Maxwell® 16 Blood DNA Purification System
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1. Promega Informa es para contacto dispon veis em Www promega com E mail techservOpromega com Sintomas Causas e coment rios Az inferior ao esperado A amostra de sangue total apresentava rendimento inferior ao esperado uma baixa contagem de gl bulos brancos O rendimento total do ADN gen mico de amostras de sangue depende do n mero de gl bulos brancos presentes na amostra A amostra de sangue total n o foi misturada antes do processamento Certifique se de que mistura amostras de sangue total antes do processamento para se assegurar que os gl bulos brancos est o em suspens o Foi processada uma quantidade elevada de amostra Processar uma quantidade de amostra superior recomendada n o ir aumentar necessariamente o rendimento da mesma Exceder o limite do tamanho de amostra pode originar um rendimento e pureza do ADN sub ideais Nenhum rendimento A amostra foi colocada no po o n 7 em vez de ter sido colocada no po o 1 do cartucho de purifica o de ADN Assegure se que orientou o cartucho de purifica o de ADN correctamente de forma a que esteja a adicionar a amostra ao po o n 1 O po o n 1 o po o mais pr ximo do lado que possui o r tulo do cartucho Transporte de part culas O ADN purificado de amostras com contagens de gl bulos brancos altas pode tornar se viscoso e dif cil de eliminar durante a elui o Execute uma segunda captura de part culas utilizando o Suporte de elu2. Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 P gina 3 O Promega 2 Componentes do produto condi es de armazenamento e legenda dos s mbolos Produto Tamanho N Cat Maxwell 16 Blood DNA Purification System 48 prepara es AS1015 Suficiente para 48 isolamentos automatizados 30 C Ya A 48 Cartuchos de ADN do sangue Maxwell 16 50 mbolos de purifica o 50 Tubos de elui o 20ml Tamp o de elui o Inclui Condi es de armazenamento Armazene os Maxwell 16 DNA Purification Kits a uma temperatura entre 15 a 30 C Consulte o prazo de validade impresso no r tulo do produto N o utilize o produto ap s o fim do prazo de validade Informa es de seguran a Os cartuchos de reagente cont m cloridrato de guanidina e tiocianato de guanidina que s o subst ncias nocivas e irritantes Os cartuchos tamb m cont m etanol e isopropanol que s o subst ncias inflam veis Os cartuchos de reagente do Maxwell 16 foram concebidos para serem utilizados A com subst ncias potencialmente infecciosas Os utilizadores devem usar a protec o adequada por exemplo luvas e culos de protec o quando manipularem subst ncias infecciosas Os utilizadores devem cumprir as respectivas normas institucionais relativas manipula o e elimina o de todas as subst ncias infecciosas quando utilizadas com este sistema Os
3. www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 2 4 13 O Promega Processo de purifica o de ADN do sangue Maxwell 16 Quando utilizado em conjunto com o Maxwell 16 Instrument o Maxwell 16 Blood DNA Purification System N Cat AS1015 automatiza a purifica o de cidos nucleicos de at 16 amostras utilizando lise celular e a liga o de part culas de s lica magnetizadas a cidos nucleicos como o princ pio de separa o prim rio Os passos automatizados efectuados pelo sistema Maxwell 16 incluem Lise da amostra na presen a de um agente caotr pico e detergente Liga o dos cidos nucleicos a part culas de s lica magnetizadas Lavagem das part culas ligadas isolando as dos outros componentes celulares Elui o de cidos nucleicos numa formula o que pode ser acrescentada directamente ao PCR padr o O utilizador selecciona o protocolo de processamento adequado conforme solicitado no instrumento Maxwell 16 coloca as amostras nos cartuchos de reagente coloca os cartuchos na plataforma do instrumento Maxwell 16 e fecha a porta Em seguida o utilizador inicia o instrumento que efectua automaticamente todos os passos do protocolo A temperatura das amostras regulada por um sistema de aquecimento que controlado pelo protocolo O ADN extra do pode ser utilizado para amplifica o por PCR Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA
