000 UUUDUUDDUUD uu Fab 0 F ab H l HJ CH 1 FaB F ab i u l 100000 H CH1 Fa Fab F ab SHI Fab F ab 2 Fab SH HH HHHHHHHHHHHHHHHHHH i Co M et al J Immunol 19940 152 2968 76 bival ent Holliger P et al 1993 Proc Natl Acad Sci USA 1993 90 6444 8 EP404 097 VD93 11161 2 M HH H M4 VH H t 20 nnnnnnnnnnnnnnn
36. o ui P L3 E 2 100p grtDOOOOODOOOOOOOO HHHH
37. pH8 O 2n 30nM 40nM 0 pH8 og 1000g 20 300 MI 0 40nM pH8 0 DEAE 1x 10cm 2nl IgGHHHHH 280nnf 2m m0 C 4ElUIUluuuunuunuunuunwD D lgMIHH 20nM pH7 5 0 HH HHHHHHHHH 20nMH pH7 5 0 8MH 000000000000000 purification HP 1nt HHHHHHH HHHHH DU 20nM pH7 5 0 8MHHH IHHH 20M0 0 0 0 0 0 pH7 5 19M HMGB 1 2 LU LI HMGB 2 RO6GZE10 D
38. DNA D H H Lac araBH LacZl u DUDU Wrd ES et al Nature 1989 341 544 6 0000 araBD 00000000000000 Better Bette Met al Sci ence 1988 240 1041 3 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH pel B 18 JP 5241518 B2 2013 7 17
39. Respiratory Bronchi ol it soci ated Interstitial Lung Disease RB ILD I Ideopathic Pul nonary osi s IPF U P Y PFOUUODOODOODOOOOOOODOODOOOODOODOOOODOO0O0O0DO0O0000000000D0 UU
40. 1 HMB HMGB 1 140 0 710 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 14 8 HMGB 1 4 l H ab oi T Hi 14 HMSB 1HHHH 0 D 0 0 0 DH 0 10a 0 0 0 7 14 utu u HMB 1 14 0 9a 0 c U ll HMGB01 14 ll 10b TUNELH D D 0 0 14 U U 0 TUNEL 140 0 1 9b HMGB Ll 9d 0 O 10c
41. C Sanders et al BBRC 1977 78 1034 42 I 0000000 10 500g 140nM 0 5nM PMSF UU 600m0 2H HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 30 140nM 0 5nM PMPFU DO000000000000 IUUUUUUUUDUUUDUUU O0000000000200000 400000000000000 75MI 300nt 0 75M 0 400nW LU LU 50000000000000 0 75M ug 1000m l LU 4 en 1 3 500m g 21nt 0 g LU 0o02 500m0 LU ul uu 70 Hu HMGB 1 HMB 2
42. s Rheum 2003 48 971 81 Kokkola R et al Arthritis Rheum 2003 48 2052 IOHMB 10000000000000000000000000000 DOHMB I100000000000000Kinm0g000 HMGB 1H NF k HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHLH L958 65 0 000000000000 HMGB 1 1400000000000000000000000000Td Il KimJY et al Am Physiol Lung Cell Mol Physiol 2005 288 ID00O0000250000HMc 1 0 TdT nedi ated dUTP Nick End Labeling TUNEL H DD D HHHHHH BALFHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 6 JP 5241518 B2 2013 7 17
43. u HMGB 1 60 Ll Ll 0 000 HMB8 10000000000 HMG 1 HMGB 1 HMG 1 Ll Ll HMGB d HMGB 1 20 3 Ll 0 0 HMGB 1 i Ll HMGB 1 Ll Ll 0 il Ll Ll 6 468 5330 0 6 448 2230 0 2005 5125070 l 0 2005 508913 0 0 O O 2004 0440010 Ii U 0 0 O O 2005 0262090 000000 0 I Abdel azi z M et al Respirology 2005 10 284 9 Lotze M and Tracey KJ Nat Rev Immunol 2005 5 331 42 Banerj ee S and Kundu TK Nucleic Acids Res 2003 31 3236 47 Care Med 2000 161 646 64 Park JS et al J Biol Chem 2004 279 7370 7 0 0 V ng H et al Sci ence 1999 285 9 248 51 AbrahamE et al J Inmunol 2000 165 2950 4 American Thoracic Soci ety and European Respiratory Soci ety Am
44. PCR DNA DNA JU DNA i EP 239400 VO 96 02576 000 FR HHHHHHHHH CR Sato K et al 1993 Cancer Res 53 851 60 3 99 VO 17 JP 5241518 B2 2013 7 17 HHHHH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH i UUUDUUD HHHHHHHHHHHHHHHHHH u i 50H 75 85
