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Bedienungsanleitung – BioPhotometer D30
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1. 7 1 3 0 2 522 0 cee cee tee Cu q a wau 7 1 4 SCABKUTZUNGENS ea 7 3 3 311 1 1 1 0 8 2 ne a re nee 9 2 1 Gesamtillustrati ns 7 e d EA a aa 9 2 2 Lieferumfang 3 1 See ee 9 2 3 Produkteigenschatten 2 ve hh iis e a ee ee uQ 10 2 3 1 Methoden 11111171 0 10 2 3 2 B dl n UN G vi 4 1 1 11 1 11111 590 9 10 2 3 3 1 d 10 2 3 4 Selbsttest des Ger ts es 10 3 Allgemeine Sicherheitshinvveise aaa ana 11 3 1 Bestimmungsgem er Gebrauch 11 3 2 Anforderung an den Anwender 11 3 3 Gef hrdungen bei bestimmungsgem em Gebrauch 11 3 3 1 Persomens had n 2 See uy okt ine 11 Gerateschaden gief vi en er nee 0 13 3 4 Hinweise zur Produkthaftung 2 2ee oe 14 35 Sicherheitshinweise am Ger t 14 4 Installation kr ei renden 15 4 1 Installation vorbereiten eo 15 4 2 Standort wahlen l sss u ae a ne en en ee re 15 4 3 Gerat an das Netz anschlie en
2. lin ew series Bradtorzd 2010 11 25 16 28 23 Abs A r 1 200 gt 0 900 0 600 0 300 0 000 Conc 797 Abs 0 929 0 300 600 900 1206006 gm 15 ID 797 pg mL 0 929 Ass nd W key Dilution Edit ID Data Finish lt Back Next gt 5 3 2 6 Optional Ergebnisse nachbearbeiten dsDNA H measure samples print amp export frew series dsONA 2012 06 01 14 25 48 6 0 More Calc Dat Finish gt Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 25 Deutsch DE gt Mit der Taste sample messen Sie der Reihe nach Ihre Proben Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert Eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit m glich In der hier gezeigten Abbildung eines Messablaufs mit Auswertung ber Standardkurve wird zus tzlich zum Probenergebnis der Graph der Standardauswertung angezeigt 1 Dr cken Sie Finish um die Messreihe zu beenden und zur Methodenauswahl zur ckzukehren 2 Schalten Sie nach Abschluss aller Messungen das Ger t aus und schlie en Sie die K vettenschachtabdeckung um den K vettenschacht vor Verschmutzung zu sch tzen Bei den Methoden der Methodengruppe Nucleic acids k nnen Sie im Methodenschritt process results Ergebnisse nachbearbeiten y W hlen Sie mit den Cursor Tasten und 9 gezielt Ergebnisse der Messreihe f r die Nachbearbeitung aus Softkey More Calc Konzentrationsergebni
3. ss 69 10517 Transport nei 1 1 115 69 AREMT E scl a u 3 3 31 1113 1 69 10 31 ERISORGU NG EE 69 11 12 13 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Technische D ten tt hen SG GN De et Eege ee 71 1110 Str mvers rgung zer naar a I a e ge 71 11 2 Umgebungsbedingun ge nis ususi ar 2 4 eas 71 11 3 een KE 3077777 9 7 8 8 111 8641 EE ae ENG 71 11 4 Photometrische Eigenschaften eos 72 11 5 Weitere technische Parameter sa ns MECH pd e 72 11 6 Anvvendungsparameter 73 Auswerteverfahren uu 3 3 1 90 75 12 1 Extinktionswerte ENNEN 1 1 09 75 12 1 1 Blank lt 7 en hp E 75 12 1 2 Background Korrektur 75 121 3 KUvettenkorrektur be 1 AE 76 12 2 Auswertung mit Faktor oder Standard 76 12 3 Auswertung mit Standardkurve gerade eeeeeeeee es 77 12 4 Verd nnung res ee ee ee en 78 12 5 Spezielle Auswerteverfahren f r Nukleins uren und Protein UV 78 12 5 1 Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 79 12 5 2 Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleinsauremengen 79 12 5 3 Berechnung des Fa
4. 15 4 4 Dr ckerranschlie enisz Saas tet eet top ate ade Rot Aap atl ale eit Zeie A 3 16 4 4 1 Thermodrucker DPU S445 16 4 4 2 Thermodrucker DPU 414 1 ts 16 45 PC oder USB Stick fur Datenexport anschlie en sss 17 ba Bedienung ec tas ess eos EE 19 5 1 Ubersicht Be dienelement nAn neta misma ot eee eile ots els oe bells ence ge 19 5 1 1 HK ln et 21 5 2 EE 22 5 3 bersicht ber den Messablaut u an sa een 23 5 3 1 Messung vorbereiten 23 53 2 Messablauf i uyruta PE GS Tan Tach ahs Ch y ke u Tacas Za 23 5 3 3 Wichtige Hinweise f r die Messungen ees 27 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 6 Methoden a uu een 3 7 Sg EE 29 6 1 Methodesausw hlen csc su em Hr a a ge 29 6 2 Methodenbeschreibung Photometrie aa 30 6 2 1 Methodengruppe Absorbance 30 6 2 2 Methodengruppe Routine 30 6 2 3 Methodengruppe Basic 31 6 3 Method nparamet t zs mimi vr penne cot De ae 32 6 4 M thodenablauf ns anzu d m r ee ee e e 34 6 4 1 check parameters ia ae aa ea Ma gaa 35 6 4 2 measure standards oc 2 u se sh 36 6 4 3 measure samples es 37 6 4 4 measure samples Ergebnisanzeigen eee 39 64 5 PFOCESSIFESUITS Far 1 1111111111 0 42 6 4 6 print Export din di D a NN ee EE dite de aye 43 6 4 7 Messreihe absch
5. 8 3 1 2 Wellenl ngenrichtigkeit berpr fen y F r die berpr fung der Wellenl ngenrichtigkeit verfahren Sie entsprechend Hier messen Sie mit 3 Pr ffiltern bei der entsprechenden Wellenl nge Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 59 Deutsch DE 8 3 2 Selbsttest des Ger ts Die H ufigkeit des automatischen Selbsttests Dauer ca 1 Minute k nnen Sie mit der Funktion Device settings einstellen siehe Device Settings auf S 51 Ab Werk ist als Selbsttest Intervall w chentlich eingestellt Beim Selbsttest werden die folgenden Punkte berpr ft berpr fung des Detektors Bestimmung der zuf lligen Messabweichung der verf gbaren Wellenl ngen berpr fung der Lichtquelle berpr fung der maximal verf gbaren Energie der Lichtquelle und der Qualit t der Lichtleitung durch das Ger t Bestimmung der zuf lligen Messabweichung eines Signals am Referenzsensor Bestimmung der Signalh he am Referenzsensor Separate Bestimmung der Lichtintensit t im UV Bereich Bestimmung der systematischen und zuf lligen Messabweichung der Wellenl nge Wahlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Perform selftest und best tigen Sie mit enter Nach Ablauf des Selbsttest zeigt das Display die Meldung PASSED Wenn das Display die Meldung FAILED zeigt ist der Selbsttest fehlgeschlagen Wenn sich dieser Fehler nicht beheben l sst siehe Fehlermeldungen auf S 63 wenden Sie sich an den Eppend
6. VGA TFT Display 5 7 Technische Daten Eppendorf BioPhotometer D30 73 Deutsch DE Sprachen f r Bedienerf hrung Englisch Franz sisch Spanisch Italienisch Deutsch Schnittstellen USB Master F r USB Stick und Thermodrucker DPU S445 USB Slave F r Verbindung mit einem PC Serielle Schnittstelle RS 232 F r Thermodrucker DPU 414 Angeschlossene Ger te m ssen den Sicherheitsanforderungen gem IEC 60950 1 entsprechen 11 6 Anvvendungsparameter Methoden Vorprogrammierte und frei programmierbare Methoden f r alle Mess und Auswerteverfahren Extinktionsmessungen e Nukleins uren und Proteine 00600 e Methoden mit Auswertung ber Faktor Standard und Standardreihe Methodenabh ngige Auswertung Extinktion Konzentration ber Faktor und Standard Konzentration ber Standardreihe Lineare Regression Nichtlineare Regression Polynom 2 und 3 Grades e Spline Auswertung e Lineare Interpolation Punkt zu Punkt Auswertung Zusatzdaten f r Nukleins uren Ratio 260 280 und 260 230 Molare Konzentration Gesamtausbeute Methodenspeicher gt 100 Methodenprogramme Messwertspeicher und Kalibrationsspeicher Speicher f r gt 1 000 Ergebnisse mit allen Daten der Ergebnis und Standardauswertung Probennummer Probenname Datum und verwendetem Parametersatz des Methodenprogramms Die Anzahl der gespeicherten Ergebnisse ist abh ngig von der Anzahl der gespeiche
7. Das BioPhotometer D30 ist ein UV VIS Photometer f r die Messung von Fl ssigkeiten in K vetten Da die Messdaten bei festen Wellenl ngen erhoben werden eignet sich das Ger t besonders f r Routineanwendungen im molekularbiologischen biotechnologischen biochemischen und zellbiologischen Bereich in Forschung und Entwicklung 2 3 1 Methoden Vorprogrammierte Methoden und Methoden Templates Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren und Proteinen Bestimmung der Bakteriendichte durch Tr bungsmessung Methode OD 600 e Methoden Templates f r unterschiedliche Mess und Auswerteverfahren schnelle Extinktionsmessungen Auswertungen mit Faktor Standard und Standardkurve Eigene Methoden k nnen auf Basis der vorprogrammierten Methoden und Templates erstellt werden e Schnelles Messen von Extinktionen ohne weitere Auswertung Methodengruppe Absorbance 2 3 2 Bedienung Die vorprogrammierten Methoden und Templates sind in bersichtlichen Gruppen zusammengefasst aus denen Sie schnell Ihre gew nschte Methode ausw hlen k nnen Nach Methodenaufruf werden Sie in bersichtlichen Schritten durch den Messablauf gef hrt Eine Hilfebox im Display gibt Ihnen bei Bedarf Hinweise Die 3 Messtasten standard blank sample erm glichen den schnellen direkten Start einer Messung 2 3 3 Ergebnisausgabe Das BioPhotometer D30 gibt die Ergebnisse auf dem Display sowie ber einen bei Eppendorf erh ltlichen Drucker aus ber einen USB
8. ds DNA 2012 06 01 14 07 09 Data packets Samples BResults DGrapp Method ElParameters Functions Main Groups Sub Groups Functions General Method Parameter Proteins Protein name Ovalbumin Factor 42900 g L Ss TT Ext coeff ksaj L mol cm Molecular mass kDa Softkeys Edit J New JI Delete OK e Edit Ausgew hlte Parametergruppe editieren New Neue Parametergruppe erstellen e Delete Ausgew hlte Parametergruppe l schen e OK In die Funktionsauswahl zur ckkehren Funktionen Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 49 gt Wenn Sie Ergebnisse drucken oder exportieren m chten w hlen Sie die Datenpakete aus Der Ablauf f r Druck und Export sowie die Bedeutung der Funktionstasten entspricht dem Methoden Schritt print 8 export gt Wahlen Sie in der rechten Spalte die Parametergruppe aus f r die Sie Parameter editieren m chten gt Best tigen Sie mit enter In diesem Beispiel sind Parametergruppen f r verschiedene Proteine zusammengefasst und jeweils unter einem Namen abgelegt Unter diesem Namen kann die gew nschte Parametergruppe bei der Editierung einer Protein Methode Methodengruppe Proteins direct UV in das Methodenprogramm importiert werden Display e links Name des Proteins W hlen Sie mit und 9 rechts zugeh rige Parameter 50 Funktionen Ep
9. e Methoden mit Auswertung ber Faktor e Methoden der Gruppe Absorbance bei denen nur Extinktionswerte ausgegeben werden Die Korrektur wird nicht angewendet auf e Methoden mit Auswertung ber Standards da vorausgesetzt wird dass Standards und Proben in K vetten derselben Schichtdicke gemessen werden e Berechnung von Ratios wie 260 280 bei Nukleins uremessungen A s XXX corrCuv XXX Cuv Axxx korrCuv rechnerisch korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Cuv Schichtdicke der K vette 12 2 Auswertung mit Faktor oder Standard C AxF C berechnete Konzentration A Extinktion F Faktor Der Faktor ist in der Parameterliste programmiert und kann ver ndert werden Er bezieht sich immer auf die K vettenschichtdicke 10 mm Wenn Sie den Parameter Cuvette ndern wird die nderung vom Ger t bei der Ergebnisberechnung ber cksichtigt Sie m ssen den Faktor f r die Auswertung also nicht ndern Wenn Sie die Konzentrationseinheit ndern m ssen Sie dagegen darauf achten dass der Faktor an die gew hlte Einheit angepasst ist Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 77 Deutsch DE Der Faktor wird entweder beim Auswerteverfahren Factor direkt als Parameter eingegeben oder beim Auswerteverfahren Standard Auswertung mit einer Standardkonzentration berechnet F berechneter Faktor Cs Konzentration des S
10. standard Standardmessung starten Leerwertmessung starten Probenmessung starten Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 21 Deutsch DE 5 1 1 Text eingeben Texte konnen Sie bei der Vergabe von Methodennamen und Ergebniseinheiten eingeben Einschrankung Fur Methodennamen sind nur Ziffern und Buchstaben sowie der Unterstrich _ erlaubt an es Mit den Cursor Tasten und navigieren Sie im ES LS Dane SO a aaa cel Eingabefeld und k nnen einzelne Positionen im Method name dsDNA Namen ver ndern Target directory S KS OFavorites MyMethods Keyboard Tastatur einblenden e abc Wechsel zwischen Gro und Kleinbuchstaben bei Eingabe ber den Tastenblock Save Eingegebenen Text speichern W hlen Sie Gas aktuale Verzeichnis ICancell Texteingabe abbrechen oder ein Zielverzeichnis in Favorites Keyboard abc Save Cancel 0 Mit den Cursor Tasten w hlen Sie die Enter tha name and storaga location eingeblendeten Zeichen aus und bestatigen jeweils Method name mit der Taste enter Wie bei einer PC Tastatur k nnen Sie mit der Shift bzw der Feststelltaste f r Target directory Favorites MyMethods 00 e die n chstfolgende bzw f r alle folgenden Eingaben OFavorites MyMethods v f zwischen Gro und Kleinschreibung wechseln Softkeys l lalalals ie 78 eo e Numbers Zur Eingabe ber den Tastenbl
11. zu hoch Tr bungen in der Messl sung Optische Fl chen der K vette verschmutzt K vette in falscher Orientierung in den K vettenschacht gesteckt Zu hohe Extinktion der Messl sung gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen neu messen Das berechnete Ergebnis ist negativ Messl sung falsch angesetzt Faktor falsch eingegeben falsches Vorzeichen gt Unter Ber cksichtigung der m glichen Ursachen neu messen Ergebnis hat mehr als 6 Vorkommastellen Sehr hohe Probenkonzentration Konzentrationseinheit passt nicht zu dem erwarteten Bereich der Probenkonzentrationen gt Probe verd nnen und neu messen gt Konzentrationseinheit Parameter Unit ndern und neu messen Das Ergebnis liegt um mehr als 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrati onen Bei Methoden mit Auswertung ber Standardkurven nichtlinearen Auswerteverfahren Das Probenergebnis liegt um mehr als 5 au erhalb des Bereichs der Standardkonzentrationen gt Probe unter Bedingungen neu messen unter denen das Ergebnis im Bereich der Standardkonzentrationen liegt Probe verd nnen Standardkonzentrationen ver ndern und neu messen Berechnung ist nicht m glich weil durch Null geteilt wird Extinktionsergeb nis ist Null Fehler bei der Berechnung Division durch Null Bei der Auswertung musste durch ein Extinktionsergebnis mit dem Wert Null geteilt werden Das ist mathematis