4. 608 277 2516 www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 12 4 13 5315MB 4 Confirme se seleccionou o protocolo correcto Use um dos bot es de deslocamento para mover o cursor para a indica o OK Pressione o bot o Run Stop Processar Parar para continuar com o ciclo de purifica o Seleccione Cancel se as informa es exibidas n o estiverem correctas 5 Abra a porta quando surgir essa indica o no visor de LCD Pressione o bot o Run Stop Processar Parar para que a plataforma deslize para fora do instrumento para uma f cil introdu o dos cartuchos Advert ncia Perigo de ponto de compress o 6 Transfira cartuchos contendo amostras e mbolos do suporte de prepara o do cartucho para a plataforma do Maxwell 16 Assegure se que os cartuchos s o A colocados no instrumento com o lado ranhurado do cartucho o mais pr ximo poss vel da porta Notas Se tiver dificuldades a encaixar o cartucho na plataforma verifique a orienta o do cartucho Insira o cartucho inserindo primeiro o lado ranhurado pressionando depois para baixo na parte de tr s do cartucho at que encaixe no devido lugar fazendo um clique Se estiver a processar menos de 16 amostras centre os cartuchos de reagente na plataforma espa ando os uniformemente de fora para o centro 7 Coloque um tubo de elui o azul para cada cartucho nas ranhuras do tubo de elui o exis
5. Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 P gina 1 OQ Promega Limita es de utiliza o do produto O Maxwell 16 Blood DNA Purification System N Cat AS1015 n o foi concebido para ser utilizado com amostras de tecidos ou amostras de fluidos corporais que n o o sangue N o foi concebido para ser utilizado com amostras n o humanas nem para a purifica o de ARN O desempenho do sistema Maxwell 16 foi avaliado isolando o ADN de 300 ul de amostras de sangue total ou 250 ul de amostras de camada leuco plaquet ria obtidas em indiv duos saud veis com uma contagem de gl bulos brancos que variava entre 4 2 x106 e 1 2 x 107 O utilizador respons vel por estabelecer as caracter sticas de desempenho necess rias para as aplica es de diagn stico a jusante Devem incluir se controlos adequados em qualquer aplica o de diagn stico a jusante que utilize o ADN purificado utilizando o sistema Maxwell 16 A conformidade com a Directiva 98 79 CE da UE relativa aos dispositivos m dicos para diagn stico in vitro foi demonstrada e s se aplica utiliza o do Maxwell 16 Instrument N Cat AS2050 AS3050 no modo cl nico com o Maxwell 16 Blood DNA Purification System N Cat AS1015 Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 Telefone 608 274 4330 Fax 608 277 2516
6. INSTRUMENT Manual T cnico Maxwell 16 Blood DNA Purification System Aten o manusear os cartuchos com cuidado as extremidades do selo podem ser cortantes C INSTRU ES DE UTILIZA O DO Dispositivo m dico MDSS GmbH Me PROMEGA Para diagn stico Schiffgraben 41 2800 Woods Hollow Ra in vitro 30175 Hannover Alemanha A S 1 0 1 5 Madison WI USA Maxwell 16 Blood DNA Purification System Toda a literatura t cnica est dispon vel na Internet atrav s do endere o www promega com tbs Visite o nosso site na Internet para verificar se est a utilizar a vers o mais recente deste Manual t cnico Se tiver quaisquer d vidas sobre a utiliza o deste sistema entre em contacto com a Assist ncia T cnica da Promega E mail techservOpromega com 1 Utiliza o prevista para o Maxwell 16 Blood DNA Purification System 1 2 Componentes do produto condi es de armazenamento e legenda dos S MBOLOS 2 sesisitisreessrasireaiiesinteserasin a tinents qan ade L sf a aa 4 3 Antes de COME AR asi osp resaioaiirasasiendonvanto pisa n nnn EREEREER ei A Prepara o da amostra para amostras de sangue total B Prepara o da amostra para amostras de camada leuco plaquet ria humana 7 C Prepara o do cartucho Maxwell 16 seems 8 4 Purifica o de ADN automatizada no instrumento Maxwell 16 10 A Ciclo do Maxwell 16 IVD Instrument AS3050 us sm