45. 280nnW u 0 0 O 150 SDS PAGE DA BO 0 HM 10 0 G1 DJ HMGB 2 HMG 10 167 180p HMGB ii 0 ut ELI SAI uud I N KLH BSA u ELI SAQ HMGB 1 ELISA II B HMGB 1 PD IH 00000 orl HM GB 1 8 H 0 0 HG UU 1670 0 180 U HU NI KLH BSAH utt uu HMB 1 HMGB 2 1 90 t 200 000
46. eo N r3 r3 r3 r3 r3 r3 r3 r3 r3 r3 r3 eo w HM ek Ll B 1 2 L1 L1 HM N L1
47. 0 0 0 IHHHHHHHHPB so00000000000000000000000000000000000000 0 0 HHH 0 0 0 000040 210 0 0 0 0 0 0 1000000000 IHHHHHHHHH 0 0000 0 0 0 0 HHHHHHHHHHH 30 1000000000 HMGB 1 000000000000000000000 HMGB 1 1000000000 0 0 0 0 0 1 00000000 DOO000000000HMB 10000D000000 40 0 nn HHHH 0 HMSB 10000000 2 HM 10 0 0 0 0 0 H 1H HMGB 1 0 0 0 0 HMGB 1 D n 0000 0 0 0 0 00000000000 HBG 10 D D D HMB 1 0000000000 76 D 0 HS 10 IHHHHHHH 0000000 0000000 000 0000000 5010 0 000000 50 JP 5241518 B2 2013 7 17 11
48. 20 6 Ll Ll i ELISA HHHHHHHHHHHH 9 PBS HHHHHH 5 30 o u HHHHHHHHHHHHH uu BU HHHHHHH Kohl er Mlstein Methods Enzynol 1981 73 3 46H 000000000 il PEGH HH HM HH u 100 10 RPM 16400 MEM HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH FCS H HH 37 C PE w v 60 30 1000 6000 GUUUHUUDUDUHUDUUDU u u u u u il
49. 26 JP 5241518 B2 2013 7 17 5000 ks v iu E 10 L iguguggaggguagiuuuauauuuuisorjeviDn dU 4Isn m gt 22000000000000000000000000000000 IHHHHHHHHHH UgYHHHH Om TBS 0 14M NaCl 0 01M Tri s pH7 4 O 0199NaN 4001 3 5 6 1094 W V
50. i i HMGB 1H 24 p lt 0 O1 p OD HMB 1 0 ut 0 0 HMGB 1 i i TUNELO I i BALF i HM 1 HMGB 1 D0000000 UDD UU 9d gMI 0 HMB 2 HMG 1 Du ll uu uu i i HMGB 2H 00 HMB 1 10 20 30 40 50 9 JP 5241518 B2 2013 7 17
51. 1 HM8 1 12 1 JP 5241518 B2 2013 7 17
52. 95 Ll Ll Ll WI bur Li pnan Proc Natl Acad Sci USA 1983 80 726 300 0000000 AN0000000000000NA 8 0 0 0 SV40 la SV40 UU H H Mul I i ng Mull ing RC et al Nature 1979 277 108 14 la M zushi naj O M zushi na Nucleic Acids Res 1990 18 5322
53. KLD HHH O BSA u ID l10mg lonM OOOOO000000 0000000000 O pHAOOGOO000000NNOO00000000000000 2 500000 D IHHHHHH MeS HHHHHH HH150uLHHHH 40 4 C 10nM 20 DDD 2 0 pH7 280nm Sephadex G 25 000 5 MBS MBS pH7 0 2 Ws Lys Pro Asp Ala Ala lu TU Uu I 1500000 30 Lys Lys Gy Val Val Lys la Gu Ls HMGB 1 HMGB 20 0 D 0 0 0000000 22 JP 5241518 B2 2013 7 17 HMGB 1 B HMGB 2H 5SHHHHHH
54. HMGB ELISAI HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HMGB 2 HMD 1 HMB 1 o HMGB 2 0 o 0 o 2H HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH DD 0 0 0 HMGB 1 HMB 2 uu u u u uu il DVEM RPM 1640 ASF 103 in vitro u u 1 598780 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH i u il il o 0 WD94 255850 W093 12227 WO92 039180 WO94 02602 0 HMGB 1H FMGEP i I I u 1i I uu U Fabll Fab F ab diabody l DD H CFV HHHHHHHHHFvHHHHHHHHHHHHH igugggggagrvu ggdggaisuuguHigugtedgtet Ll MVHHHHHHHHHHHHHHHHH Va VL
55. FaD DJun0000000000000Fab l l 000000000 Fab Fosll Fab Jun0D000000000 F ab 0 Kostelny SA et al 1992 J munol 8 1547 5300000000Fab scFvl FvOOOOODOODODOODO 20 cross over scrvlllli iu 4A 8 VI 5 DDD O VM A V CB 8 1 41 Holliger et al 1993 Proc Natl Acad Sci USA 90 6444 80 scFvll 1500000000000000000000 0000000 Ki pri yanov SM et al 1999 J Mil Biol 293 41 56 kno bs into holes Zhu Z et al 1997 Protein Sci 6 781 8 IHHHHHHHHHHHscFvl15HHHHHHHHHHHHHHHHHH 30 sc FV gt Mellender VD et al 1994 J Biol Chem 26