12. 2 gt Handlungen ohne vorgegebene Reihenfolge Liste Zusatzliche Informationen Anwendungshinweise Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 1 4 Abk rzungen A Absorbance Extinktion DNA Deoxyribonucleic acid Desoxyribonukleins ure DNS dsDNA double stranded DNA doppelstr ngige DNS M mol L molar 00600 Optische Dichte bei der Wellenl nge 600 nm RNA Ribonucleic acid Ribonukleins ure RNS ssDNA single stranded DNA einzelstr ngige DNS UV Ultraviolette Strahlung Vis Visible light sichtbares Licht VK Variationskoeffizient Standardabweichung Mittelwert in Prozent Produktbeschreibung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 2 Produktbeschreibung 2 1 Gesamtillustration Abb 2 1 BioPhotometer D30 Vorder und R ckansicht 1 Display 6 Sicherungshalter 2 K vettenschacht 7 Netzanschluss 3 K vettenschachtabdeckung 8 USB Anschluss f r PC 4 USB Anschluss f r USB Stick und Drucker 9 Anschluss RS 232 Drucker 5 Netzschalter 10 Bedienelemente Das Typenschild befindet sich an der Ger teunterseite links hinten 22 Lieferumfang Anzahl Beschreibung 1 BioPhotometer D30 1 Netzkabel 4 4 UVetten Original Eppendorf Kunststoffk vette einzeln verpackt PCR clean Protein free 1 Bedienungsanleitung mehrsprachig 10 Produktbeschreibung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 2 3 Produkteigenschaften
13. 2012 06 01 17 04 47 Yes Auf alle Proben anwenden No Nur auf aktuelle Probe anwenden Yes No Cancel 6 4 6 print 8 export Im letzten optionalen Methodenschritt k nnen Sie Datenpakete f r alle oder f r ausgew hlte Proben einer Messreihe f r den Ausdruck auf dem Drucker oder f r den Export auf einen USB Stick oder ber USB Kabel direkt zu einem PC zusammenstellen Albumin A 280_STD ed print amp export METER Datenpakete auswahlen Admin A 280 STO 2012 06 01 12 40 05 Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und best tigen Sie mit enter Samples Results Softkeys Graph Print Ausdruck starten Method Pr en Exportl Export starten Sample Einzelne Probenergebnisse ausw hlen STEGE ElResults Gate I Print Export Samples Finish if lt Back Next gt auswanien r e Dr cken Sie den Softkey Samples um die Sample selection 5 Probenauswahl aufzurufen 01 0 33mg mL Navigieren Sie mit den Cursor Tasten und 02 1 34 mg mL best tigen Sie mit enter 03 0 33mg mL 04 0 89 mg mL Softkeys 05 0 11mg mL Select all Alle Proben ausw hlen IDe Sel all Auswahl zur cksetzen Pun Export Select all De sei all OK Cancel Daten Export Die Daten werden als Excel Datei xIs bertragen und sind mit Excel Versionen ab Excel 97 lesbar F r jedes der ausgew hlten Datenpakete wird ein Tabelle
14. 968 1 496 1 530 0 172 0 195 0 943 0 969 1 503 1 538 Random error of wavelength Random error of photometer Zuf llige Messabweichung der Wellenl nge Zuf llige Messabweichung des Photometers Limiting values CV Grenzwerte VK 260 405 nm 550 600 nm Wavelength and photometric accuracy Wellenl ngen und photometrische Richtigkeit traceable to r ckf hrbar auf NIST SRM 2034 SN 04 A und SN 667 Wavelength and photometric characterization of filters All characterization is performed on a Cary 100 Bio reference UV Vis spectrophotometer SN EL 99023107 The instrument is requalified regularly by the manufacturer and is confirmed and documented to perform within manufacturer s specifications The current instrument qualification is valid through April 2015 For the current instrument qualification the following NIST traceable certified secondary spectrometric calibration standards were used Wellenl ngen und photometrische Bestimmung der Filter Alle Messungen werden auf einem Cary 100 Bio Referenz UV Vis Spektrophotometer Seriennummer EL99023107 durchgef hrt Dieses Instrument wird regelm ig vom Hersteller requalifiziert und die spezifikationsgem e Funktion dokumentiert Die aktuelle Qualifizierung ist bis April 2015 g ltig und verwendet folgende NIST r ckf hrbare und zertifizierte spektrometrische Sekund rstandards SRM 2031a SN 667 valid through g ltig bi
15. D30 Taste Funktion ES Tastenblock Zahlen und Text eingeben Tasten 1 bis 9 sowie 0 Bei Texteingabe konnen Sie neben Ziffern auch ED Buchstaben und Sonderzeichen durch mehrmaliges Dr cken der Taste eingeben Alternativ wechseln Sie mit Keyboard zu einer eingeblendeten Tastatur Au erhalb von Eingabefeldern Methodenauswahl aufrufen Au erhalb von Eingabefeldern Funktionsauswahl aufrufen Softkey Funktionen anw hlen Die Belegung der Taste wechselt mit dem Software Dialog Die aktuelle Funktion wird im Display direkt ber der Taste angezeigt 688 es 20 Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Taste 9 Funktion Cursor nach links rechts oben unten bewegen Navigieren zwischen Eingabefeldern e Cursor Tasten und innerhalb eines Eingabefeldes Innerhalb der Zeichenfolge navigieren Tasten und Q in einer Ergebnisanzeige Zwischen den Probenergebnissen der Messreihe navigieren Tasten und innerhalb eines Graphen Auf der x Achse des Graphen navigieren um z B in einem Scan die Wellenl ngen abh ngigen Extinktionswerte anzuzeigen delete Aktuelle Auswahl in die nachsthohere Ebene verlassen Eingabe l schen Innerhalb einer Zeichenfolge wird das Zeichen links vom Cursor gel scht Ausgew hlte Methode oder Funktion aufrufen Auswahlliste ffnen Eingabe oder Auswahl best tigen
16. Extinktionswert fur 280 nm e Ratio A260 A230 und Extinktionswert fur 230 nm e Extinktionswert fur die Background Wellenlange Proteins direct UV Albumin A 260 Abumin A 280 2012 07 31 18 05 28 print amp export in measure samples ee 02 0 600 I ID 0 400 A 0 85 mg mL 0 564 Ai A 0 200 i nto SE 0000 To 286 300 320 asda A 280 Abs 0 564 gt Dilution Edit ID Data Finish lt Back Next gt Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls in den Parametern aktiviert eingeschr nkter Scan Navigieren zwischen den Messpunkten im Graphen die f r die Ergebnisberechnung herangezogen werden k nnen mit und Zusatzdaten Softkey Data Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden e Extinktionswert fur 260 nm e Extinktionswert fur die Background Wellenlange Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 41 Methodengruppe Proteins with reagent Ergebnisanzeige Bradtord 2010 11 25 16 28 23 ZOE mensure samples ET Abs A 08 at 1 200 DB At 0 900 Sa 2 1 3 pg mL K 0 393 Au 0 600 f 0 300 f 7 t f 0 000 0 300 600 900 120800 00040 a and vi Dilution Edit 1D IL Finish lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenla
17. Messablauf abbrechen bzw beenden Der Name dieses Softkeys wechselt nach der ersten Probenmessung von Abort auf Finish 6 4 1 check parameters Cuvette 10mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Beca piacot 0 Autoprint off Edit paramete Edit Page Page dn Abort lt Back Next gt Cuvette 10mm Y Page 1 2 Wavelength 1595 nm Unit pg mL v Calculation Standard Y Standards 8 Replicates Bi EES 2 0 6 vo Autoprint D Number of repeat Jl Page dn Save J Save As Cancel IECH check parameters I save as OFavorites MyMethods Enter the name and storage location Method name Bradford_1 Target 0 00 v Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 35 Deutsch DE Softkeys e Page dn und Page upl Zwischen den 1 bis 3 Parameterseiten wechseln Edit In den Editiermodus f r Parameter wechseln Editiermodus f r Parameter Ge nderte Parameter werden mit einem roten Stern markiert solange die nderung nicht gespeichert wurde Softkeys Save und Save as nderungen speichern Bei Save as m ssen Sie der Methode einen neuen Namen geben Das ist immer der Fall wenn Sie die von Eppendorf vorprogrammierten Methoden der Gruppe Routine ndern Cancell Editiermodus ohne Speicherung der nderungen verlassen Speichern der Methode unter neuem Namen Sie k nnen die Methode entweder im selben Ordner speiche
18. Parameter Background m glich Umrechnung der Konzentrationen in molare Konzentrationen sowie nach Eingabe des Probenvolumens in Nukleins uremengen m glich Methodenschritt process results Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 31 Deutsch DE Proteins direct UV Konzentrationsbestimmung von Proteinen durch Messung bei 280 nm und Auswertung ber Faktor oder Standard Vorprogrammierte Methoden zur direkten Ausgabe der Extinktionen als Ergebnis Protein A 280 sowie zur Auswertung ber Albumin spezifischen Extinktionskoeffizienten Albumin A 280 Vorprogrammierte Methode f r Mikroliterk vetten Messung von Protein in Probenvolumen im Mikroliterbereich mit Lichtweg 1 mm mit Mikroliterk vetten wie Eppendorf uCuvette G1 0 oder Hellma TrayCell Zusatzinformationen zur Reinheit des gemessenen Proteins Extinktion der Background Wellenl nge voreingestellt 320 nm die Extinktion des reinen Proteins sollte hier ann hernd Null betragen Partielle Tr bungskorrektur ber Parameter Background m glich Bei der Methodenprogrammierung wird durch einfache Auswahl des Proteins aus einer vorgegebenen Liste der zugeh rige Faktor importiert Die Definition der Faktoren erfolgt separat in den Funktionen der Gruppe Gen method param Verschiedene Proteine sind in Gen method param vorprogrammiert Weitere k nnen Sie hinzuf gen Proteins with reagent Konzentrationsbestimmung von Proteinen durch Messung nach Farbreaktionen und Auswert
19. Softkey Datal angezeigt werden Graph Eingeschr nktes Extinktions Wellenl ngen Spektrum Parameters Methodenparameter Standards Results Ergebnisdaten der Standardauswertung Standards Graph Nur bei Standardauswertungen mit mehreren Standards Extinktions Konzentrations Graph In Abh ngigkeit von der Methode und von der Parametereinstellung werden nur die jeweils verf gbaren Datenpakete angeboten Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 45 Deutsch DE 6 4 7 Messreihe abschlie en Im Anschluss an den letzten Methodenschritt print amp export k nnen Sie eine neue Messreihe mit der gew hlten Methode starten oder eine neue Methode w hlen Messreihe abschlie en und neue Messreihe starten Abumin A 200 III TI TE e Softkey Next gt Methodenschritt new series Albumin A 280 2010 11 19 18 32 05 aufrufen Softkey INevvl Methodenschritt measure samples aufrufen und eine neue Messreihe starten i Info new I 1 Finish J lt Back Messreihe abschlie en und eine neue Methode w hlen Softkey Finish Messreihe abschlie en und Methodenauswahl aufrufen Methoden 46 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Funktionen Eppendorf BioPhotometer D30 47 Deutsch DE 7 Funktionen 7 1 Funktionen der Hauptgruppe User Mit der Taste function oder dem Softkey Function gelangen Sie in ein Menu mit Funktionen wie Ger teeinstellungen oder Abrufen gespeicherter Ergebnisse Die Funktione
20. Standardauswertung Bestimmtheitsma ist lt 0 8 Standardreihen uber Regressionsverfahren Das Bestimmtheitsma fur die Regressionsausvvertung deutet auf eine erhebliche Abweichung der Messpunkte von der Regressionsgeraden hin Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs akzeptieren oder Standards neu messen gt Auf klare Messl sungen achten Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 67 Symptom Meldung Das Bestimmtheitsma f r die Regressionsauswert ung der Standardreihe ist lt 0 8 Mogliche Ursache e Bei Methoden mit Auswertung von Standardreihen ber Regressionsverfahren Warnung erscheint nach Messungen von Proben wenn die Regressionsauswertung f r die Standardreihe nichtlinear war die Standardauswertung aber vom Anwender akzeptiert wurde Abhilfe gt Probenergebnisse unter dem genannten Vorbehalt verwenden oder Standardreihe und Proben neu messen Scan Einige gemessene Extinktionen sind zu hoch und werden nicht angezeigt Bei mindestens einer Wellenl nge des Scans war die Extinktion oberhalb des Messbereichs Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs gt Wenn die nicht angezeigten Bereiche des Scans relevant sind Probe verd nnen bzw durch Zentrifugation Tr bung beseitigen und Messung wiederholen Extinktion bei der Messwellenl nge ist
21. error Bitte wenden Sie sich in diesen F llen an den Technischen Service Andere Fehlermeldungen bei denen Sie selbst Ma nahmen ergreifen k nnen sind in der folgenden Tabelle erl utert Symptom Meldung Selbsttest fehlgeschlagen M gliche Ursache K vettenschachtabdeckung war beim Selbsttest offen e Der K vettenschacht war beim Selbsttest nicht leer Abhilfe Wiederholen Sie den Selbsttest mit leerem Kuvettenschacht und geschlossener Kuvettenschachtabdeckung Ger t ist defekt Wenden Sie sich an den Eppendorf Service Die Datei konnte nicht exportiert werden Beim Export von Daten e USB Stick falsch formatiert oder defekt e USB Stick zu fr h w hrend des Exports aus dem Ger t entfernt gt USB Stick neu formatieren oder ersetzen gt USB Stick erneut anschlie en und Export wiederholen Der Drucker konnte nicht initialisiert werden Drucker nicht angeschlossen oder ausgeschaltet Drucker falsch konfiguriert gt Drucker anschlie en und anschalten gt Drucker neu konfigurieren Die Druckereinstellungen zur richtigen Konfiguration finden Sie in der Installationsbeschreibung siehe Drucker anschlie en auf S 16 Blank Messung Eine Intensit t an einem eine Haupt oder Neben oder Scanwellenl nge beeinflussenden Pixel ist zu niedrig e Die fur die Blank Messung benutzte Leerwertl sung hat eine zu hohe Extinktion Falsche
22. ffilter A1 Das Ger t misst das Pr ffilter 15 mal bei 6 Wellenl ngen und zeigt anschlie end die Mittelwerte sowie die Variationskoeffizienten der Messreihe f r alle Wellenl ngen an 58 Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE EE 6 Device Calibration zum Test auf Photometrische Richtigkeit ES eech Messen Sie die beiden anderen Priffilter A2 und ID SAMPLE A1 A3 Wavelength Mean CV 260 nm 0 205 A 0 4 280 nm 0 200 A 0 4 320 nm 0 180 A 0 6 405 nm 0 164 A 0 4 562 nm 0 169 A 0 7 595 nm 0 169 A 0 7 Insert filter SAMPLE A2 and press the sample key Abort lt Back Next gt 5 Ergebnisanzeige nach Messung aller 3 Pr ffilter Device Calibration ES zum Test auf Photometrische Richtigkeit Cheek photom eta accuracy GE Mit den Tasten und Q k nnen Sie sich ID SAMPLE A3 nochmals die Ergebnisse f r die verschiedenen Wavelength Mean ee Pruffilter ansehen Mit Finish beenden sie die 260nm 1 856 A 0 4 i 28000 71 717 0 3 Prufung 320 nm 1 473 A 0 2 6 Vergleichen Sie die Mittelwerte und OT E 0 4 Variationskoeffizienten mit der mitgelieferten 562 1 487 A 1 5 Tabelle 595 nm 1 493 A 0 6 Sollten die gemessenen Werte nicht mit dem Select results zul ssigen Wertebereich bereinstimmen and eys 2 wenden Sie sich an den Eppendorf Service Finish lt Back Lassen Sie die Filter nach 2 Jahren vom Eppendorf Service neu zertifizieren
