RTS-1 / RTS-1C
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1. Il Mesophile III Thermophile 3 thermotolerante 4 fakultative 5 obligate 6 extremophile Die dicke Linie stellt die optimale Wachstumstemperatur dar 7 1 1 F r psychrophile muss das Ger t in einem Kaltraum oder einer K hlkammer installiert werden Trotz der aktiven K hlvorrichtung wird die Probe durch den oben offenen Teil des Falcon R hrchens erw rmt Zudem sollte ber cksichtigt werden dass sich die tats chliche Temperatur des Reaktors immer von der tats chlichen Temperatur der Probe aufgrund der Rotation der Probe unterscheidet bei niedrigen Temperaturen unter 10 C und h her sein wird 13 7 1 2 F r mesophile Mikroorganismen kann das Ger t bei Raumtemperatur aufgestellt werden 7 1 3 F r thermophile Mikroorganismen siehe Abb 4 wo der Vergleich der W rmeblocktemperatur und der wirklichen Temperatur im R hrchen in Abh ngigkeit von der Rotationsintensit t beobachtet werden kann Real T C inside the tube Abb 4 Vergleich der W rmeblocktemperatur und der wirklichen Temperatur im R hrchen in Abh ngigkeit von der Rotationsintensit t Die Endpunktdaten wurden 1 30 h nach dem Start des Heizvorgangs von der Raumtemperatur erfasst 7 2 Zellwachstum in Abh ngigkeit von der Rotationsintensit t Es ist bekannt dass Aeration das Wachstum und die Wachstumsrate von aeroben Mikroorganismen beeinflusst Die RS Freguenz beeinflusst die Rate der Sauerstoffaufnahme im Bioreaktor Die erhaltenen Ergebnisse we2. bitte passen Sie die Volumenparameter gem dem Messsystem an um ordnungsgem zu arbeiten Aerotolerante anaerobe L acidophilus Orpm 0 s RSF 37 C 30 ml 10 Min MF Wir empfehlen die Verwendung der Einstellung Zyklusvoreinstellung No mixing OD meas Kein Mischen OD Messung f r eine homogene Verteilung der Zellsuspension im Bioreaktorr hrchen vor der Messung 11 6 4 6 5 12 Aktuell werden Studien durchgef hrt um die Vorteile der RS Technologie Reverse Spin f r das Wachstum verschiedener Typen von Mikroorganismen etwa Hefe und Milchs urebakterien besser zu verstehen Der Endnutzer kann den Hersteller kontaktieren um einen gew nschten Mikroorganismus oder Stamm zur Testung der Kultivierung zu bestellen oder vorzuschlagen Wenden Sie sich bitte an die Forschungs und Entwicklungsabteilung von Biosan unter folgenden E Mail Adressen science biosan lv igorObiosan lv Igor Bankovsky Beratender Biotechnologe f r Anwendungsfragen 7 Empfehlungen zur Erstellung von pers nlichen Einstellungen zur Kultivierung von Mikroorganismen Was ber cksichtigt werden sollte 7 1 Temperaturverteilungsdaten psychrophile mesophile thermophile Die f r Mikroorganismen optimalen Wachstumstemperaturen lassen sich in drei Hauptgruppen unterteilen siehe Abb 3 Abb 3 Temperaturgrenzwerte und optimale Wachstumszonen f r Prokaryoten und ihre Klassifizierung I Psychrophile 2 fakultative
3. Ger t auf Sch den die durch den Transport ggf entstanden sind Transportsch den geh ren nicht zum Garantieumfang 3 2 Vollst ndiges Set Das Set enth lt RTS 1 Echtzeitzellwachstums Logger oder RTS 1C Echtzeitzellwachstums Logger mit K hlung 1 St Klappe E ame 1 St Bioreaktorgef e TPP TubeSpin Bioreaktor 50 ml 20 St D atenk bel u een see ka 1 St USB Laufwerk mit Softwareinstallationsdateien und Installationshandbuch 2222222222222BBRBR nennen 1 St Externes Netzger t 0 urrnnrenenennenennanenenannennennnannennnnenenne 1 St