7. Maxwell 16 Clinical Instrument AS2050 Nas Defini o de modo de funcionamento SEV Volume de Elui o Padr o IVD Modo Clinico 6033MD 1 O sistema Maxwell 16 consegue processar m todos de investiga o e forenses bem como o m todo cl nico Antes de o utilizar verifique se o instrumento est definido para o modo cl nico Fa a o fechando a porta e desligando e voltando a ligar o instrumento Maxwell 16 Ser o exibidos o n mero da vers o do firmware e a defini o do modo conforme mostrado Se o ecr for diferente do mostrado acima consulte o Manual de funcionamento do instrumento Maxwell 16 n TM300 para obter as instru es sobre como repor o instrumento para o modo cl nico 5314MA 2 Para efectuar um ciclo de purifica o utilize um dos bot es de deslocamento para mover o cursor para Processar Pressione Run Stop Processar Parar para seleccionar Nota Demo um ciclo de purifica o curto para fins de demonstra o A op o Definicoes utilizada para alterar o modo de funcionamento do instrumento e n o necess ria para este procedimento 3 Use um dos bot es de deslocamento para mover o cursor para o protocolo tipo de amostra pretendido Pressione Run Stop Processar Parar para seleccionar Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road gt Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 Telefone 608 274 4330 Fax
8. a a purifica o o ecr LCD ir exibir uma mensagem a indicar que o m todo terminou Ap s a conclus o abra a porta do instrumento Verifique se todos os mbolos foram retirados do conjunto da haste magn tica Se os mbolos n o tiverem sido retirados pressione os suavemente com a m o para os retirar Pressione o bot o Run Stop Processar Parar para que a plataforma deslize para fora do instrumento Retire os tubos de elui o das ranhuras dos tubos de elui o aquecidos e coloque os no Suporte de tubos de elui o magn tico Transfira as amostras elu das para tubos de armazenamento atrav s de pipeta o Elimine os tubos de elui o azuis depois da transfer ncia da amostra elu da Nota Para evitar a transfer ncia de part culas utilize uma ponta de pipeta para aspirar as amostras afastando as das part culas capturadas no lado do tubo de elui o azul Retire os cartuchos e mbolos da plataforma do instrumento e elimine os N o reutilize cartuchos de reagente mbolos nem tubos de elui o Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 Telefone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 14 4 13 O Promega 5 Resolu o de problemas Para obter resposta s quest es que n o forem abordadas nesta sec o entre em contacto com o escrit rio ou distribuidor local da
9. art TM301 P gina 5 OQ Promega 3 Antes de come ar Materiais que devem ser fornecidos pelo utilizador e pipetas e pontas de pipeta para transfer ncia de amostras em cartuchos de reagente pr cheios e tubos de armazenamento para amostras de ADN purificado 3 A Prepara o da amostra para amostras de sangue total Tabela 1 Volume de amostra de sangue total e requisitos de pr processamento Tipo de amostra Kit Volume Requisitos para pr processamento System de purifica o Sangue total humano de ADN do sangue 300 ul Nenhum N Cat AS1015 Capacidade e rendimento do processamento de amostras de sangue total O rendimento total do ADN gen mico de amostras de sangue total depende do volume da amostra e do n mero de gl bulos brancos ml Todos os cartuchos fornecidos no Maxwell 16 Blood DNA Purification System foram concebidos para a purifica o de ADN gen mico a partir de 300 ul de sangue total presumindo que possui um n mero m dio de gl bulos brancos na ordem dos 4 2 x 10 a 1 2 x 107 ml de sangue total valores para um adulto saud vel normal Exceder o volume ou n mero de c lulas recomendados pode afectar adversamente o rendimento e a qualidade do ADN gen mico purificado e pode provocar contamina o cruzada das amostras Notas 1 Podem ser utilizadas amostras de sangue total colhidas em tubos tratados com EDTA citrato ou heparina 2 As amostras de sangue devem ser armazenadas a 4 C e