23. von Partikeln Staub und Fl ssigkeit Messvolumen in der K vette ist ausreichend Minimales Messvolumen beachten Messl sung ist frei von Partikeln und Blasen K vettentemperatur und die K vettentemperierung sind oberhalb der Temperatur des Taupunktes der f r die Umgebungsbedingungen Feuchte und Temperatur gilt Die Richtung des Lichtwegs ist mit einem Pfeil auf dem Geh use gekennzeichnet 1 Positionieren Sie die K vette so dass das optische Fenster der K vette in Richtung des Lichtwegs zeigt 2 Dr cken Sie die K vette beim Einsetzen gegen einen leichten Widerstand ganz nach unten Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 23 Deutsch DE 5 3 bersicht ber den Messablauf 5 3 1 Messung vorbereiten 1 Schalten Sie das Ger t und gegebenenfalls den Drucker ein Das Ger t f hrt einen Selbsttest durch Dauer ca 1 Minute und zeigt die Methodenauswahl an 2 Stellen Sie die K vetten f r die Messungen bereit siehe K vette einsetzen auf S 22 3 Stellen Sie die Messl sungen f r die Messungen der Leerwerte ggf der Standards und der Proben bereit 4 ffnen Sie die Abdeckung des K vettenschachts W hrend der Messungen kann die Abdeckung ge ffnet bleiben Messl sungen f r Standards und Proben mit geringeren Extinktionen als 0 02 bis 0 03 A z B dsDNA Konzentration zwischen 1 0 und 1 5 ug mL sollten nicht eingesetzt werden Die Nachweisgrenze des Ger ts liegt zwar wesentlich niedri
24. 8 078 006 940001102 K vettenst nder f r 16 K vetten Bestellinformationen 84 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE ce SH c SS ce SV C S C Te CE ne CS e SS c SV CE CE CE Gett Q qe CS ce Ce ce C c Te T qe EEE t Ce C C CE Te C t c c e t C ce C C e Ee c Ge C Se K C e T 6 6 C ve E ce wed EG Konformit tserkl rung KK Se EC Conformity Declaration RT A C Das bezeichnete Produkt entspricht den einschl gigen grundlegenden Anforderungen der CE Te C aufgef hrten EG Richtlinien und Normen Bei einer nicht mit uns abgestimmten nderung des C ce ce ce Produktes oder einer nicht bestimmungsgem en Anwendung verliert diese Erkl rung ihre G ltigkeit 3 C ce C The product named below fulfills the relevant fundamental requirements of c ce ce lt the EC directives and standards listed In the case of unauthorized modifications to the product ce 6 or an unintended use this declaration becomes invalid ce cC Produktbezeichnung Product name lt e E lt Eppendorf BioPho ce C 2004 108 EG ce lt ce ce A ei 2011 65 EU E C pe eS C E CE qe e ci lh t ce 6 3 o ce ce pr lt ce c J 0 att ka lt ce 2 ER MEB Qa E C qe lt L ci Vorstand Board of Management Projektmanagement Proje t Management ce er A
25. Anschluss k nnen Sie Ergebnisdaten aus dem Ger t auf einen USB Stick einen Drucker oder direkt auf einen PC bertragen 2 3 4 Selbsttest des Ger ts Direkt nach dem Einschalten berpr ft das Ger t selbstt tig die Funktion der Photometereinheit Um das Ger t umfassender zu pr fen rufen Sie die Funktion Device calibration auf siehe Selbsttest des Ger ts auf S 59 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioPhotometer D30 11 Deutsch DE 3 Allgemeine Sicherheitshinweise 3 1 Bestimmungsgem er Gebrauch Einsatzgebiet des BioPhotometer D30 ist das Forschungslabor in Molekularbiologie Biochemie und Zellbiologie Das BioPhotometer D30 ist ausschlie lich f r die Verwendung in Innenr umen bestimmt Die l nderspezifischen Sicherheitsanforderungen f r den Betrieb elektrischer Ger te im Laborbereich m ssen eingehalten werden Das BioPhotometer D30 dient zur photometrischen Konzentrationsbestimmung von Biomolek len in Fl ssigkeiten sowie f r Tr bungsmessungen von mikrobiologischen Kulturen im Routinelabor Verwenden Sie ausschlie lich Eppendorf Zubeh r oder von Eppendorf empfohlenes Zubeh r 32 Anforderung an den Anwender Ger t und Zubeh r d rfen nur von ausgebildetem Fachpersonal bedient werden Lesen Sie vor der Anwendung die Bedienungsanleitung und die Gebrauchsanweisung des Zubeh rs sorgf ltig und machen Sie sich mit der Arbeitsweise des Ger ts vertraut 3 3 Gef hrdungen bei bestimmungsgem em Gebrau
26. Bauart leiten die Strahlung der Lichtquelle innerhalb der K vette um sodass die Strahlung der Lichtquelle bei nicht geschlossenem Deckel nach oben austreten kann gt Vergewissern Sie sich vor dem Start einer Messung dass der Deckel auf der Mikroliterk vette aufliegt WARNUNG Gesundheitssch digung durch giftige radioaktive oder aggressive Chemikalien sowie durch infekti se Fl ssigkeiten und pathogene Keime gt Beachten Sie die nationalen Bestimmungen zum Umgang mit diesen Substanzen die biologische Sicherheitsstufe Ihres Labors sowie die Sicherheitsdatenbl tter und Gebrauchshinweise der Hersteller 9 Tragen Sie Ihre pers nliche Schutzausr stung Entnehmen Sie umfassende Vorschriften zum Umgang mit Keimen oder biologischem Material der Risikogruppe 11 oder h her dem Laboratory Biosafety Manual Quelle World Health Organization Laboratory Biosafety Manual in der jeweils aktuell g ltigen Fassung WARNUNG Gesundheitsgefahr durch kontaminiertes Ger t und Zubeh r gt Dekontaminieren Sie Ger t und Zubeh r vor dem Lagern oder Versenden VORSICHT Sicherheitsm ngel durch falsche Zubeh r und Ersatzteile Zubeh r und Ersatzteile die nicht von Eppendorf empfohlen sind beeintr chtigen die Sicherheit Funktion und Pr zision des Ger ts F r Sch den die durch nicht empfohlene Zubeh r und Ersatzteile oder unsachgem en Gebrauch verursacht werden wird jede Gew hrleistung und Haftung durch Eppendorf au
27. C d LE 21 09 2012 ce 73 c lt ce Hamburg Date ce er ward a Ce Ci ce c CE qe EZ Kai o C ec 4 C C c Ce 900 oi E AA eppendorf v H ei 3 ei lt ce C e e Eppendorf AG Barkhausenvveg 1 22339 Hamburg Germany z ci ce LI ET Erz ET Ce Ge CS v amp ek S car CE Ze 66 ce ce e e KE Get ce ce ce ce 3 ce ce ce C c E eS ce E CE E C CE ve CS e eS eo C n CE Se CE 001503350902 C CE e C e CS C CE ve C tE CS c 66 66 Te C Evaluate your manual Give us your feedback www eppendorf com manualfeedback Your local distributor www eppendorf com contact Eppendorf AG 22331 Hamburg Germany eppendorf eppendorf com www eppendorf com eppendorf
28. Halten Sie die Umgebungsbedingungen ein 9 Vermeiden Sie Temperaturschwankungen gt Reinigen Sie den K vettenschacht 62 Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Fehler Messergebnisse sind unrichtig M gliche Ursache Methode falsch programmiert e Standardl sung nicht richtig vorbereitet Extinktion des Reagenz driftet e Die K vette ist nicht richtig positioniert Abhilfe gt Stellen Sie sicher dass die Methodenparameter richtig eingegeben sind 9 Stellen Sie sicher dass der richtige Standard benutzt wird und die Messl sung f r den Standard richtig vorbereitet wird gt Bei instabiler Reagenzextinktion und Endpunkt Methoden Messen Sie bei der Messung einer langen Probenserie den Reagenzleerwert nicht nur zu Beginn sondern auch wahrend der Probenserie Bei starkerer Drift des Reagenzleerwerts ist das Reagenz nicht geeignet fur fehlerfreie Messungen und muss durch neues Reagenz ersetzt werden gt Positionieren Sie die K vette so im K vettenschacht dass die optischen Fenster in Lichtwegrichtung zeigen y Lichtweg Photometrie von hinten nach vorn 9 2 Fehlermeldungen Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 63 Ger teanzeigen mit Fehlermeldungen k nnen Sie mit dem Softkey OK verlassen Systemfehler erfordern eine Beurteilung durch den Technischen Service Diese Fehler werden in Englisch dargestellt System
29. Kapitel Auswerteverfahren siehe Auswertung mit Standardkurve gerade auf S 77 e Graph In die grafische Anzeige der Standardergebnisse wechseln Conc Abs Quadratical regression D n Asos Conc 532 44 A zi 4234 21 A X 0 393 471 562 0 710 Standard 3 500 0 708 Coefficient ot determination X 0 709 R 0 9998 0 927 Standard 4 750 0 929 K 0 928 Info Standard 5 1000 ER X Nex they Last 0 Curve Fit Graph Abort lt Back Next gt Abs A 7 Quadratical regression 1 200 u Cone 92441 BER 34 52 A 2 Wei 14 0 900 A i Coetficient of Vd 4 determination 0 600 I R 0 9970 0 300 i 4 I i j 0 000 A and lt and gt E EES ET Next gt Softkeys Sobald die minimale Zahl von Ergebnissen f r die Auswertung mit dem gew hlten Verfahren Curve fit vorliegt wird das Auswertungsergebnis im rechten Teil der Anzeige dargestellt Eine vorzeitige Speicherung der Auswertung und Wechsel zur Probenmessung ber die Taste Next gt ist dann m glich Grafische Ansicht der Standardauswertung Mit den Cursor Tasten und navigieren Sie zwischen den Standards um die Ergebnisse anzuzeigen Bei mehr als einem Replikat pro Standard k nnen Sie mit und Q zwischen den Replikatergebnissen wechseln Auch aus der grafischen Anzeige k nnen Sie einzelne Standards anw hlen und messen oder neu messen e Table In die tabellar
30. Print Auf einen USB Stick oder per USB Kabel zu einem PC exportieren bzw drucken siehe print amp export auf S 43 e OK In die Funktionsauswahl zur ckkehren Folgende Einstellungen k nnen Sie editieren Sprache Deutsch Englisch Franz sisch Spanisch Italienisch Datum und Uhrzeit H ufigkeit der automatischen Selbst berpr fung des Ger ts nach dem Einschalten Softkeys Save nderungen speichern und in die Funktionsauswahl zur ckkehren Cancell In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren 52 Funktionen Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 7 1 5 Device Calibration Die Ger te berpr fung ist separat beschrieben siehe Ger t berpr fen auf S 55 7 1 6 Info Unter dem Men punkt Copyright finden Sie Lizenzinformationen zur Open Source Software Functions Main Groups Sub Groups Functions Results memory Gen method param Abs spectra library Device settings Device calibration Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 53 Deutsch DE 8 Instandhaltung 8 1 Reinigung A GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfe
31. Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 65 Symptom Meldung Die ID kann nicht gesetzt werden M gliche Ursache Fehler bei der Eingabe der Proben ID Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten Abhilfe 9 Siehe Information in der Hilfebox Die Verd nnung kann nicht gesetzt werden Fehler bei der Eingabe der Verd nnung Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten 9 Siehe Information in der Hilfebox Es kann nur noch eine Messung in dieser Messreihe durchgef hrt werden Die maximale Anzahl an Messungen in einer Messreihe ist erreicht e Die Zahl an Messungen in einer Messreihe ist auf 99 begrenzt gt Nach maximal 99 Messungen eine neue Messreihe starten 66 Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 9 3 Ergebniskennzeichnungen Warnungen und Fehlermeldungen zu Ergebnissen erscheinen in der Hilfebox unten rechts im Display Bei Warnungen ist die Kopfzeile der Hilfebox gelb unterlegt bei Fehlermeldungen rot Warnungen Entscheiden Sie unter Ber cksichtigung der angezeigten Warnung ob das Ergebnis f r Sie nutzbar ist Fehlermeldungen Es wird kein Ergebnis dargestellt die Begr ndung wird in der Fehlermeldung angezeigt Symptom Meldung Standardkurve ist nichtmonoton Bitte anderen C
32. Reagenz nicht richtig vorbereitet Pipettierung nicht richtig Ablauf der Inkubation vor der Messung nicht richtig K vette verschmutzt K vette nicht vollst ndig und blasenfrei mit Messl sung bef llt Photometer driftet K vettenschacht verschmutzt Tr bungen in der Messl sung 9 Stellen Sie sicher dass das Reagenz noch haltbar ist und richtig vorbereitet wird gt Benutzen Sie f r die Vorbereitung sofern ben tigt sauberes demineralisiertes Wasser von ausreichender Qualit t 9 Stellen Sie sicher dass die Pipette kalibriert ist und richtig pipettiert 9 Sofern der Methodenablauf vor der Messung eine Inkubation erfordert stellen Sie sicher dass die Temperatur und Zeit f r die Inkubation korrekt eingehalten werden gt Reinigen und sp len Sie die K vette Achten Sie bei einem K vettenwechsel darauf dass das optische Fenster der K vette sauber bleibt und nicht mit den Fingern ber hrt wird gt Wenn das K vettenfenster durch Fingerabdr cke verschmutzt ist reinigen Sie es durch Abwischen mit einem fusselfreien Labortuch das mit Ethanol oder Isopropanol getr nkt ist gt Stellen Sie sicher dass das erforderliche Mindestvolumen der K vette f r eine Messung erreicht wird und dass keine Blasen in der Messl sung sind 9 Zentrifugieren Sie tr be partikelhaltige Messl sungen und benutzen Sie den klaren berstand gt Wenden Sie sich an den Eppendorf Service gt
33. alle Methodengruppen eine Darstellung typischer Ergebnisanzeigen sowie einen berblick ber weitere Ergebnisdaten die Sie ber den Softkey Data erreichen Methodengruppe Ergebnisanzeige Erlauterung Hauptgruppe Absorbance Single singe le Single 2010 07 02 14 15 18 e Extinktion bei der 01 Se SE Messwellenl nge e Nur bei Verd nnung oder anderer K vette als 10 mm Zus tzliche Anzeige des Extinktionswerts vor 4 390 x 04m der Umrechnung Dilution Edit ID Lee ETA 600 Hauptgruppe Routine Methoden 40 Deutsch DE Eppendorf BioPhotometer D30 Methodengruppe Nucleic acids Ergebnisanzeige dsDNA Eheck parameters EN measure samples dsONA 2012 07 31 17 54 55 Abs A 02 0 450 ID 0 360 l IN 17 0som 0 270 LA 0 339 Axo 0 180 N i A260 A280 1 72 0 090 0 000 240 260 280 300 320 Alm X 260 Abs 0 339 gt Dilution Edit ID Data Finish lt Back Next gt Erlauterung Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenlange Falls in den Parametern aktiviert Ratio A260 A280 Falls in den Parametern aktiviert eingeschr nkter Scan Navigieren zwischen den Messpunkten im Graphen die f r die Ergebnisberechnung herangezogen werden k nnen mit und Zusatzdaten Softkey IDatal Sofern die entsprechenden Parameter aktiviert wurden e
34. bene ID vorgegeben um so schnell fortlaufend strukturierte IDs eingeben zu k nnen Eine doppelte Vergabe derselben ID innerhalb einer Messreihe ist nicht m glich TH measure samples sample id Enter a sample ID for the next sample Sample Keyboard JU I 1 op Cancel Softkeys Keyboard Tastatur einblenden 1 Dr cken Sie den Softkey Edit ID 2 Geben Sie die Proben ID maximal 12 stellig ein Alternativen zur Texteingabe Tastenblock Bei mehrmaligem Dr cken der Taste direkt hintereinander werden die Eingabem glichkeiten dieser Taste durchlaufen Tastatur mit Softkey Keyboard einblenden Zeichen mit den Cursor Tasten ausw hlen und mit enter best tigen e abc Wechsel zwischen Gro und Kleinbuchstaben bei Eingabe ber den Tastenblock OK ID Eingabe best tigen und zur Probenmessung zur ckkehren e Cancel Eingabe abbrechen und zur Probenmessung zur ckkehren Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 39 Deutsch DE Ergebnisbild mit Verd nnung und ID Bradford Ergebnisbild mit Verd nnung und Proben ID Bradford 2010 12 02 17 08 03 Abs A 09 Dil 20 80 pL Ta SE ID B12 0 900 SE 1 71 e 0 566 Am 0 600 fe ooo M blank or f Le Te 300 600 900 var A and Dilution Edit 1D Finish lt Back Next gt 6 4 4 measure samples Ergebnisanzeigen In diesem Abschnitt erhalten Sie fur