Bedienerhandbuch ZertifiKQt ssssrsreorsrrrrreeerrrrrrrrerersrrrrrrrrrn rr rr rr nan 1 Kopie 4 In RTS 1 Real Time Cell Growth Logger E H b oSan Abb 1 R ckseite Abb 2 Steuerung 3 3 Einrichten Stellen Sie das Ger t auf eine ebene horizontale Arbeitsfl che Schlie en Sie das externe Netzger t an die Netzsteckdose Abb 1 1 auf der R ckseite des Ger ts an Schalten Sie den Computer ein falls er ausgeschaltet war Installieren Sie die Software nach dem im Softwareinstallationshandbuch beschriebenen Verfahren Die Bioreaktorgef e enthalten Falcon R hrchen Die R hrchen f r den Typ TPP TubeSpin Bioreaktor 50 m ssen diejenigen mit den ffnungen sein Arbeitsvolumen 10 ml Konische Form 5 ffnungen A
4. MD Medical Biological Research amp Technologies RTS 1 RTS 1C Echtzeitzellwachstums Logger Bedienerhandbuch f r die Version Zertifikate V 1 AW Inhalt ER BED I 10 11 12 Sicherheitsvorschriften Allgemeine Informationen Erste Schritte Kalibrierung Betrieb Erprobte Methoden zur Kultivierung von Mikroorganismen Empfehlungen zur Erstellung von pers nlichen Einstellungen zur Kultivierung von Mikroorganismen Was ber cksichtigt werden sollte TA Temperaturverteilungsangaben psychrophile mesophile thermophile 7 2 _ Zellwachstum h ngt von der Rotationsintensit t ab 7 3 Aeration und empfohlene R hrchentypen 7 4 Zellwachstum h ngt von der Messfrequenz ab aerobe anaerobe 7 4 Partikelgr e und Kalibrierungskoeffizienten 600 nm 850 nm 7 5 Linearer Bereich der OD Messung als Funktion des Medienvolumens Technische Daten Wartung Kalibrierung zur Wartung des Ger ts Garantie und Anspr che Konformit tserkl rung 1 Sicherheitsvorschriften Symbolbedeutung A Achtung Stellen Sie sicher dass Sie das vorliegende Handbuch gelesen und verstanden haben bevor Sie die Ausr stung benutzen Bitte beachten Sie insbesondere die Abs tze die mit diesem Symbol gekennzeichnet sind ALLGEMEINE SICHERHEIT Benutzen Sie das Ger t nur in der im Handbuch beschriebenen Form Die Einheit sollte nicht benutzt werden falls sie heruntergefallen oder besch digt ist Nach Transport oder Lagerun
5. die bereinstimmung des Ger ts mit den Anforderungen der technischen Daten vorausgesetzt der Kunde befolgt die Betriebs Lagerungs und Transportanweisungen Die garantierte Lebensdauer des Ger ts vom Datum der Auslieferung an den Kunden betr gt 24 Monate Um zu pr fen ob verl ngerte Garantieleistungen verf gbar sind wenden Sie sich an Ihren rtlichen Vertreiber Falls der Kunde Herstellungsfehler entdeckt sollte ein Beschwerdeformular ausgef llt bescheinigt und an die Anschrift des rtlichen Vertreibers gesendet werden Das Beschwerdeformular erhalten Sie auf der Internetseite www biosan lv Abschnitt Technischer Support Falls Garantie oder Nachgarantieleistungen in Anspruch genommen werden m ssen werden folgende Informationen ben tigt F llen Sie die nachstehende Tabelle aus und bewahren Sie sie mit Ihren Unterlagen auf Modell Echtzeitzellwachstums Logger RTS 1 RTS 1C K hlung Seriennummer Verkaufsdatum 20 12 Konformit tserkl rung 21 Biosan SIA Ratsupites 7 build 2 Riga LV 1067 Lettland Telefon 371 67860693 371 67426137 Fax 371 67428101 http www biosan lv Version 1 01 August 2014