56. ioq 30 BSA HHH 7 L3 LO U1 IHHHHHHHHHHH9HHHHHHHHHHHHHH 2HHHHHHHHHHHHHHHHHIgYHH Up DatanH 300000600000000 HMGB 1HHHH HMGB 1H2HHHHHHHHHHHHHHHHH3 IHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHIgY 00000000000000 HMGB 1 0 HHHHHHHHHHHHHHHHHHH o IDD 1HHHHH9 IDD HHHHH H HMGB 2 HHHHHH 9HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 0 0
57. 1 5000000000000000HMc 10 HM 1 HMGB 2 ELI SAI BI ACORE u u D il u ELI SA BI ACORE HMGB 1 uu Ll Ll HMGB HMGB 10 0 l U 2 HMGB 20 HMGB 2 HMGB 1 HMGB 2 HIMGB 1 HMB 2 0 ELI SAC D HMGB 1 HM UI HMGB 1 UUUDUUDU ELI SA BI ACORE HMGB 1I HHHHHHHHHHHH l HMGB 1 HMB 1 HMGB 1 HD ug Hut HMGB 1 u H BU ut U U 1 HNGB HHHHHHHHHHHHHHHHHHHL 60OHH HMGB df 0 0 Goodw n H et al Biochem Bi o
58. HMGB 1H HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH JU HAI uioagp pali Mtogen Ac tivated Protein Kinase MAPK I NF k BI DI 0 TNFa 0 0 HGB 1 t U Ulloa L et al Proc Natl Acad Sci USA 2002 99 12351 6 3 130 14 BALF HMB 1 HNGB 1 p38MAPK NF k in vivo WB HMGB 1 D UU Palumpol O HMB 1J 0 000 0 RAGEHH UJU UU U H uu Pal umbo R et al J Cell Biol 2004 164 441 9 u HMGB 1 Vascula
59. YU HM gt 1 YD I Q HG 0 000000000 HMB 1 Hox D POJ u HH DNA D A0 HMG dj Q A p530 p53H D 0 0 0 HH HHHHH3 HHHHH 10 0 HMGB 1 l HMB 1 u u HHHHHHHHHH 00000 40 HMG 1 Receptor for Advanced G ycati on Products RAGE Toll 2 Toll like receptor 2 TLR2 TLR4H 5 HM GB 1 ul u u 4 HIMGB 1 20 6 op 9 H 0 HMGB 10 u 0 i i uu U i HMB 1 HNGB 1 ir En Ek a PESE 0 D HM 1 HH 0 HMGB 1 2 e G WOMEN REUS UA EL E HNGB 1 HMGB 1 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 30 6g HMB 1 IUuuuununnuuuuuuuuunununnnu a TNFa 18 IL 16 O 0000000000000000 11 18 0
60. HMGB 1 4HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH1HHHHHH HMGB 10 1670 0 0 D 50 21 JP 5241518 B2 2013 7 17
61. 1 HHHHHHHHHHH 20 0 000 HL6OH PBS RPM 16400 3LH PFHMII LA Hepari n Sepharose 40 PBSDO0000000 5MODUOO PBSHHHHHHHHHHH 2800n 0 0000000 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 5nM 000000 pH9 0 0 2MHH IHHHHHHHHH7 5nMHHHHHH pH9 0 HHHHH HH CM SehadexC25 Pharm aia I UU i 1 20nMI 0 00 00000007 5smM 00000000 pH9 0HHHHHHHHH 4 23 JP 5241518 B2 2013 7 17 IlHHHHHHHHHH I0000000 HMGB 1
62. 0O H HMGB 2 1 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH IPF MI PID HHHHHH HHHHHHH 8 IPFHH NSIPHHH HH collagen di seaseS CVDIP H 1 HH 2H HHHHHHHHHHHHH1HHHHHHHHHHHHHHHH Ri cherson HB et al J Allergy Clin Immunol 1989 84 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH l IODOODOOOOO0O00000000000000BALFDOD HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHBALFHHHH Un 3 o 3 as lt Mi i ol ogi cal Societ OOO000000000000000000000 TI i i i 1 Ii I Uu O KBI
63. Easy Reader EAR 340 SLT Lab instruments Austria O O 540 nn 50 35 JP 5241518 B2 2013 7 17 HMGB 1 1 UD HHHH HHHHHHHHHH HMGB 1 0 0 HHHHHHHHHHHHH Inu 0 IDD 000 000000000 HMGB 1 0000000 HMGB 1 13 HMGB 1 HMGB 1H 0 0 0 n n n 10 HHHHHHMGB 1IHHHHIPFHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH IHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HMGB 1HHHH IPFHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 280nml Jen 0 6 Zon KLH 90 0 4 BSA NO aoF 102 30 0 1 1 20 0 5 10 15 20 w g ml 10 t P4 IU L eddwr dw Mitis omg EX PN ia IPF NSIP CVDIP HP n 30 n 5 n 16 n 6