35. ch 3 3 1 Personenschaden A GEFAHRI Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit A 9 Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen gt F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an A GEFAHR Explosionsgefahr gt Betreiben Sie das Ger t nicht in R umen in denen mit explosionsgef hrlichen Stoffen gearbeitet wird gt Bearbeiten Sie mit diesem Ger t keine explosiven oder heftig reagierenden Stoffe gt Bearbeiten Sie mit diesem Ger t keine Stoffe die eine explosive Atmosph re erzeugen k nnen 12 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf Bi Deutsch DE oPhotometer D30 A A A WARNUNG Stromschlag durch Sch den am Ger t oder Netzkabel 9 Schalten Sie das Ger t nur ein wenn Ger t und Netzkabel unbesch digt sind gt Nehmen Sie nur Ger te in Betrieb die fachgerecht installiert oder instand gesetzt wurden gt Trennen Sie das Ger t im Gefahrenfall von der Netzspannung durch Ziehen des Netzsteckers aus dem Ger t oder der Netzsteckdose oder mit Hilfe der vorgesehenen Trennvorrichtung z B Notschalter im Labor WARNUNG Schaden durch UV Strahlung Mikroliterk vetten wie z B Hellma TrayCell oder Mikroliterk vetten hnlicher
36. ch nicht zul ssig Beispiele Berechnung eines Faktors bei Einpunktkalibrierung Berechnung einer Ratio 260 280 bei Nukleins uremessungen y berpr fen Sie die verwendeten Reagenzien und Proben und wiederholen Sie die Messung Problembehebung 68 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Transport Lagerung und Entsorgung Eppendorf BioPhotometer D30 69 Deutsch DE 10 Transport Lagerung und Entsorgung 10 1 Transport 9 Verwenden Sie die Originalverpackung f r den Transport Lufttemperatur Relative Luftfeuchte Luftdruck Allgemeiner Transport 25 C 60 C 10 95 30 kPa 106 kPa Luftfracht 40 C 55 C 10 95 30 kPa 106 kPa 10 2 Lagerung Lufttemperatur Relative Luftfeuchte Luftdruck in Transportverpackung 25 C 55 C 25 75 Vo 70 kPa 106 kPa ohne 5 C 45 C 25 75 Vo 70 kPa 106 kPa Transportverpackung 10 3 Entsorgung Bei einer Entsorgung des Produkts sind die einschl gigen gesetzlichen Vorschriften zu beachten Hinweise zur Entsorgung von elektrischen und elektronischen Ger ten in der Europ ischen Gemeinschaft Innerhalb der Europ ischen Gemeinschaft wird die Entsorgung von elektrischen Ger ten durch nationale Vorschriften geregelt die auf der EU Richtlinie 2012 19 EU ber Elektro und Elektronik Altger te WEEE basieren Nach diesen Vorschriften d rfen alle nach dem 13 August 2005 gelieferten Ger te im Business to Busines
37. chnung einbezogen siehe Extinktionswerte auf S 75 e Die Dauer vom Start einer Messung bis zur Anzeige eines Messergebnisses betr gt typischerweise ca 2 bis 3 Sekunden Wenn bei hohen Extinktionswerten wenig Licht auf den Empf nger gelangt kann die Messzeit automatisch auf bis zu 9 Sekunden verl ngert werden um die Pr zision der Messung zu erh hen Achten Sie darauf dass die gemessenen Extinktionswerte die Obergrenze des photometrischen Messbereichs nicht berschreiten Verwerfen Sie in diesem Fall das Messergebnis Die Obergrenze des photometrischen Messbereichs ist nicht nur von der Wellenl nge siehe Photometrische Eigenschaften auf S 72 sondern auch vom K vettenleerwert abh ngig Ultramikrok vetten mit kleiner Blende wie TrayCell Hellma k nnen einen K vettenleerwert bis ca A 1 besitzen Um diesen Betrag wird der verf gbare photometrische Messbereich reduziert Den K vettenleerwert k nnen Sie absch tzen wenn Sie die mit demineralisiertem Wasser gef llte K vette als Probe gegen den leeren K vettenschacht als Blank messen Der K vettenleerwert der Eppendorf uCuvette G1 0 ist zu vernachl ssigen nahe A 0 Entfernen Sie nach der Messung die Messl sung vollst ndig bevor Sie die n chste Messl sung einf llen um Verschleppung zu minimieren Wenn aufgrund von hohen Konzentrationsunterschieden Verschleppung von einer Probe zur n chsten Probe zu erwarten ist sp len Sie die K vette zwischen den Mess
38. deckung mit einer Hand an auf H he des Haltestifts und ziehen Sie die Abdeckung nach rechts bis der Haltestift ganz herausgezogen ist 0 Ziehen Sie die Abdeckung im 90 Grad Winkel nach rechts Reinigen Sie die Abdeckung mit einem Tuch oder einem fusselfreien Wattest bchen das Sie mit einem milden Reinigungsmittel befeuchtet haben Schieben Sie den Haltestift bis zum Anschlag wieder in das Geh use hinein Der Haltestift ist im Geh use ganz verschwunden O Verschlie en Sie bei Nichtgebrauch des Photometers den K vettenschacht mit der blauen K vettenschachtabdeckung um ihn vor Staub und anderen Verschmutzungen zu sch tzen 8 2 Desinfektion Dekontamination N GEFAHR Stromschlag durch eintretende Fl ssigkeit 9 Schalten Sie das Ger t aus und trennen Sie es vom Stromnetz bevor Sie mit der Reinigung oder Desinfektion beginnen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeiten in das Geh useinnere gelangen F hren Sie keine Spr hreinigung Spr hdesinfektion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an Reinigen Sie das Ger t vor der Desinfektion mit einem milden Reinigungsmittel siehe Reinigung auf S 53 W hlen Sie eine Desinfektionsmethode die den f r Ihren Anwendungsbereich geltenden gesetzlichen Bestimmungen und Richtlinien entspricht Verwenden Sie z B Alkohol Ethanol Isopropanol oder alkoholhaltige Desinf
39. detaillierterer Daten k nnen Sie zum Abschluss der Messserie im Methodenschritt print amp export die gew nschten Datenpakete zusammen stellen und ausdrucken 6 4 Methodenablauf DI oreo poromeicrs er Der Wizard am oberen Rand der Anzeige f hrt Sie durch den Methodenablauf Der jeweils aktive Onsite 10700 PERSE Methodenschritt ist hervorgehoben Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Decimal places 0 OE IEE Autoprint off 3 Edit Page dn Abort Next gt Ein Methodenablauf umfasst maximal 5 Schritte Der jeweils aktive Schritt ist optisch hervorgehoben Nach dem letzten Schritt print amp export einer Messreihe wird als weiterer Schritt der Start einer neuen Messreihe angeboten Diese beginnt wieder mit der Probenmessung Methodenschritt Erlauterung check parameters Methodenparameter berpr fen nderung bei Bedarf measure standards Nur bei Methoden mit Standardauswertung Standards messen und auswerten Alternativ Nutzung der zuletzt gespeicherten Standardauswertung m glich measure samples Proben messen process results Nur bei Methoden der Gruppe Nucleic acids Ergebnisse nachbearbeiten Umrechnung der Konzentrationsergebnisse print amp export Datenpakete f r Druck oder Export der Daten zusammenstellen Mit den Softkeys Next gt und lt Back navigieren Sie zwischen den Methodenschritten Mit Abort und Finish k nnen sie den
40. e Gesamtheit aller f r die verschiedenen Methoden verf gbaren Parameter dar F r die jeweilige Methode wird davon nur ein geringer Teil ben tigt und in der Anzeige dargestellt Parameter Eingabe Erl uterung Cuvette Auswahl Optische Schichtdicke der K vette Extinktionswerte werden 1015121110 510 21 vom Ger t immer automatisch auf die Schichtdicke 10 mm 0 1 mm einer Standardkuvette umgerechnet siehe Extinktionswerte auf S 75 Faktoren wie 50 fur die Berechnung von dsDNA Konzentrationen mussen daher nicht von Ihnen verandert werden wenn Sie den Parameter Cuvette verandern Wavelength Auswahl Messwellenlange Auf der Basis der bei dieser Wellenlange 230 260 280 320 gemessenen Extinktion wird die Konzentration ausgerechnet 340 405 490 562 Fur einige Methodengruppen z B Nucleic acids und 595 600 nm Proteins direct UV sind die Wellenlangen fest vorprogrammiert Unit Auswahl Einheit fur das Konzentrationsergebnis mg mL ug mL ng Die Auswahl ist bei den fest vorprogrammierten Methoden der mL pg mL pg L Gruppe Routine auf f r diese Methoden sinnvolle Einheiten mg dL umol mL begrenzt nmol mL pmol mL pmol uL U U mL U L Abs A min Zus tzlich freie Programmierbarkeit weiterer Einheiten in der Funktion General Method Parameters Units Max 7 Stellen Calculation Auswahl Auswerteverfahren f r die Berechnung der Factor Standard Probenkonzentration aus der g
41. ektionsmittel Wischen Sie die Oberfl chen mit einem Tuch ab welches Sie mit Desinfektionsmittel befeuchtet haben Wenn zur Desinfektion die K vettenschachtabdeckung ausgebaut werden muss verfahren Sie zum Ausbau und Zusammenbau wie beschrieben siehe K vettenschachtabdeckung reinigen auf S 53 Die demontierte K vettenschachtabdeckung k nnen Sie mittels Spr hdesinfektion desinfizieren Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 55 Deutsch DE 8 3 Ger t berpr fen Voraussetzungen Umgebungsbedingungen einhalten siehe Umgebungsbedingungen auf S 71 Pr fung bei ca 20 C durchf hren Temperaturschwankungen vermeiden z B durch ge ffnete Fenster Filter nur kurzfristig dem Filterkasten entnehmen und vor Verschmutzung oder Besch digung der Filteroberfl chen sch tzen Filter vor Staub Hitze Fl ssigkeit und aggressiven D mpfen sch tzen Filter ist so eingesetzt dass der Aufkleber mit der Filterbezeichnung zum Detektor hin zeigt Bei berpr fung der Photometereinheit Aufkleber zeigt nach vorn K vettenschacht ist frei von Verschmutzungen 56 Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 8 3 1 Photometereinheit berpr fen Zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit und der Wellenl ngenrichtigkeit wird von Eppendorf ein Filtersatz angeboten Der Satz enth lt ein Leerwertfilter AO und 3 Filter A1 A2 und A3 zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit sowie 2 Fil
42. ektren wichtiger Substanzen z B DNA Die Spektren dienen der Information und k nnen als Vergleich zum Spektrum eines Probenergebnisses herangezogen werden Device settings Editierbare Ger teeinstellungen z B Sprache Device calibration M glichkeit zur berpr fung des Photometers Hierzu ben tigen Sie einen Filtersatz von Eppendorf Info Open Source Lizenzen und Informationen zu eingetragenen Warenzeichen 48 Funktionen Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 7 1 1 Results Memory Functions Main Groups Sub Groups Functions dsDNA parameters ample results L D dsDNA 2010 07 09 15 07 35 dsDNA 2010 07 08 11 02 35 Cuvette 10 mm Page 1 2 Unit pg mL Molar Unit pmol mL Factor 50 Decimal places 1 A260 A280 on Aha s Autoprint off Pago up oF Page di Wahlen Sie in der rechten Spalte die Methode aus f r die Sie gespeicherte Ergebnisse aufrufen m chten gt Best tigen Sie mit enter gt Wahlen Sie die gew nschte Messreihe mit den Cursor Tasten gt Best tigen Sie mit enter Wie im Methodenablauf k nnen Sie auch hier der Reihe nach durch die Anzeigen der Parameter der Standards der Probenergebnisse und zuletzt der Datenpakete f r Druck und Export wechseln Die Belegung der Softkeys entspricht der Belegung im Methodenablauf dsDNA parameters N sample results print amp export
43. emessenen Extinktion Factor Werteeingabe Faktor f r die Umrechnung von Extinktionswerten in die Faktor Konzentration Grenze max 6 stellig Bei der Methodengruppe Factor k nnen Sie auch negative einschlie lich Faktoren eingeben Dezimalpunkt Protein Auswahl Nur f r die Methodengruppen Proteins direct UV Liste von Proteintypen die in der Funktion General Method Parameters Proteins hinterlegt sind Bei der Auswahl des Proteins wird aus der Funktion General Method Parameters Proteins auch der dort programmierte zugeh rige Parameter Factor importiert Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 33 Parameter Eingabe Erl uterung Standards Werteeingabe Zahl der verschiedenen Standardkonzentrationen f r die Zahl der Standards Auswertung mit Standards Bereich 1 bis 12 Bei einigen Methoden ist der Bereich f r die Anzahl der Standards auf einen kleineren Bereich als 1 bis 12 begrenzt Replicates Werteeingabe Zahl der Wiederholungsmessungen f r die verschiedenen Zahl der Replikate pro Standardkonzentrationen Standard Bereich 1 bis 3 Std Conc Werteeingabe Je nach Zahl der Standards wird dieser Parameter f r alle Konzentrationswerte der Standards Grenze Max 6 stellig einschlie lich Dezimalpunkt Standards angeboten z B Std Conc 1 Std Conc 2 Decimal places Werteeingabe Zahl der Nachkommastellen fur das Ergebnis Bereich 0 bis 3 Zahl der Nachkom
44. en quadratische Regression kubische Regression Spline Interpolation die f r die Standardauswertung am besten geeignete Funktion ergibt Die Spline Interpolation verbindet die Messpunkte durch kubische Polynome w hrend die Regressionsverfahren eine quadratische bzw kubische Funktion so zwischen die Messpunkte legen dass f r die Messpunkte m glichst geringe Abweichungen von der Funktion resultieren Bei den Regressionsverfahren wird neben der berechneten Regressionsgleichung auch das Bestimmtheitsma coefficient of determination als Ma f r die Streuung der Messpunkte um die berechnete Funktion angezeigt Bei einem Wert von lt 0 8 f r das Bestimmtheitsma wird das Ergebnis mit einer Warnung versehen Wenn der erste Standard die Konzentration 0 hat w hlen Sie die Einstellung dass die Regressionsgerade Regressionskurve durch den Nullpunkt geht Wenn keines der f r kurvenf rmige Verl ufe empfohlenen Verfahren zufriedenstellende Ergebnisse bringen w hlen Sie das Verfahren linear interpolation 12 4 Verd nnung Im Methodenschritt measure samples eingegebene Verd nnungen werden bei der Ergebnisberechnung ber cksichtigt C Dil korr C x Cou korr Mit Verd nnungsfaktor umgerechnetes Ergebnis Vp Volumen der Probe in der Messl sung Vpy Volumen des Diluents in der Messl sung 12 5 Spezielle Auswerteverfahren f r Nukleins uren und Protein UV Dieser Abschnitt bezieht sich auf die Auswertung von Nukleins ur