6. B C D E unterschiedlicher Gr e ber dem gasdurchl ssigen sterilen PTFE Filter des Schraubverschlusses Die ffnungen k nnen versiegelt werden und somit kann der Austausch je nach Bedarf eingestellt werden Steriler Gasaustausch wird durch die 0 22um Filtermembran gew hrleistet Selbst bei einer hohen Zelldichte gew hrleisten die ffnungen eine hinreichende Sauerstoffversorgung Das R hrchen passt in einen 50ml Standardzentrifugenrotor 4 Kalibrierung Das Ger t ist werksseitig vorkalibriert f r den Betrieb mit 50ml Falcon R hrchen in einem Temperaturbereich von 15 C bis 70 C 4 C bis 70 C f r RTS 1C und speichert nach dem Ausschalten die Kalibrierungsdaten F hren Sie folgende Schritte nacheinander durch um die Konformit t der Kalibrierung zu verifizieren Nehmen Sie ein 50ml Falcon R hrchen Geben Sie 10 ml 0 1 ml destilliertes Wasser hinein Schlie en Sie sorgf ltig den Falcon Verschluss F hren Sie das Falcon R hrchen in den Steckplatz ein Abb 1 4 ein Stellen Sie den Volumenparameter des destillierten Wassers auf dem Display ein Abb 2 11 Dr cken Sie die Taste Run Stop Laufen Stopp Abb 2 9 das Ger t startet die OD Messung und beschleunigt dabei auf 2000 rpm Nach 15 20 Sek sollte der Messzyklus abgeschlossen sein und der Wert auf dem Display erscheinen Falls die OD Werte gleich 0 sind 0 05 OD entspricht das Ger t der werksseitigen Vorkalibrierung und ist einsatzbe
7. anismen ist es erforderlich den Schraubverschluss des TPP TubeSpin Bioreaktor 50ml mit einem Klebeband zu versiegeln Sie k nnen zudem 50ml Standardzentrifugenr hrchen vom Typ Falcon verwenden dabei m ssen Sie ber cksichtigen dass das R hrchen so transparent wie das TPP TubeSpin Bioreaktor R hrchen sein muss 15 7 4 7 5 16 Partikelgr Be und Kalibrierungskoeffizienten 600 nm 850 nm Die Kalibrierung des Instruments wurde f r spezifische Gr Ben von Mikroorganismen von 0 4 0 8 x 1 3 um und ein Zellvolumen von ca 0 6 0 7 um entworfen Falls die o g zul ssige Gr e berschritten wird arbeitet das Messsystem nicht ordnungsgem Der Koeffizient der Umwandlungsrate der optischen Dichte OD A 850 nm in OD A 600 nm ist gleich 2 2 Berechnungsbeispiel Um 3 5 OD A 850 nm in OD A 600 nm umzuwandeln multiplizieren Sie das Ergebnis mal 2 2 was 7 7 OD A 600 nm ergibt Linearer OD Messbereich als eine Funktion des Medienvolumens Abb 7 Volume influence on RTS 1 OD measurement linearity RTS 1 OD 600nm OD standards 600nm Abb 7 Einfluss des Volumens des fl ssigen Mediums auf den linearen OD Messbereich AOD A 850nm At vs Fermentierungszeit h Wie in Abb 7 zu sehen ist registriert das Ger t die optische Dichte der Probe in einem linearen Bereich bis 15 OD A 600 nm bei einem Volumen von 10 ml bis 8 OD A 600 nm bei 20 ml und bis 6 OD A 600 nm bei 30 ml 8 Technische Da
8. g belassen Sie die Einheit 2 Stunden bei Raumtemperatur bevor Sie sie ans Stromnetz anschlie en Benutzen Sie nur die vom Hersteller empfohlenen Reinigungs und Desinfektionsmethoden Nehmen Sie keine nderungen am Design des Ger ts vor ELEKTRISCHE SICHERHEIT Schlie en Sie die Einheit nicht an eine nicht geerdete Steckdose an und benutzen Sie kein nicht geerdetes Verl ngerungskabel Schlie en Sie das Ger t nur an elektrische Netze an deren Spannung der auf dem Seriennummernetikett angegebenen Spannung entspricht Benutzen Sie nur das mit diesem Produkt mitgelieferte externe Netzger t Stellen Sie sicher dass der Netzschalter und das externe Netzger t w hrend des Betriebs leicht zug nglich sind Koppeln Sie die Einheit vom Stromnetz bevor Sie sie versetzen Schalten Sie das Ger t aus indem Sie den Netzschalter Power ausschalten und