64. 00000000000000002000000000 HHHH ELI 60 ELI SAT KH th o m 960 00 0000 000000000041 O 100p L IUUuUugUuuUuU KEHIUUUHUDDOUHU 050 0 0 200 Tween20 TS Son J I i iu nui uu uu 1 477M JU 0 137nM 0 2 68nMlHHHHHHHHHHHHpH7 2HHHHHHHHHH 10 BA HHHHHH HHHHHHHHHHHHH pH7 2 10 0 0 O0 O 300 0 37 C0 20 0000000000000000 D 3 100 Il 900u 0 O0 O 10000 O 100000 100000H 100u L 3 CH 20 000000000 4 O 3 2 10 BSAQ O 0O 0 1M 100u L 3 CH 20 000000000 29 9 O Up 0 0 0O 30 BSA
65. BALF HMGB 220 HHHHHH BALF HG d HMGB 1 IP NSIPHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH u UUUDUUD UUUDUUDUUDU u HMGB 1 HMGB 1 Ll Ll HM 1 ud HIL 1BHTNFeHHHHHHHHHHHHHHHH 2 MP2 Ll HMGB 1 0000070000 HMB 1 o Ll i DNA 1 p530 p i UUUDUUDU DNA p21 p53 Kuwano K et al Am Respir Crit Care Med 1996 154 2 Pt 1 477 83 Hp p530 HMGB 1H 00000 3000 HMGB 1j 0 I PF p530 0000000000 HMGB 1 HMGB HMGB 1 50 14 HMB 1 u u u HMGB 1 HMGB 1 Tani guchi N et al Arthr
66. Agrobacteriumtunefaciens oo ID N cotiana tabacum MG et al Eur J Immunol 1994 24 131 8 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 19 JP 5241518 B2 2013 7 17
67. EDTAI HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH IHHHHHHH 30 TT Annexi n V FLUOS stai ni ng kit Roche Di agnostics Penzberg Cernany 1 x 10 PBSH D O O O Annexin V FI TQ D Pr opi di umi odi de IUuuuunnnnunnnu 10 nM HEPES NaOH pH 7 4 140 mM Nad 5 nM C ad O0 0 0000 00000 20 00000000000000 Coulter EPICS XL flow cytometer Coulter Mam FLO HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH W 38 80 CH Sircor Collagen Assay kit Biocolor Northern Ireland UK 40 b DDU w 38 DS Pharma Biomedical saka Japan w 380 000960 00 0 10 FBS MEM 37 CH 594 0 HMGB 1 100 30 ng n J 0 240000 W 38 Tetra color ONE assay kit SEI KAGAKU CORPCRATI ON Tokyo Japan W 38 HMGB 1 0 0 0 0 NJ te tra color ONE 0 O0 37 c0o 40
68. HHHHHHHHHHHIlgdHHHHHHHHHHHHHHH Ri dgvay J B et al 1996 Protein Engineering 9 617 21 Merchant AM et al 1998 Nat Biotech 16 6 77 810 l
69. VO93 12227 WO92 03918 WO94 02602 VO94 255850 VO96 3 Ll Ll Ll DNA ID DMHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH reshaped O O CDRI CDRU H U CDRI framework regi on FR DAJ
70. l 9 OO O00000 0O ELISA J BALF BALO O0 O0 O0 O analysis of variance ANwvA D Scheffe FI Kruskal VallisH MMnn StatVew 1 5 0 05 ooo ey Abacus Concepts Inc Berkley CA0 0000000 HMB 1 HH BALF 1 HM 10 J U 0 SEM 0 IPFO 3 7 1 90 NSI PO 0 1 0 1 CVD IP 0 8 0 5 HPO 4 1 3 40 0 5 0 3ng nt HMGB 1 l HHHHHHHHHHHHH I 5 BALF HMGB 1 SEM 1PF 3 5 O 60 NSI PO A 9 2 4 CVD 1P 2 2 O 5 HPO 9 4 4 20 0 0 1 6 0 4ng m0 0 0 O0 O BALF HMB 100000000000000 IPF 0 HPOODOOODODOOOODOOOOOODO OODOp0O0 050 py 0 01 0 etr HM amp 10 0 0 2 1PF0 0 NSIPOO0O00 00000 HMGB 1 i uu ID0OOOO0O00000D0NsPOODOOOOODOOD i IPFH U DL f HMB 10 0 3
71. OI 255 No 3 p 320 331 IH D 22 Nb 3 p 301 309 000000 1 10 No 3 p 204 208 58 JUDD Irt G D E Ll E E iulii HELLE E HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