45. en bzw Proteinen in den Methodengruppen Nucleic acids und Proteins direct UV Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 79 Deutsch DE 12 5 1 Ratio A260 A280 und Ratio A260 A230 Anwendung Information zur Reinheit der gemessenen Nukleins ure Die Anwendung des Auswerteverfahrens kann in den Parametern A260 280 beziehungsweise A260 A230 aktiviert werden Ratio bezeichnet den Quotienten der gemessenen Extinktionen bei den genannten Wellenl ngen Literaturwerte f r die Ratio Werte bei reinen Nukleins uren A260 A280 e DNA 1 8 bis 1 9 RNA 1 9 bis 2 0 Current Protocols in Molecular Biology 1994 A260 A230 F r die Ratio A260 A230 findet man in der Literatur unterschiedliche Angaben f r reine Nukleins uren e DNA 2 3 bis 2 5 The Nucleic Acids 1955 e DNA 1 9 Current Protocols in Molecular Biology 1994 Die Werte sind stark vom pH Wert abh ngig Nukleins uren sollten daher nicht in Wasser sondern in einem Puffer mit pH Wert 7 bis 7 2 gemessen werden z B TE Puffer 12 5 2 Umrechnung in molare Konzentrationen und Nukleins uremengen Die Umrechnung kann nur f r Nukleins uren angewendet werden Sie erfolgt im Methodenschritt process results More calculations 12 5 2 1 Berechnung der Menge Anwendung Berechnung der Menge Masse an Nukleins ure im gesamten Probenvolumen M CxV gesamt M berechnete Gesamtmenge Masse der Nukleins ure im Probengef Einheit ug C aus der Messung berechne
46. eppendorf Register your instrument www eppendorf com myeppendorf Bedienungsanleitung Copyright 2014 Eppendorf AG Hamburg No part of this publication may be reproduced without the prior permission of the copyright owner Trademarks Eppendorf the Eppendorf logo Eppendorf BioPhotometer Eppendorf uCuvette and UVette are registered trademarks of Eppendorf AG Hamburg Germany Cy is a registered trademark of GE Healthcare UK Ltd Buckinghamshire UK Trademarks are not marked in all cases with TM or in this manual This product is manufactured under license to issued U S Patent No 6 122 052 6133 900 053 02 052014 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Inhaltsverzeichnis 1 Amwendungshinweise cece 8 7 1 1 Anwendung dieser Anleitung 7 1 2 Gefahrensymbole und Gefahrenstufen eeeeo es 7 1 2 1 EI Gil El H 10272 266 0 0
47. er D30 83 Deutsch DE Best Nr International 6133 000 001 Best Nr Nordamerika Beschreibung Eppendorf BioPhotometer D30 230 V 50 60 Hz Netzstecker Europa weitere Netzanschlussvarianten erh ltlich 6133 000 010 6133000010 120 V 50 60 Hz Netzstecker Nordamerika Eppendorf pCuvette G1 0 und BioPhotometer D30 Bundle Eppendorf Mikrovolumen Messzelle und BioPhotometer D30 6133 000 907 6133000907 230 V 50 60Hz 6133 000 908 6133000908 120 V 50 60 Hz BioPhotometer D30 Referenzfiltersatz 6133 928 004 6133928004 Filtersatz zur berpr fung der photometrischen Richtigkeit und Wellenl ngenrichtigkeit gem NIST Thermodrucker DPU S445 inkl Netzteil und Druckerkabel 6135 011 000 230 V EU 6135 010 004 6135010004 115 V 110V USA JP 6135 012 007 230 V UK Thermopapier 0013 021 566 952010409 5 Rollen Eppendorf uCuvette G1 0 6138 000 018 6138000018 Eppendorf Mikrovolumen Messzelle f r die Eppendorf BioPhotometer und BioSpectrometer Eppendorf UVette 220 nm 1 600 nm Original Eppendorf Kunststoffk vette PCR clean Protein free 0030 106 300 952010051 50 2 000 uL 80 St ck einzeln verpackt Eppendorf UVette routine pack 220 nm 1 600 nm Eppendorf Quality 0030 106 318 952010069 50 2 000 UL 200 St ck wiederverschlie bare Box Eppendorf macro Vis Cuvettes 0030 079 345 0030079345 10 x 100 St ck Eppendorf semi micro Vis Cuvettes 0030 079 353 0030079353 10 x 100 St ck 430
48. er neuem Namen abgespeichert werden Um eine Methode aufzurufen w hlen Sie mit den Cursor Tasten zun chst die Hauptgruppe Untergruppe und die Methode aus Best tigen Sie jeweils mit enter Tab 6 1 Photometrische Methoden Absorbance Methoden f r schnelle einfache Extinktionsmessungen ohne weitere Auswertungen Routine H ufig genutzte Methoden der Molekularbiologie Die Methoden sind fest vorprogrammiert Eine nderung von Parametern ist aber mit Speichern unter neuem Namen m glich Basic Methoden f r die Auswertung von Extinktionsmessungen mit Faktor Standard oder Standardkurve gerade Favorites In Favorites k nnen Sie mit lt New Folder gt eigene Ordner einrichten und Ihre h ufig benutzten Methoden in diese Ordner kopieren um schnell auf diese Methoden zugreifen zu k nnen In allen Ordnern k nnen Sie mit lt New Method gt neue Methoden erstellen In Favorites k nnen Sie eigene Ordner erstellen z B f r personenorientierte Zuordnung umbenennen und l schen 30 Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Tab 6 2 Softkeys in der Methodenauswahl Cut und Paste Methoden ausschneiden und einf gen Copy und Paste Methoden kopieren und einf gen Delete Methoden l schen Renamel Methoden umbenennen Kopierte oder ausgeschnittene Methoden k nnen Sie entweder in einen anderen Ordner unter Favorites oder unter neuem Namen in den urspr ng
49. er tes durch eine berpr fung sicher dass die Mess und Auswertefunktionen des Ger tes korrekt ablaufen ACHTUNG Sch den durch berhitzung gt Stellen Sie das Ger t nicht in der N he von W rmequellen z B Heizung Trockenschrank auf 9 Setzen Sie das Ger t keiner direkten Sonneneinstrahlung aus gt Gew hrleisten Sie eine ungehinderte Luftzirkulation Halten Sie um alle L ftungsschlitze einen Abstand von mindestens 5 cm frei Allgemeine Sicherheitshinweise 14 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE ACHTUNG Sachsch den durch falsche Anwendung 9 Setzen Sie das Produkt nur f r den in der Bedienungsanleitung beschriebenen bestimmungsgem en Gebrauch ein 9 Achten Sie auf eine ausreichende Materialbest ndigkeit bei der Anwendung von chemischen Substanzen gt Wenden Sie sich in Zweifelsf llen an den Hersteller dieses Produktes Die Eppendorf AG haftet nicht f r Sch den durch unsachgem e Verpackung ACHTUNG Sch den durch unsachgem e Verpackung 9 Lagern und transportieren Sie das Ger t nur in der Originalverpackung ACHTUNG Sch den durch unsachgem e Reinigung des K vettenschachts gt Reinigen Sie den K vettenschacht nur mit einem feuchten Wattestabchen 9 Lassen Sie keine Fl ssigkeit in den K vettenschacht gelangen 9 Fassen Sie nicht mit dem Finger in den K vettenschacht 3 4 Hinweise zur Produkthaftung In den folgenden F llen kann der vorgesehene Schutz des Ger ts beei
50. et 8 OFF U S A DIP SW 3 Bedeutung 1 ON Data Length 8 bits 2 ON Parity Setting NO 3 ON Parity Condition Odd 4 OFF Busy Control XON XOFF 5 OFF Baud 6 ON Rate 7 ON Select 8 ON 9600 bps 4 5 PC oder USB Stick f r Datenexport anschlie en Sie k nnen einen USB Stick FAT 32 formatiert an den USB Anschluss 4 anschlie en siehe Gesamtillustration auf S 9 Alternativ k nnen Sie das Ger t f r den Datenexport ber ein USB Kabel direkt mit einem PC verbinden Voraussetzung e PC mit Windows Version XP SP2 oder h here Version e USB Kabel mit je einem Stecker Typ A und Typ B Verbinden Sie das Ger t mit dem PC ber das USB Kabel am USB Anschluss 8 siehe Gesamtillustration auf S 9 d e Sie ben tigen keine spezielle PC Software f r die Daten bertragung Ubertragene Datenpakete werden vom PC wie ein USB Stick als Wechseldatentr ger erkannt Um die Daten sichtbar zu machen m ssen Sie das angemeldete Datenpaket nur ffnen e Die bertragung von Daten auf den USB Stick oder an den PC starten Sie nach Abschluss der Messreihe im Methodenschritt print amp export siehe print amp export auf S 43 17 Installation 18 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 19 Deutsch DE 5 Bedienung 5 1 bersicht Bedienelemente UE 6 6 o 666 oo 0000 O c0 Abb 5 1 Bedienelemente des BioPhotometer
51. eutsch DE 11 4 Photometrische Eigenschaften Messprinzip Absorptions Einstrahlphotometer mit Referenzstrahl Lichtquelle Xenon Blitzlampe Spektrale Zerlegung Holographisches Aberations korrigiertes Konkavgitter Strahlungsempfanger CMOS Photodioden Wellenlangen 230 nm 260 nm 280 nm 320 nm 340 nm 405 nm 490 nm 562 nm 595 nm 600 nm Wellenlangenwahl Methodenabhangig frei wahlbar Spektrale Bandbreite lt 4nm Systematische 1 nm Messabweichung der Wellenlange Zufallige Messabweichung lt 0 5 nm der Wellenl nge Photometrischer Messbereich 0A bis 3 0 A bei 260 nm Ablesegenauigkeit AA 0 001 Zufallige Messabweichung des Photometers lt 0 002 bei A 0 lt 0 005 0 5 bei A 1 Systematische 1 beiA 1 Messabweichung des Photometers Falschlichtanteil lt 0 05 11 5 Weitere technische Parameter K vettenmaterial F r Messungen im UV Quarzglas oder UV transparenter Kunststoff UVette von Eppendorf 220 nm bis 1600 nm F r Messungen im sichtbaren Bereich Glas oder Kunststoff Gesamthohe der K vetten Mind 36 mm Hohe des Lichtstrahls in der K vette 8 5 mm Tastatur 22 Folientasten 6 Folientasten als Softkeys Ergebnisausgabe Extinktion Konzentration eingeschr nkter Scan Extinktions Wellenl ngen Spektrum Methodenabh ngig weitere Zusatzdaten Ratio Background Extinktionen Display
52. ger jedoch ist der Einfluss von St rungen aus den Messl sungen Partikel Blasen Tr bungen auf die Zuverl ssigkeit des Ergebnisses bei diesen geringen Extinktionen sehr gro 5 3 2 Messablauf 5 3 2 1 Methode ausw hlen Wahlen Sie mit den Cursor Tasten die Method Selection Main Groups gew nschte Methode und rufen Sie die Methode Favorites NO nocecacos mit der Taste enter auf asrama SE mao Eine bersicht und detaillierte Beschreibung der o D B BCA micro Methoden finden sie im n chsten Kapitel siehe Lowry Methoden auf S 29 Lowry micro lt New Method gt Bradford check parameters Wizard Der Wizard am oberen Rand der Anzeige f hrt Sie schrittweise durch den Methodenablauf Cuvsite 1 Hilfebox Bei jedem Schritt des Ablaufs erhalten Sie eech Ak EH unten rechts in der Anzeige Hilfetexte gt rn Softkeys Mit den Softkeys lt Back und Next gt Calculation Standard bewegen Sie sich im Wizard einen Methodenschritt Standards 6 v vor oder zuruck Replicates 1 Decimal places 0 Autoprint off puuma Edit Page dn Abort k 24 Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 5 3 2 2 Parameter pr fen CH check parameters measure standards measure samples L Cuvette 10 mm Page 1 2 Wavelength 595 nm Unit pg mL Calculation Standard Standards 6 Replicates 1 Deci
53. ische Anzeige der Standardergebnisse wechseln Next gt Standardauswertung speichern und zur Probenmessung wechseln Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 37 Deutsch DE 6 4 3 measure samples Mit der Taste sample messen Sie der Reihe nach Ihre Proben Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit m glich Mit den Tasten und 9 k nnen Sie zwischen den bisher in der Messreihe erzielten Probenergebnissen navigieren Brodtord EE WEE Bradtord 2010 11 25 16 28 23 Das Konzentrationsergebnis 6 stellig mit Abs Ar Se Flie komma wird deutlich hervorgehoben SS e Mit Grafik Ergebnis rechts in der Anzeige 0 900 Pag te GE 0106 Grafik Ergebnis zentral in der Anzeige A 0 393 Ass Zus tzlich zum Ergebnis wird der zugrunde liegende Extinktionswert kleiner angezeigt 0 300 d 0000 don 600 900 ec i and Y key Dilution Edit ID Finish lt Back Next gt Weitere Daten oben rechts 1 Zeile Probennummer wird fortlaufend gez hlt und f r jede neue Messreihe wieder auf 1 gesetzt Probenverd nnung sofern eingegeben oben rechts 2 Zeile Probenidentifikation ID sofern eingegeben e oben links Dateiname unter dem die Daten im Methodenschritt print and export als Excel Datei exportiert werden siehe S 43 Softkeys e Dilution Probenverd nnung eingeben e Edit ID Pr
54. kierten Parameters ist nicht in den Gen Meth Param definiert Bitte korrigieren Sie den Parameter Diese Fehlermeldung erscheint beim Editieren von Methodenparametern Parameter in General Method Parameter ist nicht definiert Wahlen Sie einen anderen Parameter aus der vorhandenen Liste Falls erforderlich programmieren Sie in General Method Parameter einen neuen Listeneintrag um bei der Programmierung einer Methode darauf zur ckgreifen zu k nnen Die eingegebenen Standardkonzentrat ionen sind nicht monoton steigend bzw monoton fallend Bitte Standardkonzentrat ionen korrigieren Siehe Fehlertext gt Die Standardkonzentrationen so eingeben dass der erste Standard die niedrigste Konzentration erh lt und die weiteren Standardkonzentrationen eine aufsteigende Folge bilden Mindestens zwei eingegebene Standardkonzentrat ionen sind gleich Bitte Standardkonzentrat ionen korrigieren Siehe Fehlertext gt Die Standardkonzentrationen so eingeben dass der erste Standard die niedrigste Konzentration erh lt und die weiteren Standardkonzentrationen eine aufsteigende Folge bilden Die Messwerte sind nicht streng monoton Fehler bei der Messung einer Standardreihe Die gemessenen Extinktionswerte der Standardreihe sind nicht kontinuierlich steigend oder fallend 9 Standardmessungen wiederholen oder einzelnes fehlerhaft gemessenes Standardergebnis l schen
55. ktion am Geh use durch 9 Schlie en Sie das Ger t nur innen und au en vollst ndig getrocknet wieder an das Stromnetz an ACHTUNG Korrosion durch aggressive Reinigungs und Desinfektionsmittel 9 Verwenden Sie weder tzende Reinigungsmittel noch aggressive L sungs oder schleifende Poliermittel gt Inkubieren Sie das Zubeh r nicht l ngere Zeit in aggressiven Reinigungs oder Desinfektionsmitteln 1 Wischen Sie die Oberfl chen mit einem Tuch ab das Sie mit einem milden Reinigungsmittel befeuchtet haben K vettenschacht reinigen 2 Reinigen Sie den K vettenschacht nur mit einem mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten fusselfreien Wattest bchen Vermeiden Sie dass Fl ssigkeit in den K vettenschacht gelangt Sofern zur Beseitigung der Verunreinigung mit Wasser befeuchtet werden musste reinigen Sie abschlie end mit einem mit Ethanol oder Isopropanol befeuchteten Wattest bchen um das Trocknen des K vettenschachts zu beschleunigen 8 1 1 K vettenschachtabdeckung reinigen Wenn Sie nicht nur die direkt zug ngliche Oberfl che der K vettenschachtabdeckung reinigen m chten k nnen Sie die Abdeckung ausbauen 0 gt Weichen Sie die K vettenschachtabdeckung nicht in Reinigungsmittel ein gt Reinigen Sie die K vettenschaftabdeckung wie beschrieben 54 Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 1 2 Fassen Sie mit der anderen Hand die Abdeckung Heben Sie die K vettenschachtab