10. cartuchos de reagente do Maxwell 16 cont m subst ncias qu micas potencialmente perigosas Os utilizadores devem usar luvas quando manipularem os cartuchos de reagente Os utilizadores devem seguir as respectivas normas institucionais para a elimina o do produto em causa Para informa es de seguran a adicionais consulte a Ficha de dados de seguran a dos materiais dispon vel em www promega com EC REP Srirven Schiffgraben 41 30175 Hannover Alemanha Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 gt Telefone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 4 4 13 Legenda dos s mbolos Explica o S mbolo Explica o Dispositivo m dico para diagn stico in vitro Representante autorizado Conservar a 15 30 C Importante al PROMEGA 2800 Woods Hollow Rd Madison WI USA X Fabricante Nocivo Irritante Cont m o suficiente mam para n testes z lt n gt Advert ncia Risco biol gico FE N mero de cat logo O N o reutilizar E Promega Corporation 2800 Woods Toll Free in USA 800 356 9526 Printed in USA 4 13 Hollow Road Phone 608 274 4330 AN N B e Conformit Europ enne Advert ncia Perigo de ponto de compress o N mero do lote Madison WI 53711 5399 USA Fax 608 277 2516 WWW promega com P
11. e de SEV se encontra presente Prima Run Stop para continuar 3 Introduza o utilizador e o PIN se esta op o estiver activada 4 Seleccione o protocolo pretendido no ecr t ctil e em seguida prima o bot o Run Stop 5 No ecr seguinte verifique se est o seleccionados o m todo e o utilizador correctos Seleccione Run Stop para continuar 6 Abra a porta quando for solicitado no ecr e em seguida seleccione Run Stop Aviso Perigo de ponto de compress o 7 Se configurou o instrumento para recolher informa es sobre o ciclo necess rio introduzir as informa es no ecr Entrada do C d de Barras seleccionado para executar o ciclo Consulte o manual Maxwell 16 IVD Instrument Technical Manual TM315 gt gt 8 Transfira cartuchos contendo amostras e mbolos do suporte de prepara o do cartucho para a plataforma do Maxwell8 16 Assegure se que os cartuchos s o colocados no instrumento com o lado ranhurado do cartucho o mais pr ximo poss vel da porta Notas Se tiver dificuldades a encaixar o cartucho na plataforma verifique a orienta o do cartucho Insira o cartucho inserindo primeiro o lado ranhurado pressionando depois para baixo na parte de tr s do cartucho at que encaixe no devido lugar fazendo um clique Se estiver a processar menos de 16 amostras centre os cartuchos de reagente na plataforma espa ando os uniformemente de fora para o centro 9 Coloqu
12. e um tubo de elui o azul para cada cartucho nas ranhuras do tubo de elui o existentes na parte frontal da plataforma 10 Adicione 300 ul de tamp o de elui o a cada tubo de elui o azul Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Parti TM301 Printed in USA Page 10 4 13 O Promega 11 Pressione o bot o Run Stop Processar Parar A plataforma recolher automaticamente Feche a porta A Advert ncia Perigo de ponto de compress o O instrumento Maxwell 16 IVD Instrument inicializa imediatamente o ciclo de purifica o O ecr apresenta o tempo de ciclo restante aproximado Notas 1 A press o do bot o Run Stop ou a abertura da porta interrompem o ciclo 2 Se o ciclo for interrompido antes da respectiva conclus o o instrumento ir remover as part culas dos mbolos por meio de lavagem e ejectar os mbolos para o po o n 7 do cartucho As amostras ser o perdidas 12 Uma vez conclu do o ciclo de purifica o autom tica siga as instru es em ecr relativas transfer ncia dos dados Para obter instru es detalhadas consulte o manual Maxwell 16 IVD Instrument Technical Manual ETM315 and Maxwell Sample Track Software Technical Manual TM314 13 Siga as instru es em ecr apresentadas no final do m todo para abrir a porta Verifique se os mbolos se encont