72. 1 High Mbbility Group Box Protein H D High Mbility Goup Protein HJ li Il Ii i 1964 HMGB u GENETYX 0 SOFTVARE DEVELOPME NN U LH HMGB 1 D HMGB 1 0 98 6 HIMGB 1 99 1 HMG 1 HMGB 81 2 HMGB 2 0 72 3 HMGB 2 4 HMD 1 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HMD HHHHHHHHHHDNAUHHHHHHHHDNAHHHHHHHH O0000DMW0000000000000000000000 OOOGO00000000000000000000000U0UUU0O u u msg DOO000000000000000000000000000000 JP 5241518 B2 2013 7 17
73. HMGB 1 HMGB 10 ELI SA JI Lu HMGB 1 HMGB 1 HHHHHHHHHHHHHH u i 000000000 00000000 0000 OD PEQ Tweend 000000 ED TAO ut il u D D D Ul 6 u OOOOODODOOD DOOD u HCO 50 800 0 00000 HMGB 1 0 0 0 0 0 Rem ngton s Pharmaceutical Sci
74. JP 5241518 B2 2013 7 17 19 JP a Fr 8 B2 11 5241518 P5241518 45 25 7 17 2013 7 17 24 25 4 12 2013 4 12 51 Int CI FI A61K 39 395 X 2006 01 AGIK 39 395 D A61P 11 00 2006 01 AGIK 39 395 N CO7K 16 18 2006 01 A61P 11 00 CO7K 16 8 ZNA 6 39 Si 21 2008 558149 P2008 558149 Weste 504145342 86 22 IHRE 20 2 15 2008 2 15 86 PCT JP2008 052526 10 1 87 WO2008 099920 T3 504258527 87 20 8 21 2008 8 21 23 2 14 2011 2 14 2 1 8524 31 12007 34293 P2007 34293 T3 000131474 32 19 2 15 2007 2 15 33 JP 5 6 T4 100102978 74 100102118 74 100160923 dx 54 HMGB
75. 0 0 5781 60 0 8 CScheri ng P EE EIEH EEDD 0 25g 20 1kgHH HHH50uLHHHHHHHHHH HHHHHH HHHHHHHHHH 32 JP 5241518 B2 2013 7 17
76. 1 572 uUggggaaauggaaugggauduuuddaiHce nsgdgmgggadaguagagd HHHHHHHHHMGB 1H HHHHHHHHHHHHHHHHHHH 0 000000 1 u HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH2HHHHHHHH 10 2 I 2 HMGB 2 0 0 HMB D O HMGB 1 i00000000000000000001000000000000000 000000 HMGB 1 HMGB 2H HHHHHHHH 0000 HEH 20 2 JP 5241518 B2 2013 7 17
77. 2 t 15 1 05 0 c mg mD 10 30 HMGB 1 ng mL 0005241518000001 app 38 JP 5241518 B2 2013 7 17 39 JP 5241518 B2 2013 7 17 000000 74 100119507 4000 140014929 4000 100148600 74 100128048 74 100129506 74 100130845 74 100114340 74 100121072 HHH i Ll HHHHHHHHH 2000 un HH HHHHHH 00 0 0 HHHHHH HHHHHHHHHHHHH 72 U D00000000 00 0 0000 100000 2000 EN E 56 IIHHHHHHHHHHHHHHHHHHH I DD Val 62 No 12 p 223 2229 Areri can journal of Physiology Lung C Iu ar Ad MI ecu ar FsiolooMJHHHHHHW 1 288 No J p L958 L965 Areri can journal of Respiratory and Critical Gre Mi ci 1 D D D D Mg 164 No 1 Part 10 p 1768 1773 Jorna d Irtenal Md d nei I IU
78. 20nw 8 HMGB 1 HNCP 20 H H 200nM 000000 5 nM pH9 0 10m 0 O 2005920 7 5nM pH9 0 9 7 5nM pH9 0 OMH HH C25H 0 O 200nM I JU UU U DU 7 5M 0 iugBgagdgdem opnpgugagagaamumumgusngugagdggadgammuminDH 100 15 SDS atl 80 u 0 0 HMGB 1 HHHHHHHHHH HH 0 HMGB 2H 11 BI HHHHHHHHHHHH LO U 0000 HMGB 1 HMGB 20 D HMGB 1 0 0 0 6 0 0 HX B 2 I HU U 7 U J P Cabart et al Cell B iochem stry and Function 13 125 133 1995 0 O0 O Eeo J Ul I D D 10 HL60 celli 300m 10 lll B Fe TI I UI B B B 0 0 RPM 1640
79. CDRIHHHHHHHHHHHCDRIHHHH u CHI 0 0 o H HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH
80. 280 L1128 37 Tsuburai T et al Hum Gene Ther 2002 13 1945 6O DNA 000000000000 DeadEnd Colori metri c Apoptosi s Detect ion System Pronega M USAD J TUNELO Kuwano K et al Lab Invest 2002 82 1695 706 0 0000000 2000 d d aor 00000 mep ELI SA HMGB 1 0 7 HMGB 1H HHHHHHHHHHHMGB ELLSA Yanada S et al Clin Chem 2003 49 1535 7 HMGB 1H 2 g L nnnm 33 JP 5241518 B2 2013 7 17 8 0 H B HHHHHHHHHHHHHH rthern Irel and UK 198 1179 88 Sircor Collagen Assay Bi ocol or No Kitani A et al J Exp Med 2003