56. ktors f r Protein in General Method Parameter 81 Bestellinformationen e NN SNE NN a a ee a a 83 Zertifikate vi 5 8 3 11 516 ht Pe nk N 85 6 Inhaltsverzeichnis Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Anwendungshinweise Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 1 Anwendungshinweise 1 1 Anwendung dieser Anleitung y Lesen Sie diese Bedienungsanleitung vollst ndig bevor Sie das Ger t das erste Mal in Betrieb nehmen Beachten Sie ggf die Gebrauchsanweisungen des Zubeh rs y Diese Bedienungsanleitung ist Teil des Produkts Bewahren Sie sie gut erreichbar auf F gen Sie diese Bedienungsanleitung bei Weitergabe des Ger ts an Dritte bei gt Die aktuelle Version der Bedienungsanleitung in den verf gbaren Sprachen finden Sie auf unserer Internetseite www eppendorf com 1 2 Gefahrensymbole und Gefahrenstufen Die Sicherheitshinweise in dieser Anleitung haben die folgenden Gefahrensymbole und Gefahrenstufen 1 2 1 Gefahrensymbole Stromschlag Explosion Giftige Stoffe Be Sachschaden 1 2 2 Gefahrenstufen Gefahrenstelle GEFAHR Wird zu schweren Verletzungen oder zum Tod f hren WARNUNG Kann zu schweren Verletzungen oder zum Tod f hren VORSICHT Kann zu leichten bis mittelschweren Verletzungen f hren ACHTUNG Kann zu Sachsch den f hren 1 3 Darstellungskonventionen Darstellung Bedeutung 1 Handlungen in vorgegebener Reihenfolge
57. lc GSONA 2012 06 01 14 25 48 6 0 A 4 lt UYW Q resurs Nach Eingabe der Molmasse alternativ in Basen process results more calc dsDNA 2012 06 01 17 04 47 Basenpaaren oder in kDa caer 18 Konzentrationsergebnis in die molare Total volume of 100 pL ID I g Molecular mass 297 basepairs Konzentration umrechnen 198 kDa GO e Nach Eingabe des Probenvolumens Calculations e Mumm dsDNA 6 0 pg mL 0 120 Axx Gesamtmenge in der Probe berechnen P S NITION RCS Save nderung speichern und zum 30 7 pmol mL u 3 1 pmol total amount in sample Methodenschritt process results zur ckkehren Cancell Abbrechen und zum Methodenschritt process results zur ckkehren JI H I I save Cancel e Fur dsDNA wird bei der Berechnung der molaren Konzentration eine doppelstrangige Nukleins ure angenommen F r die Methoden ssDNA RNA und Oligo wird eine einzelstr ngige Nukleins ure angenommen e F r Methoden die in der Hauptgruppe Routine Methodengruppe Nucleic acids ber lt New Method gt neu programmiert wurden werden f r die Berechnung der molaren Konzentration immer doppelstr ngige Nukleins uren angenommen Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 43 Deutsch DE Nach Speicherung der Anderungen k nnen Sie diese mit Yes auf alle Proben der Messreihe bertragen Would you like to apply the change to all samples in the measuring series dsDNA
58. lichen Ordner einf gen Navigieren Sie mit den Cursor Tasten in die Spalte Methods des gew nschten Ordners und dr cken Sie paste zum Einf gen der Methode 6 2 Methodenbeschreibung Photometrie In diesem Kapitel werden die vorprogrammierten Methoden und Methoden Templates beschrieben 6 2 1 Methodengruppe Absorbance Single A Extinktionsmessung bei einer Wellenl nge Keine nachgeschaltete Auswertung 6 2 2 _ Methodengruppe Routine Die Methoden der Gruppe Routine sind als feste Methoden vorprogrammiert Nach nderung von Methodenparametern in den fest vorprogrammierten Methoden muss daher ein neuer Methodenname vergeben werden Nucleic acids Konzentrationsbestimmung von Nukleins uren durch Messung bei 260 nm und Auswertung ber Faktor Verschiedene Nukleins uremethoden wie dsDNA oder RNA sind vorprogrammiert Die Parameter unterscheiden sich durch den Faktor Vorprogrammierte Methode f r Mikroliterk vetten Messung von DNA in Probenvolumen im Mikroliterbereich mit Lichtweg 1 mm mit Mikroliterk vetten wie Eppendorf uCuvette G1 0 oder Hellma TrayCell Zusatzinformationen zur Reinheit der gemessenen Nukleins ure Ratio A260 A280 Ratio A260 A230 eingeschr nktes Extinktions Wellenl ngen Spektrum der Nukleins ure in Abst nden von 3 nm Extinktion der Background Wellenl nge voreingestellt 320 nm die Extinktion der reinen Nukleins ure sollte hier ann hernd Null betragen Partielle Tr bungskorrektur ber
59. lie en asua eee nae 45 7 Funktionen 33 3 313 s NG acces Re ee 0 0 90 47 7 1 Funktionen der Hauptgruppe User 47 7 1 1 Results Memory 1 9 48 7 1 2 General Method Parameters oes 49 7 1 3 Absorbance Spectra Library 51 721 4 0 ee deet Ee 3 eae ea ee LT Oe d 51 LAS D vice Galibratl on sai ke ee 1111 9 52 waki oi a eas 3 e GCG 52 8 iInstandhaltung ca 13590 0 53 8 1 Reinigung 2 nt wae 0 53 8 1 1 K vettenschachtabdeckung rengen 53 8 2 Desinfektion Dekontamination aa 54 8 3 of esc a 3 11 0 55 8 3 1 Photometereinheit berpr fen ee es 56 8 3 2 586 6 59 8 4 Sicherungen Ersetzen rrim n a a r a i res 59 8 5 Dekontamination vor Versand 60 9 Problemb hebung is zi id ORIEN NR EE SE een 61 9 1 Allgemeine FER Ps saz vs indu vit rent 1 1 0 61 9 2 Fehlermeldungen un d vende suu E DR et ta es Su gee l 63 9 3 Ergebnisk nnzeichn und en ja ci us da ne ee sasa 66 10 Transport Lagerung und Entsorgung 2 2 22
60. mal places 0 Autoprint 5 3 2 3 Blank und Standards messen gt berpr fen Sie die Parametereinstellung Mit den Softkeys Page dn und Page up rufen Sie die Seiten der Parameterliste auf Mit Edit ndern und speichern Sie Parameter O Bei Auswertung ohne Standards z B DNA Messungen entf llt dieser Methodenschritt Standard 1 Linear regression not calculated Standard 2 250 Standard 3 Quadratical regression Conc 924 41 A 134 52 A 123 14 Standard 4 3 Coefficient of determination Standard 5 1000 R 0 9970 Standard 6 1 Messen Sie zun chst einen Leerwert Taste blank 2 Messen Sie der Reihe nach alle Standards Taste standard In der Anzeige ist jeweils der n chste zu messende Standard markiert Mit den Softkeys Graph bzw Table k nnen Sie die Ergebnisansicht wechseln gt Mit Next akzeptieren Sie die aus den Standardergebnissen errechnete Auswertung 5 3 2 4 Proben messen EL DEEG measure samples print amp export Hnew series Bradtord 2010 11 25 16 28 23 Abs A 1 200 0 900 0 600 0 300 0 000 0 300 600 900 1206005 gm 08 ID 2 1 3 pg mL 0 393 A re blank or A and keys Dilution Edit ID Dat Finish lt Back Next gt 5 3 2 5 Methode abschlie en Bradford measure EEND measure samples
61. mastellen f r das berechnete Konzentrationsergebnis Show scan Auswahl Nur f r die Methodengruppen Nucleic acids und Proteins ein aus direct UV Anzeige eines eingeschr nkten Scans Extinktions Wellenl ngen Graph im Abstand von 3 nm zus tzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung A260 A280 Auswahl Nur f r Nukleins uren ein aus Anzeige der Ratio A260 A280 zus tzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung A260 A230 Auswahl Nur f r Nukleins uren ein aus Anzeige der Ratio A260 A230 zus tzlich zum Ergebnis bei der Probenmessung Background Auswahl Nur f r die Methodengruppen Nucleic acids und Proteins ein aus direct UV Vor der Ergebnisberechnung einer Probe wird die Extinktion einer Background Wellenl nge bei der der zu messende Analyt die Extinktion Null zeigen soll von der Extinktion der Messwellenl nge subtrahiert H ufige Anwendung Partielle Tr bungskorrektur bei Messung von Nukleins uren Background Wellenl nge hierf r 320 nm oder 340 nm Wavelength Auswahl 320 340 nm Wellenl nge bei der der Background gemessen werden soll Der zu messende Analyt sollte hier in reiner Form den Extinktionswert Null haben Methoden 34 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Parameter Eingabe Erl uterung Autoprint Auswahl Ausdruck eines Messergebnisses direkt nach der Messung mit ein aus dem Thermodrucker Es werden nur die wesentlichen Ergebnisdaten ausgedruckt F r die Ausgabe
62. n sind analog zur Methodenauswahl in 3 Spalten strukturiert F r Sie sind die Funktionen in der Hauptgruppe User zug nglich Wie in der Methodenauswahl navigieren Sie mit den Cursor Tasten um zun chst die gew nschte Untergruppe und danach in der rechten Spalte die gew nschte Funktion auszuw hlen Mit enter rufen Sie die Funktion auf Functions Main Groups Sub Groups 1 Functions User IS Gen method param Abs spectra library Device settings Device calibration Info mo 1 ECH Softkey Info Firmware Version und Seriennummer des BioPhotometer D30 aufrufen Tab 7 1 bersicht ber die Funktionen Untergruppe Erl uterung Results memory Gespeicherte Ergebnisse anzeigen Die Ergebnisse sind nach Methoden und nach Messreihen strukturiert abrufbar und k nnen aus dem Speicher heraus gedruckt und exportiert werden General method parameters Parameter die bergreifend f r verschiedene Methoden genutzt werden sind im Bereich Functions zentral gespeichert Diese Parameter k nnen hier editiert ge ndert oder neu erstellt werden Im Methodenschritt Check parameters sind die bergreifenden Parameter ber Auswahlboxen dann einfach ausw hlbar e Proteins Parameter f r Methoden der Gruppe Proteins direct UV e Units Einheiten f r Konzentrationsergebnisse die f r viele Methoden genutzt werden k nnen Absorbance spectra library Extinktions Wellenl ngen Sp
63. nblatt in Excel angelegt Der Dateiname setzt sich aus dem Methodenamen der Uhrzeit und dem Datum der Messreihe zusammen Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Export Variante ausw hlen Select an export method OExport to PC J J Export auf USB Stick Export Cancel Wenn kein USB Stick angeschlossen ist ist die erste Variante nicht anwahlbar 1 Schlie en Sie einen USB Stick FAT 32 formatiert an den USB Anschluss 4 an siehe Gesamtillustration auf S 9 2 Starten Sie mit Export Export auf ein externes Speichermedium Export zu PC Voraussetzung f r das Betriebsystem des PC Windows XP SP2 oder h here Version 1 Verbinden Sie das Ger t mit dem PC ber das USB Kabel am USB Anschluss 8 siehe Gesamtillustration auf S 9 2 Stellen Sie bei wiederholtem Export sicher dass zuvor exportierte Daten auf die Festplatte des PC gespeichert wurden da diese sonst durch den erneuten Export berschrieben w rden w Starten Sie mit Export Export auf den PC 4 Das exportierte Datenpaket wird auf Ihrem PC als Wechseldatentr ger mit dem Namen eppendorf angezeigt ffnen Sie die Excel Datei in diesem Laufwerk und speichern Sie sie auf der Festplatte Datenpakete ausw hlen Results Prim re Ergebnisdaten nicht ausw hlbar da sie immer bertragen werden Data Zus tzliche Ergebnisdaten die in den Ergebnisanzeigen w hrend der Messung mit dem
64. nge Bei Auswertung mit Standardreihe Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis Bacterial density 00 000 re unner mensure sampies Kat export few series OD 600 2010 07 02 14 20 39 01 ID 0 846 0 846 Ay A and i Dilution 6940 H H Finish I lt Back Next gt Ergebnisanzeige Berechnetes Ergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge Hauptgruppe Basic Factor standard Analog zu Protein direct UV siehe oben Ergebnisanzeige Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge Calibration curve Analog zu Proteins with reagent siehe oben Ergebnisanzeige e Konzentrationsergebnis mit Extinktion bei der Messwellenl nge e Graph der Standardauswertung mit eingezeichnetem Probenergebnis 42 Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 6 4 5 process results Nach der Probenmessung folgen im Methodenablauf zwei optionale Schritte process results und print amp export Im Schritt process results k nnen Sie bei den Methoden der Gruppe Nucleic acids die Konzentrationsergebnisse in molare Konzentrationen oder nach Volumeneingabe in Gesamtmengen umrechnen Wie in der Ergebnisanzeige k nnen Sie mit den Cursor Tasten und Q zwischen den Probenergebnissen der Messreihe navigieren und gezielt Ergebnisse zur Nachbearbeitung ausw hlen Tab 6 3 More calculations dsDNA Dr cken Sie den Softkey More ca
65. ntr chtigt sein Die Haftung f r entstehende Sach und Personensch den geht dann auf den Betreiber ber Das Ger t wird nicht entsprechend der Bedienungsanleitung benutzt Das Ger t wird au erhalb des bestimmungsgem en Gebrauchs eingesetzt Das Ger t wird mit Zubeh r oder Verbrauchsartikeln verwendet die nicht von Eppendorf empfohlen werden Das Ger t wird von Personen die nicht von Eppendorf autorisiert wurden gewartet oder instand gesetzt Am Ger t werden vom Anwender unautorisiert nderungen vorgenommen 3 5 Sicherheitshinweise am Ger t Darstellung A Bedeutung Gefahrenstelle gt Beachten Sie die Bedienungsanleitung Ort R ckseite des Ger ts Ger t nach dem ffnen justieren Adjust device after opening Wenn das Ger t ge ffnet wird muss es neu justiert werden gt Ger t nicht ffnen Unterseite des Ger ts Installation Eppendorf BioPhotometer D30 15 Deutsch DE 4 Installation 4 1 Installation vorbereiten y Heben Sie den Transportkarton und das Verpackungsmaterial f r einen sp teren sicheren Transport oder f r eine Lagerung auf gt Kontrollieren Sie anhand der Angaben zum Lieferumfang die Vollst ndigkeit der Lieferung siehe Lieferumfang auf S 9 gt Pr fen Sie alle Teile auf eventuelle Transportbesch digungen 4 2 Standort w hlen W hlen Sie den Standort f r das BioPhotometer D30 nach folgenden Kriterien e 2 S
66. oben ID eingeben e Data Zus tzliche Ergebnisdaten anzeigen nicht bei allen Methoden e Finish Messreihe beenden und zur Methodenauswahl zur ckkehren 0 Die angezeigten Extinktionswerte entsprechen immer den direkt gemessenen Werten Verd nnungs oder K vettenfaktor sowie Backgroundextinktionen werden erst f r die anschlie ende Ergebnisberechnung einbezogen siehe Extinktionswerte auf S 75 38 Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Verd nnung eingeben U measure samples I dilution Enter dilution for next sample 201 ut sample BQ diluent Clear ai 1 J op J Cancel Softkeys Der Softkey Dilution ist aktiviert nachdem der Leerwert Taste blank gemessen worden ist 1 Dr cken Sie den Softkey Dilution 2 Geben Sie die Volumina f r die Probe maximal 3 stellig und f r den Verd nnungspuffer maximal 4 stellig ein Die nachfolgenden Probenergebnisse werden vom Ger t mit dem errechneten Verd nnungsfaktor multipliziert e Clear dil Werte f r die Probenverd nnung l schen OK Probenverd nnung best tigen und zur Probenmessung zur ckkehren e Cancel Eingabe abbrechen und zur Probenmessung zur ckkehren Die Verd nnung wird f r alle nachfolgenden Probenergebnisse angewendet bis sie durch erneute Eingabe ge ndert wird Proben ID eingeben Die ID wird f r das nachfolgende Probenergebnis angewendet Bei Eingabe einer ID wird die zuletzt eingege