das externe Netzger t von der Steckdose nehmen Falls Fl ssigkeit in das Innere des Ger ts gelangt nehmen Sie es vom externen Netzger t und lassen Sie es von einem Instandsetzungs und Wartungstechniker berpr fen Betreiben Sie die Einheit nicht unter Bedingungen in denen sich Kondenswasser bilden kann Die Betriebsbedingungen der Einheit sind im Abschnitt Technische Daten dargelegt W HREND DES BETRIEBS e Betreiben Sie die Einheit nicht in Umgebungen mit aggressiven oder explosiven chemischen Mischungen Wenden Sie sich im Vorfeld an den Hersteller wenn Sie die Einheit i
9. isen darauf hin dass die H chstrate der Zellteilung bei einer Freguenz von 1 RS pro Sekunde 1 s bei einer Geschwindigkeit von 2000 rpm erreicht wurde Der Anstieg der Pause zwischen Reverse Spins reduziert die Zellwachstumsrate und erreicht 50 des H chstwertes wenn die RS Freauenz 30 s betr gt siehe Abb 5 und Abb 6 OD over ime 45 E 30s Bas 4 His E 155 2 Hs 3 3 LE kt 025 D 2 15 10 20 3 0 40 50 60 70 5 0 30 100 170 120 130 140 150 Hours Growth rate 14 1 2 1 7 3 Experimenterkl rung Abb 5 Der Echtzeitzellwachstums Logger RTS 1 wurde mit 850 nm LED verwendet das Volumen von LB Medien in 50ml Falcon R hrchen betr gt ca 15 ml die Reverse Spin Frequenz 1 2 4 8 16 30 s Messfreguenz MF betr gt ca 10 Min die Reaktorrotationsgeschwindigkeit 2000 rpm die Temperatur 37 C der Durchmesser der Filterporen f r Aeration 0 25 um Growth rate M 30s H 4s H is H 16s Hos H ss amp AH nr EL ra 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 Hours Aeration und empfohlene R hrchentypen F r aerobe Mikroorganismen empfehlen wir die von uns erh ltlichen R hrchen TPP TubeSpin Bioreaktor 50ml f r aerotolerante anaerobe Mikroorganismen z B den Lactobacillus acidophilus ist es jedoch notwendig Testr hrchen mit versiegelter Klappe nicht Membran zu benutzen F r optimale Ergebnisse mit wachsenden aerotoleranten anaeroben Mikroorg
10. n spezifischen Atmosph ren betreiben m chten e Betreiben Sie die Einheit nicht falls sie defekt ist oder falsch installiert wurde e Benutzen Sie sie nicht au erhalb von Laboren e berpr fen Sie die Temperatur nicht durch Ber hren Benutzen Sie ein Thermometer e Der Rotor muss nach Gebrauch immer gereinigt und dekontaminiert werden BIOLOGISCHE SICHERHEIT e Der Benutzer ist f r die angemessene Dekontaminierung verantwortlich wenn gef hrliche Stoffe auf oder in das Innere der Einheit gelangen 2 Allgemeine Informationen Der Echtzeitzellwachstums Logger ist ein Ger t das als Inkubator mit optionaler Messung der Dichte in Echtzeit benutzt werden kann Die Temperatursteuerung erm glicht die Verwendung von RTS 1 RTS 1C als Inkubator z B um Zellen zu kultivieren Dank der innovativen Mischtechnologie Reverse Spinning der Probe um ihre eigene Achse ist es m glich OD Messungen ohne Sondeninterferenzen vorzunehmen Die weiterentwickelte Software zum Erfassen Anzeigen und Analysieren von Daten erm glicht Arbeiten in Echtzeit Das Modell RTS 1C ist mit einer K hlvorrichtung ausger stet die die K hlung der Proben auf 4 und Temperatureinstellung mithilfe der Software erm glicht Der Echtzeitzellwachstums Logger kann auf folgenden Gebieten eingesetzt werden e Molekularbiologie Zellbiologie Biotechnologie Biochemie Chemie Mikrobiologie Merkmale e Innovative Mischung dank Reverse Spinning der Probenr hrchen