81. 3 complenentarity determning regi ong CH MM MHHHHHHHHHHHHHHHHHHH er CDRE HHHH 30 CDR FvHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH UI 14 JP 5241518 B2 2013 7 17
82. Em EX Tn pm gi 8 YED s mend IE E i o Se E3 I 8 EX EI mA ma 6 ma S o T Ka N n XA Er El i m o o s ii S RS SR N ci mt Er Er El 8 o x I FR es i Ta o Cr Ln o Et El N 12 JP 5241518 B2 2013 7 17
83. HH HMGB 2 IHHHHHHHHHH IU 00000000000000000000000000 28 JP 5241518 B2 2013 7 17
84. HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHMSB 1H HH HMGB 1 HMGB 2H HMGB 1 HMGB 2 EE E EFE OUE E E amne 0 HMGB 1 1ng mv 0 HMGB 2 1nw m 1 1 1 100 15 SDS HHHHHHHHHHHHHHHHHHH HHH HH 8 1800 5 U 27 JP 5241518 B2 2013 7 17
85. Hmp HATH D u u u u I P3 P 3x 63Ag8 653 J Inmunol 1979 123 1548 50 P3x 63Ag8U 1 Curr Topi cs M cr obi ol 1mnunol 1978 81 1 7 NS 1 Kohl er MI stein Eur J Immunol 1976 6 511 9 0 MC 11 MBrgulies et al Cell 1976 8 405 15 SP2 00 Shul nan et al Nat ure 1978 276 269 700 0 FOO deSt Groth et al J Immunol Methods 1980 35 1 13 JP 5241518 B2 2013 7 17
86. ence 16th editi on Os 000000000 lo Ed 1980 u Langer et al 1981 J Bi oned Mater Res 15 267 77 Langer 19 D D 0O 3 773 9190 EP58 481 Sidnan et al 1983 0 98 105 12 Chentech 82 Bi opol yners 22 547 56 EP133 988 1 L3 e IlHHHHHHHHHHHH 0 10 10000 ny 500090 2000ng L EF EU LJ I U1 HHHHHH U1 o 20 JP 5241518 B2 2013 7 17
87. n 19 r HMGBI HMGR2 l HMGB1 ng ml p lt 0 05 9 p lt 0 01 35 30 25 20 4 15 10 H t 5 d a 0 Ss IPF NSIP CVD P HP n 22 n 8 n 20 n 7 n 48 JP 5241518 B2 2013 7 17 JP 5241518 B2 2013 7 17 37 o r N o o DL ZL us0LX Xn Q TONO 8 DL eL FL lu s0LX G 4CUtc2 0 o T e N pg mg o Y os S0 0 d q 0 0 L z 2 r r S S 9 9 1 4 8 6 0L L0 0 d myu SY EST us0IX 7 00011 S0 0 gt d ge ect L0 0 gt d 0 9 oL SL oz u Sc im 0 ES OMNE Iu sOLX T 3 1U4 s0 1X 500 gt d RUE S e ECKER S0 0 d N 0 LL 0 s z 0 R SL 9 3 oc 8 9 sz OL I oe S lel R se D o P 91 NAC H 8 10 0 gt d oi 9 0 0 gt d p 9 0 du 496uty dg Je6buty Wig wia wia wia S K 0 zx LE 9 e E E DL D H S 0 L cm SL sk oz a rz sz oz 1 cT S od ME 10 0 d 8 E L oy e Sr a e Kl AT O IW s01X Wed e 0L SL 0c luu s0LX a 96 2 1 6 1 2 8 4 0 b
88. 00 HMGB 1 0000020 0 0 HMGB 1 40 HMB 1 H 1 2 HH Hx 10 0 D 0 D 0 0 D 0 0 HMGB 1 HMB 1 D DU ARIS HHHH HHHH HHH HMGB 1 HHHH 0 50 4 JP 5241518 B2 2013 7 17
89. 0000 1000000 100u L 37 C0 20 000000 HHHH HHHHHHHHHHHHHH 0 1M 0 1000 LO O H O D 37 C 2 POHHHHHHHIlgGHH g 50000 HHHHHH Ou L 37 C0 20 0 00000000000000 3nM 2 2 0 3 HH 0 ABTS HHH5OHMIHHHHHH 0 24nM 0 0 0 30 1 7 IHHHHH 001000001 IHHHH15HHH1 100150 LO 6311 0 0 0 0 0 0 0 0 IHHHHHHHHHHHHHHHHHH415nnWHHHHHH 0 X63 Ag8 U1H HHHHHHHH 9085HHHH D D 0 0 0 0 0 0 0 RPM 16 40 0 0 200m0 eu 2000 0 RPM 1640 IHHH 20 H H D 0 P3 X63 Ag8 U10 IHHHH IHHHHHHHHHHHHHHHHH 500 0 RPM 1640 0 0 HHH 00000 0 nn 50 29 JP 5241518 B2 2013 7 17
90. 0000000000019 il i 3 6 HMGB 1 HMGB 1 2 ut 5066107 ut ul HMB 1 HMB 2 1 U U i ID 20 6 G7E1 O 11 6 HMB 1 HMGB 1 2 0 HMG 1 0 HMGB 1 utu u BALF HNCP 1 HMD 1 HMGB 1 ll a ul b NSIP IUUUDUDDUCOIPFIDUDUDIDDUC d IPF b d al x 1000 br O d x 2000 cO x 400 IT HMGB 1 u t 0 g 3 b 1 5 9 uy e 14H f 14 d uu Ifl i 0 a e x 100 x 4000 10 20 30 40 50 8 JP 5241518 B2 2013 7 17