67. ock A GE e i 1 5 Current entry wechseln a a s a 1 910111611 e Keyboard Ei T i h tt z x e vibin m tr Numeric keypad Save Eingegebenen Text speichern Numbers Se Space pads Cancel Texteingabe abbrechen Numbers abc Save H Cancel 22 Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 52 K vette einsetzen In die K vettenaufnahme k nnen Sie handels bliche Rechteckk vetten aus Glas oder Kunststoff einsetzen Au enma e 12 5 mm x 12 5 mm Lichtwegh he 8 5 mm ber dem K vettenboden Gesamth he mindestens 36 mm Die K vetten m ssen bei der jeweiligen Messwellenl nge optisch transparent sein F r Messungen im UV Bereich bietet Eppendorf mit der UVette eine Kunststoffk vette an die bei Wellenl ngen ab 220 nm transparent und damit auch f r die Messung von Nukleins uren geeignet ist Eppendorf mi i mi Cuvettes uCuvette G1 0 Hellma TrayCell UVette Ultra micro Semi micro Macro Basic area 12 5 mm x 12 5 mm Min overall height 36 mm Min filling level 10 mm Light path 8 5 mm Max height of base 7 mm 0 mm Min volume Photometry See manufacturer See manufacturer 50 uL 70 uL 400 uL 1000 uL information information or similar microliter cuvette Voraussetzung K vette ist frei von Verschmutzung durch Staub oder Fingerabdr cke und frei von Kratzern K vettenschacht ist frei
68. odengruppe Nucleic acids ber lt New Method gt neu programmiert wurden werden f r die Berechnung der molaren Konzentration immer doppelstr ngige Nukleins uren angenommen Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 81 Deutsch DE 12 5 3 Berechnung des Faktors f r Protein in General Method Parameter Dieser Abschnitt gilt nur f r Berechnung der Proteinkomponente in der Methodengruppe Proteins direct UV Bei dieser Methodengruppe wird in den Parametern die Proteinkomponente ausgew hlt siehe Methodenparameter auf S 32 Der Proteinkomponente ist ein Faktor zugeordnet der in der Funktion General Method Parameter Proteins f r jedes Protein eingegeben wird Alternativ zur Eingabe des Faktors kann entweder Ag 1 oder der Extinktionskoeffizient plus die Molmasse des Proteins eingegeben werden In diesem Fall wird der Faktor wird wie folgt berechnet 1 ee A F Faktor f r das Protein Einheit g L Ao 1 Extinktion des Proteins bei einer Konzentration von 0 1 1 g L Bei Eingabe des molaren Extinktionskoeffizienten und der relativen Molmasse des Proteins kann Ay 1 hieraus berechnet werden E pes P A MM Ep molarer Extinktionskoeffizient des Proteins Einheit cm 1M 1 MMp relative Molmasse des Proteins Einheit Da Eingabe in General Method Parameter in kDa Auswerteverfahren 82 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 13 Bestellinformationen Bestellinformationen Eppendorf BioPhotomet
69. oder tr be Leerwertl sung 9 Leerwertl sung berpr fen und Blank ggf neu messen Der eingegebene Name ist nicht g ltig Fehler bei der Eingabe von Namen Verschiedene Ursachen sind m glich Zur konkreten Ursache bitte die Information in der Hilfebox beachten 9 Siehe Information in der Hilfebox Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Symptom Meldung Es existiert bereits eine Methode oder ein Ordner Protein Unit mit diesem Namen M gliche Ursache e Der Name unter dem die Methode abgespeichert werden soll wurde bereits f r eine andere Methode in demselben Ordner verwendet e Die Meldung erscheint auch wenn bereits vergebene Namen f r einen Ordner oder unter General Method Parameter f r ein Protein oder eine Konzentrationseinheit editiert wurden Abhilfe gt Anderen Namen vergeben Folgende Parameterwerte sind in General Method Parameter nicht definiert Beim ffnen einer Methode deren Parameter auf General Method Parameter zur ckgreift wurde festgestellt dass mindestens ein Parameter Protein Einheit dort nicht mehr existiert also vermutlich gel scht wurde Wahlen Sie einen anderen Parameter aus der vorhandenen Liste Falls erforderlich programmieren Sie in General Method Parameter einen neuen Listeneintrag um bei der Programmierung einer Methode darauf zur ckgreifen zu k nnen Der Wert des mit mar
70. on aus der Extinktion die Au 1 folgenden Daten eingeben Ext coeff Faktor oder Ag 10 oder Extinktionskoeffizient und Molmasse e Molecular mass Units Aus allen verf gbaren Einheiten k nnen Sie bei der Programmierung von Methodenparametern eine Einheit ausw hlen e Unit Eine noch nicht programmierte Einheit f r das Konzentrationsergebnis eingeben Funktionen Eppendorf BioPhotometer D30 51 Deutsch DE 0 e Kenndaten f r Proteine die nicht ab Werk vorprogrammiert sind k nnen in der Datenbank expasy ermittelt werden http www expasy org tools protparam html e Eine Tabelle mit A Merten f r viele Proteine finden Sie auch in C N Pace et al Protein Science 1995 4 2411 2423 Tabelle 5 Die A o Werte m ssen mit 0 1 multipliziert werden um die ben tigten Ao 1 Werte zu erhalten 71 3 Absorbance Spectra Library Functions Main Groups Sub Groups Functions Absorbance Spectra Library CHS SS 0 800 0 400 m ee See kt 7 N 7 1 4 Device Settings Device Settings Language English Je Current time 2012 07 31 17 40 52 Date 2012 07 31 YYYY MM DD Time 17 40 24 HH MM SS Weekly v last self test 2012 07 31 Photometer unit PASSED Self test interval Save Cancel In der rechten Spalte w hlen Sie das Spektrum aus das Sie aufrufen m chten und best tigen Sie mit enter Softkeys Export und
71. orf Service 8 4 Sicherungen ersetzen N GEFAHR Stromschlag Schalten Sie das Ger t aus und ziehen Sie den Netzstecker bevor Sie mit der Wartung bzw Reinigung beginnen Der Sicherungshalter befindet sich zwischen der Netzanschlussbuchse und dem Netzschalter 1 Ziehen Sie den Netzstecker 2 Dr cken Sie die Kunststofffedern 1 oben und unten zusammen und ziehen Sie den Sicherungshalter 2 vollst ndig heraus 3 Ersetzen Sie defekte Sicherungen und setzen Sie den Sicherungshalter wieder ein Achten Sie auf die korrekte Position der F hrungsschiene 3 60 Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 8 5 Dekontamination vor Versand Wenn Sie das Ger t im Reparaturfall zum autorisierten Technischen Service oder im Entsorgungsfall zu Ihrem Vertragsh ndler schicken beachten Sie Folgendes AN WARNUNG Gesundheitsgefahr durch kontaminiertes Ger t A 1 Beachten Sie die Hinweise der Dekontaminationsbescheinigung Sie finden diese als PDF Datei auf unserer Internetseite www eppendorf com decontamination 2 Dekontaminieren Sie alle Teile die Sie versenden 3 Legen Sie der Sendung die vollst ndig ausgef llte Dekontaminationsbescheinigung bei Problembehebung Eppendorf BioPhotometer D30 61 Deutsch DE 9 Problembehebung 9 1 Allgemeine Fehler Fehler M gliche Ursache Abhilfe Messergebnissesind Haltbarkeit des Reagenzes unprazise berschritten
72. pendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE e Sie mit Q und Q den zu editierenden Protein name New protein Parameter C GC S a A Factor 1 67500 g Best tigen Sie an Aois 0 59701 Ext coet be L mol cm Molecular mass im kDa Korea Jae I ICH Issa Softkeys e OK Eingabe speichern und in die Auswahl der Parametergruppe zur ckkehren e Cancel In die Auswahl der Parametergruppe ohne nderung zur ckkehren Bei der Programmierung einer Methode der Methodengruppe Proteins direct UV k nnen Sie auf die Eintr ge in General Method Parameter zugreifen W hlen Sie den Namen des Proteins aus um die zugeh rige Parametergruppe in das Methodenprogramm zu importieren ber die Auswahl edit beim Parameter Protein k nnen en Bewpriei Sie auch direkt in die Funktion General Method Cuvette 10mm Y Page 1 2 Unit mg mL v Calculati Factor 7 raras Parameter gelangen und dort die Parameter Factor 7 4 aie ansehen sowie editieren Decimal places 2 ele SL H Page dn he Save Save As JC Cancel Tab 7 2 Parameter in General Method Parameter Parameter Erlauterung Proteins Diese Parameter werden bei der Auswahl eines Proteins bei der Programmierung einer Methode der Gruppe Proteins direct UV in die Methodenparameter geladen e Protein name Neben dem Namen und der Wellenl nge k nnen Sie zur Definition des Factor Faktors f r die Berechnung der Konzentrati
73. rn in dem Sie die Methode aufgerufen haben oder in der Methodengruppe Favorites in einem frei w hlbaren Ordner speichern Den Namen maximal 20 stellig k nnen Sie ber eine eingeblendete Tastatur Softkey Keyboard oder direkt ber den Tastenblock siehe Text eingeben auf S 21 eingeben Nach dem Speichern gelangen sie zur ck in die Anzeige check parameters 36 Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 6 4 2 measure standards measure standards new Conc Abs Linear regression pg ml Asos not calculated Standard 1 100 Sasa Ke Standard 2 250 x Standard 3 500 x randard 4 Curve Fit Graph ee Der erste zu messende Standard ist in der Anzeige markiert Messen Sie nach dem Leerwert Taste blank der Reihe nach alle Standards Taste standard Wenn Sie mehr als ein Replikat pro Standard messen wird der Mittelwert f r jeden Standard automatisch errechnet und angezeigt Mit den Cursor Tasten Q und Q k nnen Sie auch gezielt bestimmte Standards zur Messung ausw hlen Auch eine Neumessung einzelner Standards ist so m glich Last call Die zuletzt gespeicherte Standardauswertung f r diese Methode aufrufen um diese f r Probenmessungen zu nutzen e Curve fit Verfahren zur Standardauswertung ausw hlen Sie k nnen das Verfahren auch nachtr glich ndern solange das Ergebnis nicht gespeichert wurde Hinweise zur Auswahl des Auswerteverfahrens finden Sie im
74. rten Methoden Technische Daten 74 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 75 Deutsch DE 12 Auswerteverfahren Dieses Kapitel beschreibt die in den Methodenprogrammen verf gbaren Auswerteverfahren sowie die Berechnung einer Verd nnung durch die Ger te Software 0 Beachten Sie beim Vergleich von Messergebnissen mit den Ergebnissen anderer Photometer Spektralphotometer dass die Werte von der Bandbreite der Ger te abh ngen k nnen In den folgenden F llen k nnen die Unterschiede erheblich sein Das Extinktionsspektrum weist bei der Messwellenl nge einen schmalen Peak auf e Es wird nicht am Maximum sondern auf der Flanke eines Peaks gemessen Kontrollieren Sie daher die Richtigkeit der Methode durch die Messung von Standards 12 1 Extinktionswerte Extinktionswerte werden als Axxx XXX steht f r die Wellenl nge dargestellt Diese Anzeigen entsprechen immer den direkt gemessenen Werten d h ohne Korrekturen die in die anschlie ende Auswertung einflie en wie z B Korrekturen f r optische Schichtdicken der K vette oder Background Korrekturen 12 1 1 Blank Alle Extinktionswerte sind immer auf den zuletzt gemessenen Blank Leerwert bezogen Eine Blank Messung ist daher zu Beginn einer jeden Messreihe obligatorisch und auch w hrend einer Messreihe jederzeit m glich Die Blank Messung sollte idealerweise alle Einflussm glichkeiten auf den Extinktionswert der Me
75. ruckers an das Stromnetz an und schalten Sie ihn ein Hinweise zum Drucker finden Sie in der Bedienungsanleitung des Druckers 4 4 2 Thermodrucker DPU 414 Schlie en Sie den Thermodrucker DPU 414 an den seriellen Druckeranschluss an 1 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem seriellen Druckeranschluss 9 und drehen Sie die Sicherungsschrauben fest siehe Gesamtillustration auf S 9 2 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem Drucker und drehen Sie ebenfalls die Sicherungsschrauben fest 3 Schlie en Sie den Drucker ber das mitgelieferte Steckernetzteil und Netzkabel Zubeh r des Druckers an das Stromnetz an und schalten Sie ihn ein Hinweise zur Ver nderung der Einstellungen des Druckers finden Sie in der Bedienungsanleitung des Druckers Die DIP Schalter sind entsprechend der folgenden Tabelle bereits f r das BioPhotometer D30 voreingestellt Tab 4 1 Einstellung der DIP SW f r den Thermodrucker DIP SW 1 Bedeutung 1 OFF Input Serial 2 ON Printing Speed High 3 ON Auto Loading ON 4 OFF Auto LF OFF 5 ON Setting Command Enable 6 OFF Printing 7 ON Density 8 ON 100 Installation Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE DIP SW 2 Bedeutung 1 ON Printing Columns 40 2 ON User Font Back up ON 3 ON Character Select Normal 4 ON Zero Normal 5 ON International 6 ON Character 7 ON S
76. s 12 2014 The valid certificates are part of the requalification documentation Die G ltigkeitszertifikate sind Teil der Qualifizierungsdokumentation 6133 928 020 00 Please protect against dust heat cold and liquid The limits are valid for max 2 years Bitte vor Staub Hitze K lte und Fl ssigkeiten sch tzen Signature Die Grenzwerte gelten f r max 2 Jahre Unterschrift Abb 8 1 Deckel Innenseite des Filterkastens Muster 8 3 1 1 Photometrische Richtigkeit berpr fen Functions Main Groups Sub Groups Functions Results memory B Photometer unit D Gen method param HEI Perform selftest D Abs ectra library Dev Device calibration Info 260 nm 280 nm O Check photometric accuracy Al A2 Next will start A3 the selected calibration Device Calibration Device Calibration Check photometric accuracy Insert filter AO and press the blank key Abort lt Back Next gt Instandhaltung Eppendorf BioPhotometer D30 57 Deutsch DE W hlen Sie in der Gruppe Device calibration die Funktion Photometer unit und best tigen Sie mit enter W hlen Sie aus ob Sie die Wellenl ngenrichtigkeit oder die Photometrische Richtigkeit berpr fen wollen Best tigen Sie mit enter Wechseln Sie mit Next gt zur Messung Folgen Sie den Anweisungen im Display und messen Sie zun chst das Leerwertfilter AO und danach das erste Pr
77. s Bereich in den dieses Produkt einzuordnen ist nicht mehr im kommunalen Abfall oder Hausm ll entsorgt werden Um dies zu dokumentieren sind sie mit folgendem Symbol gekennzeichnet Da sich die Entsorgungsvorschriften innerhalb der EU von Land zu Land unterscheiden k nnen bitten wir Sie sich bei Bedarf bei Ihrem Lieferanten zu informieren Transport Lagerung und Entsorgung 70 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Technische Daten Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 71 11 Technische Daten 11 1 Stromversorgung Spannungsversorgung 100 V bis 240 V 10 50 Hz bis 60 Hz berspannungskategorie Verschmutzungsgrad 2 Leistungsaufnahme Maximal auftretende Leistung laut Typenschild 25 W Ca 15 W im Bedienablauf Ca 5 W mit gedimmtem Display Zul ssige Netzunterbrechung Ca 10 ms bei 90 V Ca 20 ms bei 230 V Schutzklasse Sicherungen T 2 5 A 250 V 5 mm x 20 mm 2 St ck 11 2 Umgebungsbedingungen Betrieb Umgebungstemperatur 15 C bis 35 C Rel Luftfeuchte 25 bis 70 Luftdruck 86 kPa bis 106 kPa Luftdruck Verwendung bis zu einer H he von 2000 m ber Meeresh he Vor direktem Sonnenlicht sch tzen 11 3 Gewicht Ma e Gewicht 5 4 kg Abmessungen Breite 295 mm Tiefe 400 mm Hohe 150 mm Benotigter Raum Breite 500 mm mit Thermodrucker 750 mm Tiefe 500 mm 72 Technische Daten Eppendorf BioPhotometer D30 D