13. esimesseemes 10 B Ciclo do Maxwell 16 Clinical Instrument AS82050 seems 12 5 Resolu o de probleMm ssinissnississsisianima nnns 15 I Utiliza o prevista para o Maxwell 16 Blood DNA Purification System O sistema Maxwell 16 que constitu do pelo Maxwell 16 Blood DNA Purification System N Cat AS1015 e pelo Maxwell 16 Instrument N Cat AS2050 AS3050 utilizado para efectuar o isolamento automatizado do ADN de amostras de sangue total humano ou de camada leuco plaquet ria As amostras colhidas em tubos de colheita de sangue tratados com EDTA heparina ou citrato podem ser utilizadas com o sistema Maxwell 16 A metodologia de isolamento de cidos nucleicos utilizada pelo sistema Maxwell 16 produz o ADN adequado para uma an lise directa e a jusante atrav s de m todos de amplifica o padr o Estes m todos incluem uma ampla variedade de testes de reac o de polimeriza o em cadeia PCR para fins de diagn stico humano in vitro O sistema Maxwell 16 n o foi concebido para ser utilizado como parte de um teste de diagn stico in vitro espec fico O Maxwell 16 Blood DNA Purification System destina se exclusivamente a utiliza o profissional Os resultados do diagn stico obtidos utilizando o ADN purificado com este sistema devem ser interpretados em conjunto com outros dados cl nicos ou laboratoriais Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll
14. i o magn tico ou retire as part culas por centrifuga o Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 P gina 15 U S Pat Nos 6 027 945 6 368 800 and 6 673 631 European Pat No 1 204 741 and Japanese Pat No 4425513 2008 2010 2012 2013 Promega Corporation Todos os direitos reservados Maxwell e MagneSil s o marcas comerciais registadas da Promega Corporation Vacutainer uma marca comercial registada da Becton Dickinson and Company Os produtos podem estar cobertos por patentes pendentes ou por patentes emitidas ou podem possuir algumas limita es Visite o nosso site na Internet para obter mais informa es Todos os pre os e especifica es est o sujeitos a altera o sem aviso pr vio As caracter sticas dos produtos est o sujeitas a altera o Contacte a Assist ncia T cnica da Promega ou aceda ao cat logo da Promega on line para obter as informa es mais recentes acerca dos produtos da Promega Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 Telefone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 16 4 13
15. infecciosas Os utilizadores devem cumprir as respectivas normas institucionais relativas manipula o e elimina o de todas as subst ncias infecciosas quando utilizadas com este sistema A Os cartuchos de reagente do Maxwell 16 foram concebidos para serem Os cartuchos de reagente do Maxwell 16 cont m subst ncias qu micas x potencialmente perigosas Os utilizadores devem usar luvas quando manipularem os cartuchos de reagente Os utilizadores devem seguir as respectivas normas institucionais para a elimina o do produto em causa O Os tubos de elui o azuis ser o utilizados posteriormente no processo de configura o Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 P gina 9 OQ Promega 4 Purifica o de ADN automatizada no instrumento Maxwell 16 4 A Ciclo do Maxwell 16 IVD Instrument AS3050 Consulte o manual Maxwell 16 IVD Instrument Technical Manual TM315 para obter informa es detalhadas sobre como configurar e utilizar o instrumento Maxwell 16 IVD Instrument 1 Ligue o instrumento Maxwell 16 IVD Instrument O instrumento faz o arranque apresenta a vers o de firmware executa uma auto verifica o e coloca todas as pe as m veis na respectiva posi o inicial 2 Verifique se o ecr inicial apresenta a indica o SEV e se o hardwar