91. 0002 3HHHHHHHH11HHHHHHHHHH 20m 1985A HHHHHHHH80u HHHHHHHHHH 2 20m0 0 d dut 100 3 96 30 BSAHHHHHHH 5000 20rHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 20m0 io 3 0 0250 0 3 3 00000000000 0 010000000000000000000020m000000000000 1500000000000000000000000D300000000 RO6G E10 0 4 96 Ll Ll 50667100 1 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 60 HMB 1 40 100000 9 0 HG HM 2 20 0 0 000 11
92. 0500000 200 Tweb20 5 59 1 47nM 137nM 0 2 68 pHZ 2 H HHHHHHH 10 Bea 10nM D D 00000000000000pH7 2 100000 300 37 CH 2 HHHHHHHHHHHHHHHHHHH 3H HHHHHHHHHHHHHHHHHH100uLHHHHHH900uLHHHHH 1000H 10000H O O 1000000 25 JP 5241518 B2 2013 7 17 100uLHHHHHH3Z CH2HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 2 L 10 BSAH 0 1MI 100p LH 37 C 20 P
93. 9 199 206 i Vandame et al Eur J Bio chem 1990 192 767 75 HHHHHHHHHHHHHHHHH TRNA Cmirgwn et al Bi ochen stry 1979 18 5294 90 0 ACPQ Chonczynski et al Anal Biochem 40 1987 162 156 9 0 0 RNAD U UU RNA Pu rification Kit Pharmacia TRNA Qui ckP rep nRNA Purification Kit Pharnacia H 000000000 RU II UU I DD TRNAJHHHHHHHH mRNA M cDNA cDNA AW Reverse Transcri ptase First strand cDNA Synthesis Kit HHH 0 ca DH D 5 Anpli FI NDER RACE Kit Clontech l PCR 5 RACED Fro hnan et al Proc Natl Acad Sci USA 1988 85 8998 9002 Bel yavsky et al Nucl eic Acids Res 1989 17 2919 320 00000000000000000000000 IDOOO0O0000000000Rr pPcooOLOOHMOOOOOvYOVOOcNOOODO 50 16 JP 5241518 B2 2013 7 17
94. 90 10000 50000 0 00 3 3 3 40000000000 100 37 CH 200000000 J E IHHHHHHHHHHHHHHH 3nM 2 2 3 0 6 0000000ABTSD 150nMJHHHHHHHH 24 0 imnuugugaurivagagggggggnuagguagdggaugsti Ou L I00000000001500010000015010 6NJHH 000 El AI HHHHHHHHHHHHHHHH415nnHHHHH 0 112HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 0 DO000000000 090000 Ont TBS 0 14M NaCl 0 01M Tri s pH 4 O 019NaN 40nt 7 5m CaCl al 10 WW 2 HHHHHHUHHUHHHHHHHHHHHHHHUHHHHHHHHHHHHHH LA o 20g 1001 TBS PPS n 24 JP 5241518 B2 2013 7 17 Co EI 1 I B Ll L3 L3
95. HHHHHHHHHHHHHHHHHHHH IIiuuniuunuunuunuugninUniuunuuunuunonu 2 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH J Dff Qui ck Baxter D agnosti cs 20 Ot BAD HHHHHHHHHHHHH HMSB 1 HHHHHHHH 80 C 4 HMB 1 ut 30000 10 8 HHHHHHHHHLHHHHHH 00 0 SAB PO 0000 0 0000 000000000000 0 HMGB 1 O Upstate Lale Placid NY aC D u LU u 5 0 10 LOU HD OE 40 OHHHHHHH 5 0 20 0 50 250 00 30200000 5000 nn 6 DNA HHIHHHHHHHH TUNELO HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH Kuwano K et al J Cin Invest 1999 104 13 9 Meeyana T et al AmJ Physiol Lung Cel Mol Physiol 2001
96. HMGB 10 0 0 0 ELISAHHHHHHHHHHHHHHHHHELISAHHHH 1 1 HMGB 1 24 JUD 0000 0000000 000000 000 0000 0 JUD HATHHHHHHHHHHHHHHHMSB 1HHHHHHHHHHH 1 1 H ELI 520 0 HHHH 00400000000 UD 20 4 0000 H DO 0 0 HMGB 1 0 000 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH IHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH Dn D n 00000000 00000 000 1004 0 110 0 0 0 0 0 5 0 0 0 10 00 0002000000000096 000000000 10 0 0 0 0 100p L O00000 20300000000000 00000 0 00002 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH MGB 1 IHHHHHHHHHHHHHHHHHELISAJHHHHH 1H HHH1HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 2000000 30 24 00000000000002000 0000 0 