11. onen Dr cken Sie die Taste Run Stop Laufen Stopp Abb 2 9 um den Betrieb zu starten und zu beenden Dr cken Sie die Taste Run Stop Laufen Stopp Abb 2 9 um den Betrieb zu beenden Achtung Das Beenden des Betriebs beendet nicht den Heizvorgang Um den Heizvorgang zu beenden muss die eingestellte Temperatur manuell gesenkt werden bis die Anzeige OFF Aus erscheint Abb 2 5 Nach Beendigung des Betriebs schalten Sie das Ger t am Netzschalter aus OFF Abb 1 3 Nehmen Sie das externe Netzger t vom Stromnetz Abb 1 1 6 Erprobte Methoden zur Kultivierung von Mikroorganismen Wir sind uns bewusst dass die Welt der Mikroorganismen unendlich ist und jeder Stamm seine individuelle Wachstumsoptimierung erfordert Zweifellos wird die Anzahl der neuen Methoden zur Kultivierung von Mikroorganismen mit der RTS 1 Technologie zunehmen wir werden unsere Kunden dar ber auf dem Laufenden halten Hier finden Sie 3 erprobte Methoden die vom Biosan Anwendungslabor entwickelt wurden 6 1 6 2 6 3 Fakultative anaerobe Escherichia coli 2000 rpm Spin Geschwindigkeit des Gef es 1 Sek Reverse Spin Frequenz RSF 37 C Steckplatztemperatur 15 mi Probenvolumen im Testgef 10 Min jedoch nicht weniger Messfreguenz MF Thermophile aerobe Thermophilus sp 2000 rpm 1s RSF 70 C wirkliche R hrchentemperatur 5 C niedriger 15 ml 10 Min MF Abdampfungsrate bei 70 C 5 ml 24 h
12. reit 5 Betrieb Empfehlungen w hrend des Betriebs 5 1 5 2 5 3 5 4 5 5 5 6 5 7 5 8 5 9 5 10 10 Nehmen Sie das Falcon R hrchen aus dem Steckplatz bevor Sie w hrend des Betriebs das externe Netzger t anschlie en oder abkoppeln Es empfiehlt sich den Betrieb ca 15 Minuten nach dem Einschalten des Ger ts zu starten diese Zeit wird f r die Stabilisierung des Arbeitsmodus ben tigt Schlie en Sie das externe Netzger t an das Stromnetz an Abb 1 1 Schalten Sie das Ger t mit Hilfe des Netzschalters Power auf der R ckseite des Ger ts ein Abb 1 3 F hren Sie das R hrchen in den Steckplatz ein Abb 1 4 Dr cken Sie die Taste Select Ausw hlen Abb 2 1 um die zu ndernden Parameter auszuw hlen der aktive Parameter blinkt Stellen Sie mithilfe der Tasten A und V Abb 2 2 den gew nschten Wert ein wenn Sie die Taste l nger als 2 Sek gedr ckt halten ndert sich der Parameter schneller Es ist m glich die Zeit zwischen den Messungen der optischen Dichte Abb 2 3 die Spinning Geschwindigkeit Abb 2 4 die Temperatur Abb 2 5 die Zeit zwischen Reverse Spins Abb 2 8 und die Betriebszeit Abb 2 11 einzustellen Die aktuellen Temperatur und Geschwindigkeitswerte erscheinen auf dem Display Abb 2 6 und Abb 2 7 Hinweis Nach dem Einschalten startet das Ger t den Heizvorgang und h lt dann die Temperatur aufrecht unabh ngig von anderen Operati
13. ss nehmen Sie es vom Stromnetz und wenden Sie sich an Biosan oder Ihren rtlichen Vertreter S mtliche Wartungs und Instandsetzungsarbeiten d rfen nur von qualifiziertem und spezifisch geschultem Personal vorgenommen werden Standardethanol 75 oder andere Reiniger die f r die Reinigung von Laborausr stung empfohlen werden k nnen zum Reinigen und Dekontaminieren des Ger ts benutzt werden Reinigen Sie nach Abschluss der Fermentierung den Rotor des Ger ts vor Fl ssigkeitstropfen und m glicher Kontaminierung 10 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 7 10 8 10 9 Kalibrierung zur Wartung des Ger ts Hinweis Benutzen Sie diese Kalibrierung nur wenn das Messsystem nicht ordnungsgem arbeitet Schalten Sie das Ger t ein F hren Sie