16. processadas no prazo de 7 dias ap s a colheita 3 Quando se trabalha com ADN gen mico concentrado quaisquer part culas residuais de MagneSil podem ser removidas efectuando uma segunda limpeza utilizando o Suporte de elui o magn tico ou por centrifuga o do material elu do transferindo subsequentemente o sobrenadante para um novo tubo Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 Telefone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 6 4 13 O Promega 3 B Prepara o da amostra para amostras de camada leuco plaquet ria humana Tabela 2 Volume de amostra da camada leuco plaquet ria e requisitos de pr processamento Tipo de amostra Kit Volume Requisitos para pr processamento Camada leuco System de 250 pl 1 Rode o tubo Vacutainer durante plaquet ria purifica o concentrado 20 minutos a 2 000 x g humana ce ADAD flo a z 2 Proceda colheita dos gl bulos brancos NSCAt Fan N dia utilizando uma pipeta de 1 ml AS1015 3 Adicione amostra ao po o n 1 Capacidade e rendimento de processamento de amostras de camada leuco plaquet ria Centrifuga o de uma amostra de sangue total a 2 000 x g durante 20 minutos origina a separa o do material em tr s camadas uma camada inferior contendo principalmente gl bulos vermelhos uma camada superior de plasma e uma camada branca fina na inte
17. ra um novo tubo 3 A concentra o do ADN purificado deve ser medida por absorv ncia a A o A pureza do ADN deve ser confirmada por electroforese em gel de agarose e por medi o do r cio Aseo Avgo que habitualmente gt 1 7 4 Devem incluir se controlos adequados em qualquer aplica o de diagn stico a jusante que utilize ADN purificado utilizando o sistema Maxwell 16 5 Durante a avalia o do desempenho ficou demonstrado que o transporte de ADN entre cartuchos lt 6 pg ul O utilizador respons vel por estabelecer as caracter sticas de desempenho necess rias para as aplica es de diagn stico Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 P gina 7 3 C Prepara o do cartucho Maxwell 16 Conte do Acrescentos do Utilizador Lado com Tamp o de Lise Amostra r tulo Part culas magn ticas MagneSil Tamp o de lavagem Tamp o de lavagem Tamp o de lavagem Tamp o de lavagem Tamp o de lavagem mbolo 5298MA Lado ranhurado Figura 1 Cartucho do Maxwell 16 Blood DNA Purification System A amostra adicionada ao po o n 1 Siga os procedimentos laboratoriais padr o para evitar a contamina o cruzada das O amostras Use luvas e substitua as com frequ ncia Utilize pontas resistentes a aeross is quando
18. ram no po o n 7 do cartucho no final do ciclo Se os mbolos n o tiverem sido retirados do conjunto de haste magn tica pressione os suavemente com a m o para os retirar 14 Pressione Run Stop para fazer deslizar a plataforma para fora do instrumento Aviso Perigo de ponto de compress o 15 Retire os tubos de elui o das ranhuras dos tubos de elui o aquecidos e coloque os no Suporte de tubos de elui o magn tico Transfira as amostras elu das para tubos de armazenamento atrav s de pipeta o Elimine os tubos de elui o azuis depois da transfer ncia da amostra elu da Nota Para evitar a transfer ncia de part culas utilize uma ponta de pipeta para aspirar as amostras afastando as das part culas capturadas no lado do tubo de elui o azul 16 Retire os cartuchos e mbolos da plataforma do instrumento e elimine os 2 N o reutilize cartuchos de reagente mbolos nem tubos de elui o 17 Se tiver configurado o instrumento para efectuar um tratamento por UV no final de cada ciclo esse tratamento iniciado quando a porta fechada Certifique se de que as amostras foram removidas antes de fechar a porta e de iniciar o tratamento por UV para evitar danificar o cido nucleico Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 Page 11 4 B Ciclo do