D000000000050000000 HMGB 10 0 0 000 ELI SA ELI Sa 0 0 0 0 0 960 0 0 0 0 0 0 0 HHHH 0 0 50D000000HM8 100000000000 0000 0 0 HHH1 1 HHHHHHHHHH 20 IHHHHHHHHHHH HMGB 10 0000000 0 0 50 0 0 0 0 0 0 HMB 1000HMG 40 B 20000000 00 EL SA 0 0 ELI sag O 0000 96000 000 0 0 0 50000000HMs 1I0000 HVC 2D D 000000000001 1 IHHHHHHHMGB 1HHHHHH HMGB 2 IHHHHHHHHHHHH RO8GL2 G2 RO6G E10 HHHH 5 4000 0 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH 50 30 JP 5241518 B2 2013 7 17 I00000000000000 200g U1 RPM 16400 0 0 0 30000 2m RP 1 HHHHHHH8HHHHHHHHHHHHHHH
97. NEL b TUNELH HMGB 1 14 OD 0 0 TUNELO d julia x 40 b d x 200 J HMB 1 IDDU 14H HMGB 1 SE b 14 HMGB 1 U D 14 HMB 1 TUNEL O00000000000000000 d 000 14 HM 10 0 U BAL HMSB 1H HHHHHHHHHHHHHH 14 HMGB 1 BAL SE EP 8 b 14 DEP UU BALF HMGB 1 ut BALF HMB 1 u o uuuuuunnauu DUOI40000EPOOOOODOODODOO O SE d H UU 14 EP PED an SER 2 nnmn SE BAL TER IDD 14 EP DAT SE HMB 1
98. OD 0 1g Up DatalHHH 30 85240 50000 3 40000000000 a 1 CH 2HHHHHHHH JU 3nM2 2 3 0 O0 6 000000 0 ABTS 50nM l 24nM 10 LO 214 LO 1 70 0 10 150 0100000 50u LO 6 4156580 2 Cys Lys Pro Asp Ala Ala Lys Lys Gy Val Val Lys 3 BSAJHHHHHHHH 100u g nH 0 9000000000000000000000000000
99. dol ph CRC Press Florid 1996 VO BAN 17706 93 ex vivo ul 4 945 050H u 20 HHHH HMGB 1H n 000 000000000 HHH 0000000 nnnm 30 Ll Ll ut 2 HMB 1 HMGB HH HMGB 2 HMGB 1 40 HMGB 1H 6 0 0 1 Ven et al Nucleic Acids Res 1989 17 1197 214 HMGB 1 20 O0 O0 O CT P Hopp et al Proc Natl Acad Sci USA 1981 78 3824 8 0 HMGB 1 HMGB 2 3 M Yoshida et al J Biol Chem 1992 267 6641 50 00000000 HMGB 1 HMGB 2
100. n scFv VHHMHHHHHHHHHHHHHHHH scFvHH O Huston JS et al Proc Natl Acad Sci USA 1988 85 5879 8 3 scFv Pl uckthun The Pharmacol ogy of Mbnocl onal Anti bodi es V ol 1130 Rosenburg and Moore ed Spri nger Verl ag New York pp 269 315 19940
101. peptide synthesizer t Cys Lys Pro Asp Ala Ala Lys Lys Gy Val Va LyxsAadGuLkLys00000 3000000000000000000000000 mti U Ll D l U U U U u 2N HHHH 0000 0 D 0 0 0 0 1 2 DOIEX 1 X2 QDS HHHHH 20 u O HPLC u HPLG HPLG OS YMC D ODS 50 20mm 30050 TW NCLET ll GP o0 0 O 700 0 A40 0o 1000000000 TFA UDC 100M 210nm 1 0 0 0000000000 7 O0m j 28AUFS I CDS JU PLA YMC R ODS 50 4 On 300mp 0 000000000 0 0 TW NCLE IHHHH 30 GP A40H 0 TFA H 0 1 0ntH 25H WI C 10 700000 OM 210nm 1 28AUFS H HHHHHHHHHHHHHHHHHHH 100
102. phy Acta 1975 405 280 Yoshida Met al J Biochem 1980 95 117 24 Adachi Y et al J Chromatogr 91 2 HMGB 10 HM 39 46 530 1992 1 HMGB U HM 1 u HMGB 10 HMGB 1 GenBank Accessi on No NP_002119 CenBank Accession No NM 0021280 uu u u HMGB 1 10 JP 5241518 B2 2013 7 17
103. r Endothelial Gowh Factor VEGF U TNFa 8 1L 8 Oo Met al Che mother Pharnacol 1999 43 S69 71 Andersson U et al J Leukoc Biol 2002 72 1084 91 Schi ueter HM 1 in vitro UN Schlueter C et al Am Pathol 2005 166 1 259 63 HHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHHH Hanada N et al J Immunol 2005 175 1224 31 Burdick MD et al Am Respir Crit Care Med 2005 171 261 8 Dumtriul I U U D i HMB 1 T00000000000000 Dumitriu LE et al J Im munol 2005 174 7506 15 u THH HMB 1 00 l 0 E 0 0 PFO HPO O O BALF 0 HMSB 1 HMG 10 IPFH HMGB 1 i i HMGB 1 o HMGB 10 J
Download Pdf Manuals
Related Search