ein 50ml Zentrifugenr hrchen mit 10 ml H20 in das Ger t ein Stellen Sie den Volumenparameter auf 10 ml ein Stellen Sie mithilfe der Steuerungstafel des Ger ts oder der Software die Geschwindigkeit auf 2000 RPM ein Dr cken Sie die Taste Run Stop Laufen Stopp Dr cken Sie die Taste Select Ausw hlen und halten Sie sie gedr ckt bis der Befehl CC auf dem Display erscheint und blinkt Dr cken Sie die Taste A eine 0 00 Nummer erscheint und blinkt auf dem Display Warten Sie 15 Sekunden und dr cken Sie dann die Taste V Das Ger t ist nun kalibriert und wird eine Verifizierungsmessung durchf hren 11 Garantie und Anspr che Der Hersteller garantiert
14. ten Das Ger t wurde f r den Betrieb bei einer Umgebungstemperatur von 4 C bis 40 C in einer nicht entsprechenden Temperatur bei maximaler relativer Luftfeuchtigkeit von 80 f r Temperaturen bis 31 C entworfen die linear auf 50 relative Luftfeuchtigkeit bei 40 C absinkt Messdaten RTS 1 RTS 1C Lichtguelle LED 8 1 Wellenl nge A nm 850 15 20 Messbereich OD 0 10 00 0 18 Echtzeitmessung Min Messung 1 60 Zeiteinstellaufl sung Min 1 Temperaturvorgaben RTS 1 RTS 1C Einstellbereich C 25 70 24 70 A 5 C ber 15 C unter 8 2 Unter Steuerungsbereichspunkt C Umgebungstemperatur Umgebungstemperatur Oberster Steuerungsbereichspunkt 70 Einstellaufl sung C 0 1 Stabilit t C 0 1 Allgemeine Spezifikationen RTS 1 RTS 1C Probenvolumen ml 5 30 Geschwindigkeitsbereich rpm 250 2000 Geschwindigkeitseinstellaufl sung 1 rpm Anzeige LCD 8 3 an BxTxH 130 x 212 x 200 Gewicht kg 1 7 2 2 Eingangsstrom Stromverbrauch 12 VDC 3 3 A 40 W 5A 60OW Externes Netzger t Eingang AC 100 240V 50 60Hz Ausgang DC 12V Biosan verfolgt ein Programm zur laufenden Verbesserung und beh lt sich das Recht vor das Design und die technischen Daten der Ausr stung ohne vorherige Ank ndigung zu ndern Fehlerfrei innerhalb 10 17 9 1 9 2 9 3 9 4 18 Wartung Wenn das Ger t gewartet werden mu
15. um ihre eigene Achse e Dank der innovativen Mischtechnologie ist es m glich die optische Dichte und Lichtstreuung der Probe in Echtzeit ohne Sondeninterferenzen und bei Aufrechterhaltung der Sterilit t des Vorgangs zu messen e Die M glichkeit Parameter wie Temperatur Umdrehungen pro Minute und die Spinning Zeit f r eine Richtung zu ndern und gleichzeitig Exprimentalgorithmen zu erstellen inkl Steuerung von Temperatur Mischintensit t optischer Dichte etc gestattet sowohl die Durchf hrung von schwierigen Algorithmusseguenzen im Fermentierungsprozess als auch das Erzielen von konsistenten und wiederholbaren Ergebnissen Softwarem glichkeiten Fernverfolgung und Steuerung des Fermentierungsprozesses Echtzeitregistrierung der Zellwachstumskinetik oder des Partikelsuspensionsaggregations disaggregationsprozesses Benutzerdiagramme inkl 3D Diagramme Pause Speichern und Laden von Ergebnisdaten Tabellenberichte in PDF und Excel Format Simultaner Anschluss von bis zu 10 Ger ten der einerseits die Untersuchung des Einflusses von verschiedenen chemischen und physikalischen Faktoren auf den Fermentierungsprozess und andererseits die Untersuchung der Wechselwirkung dieser Faktoren in Matrixexperimenten erm glicht 3 Erste Schritte 3 1 Auspacken Entfernen Sie vorsichtig das Verpackungsmaterial und legen Sie es f r den k nftigen Transport und die Lagerung des Ger ts beiseite berpr fen Sie sorgf ltig das
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