19. rface que enriquecida para os gl bulos brancos Pode utilizar se uma pipeta de 1 ml para colher cuidadosamente os gl bulos brancos enriquecidos camada leuco plaquet ria da interface Tipicamente isto origina uma concentra o dez vezes superior dos gl bulos brancos numa amostra de sangue dependendo da t cnica do utilizador e da forma de empacotamento dos gl bulos brancos Caracter sticas tais como a antiguidade da amostra e o seu armazenamento transpar ncia da camada de plasma e contagem de gl bulos brancos podem afectar a recupera o da frac o da camada leuco plaquet ria e o rendimento do ADN resultante Pode processar se um volume de 250 ul de camada leuco plaquet ria obtida a partir de 2 5 ml de sangue total utilizando o Cartucho de ADN do sangue Maxwell 16 e o m todo da camada leuco plaquet ria Notas 1 O volume de elui o importante Coloque 300 ul de tamp o de elui o no tubo de elui o do Maxwell 16 quando O processar 250 ul de amostra de camada leuco plaquet ria Algum tamp o de elui o ir perder se durante o processamento devido evapora o e humedecimento das part culas de MagneSil durante a elui o 2 Quando se trabalha com ADN gen mico concentrado quaisquer part culas residuais de MagneSil podem ser removidas efectuando uma segunda limpeza utilizando o Suporte de Elui o Magn tico ou por centrifuga o do material elu do e subsequente remo o do sobrenadante pa
20. tentes na parte frontal da plataforma 8 Adicione 300 ul de tamp o de elui o a cada tubo de elui o azul Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road Madison WI 53711 5399 USA Toll Free in USA 800 356 9526 Phone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Printed in USA Part TM301 4 13 P gina 13 OQ Promega 4 B Ciclo do Maxwell 16 Clinical Instrument AS2050 continua o 9 A 10 11 12 13 A D 14 Pressione o bot o Run Stop Processar Parar A plataforma recolher automaticamente Feche a porta Advert ncia Perigo de ponto de compress o O instrumento Maxwell 16 ir iniciar o ciclo de purifica o O ecr LCD apresenta os passos efectuados e o tempo aproximado restante do ciclo Notas Ao pressionar o bot o Run Stop Processar Parar ou ao abrir a porta ir interromper o ciclo Feche a porta se estiver aberta e seleccione se pretende continue Continuar ou terminate Terminar o ciclo Se terminar o ciclo antes da sua conclus o o instrumento ir remover as part culas dos mbolos por meio de lavagem e remover os mbolos para o po o n 7 do cartucho e a sua amostra ser perdida Para obter as instru es sobre como recuperar a amostra depois de uma falha de energia transit ria consulte a sec o de resolu o de problemas do Manual de funcionamento do instrumento Maxwell 16 n TM300 Depois de conclu d
21. transferir as amostras visando minimizar a possibilidade de contamina o cruzada N o utilize cartuchos se os selos se apresentarem danificados ou estiverem em falta 5361MB 1 Coloque cada cartucho a utilizar no suporte de cartuchos Maxwell 16 Cartridge Rack com o lado ranhurado do cartucho virado para o lado numerado do suporte Retire cuidadosamente o selo de cada cartucho Tenha o cuidado de evitar a contamina o dos reagentes ao remover o selo Promega Corporation 2800 Woods Hollow Road gt Madison WI 53711 5399 EUA N mero gratuito nos EUA 800 356 9526 Telefone 608 274 4330 Fax 608 277 2516 www promega com Pe a N TM301 Impresso nos E U A P gina 8 4 13 2 Coloque um mbolo no po o n 7 de cada cartucho certificando se de que a parte inferior do mbolo est assente no fundo do cartucho O po o n 7 o po o mais pr ximo do lado ranhurado do cartucho Nota O mbolo ir encaixar livremente no cartucho 3 Transfira a sua amostra para o po o n 1 O po o n 1 o po o mais pr ximo do r tulo do cartucho e o mais afastado do utilizador Tenha o cuidado de evitar a contamina o das amostras durante a transfer ncia e de garantir que as amostras est o correctamente identificadas e s o acompanhadas utilizados com subst ncias potencialmente infecciosas Os utilizadores devem usar a protec o adequada por exemplo luvas e culos de protec o quando manipularem subst ncias
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