78. sgeschlossen 9 Verwenden Sie ausschlie lich von Eppendorf empfohlenes Zubeh r und Original Ersatzteile 3 3 2 Allgemeine Sicherheitshinweise Eppendorf BioPhotometer D30 13 Deutsch DE Ger teschaden L Gi P ACHTUNG Sch den durch aggressive Chemikalien 9 Verwenden Sie am Ger t und Zubeh r keine aggressiven Chemikalien wie z B starke und schwache Basen starke S uren Aceton Formaldehyd halogenierte Kohlenwasserstoffe oder Phenol gt Reinigen Sie das Ger t bei Verunreinigungen durch aggressive Chemikalien umgehend mit einem milden Reinigungsmittel ACHTUNG Ger teschaden durch Begasung mit aggressiven Chemikalien gt F hren Sie am Ger t keine Desinfektion durch Begasung durch ACHTUNG Korrosion durch aggressive Reinigungs und Desinfektionsmittel 9 Verwenden Sie weder tzende Reinigungsmittel noch aggressive L sungs oder schleifende Poliermittel gt Inkubieren Sie das Zubeh r nicht l ngere Zeit in aggressiven Reinigungs oder Desinfektionsmitteln ACHTUNG Sch den an elektronischen Bauteilen durch Kondensatbildung Nach dem Transport des Ger ts von einer k hlen in eine w rmere Umgebung kann sich im Ger t Kondensat bilden gt Warten Sie nach dem Aufstellen des Ger ts mindestens 3 h Schlie en Sie das Ger t erst danach an das Stromnetz an ACHTUNG Beeintr chtigung der Funktion durch mechanische Sch den y Stellen Sie nach einer mechanischen Besch digung des G
79. sse in molare Konzentrationen oder in Nukleins uremengen Masseneinheit oder Moleinheit umrechnen 26 Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 5 3 2 7 Drucken und exportieren Albumin A 280_STD fmeasure samples print amp export new series Abumin A 280 STD 2012 06 01 12 40 05 Data packets Samples WResults ElGraph Method ElParameters Standards ElResutts exp Print J Export Samples Finish lt Back Next gt Stellen Sie Datenpakete f r alle oder f r ausgew hlte Proben zusammen Drucken Sie die Daten aus speichern Sie sie auf einem USB Stick oder bertragen Sie sie ber ein USB Kabel an einen PC 5 3 3 d Bedienung Eppendorf BioPhotometer D30 27 Deutsch DE Wichtige Hinweise f r die Messungen Beachten Sie bei jeder Messung Bei Kunststoffk vetten Wie viele Messungen nacheinander k nnen in der K vette zuverl ssig durchgef hrt werden Messen Sie vor Proben oder Standard Messungen den Leerwert der K vette um neben dem Reagenzleerwert auch den K vettenleerwert zu kompensieren Leerwertergebnisse bleiben f r eine Messreihe gespeichert eine neue Leerwertmessung ist aber jederzeit auch zwischen Probenmessungen m glich e Die angezeigten Extinktionswerte entsprechen immer den direkt gemessenen Werten Verd nnungs oder K vettenfaktor sowie Background Extinktionen werden erst f r die anschlie ende Ergebnisbere
80. ssl sung kompensieren k nnen Der Blank sollte daher mit dem auch f r die Probenmessung benutzten Puffer sowie in derselben K vette wie der Probenwert gemessen werden es sei denn die f r Blank und Probenmessung benutzten K vetten sind optisch gegeneinander abgeglichen haben also denselben Extinktionswert bei der Messwellenl nge 12 1 2 Background Korrektur Hauptanwendung Partielle Korrektur von Verf lschungen der Extinktion bei Nukleins uremessungen durch Tr bungen in der Messl sung Beispielsweise wird die Extinktion bei 320 nm die bei reinen Nukleins uren etwa bei 0 A liegen sollte von der Extinktion bei 260 nm der Messwellenl nge f r Nukleins uren subtrahiert A A A XXX corrBkgr XXX Bkgr Axxx korrBkgr rechnerisch korrigierte Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm Axxx gemessene Extinktion bei der Wellenl nge XXX nm ABkgr gemessene Extinktion bei der Background Wellenl nge 76 Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 12 1 3 Kuvettenkorrektur S mtliche Extinktionswerte die in Ergebnisberechnungen eingehen sind auf die K vetten Schichtdicke 10 mm normiert Wird eine K vette mit einer anderen Schichtdicke benutzt muss diese Schichtdicke im Parameter Cuvette definiert werden In diesem Fall werden die gemessenen Extinktionen vor der Umrechnung in Probenergebnisse auf Messergebnisse mit einer K vette der Schichtdicke 10 mm korrigiert Diese Korrektur wird angewendet auf
81. tandards als Parameter eingegeben As gemessene Extinktion des Standards Wurde f r den Standard Mehrfachmessung 2 oder 3 Replikate programmiert wird aus den gemessenen Extinktionen der Replikate der Mittelwert gebildet und als 4 eingesetzt 12 3 Auswertung mit Standardkurve gerade Wird mit mehr als einem Standard ausgewertet k nnen mit dem Curve fit im Methodenschritt measure standards new folgende Auswerteverfahren f r die Standardkurve gerade ausgew hlt werden Auswerteverfahren Beschreibung Erforderliche Mindestzahl an Standardpunkten linear interpolation Lineare Mindestens 2 Standards Punkt zu Punkt Verbindung im Extinktions Konzentrations Graph en der Standardauswertung linear regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 3 Standards ersten Grades quadratical regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 4 Standards zweiten Grades cubical regression Polynomregression f r Polynom Mindestens 5 Standards dritten Grades spline interpolation Interpolation durch nat rliche Mindestens 3 Standards kubische Splines 78 Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Zus tzlich kann f r Regressionsverfahren gew hlt werden dass die Regressionsgerade Regressionskurve durch den Nullpunkt geht 0 Verwenden Sie f r Kalibrationsgeraden das Verfahren linear regression Testen Sie bei kurvenf rmigen Verl ufen welches Auswerteverfahr
82. te Konzentration der Nukleins ure Einheit ug mL oder ng uL Vp gesamt Gesamtvolumen der Probe im Probengef Geben Sie diesen Wert in More calculations ein Einheit uL 80 Auswerteverfahren Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 12 5 2 2 Berechnung der molaren Konzentration Anwendung Berechnung der molaren Konzentration der Nukleins ure aus Massenkonzentration und relativer Molmasse Die Molmasse wird entweder direkt eingegeben oder vom Ger t aus der eingegebenen Zahl der Basen bzw Basenpaare pro Nukleins uremolek l errechnet Cx10 Mol MM Cm berechnete molare Konzentration der Nukleins ure Einheit pmol mL C aus der Messung berechnete Massenkonzentration der Nukleins ure Einheit ug mL oder ng uL MM relative Molmasse Einheit kDa Falls in More calculations statt der relativen Molmasse die Zahl der Basen bzw Basenpaaren pro Nukleins uremolek l eingegeben wurde wird MM aus der Zahl der Basen bzw Basenpaaren berechnet F r dsDNA MM bpx 2x330x10 F r ssDNA RNA Oligo MM bx330x10 MM berechnete relative Molmasse Einheit kDa bp eingegebene Zahl der Basenpaare pro Molek l b eingegebene Zahl der Basen pro Molek l 0 e Fur dsDNA wird bei der Berechnung der molaren Konzentration eine doppelstrangige Nukleins ure angenommen F r die Methoden ssDNA RNA und Oligo wird eine einzelstr ngige Nukleins ure angenommen e F r Methoden die in der Hauptgruppe Routine Meth
83. teckdosen mit Schutzleiter f r das BioPhotometer D30 und fur den Drucker Fester Labortisch mit waagerechter Arbeitsplatte Platzbedarf des Ger tes 50 cm mit Drucker 75 cm Breite 50 cm Tiefe Temperatur 15 C bis 35 C Vermeiden Sie Temperaturschwankungen z B durch ge ffnete Fenster Vermeiden Sie direktes Sonnenlicht Luftfeuchtigkeit 25 bis 70 relative Feuchtigkeit 0 Achten Sie darauf dass keine Gegenst nde unter dem Ger t liegen 2 8 lose Bl tter Hefte die die Luftzufuhr behindern k nnen 4 3 Ger t an das Netz anschlie en 1 Stellen Sie das BioPhotometer D30 auf eine geeignete Arbeitsfl che 2 berzeugen Sie sich dass Netzspannung und Netzfrequenz mit den Angaben auf dem Typenschild bereinstimmen 3 Verbinden Sie das Ger t mit dem Stromnetz und schalten Sie es mit dem Netzschalter ein 4 Entfernen Sie die Schutzfolie vom Display 16 Installation Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 4 4 Drucker anschlie en 4 4 1 Thermodrucker DPU S445 Voraussetzung Auf dem Ger t ist die Software Version 3 4 4 0 oder h her installiert Schlie en Sie den Thermodrucker DPU S445 an den USB Anschluss f r Drucker an 1 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem USB Anschluss f r Drucker 4 siehe Gesamtillustration auf S 9 2 Verbinden Sie das Druckerkabel mit dem Drucker 3 Schlie en Sie den Drucker ber das mitgelieferte Steckernetzteil und Netzkabel Zubeh r des D
84. ter zur berpr fung der Wellenl ngenrichtigkeit 260 nm 280 nm Die Extinktionen der Filter werden gegen das Leerwertfilter AD gemessen Zus tzlich zu den Informationen ber die Richtigkeit erhalten Sie auch Informationen ber die Pr zision Aus den jeweils 15 Messungen pro Wellenl nge wird neben dem Mittelwert auch der Variationskoeffizient VK Wert berechnet Zur Messung setzen Sie zun chst das Leerwertfilter f r die Leerwertmessung und anschlie end die Pr ffilter wie K vetten in den K vettenschacht ein Die f r die Pr ffilter gemessenen Extinktionswerte werden gegen den zul ssigen Wertebereich verglichen Die Grenzwerte f r den zul ssigen Bereich sind f r die einzelnen Filter in einer Tabelle im Deckel des Filterkastens abgedruckt Wenn Sie die Werte dokumentieren wollen schlie en Sie den Thermodrucker an BioPhotometer D30 reference filter set eppendorf Function Device calibration Photometer unit Order No Best Nr 6133 928 004 Set No Satz Nr 006 Limits measured against Blank A 0 at approx 20 C Grenzwerte gemessen gegen Blank A 0 bei ca 20 C SN 6133 914 006 916 006 917 006 921 006 922 006 923 006 Filter Blank Sample Sample Sample Sample Type A0 260 nm 280 nm A2 A3 Limiting values A Grenzwerte E 1 291 1 499 s 0 197 0 221 1 078 1 101 1 857 1 888 1 041 1 287 0 193 0 217 1 024 1 047 1 717 1 749 aa s 0 173 0 196 0 923 0 947 1 478 1 509 0 161 0 184 0 903 0 926 1 429 1 461 0 172 0 195 0 941 0
85. ung ber Standards oder Faktor typisch Auswertung mit Standardkurve e Die Methoden Bradford Bradford micro Lowry Lowry micro BCA und BCA micro sind bereits vorprogrammiert Je nach Reagenzhersteller muss gegebenenfalls der Curve fit Standardkurventyp verandert werden Bacterial density e Tr bungsmessung zur Bestimmung der Bakteriendichte Messung bei 600 nm ist bereits vorprogrammiert 6 2 3 Methodengruppe Basic Factor Standard Messung bei einer Wellenl nge und Auswertung ber Faktor oder Standard e Methoden f r die Auswertung ber Faktor und Standard sind vorprogrammiert Calibration curve Messung bei einer Wellenl nge und nachfolgende Auswertung mit einer Reihe von 2 bis 12 Standards Verschiedene Auswerteverfahren Curve fit wie lineare Regression nichtlineare Regression sind ausw hlbar Grafische und tabellarische Anzeige der Standardergebnisse e Nutzung der letzten gespeicherten Standardauswertung ist m glich Eine Methode f r die Auswertung mit Standardkurve ist vorprogrammiert 32 Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE 6 3 Methodenparameter In diesem Kapitel werden die Parameter f r die Programmierung der Methoden erl utert Die Reihenfolge der Parameter in der Ger teanzeige kann im Vergleich zur Reihenfolge in der Tabelle bei einigen wenigen Methoden leicht ver ndert sein um die Parameter in der Anzeige bersichtlich darzustellen Die Tabelle stellt di
86. ungen Bei Temperaturunterschieden zwischen Lampe und Umgebung kann photometrische Drift auftreten Bringen Sie daher ein Ger t das aus einer k lteren Umgebung kommt zun chst auf Umgebungstemperatur Vermeiden Sie schnelle Temperaturwechsel F hren Sie bei l ngeren Messreihen oder bei Messungen nach einem l ngeren Zeitraum eine neue Leerwertmessung durch Bedienung 28 Eppendorf BioPhotometer D30 Deutsch DE Methoden Eppendorf BioPhotometer D30 29 Deutsch DE 6 Methoden 6 1 Methode ausw hlen Methoden und Methoden Templates sind bereits mit Auslieferung vorprogrammiert Die Methoden sind in Haupt und Untergruppen geordnet Method Selection Main Groups Sub Groups Methods D Bradford micro Routine Proteins reagent BCA BCA micro BI Lowry Lowry micro D lt Method gt Copy A H Gs Schreibgesch tzte Methoden Die wichtigsten Methoden der Molekularbiologie Sie k nnen die Parameter zwar ver ndern dann aber nur unter neuem Methodennamen abspeichern Nicht schreibgesch tzte Methoden Sie k nnen die Parameter beliebig ver ndern und nach Speichern direkt mit der Messung beginnen Templates f r neue Methoden Jede Methodengruppe enth lt ein Template das zur Erleichterung der Programmierung neuer Methoden bereits mit kompletten Parameters tzen vorprogrammiert ist Die Parameter k nnen beliebig ver ndert und unt
87. urve Fit w hlen M gliche Ursache Bei Auswertung einer Standardkurve mit den Curve Fit Verfahren spline interpolation quadratical regression oder cubical regression wurde kein verwertbares Ergebnis erhalten Abhilfe 9 Anderes Curve Fit Verfahren w hlen Einige Extinktionswerte bei Nebenwellenl ngen sind zu hoch und werden nicht angezeigt Bei mindestens einer Nebenwellenl nge war die Extinktion oberhalb des Messbereichs Nebenwellenl ngen werden nicht f r die Berechnung des Konzentrationsergebnisses herangezogen sondern f r andere Zwecke benutzt Z B Methode dsDNA Extinktion bei 280 nm f r die Berechnung von Ratio 260 280 Tr bungen in der Messl sung Messungen an den Grenzen des photometrischen Messbereichs gt Wenn die Extinktionswerte der Nebenwellenl ngen relevant sind Probe verd nnen bzw durch Zentrifugation Tr bung beseitigen und Messung wiederholen Das Ergebnis liegt au erhalb des Bereichs der Bei Methoden mit Auswertung ber Standardkurven nichtlineare Auswerteverfahren Das gt Messergebnis akzeptieren oder Probe unter Bedingungen neu messen bei denen das Ergebnis im Bereich der Standardkonzentrati Probenergebnis liegt um bis zu 5 Standardkonzentrationen liegt Probe onen au erhalb des Bereichs der verd nnen oder Standardkonzentrationen Standardkonzentrationen ver ndern und neu messen Das e Bei Methoden mit Auswertung von 9 Ergebnis der
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